Embora a importância do controle dos níveis de amônia em biotérios seja reconhecida há muitos anos e várias consequências da exposição por inalação em espécies convencionais de laboratório sobre o trato respiratório tenham sido descritas na literatura, existem poucos estudos que avaliaram os efeitos sistêmicos e subclínicos nos animais. O presente trabalho teve por objetivo avaliar o perfil hematológico e bioquímico em ratos Wistar alojados sob condições ambientais adversas (ammonia build-up) com tempo de permanência de 5 (Grupo 1, n=20), 10 (Grupo 2, n=20) ou 15 dias (Grupo 3, n=20). A elevação dos níveis de poluentes no ambiente de alojamento experimental foi obtida através da redução da taxa de ventilação e da colocação de maravalha servida, de forma a alcançar-se uma concentração média aproximada de 90 ppm de amônia, variando de 76 a 106 ppm. A análise hematológica revelou que os animais do Grupo 1 apresentaram valores de hemoglobina e hematócrito significativamente maiores em relação todos os outros grupos. Com relação aos parâmetros bioquímicos, novamente observou-se que o Grupo 1 diferiu estatisticamente do Grupo Controle, do Grupo 2 e do Grupo 3 para creatinina e para gama-glutamiltransferase. Diferenças entre o Grupo 1 e os demais grupos experimentais foram encontradas para fosfatase alcalina, alanina aminotranferase, amilase e glicose. Os demais parâmetros apresentaram resultados variáveis e aparentemente inconclusivos. Concluindo, a análise dos resultados indica que a maioria das alterações no perfil hematológico e bioquímico de animais expostos ocorre entre o dia 0 e o dia 5 e posteriormente retorna aos valores basais, devido a uma possível resposta adaptativa ao aumento da concentração de amônia atmosférica no ambiente de alojamento. / Although the importance of controlling the levels of ammonia in animal facilities has been acknowledged for many years now, and several consequences of exposure by inhalation in conventional laboratory species on the respiratory tract have been described in the literature, there are few studies assessing the systemic and subclinical effects on animals. This study aimed at assessing the hematological and biochemical profile in Wistar rats housed under adverse environmental conditions (ammonia build-up) with stay time of 5 (Group 1, n=20), 10 (Group 2, n=20) or 15 days (Group 3, n=20). The increase in the levels of pollutants in the experimental environment housing was achieved by reducing the rate of ventilation and the placement of soiled bedding served, in order to achieve an average concentration of ammonia of approximately 90 ppm, ranging from 76 to 106 ppm. The hematological analysis revealed that animals in Group 1 had hemoglobin and hematocrit values significantly higher than all other groups. Concerning the biochemical parameters, once again it was observed that Group 1 differed statically from the Control Group, Group 2 and Group 3 regarding creatinine and gamma-glutamyltransferase. Differences between Group 1 and the other experimental groups were found regarding alkaline phosphatase, alanine aminotransferase, amylase and glucose. The other parameters showed variable results, apparently inconclusive. In conclusion, the analysis of the results indicates that most changes in the hematological and biochemical profile of the animals exposed occur between day 0 and day 5, and then return to baseline, in reason of a possible adaptive response to the increase of atmospheric ammonia concentration in the environment housing.

A contagem de plaquetas é um exame de rotina utilizado no auxilío do diagnóstico de diversos distúrbios hemostáticos, além de ser usada no monitoramento de pacientes, portanto existe a necessidade de obter parâmetros fidedignos para assegurar a existência de plaquetopenia ou plaquetose e alterações morfológicas destas células. A comum ocorrência de agregação plaquetária “in vitro” dificulta a análises destes parâmetros, evento devido ao uso incorreto da metodologia de coleta, armazenamento inadequado da amostra, assim como o uso incorreto do anticoagulante. O diagnóstico errôneo de plaquetopenia ou plaquetose pode ter como consequência o direcionamento terapêutico inadequado do paciente. O objetivo deste estudo foi comparar quantitativa e qualitativamente os parâmetros plaquetários em amostras com diferentes anticoagulantes, e diferentes tempo e temperatura de armazenagem. Além disso, foram também objetivos averiguar a diferença entre os métodos de contagem de plaquetas (automático, manual e estimado em lâmina), e a correlação entre o volume plaquetário médio (MPV) e a porcentagem de macroplaquetas, assim como definir um intervalo de referência para a porcentagem de macroplaquetas em uma população de cães sadios. Amostras de sangue foram coletadas através do sistema a vácuo em tubos de EDTA K2 e citrato de sódio 3,2% de 54 cães clinicamente saudáveis. As amostras foram separadas em duas alíquotas e posteriormente armazenadas em pares, um par a temperatura ambiente (25°C) e outro a 4°C por até 6 horas após coleta. Cada alíquota foi avaliada em três momentos diferentes, nos quais as contagens plaquetárias, o MPV, e o escore de agregação foram realizados. A porcentagem de macroplaquetas foi feita apenas nas amostras de EDTA armazenadas a 25°C, no tempo zero após a coleta. Foi observada uma diminuição significativa nas contagens plaquetárias com o passar do tempo e em amostras sob refrigeração, e uma tendência ao aumento dos valores de MPV. As contagens realizadas em amostras de EDTA foram mais elevadas do que aquelas em citrato, e não houve correlação entre o volume de plaquetário médio e a porcentagem de macroplaquetas e, além de que a freqüência de aglomeração foi maior em amostras citratadas armazenadas a 4°C. / The platelet count is a routine examination used in the diagnosis of bleeding disorders and patient monitoring. Therefore, reliable parameters are needed to ensure the existence of thrombocytopenia or thrombocytosis and morphological changes of these cells. The common occurrence of platelet aggregation difficult the analysis of these parameters, this often occurs due to incorrect venipuncture methodology, improper storage of the sample, as well as the incorrect use of anticoagulants. The misdiagnosis of thrombocytopenia or thrombocytosis may result in inappropriate treatment guidance. The aim of this study was to compare the quantitative and qualitative platelet parameters in samples with different anticoagulants, times and temperatures. Additional objectives were to, ascertain the difference between platelet count methods (automatic, manual and estimated) and to verify a possible correlation between the mean platelet volume (MPV) and macroplatelets percentage, as well as to define a reference range for macroplatelets percentage in a healthy population of dogs. Blood was collected from 54 clinically healthy dogs via vacuum system into EDTA K2 and sodium citrate 3.2% tubes. The samples were separated into two aliquots and then stored in pairs, one pair at room temperature (25°C) and another at 4°C for up to 6 hours post sampling. Each sample was evaluated at three different times, in which platelet counts, MPV, and clumping scores were performed. The macroplatelets percentage was done only in EDTA samples stored at 25°C, at zero hour post sampling. The authors observed a statistically significant decrease in platelet counts over time and in refrigerated samples, and a tendency to increased values of MPV. Counts performed in EDTA samples were higher than those in citrate, and there was no correlation between the mean platelet volume and macroplatelets percentage; and besides the frequency of clumping was higher in citrated samples stored at 4°C.

O jacaré-de-papo (Caiman latirostris) é considerado um crocodiliano de médio porte que apresenta uma ampla distribuição latitudinal na América do Sul. Possivelmente a espécie possui a situação mais complexa entre os crocodilianos brasileiros quanto ao aspecto da conservação, basicamente porque suas populações encontram-se fragmentadas em grande parte de sua área de distribuição original e por utilizarem áreas com fortes atividades antrópicas. Embora a espécie possua aparentemente um processo adaptativo frente a estas pressões, um aspecto fisiológico pode ainda sofrer rápida alteração quando submetido a elas: o estado sanitário. Desta maneira, este estudo objetivou determinar o estado sanitário do maior predador aquático, utilizando duas áreas distintas no Estado de São Paulo, através da determinação dos perfis hematológicos e bioquímicos do sangue, além da caracterização da microbiota oral, servindo de modelo à conservação da espécie em ambientes alterados. No primeiro capítulo foram determinados o perfil hematológico e bioquímico do sangue utilizando-se 29 indivíduos (19 machos e 10 fêmeas) capturados em Angatuba e 11 indivíduos (2 machos, 4 fêmeas e 5 filhotes) capturados em Cubatão. Diferenças estatísticas significativas foram encontradas nos valores de creatinina na comparação entre fêmeas de ambas as áreas de estudo (p = 0,033) e nos valores de alanina aminotransferase (p = 0,003), hemácias (p = 0,034), hemoglobina (p = 0,049) e volume corpuscular médio (p = 0,027) quando da comparação entre sexos. No segundo capítulo determinou-se a microbiota oral destes animais através do isolamento, identificação e caracterização bacteriana, em conjunto com o teste de perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos. Foram determinados 14 diferentes tipos de bactérias na área de Angatuba, sendo uma classificada como baciliforme aeróbio Gram-positivo, uma como bacilo Gram-negativo e 12 classificadas como Enterobactérias Gram-negativas. Na área de Cubatão foram isolados cinco tipos de bactérias, sendo quatro classificadas como Enterobactérias Gram-negativas e uma como baciliforme aeróbio Gram-positivo. Considerando que o uso de antimicrobianos é um processo primário no tratamento de animais e pessoas, principalmente nos casos que envolvam infecções provocadas pela interação homem x animais, para ambas as áreas de estudo, as quinolonas Enrofloxacina e Norfloxacina, além do aminoglicosídeo Gentamicina, foram os antimicrobianos que apresentaram os menores índices de resistência frente aos isolados testados. / The broad-snouted caiman (Caiman latirostris) is considered a medium-sized crocodilian, which has a wide latitudinal distribution in South America. The species may possibly have a more complex situation among Brazilian crocodilians on the aspect of conservation, basically, because their populations are fragmented in much of their original range, forcing these animals to disperse through areas with strong human activities. Although the species apparently went through an adaptive process against these pressures, a physiological aspect may undergo rapid change when subjected to them: the health status. Thus, this study aimed to determine the health status of the largest aquatic predator, using two distinct areas in São Paulo State, through the determination of hematological and biochemical profiles of blood, in addition to the characterization of oral microbiota, serving as a model for conservation of the species in anthropic habitats. In the first chapter were determined the hematological and biochemical blood profiles of 29 individuals (19 males and 10 females) captured in Angatuba and 11 individuals (2 males, 4 females and 5 hatchlings) captured in Cubatão. Statistically significant differences were found in creatinine values when comparing females of both areas of the study (p = 0.033) and in alanine aminotransferase values (p = 0.003), erythrocytes (p = 0.034), hemoglobin (p = 0.049) and mean corpuscular volume (p = 0.027) when comparing genders. In the second chapter the oral microbiota of these animals was determined by isolation, identification and characterization of the bacteria, besides the antimicrobial susceptibility profile compared to the isolates tested. The results showed growth of 14 different species of bacteria in the Angatuba area, one classified as Aerobic Grampositive Bacilliform, one as Gram-negative Bacilli and 12 classified as Gram-negative Enterobacteria. In the Cubatão area five species of bacteria were isolated, four classified as Gram-negative Enterobacteria and one as Aerobic Gram-positive Bacilliform. Considering that the use of antimicrobials is a primary process in the treatment of animals and people, especially in cases involving infections caused by human x animal interaction for both study areas, quinolones Enrofloxacin and Norfloxacin, and the aminoglycosides Gentamicin were the antimicrobials that had the lowest resistance rates against the tested isolates.

Embora a importância do controle dos níveis de amônia em biotérios seja reconhecida há muitos anos e várias consequências da exposição por inalação em espécies convencionais de laboratório sobre o trato respiratório tenham sido descritas na literatura, existem poucos estudos que avaliaram os efeitos sistêmicos e subclínicos nos animais. O presente trabalho teve por objetivo avaliar o perfil hematológico e bioquímico em ratos Wistar alojados sob condições ambientais adversas (ammonia build-up) com tempo de permanência de 5 (Grupo 1, n=20), 10 (Grupo 2, n=20) ou 15 dias (Grupo 3, n=20). A elevação dos níveis de poluentes no ambiente de alojamento experimental foi obtida através da redução da taxa de ventilação e da colocação de maravalha servida, de forma a alcançar-se uma concentração média aproximada de 90 ppm de amônia, variando de 76 a 106 ppm. A análise hematológica revelou que os animais do Grupo 1 apresentaram valores de hemoglobina e hematócrito significativamente maiores em relação todos os outros grupos. Com relação aos parâmetros bioquímicos, novamente observou-se que o Grupo 1 diferiu estatisticamente do Grupo Controle, do Grupo 2 e do Grupo 3 para creatinina e para gama-glutamiltransferase. Diferenças entre o Grupo 1 e os demais grupos experimentais foram encontradas para fosfatase alcalina, alanina aminotranferase, amilase e glicose. Os demais parâmetros apresentaram resultados variáveis e aparentemente inconclusivos. Concluindo, a análise dos resultados indica que a maioria das alterações no perfil hematológico e bioquímico de animais expostos ocorre entre o dia 0 e o dia 5 e posteriormente retorna aos valores basais, devido a uma possível resposta adaptativa ao aumento da concentração de amônia atmosférica no ambiente de alojamento. / Although the importance of controlling the levels of ammonia in animal facilities has been acknowledged for many years now, and several consequences of exposure by inhalation in conventional laboratory species on the respiratory tract have been described in the literature, there are few studies assessing the systemic and subclinical effects on animals. This study aimed at assessing the hematological and biochemical profile in Wistar rats housed under adverse environmental conditions (ammonia build-up) with stay time of 5 (Group 1, n=20), 10 (Group 2, n=20) or 15 days (Group 3, n=20). The increase in the levels of pollutants in the experimental environment housing was achieved by reducing the rate of ventilation and the placement of soiled bedding served, in order to achieve an average concentration of ammonia of approximately 90 ppm, ranging from 76 to 106 ppm. The hematological analysis revealed that animals in Group 1 had hemoglobin and hematocrit values significantly higher than all other groups. Concerning the biochemical parameters, once again it was observed that Group 1 differed statically from the Control Group, Group 2 and Group 3 regarding creatinine and gamma-glutamyltransferase. Differences between Group 1 and the other experimental groups were found regarding alkaline phosphatase, alanine aminotransferase, amylase and glucose. The other parameters showed variable results, apparently inconclusive. In conclusion, the analysis of the results indicates that most changes in the hematological and biochemical profile of the animals exposed occur between day 0 and day 5, and then return to baseline, in reason of a possible adaptive response to the increase of atmospheric ammonia concentration in the environment housing.

A contagem de plaquetas é um exame de rotina utilizado no auxilío do diagnóstico de diversos distúrbios hemostáticos, além de ser usada no monitoramento de pacientes, portanto existe a necessidade de obter parâmetros fidedignos para assegurar a existência de plaquetopenia ou plaquetose e alterações morfológicas destas células. A comum ocorrência de agregação plaquetária “in vitro” dificulta a análises destes parâmetros, evento devido ao uso incorreto da metodologia de coleta, armazenamento inadequado da amostra, assim como o uso incorreto do anticoagulante. O diagnóstico errôneo de plaquetopenia ou plaquetose pode ter como consequência o direcionamento terapêutico inadequado do paciente. O objetivo deste estudo foi comparar quantitativa e qualitativamente os parâmetros plaquetários em amostras com diferentes anticoagulantes, e diferentes tempo e temperatura de armazenagem. Além disso, foram também objetivos averiguar a diferença entre os métodos de contagem de plaquetas (automático, manual e estimado em lâmina), e a correlação entre o volume plaquetário médio (MPV) e a porcentagem de macroplaquetas, assim como definir um intervalo de referência para a porcentagem de macroplaquetas em uma população de cães sadios. Amostras de sangue foram coletadas através do sistema a vácuo em tubos de EDTA K2 e citrato de sódio 3,2% de 54 cães clinicamente saudáveis. As amostras foram separadas em duas alíquotas e posteriormente armazenadas em pares, um par a temperatura ambiente (25°C) e outro a 4°C por até 6 horas após coleta. Cada alíquota foi avaliada em três momentos diferentes, nos quais as contagens plaquetárias, o MPV, e o escore de agregação foram realizados. A porcentagem de macroplaquetas foi feita apenas nas amostras de EDTA armazenadas a 25°C, no tempo zero após a coleta. Foi observada uma diminuição significativa nas contagens plaquetárias com o passar do tempo e em amostras sob refrigeração, e uma tendência ao aumento dos valores de MPV. As contagens realizadas em amostras de EDTA foram mais elevadas do que aquelas em citrato, e não houve correlação entre o volume de plaquetário médio e a porcentagem de macroplaquetas e, além de que a freqüência de aglomeração foi maior em amostras citratadas armazenadas a 4°C. / The platelet count is a routine examination used in the diagnosis of bleeding disorders and patient monitoring. Therefore, reliable parameters are needed to ensure the existence of thrombocytopenia or thrombocytosis and morphological changes of these cells. The common occurrence of platelet aggregation difficult the analysis of these parameters, this often occurs due to incorrect venipuncture methodology, improper storage of the sample, as well as the incorrect use of anticoagulants. The misdiagnosis of thrombocytopenia or thrombocytosis may result in inappropriate treatment guidance. The aim of this study was to compare the quantitative and qualitative platelet parameters in samples with different anticoagulants, times and temperatures. Additional objectives were to, ascertain the difference between platelet count methods (automatic, manual and estimated) and to verify a possible correlation between the mean platelet volume (MPV) and macroplatelets percentage, as well as to define a reference range for macroplatelets percentage in a healthy population of dogs. Blood was collected from 54 clinically healthy dogs via vacuum system into EDTA K2 and sodium citrate 3.2% tubes. The samples were separated into two aliquots and then stored in pairs, one pair at room temperature (25°C) and another at 4°C for up to 6 hours post sampling. Each sample was evaluated at three different times, in which platelet counts, MPV, and clumping scores were performed. The macroplatelets percentage was done only in EDTA samples stored at 25°C, at zero hour post sampling. The authors observed a statistically significant decrease in platelet counts over time and in refrigerated samples, and a tendency to increased values of MPV. Counts performed in EDTA samples were higher than those in citrate, and there was no correlation between the mean platelet volume and macroplatelets percentage; and besides the frequency of clumping was higher in citrated samples stored at 4°C.

Objetivo: Avaliar a freqüência das células T reguladoras (Tregs) em crianças com diagnóstico novo de Púrpura Trombocitopênica Imune (PTI) e a sua associação com a contagem de plaquetas na ocasião, comparando os achados com os de controles saudáveis. Pacientes e Métodos: Foi realizado um estudo caso-controle, no qual foram incluídos 19 pacientes com diagnóstico novo de PTI e 19 controles. Para cada um dos casos, foram coletadas quatro amostras de sangue em períodos distintos, sendo eles ao diagnóstico – antes da instituição de qualquer terapêutica – e após um, três e seis meses do mesmo. Para os controles, utilizou-se amostra de sangue de 19 pacientes saudáveis, coletadas eletivamente. Em todas as amostras de sangue foi realizada contagem de plaquetas através de hemograma e avaliação dos linfócitos Tregs (CD4+ CD25+ Foxp3) por citometria de fluxo. Resultados: A idade média ao diagnóstico de PTI foi de 6,53 ± 4,14 anos. Dos 17 pacientes tratados, 13 receberam apenas corticosteróide oral e quatro pacientes receberam corticosteróide e imunoglobulina endovenosa associada em algum momento do tratamento. Em relação à evolução da doença, 14 crianças apresentaram remissão completa, duas remissão e três PTI crônica. Houve diferença estatisticamente significativa no número de plaquetas entre os grupos caso e controle nas amostras 1 e 4. Não houve diferença significativa na contagem de Tregs entre os casos e os controles em nenhum momento de coleta. Não foi encontrada correlação estatisticamente significativa entre Tregs e o número de plaquetas entre os casos e os controles, nem nos pacientes do grupo caso ou do grupo controle analisados separadamente. Não houve diferença na contagem de células Tregs entre os grupos de pacientes crônicos e não crônicos. Conclusão: Os achados deste estudo não nos permitiu evidenciar correlação estatisticamente significativa entre Tregs e o número de plaquetas nos grupos caso e controle. As células T CD4+ CD25+ Foxp3 (Tregs) parecem não desempenhar um papel crucial na regulação da auto-imunidade em pacientes pediátricos com diagnóstico de PTI, provavelmente, devido à existência de outros mecanismos responsáveis pela auto-imunidade em crianças, ainda não identificados. / Objective: To assess the frequency of regulatory T cells (Tregs) in children with a new diagnosis of Immune Thrombocytopenic Purpura (ITP), and its association with the counts of platelets on the occasion, and compare with healthy controls. Patients and Methods: A case-control study was conducted, in which 19 patients with new diagnosis of ITP and 19 controls were included. For each case, four blood samples were collected at different point times, that is, at the diagnosis – before the establishment of any treatment – and after one, three and six months. For the controls, electively collected blood samples from 19 healthy patients were used. For all blood samples, platelets were counted through a CBC and assessment of Treg lymphocytes (CD4+ CD25+ Foxp3) by flow cytometry. Results: The mean age at the ITP diagnosis was 6.53 ± 4.14 years. Of 17 treated patients, 13 received oral corticosteroid only, and four patients received corticosteroid and associated intravenous human immunoglobulin at some point in the treatment. Regarding the disease course, 14 children showed full remission, two partial remission, and three chronic ITP. There was a statistically significant difference in the number of platelets between the case and control groups in the samples 1 and 4. There was no significant difference in the counts of Tregs between cases and controls at any collection time. No statistically significant correlation was found between Tregs and number of platelets between cases and controls, neither in patients in the case group nor in the control group who were analyzed separately. There was no difference in the counts of Treg cells between the groups of chronic and non-chronic patients. Conclusion: The findings of this study did not show any statistically significant correlation between Tregs and number of platelets in the case and control groups. The T cells CD4+ CD25+ Foxp3 (Tregs) seems did not play a key role in the regulation of self-immunity in pediatric patients diagnosed with ITP. Other mechanisms, which aren’t still identified, are likely to account for self-immunity in children.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-19T17:36:44Z No. of bitstreams: 1 Marco Antonio Granja Barbosa.pdf: 251854 bytes, checksum: 0a11e9c0c9eb675917e79b17a0de1714 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T17:36:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marco Antonio Granja Barbosa.pdf: 251854 bytes, checksum: 0a11e9c0c9eb675917e79b17a0de1714 (MD5) Previous issue date: 2004-02-07 / Studies were performed in two groups of mixed-breed male dogs containing six (Experimental Group) and two (Control Group) animals which were administered IV a crude, whole-body extract of female heartworms or saline solution respectively. The frequency of clinical signs and shock-like reaction as well as changes in clinical parameters such as electrocardiographic record, RBC and WBC counts, serum alanine amino transferase, aspartate amino transferase, creatine phosphokinase and also urea were monitored. The results had been analyzed by the test of Wilcoxon e Mann-Whitney for Clinical hematological, clinical chemistry and by the test of Fischer to electrocardiographic values respectively. Shock with clinical signs such as the pale color of the visible mucous membranes, respiratory disorders, developed in all crude, whole-body extract inoculated dogs. It was observed a significative difference not only between the lynfocytes count and CPK values but also with RBC and eosinophil count absolute. These results indicated that some products present on whole-body extract of female heartworms might be responsible for the onset of shock in dogs. / Foram realizados estudos em dois grupos de caninos,machos, sem raça definida, sendo um grupo experimental composto de seis animais e dois animais no grupo controle, os quais foram inoculados com extrato bruto de fêmeas de Dirofilaria immitis e solução salina respectivamente, com objetivo de avaliar as alterações clínicas, hematológicas e bioquímico séricas. A freqüência dos sinais clínicos apresentados durante o choque foram monitoradas, assim como as modificações nos parâmetros eletrocardiográficos, hematológicos, bioquímico séricos no período compreendido entre cinco minutos a 24 horas após o inicio do experimento. Os resultados foram analisados através dos testes de Wilcoxon e Mann-Witney para as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas, e o teste de Fischer para os valores do eletrocardiograma. Sinais clínicos compatíveis com choque como palidez das membranas mucosas visíveis e distúrbios respiratórios, foram observados em todos os animais inoculados com extrato bruto de Dirofilaria immitis. Diferença significativa foi observada não apenas entre a contagem de linfócitos e os valores de CK, mas também na contagem total de hemácias e na contagem absoluta de eosinófilos.Os resultados indicam que substâncias presentes nos nematóides fêmeas foram responsáveis pelo aparecimento de choque.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-03T13:33:50Z No. of bitstreams: 1 Rosangela Maria Nunes Da Silva.pdf: 985135 bytes, checksum: 202f5add90240bc25bb5337368194719 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T13:33:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosangela Maria Nunes Da Silva.pdf: 985135 bytes, checksum: 202f5add90240bc25bb5337368194719 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This research aimed to evaluate the influence of Vitamin E administered by intramuscular injection (IM), on hematological, biochemical, physiological and electrocardiographic parameters of young goats at the dry period (DP), and at the rainy period (RP), in semiarid of Paraiba. For this were used, for each period, 12 crossbred males, at the age of 60 ± 12 days, and mean weight of 12 ± 2,5 kg, which were distributed into two groups (n=6), called Control Group (CG) and Treatment Group (TG).Animals of the CG had not received any kind of treatment, while the others of the TG received vitamin E (20mg/kg IW), once a week, during 112 days. During this time and for each period was realized in gaps of 14 days (M0, M1, M2,M3, M4, M5, M6, M7 and M8) blood cells analysis, biochemical dosages and evaluation of physiological and electrocardiographic parameters. The obtained data were compared by the t-test (p<0.05), and by the non-parametric Mann-Whitney test (p<0.05). At DP, for CG and TG, the statistical significance was demonstrate at 42 (M3), 98 (M7) and 56 days (M4) for red blood cells variables, with higher means for the no treated animals. There was no significant difference for the means related to white blood cells analysis. At RP it was observed that the Corpuscular Hemoglobin Mean Concentration (MCHC), at 28 days (M2), was statistically significant with the means of TG higher than the CG, while the count of Monocytes at 42 days (M3) and of Segmented Neutrophils at 56 days (M4) was significantly higher for CG. For biochemical parameters, at DP, there was not observed significant statistical variations. At RP, for CG and TG, the statistical significance was observed at 98 days (M7) for Globulins and Albumin:Globulin ratio, and at 28 days (M2) for Creatinine. At DP, for CG and TG, there was no significant difference for Body Temperature (BT) and Cardiac Frequency (CF), however at 28 days (M2) was observed statistical significance for Respiratory Frequency (RF), at 14 days (M1) for QRSms complex and at 84 days (M6) for RmV wave. At RP, for CG and TG, no statistical significance was verified for physiological parameters, however was showed significant difference for Pms wave at 70 (M5) and 98 days (M7) and for PRms gap at 84 days (M6). It was concluded that the doses, the way and the frequency ofadministration of vitamin E, purposed in this research, promote a increase for erythrocytes values, at DP; vitamin E suggests turn better the phagocytosis function of Neutrophils at RP; it exercises no influence on serum biochemistry at DP, however is efficient to maintain the normal concentration of Globulins and Albumin:Globulin ratio at RP; it can be used in young goats to improve the immunologic answers; it exercises no influence on physiological parameters, being these influenced by the environmental temperatures; vitamin E does not present effects on cardiac electrophysiology of young goats in semiarid. / Objetivou-se com esta pesquisa avaliar a influência da vitamina E administrada por via intramuscular (IM), sobre os parâmetros hematológicos, bioquímicos, fisiológicos e eletrocardiográficos de caprinos jovens nas épocas seca (ES) e chuvosa (EC), do semiárido paraibano. Foram utilizados, para cada época, 12 animais, machos, sem raça definida, com idade de 60 ± 12 dias e peso de 12 ± 2,5 kg, distribuídos em dois grupos (n=6), denominados Grupo Controle (GC) e Grupo Tratamento (GT). Aos animais do GC não foi administrado nenhum tipo de tratamento, enquanto no GT, administrou-se vitamina E (20 mg/kg IM), a cada sete dias, durante 112 dias. Durante este período e para cada época, realizou-se com intervalos de 14 dias (M0, M1, M2, M3, M4, M5, M6, M7 e M8) hemograma, dosagens bioquímicas e avaliações dos parâmetros fisiológicos e eletrocardiográficos. Os dados obtidos foram comparados pelo teste t de Student (p<0,05) e pelo teste não-paramétrico de Mann-Whitney (p<0,05). Na ES, nos GC e GT, a significância estatística foi demonstrada aos 42 (M3), 98 (M7) e 56 dias (M4) para as variáveis eritrocitárias, com médias superiores nos animais tratados. Não houve diferença significativa quanto às médias relativas ao leucograma. Na EC observou-se no hemograma que a Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média (CHCM), aos 28 dias (M2), foi estatisticamente significativa com as médias do GT maior que as do GC, enquanto que a contagem dos Monócitos aos 42 dias (M3) e dos Neutrófilos segmentados aos 56 dias (M4) foram significativamente superiores no GC. Não foram verificadas variações estatisticamente significativas para as variáveis bioquímicas na ES, em nenhum momento. Na EC, nos GC e GT, a significância estatística foi observada aos 98 dias (M7) para as variáveis Globulinas e relação Albumina: Globulina, e aos 28 dias (M2) para a Creatinina. Na ES, nos GC e GT, não houve diferença significativa para a Temperatura Corporal (TC) e Frequência Cardíaca (FC), porém aos 28 dias (M2) observou-se significância estatística para as variáveis Frequência Respiratória (FR), aos 14 dias (M1) para o complexo QRSms e aos 84 dias (M6) para a onda RmV. Na EC, nos GC e GT, nenhuma significância estatística foi verificada com relação aos parâmetros fisiológicos, porém foi evidenciadodiferença significativa para a onda Pms aos 70 (M5) e 98 dias (M7) e intervalo PRms aos 84 dias (M6). Conclui-se que a dose, a via e a frequência de administração da vitamina E, propostos nesta pesquisa, promovem aumento dos valores eritrocitários, na ES; a vitamina E sugere melhorar as funções de fagocitose dos Neutrófilos na EC; ela não exerce influência sobre a bioquímica sérica na ES, porém é eficiente em manter as concentrações normais de Globulinas e a relação Albumina:Globulina na EC; pode ser usada em caprinos jovens para maximizar a resposta imune; ela não exerce influência sobre os parâmetros fisiológicos, sendo estes influenciados pela temperatura ambiental; a vitamina E não apresenta efeitos sobre a eletrofisiologia cardíaca de caprinos jovens no semiárido.

Com o objetivo de avaliar o envolvimento da resposta imune humoral no desenvolvimento da anemia e das alterações quantitativas e qualitativas das plaquetas na erliquiose canina, sete cães adultos, livres de infecção, foram inoculados com E. canis e acompanhados durante 10 semanas. Três cães permaneceram como controles. Os animais foram submetidos a exame físico diário e avaliação laboratorial (hemograma, contagem de plaquetas, mielograma, bioquímica sangüínea, fragilidade osmótica eritrocitária e teste de Coombs), reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisa de anticorpos anti-E. canis, antiplaquetários e antimegacariocíticos (IFI), e teste da atividade de agregação plaquetária, em diferentes momentos durante o período de observação. Febre, esplenomegalia, linfadenomegalia, trombocitopenia, anemia não regenerativa, aumento das atividades séricas da ALT, AST e FA foram as principais alterações clínicas e de patologia clínica observadas, com pico máximo entre o 21&ordm; e 28&ordm; dias pós-infecção. Houve diminuição da capacidade de agregação plaquetária dos animais infectados (p<0,05) nos dias 14, 21, 28 e 35 pós-infecção e aumento do número das células megacariocíticas, principalmente seus precursores (megacarioblastos e pró-megacariócitos) no 14&ordm; dia pós-infecção. Não foram detectados anticorpos antiplaquetários ou antimegacariocíticos. O teste de Coombs, bem como a fragilidade osmótica eritrocitária, mantiveram-se inalterados, comprovando não ter ocorrido hemólise imunomediada. Conclui-se que a anemia desenvolvida durante a fase aguda da infecção experimental por E. canis, de característica eritroregenerativa, ainda que tardia, pelo menos nos animais estudados, não teve envolvimento de mecanismo imunológico direcionado contra as hemácias, e ainda, que a causa da trombocitopenia e da hipofunção plaquetária observada durante esta fase da doença não parece estar relacionada ao desenvolvimento de mecanismos imunológicos direcionados contra as plaquetas ou seus precursores. / In order to determine the involvement of humoral and immune response on development of anemia and quantitative and qualitative platelets disorders in experimental canine ehrlichiosis, seven adult naïve dogs were inoculated with E. canis and followed during 10 weeks. Three dogs were remained as control. Daily clinical evaluation and laboratorial exams (hematological, platelet counts, bone marrow evaluation, biochemistry, erythrocyte osmotic fragility and Coombs? test) polymerase chain reaction assay (PCR), anti-E.canis, antiplatelet and antimegakaryocyte antibodies detection (IFA) and platelet aggregation studies were evaluated at different moments during all the experimental period. Fever, splenomegaly, lymphadenomegaly, thrombocytopenia, non-regenerative anemia and increase on liver?s enzymes serum activity (ALT, AST and ALP) were the main clinical and laboratorial findings observed, with the highest point between days 21 and 28 post-infection. The infected animals showed a decrease in platelet aggregation responses (p<0.05) on days 14, 21, 28 and 35 post-infection and increase of megakaryocytic cells, mainly its precursors (megakaryoblasts and promegakaryocytes) on day 14 post-infection. It weren?t detected any antiplatelet or antimegakaryocyte antibodies, as well as, there were no variations on erythrocyte osmotic fragility and Coombs? tests results, which confirms the absence of immune-mediated hemolysis. It is concluded that the anemia observed during the experimental acute phase of the E. canis infection, with regenerative pattern, even though late, at least in the studied animals, wasn?t related with immune mechanism against the red blood cells, and that, the thrombocytopenia and platelet dysfunction observed during this phase of the disease don?t seen to be related with immune mechanisms against platelets or its precursors.

O aborto espontâneo recorrente (AER) é caracterizado pela ocorrência de três ou mais abortos consecutivos e acomete 2-4% das mulheres em idade fértil. A etiologia está associada a vários fatores de risco, tais como anomalias uterinas, aberrações cromossômicas, autoimunidade, trombofilias, elevação na concentração de homocisteína (tHcy), porém cerca de 40% dos casos permanece sem causa definida. O metabolismo de unidades de carbono desempenha papel fundamental na disponibilidade de folato na célula, sendo essencial para o desenvolvimento placentário e fetal. Deficiência de vitaminas que regulam este metabolismo, como o ácido fólico, e polimorfismos em genes que codificam enzimas relacionadas ao metabolismo de folato (MTHFR, RFC1, GCP2 e MTHFD1) podem levar à redução das concentrações desta vitamina e ao aumento das concentrações de tHcy. Objetivo foi avaliar a associação entre polimorfismos em genes relacionados ao metabolismo do folato (RFC1, GCP2, MTHFR e MTHFD1) e o risco de se ter AER, bem como avaliar a associação entre estes polimorfismos e as alterações nas concetranções de folato, cobalamina e homocisteína. Foram constituídos três grupos: AER primário: 117 mulheres com AER e nenhum feto viável; AER secundário: 139 mulheres com AER e pelo menos um feto viável; e Controle: 264 mulheres sem história de aborto espontâneo. Nenhuma das mulheres estava grávida no momento da coleta do sangue. Amostras de sangue foram obtidas para dosagens bioquímicas (folato, Cbl, tHcy, entre outras), imunológicas e extração de DNA genômico. As genotipagens foram feitas por PCR-RFLP ou PCR em tempo real. As concentrações séricas de folato e Cbl foram maiores no AER primário e secundário (p<0,05). A distribuição dos genótipos de todos os polimorfismos foi semelhante nos três grupos. O aumento nas concentrações de folato sérico (OR: 1,05, 95% IC: 1,03 - 1,07, p<0,001), Cbl (OR: 1,00, 95% IC: 1,00 - 1,00, p= 0,016), tHcy (OR: 1,03, 95% IC: 0,97 - 1,11, p= 0,033) e T4 (OR: 1,02, 95% IC: 1,00 - 1,03, p= 0,006) e a presença de FAN reagente (1:160) (OR: 2,90, 95% IC: 1,25 - 6,75, p= 0,013) foram considerados fatores de risco para aborto primário. Para o aborto secundário, foram considerados fatores de risco o aumento nas concentrações de folato sérico (OR: 1,04, 95% IC: 1,02 - 1,05, p<0,001), Cbl (OR: 1,00, 95% IC: 1,00 - 1,00, p= 0,019) e tHcy (OR: 1,05, 95% IC: 1,00 - 1,09, p= 0,039), maiores idades (OR: 1,02, 95% IC: 0,98 - 1,06, p= 0,031), hábito de fumar (OR: 2,54, 95% IC: 1,41 - 4,60, p= 0,002) e ter maior IMC (OR:1,42, 95% IC: 1,07 - 1,88, p= 0,015). Os polimorfismos estudados não foram associados ao maior risco de se ter AER, quando analisados isoladamente, e também não foram associados a alterações nas concentrações séricas de folato, Cbl e tHcy, com exceção do genótipo MTHFR 677TT, cujas portadoras apresentaram maior concentração de tHcy, quando comparadas com as portadoras de genótipos 677CC e 677CT nos três grupos. As variáveis concentrações de folato, Cbl, tHcy e T4 e presença de FAN reagente foram associadas ao maior risco de se ter aborto primário. As variáveis idade, IMC, tabagismo, concentrações de folato, Cbl e tHcy foram associadas ao maior risco de aborto secundário. / The recurrent spontaneous abortion (RSA) is characterized by the occurrence of three or more consecutive miscarriages and affects 2-4% of women of childbearing age. The etiology is associated with several risk factors such as uterine abnormalities, chromosomal aberrations, autoimmunity, thrombophilia, increased concentration of homocysteine (tHcy). About 40% of cases remains unknown cause. The units of carbon metabolism plays an essential role in the availability of the cell folate, is essential for the placental and fetal development. A deficiency of the vitamins that regulate this metabolism, like folic acid, and polymorphisms in genes encoding enzymes related to folate metabolism (MTHFR, RFC1, and GCP2 MTHFD1) may lead to decreased concentrations of this vitamin and increased concentrations of tHcy. Objective was to evaluate the association between polymorphisms in genes related to folate metabolism (RFC1, GCP2, MTHFD1 and MTHFR) and the risk of having AER, and to evaluate the association between these polymorphisms and changes in concetranções folate, cobalamin, and homocysteine. Three groups were divided: AER primary: 117 women with RSA and no viable fetus, AER secondary: 139 women with RSA and at least one viable fetus and Control: 264 women with no history of miscarriage. None of the women was pregnant at time of blood collection. Blood samples were taken for biochemical (folate, Cbl, tHcy, etc.), immunological and genomic DNA extraction. The genotyping were carried out by PCR-RFLP or real time PCR. Serum concentrations of folate and Cbl were higher in groups 1 and 2 (p <0.05). The distribution of genotypes of MTHFR c.677C> T, MTHFR c.1298A> C, MTHFD1 c.1958G> A, RFC1 c.80G>GCP2 A and c.1561C> T was similar among the three groups. The increased concentrations of serum folate (OR: 1.05, 95% CI: 1.03 - 1.07, p <0.001), Cbl (OR: 1.00, 95% CI: 1.00 to 1.00, p = 0.016), tHcy (OR: 1.03, 95% CI: 0.97 to 1.11, p = 0.033) and T4 (OR: 1.02, 95% CI: 1.00 to 1.03, p = 0.006) and the presence of ANA (1:160) (OR: 2.90, 95% CI: 1.25 - 6.75, p = 0.013) were considered risk factors primary for abortion. For secondary abortion, were considered risk factors increased the concentrations of serum folate (OR: 1.04, 95% CI: 1.02 - 1.05, p <0.001), cobalamin (OR: 1.00, 95 % CI: 1.00 to 1.00, p = 0.019) and tHcy (OR: 1.05, 95% CI: 1.00 to 1.09, p = 0.039), higher age (OR: 1.02, 95% CI: 0.98 to 1.06, p = 0.031), cigarette smoking (OR: 2.54, 95% CI: 1.41 to 4.60, p = 0.002) and had a higher BMI (OR : 1,42,95% CI: 1.07 to 1.88, p = 0.015). The studied polymorphisms were not associated with increased risk of having RSA when analyzed separately, and were not associated with changes in serum folate, Cbl and tHcy, with the exception of the MTHFR 677TT genotype, whose patients had a higher concentration of total tHcy compared with those with 677CC and 677CT genotypes in the three groups. The variable concentrations of folate, Cbl, tHcy, and T4, presence of ANA and have been associated with increased risk for miscarriage primary. The variables age, BMI, smoking, concentrations of folate, Cbl and tHcy were associated with increased risk of secondary miscarriage.