Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: desenvolver um modelo experimental de carcinogênese em colo de rato induzido pelo azoximetano e estabelecer um padrão de ação protetora do hexafosfato de inositol, pela expressão da enzima superóxido dismutase em foco de cripta aberrante. Métodos: 48 ratos Wistar, adultos, machos, foram mantidos em observação por seis semanas. GI (n=12) recebeu injeções de solução salina subcutânea durante a terceira e quarta semanas, enquanto que o GII (n=12), no mesmo período, recebeu azoximetano (AOM) na dose 20mg.Kg-1 subcutânea. O GIII (n=12) recebeu inositol hexafosfato 1% (IP6) na água de beber durante as seis semanas, enquanto que o GIV, além do IP6 na água de beber, recebeu também as injeções subcutâneas de AOM durante a terceira e quarta semanas. Ao término da sexta semana os animais sofreram a eutanásia e foram coletados segmentos de intestino grosso à cerca de um centímetro da transição íleocólica. Fragmentos foram preparados e submetidos à coloração imunoistoquímica para de anticorpo primário anti-SOD1 (superóxido dismutase1) e anticorpo secundário antirato, revelador de cor DAB (diamino-benzidina) com obtenção de expressão SOD1 na coloração marrom. A porcentagem da expressão de SOD em FCA (foco de cripta aberrante) foi quantificada por meio de processamento de imagem assistida por computador (ImageLab). Os resultados foram submetidos aos testes de análise de variância (ANOVA) e estabelecido o nível de 5% (p≤0,05) para rejeição da hipótese de nulidade. Resultados: a porcentagem média da expressão da SOD no GI (16,0 ± 3,7) foi semelhante ao GIII (16,9 ± 3,1) mostrando que a solução salina (controle) e o IP6 não provocaram alterações em FCA; o grupo II (26,7 ± 3,5) mostrou uma significante porcentagem de expressão da SOD em FCA, demonstrando sua capacidade de provocar lesões pré-malignas em cólon de roedores; por outro lado este estímulo de indução carcinogênica foi protegido pela administração de IP6 representada pelos resultados do GIV (20,9 ± 3,3). Conclusões: O estímulo carcinogênico do AOM proporcionou um modelo de carcinogênese em colo de rato Wistar que foi protegido pela administração do IP6, sendo que a expressão da SOD em FCA mostrou-se um parâmetro imunoistoquímico confiável para representar as lesões pré-neoplásicas em FCA. / Objective: to develop an experimental model of carcinogenesis in Wistar rats induced by the azoximethane and to establish a pattern of protecting action of the inositol hexafosfate, for the expression of the enzyme superoxide dismutase in foci of aberrant crypts. Methods: 48 Wistar male rats, adults, were maintained in observation by six weeks. GI (n=12) received injections of subcutaneous saline solution during the third and fourth weeks, while GII (n=12), in the same period, received 20mg.Kg-1 of subcutaneous azoximetano (AOM). GIII (n=12) received inositol hexafosfato 1% (IP6) in the drinking water during the six weeks, while GIV, besides IP6 in the drinking water, also received the subcutaneous injections of AOM during the third and fourth weeks. At the end of the sixth week large intestine segments were collected to the about a centimeter of the ileo-colic transition. Fragments were prepared and submitted to the imunohistochemical process to antibody primary anti-SOD1 (superoxide dismutase1) and antibody secondary anti-rat, color discloser DAB (diamino-benzidina) with expression obtaining SOD1 in the brown coloration. The percentage of the expression of SOD in FCA (focus of aberrant crypt) was quantified through image processing attended by computer (ImageLab). The results were submitted to the tests of variance analysis (ANOVA) and established the level of 5% (p≤0.05) for rejection of the nullity hypothesis. Results: the medium percentage of the expression of SOD in GI (16.0 ± 3.7) was similar to GIII (16.9 ± 3.1) showing that the saline solution (controls) and IP6 didn't provoke alterations in FCA; the group II (26.7 ± 3.5) showed a significant percentage of expression of SOD in FCA, demonstrating the capacity to provoke preneoplasic lesions in colon of rodents; on the other hand this promotion of carcinogenic induction was protected by the administration of IP6 showed by the results of GIV (20.9 ± 3.3). Conclusions: The carcinogenic action of AOM provided a carcinogênese model in colon of Wistar rat that was protected by the administration of IP6, and the expression of SOD in FCA was a histochemical parameter reliable to represent the preneoplasic lesions in FCA. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Os hormônios exercem importante influência sobre a laringe. Variações da voz são comuns na prática clínica, e podem refletir alterações nas pregas vocais ao nível macroscópico e ultraestrutural. A prega vocal contém, entre outras substâncias, 0 ácido hialurônico, sendo este responsável, em grande parte, pelas suas propriedades viscoelásticas. A concentração do ácido hialurônico nos tecidos pode variar com a ação dos hormônios. OBJETIVO: 0 objetivo deste trabalho e analisar comparativamente a concentração do ácido hialurônico nas pregas vocais de ratas durante 0 ciclo estral e ciclo gravídico-puerperal. MÉTODO: Foram utilizadas 40 ratas adultas, divididas em dois grupos, ciclo estral e gravídico-puerperal. No primeiro grupo utilizamos 20 ratas para determinação da concentração do ácido hialurônico no ciclo estral; no segundo grupo, também de 20 animais, foi realizado 0 mesmo experimento no ciclo gravídico-¬puerperal. Os dois grupos foram divididos em subgrupos de acordo com a fase do ciclo em que se encontravam, e com 0 tempo de prenhez do animal. Nos subgrupos de cinco animais, quatro foram utilizados para 0 estudo da concentração do AH e um para os procedimentos histológicos. 0 método utilizado foi desenvolvido no Departamento de Biologia Molecular da Universidade de São Paulo-Escola Paulista de Medicina e trata-¬se de um método fluorimétrico para a determinação do AH em fluidos biológicos, utilizando sondas de ligação do AH. Os cortes histológicos foram submetidos a coloração de Hematoxilina-Eosina, e azul de alcian com e sem tratamento com hialuronidase. RESULTADOS: No grupo do ciclo estral não se observou variação da concentração do ácido hialurônico. No grupo do ciclo gravídico-puerperal houve aumento da concentração do ácido hialurônico no subgrupo do puerpério. Na comparação entre os dois grupos do ciclo estral e gravídico-puerperal não houve diferença. Quando comparamos todos os subgrupos há diferença no grupo do puerpério. CONCLUSÕES: Comparando-se todos os subgrupos do ciclo estral e ciclo gravídico-puerperal, só no puerpério houve aumento da concentração do ácido hialurônico.. / Hormones play an important role in the larynx. Voice variations are common in the clinical practice and may reflect alterations in the vocal folds at the macroscopic and ultrastructural levels. The vocal fold is composed of a number of substances that provideits viscoelastic properties nestly the hialuronic acid. The concentration of hyaluronic acid in the tissues may vary according to hormone action. OBJECTIVE: the objective of this study is to analyze the concentration of hyaluronic acid in the vocal folds during estral and gravidic-puerperal cycles. METHOD: 40 adult female rats were divided into two groups: Group I- 20 adult female rats were to determine concentration of hyaluronic acid during the estral cycle, and group II , 20 animals were submitted to the same procedure but during the gravidic-puerperal cycle. The two groups were divided into sub-groups according to the rats phase of the cycle and according to gestacional phase. In the sub-groups of five animals, four were used to analyze the HA concentration and one was used for histological procedures. The method used was developed in the Department of Molecular Biology of the Federal University of São Paulo University – Escola Paulista de Medicina. It is a fluorometric method that determines HA in biologic fluids, using a probe to bind HA. Histological sections were submitted to alcian blue/ hematoxylin-eosin staining method with and without hyaluronidase treatment. RESULTS: Variation in the concentration of hyaluronic acid was not observed during the estral cycle. In the gravidic puerperal cycle group, an increase in the hyaluronic acid concentration was observed only in the puerperal subgroup. No difference could be observed in the comparison between the two groups of estral and gravidic-puerperal cycles, CONCLUSIONS: When comparing all subgroups of the estral and gravidic-puerperal cycles, an increase in the hyaluronic acid concentration could be seen only in the puerperal phase. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Andrea Hayashi (deachan@gmail.com) on 2016-06-17T19:38:30Z No. of bitstreams: 1 2011-12-doutorado-paulo-roberto-dias-dos-santos.pdf: 6370997 bytes, checksum: 9a2878a903c3f2d2f6dfbf3ca1712c66 (MD5) / Approved for entry into archive by Andrea Hayashi (deachan@gmail.com) on 2016-06-17T19:38:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011-12-doutorado-paulo-roberto-dias-dos-santos.pdf: 6370997 bytes, checksum: 9a2878a903c3f2d2f6dfbf3ca1712c66 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-17T19:38:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011-12-doutorado-paulo-roberto-dias-dos-santos.pdf: 6370997 bytes, checksum: 9a2878a903c3f2d2f6dfbf3ca1712c66 (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: As ondas de choque têm sido utilizadas para estimular a regeneração óssea em pacientes com retardo de consolidação nas fraturas. Dentre as estruturas envolvidas na osteogênese, a matriz extracelular, composta de glicosaminoglicanos (GAGs), tem um papel fundamental. Objetivo: Distinguir e quantificar os glicosaminoglicanos sulfatados e ácido hialurônico (AH) de fêmures de ratos, após perfuração óssea e aplicação de ondas de choque. Métodos: A amostra foi constituída de 50 ratos machos da linhagem Wistar, com três meses de idade e cerca de 300 gramas de peso. Os animais foram divididos em dois grupos e submetidos à cirurgia com perfuração óssea de dois milímetros, associado ou não a aplicação de ondas de choque, sendo feito eutanásia no terceiro, sétimo, 14o, 21o e 28o dias. A análise dos glicosaminoglicanos foi realizada pela eletroforese em gel de agarose, densitometria das bandas de migração e pelo teste ELISA-like. Resultados: Houve aumento significativo dos valores dos glicosaminoglicanos sulfatados no período de três a 28 dias com predominância do condroitim sulfato. O ácido hialurônico, no terceiro dia de sacrifício, mostrou aumento significativo no grupo submetido às ondas de choque em relação ao grupo controle. Conclusão: A aplicação de ondas de choque em fêmures perfurados de ratos estimularam a expressão de glicosaminoglicanos sulfatados durante a reparação óssea e a expressão do ácido hialurônico, no grupo três dias, em relação ao grupo controle. / Introduction: Several cases of delayed bone consolidation in fractures treated with shock waves for bone healing are related in cientific literature. Some of these studies point to a key role of Glycosaminoglycans extracellular matrix in the osteogenesis process. Objective: Sulfated Glycosaminoglycans (GAGs) and Hyaluronic Acid (HA) distinguish and quantification in rat femurs, after bone drilling and shock waves. Methods: The study included 50 male Wistar rats, aged three months and 300g weighted. These animals were divided in two groups, both submitted to bone drilling, but only one of them treated with shock wave. All rats were sacrified by euthanasia in different days after bone drilling: third, seventh, 14th, 21th and 28th days. The glycosaminoglycans were analysed by agarose gel electrophoresis, migration bands densitometry and by ELISA like test. Results: Sulfated glycosaminoglycans statistically significant increased since the third day group to the 28th day group, with chondroitin sulfate predominance. The hyaluronic acid statistically significant increased in the third day group treated with shock waves compared with control group. Conclusion: The application of shock waves in perforated femurs of rats stimulated the expression of sulfated glycosaminoglycans during bone repair and expression of hyaluronic acid in the group three days in the control group.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:07:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326393.pdf: 9574470 bytes, checksum: ba2c04e87fba01d7b5c7b26cfbbe5620 (MD5) Previous issue date: 2014 / O bolor azul causado por P. expansum é uma doença de grande importância em pós-colheita de frutos de maçã, sendo considerada nos países produtores a doença mais importante na perda da qualidade e quantidade dos frutos armazenados. A aplicação de ácido salicílico (AS) em pós-colheita de frutos pode representar uma eficiente forma de controle alternativo de doenças. Este trabalho objetivou avaliar o efeito do AS no desenvolvimento do fitopatógeno e da doença visando a proteção dos frutos de maçã cv. Fuji das categorias 1, 2 e 3 contra o bolor azul, além de elucidar os mecanismos de ação pelo qual o AS poderia atuar. In vitro, esporos de P. expansum tiveram sua germinação reduzida em 80% quando o AS foi aplicado a 0,5 mM, chegando a 100% de inibição a uma dose de 2,5 mM em contato com os esporos por 60 minutos, equivalendo-se ao cloro ativo. A atividade antimicrobiana do AS foi dependente do pH da solução, com maior redução da germinação de P. expansum em pH em torno de 3 e perda total da atividade quando o pH foi elevado a 6. Com o aumento do tempo de contato do AS a 2,5 mM com os esporos, notou-se um aumento linear na liberação de espécies reativas de ácido tiobabitúrico (ATB), atingindo um valor máximo de 6000 pmol de ATB por mg de proteína após 120 minutos de contato. De forma semelhante, após a exposição do micélio de P. expansum ao AS (2,5 mM) por 120 minutos, observou-se um extravasamento de 3,2 µg de proteína solúvel por g de micélio, duas vezes maior do que o apresentado pelo micélio do fungo submetido ao tratamento com água destilada. Tais resultados corroboraram os obtidos por microscopia de fluorescência e eletrônica de transmissão, evidenciando danos do AS associados à membrana plasmática do fungo sem, por outro lado, afetar sua parede celular. Quando aplicado nos frutos de maçã, o AS apresentou apenas efeito erradicante, reduzindo a incidência do bolor azul em até 100% no tratamento em que os esporos de P. expansum permanecerem em contato por 30 min em solução de AS (2,5 mM) antes da imersão dos frutos. A atividade de peroxidases, polifenoloxidases e glucanases dos frutos, assim como o teor de compostos fenólicos e de flavonóides foram pouco influenciados pelo tratamento com o AS a 2,5 mM ou pela inoculação com o fitopatógeno durante as primeiras 80 h, sem diferir também entre as categorias de maçã. Nas características físico-químicas dos frutos, o AS a 2,5 mM promoveu a manutenção da massa, dos teores de sólidos solúveis e da acidez titulável nas maçãs a valores próximos àqueles encontrados no início do experimento, contra alterações de até 50% nos frutos da testemunha. Os resultados do presente estudo mostram a capacidade do AS de controlar doenças pós-colheita como o bolor azul, principalmente através dos danos à membrana plasmática de P. expansum, e de proporcionar a manutenção das características fisiológicas dos frutos de maçã, possibilitando um aumento no tempo de prateleira.<br> / Abstract : The blue mold caused by P. expansum is a disease of great importance in apple post-harvest, being considered the most important disease in the loss of quality and quantity of stored fruits in producing countries. The application of salicylic acid (SA) in postharvest fruit can be an efficient form of control the disease alternatively. This study evaluated the effect of AS on the pathogen and disease development, by protecting the apple fruit of categories 1, 2 and 3 against the blue mold, besides elucidating the mechanisms by which AS could act. In vitro, spores of P. expansum had their germination reduced by 80 % when AS was applied at 0.5 mM, reaching 100 % of inhibition at a dose of 2.5 mM in contact with the spores for 60 minutes, equivalent to the active chlorine. The antimicrobial activity of AS depends of the pH of the solution, exhibiting total reduction of the P. expansum germination in pH around 3 and a total waste of activity when the pH was raised to 6. With the increase of the time of contact between the spores and AS (2.5 mM), a linear increase in the release of thiobabituric acid reactive species was noted, reaching a maximum of 6000 thiobabituric acid per pmol per mg protein after 120 minutes of contact. Similarly, after exposure with AS at 2.5 mM for 120 minutes, there was a leakage of 3.2 mg of soluble protein per g of the mycelium of P. expansum, twice greater than that presented by mycelia treated with distilled water. These results corroborate to those obtained from fluorescence and transmission electron microscopy, showing that the damage was associated with the plasma membrane of the fungus without, moreover, damaging its cell wall. When applied in apple fruit, AS (2.5 mM) only showed eradicative effect, reducing the incidence of the blue mold by up to 100% in the treatment in which the spores of P. expansum remain in contact for 30 minutes in a AS (2.5 mM) solution after the fruits immersion. The activity of peroxidases, polyphenoloxidases, glucanases and accumulation of phenolic compounds and flavonoids were little influenced by AS treatment or inoculation with the pathogen during the first 80 hours without differ between apple categories. Considering the physico-chemical characteristics of fruits, AS at 2.5 mM promoted the maintenance of mass, soluble solids and titratable acidity util the end of the experiments, against changes of 50% in the fruits treated with control-treatment. The results of this study show the ability of AS to control postharvest diseases such as blue mold, mainly through damage to the plasma membrane of P. expansum and providing maintenance of the physiological characteristics of apple fruit, allowing an increased shelf life.

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:11:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 956.pdf: 879309 bytes, checksum: d84a3114e760ae742d5f261487879a6d (MD5) Previous issue date: 2001 / A xerostomia é a redução do fluxo salivar, que pode ocorrer devido a problemas relacionados diretamente com as glândulas salivares, ou por motivos de ordem geral. O paciente acometido pela xerostomia queixa-se de boca seca, dificuldade de mastigação e deglutição. A xerostomia atinge cerca de trinta por cento da população brasileira, sendo um dos efeitos colaterais mais comum do tratamento radio e quimioterápico. Esta dissertação está estruturada sob a forma de dois estudos baseados em um mesmo desenho experimental. O primeiro estudo descreve o efeito sialogogo de duas frutas cítricas, a acerola e o kiwi, associados ou não a estimulação mecânica da mastigação do látex. Os resultados obtidos neste estudo mostraram que a associação do estímulo mecânico da mastigação de um centímetro de látex a uma porção do cítrico kiwi ou acerola aumenta significativamente o fluxo salivar, sendo a associação com o cítrico kiwi mais sialogoga. O segundo estudo consiste em determinar a confiabilidade e a validade dos resultados obtidos na mensuração do pH salivar através do (kit) industrializado DentoBuff.(...). Porém, quando se classifica o pH salivar pela escala de cores do (kit) DentoBuff em ácido, neutro e alcalino essa diferença se dilui devido se estar trabalhando dentro de intervalos.

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:11:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 540.pdf: 1175894 bytes, checksum: 6c65532262827d054788b98c6908a063 (MD5) Previous issue date: 2003 / O chumbo é um metal tóxico, de ocorrência natural na crosta terrestre e utilizado desde a antigüidade. A exposição ao chumbo afeta, especialmente, o sistema hematológico, alterando a atividade de enzimas da biosíntese do heme. Uma destas, a ácido aminolevulínico desidratase (ALAD), apresenta um polimorfismo, com dois alelos (1 e 2), que, possivelmente, modifica a toxicidade do chumbo no organismo. O objetivo deste trabalho foi padronizar uma metodologia para investigação deste polimorfismo, que possa ser utilizada em estudos de exposição ao chumbo. Para tanto, foram padronizados métodos para extração de DNA, amplificação, purificação e digestão enzimática. Após padronizada, a metodologia foi aplicada em uma amostra populacional de 50 indivíduos, dos quais também foram determinados os níveis de alguns indicadores biológicos. (...) A metodologia se mostrou eficiente, específica e sensível para determinação do genótipo da ALAD da população, onde 98 por cento apresentou genótipo ALAD1-1 e por cento, ALAD1-2. Os indicadores apresentaram níveis médios de 4,2 µg/dL(não expostos) e 70,7 (expostos) para chumbo em sangue; 38,1 por cento (não expostos) e 67,2 por cento (expostos) para recuperação da ALAD; 2,4 µmoles/g Hb (não expostos) e 30,3 µmoles/g Hb (expostos) para zinco protoporfirina eritrocitária; e 0,75 mg/g Cr (não expostos) e 13,66 mg/g Cr (expostos) para ácido -aminolevulínico urinário. A metodologia para genotipagem da ALAD padronizada neste trabalho pode ser aplicada para determinação do polimorfismo da enzima em estudos de exposição ao chumbo.

Made available in DSpace on 2016-04-04T12:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 loyze_lima_ioc_mest_2014.pdf: 4809047 bytes, checksum: ddb3a58d24cdeff435fb1a250dcb5a46 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii causa uma infecção comumente assintomática, porém pode se apresentar de forma grave durante a gravidez e em pacientes imunocomprometidos. A terapia atual para a toxoplasmose é restrita contra taquizoítos, e possuem pouco ou nenhum efeito sobre bradizoítos, que são mantidos em cistos teciduais como fonte recrudescente da infecção. Com isso, novas alternativas terapêuticas vêm sendo propostas, como o uso da Atovaquona, que apresentou alguma eficácia sobre taquizoítos e bradizoítos em cistos teciduais. Neste trabalho, foi estudado o efeito de 3-BrPA, um composto utilizado em testes sobre células cancerígenas, durante a interação de células LLC-MK2 infectadas com taquizoítos da cepa RH de T. gondii. Quanto à célula hospedeira não se observou efeito do composto sobre a proliferação e viabilidade celular. A avaliação da interferência de 3-BrPA sobre o crescimento in vitro do T. gondii evidenciou uma redução na proliferação intracelular do parasito de cerca de 55% após 24 h de tratamento e 61% após 48 h O desenvolvimento intracelular do parasito, analisado por MEV, apresentou características morfológicas comumente encontradas em cistos teciduais. A incubação das culturas com lectina DBA confirmou o desenvolvimento de cistos e por MET se evidenciou a presença de bradizoítos. Além disso, foram revelados parasitos degradados e a influência do composto sobre a endodiogenia. Outra abordagem adotada foi o tratamento de culturas infectadas com a combinação de 3-BrPA e Atovaquona, que resultou em uma redução de parasitos intracelulares de 73% após 24 h de tratamento e 71% após 48 h, em comparação ao controle, além da ausência da formação de parede cística nessas culturas. Conclui-se, portanto, que a utilização de 3-BrPA pode se apresentar como uma importante ferramenta para o estudo:(i) da cistogênese in vitro;(ii)do metabolismo do parasito, necessitando de maior aprofundamento do alvo de ação do composto em T. gondii;(iii) das vias metabólicas alternativas do parasito, e (iv) dos mecanismos moleculares/celulares desencadeados que levaram a morte dos parasitos / Toxoplasma gondii usually causes an asymptomatic infection, but it can present severity during pregnancy and in immunocompromised patients . Current therapies for toxoplasmosis are restricted only against tachyzoites, and have little or no effect on bradyzoites, which are kept in tissue cysts like source of the infection recrudescent. Consequently, new therapeutic alternatives have been proposed, as the use of Atovaquone that showed some effica cy against tachyzoites and bradyzoites in tissue cysts. In this work, we propose to study the effect of 3 - BrPA, a compound that is being tested against cancer cells, on the infection of LLC - MK 2 cells with tachyzoites of T. gondii (RH strain) . N o effect of 3 - BrPA on host cell proliferation and viability was observed. Evaluation of 3 - BrPA interference on in vitro growth of T. gondii showed a reduction in intracellular parasite proliferation about 55% after 24 h of treatment, and 61% after 48 h. Intracellular d evelopment of parasite, analyzed by SEM, showed morphological characteristics commonly found in tissue cysts. Incubation of cultures with DBA lectin confirmed the development of cysts and TEM showed the presence of bradyzoites. Moreover, we revealed the pr esence of degraded parasites and the influence of compound on endodyogeny. Another approach used was the treatment of infected cultures with combination of 3 - BrPA and Atovaquone. This r esulted in the reduction of intracellular parasites of 73% after 24 h o f treatment and 71% after 48 h, compared to control, besides the absence of cyst wall formation in these cultures. The refore, it is concluded that use of 3 - BrPA may pres ent as an important tool for study of: (i) in vitro c ystogenesis , (ii) the metabolism o f the parasite, requiring deeper understanding of the target of action of the compound in T. gondii , (iii) the alternatives metabolic pathways of the parasite, and (iv) the molecular / cellular triggered that led to death of the parasites mechanisms.

Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-06-16T12:51:41Z No. of bitstreams: 1 2004_tese_smmregadas.pdf: 602966 bytes, checksum: b99309de45018ca8ffa0886541e3174c (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-06-16T13:33:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_tese_smmregadas.pdf: 602966 bytes, checksum: b99309de45018ca8ffa0886541e3174c (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-16T13:33:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_tese_smmregadas.pdf: 602966 bytes, checksum: b99309de45018ca8ffa0886541e3174c (MD5) Previous issue date: 2004

FERREIRA, D. A. Estudo Fitoquímico de Sclerobolium rugosum (Leguminosae). 2008. 142 f. Dissertação (Mestrado em Química Orgânica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2008. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-10T17:45:02Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_daferreira.pdf: 2722883 bytes, checksum: 3ae67750260d9fbd1242a32838b84c13 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-04-20T19:58:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_daferreira.pdf: 2722883 bytes, checksum: 3ae67750260d9fbd1242a32838b84c13 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-20T19:58:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_daferreira.pdf: 2722883 bytes, checksum: 3ae67750260d9fbd1242a32838b84c13 (MD5) Previous issue date: 2008 / This work reports the study phytochemical investigation Sclerolobium rugosum, specie of the Leguminosae family, subfamily Caesalpinoideae, a plant found on the margins of rivers in the Northeast of Brazil. There is no any scientific study about this specie, except the astringent property cited in the folk medicine. Phytochemical investigation of hexane and ethanol extracts of bark and wood of the roots of S. rugosum using silica gel allowed to isolation and identification of: Lupeol, -sistosterol and stigmasterol glycosides and one ester derivative of cinnamic acid (trans-triacontyl-4-hydroxicinnamate) (Table 01, p. X). Derivatives reactions were obtained in order to determine structures, training of the usual techniques in the laboratory and to make further studies of biological activities. Natural compounds were isolated and purified using the technique of column chromatography on silica gel (CC). The formation of derivatives reactions were accompanied by Thin-Layer Chromatography (TLC). Structure determination of natural products and derivates were done by spectrometric methods including: NMR 1H and 13C (nuclear magnetic resonance), IR (Infrared) and MS (mass spectrum). With these techniques was also possible of establish the relative configuration of compounds and derivatives. / Neste trabalho é relatado o estudo fitoquímico de Sclerolobium rugosum, espécie da família Leguminosae, subfamília Caesalpinoideae, uma planta encontrada nas margens de rios da região Nordeste do Brasil.Não existe nenhum estudo científico sobre a espécie, exceto a propriedade adstringente citado na medicina popular. A investigação fitoquímica a partir dos extratos hexânico e etanólico da casca e lenho da raiz de S. rugosum através de cromatografia de gel de sílica, levou ao isolamento e identificação do: lupeol, -sistosterol e estigmasterol glicosilados e um éster derivado do ácido cinâmico (trans-triacontila-4-hidroxicinamato) (Tabela 01, pág. X). Os derivados reacionais foram obtidos tendo em vista a confirmação das estruturas, treinamento das técnicas usuais em laboratório e, visando efetuar em etapa posterior, testes de atividades biológicas. Os compostos naturais foram isolados e purificados utilizando a técnica de cromatográfica em coluna de gel de sílica (CC). A formação dos derivados reacionais foi acompanhada através de cromatografia em camada delgada (CCD). A determinação estrutural dos produtos naturais e seus derivados foram feitas por métodos espectrométricos incluído: RMN 1H e 13C (ressonância magnética nuclear), IV (infravermelho) e EM (espectro de massa). Com estas técnicas também foi possível estabelecer a configuração relativa produtos naturais e seus derivados.

CASTRO, J. L. S. A toxidade do ácido ascórbico em plantas de arroz silenciadas nas APXs cloroplásticas induz estresse oxidativo não dependente da fotossíntese. 2014. 79 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-22T18:39:40Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlscastro.pdf: 1579441 bytes, checksum: 4f35a992cef56b64959af93486c78676 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-29T19:59:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlscastro.pdf: 1579441 bytes, checksum: 4f35a992cef56b64959af93486c78676 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-29T19:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlscastro.pdf: 1579441 bytes, checksum: 4f35a992cef56b64959af93486c78676 (MD5) Previous issue date: 2014 / Ascorbic acid (AA) is one of the most important antioxidants in plant protection against the oxidative stress generated by abiotic stresses. In animal cells, several works have shown that high concentrations of this acid can cause toxicity and cell death. The proposed mechanism is related to a pro-oxidant action by the reduction of Fe+3 to Fe+2 and by the action of this Fe+2 in the Fenton reaction with generation of reactive oxygen species (ROS). To the best of our knowledge, this mechanism has not been reported yet. The objective of this work was to elucidate toxicity mechanisms of high concentrations of AA in plants using rice mutants with deficiency (gene silencing) in two chloroplastic APX (stromal and thylakoidal) as model. Forty-five days old silenced plants and non-transformed (NT) were exposed to 10 mM (moderate concentration) and 50 mM (high concentration) of exogenous AA (sprayed on leaves). These concentrations were defined based on dose-dependent experiments from 0 to 50 mM using leaf segments in plates. In order to assess the protective effect (antioxidant) of the AA, plants and leaf segments were exposed to high light intensity (1000 µmol m-2 s 1) to induce photooxidative stress. AA concentrations higher than 30 mM induced oxidative stress (increase in the TBARS level) in leaf segments and this effect was enhanced by high light. In addition to the oxidative damage, these AA concentrations induced an increase in membrane damage (electrolytes leakage) and reduction in photosystem II integrity (Fv/Fm). Interestingly, the 10 and 20 mM concentrations did not mitigate the negative effects caused by the light excess. The high AA concentration (50 mM) induced leaf senescence under high light, indicated by the decrease in chlorophyll and carotenoids contents. Plants deficient in two chloroplast APX (APX7/8) displayed higher sensibility to AA toxicity, especially in combination with high light. These effects were indicated by exhibition of higher levels of TBARS (lipid peroxidation), electrolyte leakage, H2O2 and superoxide radical. Curiously, the transgenic plants under high AA concentrations did not exhibited differences for several photosynthetic parameters: CO2 assimilation rate and PSII (ΦPSII, ETR, NPQ e Fv/Fm) and PSI efficiency indicators (ΦPSI, ETR e P700), apart from the estimation of cyclic flux (CEF), compared with NT. Despite the AA toxicity have not changed the parameters of photosynthesis in APX-deficient plants, the sole presence of high light caused changes in some parameters of photochemical activity in these plants.The data set of this work shows that the excess of AA may cause toxicity in plants. The intensity of these effects is strongly enhanced by the excess of light but they are not dependent on photosynthesis. In this work, the roles of the two chloroplastic APX and/or high light on the AA toxicity still unclear, despite the deficient plants had showed increased sensibility. Apparently, the mechanism of AA toxicity in plants is similar to the proposed for animal cells.This antioxidant, when in excess, can act as a pro-oxidant stimulating Fenton reactions, inducing the accumulation of ROS and resulting oxidative stress. Further studies are needed to elucidate the role of the chloroplast APXs and high light on the toxicity of ascorbic acid in plants. / O ácido ascórbico (AA) é um dos antioxidantes mais importante na proteção das plantas contra o estresse oxidativo gerado por estresses abióticos. Em células animais, diversos trabalhos têm demonstrado que concentrações elevadas desse ácido podem causar toxicidade e morte celular. O mecanismo proposto é de uma ação pro-oxidante, por meio da redução de Fe+3para Fe+2 e ação desse último na reação de Fenton, com geração de espécies reativas de oxigênio (EROs). Até o nosso conhecimento, esse mecanismo ainda não foi relatado em plantas. O objetivo deste trabalho foi elucidar mecanismos de toxicidade de concentrações elevadas de AA em plantas, utilizando como modelo mutantes de arroz com deficiência (silenciamento gênico) nas duas APX de cloroplasto (estromal e tilacoidal). Plantas silenciadas e não transformadas (NT) com 45 dias de idade foram expostas a 10 mM (concentração moderada) e 50 mM (concentração elevada) de AA exógeno (pulverizado nas folhas). Essas concentrações foram definidas a partir de experimentos dose-dependente de 0 a 50 mM utilizando segmentos foliares em placa. No sentido de avaliar o efeito protetor (antioxidante) do AA, plantas e segmentos foliares foram expostos a intensidade de luz elevada (1000 µmol m-2 s-1) para induzir estresse fotoxidativo. Concentrações de AA acima de 30 mM induziram estresse oxidativo (aumento no nível de TBARS) em segmentos de folhas e esse efeito foi potencializado por luz elevada. Além de dano oxidativo, esses níveis de AA induziram aumento no dano de membrana (vazamento de eletrólitos) e redução na integridade do fotossistema II (Fv/Fm). É interessante notar que as concentrações de 10 e 20 mM de AA não mitigaram os efeitos negativos causados pelo o excesso de luz. A concentração elevada de AA (50 mM) induziu senescência foliar na presença de luz elevada, indicada por redução nos conteúdos de clorofilas e carotenoides. As plantas deficientes nas duas APXs de cloroplasto (APX7/8) apresentaram maior sensibilidade a toxicidade do AA, especialmente na combinação com luz elevada. Esses efeitos foram indicados por exibirem maiores níveis de TBARS (peroxidação lipídica), vazamento de eletrólitos, H2O2e radical superóxido. Curiosamente, as plantas mutantes na presença de AA elevadonão apresentaram diferenças em diversos parâmetros da fotossíntese: taxa de assimilação de CO2 e indicadores de eficiência doFSII (ΦPSII, ETR, NPQ e Fv/Fm) e FSI (ΦPSI, ETR e P700), além da estimativa do fluxo cíclico (CEF), quando compradas com as NT. A despeito da toxicidade de AA não ter alterado os parâmetros da fotossíntese nas plantas deficientes em APX, a presença de luz elevada, isoladamente, causou mudanças em alguns parâmetros da atividade fotoquímica nessas plantas. O conjunto dos dados deste trabalho mostra que o excesso de AA pode causar toxicidade em plantas. A intensidade desses efeitos é fortemente potencializada pelo excesso de luz, mas eles não são dependentes da fotossíntese. O papel das duas APXs de cloroplasto e da luz elevada na toxicidade de AA não ficou claro neste trabalho, apesar das plantas deficientes terem mostrado maior sensibilidade. Aparentemente, o mecanismo de toxicidade de AA em plantas é semelhante ao proposto para células animais. Esse antioxidante quando em excesso pode atuar como pro-oxidante estimulando as reações de Fenton, induzindo a acumulação de EROs e gerando estresse oxidativo. Novos estudos são necessários para elucidar o papel das APXs de cloroplasto e da luz elevada na toxicidade de ácido ascórbico em plantas.