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[en] EVALUATION OF THE CONTAMINATION FROM GUANABARA BAY MANGROVES USING CRABS UCIDES CORDATUS AS INDICATORS OF OIL POLLUTANTS AND DEVELOPMENT OF ANALYSIS / [pt] AVALIAÇÃO DA CONTAMINAÇÃO DE MANGUEZAIS DA BAÍA DE GUANABARA UTILIZANDO CARANGUEJOS UCIDES CORDATUS COMO BIOINDICADOR DE POLUENTES DE PETRÓLEO E DESENVOLVIMENTO DE METODOLOGIAS DE ANÁLISESADRIANA HADDAD NUDI 07 March 2006 (has links)
[pt] O principal objetivo deste estudo foi validar o
caranguejo
da espécie Ucides
cordatus como organismo indicador de poluição por óleo
em
áreas de
manguezais da Baía de Guanabara. Para isto foram
realizadas as seguintes
etapas: (1) análises químicas de hidrocarbonetos
policíclicos aromáticos (HPAs)
em amostras de hepatopâncreas e sedimento por
cromatografia gasosa acoplada
ao espectrômetro de massas (CG/EM); (2) bioensaios com
experimentos de
exposição ao pireno e avaliação das respostas biológicas
através das medidas
dos metabólitos formados em amostras de urina de
caranguejos; (3) ensaio do
micronúcleo em hemócitos de caranguejos para verificar
conseqüências
genotóxicas. Amostras de sedimento e caranguejos foram
coletadas entre
setembro de 2003 e outubro de 2004 em quatro áreas de
manguezais da Baía de
Guanabara: Piedade, Nova Orleans, Suruí e Canal do
Peteca.
O manguezal de
Barra de Guaratiba foi escolhido como área de referência
fora da baía. Foi
desenvolvido um método semiquantitativo e não destrutivo
para medidas de
metabólitos em urina de caranguejo utilizando
cromatografia líquida de alta
eficiência com detector de fluorescência (CLAE/F). Esta
técnica apresentou boa
sensibilidade (LQ= 0,01 (mi)g mL-1) e baixo custo.
Amostras
de urina de
caranguejos foram analisadas em todas as áreas estudas.
Foram conduzidos
vários bioensaios em laboratório com caranguejos
expostos
à pireno. Durante as
primeiras etapas dos experimentos, o metabólito 1-pireno-
sulfato foi o principal
metabólito formado. Em urina de caranguejos dos
manguezais
estudados, o 1-
pireno-glucosídeo foi o metabólito dominante. Foram
encontradas diferenças significativas nos níveis de HPAs
totais em amostras de hepatopâncreas,
variando de 256 (mi)g kg-1 (p.s.) para Barra de Guaratiba
a
67000 (mi)g kg-1 (p.s.) no
Suruí. Os manguezais de Suruí e do Canal do Peteca
apresentaram as maiores
concentrações de HPAs nas amostras de hepatopâncreas e
sedimento. Os
compostos de 3 a 4 anéis aromáticos foram mais
abundantes que os HPAs de 5
e 6 anéis. As concentrações de HPAs nas amostras de
sedimento diminuíram
com a profundidade em todas as estações estudadas. As
concentrações
determinadas foram: Barra de Guaratiba ((somatório)PAH 35-
200 (mi)g
kg-1p.s); Piedade
((somatório)PAH 311-615 (mi)g kg-1 p.s.); Nova Orleans
((somatório)PAH 270-1134
(mi)g kg-1 p.s.);
Suruí ((somatório)PAH 1280-31500 (mi)g kg-1 p.s.) e no
Canal do
Peteca ((somatório)PAH 336-6000
(mi)g kg-1 p.s.). Amostras de hepatopâncreas de Ucides
cordatus apresentaram
maiores concentrações de HPAs que as de sedimento. O
fator de bioacumulação
(FA) variou entre 0,7 e 35, e fator de bioacumulação
biota-sedimento (FBA)
entre 0,02 e 3,0. Foram encontradas correlações
positivas (r2= 0.70) entre os
metabólitos de pireno em urina e os níveis de HPAs em
hepatopâncreas e
sedimento dos locais estudados. O ensaio do micronúcleo
foi realizado no
laboratório, em caranguejos expostos ao pireno. Foi
observado um aumento do
número de micronúcleos nos hemócitos, indicando
respostas genotóxicas e
mutagênicas. Entretanto, o ensaio do micronúcleo não foi
sensível para avaliar
o gradiente de contaminação nos manguezais amostrados,
não apresentando
correlação com os níveis de contaminação detectados nas
amostras de
hepatopâncreas e sedimento. O Ucides cordatus demonstrou
ser um excelente
bioindicador para avaliar a qualidade ambiental em áreas
de manguezais. / [en] The aim of this study was the validation of crab Ucides
cordatus as indicator of
oil pollution in mangrove areas from Guanabara Bay. For
such purpose it was
performed: (1) chemical analyses of PAHs in hepatopancreas
and sediment
samples by gas chromatography with mass spectrometer
detector (GC/MS); (2)
bioassays with pyrene exposure experiments and evaluation
of biological
responses through pyrene metabolites measurements in urine
samples; (3)
micronucleus assay in crab hemocytes to verify genotoxic
consequences.
Sediment and crab samples were collected from September
2003 to October 2004
in four mangrove areas of Guanabara Bay: Piedade, Nova
Orleans, Suruí, Canal
do Peteca. The mangrove of Barra de Guaratiba was chosen
as reference site. It
was developed a semiquantitative and nondestructive method
for measurements of
pyrene metabolites in crab urine using HPLC/Fluorescence.
This technique
presented several advantages as sensitivity (DL= 0.01(mi)
g.mL-
1) and low cost.
Crabs urine was sampled straight from the field in all
studied sites. Beside this, it
was conducted several bioassays in laboratory with crabs
exposed to pyrene.
During the first stages of experiments, pyrene-1-sulphate
was the main metabolite
produced, followed by pyrene-1-glucoside. In crabs urine
from mangrove areas,
the pyrene-1-glucoside was the dominant metabolite. It was
found significant
differences on total PAH levels of crab samples among
studied sites, which
ranged from 256 in Barra de Guaratiba to 67000 (mi)g kg-1
dry
weight, in Suruí.
Suruí and Canal do Peteca presented the highest PAHs
concentrations in crab
hepatopancreas and sediment samples. Besides, three and
four ring compounds
were more abundant than five and six ring PAHs. In
sediment samples PAHs concentrations decreased with depth
for all studied sites: Barra de Guaratiba
((somatório)PAH 35-200 (mi)g kg-1d.w.); Piedade
((somatório)PAH 311-615 (mi)g kg-
1d.w.); Nova Orleans
((somatório)PAH 270-1134 (mi)g kg-1d.w.); Suruí (somatório)
PAH 1280-31500 (mi)g kg-
1d.w. and Peteca
((somatório)PAH 336-6000 (mi)g kg-1d.w.). Hepatopancreas
samples of
crabs Ucides cordatus
had higher PAHs concentrations than sediment samples with
bioaccumulation
factors (BAF) of 0,70 to 35,00 and 0,02 to 3,00 for the
bioaccumulation factors
biota-sediment (BSAF). Also, it was found high
correlations between pyrene
metabolites in urine and PAHs levels in crab
hepatopancreas and sediments.
Pyrene metabolites of crab urine samples presented strong
correlation (r2= 0,77)
with hepatopancreas and sediment samples from each studied
site. In laboratory,
micronucleus assay was performed in crabs exposed to
pyrene. It was found an
increase of micronucleus number in haemocytes, indicating
responses of
genotoxicity and mutagenicity. However, the micronucleus
assay was not
sensitive enough for showing contamination gradient among
mangrove sites, nor
it was significantly correlated with PAHs levels of crabs
and sediment samples.
Ucides cordatus revealed an excellent bioindicator and
suitable for monitoring the
environmental quality in mangrove areas.
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