Com o objetivo de avaliar as imunidades humoral e celular de pacientes com endometriose, analisamos as concentrações das Imunoglobulinas ( A, G e M ) e das Interleucinas (1β, 10 e IFγ) no soro e no líquido peritonial. Também analisamos a sua associação com a presença de infertilidade, o nível de dor apresentado e a extensão da endometriose. Foram coletadas amostras de soro e líquido peritonial de 43 pacientes submetidas a laparoscopia, que foram divididas em 4 grupos : 20 pacientes inférteis com endometriose, 9 pacientes inférteis sem endometriose, 4 pacientes férteis com endometriose e 10 pacientes férteis sem endometriose. As concentrações de IL-1β, IL-10 e IFγ foram determinadas pela método de ELISA e as concentrações de IgA, IgG e IgM foram feitas pela técnica de imunodifusão radial. Nas pacientes com endometriose, as concentrações de IgA no soro e do líquido peritonial foram maiores nas pacientes inférteis do que nas férteis. A IgG estava mais elevada nas pacientes sem endometriose do que nas pacientes com endometriose, todas inférteis. Os níveis de interleucina 10 no líquido peritonial de pacientes com endometriose foram mais elevados nas pacientes inférteis do que nas férteis e Interferon γ apresentou concentrações mais baixas no soro e no líquido peritonial de pacientes inférteis sem endometriose. Não houve diferenças significativas entre os grupos para as concentrações de IgM e IL-1β, bem como nas correlações entre os níveis de citocinas e imunoglobulinas entre os diferentes grupos com os graus de endometriose e os níveis de dor nessas pacientes.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-01-05T15:05:48Z No. of bitstreams: 1 2016_JulianaLinsSolorzano.pdf: 1629251 bytes, checksum: 52ab3b9da67aa848917433cdedad980d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-02-03T19:15:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_JulianaLinsSolorzano.pdf: 1629251 bytes, checksum: 52ab3b9da67aa848917433cdedad980d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T19:15:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_JulianaLinsSolorzano.pdf: 1629251 bytes, checksum: 52ab3b9da67aa848917433cdedad980d (MD5) / A alergia alimentar ao leite de vaca e a intolerância à lactose vêm aumentando sua incidência na população. Neste contexto, as bebidas vegetais, utilizadas como substitutas do leite de vaca, ganham mercado e são cada vez mais utilizadas. Geralmente se utilizam leguminosas, cereais e oleaginosas, como a soja, o arroz e as castanhas. Porém, algumas vezes, esses componentes isolados não proporcionam uma fonte balanceada de todos os macronutrientes e, também, apresentam alta incidência de reações adversas aos alimentos. Frente à dificuldade de encontrar substitutos do leite de vaca que apresentem características nutricionais, sensoriais e tecnológicas semelhantes às deste produto e que apresentem baixa capacidade de desencadear reações adversas no organismo, destaca-se a possibilidade de utilização da quinoa (Chenopodium quinoa Willd), por conter aminoácidos essenciais, especialmente, lisina, triptofano, cisteína e leucina. Por esta razão, este trabalho objetivou o desenvolvimento de uma bebida à base de quinoa real, enfatizando a valorização dos seus atributos nutricionais, como alternativa ao leite de vaca. A bebida de quinoa foi preparada a partir de uma sequência de 16 experimentos, que visou a solubilizar as proteínas do grão da quinoa e obter uma bebida fluida. Para isso, foram realizados testes para determinação das proporções de grão e de água para cozimento (1:4, 1:5, 1:6, 1:7 e 1:8), com diferentes tratamentos enzimáticos, e diferentes concentrações salinas (0, 0,009, 0,03, 0,05, 0,051, 0,06 e 0,07 mol/L) e pH (4, 5 e 6), em delineamento composto centralizado rotacional (DCCR). Além disso, foram realizados testes para estudo da interferência das saponinas na solubilidade das proteínas, e testes de aceitabilidade com a bebida, natural e saborizada com baunilha e cacau. Os resultados demonstraram que a adição de cloreto de sódio para cozimento do grão auxilia na solubilidade das globulinas e melhora a aceitabilidade da bebida. Além disso, a partir dos estudos com diferentes pH. Notou-se que a acidificação, com teores mais ácidos – pH 4 e 5 – é essencial para otimização do teor proteico e melhora do paladar. Assim, tanto a concentração salina, quanto o pH são variáveis independentes, enquanto o teor proteico e a aceitação são variáveis dependentes. No teste de aceitação, observou-se que o emprego de aroma de baunilha melhorou a aceitabilidade do produto final. Os tratamentos com proporção de grão e solução salina de 1:7, com 0,03 mol/L e pH 4 e 5, foram escolhidos para ser realizada a composição centesimal. O valor nutricional final das bebidas apresentou teor proteico (1,21 e 1,39 g/100g MF, nos pH 4 e 5, respectivamente) elevado e teor de sódio reduzido (20,28 mg/100g), quando comparado aos das bebidas de arroz e aveia. Os testes de aceitabilidade apontaram boa aceitação da bebida por um grupo de pessoas que consome esse tipo de produto com frequência e que relataram apresentar algum tipo de alergia ou intolerância ao leite de vaca, ao de soja e a castanhas. Dessa forma, a bebida de quinoa apresenta-se como alternativa às bebidas vegetais de arroz, aveia e soja, por seu valor nutricional e baixa alergenicidade. Porém, até o momento, seu emprego como substituta do leite de vaca ainda é limitado, por causa de sua composição centesimal. / Food allergy to cow's milk and lactose intolerance is increasing its incidence in the population . In this context, vegetable drinks used as a substitute to cow's milk gain market and are increasingly used . These generally used leguminous, cereals and oilseeds , such as soybeans, rice and nuts . However, sometimes these components alone do not provide a balanced source of all macronutrients and also have a high incidence of adverse reactions to foods. Facing the difficulty of finding substitutes for cow's milk presenting nutritional , sensory characteristics , similar to the technology of this product and that has low capacity to trigger adverse reactions in the body , there is the possibility of using quinoa ( Chenopodium quinoa Willd ) by contain essential amino acids, especially lysine, tryptophan, cysteine and leucine. Thus, this study aimed to develop a beverage based on quinoa, emphasizing the value of its nutritional attributes as an alternative to cow's milk. The quinoa’s beverage was prepared from a sequence of 16 experiments that aimed to solubilize proteins grain quinoa and get a smooth drink. To this end, tests to determine the proportion of grain to water and cooking (1:4, 1:5, 1:6 , 1:7 and 1:8 ) with different enzyme treatments,, and different salt concentrations (0, 0.009 , 0.03 , 0.05 , 0.051 , 0.06 and 0.07 mol/L) and pH (4 , 5 and 6) , and the rotational central composite design (RCCD). In addition, tests to study the interference of saponins in the protein solubility, and acceptability tests with natural and flavored drink with vanilla and cocoa were performed. The results showed that the addition of sodium chloride to the grain baking aids in the solubility of the globulins and improves the acceptability of the beverage. Furthermore, studies with different pH noted that acidification with more acidic contents - pH 4 and 5 - is essential to optimize the protein content and improves taste. Thus, both the salt concentration and the pH are independent variables, whereas the protein content and acceptance are dependent variables. At the acceptance test, it was observed that the employment of improved vanilla flavor acceptability of the final product. Treatment with grain ratio of 1:7 and saline with 0.03 mol/L and pH 4 and 5 were chosen chemical composition to be performed. The final nutritional value of drinks showed protein content (1.21 and 1.39 g/100g MF, in pH 4 and 5, respectively) high and low sodium content (20.28 mg/100g) compared rice and drinks oats. The tests showed good acceptance of acceptability of the beverage by a group of people who use this type of product often and who reported having some kind of allergy or intolerance to cow's milk, soy and nuts. Thus, the quinoa’s beverage is presented as an alternative to vegetable drinks like rice, oat, and soybean against nutritional value and low allergenicity. But so far, his job as a substitute for cow's milk is still limited due to their chemical composition.

Orientador: Eduardo Bagagli / Banca: Antonio Zuliani / Banca: Silvana Andréia Molina Lima / Banca: Sandra de Moraes Gimenes Bosco / Banca: Edson Luiz Furtado / Resumo: O crescente interesse por micro-organismos alergênicos, a procura por novos reservatórios, além do interesse em fungos anemófilos, a grande frequência e diversidade, bem como a associação com doenças alérgicas, motivaram o estudo. A identificação e quantificação dos fungos em travesseiros poderão proporcionar avanços no diagnóstico e nas medidas ambientais. Avaliar ocorrência de fungos em travesseiros de crianças alérgicas, o ambiente e os aspectos envolvidos.Pacientes do Ambulatório de Imunologia e Alergia do Hospital das Clínicas de Botucatu preencheram questionário com dados epidemiológicos e clínicos e os travesseiros utilizados pelas crianças foram coletados, na residência, colocados em saco plástico estéril. Para o controle, foram adquiridos três travesseiros novos. Todos foram trazidos ao laboratório de Micologia do Instituto de Biociências de Botucatu - UNESP e foram aspirados, dentro da câmara de fluxo, com amostrador de ar MAS- 100NT® por cinco minutos em cada área- externa e interna. Utilizadas três placas para cada aspirado com três diferentes meios de cultura. As identificações foram feitas pelos métodos micológicos tradicionais e, para alguns, foram realizadas extrações de DNA e sequenciamento. Todos procedentes de diferentes regiões de Botucatu , 4,46% dos pacientes do Ambulatório de Alergia e Imunologia, que realizaram teste de sensibilização, eram positivo para os fungos testados; a maioria dos pacientes era sensibilizada a mais de um alérgeno, os mais frequentes foram: Dermatophagoides Farinae , Dermatophagoides Pteronyssinus , Blomia tropicalis e fungos; 80% dos pacientes tinham rinite e 50% também tinham asma; nenhum ambiente, avaliado no domicílio dos pacientes, revelou-se adequado para pacientes alérgicos; somente dois travesseiros tinham capa adequada e se encontravam visivelmente limpos; todos os travesseiros dos ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The increasing interest in allergenic microorganisms, the search for new reservoirs in addition to the interest in anemophilous fungi, their high frequency and diversity as well their association with allergic diseases motivated this study. Fungal identification and quantification in pillows can lead to advancement in diagnosis and in environmental measures. To evaluate the occurrence of fungi in pillows of allergic children, the environment and the issues involved. Patients from the Immunology and allergy outpatient unit of the Botucatu University Hospital completed a questionnaire with epidemiological and clinical data, and the pillows used by the children were collected from their homes and placed in a sterile plastic bag; three new pillows were acquired for control. All the pillows were brought to the Mycology Laboratory of the Biosciences Institute and aspirated within a flow chamber by an MAS-100NT® air sampler for five minutes on each area - external and internal. Three plates were used for each aspirate with three different culture media. Fungi were identified by conventional mycological methods, and DNA extraction and sequencing were also performed. All the participants were from different regions of Botucatu; 4.46% of the patients from the Immunology and Allergy Outpatient Unit who underwent the sensitization test were positive for the tested fungi; most of the patients were sensitized to more than one allergen, of which the most frequent were: Dermatophagoides Farinae, Dermatophagoides Pteronyssinus, Blomia tropicalis and fungi; 80% of the patients had rhinitis, and 50% also had asthma. None of the environments evaluated at the patients' homes showed to be adequate for allergic patients; only two pillows had an adequate cover and were visibly clean; all the patients' pillows were contaminated with fungi and, in some of them, the presence of gram positive bacteria ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Com o objetivo de avaliar as imunidades humoral e celular de pacientes com endometriose, analisamos as concentrações das Imunoglobulinas ( A, G e M ) e das Interleucinas (1β, 10 e IFγ) no soro e no líquido peritonial. Também analisamos a sua associação com a presença de infertilidade, o nível de dor apresentado e a extensão da endometriose. Foram coletadas amostras de soro e líquido peritonial de 43 pacientes submetidas a laparoscopia, que foram divididas em 4 grupos : 20 pacientes inférteis com endometriose, 9 pacientes inférteis sem endometriose, 4 pacientes férteis com endometriose e 10 pacientes férteis sem endometriose. As concentrações de IL-1β, IL-10 e IFγ foram determinadas pela método de ELISA e as concentrações de IgA, IgG e IgM foram feitas pela técnica de imunodifusão radial. Nas pacientes com endometriose, as concentrações de IgA no soro e do líquido peritonial foram maiores nas pacientes inférteis do que nas férteis. A IgG estava mais elevada nas pacientes sem endometriose do que nas pacientes com endometriose, todas inférteis. Os níveis de interleucina 10 no líquido peritonial de pacientes com endometriose foram mais elevados nas pacientes inférteis do que nas férteis e Interferon γ apresentou concentrações mais baixas no soro e no líquido peritonial de pacientes inférteis sem endometriose. Não houve diferenças significativas entre os grupos para as concentrações de IgM e IL-1β, bem como nas correlações entre os níveis de citocinas e imunoglobulinas entre os diferentes grupos com os graus de endometriose e os níveis de dor nessas pacientes.

Orientador: Ângelo Pires do Prado / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T09:23:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RaquelSoaresBinottide_D.pdf: 2064191 bytes, checksum: 947400e01f2da61b9ec537f4350e8793 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Ácaros são os principais agentes relacionados ao quadro de sensibilização respiratória de indivíduos atópicos no Brasil, sendo responsáveis por crises de asma, rinite e conjuntivite alérgicas, dentre outros. São encontrados nas residências principalmente em colchões, sofás e tapetes, onde alguns métodos podem ser utilizados para controlar sua infestação. O objetivo desse estudo foi o de avaliar a eficácia acaricida in vitro do produto a base de óleo essencial das plantas Lavandula officinalis e Mentha piperita (Labiatae) contra ácaros Dermatophagoides pteronyssinus e Dermatophagoides farinae (Pyroglyphidae). O efeito acaricide do Produto-Teste foi comparado com vários outros produtos químicos em estudos in vitro e de intervenção. O estudo in vitro foi realizado utilizando culturas acarinas, nas quais os produtos foram diretamente aplicados e em placas de Petri onde um número de ácaros foram colocados em contato com as substâncias testadas. A mortalidade acarina foi avaliada e utilizada para a comparação. O estudo de intervenção foi realizado em 30 residências de pacientes atópicos com asma e/ou rinite. A eficácia do Produto-Teste foi comparada com um produto acaricida comercializado no país através da quantificação de alérgenos acarinos Der p1 e Der f1 por ELISA e pela contagem do número de corpos acarinos nas amostras de poeira coletadas de colchões, sofás e tapetes tratados com um dos produtos pelo período de 6 meses. As implicações clínicas como sintomas alérgicos e segurança aos humanos dos produtos também foram avaliados. O estudo in vitro demonstrou que o efeito acaricida do Produto-Teste foi similar aquele observado com os produtos químicos. No estudo de intervenção, houve uma diminuição significativa nas concentrações dos alérgenos Der p1 e Der f1 nos 3 substratos tratados. Essa diminuição foi semelhante aquela observada com o produto comercial utilizado como controle. Apesar dos resultados, o número de corpos acarinos nas amostras de poeira dos 3 substratos não demonstrou alteração significativa após os 6 meses de tratamento para ambos os produtos testados. Além disso, os produtos foram considerados seguros para uso humano, desde que não foram observados efeitos adversos ou sinais de irritação significativos, embora fosse observado que alguns patientes atópicos presentes no recinto quando da aplicação do produto reclamaram de sintomas respiratórios. Os resultados demonstram que o acaricida contendo óleos essenciais de Lavandula officinalis e Mentha piperita (Labiatae) apresenta significativo efeito in vitro contra ácaros Dermatophagoides pteronyssinus e Dermatophagoides farinae (Pyroglyphidae) e causa uma diminuição significativa nos níveis de Der p1 e Der f1 na poeira de colchões, sofás e tapetes tratados. O produto foi considerado seguro para uso por humanos. / Abstract: House dust mites (HDM) are the greatest source of indoor allergens in Brazil, being closely implicated in respiratory allergic diseases such as asthma and rhinitis. In dwellings, HDM allergens are mainly found on mattresses, sofas and rug surfaces, where several methods such as mattress-covers and acaricides, can be used to control indoor mite infestation. The aim of this study was to evaluate the acaricide effect of an herbal product containing essential oils from Lavandula officinalis and Mentha piperita (Labiatae) against mites Dermatophagoides pteronyssinus and Dermatophagoides farinae (Pyroglyphidae). The acaricide effect of the Test-product was compared with several other chemical products in in vitro and clinical studies. The in vitro study was conducted using mite cultures, in which the chemical products were directly applied and in Petri dishes where a number of mites were placed in contact with the chemicals tested. Mite mortality was counted and used as comparison. The clinical study was conducted in 30 dwellings of atopic patients with asthma and/or rhinitis. The efficacy of the Test-product was compared with a Brazilian commercial acaricide and was done by ELISA quantification of the mite allergens Der p1 and Der f1 and by the number of body mites on dust collected from a mattress, sofa and rug treated with one of the products for 6 months. Clinical implications in allergic symptoms and the toxicity of the products for humans were also evaluated. The in vitro study showed that the acaricide effect of the Test-product was similar to that observed with the chemical products. In the clinical study, a significant decrease in Der p1 and Der f1 allergens concentrations were observed in all 3 treated sources. This decrease was similar to that observed with the commercial product used as control. Despite these results, the number of mite bodies on dust from all 3 sources presented no significant difference after the 6- months of treatment for both Test- and Control-products. Also, both products were considered safe for human use, since no significant adverse effects or toxicity signals were observed, although, atopic patients who were present in the room when the product was applied complained of respiratory symptoms. Our findings showed that the acaricide containing essential oils from Lavandula officinalis and Mentha piperita (Labiatae) has a significant in vitro effect against mites Dermatophagoides pteronyssinus and Dermatophagoides farinae (Pyroglyphidae) and caused a significant decrease in Der p1 and Der f1 levels on dust from treated mattresses, sofas and rugs. The product was considered safe for human use. / Doutorado / Saude da Criança e do Adolescente / Doutor em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador: Heloísa Helena de Araújo Ferreira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T04:19:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pelaquini_EdmarHenrique_M.pdf: 18418086 bytes, checksum: fa003dada60c0eb4043e3908a67d256b (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito do tratamento com 1400W, inibidor seletivo da NOS induzível (iNOS), na adesão in vitro a VCAM-1 e ICAM-1 e na expressão das selectinas VLA-4, Mac-1 e LFA-1 nos eosinófilos da medula óssea e do sangue periférico. A produção das citocinas sintetizadas pelos linfócitos T, Th1 e Th2, também foi avaliada nos homogenatos dos pulmões. Verificamos que o conteúdo de eosinófilos estava aumentado nos pulmões dos camundongos não tratados (controles) a partir de 48h após o desafio com OVA. O tratamento dos camundongos alérgicos com 1400W causou redução no infiltrado de eosinófilos somente em 48h. O tratamento com 1400W aumentou a adesão in vitro dos eosinófilos obtidos da medula óssea a ICAM-1 em 24h-48h, enquanto que a adesividade a VCAM-1 estava diminuída em 48h. Nos eosinófilos do sangue, o 1400W diminuiu a adesão a VCAM-1 em 24h-48h. Na análise por citometria de fluxo não foram observadas alterações na expressão do CD11a sobre os eosinófilos da medula óssea ou do sangue periférico obtidos de ambos os grupos. Um aumento da expressão do CD11b nos eosinófilos da medula óssea dos controles foi verificada em 48h, enquanto que, neste período, CD11b e CD49d estavam diminuídas nos eosinófilos do sangue. O tratamento com 1400W aumentou a expressão do CD11b dos eosinófilos da medula óssea em 24h e 48h e provocou efeitos contrários nas células do sangue ao diminuir sua expressão em 24h e aumentar em 48h. Do mesmo modo, efeitos inversos do 1400W sobre a CD49d foram detectados no sangue quando reduziu sua expressão em 24h, aumentando-a em 48h. O desafio com OVA provocou em 24h aumento nos níveis de todas citocinas nos pulmões dos controles. Não foram observadas outras variações significativas nos níveis de IFN-y e TNF-a em nenhum dos grupos. A eotaxina mostrou pico de produção em 48h-72 horas nos animais controles, quando o tratamento com 1400W reduziu sua síntese nos pulmões. A IL-4, IL-5, IL-10 e IL-13 estavam aumentadas nos camundongos controles em 24h, sendo que picos de IL-4 e IL-13 foram detectados em 24h e 48h, respectivamente. Níveis elevados de IL-5 foram observados em 24-48h. O tratamento com 1400W reduziu os níveis de IL-4 no pulmão em 24h-48h após o desafio com OVA, assim como os de IL-5 em 48h e de IL-13 em 48h-72h. Somente em 72h o 1400W diminuiu o nível da IL-10 no pulmão. Em conclusão, nossos resultados sugerem que o envolvimento do NO na modulação da secreção de citocinas derivadas dos linfócitos Th2 e da eotaxina nos pulmões, bem como na expressão das moléculas de adesão nos eosinófilos da medula óssea e do sangue periférico, pode influenciar a migração celular para os pulmões dos camundongos alérgicos. O NO produz um efeito temporal na expressão/função do Mac-1, sugerindo ser esta a principal molécula de adesão envolvida no efluxo dos eosinófilos da medula óssea em 24h, enquanto o Mac-1 e o VLA-4 estão envolvidos na mobilização dos eosinófilos do sangue periférico para o pulmão em 48h após o desafio antigênico. / Abstract: The aim of this study was investigated the effectiveness of treatment with 1400W, a selective inhibitor of inducible NOS (iNOS) in in vitro adhesion to VCAM-1 and ICAM-1 and VLA-4, Mac-1 and LFA-1 expression in eosinophils from bone marrow and peripheral blood. The cytokines synthesized by T lymphocytes, Th1 and Th2 cells, was evaluated in lungs homogenates. As a result we found that the eosinophils were increased from 48h after OVA challenge in lungs of untreated mice (controls). Treatment of allergic mice with 1400W caused a reduction in eosinophils infiltration only after 48h. 1400W increased between 24-48h the in vitro adhesion of bone marrow eosinophils to ICAM-1, whereas adhesion to VCAM-1 was decreased after 48h. In the blood eosinophils, 1400W decreased adhesion to VCAM-1 between 24-48h. Flow cytometric analysis showed no significant changes in the expression of CD11a on bone marrow and peripheral blood eosinophils obtained from both groups. An increased expression of CD11b on bone marrow eosinophils of controls was observed after 48h, while on that period, CD11b and CD49d expression were reduced in blood eosinophils. In the bone marrow eosinophils, treatment with 1400W increased CD11b expression in both 24h and 48h, but in the blood cells caused adverse effects by decreasing expression after 24h and increase after 48h. Similarly, the opposite 1400W effect was detected in the blood cells when CD49d expression had been reduced after 24h and increased after 48h. The OVA challenge resulted in increasing the levels of all cytokines in the control lungs after 24h. There were no other significant variations in the IFN-y and TNF-a levels in both groups. In control animals, the eotaxin showed peak production between 48-72h, while 1400W treatment reduced its synthesis in the lungs. IL-4, IL-5, IL-10 and IL-13 were increased in control mice after 24 hours, with peaks of IL-4 and IL-13 were detected after 24h and 48h, respectively. Elevated levels of IL-5 were observed between 24-48h. Treatment with 1400W reduced the levels of IL-4 in lung between 24h-48h after OVA challenge, as well as IL-5 in 48 hours and IL-13 in 48h-72h. Only after 72h 1400W decreased the level of IL-10 in the lung. In conclusion, our results suggest that the involvement of NO in modulating the secretion of cytokines derived from Th2 lymphocytes and eotaxin in the lungs, as well as in the adhesion molecules expression in bone marrow and peripheral blood eosinophils may influence cell migration to the lungs of allergic mice. NO produces a temporal effect on the expression / function of Mac-1, suggesting that the main adhesion molecule involved in the efflux of bone marrow eosinophils after 24h, while Mac-1 and VLA-4 were involved in the mobilization of peripheral blood eosinophils to the lungs in 48 h after antigen challenge. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Celso Henrique de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T06:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_DanielaReginados_M.pdf: 551270 bytes, checksum: fa93b2a23595a4489633cef3a081bb1b (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: No Brasil, pacientes atópicos com rinite alérgica e/ou asma brônquica apresentam sensibilidade a aeroalérgenos, sobretudo ácaros. Outras potenciais fontes de alérgenos como a traça-de-livro ainda necessitam ser confirmadas como alergênicas e relacionadas a doenças alérgicas respiratórias. O objetivo do estudo foi avaliar a sensibilidade imediata de pacientes atópicos através do teste cutâneo de puntura, a extrato padronizado em Unidades Biológicas de corpo inteiro da traça-de-livro Lepisma saccharina. A padronização do extrato bruto de corpo inteiro de L. saccharina em Unidades Biológicas (UB) foi realizada através da regressão linear dos dados do teste de puntura obtidos em pacientes atópicos e voluntários sadios. O teste cutâneo foi realizado com extratos comerciais de ácaros, epitélios de cão e gato, baratas, poeira domiciliar e os extratos-testes de L. saccharina nas concentrações de 5.000, 10.000 e 25.000 PNU/mL. Após a padronização do extrato da traça, foram realizados novos testes de puntura em novos voluntários para se avaliar a sensibilidade imediata ao extrato na concentração de 100 UB/mL. Na fase de padronização do extrato, participaram 32 atópicos e 11 indivíduos sadios. O tamanho da pápula encontrado equivalente à histamina foi de 29.336 PNU/mL. Na segunda fase, participaram 21 atópicos e 16 voluntários sadios. Houve ainda uma significativa maior positividade aos extratos de D. pteronyssinus, B. tropicalis e Tyrophagus putrescentiae e poeira intradomiciliar no grupo de atópicos que no grupo controle. Encontramos sensibilidade ao extrato padronizado da traça L. saccharina (100 UB/mL) de 14,3% no grupo de paciente atópicos e 8,1% de prevalência global. A sensibilidade ao extrato padronizado de L. saccharina em UB foi considerada leve nos grupo / Abstract: In Brazil, allergic patients with allergic rhinitis and/or asthma present sensibility for several aeroallergens mainly from house dust mites. Other potential sources of allergens like silverfish remain to be investigated as really allergenic and firmly related to respiratory allergic diseases. The aim of this study was investigate by skin prick test the immediate sensitivity to a biological unit-standardized extract of silverfish Lepisma saccharina in allergic patients. The standardization of the crude extract of L. saccharina whole bodies by biological units (BU) was performed with linear regression of skin prick test data from allergic patients and healthy volunteers. Skin prick tests were performed using commercial extracts of mites, cat and dog dander, cockroaches, house dust and the crude-extracts of L. saccharina at 5.000, 10.000 and 25.000 PNU/mL. After standardization, the silverfish extract at 100 BU/mL was prick-tested to evaluate silverfish sensitivity in allergic patients. Thirty-two allergic patients and 11 healthy volunteers were enrolled in silverfish extract standardization test. The histamine equivalent papule area of silverfish extract was calculated at the concentration of 29.336 PNU/mL. To investigate the sensitivity of silverfish standardized extract another 21 allergic patients and 16 healthy volunteers were studied. There were significant higher skin test positive results for D. pteronyssinus, B. tropicalis, Tyrophagus putrescentiae and house dust extracts in allergic patients than controls. The sensitivity of silverfish L. saccharina (100 BU/mL) standardized extract was 14.3% in allergic patients with 8.1% of general prevalence. The sensibility to standardized extract of silverfish in BU was considerate light in allergic patients / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trevizan_Giovanna_M.pdf: 992041 bytes, checksum: 788bad7f2b885488c459d8cc22f66468 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: As reações alérgicas à ferroada de inseto resultam de resposta exacerbada do sistema imune, com produção de elevados níveis de anticorpos IgE alérgeno-específicos e padrão de citocinas Th2. A diferenciação de linfócitos Th2 e a secreção de citocinas por estas células são reguladas pelo fator de transcrição GATA-3. A ligação da IgE ao seu receptor de alta afinidade (Fc?RI) em mastócitos e basófilos, promove a liberação de mediadores inflamatórios. Muitos estudos demonstram a eficácia da imunoterapia específica na dessensibilização e no desenvolvimento de tolerância em indivíduos com quadros graves de hipersensibilidade à ferroada de insetos, sobretudo da classe Hymenoptera. A histamina é o principal mediador liberado durante a resposta alérgica; através da ativação de diferentes receptores (HR1, HR2, HR3 ou HR4) as células do sistema imune podem ser tanto inibidas como estimuladas. Via HR1, a histamina estimula principalmente linfócitos Th1, enquanto inibe linfócitos Th2 via HR2. O receptor 4 desempenha papel central na diferenciação de linfócitos Th2 e também é capaz de modular a produção de citocinas. A liberação de histamina é regulada por fatores de liberação de histamina (HRF), sendo que os HRF dependentes de IgE induzem a liberação de histamina na fase tardia das reações alérgicas. Considerando-se todas essas informações, o objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos modulatórios da imunoterapia na expressão gênica dos receptores de histamina (HR1, HR2 e HR4), fatores de liberação de histamina (HRF) e cadeia ? do receptor de alta afinidade de IgE, além da expressão protéica do fator de transcrição GATA-3, em células linfomononucleares de pacientes alérgicos ao veneno de abelha. As células foram isoladas de pacientes submetidos à imunoterapia, em diferentes períodos do tratamento (Pré, 1, 3, 6, 12, 18 e 24 meses), após injeção subcutânea, e submetidas à cultura por 72 horas, com estimulo de veneno de abelha a 1 ng/ml. Indivíduos não alérgicos foram estudados como grupo controle. Com objetivo de avaliar a expressão gênica foram realizadas extração de RNA, seguida de síntese de cDNA e PCR, para avaliação da expressão protéica, utilizou-se a técnica de imunofluorescência. A expressão gênica de HR1 e HR4, assim como de HRF e da cadeia gama do Fc?RI foi significativamente reduzida ao final do período analisado. O receptor 2 de histamina não apresentou alterações bem definidas após 24 meses de imunoterapia. O fator de transcrição GATA-3 apresentou diminuição significativa na expressão a nível protéico. Nossos resultados demonstram que a imunoterapia específica ao veneno de abelha foi capaz de modular elementos envolvidos na resposta imune / Abstract: Allergic disease is an abnormal response from the immune system, with high levels of allergen specific IgE antibodies and Th2 pattern of cytokines. Development of Th2 cells and the production of cytokines are regulated by transcription factor GATA-3. Binding of IgE to its high affinity receptor (Fc?RI) in mast cells and basophils induces inflammatory mediators' release. Many studies have shown the efficacy of specific immunotherapy. Histamine is an important mediator in allergy, through activation of distinct histamine receptors (HR1, HR2, HR3 or HR4) in the immune system; cells can be either stimulated or inhibited. Histamine can stimulate, by HR1 receptor, especially Th1 response, and inhibit particularly Th2 cells through HR2 activation. HR4 plays a central role in Th2 polarization and also modulates cytokine profile production. IgE-dependent histamine releasing factors (IgE-HRF) induce histamine release in late phase reaction. In regard of this information, the aim of this study was to evaluate the modulating effects of specific immunotherapy in gene expression of histamine receptors (HR1, HR2 and HR4), histamine releasing factor (HRF), in patients with allergy and the gama chain of Fc?RI, and also GATA-3 protein levels. Bee venom allergic subjects underwent specific bee venom immunotherapy (VIT) in different stages of treatment (Pre, 3, 6, 12, 18 and 24 months) were studied. Peripheral blood mononuclear cells were isolated after subcutaneous venom injection and submitted to culture for 24, 48 and 72 hours stimulated with 1ng/ml of bee venom. In parallel healthy subjects were studied as well. Total RNA extraction, followed by cDNA synthesis and PCR were used to evaluate gene expression; GATA-3 protein expression was analyzed by immunofluorescence assay. Data from all time of cell culture - 24, 48 and 72 hours - were grouped and analyzed. Gene expression from HR1 and HR4 and also HRF and ? chain of Fc?RI were significantly reduced at the end of 24 months of immunotherapy. Histamine receptor 2 didn't show well established alterations. For transcription factor GATA-3 significant decrease at protein level was observed. Together, our results indicate that bee venom specific immunotherapy was able to modulate some of the elements involved in the immune response / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Dermatite atópica (DA) é uma dermatose inflamatória, de caráter crônico e recidivante, com alta prevalência mundial, caracterizada por eczema localizado ou generalizado, xerose cutânea e prurido intenso, mais comum em crianças, porém podendo acometer adultos, muitas vezes prejudicando de forma considerável a qualidade de vida dos pacientes e seus familiares. O diagnóstico de alergia inclui testes in vivo (testes cutâneos de hipersensibilidade imediata ou prick test) e testes in vitro com mensuração de anticorpos IgE no sangue. Está disponível método para detecção de alergia baseado no princípio de diagnóstico por componentes, o ImmunoCAP Immunosorbent Allergen CHIP (ImmunoCAP-ISAC) que marca a transição para o diagnóstico molecular de alergia. No presente estudo, tivemos por objetivos determinar o perfil de resposta IgE a alérgenos purificados, naturais ou recombinantes, em pacientes adultos com DA e comparar o valor do diagnóstico de alergia por componentes com métodos diagnósticos existentes. Foram selecionados 39 pacientes adultos com DA dentre aqueles Atendidos nos Ambulatórios de Alergia e Dermatologia do HCFMRP-USP. A idade dos pacientes variou de 14-66 anos (média ± DP 34,3 ± 2.1 anos), 64% mulheres. O tempo médio de doença foi de 16 anos. SCORAD médio foi de 36,6 (2-90). Média geométrica (MG) de IgE total foi 1,963 kU/L (24-63,000 kU/L). Alérgenos de ácaros foram dominantes, com sensibilização a Der p1 e a Der f1, Der p2 e Der f2 em 82% e 85% dos pacientes, com MG 27,6; 50; 39,2; 45,4 ISU-E respectivamente, seguidos de gato (38%), cachorro (36%) e pólen de gramíneas (36%). IgE para alérgenos de baratas, fungos, pólen de árvores, látex e veneno de insetos foi encontrada em menos de 20% dos pacientes em baixos níveis. Sensibilização para castanhas (33%) e camarão (31%) foram os alérgenos mais prevalentes entre os alimentos, enquanto a reatividade IgE para leite e ovo esteve presente em 10% ou menos dos pacientes, com baixos níveis de anticorpos IgE na maioria dos casos. Apenas 6 pacientes (15,4%) apresentaram IgE para o panalérgeno tropomiosina, e 3/39 (7,7%) foram negativos para todos os 112 componentes de alérgenos testados no ImmunoCAP-ISAC, com níveis de IgE total de 24, 38,7 e 156 kU/L. Concluímos que o perfil de sensibilização IgE entre os pacientes adultos com dermatite atópica difere daquele entre os pacientes com alergiarespiratória, apresentando menos sensibilização para baratas e para o panalérgeno tropomiosina, e difere ainda do perfil presente em crianças com DA, com predomínio de sensibilização IgE a castanhas e camarão, e baixa taxa de sensibilização a alérgenos de leite de vaca e ovo. / Atopic dermatitis (AD) is an inflammatory, chronic, relapsing dermatosis with a high global prevalence characterized by localized or generalized eczema, cutaneous xerosis and intense pruritus, more common in children, but it can affect adults, often causing considerable damage to the quality of life of patients and their families. The diagnosis of allergy includes in vivo tests (skin tests of immediate hypersensitivity or prick test) and in vitro tests with measurement of IgE antibodies in the blood. An allergy detection method based on the principle of component diagnosis is available, ImmunoCAP Immunosorbent Allergen CHIP (ImmunoCAP-ISAC), and marks the transition to the molecular diagnosis of allergy. In the present study, we aimed to determine the IgE response profile to purified, natural or recombinant allergens in adult patients with AD and to compare the value of component allergy diagnosis with existing diagnostic methods. Thirty-nine adult patients with AD were selected from among those attending the Outpatient Clinic of Allergy and Dermatology at HCFMRP-USP. The age of the patients ranged from 14-66 years (mean ± SD 34,3 ± 2.1 years), 64% women. The mean duration of illness was 16 years. SCORAD mean was 36,6 (2- 90). Geometric mean (GM) of total IgE was 1,963 kU / L (24-63,000 kU / L). Mite allergens were dominant, with sensitization to Der p1 and Der f1, Der p2 and Der f2 in 82% and 85% of the patients, with GM 27,6; 50; 39.2; 45.4 ISU-E respectively, followed by cat (38%), dog (36%) and grass pollen (36%). IgE for cockroach, fungus, tree pollen, latex and insect venom allergens was found in less than 20% of patients at low levels. Sensitization to nuts (33%) and shrimp (31%) were the most prevalent allergens among foods, while IgE reactivity to milk and egg was present in 10% or less of the patients, with low levels of IgE antibodies in most cases. Only 6 patients (15.4%) presented IgE for the pan-allergen tropomyosin, and 3/39 (7.7%) were negative for all 112 allergen components tested on ImmunoCAP-ISAC, with total IgE levels of 24; 38,7 and 156 kU / L. We concluded that the IgE sensitization profile among adult patients with atopic dermatitis differs from that among patients with respiratory allergy, presenting less sensitization to cockroaches and to the pan-allergen tropomyosin, andalso differs from the profile present in children with AD, with a predominance of IgE sensitization to nuts and shrimp, and low sensitization rate to cow\'s milk and egg allergens.

Exposição a alérgenos de poeira doméstica é fator de risco para o desenvolvimento de doenças alérgicas. Os objetivos foram estudar a resposta inflamatória pulmonar alérgica induzida pela sensibilização i.n. ou s.c. ao extrato do ácaro Blomia tropicalis (Bt) e avaliar a participação da molécula adaptadora Myd88. Animais C57BL/6 sensibilizados com solução de extrato de Bt adsorvido ao alum exibiram altos níveis de IgE e aumento do número de eosinófilos. Contudo, animais sensibilizados apenas com Bt não apresentaram aumento dos níveis de IgE. Assim, animais C57BL/6 ou MyD88KO foram sensibilizados com uma dose maior do extrato de Bt (i.n. ou s.c.) e desafiados i.n. As sensibilizações produziram aumento do número células no BAL e níveis de IgE. Os parâmetros celulares em animais MyD88KO se mostraram inibidos, contudo, os níveis de IgE foram similares aos dos animais WT. Concluindo, o desenvolvimento de inflamação pulmonar alérgica não requer alum e sensibilização i.n. ou s.c. induz o recrutamento de células, dependente de MyD88 e produção de IgE, independe de MyD88. / Exposure to allergens from house dust is a risk factor for the development of allergic diseases. The objectives were to study the allergic lung inflammatory response induced by sensitization i.n. or s.c. to Blomia tropicalis (Bt) extract and determine the role of MyD88 adapter molecule. C57BL/6 mice sensitized with Bt extract solution adsorbed to alum exhibited high levels of IgE and increased numbers of eosinophils. However, animals sensitized only with Bt did not show increased levels of IgE. Thus, C57BL/6 or MyD88KO mice were sensitized with a higher dose of Bt extract (i.n. or s.c.) and challenged i.n. The sensitization produced increased cell number in BAL and IgE serum levels. Cell parameters were inhibited in MyD88KO mice, however, IgE levels were similar to those of WT mice. In conclusion, the development of allergic lung inflammation does not require alum, i.n. or s.c. sensitization induces cell recruitment dependent of MyD88 adaptor molecule and IgE production is independent of MyD88.