Thesis (M.S.)--Miami University, Dept. of Chemistry and Biochemistry, 2007. / Title from first page of PDF document. Includes bibliographical references.

abstract: Studies have demonstrated that anthocyanins can function as antioxidants, reduce inflammation, and improve dyslipidemia. Tart cherries are anthocyanin-rich, making them particularly attractive as a functional food to improve cardiovascular disease (CVD) risk. There have been few published studies to date examining the impact of tart cherries on biomarkers of dyslipidemia and inflammation, particularly in overweight and obese individuals at high risk for these conditions. This study evaluated the effect of consuming 100% tart cherry juice daily on blood lipids including total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), calculated very low density lipoprotein cholesterol (VLDL-C), triglycerides (TG), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), and the CVD risk ratios, as well as the inflammatory biomarkers interleukin 6 (IL-6), interleukin 10 (IL-10), tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), C-reactive protein (CRP), monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), and erythrocyte sedimentation rate (ESR) following a 4-week period. Based on the high anthocyanin content of tart cherries, it was hypothesized that the lipid and inflammatory profiles would be significantly improved following the intervention. A total of 26 men and women completed this 4-week randomized, single-blind, placebo-controlled, crossover study. Participants were randomized to drink either 8 ounces of placebo beverage or tart cherry juice daily for 4 weeks. Following a 4-week washout period, the alternate beverage was consumed. Ultimately, this investigation demonstrated no statistically significant alterations in any of the lipid or inflammatory biomarkers when analyzed across time and between interventions (p > 0.05). As expected, glucose and insulin parameters remained stable over the duration of the study, as well as self-reported physical activity level, total calorie consumption, and macronutrient intake. However, trans-fat was reported to be significantly higher during the cherry arm of the study as compared to the placebo arm (p < 0.05), potentially confounding other results. Although the results of this study were equivocal, it is feasible that a higher dose, longer treatment duration, or more susceptible target population may be required to elicit significant effects. Consequently, further investigation is necessary to clarify this research. / Dissertation/Thesis / M.S. Nutrition 2012

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-16Bitstream added on 2014-06-13T20:23:10Z : No. of bitstreams: 1 rocha_sa_dr_botib.pdf: 801498 bytes, checksum: b3be7a863fd6894761090b9b2ccb9cea (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Este trabalho objetivou determinar o teor de substâncias com poder antioxidante (poliaminas, fenóis, flavonóides, ácido ascórbico, carotenóides, clorofila), além de potencial antioxidante do vegetal (DPPH) e nitrato em vegetais pós-colheita oriundos de cultivo orgânico. Folhas de chicória, polpa de berinjela e frutos de quiabeiro foram adquiridos de produtor orgânico certificado no município de Botucatu/SP. Os vegetais foram lavados, higienizados e armazenados em temperaturas de 25 ± 2°C ou 10 ± 2°C. As coletas foram realizadas em intervalos de três dias. A temperatura de 10 ± 2°C de armazenamento induziu maior longevidade para chicória, berinjela e quiabo. Os teores de poliaminas diferiram entre os vegetais estudados. A temperatura de 10 ± 2 °C não influenciou os níveis de poliaminas. Chicória e quiabo apresentaram teores baixos de nitrato. Os níveis de polifenóis não sofreram grandes alterações com o transcorrer do tempo pós-colheita nos três vegetais analisados, mas houve influência da temperatura principalmente nas antocianinas em berinjela. Aumentos nos teores de vitamina C e carotenóides foram observados em quiabo e chicória durante a pós-colheita / This study aimed to determine the levels of substances presenting antioxidant capacity (polyamines, phenols, flavonoids, ascorbic acid, carotenoids, chlorophyll), as well as the antioxidant potential (DPPH) and the nitrate level in organic plants during the postharvest. Chicory leaves, eggplant fruit pulp and okra fruits were obtained from an organic farmer certified in Botucatu Municipality, São Paulo State, Brazil. The plants were washed, sanitized and stored at 25 ± 2°C or 10 ± 2°C. Harvests were performed at three-day intervals. The storage temperature of 10 ± 2°C induced greater longevity for chicory, eggplant fruit and okra. Polyamine levels differed among the studied plants and were not affected by the temperature of 10 ± 2°C. Chicory and okra had low nitrate levels. Polyphenol levels did not have great changes over the postharvest period for all three analyzed plants but were influenced by the temperature, especially concerning anthocyanins of eggplants. Increased levels of vitamin C and carotenoids were noted for okra and chicory during the postharvest

Araucarea angustifolia (Bert.) O. Kuntze é uma espécie dioica, isto é, flores masculinas e femininas originam-se em árvores separadas. As flores femininas apresentam-se como estróbilo, mais conhecido como pinha. A pinha é constituída por sementes (pinhões) e brácteas (sementes não desenvolvidas), as quais apresentam elevada concentração de compostos fenólicos. Esses compostos são conhecidos por reduzir danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácidos nucleicos, contribuindo para minimizar a incidência de doenças relacionadas com o estresse oxidativo, tais como doenças cardiovasculares, neurológicas e câncer. O objetivo deste estudo foi caracterizar quimicamente, avaliar a atividade antioxidante e antigenotóxica do extrato aquoso de brácteas de A. angustifolia. Neste trabalho, os polifenóis totais do extrato de A. angustifolia foram determinados pelo método de Folin- Ciocalteu e sua composição química foi confirmada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O potencial do extrato para neutralizar espécies reativas foi avaliado através do ensaio com 2,2-difenil 1-picrilhidrazil (DPPH●) e pelas atividades like das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Em linhagem celular de fibroblasto de pulmão humano (MRC5), avaliou-se o efeito protetor do extrato na viabilidade celular através da redução de 3-(4,5-dimetiltiazol 2-il)-2,5difenil brometo de tetrazolina (MTT), na atividade das enzimas SOD e CAT, nos danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácido desoxirribonucléico (DNA) (ensaio cometa alcalino e enzimático) induzidos pelo peróxido de hidrogênio (H2O2). O teor de fenólicos totais do extrato de A. angustifolia foi de 670,93 ± 17,79 mg catequina /100 g de brácteas, sendo a catequina, epicatequina, quercetina e apigenina os principais polifenóis encontrados. O extrato de A. angustifolia foi capaz de reduzir o radical DPPH● e apresentou atividade SOD e CAT-like. Além disso, o extrato de A. angustifolia nas concentrações estudadas (25 e 50 μg/mL) reduziu a mortalidade celular, danos oxidativos a lipídios, proteínas e DNA, e diminuiu a depleção das enzimas antioxidantes SOD e CAT induzida pelo H2O2 em células MRC5. Apesar de não ter sido observado correlação entre os polifenois e marcadores de danos oxidativos, verificou-se uma correlação negativa entre danos a lipídos, proteínas e ácidos nucleicos e a atividade das enzimas SOD e CAT, sugerindo que essas enzimas desempenham um importante papel na prevenção de danos ás biomoléculas. Esses resultados mostram que a A. angustifolia apresenta potencial como fonte de compostos fitoquímicos com atividade biológica relevante. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-11T13:43:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marcia Denize Oliveira de Souza.pdf: 1692835 bytes, checksum: df8d66ab76d9a357820549d73b1c5332 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-11T13:43:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marcia Denize Oliveira de Souza.pdf: 1692835 bytes, checksum: df8d66ab76d9a357820549d73b1c5332 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Araucaria angustifolia (Bert.) O. Kuntze is a dioecious species, with male and female flowers found on separate trees. The A. angustifolia female cone consists of fully developed edible seeds and non-developed seeds called bracts. These bracts have high concentration of phenolic compounds, which have the potential to prevent oxidative damage to lipids, proteins and nucleic acids, and decreasing the incidence of diseases related to oxidative stress, such as cardiovascular and neurological diseases, and cancer. The aim of the present study was to evaluate the chemical characterization and antioxidant and antigenotoxic activities of the extract of A. angustifolia bracts. In this work the polyphenols total of A. angustifolia extract was determinate by Folin-Ciocalteu reagent and its chemical composition was confirmed by high performance liquid chromatography (HPLC). The extract potential to neutralize reactive species was evaluated by 2,2- diphenyl 1-picrylhydrazyl (DPPH●) method and by the ability to mimic the activities of superoxide antioxidants like dismutase (SOD) and catalase (CAT). In human cell line of lung fibroblast (MRC5), we evaluated the protective effect of the extract on cell viability by reduction of 3 - (4,5 dimethylthiazol - 2 - yl ) -2,5 diphenyl tetrazolina bromide (MTT), in the activity of SOD and CAT enzymes in oxidative damage to lipids, proteins and the deoxyribonucleic acid (DNA) (enzymatic and alkaline comet assay) induced by hydrogen peroxide (H2O2). The total phenolic content of the A. angustifolia extract was 670.93 ± 17.79 mg catechin / 100 g bracts, and catechin, epicatechin, quercetin and apigenin the main polyphenol found. The A. angustifolia extract was able to reduce DPPH● and presented like activity of SOD and CAT enzymes. Furthermore, the A. angustifolia extract at the concentrations studied (25 and 50 mg/mL) reduced cell death , oxidative damage to lipids, proteins and DNA, and decreased depletion of antioxidant enzymes SOD and CAT induced by H2O2 in MRC5 cells . Although, no correlation between polyphenols and bookmarks of oxidative injury have been observed. There was a negative correlation between damage to lipids, proteins and DNA with enzymes SOD and CAT, suggesting that these enzymes play a role in the regulation of cellular redox metabolism. These results showed that the A. angustifolia has potential as a source of phytochemical compounds with relevant bioactivities.

Araucarea angustifolia (Bert.) O. Kuntze é uma espécie dioica, isto é, flores masculinas e femininas originam-se em árvores separadas. As flores femininas apresentam-se como estróbilo, mais conhecido como pinha. A pinha é constituída por sementes (pinhões) e brácteas (sementes não desenvolvidas), as quais apresentam elevada concentração de compostos fenólicos. Esses compostos são conhecidos por reduzir danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácidos nucleicos, contribuindo para minimizar a incidência de doenças relacionadas com o estresse oxidativo, tais como doenças cardiovasculares, neurológicas e câncer. O objetivo deste estudo foi caracterizar quimicamente, avaliar a atividade antioxidante e antigenotóxica do extrato aquoso de brácteas de A. angustifolia. Neste trabalho, os polifenóis totais do extrato de A. angustifolia foram determinados pelo método de Folin- Ciocalteu e sua composição química foi confirmada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O potencial do extrato para neutralizar espécies reativas foi avaliado através do ensaio com 2,2-difenil 1-picrilhidrazil (DPPH●) e pelas atividades like das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Em linhagem celular de fibroblasto de pulmão humano (MRC5), avaliou-se o efeito protetor do extrato na viabilidade celular através da redução de 3-(4,5-dimetiltiazol 2-il)-2,5difenil brometo de tetrazolina (MTT), na atividade das enzimas SOD e CAT, nos danos oxidativos a lípidos, proteínas e ácido desoxirribonucléico (DNA) (ensaio cometa alcalino e enzimático) induzidos pelo peróxido de hidrogênio (H2O2). O teor de fenólicos totais do extrato de A. angustifolia foi de 670,93 ± 17,79 mg catequina /100 g de brácteas, sendo a catequina, epicatequina, quercetina e apigenina os principais polifenóis encontrados. O extrato de A. angustifolia foi capaz de reduzir o radical DPPH● e apresentou atividade SOD e CAT-like. Além disso, o extrato de A. angustifolia nas concentrações estudadas (25 e 50 μg/mL) reduziu a mortalidade celular, danos oxidativos a lipídios, proteínas e DNA, e diminuiu a depleção das enzimas antioxidantes SOD e CAT induzida pelo H2O2 em células MRC5. Apesar de não ter sido observado correlação entre os polifenois e marcadores de danos oxidativos, verificou-se uma correlação negativa entre danos a lipídos, proteínas e ácidos nucleicos e a atividade das enzimas SOD e CAT, sugerindo que essas enzimas desempenham um importante papel na prevenção de danos ás biomoléculas. Esses resultados mostram que a A. angustifolia apresenta potencial como fonte de compostos fitoquímicos com atividade biológica relevante. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Araucaria angustifolia (Bert.) O. Kuntze is a dioecious species, with male and female flowers found on separate trees. The A. angustifolia female cone consists of fully developed edible seeds and non-developed seeds called bracts. These bracts have high concentration of phenolic compounds, which have the potential to prevent oxidative damage to lipids, proteins and nucleic acids, and decreasing the incidence of diseases related to oxidative stress, such as cardiovascular and neurological diseases, and cancer. The aim of the present study was to evaluate the chemical characterization and antioxidant and antigenotoxic activities of the extract of A. angustifolia bracts. In this work the polyphenols total of A. angustifolia extract was determinate by Folin-Ciocalteu reagent and its chemical composition was confirmed by high performance liquid chromatography (HPLC). The extract potential to neutralize reactive species was evaluated by 2,2- diphenyl 1-picrylhydrazyl (DPPH●) method and by the ability to mimic the activities of superoxide antioxidants like dismutase (SOD) and catalase (CAT). In human cell line of lung fibroblast (MRC5), we evaluated the protective effect of the extract on cell viability by reduction of 3 - (4,5 dimethylthiazol - 2 - yl ) -2,5 diphenyl tetrazolina bromide (MTT), in the activity of SOD and CAT enzymes in oxidative damage to lipids, proteins and the deoxyribonucleic acid (DNA) (enzymatic and alkaline comet assay) induced by hydrogen peroxide (H2O2). The total phenolic content of the A. angustifolia extract was 670.93 ± 17.79 mg catechin / 100 g bracts, and catechin, epicatechin, quercetin and apigenin the main polyphenol found. The A. angustifolia extract was able to reduce DPPH● and presented like activity of SOD and CAT enzymes. Furthermore, the A. angustifolia extract at the concentrations studied (25 and 50 mg/mL) reduced cell death , oxidative damage to lipids, proteins and DNA, and decreased depletion of antioxidant enzymes SOD and CAT induced by H2O2 in MRC5 cells . Although, no correlation between polyphenols and bookmarks of oxidative injury have been observed. There was a negative correlation between damage to lipids, proteins and DNA with enzymes SOD and CAT, suggesting that these enzymes play a role in the regulation of cellular redox metabolism. These results showed that the A. angustifolia has potential as a source of phytochemical compounds with relevant bioactivities.

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T23:14:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lamas_CelinadeAlmeida_M.pdf: 4632096 bytes, checksum: e93808b5b5cccd35f9d08ba0c30c5a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O cádmio é um desregulador endócrino ressaltado por causar significativas disfunções fisiológicas e bioquímicas em animais e humanos. Está presente em pesticidas e no cigarro, sendo comum a contaminação de humanos. O testículo é um dos órgãos mais afetados pela toxicidade do cádmio, sendo muito suscetível ao seu acúmulo, que causa degeneração tubular, atrofia das células de Leydig, redução da qualidade espermática, entre outras alterações. Na tentativa de reverter ou amenizar os danos causados por este metal vários antioxidantes tem sido estudados, como os polifenóis, presentes na uva e seus derivados. Efeitos positivos destas substâncias têm sido relatados, como redução da pressão sanguínea, capacidade de modular enzimas e propriedade de quelar metais pesados. Já que essas substâncias quando ingeridas diariamente em determinadas quantidades podem modificar positivamente o metabolismo, neste estudo o concentrado de suco de uva foi administrado como um hábito alimentar, antes e após a intoxicação com o metal. Para isto, 24 ratos Wistar foram divididos em 4 grupos: GC (sem tratamento), GCd (CdCl2 - 1,2mg/Kg), GCdJ (CdCl2+G8000® ¿ 2g/Kg) e GJ (G8000® ¿ 2g/Kg). O suco de uva foi administrado diariamente por gavagem desde os 50 dias até 136 dias de idade. O CdCl2 foi injetado intraperitonealmente em uma dose única quando os animais tinham 80 dias. Depois do tratamento, os animais foram eutanaziados sob anestesia (xilazina e cetamina, 10 e 80mg/kg, respectivamente). Para avaliar os efeitos do tratamento foram realizadas análises biométricas, morfológicas (morfometria, estereologia e microscopia eletrônica de transmissão), dosagem de marcadores antioxidantes (CAT, SOD, GSH, MDA), acúmulo de cádmio tecidual e análises da qualidade e contagem espermática. A resposta testicular ao cádmio foi um pouco diferente do regularmente encontrado na literatura, considerando que esta dosagem foi incapaz de alterar níveis das enzimas relacionadas com estresse oxidativo, mas isto pode ser devido ao tempo decorrido entre a contaminação e a realização das análises. Apesar disso, um efeito devastador na morfologia testicular e perfil espermático foram observados. O acúmulo de metal foi evidente no grupo GCd, reduzindo a contagem e qualidade espermática, destruindo a arquitetura testicular e ultraestrutura. O efeito positivo do consumo de suco de uva foi confirmado em nosso estudo, sendo capaz de proteger a morfologia testicular e desenvolvimento espermático, levando-se em consideração a produção e morfologia, alterados pelo metal. O suco de uva isoladamente foi capaz de reduzir o ganho de peso, diâmetro tubular e altura do epitélio seminífero, mas considerando nossas evidências, este efeito não foi devido à toxicidade. Em conclusão, o suco de uva é um agente positivo na proteção do sistema reprodutor masculino contra intoxicação por cádmio / Abstract: Cadmium is an endocrine disruptor, highlighted in that it causes significant physiological and biochemical dysfunction in animals and humans. This metal is present in pesticides and cigarettes, so that human contamination is common. In cadmium intoxication, the testis is one of the most strongly affected organs, being very susceptible to accumulation of this metal, which causes tubular degeneration, Leydig cell atrophy and decreases in semen quality, among other alterations. In order to reverse or diminish the modifications generated by this metal, various antioxidants have been studied, such as polyphenols, present in grapes, and its derivatives. Positive effects of these substances have been reported, such as reduction of blood pressure, capacity to modulate some enzymes, and metal chelating properties. Based on the fact that daily ingestion of polyphenols in certain quantities can favorably modify the metabolism, preventing changes that can lead to severe damage, grape juice was administered as an eating pattern, before and after injection of the metal, from the beginning of sexual maturity to the end of a full spermatogenic cycle. For this study, 24 Wistar rats were divided into 4 groups: GC (without treatment), GCd (CdCl2 - 1,2mg/Kg), GCdJ (CdCl2+G8000® ¿ 2g/kg) and GJ (G8000® ¿ 2g/kg). The grape juice was administrated daily by gavage from 50 days of age until the rats were 136 days old. The CdCl2 was intraperitoneally injected when the animals were 80 days old. After the treatments, the animals were euthanized using a mixture of ketamine and xylazine (10 and 80mg/kg, respectively). In order to evaluate this effect, analyses were performed, including biometric analysis, morphological analyses, such as morphometry, stereology and transmission electron microscopy evaluation, dosage of antioxidant markers including CAT, GSH, SOD, MDA, dosage of cadmium accumulation in the testis and sperm quality analysis. Testis response to cadmium was different from that described in the literature, considering that this dosage did not alter enzymes related to oxidative stress, although a devastating morphological effect was observed. Metal accumulation was evident in GCd, reducing sperm count and quality, disrupting the architectural structure and ultrastructure of the testis. The positive effect of the grape juice administration was confirmed in our research considering it was able to protect testis morphology and sperm development, considering sperm production and morphology. Grape juice by itself reduced body weight gain, tubular diameter and seminiferous epithelium height, but considering our evidences its effects were non toxic. In conclusion, grape juice administration is a confirmed positive agent in relation to reproductive cadmium toxicity / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: José Butori Lopes de Faria / Textos em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T19:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_AlineMacedo_D.pdf: 2909540 bytes, checksum: fff73b7c4aa0615644542da6920d5af7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: No diabetes mellitus (DM), o estresse oxidativo e a redução do óxido nítrico (NO) contribuem para a patogênese da nefropatia diabética. O desacoplamento da NO sintase endotelial (eNOS) faz com que essa sintase produza superóxido ao invés de NO. O objetivo do presente estudo foi investigar o potencial do chá verde (CV) na melhora do desacoplamento da eNOS no DM. Em ratos com DM induzido por estreptozotocina, a biodisponibilidade NO estava reduzida pelo desacoplamento da eNOS, caracterizada pela redução nos níveis de BH4 e pela redução da estrutura conformacional ativa da eNOS, avaliada pela expressão da razão dímero/monômero. O tratamento com chá verde foi capaz de reverter estas abnormalidades. Além disso, células mesangiais humanas imortalizadas (ihMCs) cultivadas sob condições de alta glicose (30mM) exibiram um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e uma redução na biodisponibilidade de NO, que foram revertidos pelo CV. A produção de BH4 e a atividade da guanosina trifosfato ciclohidrolase I (GTPCH I), enzima importante na formação do BH4, diminuíram em ihMCs expostas a alta glicose e foram normalizados pelo CV. Administração exógena de BH4 nas ihMCs reverteu o aumento das ERO e declínio da produção de NO induzido pela alta glicose. Contudo, a co-administração de CV e BH4 não resultou em uma redução adicional na produção de ERO, sugerindo que a redução na produção de ERO pelo CV é um efeito secundário ao desacoplamento da eNOS. Em resumo, CV reverte a redução dos níveis de BH4, induzida pelo DM, melhorando o desacoplamento da eNOS, levando ao aumento da biodisponibilidade de NO e redução do estresse oxidativo, duas anormalidades que são envolvidas na patogêneses da nefropatia diabética / Abstract: The aim of the present study was to investigate the potential of green tea (GT) to improve uncoupling endothelial nitric oxide synthase (eNOS) in diabetic conditions. In rats with streptozotocin-induced diabetes mellitus (DM), nitric oxide (NO) bioavailability was reduced by uncoupling eNOS, characterized by a reduction in BH4 levels and an increase in the eNOS dimer/monomer ratio. GT treatment ameliorated these abnormalities. Moreover, immortalized human mesangial cells (ihMCs) exposed to high glucose (HG) levels exhibited a rise in reactive oxygen species (ROS) and a decline in NO levels, which were reversed with GT. BH4 and the activity of guanosine triphosphate cyclohydrolase I decreased in ihMCs exposed to HG and were normalized by GT. Exogenous administration of BH4 in ihMCs reversed the HG-induced rise in ROS and decline in NO production. However, co-administration of GT with BH4 did not result in a further reduction in ROS production, suggesting that reduced ROS with GT was indeed secondary to uncoupled eNOS. In summary, GT reversed the diabetes-induced reduction of BH4 levels, ameliorating uncoupling eNOS, thus increasing NO bioavailability and reducing oxidative stress, two abnormalities that are involved in the pathogenesis of diabetic nephropathy / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

The incidence of melanoma and non‐melanoma skin cancer is continuing to increase worldwide. Melanoma is the sixth most common cancer in the United States, making skin cancer a significant public health issue. Photo chemoprevention with natural products is an effective strategy for the control of cutaneous neoplastic. Polyphenols from fruits have been shown to protect the skin from the adverse effects of solar UVR, cancer, and the growth of cancer stem cells. In particular, blueberries are known for their high concentration of phenolic compounds that have the high antioxidant capacity, and their effectiveness in reducing UV damage and, therefore, skin cancer. In Matar's lab, we have shown that Polyphenol-Enriched Blueberry Preparation (PEBP), derived from biotransformation of blueberry juice through fermentation, is effective for targeting skin cancer stem cell proliferation in different skin cancer cell lines. We predicted that PEBP affects melanoma skin cancer stem cells (MCSCs) epigenetically by targeting miRNA pathways. We observed the effects of PEBP on sphere growth and cell motility in vitro. We performed RT2-qPCR analyses to determine PEBP influence on miRNA in B16F10 spheres. We transfected B16F10 cells with miR-200b and performed western blotting analyses. Our results demonstrated that PEBP reduced sphere growth and cell migration, and up regulated miR-200b expression in different biological settings. Inhibition of miR-200b increased Zinc Finger E-Box Binding Homeobox 1 (ZEB1) expression. Consequently, PEBP may influence MCSCs through miRNA pathways. Elucidating the mechanisms by which PEBP modulates CSCs biological behavior by controlling miRNAs will enhance our understanding of the molecular mechanisms in skin cancer chemoprevention and might result in their use as natural photo-protectants in skin cancer.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-07-28T14:37:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO PATRÍCIA NERI (PPGCF) - VERSÃO DIGITAL.pdf: 2349213 bytes, checksum: 73f2d950a1240688c94ba3d7578fe8e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-28T14:37:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO PATRÍCIA NERI (PPGCF) - VERSÃO DIGITAL.pdf: 2349213 bytes, checksum: 73f2d950a1240688c94ba3d7578fe8e4 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CNPQ / Os compostos fenólicos são um grupo de substâncias facilmente encontradas na natureza, presentes em várias espécies vegetais. A forma de retirada e obtenção destes compostos presentes nas matrizes das células vegetais é através dos métodos extrativos. A extração é a primeira etapa dos estudos com plantas e pode sofrer interferência de vários fatores como temperatura, tempo de extração, solvente e parte da planta utilizada e tem se tornado um dos principais alvos nos estudos com planejamento fatorial. Maytenus rigida Mart., espécie considerada nativa do nordeste brasileiro, é rica em compostos fenólicos e apresenta atividades farmacológicas conhecidas, entre elas a atividade antimicrobiana. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo analisar as condições extrativas de compostos fenólicos de cascas e folhas desta espécie através de ensaios fitoquímicos e microbiológicos. As amostras foram submetidas à extração hidroetanólica (70%) através de cinco métodos extrativos: maceração, decocção sob refluxo, turbólise, ultrassom e micro-ondas, dos quais um foi escolhido para realização do planejamento fatorial. Esta escolha baseou-se nos doseamentos de fenóis totais, taninos, flavonoides e cumarinas; e nos ensaios antimicrobianos por testes de difusão em disco. Após determinação do método a ser utilizado, foi feito um planejamento fatorial 23, para analisar a interferência do teor alcóolico, do tempo de extração e da proporção massa/solvente nos teores dos metabólitos analisados. O método por decocção sob refluxo foi o escolhido por ter se mostrado mais vantajoso na extração de compostos fenólicos, não havendo diferença significativa entre os métodos para a atividade antimicrobiana. No planejamento fatorial, as variáveis analisadas não exerceram influência sobre os teores de fenóis totais e taninos, já para flavonoides e cumarinas observou-se que o aumento da proporção de etanol aumentou a extração destes metabólitos. Para atividade antimicrobiana, as variáveis exerceram influência significativa frente a M. luteus. Os extratos também foram testados frente a cepas de S. aureus isolados clínicos, apresentando halos entre 12-15 mm, sendo considerados ativos. / Phenolic compounds are a group of substances easily found in nature, present in several plant species. The form of withdrawal and obtaining these compounds in matrices of plant cells is through extractive methods. Extraction is the first stage of studies with plants and can be interfered with by many factors such as temperature, extraction time, solvent and part of the plant used and has become a major target in studies with factorial design. Maytenus rigida Mart., considered native to northeastern Brazil, is rich in phenolic compounds and has known pharmacological activities, including antimicrobial activity. Thus, this study aims to analyze the conditions extraction of phenolic compounds from barks and leaves of this specie through phytochemical and microbiological tests. The samples were submitted to extraction hydroethanol (70%) through five extractive methods: maceration, decoction under reflux, turbo-extraction, ultrasound and microwave, one of which was chosen to perform the factorial design. This choice was based on measurements of total phenols, tannins, flavonoids and coumarins; and antimicrobial tests for disk diffusion test. After determining the method to be used a factorial design 23 was done to analyze the interference of the alcoholic contents, the extraction time and the ratio mass/ solvent in the levels metabolites analyzed. The method by decoction under reflux was chosen for having been more advantageous in extracting of phenolic compounds, with no significant difference between methods for antimicrobial activity. In the factorial design, the analyzed variables did not influence on the contents of total phenols and tannins, flavonoids and coumarins have to be observed that the increase in the proportion of ethanol increased the extraction of these metabolites. To antimicrobial activity, the variables exercised significant influence against M. luteus. The extracts were also tested strains of S. aureus clinical isolates, showing halos between 12-15 mm, and are considered assets.

Capparis spinosa is a wild and cultivated bush, which grows mainly in the Mediterranean Basin. Unopened flower buds, called capers are used in the Mediterranean cuisine as flavoring for meat, vegetable and other foods. Several studies evaluated bioactive component and antioxidant activity of Capparis spinosa, increasing the market demand and the economic importance of capers. The aim of this work was to evaluate the contents of bioactive compounds in floral buds fermented in salt of C. spinosa collected from different areas of Pantelleria Island (Italy), testing the effect on healthy function as total antioxidant compounds. Hydrophilic extracts of C. spinosa from Pantelleria Island were characterized by high-performance liquid chromatography-electrospray ionization/mass spectrometry. Among 24 compounds were detected and quantified by HPLC-MS technique: several Kaempherol and Quercetin derivate were characterized, based on UV spectra and MSn fragmentation pattern. The antioxidative activity of caper hydrophilic extracts was assessed in a number of chemical assays (ORAC, DPPH and ABTS). In order to determine the genetic diversity within and among populations of Capparis spinosa from Pantelleria Island, AFLPs (Amplified Fragment Length Polymorphism) markers were employed. Moreover, in the present study, a commercial model of an Electronic Nose (EN), EOS835 (Sacmi), was preliminarily used to investigate the flavor profile of capers. The EN technique was comparated with a classical techniques gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis, using Head Space Solid-Phase Microextraction (HS-SPME) as a solvent-free sample preparation method. / Capparis spinosa es un arbusto silvestre y cultivado, que crece principalmente en la cuenca mediterránea. Cuando los botones de las flores aún no están abiertas reciben el nombre de alcaparras y se utilizan en la alimentación. Varios estudios han demostrado la presencia de un número de componentes bioactivos in C. spinosa y su actividad antioxidante, lo que ha provocado un aumento de su demanda y ha incrementado la importancia económica de las alcaparras. El propósito de este trabajo fue evaluar el contenido de compuestos bioactivos en el capullo de la flor de C. spinosa conservado en salmuera, procedente de diferentes zonas de la isla de Pantelleria (Italia). Los resultados se expresan como actividad antioxidante total. La actividad antioxidante de los extractos hidrófilos de alcaparra se evaluó mediante pruebas químicas (ORAC, DPPH, ABTS). Con el fin de determinar la diversidad genética dentro y entre poblaciones de C. Spinosa, se utilizaron marcadores moleculares del tipo AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism). Los extractos hidrófilos de C. spinosa se caracterizaron mediante cromatografía líquida de alta eficacia - ionización electrospray acoplada a espectrometría de masas. Se han identificado y cuantificado aproximadamente 24 compuestos con la técnica de HPLC-MS, y se han caracterizado varios derivados de kaempferol y quercetina, sobre la base de los espectros UV y con el modelo de fragmentación MSn. En el este estudio también se ha utilizado un modelo de nariz electrónica comercial (ES), EOS835 (Sacmi), para un estudio preliminar del perfil de aroma de las alcaparras. La técnica ES se ha comparado con una técnica de análisis clásicos tales como la cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS), utilizando como método de preparación de la muestra el espacio de cabeza de microextracción en fase sólida (HS-SPME) libre de disolventes. / Capparis spinosa és un arbust silvestre i conreat, que creix principalment a la conca mediterrània. Quan els botons de les flors encara no estan obertes reben el nom de tàperes i s'utilitzen en l'alimentació. Diversos estudis han demostrat la presència d'un nombre de components bioactius in C. spinosa i la seva activitat antioxidant, el que ha provocat un augment de la seva demanda i ha incrementat la importància econòmica de les tàperes. El propòsit d'aquest treball va ser avaluar el contingut de compostos bioactius en el capoll de la flor de C. spinosa conservat en salmorra, procedent de diferents zones de l'illa de Pantelleria (Itàlia). Els resultats s'expressen com a activitat antioxidant total. L'activitat antioxidant dels extractes hidròfils de tàperes es va avaluar mitjançant proves químiques (ORAC, DPPH, ABTS). Per tal de determinar la diversitat genètica dins i entre poblacions de C. Spinosa, es van utilitzar marcadors moleculars del tipus AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism). Els extractes hidròfils de C. spinosa es van caracteritzar mitjançant cromatografia líquida d'alta eficàcia - ionització electrospray acoblada a espectrometria de masses. S'han identificat i quantificat aproximadament 24 compostos amb la tècnica d'HPLC-MS, i s'han caracteritzat diversos derivats de kaempferol i quercetina, sobre la base dels espectres UV i amb el model de fragmentació MSN. Al aquest estudi també s'ha utilitzat un model de nas electrònic comercial (ES), EOS835 (Sacmi), per a un estudi preliminar del perfil d'aroma de les tàperes. La tècnica ÉS s'ha acoblat amb una tècnica d'anàlisi clàssics com ara la cromatografia de gasos acoblada a espectrometria de masses (GC-MS), utilitzant com a mètode de preparació de la mostra l'espai de cap de microextracció en fase sòlida (HS-SPME ) lliure de dissolvents. / Lo Bosco, F. (2017). Evaluation of antioxidant properties and assessment of genetic diversity of Capparis spinosa cultivated in Pantelleria Island [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/79872 / TESIS