Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2018-09-04T11:52:25Z No. of bitstreams: 1 annelisafarahsilvapaesleme.pdf: 3714457 bytes, checksum: 04f67b418a9032046d649343f4ef5330 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-09-04T13:18:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 annelisafarahsilvapaesleme.pdf: 3714457 bytes, checksum: 04f67b418a9032046d649343f4ef5330 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-04T13:18:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 annelisafarahsilvapaesleme.pdf: 3714457 bytes, checksum: 04f67b418a9032046d649343f4ef5330 (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Biofilmes associados a dispositivos médicos são responsáveis por 85% das infecções de corrente sanguínea relacionadas a catéteres (ICSRC). O objetivo deste trabalho foi testar duas formulações, como revestimento para catéteres venosos centrais (CVC), as quais tiveram a eficácia antimicrobiana e antiaderente avaliadas in vitro e a eficácia e biocompatibilidade, in vivo. A atividade antimicrobiana foi determinada por método turbidimétrico e a concentração inibitória mínima (CIM) foi estabelecida. A microscopia eletrônica de varredura (MEV) avaliou a propriedade antiaderente dos CVC revestidos com a formulação 1 (CVC-R1) e formulação 2 (CVC-R2), comparados aos não revestidos (CVC-NR). Implantes subcutâneos foram inseridos na área dorsal de ratos. O primeiro ensaio compreendeu análises hematológicas e microbiológicas (hemocultura e colonização das superfícies de CVC), a fim de avaliar a eficácia dos revestimentos. A biocompatibilidade foi avaliada no segundo ensaio pela observação das reações inflamatórias após 7 e 21 dias. Ambas formulações apresentaram atividade antimicrobiana frente a todas as cepas testadas. A desagregação do biofilme, com redução significativa da aderência microbiana, foi observada em ambos CVC revestidos. In vivo, foi observada maior eficácia antibiofilme de CVC-R2, com redução da colonização por Staphylococcus aureus ATCC 25923. As reações teciduais provocadas por CVC-R1 e CVC-R2 foram mais pronunciadas inicialmente, contudo, ao longo do experimento, se tornaram estatisticamente semelhantes às do CVC-NR. Ambas as formulações foram biocompatíveis, com maior velocidade de reparo tecidual no grupo CVC-R2. O uso de CVC- R1 e, especialmente de CVC-R2, pode diminuir a incidência de ICSRC. Acredita-se que CVC-R2 apresenta potencial para ser testado clinicamente. / Device-associated biofilms are responsible for 85% of catheter-related bloodstream infections (CRBSI). The aim of this study was investigate two formulations, as central venous catheters (CVC) coating, which were submitted to in vitro evaluation of antimicrobial and anti-adherent efficacy and in vivo evaluation of efficacy and biocompatibility. The antimicrobial activity was assessed by turbidimetric method and the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined. The scanning electron microscopy (SEM) was used to assess the anti-adherent property of CVC coated with formulation 1 (CVC-R1) and formulation 2 (CVC-R2), in comparison to uncoated CVC fragments (CVC-NR). Subcutaneous implants were inserted into the dorsal area of rats. The first assay consisted in hematological and microbiological analysis (hemoculture and CVC surfaces colonization) in order to evaluate the coatings effectiveness. The second assay evaluated the biocompatibility by the observation of inflammatory reactions after 7 and 21 days. Both formulations showed antimicrobial activity against all tested strains. The biofilm disaggregation, with reduction in microbial adherence, was noted in coated catheters. In vivo results showed greater antibiofilm efficacy of CVC-R2 since a reduction of Staphylococcus aureus ATCC 25923 colonization was observed. The tissue reactions of CVC-R1 and CVC-R2 groups were initially more pronounced, however, throughout the experiment, the histological parameters have become statistically similar those found in CVC-NR group. Both formulations were biocompatible and a higher speed of tissue repair in CVC-R2 group was noted. The use of CVC- R1, and especially of CVC-R2, may reduce the development of CRBSI, and thereby, CVC-R2 have potential to be clinically tested.

Objetivo: Avaliar se a adição de nanopartículas de prata ao cimento MTA branco irá melhorar a ação antimicrobiana sobre Enterococcus faecalis e prevenir a aderência deste microrganismo ao material. Método: Teste de contato direto utilizando corpos de prova dos materiais: MTA branco (n=10) grupo B, MTA cinza (n=10) grupo C, MTA branco + NPAg em pó a 1% em peso (n=10) grupo P, MTA branco + solução de NPAg 50ppm (n=10) grupo L, que foram mantidos a 35˚C por 72 horas na suspensão de Enterococcus faecalis em SBF (0.085 UA; 660nm). Alíquotas de 100μL foram tomadas da suspensão a cada 24 horas, realizadas as diluições seriadas e semeadas em triplicata em placa de Petri contendo meio Nutriente acrescido de azul de bromotimol a 0,001%. As placas foram incubadas a 35˚C por 48 horas e então realizadas as contagens de UFC. Ao final de 72 horas, corpos de prova em resina (n=10), que haviam sido mantidos na mesma suspensão juntamente com os demais grupos, tiveram a suspensão renovada, tendo sido ajustada para 0.1 UA (660nm). Permaneceram por mais 72 horas em estufa a 35˚C e então foram submetidos ao teste de aderência. Resultados: Para a comparação intergrupos considerando a variação do número de UFC em dois períodos houve diferença significante entre o grupo P e demais grupos no intervalo (T0-24h) e no intervalo (48-72h) para o grupo C comparado ao grupo L e P (Teste Anova teste t; α=0.01). Conclusões: Os cimentos MTA cinza e branco, com ou sem nanopartículas, apresentaram ação antimicrobiana sobre Enterococcus faecalis em todos os períodos do teste de contato direto; A adição da nanopartícula de prata em pó promoveu um efeito antimicrobiano em menor tempo sobre o Enterococcus faecalis, no teste de contato direto; O MTA branco, com nanopartículas não permitiu a aderência bacteriana ao final de 72 horas em contato com a suspensão bacteriana de Enterococcus faecalis. / Aim: To evaluate if the addition of silver nanoparticles to white MTA cement will improve the antimicrobial action of Enterococcus faecalis and prevent adherence of this microorganism to the material. Method: Direct contact test using samples of materials: white MTA (n=10) B group, gray MTA (n=10) C group, white MTA + NPAG powder to 1wt% (n=10) P group, white MTA + solution NPAG of 50ppm (n=10) L group were kept at 35˚C for 72 hours in Enterococcus faecalis in SBF(0.085AU; 660nm). Aliquots of the suspension were taken every 24 hours, serial dilutions carried out in triplicate and plated on Petri dishes containing nutrient medium plus bromothymol blue 0.001%. The plates were incubated at 35˚C for 48 hours and then the CFU counts performed. At the end of 72 hours resin specimens (n=10) which had been kept at the same suspension together with the remaining groups all had renewed suspension having been adjusted to 0.1AU (660nm). Lasted for over 72 hours in an oven at 35˚C and then were tested for adhesion. Results: Comparing between those groups consider the variation of numbers of CFU in two periods there was significant differente between the P group and other groups in the interval (T0-24h) and range (48-72h) for group C compared with group L and P (Anova test - t test; α=00:01). Conclusions: The gray and white MTA, with or without nanoparticles showed antimicrobial activity on Enterococcus faecalis at all periods of direct contact test; the silver nanoparticle powder addition promoted an antimicrobial effect in less time on the Enterococcus faecalis in test direct contact; white MTA with nanoparticles prevented bacterial adherence at the end of 72 hours in contact with the bacterial suspension of Enterococcus faecalis.