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Determinación de Acido Micofenólico en Pacientes Pediátricos Trasplantados RenalesGatica Pulgar, Marcelo Rodrigo January 2008 (has links)
Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El presente trabajo ha sido orientado al estudio y formulación de un protocolo para la determinación de los niveles plasmáticos de ácido micofenólico en pacientes pediátricos trasplantados renales. La cuantificación del ácido micofenólico fue hecha en el Servicio del Laboratorio Clínico del Hospital Luis Calvo Mackenna, a través de la técnica de EMIT (Enzime Multiplied Immunoassay Technique), utilizando como referencia la determinación por HPLC (High Performance Liquid Chromatography) realizada en el Laboratorio de Farmacocinética de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile.
El criterio adoptado en relación a las condiciones de toma de muestra para el fármaco se basó en la revisión bibliográfica de las características farmacocinéticas y formas de administración del fármaco y se estableció en consenso con todo el equipo de salud, que comprende al cuerpo Médico, Químico Farmacéutico y Enfermeras.
Este estudio constituye una herramienta para crear un Servicio de Farmacocinética Clínica, que proporcione ayuda e información a la comunidad del hospital, con el fin de obtener un uso racional de los niveles plasmáticos y mejorar la relación costo/beneficio de las mediciones de las concentraciones plasmáticas de medicamentos. Para que la determinación de niveles de ácido micofenólico en el laboratorio de Bioquímica Central del Hospital tuviera validez, se revisaron las fichas clínicas de los pacientes y se diseñaron fichas adecuadas para un servicio de Farmacocinética clínica que recogerán datos sobre el paciente, cumplimiento y adherencia de la terapia, hora de última toma de dosis, hora de toma de muestra, entre otros
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Validación de metodología análisis de identificación y valoración de una forma farmacéutica oral sólida de liberación convencionalIribarne Albornoz, Ariel Enrique January 2016 (has links)
Unidad de Práctica Prolongada para optar al título de Químico Farmacéutico / En el siguiente informe se detalla el proceso de validación prospectivo de una metodología de análisis no farmacopeica de identificación y valoración por medio de la técnica de cromatografía liquida de alta eficiencia (HPLC) de un principio activo en una forma farmacéutica oral, sólida y de liberación inmediata fabricada por Laboratorio Synthon Chile ltda.
Con el fin del cumplimiento de las normas GMP y exigencias de las diferentes instituciones sanitarias nacionales e internacionales (ISP, FDA, EMA, OMS), para el proceso de validación se generó un protocolo en el cual se detallaron los diferentes parámetros de desempeño a ser estudiados de acuerdo al propósito de la metodología y siguiendo las recomendaciones y los criterios de aceptación establecidos en diferentes guías (FDA, OMS, ICH).
Los resultados obtenidos fueron presentados en un reporte de validación en acuerdo con las exigencias GMP. Estos resultados demostraron el cumplimiento con los criterios de aceptación y por lo tanto demostraron que la metodología empleada cumplió con el propósito para el cual está destinada y por consecuencia se encuentra formalmente validada.
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Desarrollo de una metodología analítica de cuantificación de Ertapenem total en plasma humano mediante HPLC para ser aplicada en pacientes geriátricos hospitalizados en unidades no críticas del Hospital Clínico de la Universidad de ChileSan Martín Díaz, Daniela Andrea January 2017 (has links)
Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El perfil farmacocinético de los adultos mayores sufre una serie de alteraciones debido a que experimentan cambios fisiológicos asociados al envejecimiento capaces de modificar la estructura y funcionamiento de los diferentes sistemas de su organismo. Dichos cambios, sumados a las co-morbilidades que pueden presentar estos pacientes al ser hospitalizados en unidades no críticas, condicionan la respuesta y éxito de las terapias farmacológicas con antimicrobianos, dado que pueden afectar el logro de un índice PK/PD óptimo.
El objetivo de este estudio fue desarrollar y optimizar una metodología analítica mediante HPLC acoplado a un detector UV/Vis para cuantificar ertapenem en plasma humano, para posteriormente ser aplicado en la caracterización del perfil farmacocinético de este antibiótico en adultos mayores hospitalizados en unidades no críticas, a los que, además, se les debió determinar su composición corporal.
Para llevar a cabo lo anterior se reclutó a pacientes hospitalizados en la Unidad Geriátrica de Agudos del Hospital Clínico de la Universidad de Chile, a los que se les realizaron mediciones antropométricas y se les extrajeron muestras de sangre que fueron almacenadas para su posterior análisis. Paralelamente se trabajó evaluando diferentes condiciones experimentales que influyeran en el desarrollo de la metodología analítica y que permitieran validarla según parámetros internacionales.
La metodología analítica desarrollada utilizó una columna Waters Spherisorb® y una fase móvil ajustada a pH 2,4 compuesta por el 70% de buffer fosfato 10 mM y 30% de acetonitrilo. Además, la velocidad de flujo fue de 0,9 ml/min y la longitud de onda utilizada fue de 310 nm. A la metodología se le realizaron diferentes ensayos para validarla, pero no cumplió con el parámetro de exactitud y precisión inter-día, por lo que se descartó.
Por otro lado, de los 3 pacientes reclutados, 2 correspondieron a hombres y la edad promedio de la muestra fue de 82,3 ± 8,0 años. El peso real se pudo determinar en solo 2 pacientes y dio un promedio de 59,2 ± 15,4 kg. A su vez, el peso y la estatura se estimaron con diferentes métodos, arrojando valores de 54,5 ± 8,1 kg y 49,8 ± 3,8 kg y de 1,65 ± 0,1 m y 1,52 ± 0,1 m, respectivamente. El IMC clasificó a la muestra como normal o con déficit de peso, dependiendo de los datos utilizados. En relación a la composición corporal y estado nutricional de cada paciente, se pudo determinar que ID#1 estaba en riesgo de desnutrición/desnutrición, ID#2 se hallaba normal e ID#3 se encontraba en desnutrición/normal / The pharmacokinetic profile of older adults suffers a series of alterations because they experience physiological changes associated with aging, capable of modifying the structure and functioning of the different systems of their organism. These changes, added to the co-morbidities that these patients can present when hospitalized in non-critical units, condition the response and success of pharmacological therapies with antimicrobials, since they can affect the achievement of an optimal PK/PD index.
The objective of this study was to develop and optimize an analytical methodology using HPLC coupled to a UV/Vis detector to quantify ertapenem in human plasma, to be subsequently applied in the characterization of the pharmacokinetic profile of this antibiotic in older adults hospitalized in non-critical units, to which, in addition, their body composition should have been determined.
To carry out the above, hospitalized patients were recruited in the Geriatric Acute Unit of the Hospital Clínico de la Universidad de Chile, who underwent anthropometric measurements and blood samples were taken and stored for later analysis. At the same time, we worked evaluating different experimental conditions that influenced the development of the analytical methodology and that allowed to validate it according to international parameters.
The developed analytical methodology used a Waters Spherisorb® column and a mobile phase adjusted to pH 2.4 composed of 70% of 10 mM phosphate buffer and 30% of acetonitrile. In addition, the flow rate was 0.9 ml/min and the wavelength used was 310 nm. The methodology was subjected to different tests to validate it, but it did not comply with the parameter of accuracy and precision inter-day, so it was discarded.
On the other hand, of the 3 patients recruited, 2 corresponded to men and the average age of the sample was 82.3 ± 8.0 years. Actual weight could be determined in only 2 patients and averaged 59.2 ± 15.4 kg. In turn, weight and height were estimated using different methods, yielding values of 54.5 ± 8.1 kg and 49.8 ± 3.8 kg and of 1.65 ± 0.1 m and 1.52 ± 0.1 m, respectively. The body mass index classified the sample as normal or with a weight deficit, depending on the data used. In relation to the body composition and nutritional status of each patient, it was determined that ID#1 was at risk of malnutrition/malnutrition, ID#2 was normal and ID#3 was malnutrition/normal
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Cimentos de escória ativada com silicatos de sódio. / Sodium silicate activated blast furnance slag cements.John, Vanderley Moacyr 18 May 1995 (has links)
Os cimentos de escória apresentam boas possibilidades de mercado, especialmente em aplicações em que o cimento Portland não possa ser utilizado ou onde o seu uso provoque uma elevação dos custos. A confecção de matrizes para fibras sensíveis aos álcalis e a produção de cimentos com baixo calor de hidratação são exemplos. Neste trabalho, a escória foi ativada com silicato de sódio e cal hidratada. O ativador foi formulado de maneira a proporcionar teores de Na2O de 2,5% e 5%, SiO2 de 0% a 14,8% e Ca(OH)2 de 0%, 2,5% e 5%. O aumento dos teores de Na2O e de SiO2, dentro de determinados limites, propicia um notável crescimento da resistência à compressão. Este crescimento da resistência está associado a uma diminuição da porosidade, para um mesmo fator/água aglomerante. Certamente a diminuição da porosidade é devida a um menor grau de organização cristalina dos produtos hidratados, decorrente do aumento da velocidade de precipitação de hidratados e de gel de N-C-S-H. A adição de Ca(OH)2 diminui a velocidade de perda da trabalhabilidade. Os cimentos de escória ativada com silicatos de sódio podem apresentar resistência à compressão de até 100 MPa, superior à dos cimentos Portland, com calor de hidratação da mesma ordem de grandeza. A velocidade de carbonatação destes cimentos é equivalente a dos cimentos Portland de mesma resistência. No entanto, estes cimentos apresentam maior retração hidráulica. / Binders based on ground granulated blast furnace slag (BFS) are suitable for the building industry, mainly if the use of Portland cement is expensive or may cause problems, such as: alkali sensitive fibre-reinforced cement and concretes and low heat-hydration concretes. BFS is activated by sodium silicates and hydrated lime. The compound\'s proportions are: Na2O - 2.5 and 5.0%; SiO2 from 0 to 14.8%; CaOH2 - 0, 2.5 and 5%. The increase of Na2O and SiO2 amounts allows a considerable improvement of binder strength, with values up to 100 MPa. This increase of the strength is related to the decrease of the porosity for a constant water-binder ratio. The porosity is affected certainly by the reduction of the degree of cristalynity of the hydrated compounds, due to the increase of the speed of precipitation of the hydrates or the N-C-S-H gel. It is possible to obtain BFS binders stronger than the Portland cement, with similar hydration heat. The carbonation rate of these new binders is equivalent to those of Portland cement specimens with similar strength. However these BFS binders have higher drying shrinkage.
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Pilares de concreto de alto desempenho: fundamentos e experimentação / High performance concrete columns: principles and experimentationLima, Flávio Barboza de 30 October 1997 (has links)
O uso de concreto de alto desempenho constitui tendência irreversível, devido às vantagens que apresenta em relação aos concretos de resistência usual, principalmente na execução de pilares de edifícios, pois as áreas das seções transversais podem ser reduzidas. Este trabalho trata da obtenção e do estudo teórico e experimental de pilares de concreto de alto desempenho, analisando o comportamento de modelos, solicitados à compressão centrada e flexão normal composta. Foram analisados pilares de seções transversais quadradas de 20cm x 20cm e retangulares de 15cm x 30cm e 12cm x 30cm, dimensões que representam pilares usuais em estruturas de edifícios. Na compressão centrada ficou caracterizado que o estado limite último foi atingido por ruptura da seção mais solicitada e comprovado que a ruptura ocorreu quando o núcleo, definido pelo perímetro considerado pelos eixos dos estribos, se rompeu. Nos ensaios de flexão normal composta os resultados mostraram que as hipóteses de distribuição de tensões, utilizadas para os concretos de resistências usuais, não devem ser consideradas para concreto de alta resistência. As forças normais experimentais e as teóricas, calculadas por um modelo proposto pelo Autor, ficaram iguais enquanto que, para os momentos fletores, os valores experimentais ficaram muito acima dos teóricos. / The use of high performance concrete is an irreversible tendency in structural design due to the advantages it presents, compared to the concrete of usual strength, these advantages can be seen mainly in the execution of buildings columns as the cross sections can be reduced. This thesis is about the theoretical and experimental study to obtain high performance concrete columns. The behaviour of models subjected to axial load and bending plus axial load was analysed. Columns with the square (20cm x 20cm) and rectangular (15cm x 30cm and 12cm x 30cm) cross sections were studied, because they are the usual buildings columns dimensions. As far as axial load is concerned, the ultimate state limit was reached when the mostly demanded section broke. It was proven that the rupture occurred when the core, defined by the perimeter considered by the axial stirrups, broke. The results of bending plus axial load tests have shown that the distribution of stress hypotheses used for concrete of usual strength must not be considered for high strength concrete. The experimental axial forces and the internal ones calculated by a given model were the same, whereas the experimental values for the internal moments were much higher.
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Análise experimental de pilares de concreto de alto desempenho submetidos à compressão simples / Experimental analysis of high strength concrete columns (60 MPa) under axial compressionQueiroga, Marcos Vinícios Mendonça de 30 March 1999 (has links)
O objetivo da pesquisa foi obter subsídios para o projeto de pilares de concreto de alta resistência, submetidos à compressão simples, com concreto de resistência média de 60 MPa. Este projeto faz parte de um plano mais amplo onde já se têm resultados experimentais que traduzem o comportamento de pilares moldados com concreto de resistência média à compressão de 80 MPa. Nestes constatou-se a participação isolada do núcleo de concreto definido pelo eixo da armadura transversal como seção resistente dos pilares. Na etapa experimental foram ensaiados pilares com seções transversais quadradas de 200 mm x 200 mm e retangulares de 150 mm x 300 mm. As alturas dos pilares correspondem a seis vezes a menor dimensão da seção transversal, portanto, 1200 mm e 900 mm, respectivamente. Nos modelos de seção quadrada, o valor médio das relações entre as forças últimas experimentais e as forças últimas teóricas, considerando a seção total de concreto, resultou igual a 0,82, indicando que a seção resistente não é a seção total. Por outro lado, a média das relações entre as forças últimas experimentais e as forças últimas teóricas, considerando apenas a área do núcleo limitada pelo eixo dos estribos, resultou igual a 1,21, o que mostra que a seção resistente pode ser considerada, no Estado Limite Último, como a seção do núcleo. / This research\'s aim is to obtain information for design of high strength concrete columns under concentrically loads with medium cylinder compressive strength of 60 MPa. This project belongs to a more extensive plan which already has experimental results that represent the behavior of columns performed with concrete with medium cylinder compressive strength of 80 MPa. In these models has been verified the independent participation of concrete core defined by the transversal reinforcement axis as resistant section near the ultimate load. In the experimental stage it was tested twelve columns with square (200 mm x 200 mm) and rectangular (150 mm x 300 mm) cross sections. The height of the columns corresponds to six times the smallest dimension of the cross section, 1,200 mm and 900 mm, respectively. The medium value of the ratios between the ultimate experimental force and the ultimate theoretical force, regarding the full concrete section, was 0.82, indicating that the resistant section is not the full section. On the other hand, the medium of ratios between the ultimate experimental force and the ultimate theoretical force, considering only the core area limited by the axis of the lateral reinforcement bars, was 1.21, what shows that the resistant section can be considered as the core section in the Ultimate Limit State.
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Cimentos de escória ativada com silicatos de sódio. / Sodium silicate activated blast furnance slag cements.Vanderley Moacyr John 18 May 1995 (has links)
Os cimentos de escória apresentam boas possibilidades de mercado, especialmente em aplicações em que o cimento Portland não possa ser utilizado ou onde o seu uso provoque uma elevação dos custos. A confecção de matrizes para fibras sensíveis aos álcalis e a produção de cimentos com baixo calor de hidratação são exemplos. Neste trabalho, a escória foi ativada com silicato de sódio e cal hidratada. O ativador foi formulado de maneira a proporcionar teores de Na2O de 2,5% e 5%, SiO2 de 0% a 14,8% e Ca(OH)2 de 0%, 2,5% e 5%. O aumento dos teores de Na2O e de SiO2, dentro de determinados limites, propicia um notável crescimento da resistência à compressão. Este crescimento da resistência está associado a uma diminuição da porosidade, para um mesmo fator/água aglomerante. Certamente a diminuição da porosidade é devida a um menor grau de organização cristalina dos produtos hidratados, decorrente do aumento da velocidade de precipitação de hidratados e de gel de N-C-S-H. A adição de Ca(OH)2 diminui a velocidade de perda da trabalhabilidade. Os cimentos de escória ativada com silicatos de sódio podem apresentar resistência à compressão de até 100 MPa, superior à dos cimentos Portland, com calor de hidratação da mesma ordem de grandeza. A velocidade de carbonatação destes cimentos é equivalente a dos cimentos Portland de mesma resistência. No entanto, estes cimentos apresentam maior retração hidráulica. / Binders based on ground granulated blast furnace slag (BFS) are suitable for the building industry, mainly if the use of Portland cement is expensive or may cause problems, such as: alkali sensitive fibre-reinforced cement and concretes and low heat-hydration concretes. BFS is activated by sodium silicates and hydrated lime. The compound\'s proportions are: Na2O - 2.5 and 5.0%; SiO2 from 0 to 14.8%; CaOH2 - 0, 2.5 and 5%. The increase of Na2O and SiO2 amounts allows a considerable improvement of binder strength, with values up to 100 MPa. This increase of the strength is related to the decrease of the porosity for a constant water-binder ratio. The porosity is affected certainly by the reduction of the degree of cristalynity of the hydrated compounds, due to the increase of the speed of precipitation of the hydrates or the N-C-S-H gel. It is possible to obtain BFS binders stronger than the Portland cement, with similar hydration heat. The carbonation rate of these new binders is equivalent to those of Portland cement specimens with similar strength. However these BFS binders have higher drying shrinkage.
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Hipotireoidismo e gestação: importância do pré-natal no diagnóstico, tratamento e acompanhamentoLopes, Fabiana Pires Rodrigues de Almeida 17 December 2016 (has links)
A pesquisa teve por objetivo investigar o perfil epidemiológico do Hipotireoidismo na Gestação na cidade de Palmas-TO. Trata-se de um estudo descritivo e exploratório do tipo documental, com abordagem quantitativa, realizado na Maternidade Pública e no Centro de Saúde Sexual e Reprodutiva. Analisaram-se 15 prontuários de mulheres portadoras do hipotireoidismo, sendo onze no Hospital e Maternidade Dona Regina e quatro no Centro de Saúde Sexual e Reprodutivo. A idade materna média foi de 29 anos; a idade gestacional média, de 16,3 anos; o número de gestações anteriores foi identificado em 9 prontuários; o local de residência foi encontrado em 3 prontuários e moravam na zona urbana; o histórico pessoal da doença contempla 14 indivíduos; história familiar, em apenas 1 prontuário houve registro; a história de abortos contempla 5; casos de prematuridade, não foram encontrados registros nos prontuários investigados; para o tratamento de infertilidade, em apenas 1 prontuário foi observado o registro; com relação à historia de bócio/nódulo, obteve-se 2 registros; cirurgia anterior, não foram encontrados registros; a reposição hormonal ocorreu em 4 gestantes. Com relação aos exames repetidos durante a gestação, obteve-se 11 registros nos prontuários. Conclui-se que o acompanhamento se deu de forma pontual com intervenções pertinentes, entretanto, é preciso melhorar a qualidade dos registros nos prontuários, uma vez que informações não preenchidas dificultaram o entendimento do prognóstico dessas mulheres no pré-natal de alto risco. / The research aimed to investigate the epidemiological profile of Hypothyroidism in Pregnancy in the city of Palmas-TO. This is a descriptive and exploratory study of documentary type, with quantitative approach, carried out at the Public Maternity and at the Center of Sexual and Reproductive Health. The analysis comprised 15 medical records of women with hypothyroidism, of these, eleven at the Maternity and four at the Center of Sexual and Reproductive Health (CSRH). The average maternal age was 30.2 years; the average gestational age was 16.3 years; the number of previous pregnancies was identified in 9 records; place of residence was found in 3 records and lived in urban areas; the disease personal history comprises 14 individuals; the history family in just 1 records were recorded; the history of abortions comprises 5; cases of prematurity, was not found records in medical charts; for the treatment of infertility in only 1 records noted the record; regarding the history of goiter / lump, there was obtained 2 registers; previous surgery, was not found records; hormone replacement occurred in 4 pregnant women. Regarding the repeated examinations during pregnancy, it was obtained one case in the medical records. We conclude that monitoring occurred in a timely manner with pertinent interventions; however, it is necessary to improve the quality of the medical records, since that unfilled information hindered the understanding of the prognosis of women under high risk prenatal.
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Projeto estrutural de vigas de concreto de alto desempenho / Structural design of high performance concrete beamsAndrade Júnior, João Paulo de 10 February 1999 (has links)
Este trabalho fornece uma visão geral sobre a aplicação, o dimensionamento e o detalhamento de elementos fletidos de concreto de alto desempenho (CAD), armados ou protendidos, com particular atenção para estes últimos. Procurou-se, sempre que possível, realçar as situações nas quais os atuais procedimentos normalizados permanecem válidos, ou não, para o cálculo das vigas de CAD. Na introdução, apresenta-se a viabilidade econômica da aplicação do concreto de alto desempenho nas vigas. No capítulo referente à retração e à fluência, abordam-se procedimentos válidos para o CAD, os quais apresentam melhor correlação com os resultados experimentais que a obtida através do ACI 209 (1982) ou do CEB-FIP (1990). No que se refere à flexão, apresenta-se um diagrama tensão-deformação retangular, e comparam-se os seus resultados para concretos usuais e de alto desempenho, com os obtidos pelo diagrama parábola-retângulo, em termos de consumo de armadura. No capítulo referente ao cisalhamento, apresentam-se recomendações para a utilização do Método Padrão e do Modelo de Treliças de Diagonais de Inclinação Variável para o cálculo da armadura transversal em vigas de CAD. Para o cálculo dos deslocamentos causados por ações de curta duração, confirma-se a validade da metodologia de Branson para as vigas de CAD. Os deslocamentos adicionais causados por ações de longa duração também são considerados, incluindo-se metodologias para as vigas de concreto armado e para as pré-moldadas protendidas. Exemplos de dimensionamento são feitos para todos os itens apresentados, considerando-se uma viga pré-moldada de 30 m de comprimento, seção \"T\", com pós-tensão e fck = 70 MPa. / This work provides an overview of use and design of the high performance concrete (HPC) flexural members, reinforced or prestressed, with particular attention for the last ones. Cases in which procedures of the modern codes for calculation of HPC beams remain valid were enhanced. In the introduction, the economic viability of high performance concrete beams is presented. In the chapter about shrinkage and creep, valid procedures for HPC are presented. These procedures have better correlation with the actual results than those relative to ACI 209 (1982) or CEB-FIP (1990). A rectangular stress block is presented, and its results for usual and high performance concrete are compared with those from the parabolic-rectangular stress block, in terms of consume of steel. In the chapter about shear, recommendations for use of Standard Method and Variable Angle Truss Model for HPC beams are presented. For the calculation of short term deflections, the validity of Branson\'s Method for high performance concrete beams is confirmed. Sustained load deflections are also considered, and including procedures for reinforced beams and for precast prestressed ones. For all the considered topics, examples are presented for a 30 m span precast post-tensioned beam, \"T\" cross section and fck = 70 MPa.
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Determinação da ativação de monócitos e de biomarcadores celulares em gestantes portadoras de pré-eclâmpsia /Romão, Mariana. January 2013 (has links)
Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Coorientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Ricardo de Carvalho Cavalli / Banca: Débora Cristina Damasceno Meirelles dos Santos / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gestação humana, caracterizada por uma resposta inflamatória sistêmica, de maior intensidade do que a observada na gestação normal. Nessa patologia, células do sistema imune inato como monócitos e granulócitos encontram-se ativadas endogenamente e secretam níveis elevados de radicais livres e citocinas inflamatórias. 1) Determinar o estado de ativação endógena de monócitos pela expressão de receptores TLR2 e TLR4, bem como a ativação do fator de transcrição nuclear NF-κB nessas células em gestantes portadoras de PE distribuídas quanto à idade gestacional de aparecimento das manifestações clínicas (precoce ou tardia) da doença; 2) Correlacionar a expressão de TLR2 e TLR4 com a produção de fator de necrose tumoral alfa (TNF-), interleucina-10 (IL-10) e IL-12 por monócitos estimulados com lipopolissacáride de Escherichia coli (LPS) e peptidoglicano (PGN) de bactéria Gram-positiva em gestantes com PE precoce ou tardia; 3) Verificar se os parâmetros estudados diferenciam PE precoce e tardia. Foram estudadas 92 gestantes, sendo 32 normotensas e 60 portadoras de PE, pareadas pela idade gestacional. As gestantes pré-eclâmpticas foram classificadas de acordo com o aparecimento das manifestações clínicas em PE precoce (<34 semanas de gestação, n=30) e PE tardia (≥34 semanas de gestação, n=30). Monócitos de sangue periférico obtidos de gestantes normotensas ou com PE foram cultivados por 18 h na ausência ou presença de LPS ou de PGN. A expressão de receptores TLR2 e TLR4, presentes na superfície de monócitos, foi detectada por citometria de fluxo, empregando-se anticorpos monoclonais específicos, marcados com fluorocromos. Para análise da ativação do fator de transcrição nuclear NF-κB os monócitos foram incubados na presença ou ausência de LPS ou PGN por 30 min e o extrato nuclear obtido foi empregado para dosagem de NF-κB. Monócitos ... / Abstract: Preeclampsia (PE) is a pregnancy-specific human syndrome characterized by a systemic inflammatory response, with higher intensity than the one observed in normal pregnancy. In this pathology, innate immune cells such as monocytes and granulocytes are activated endogenously and secrete high levels of inflammatory cytokines and free radicals. 1) to determine the activation state of monocytes by endogenous expression of TLR2 and TLR4 receptors as well as the nuclear transcription factor (NF-κB) activation in these cells in pregnant women with PE, distributed according to the gestational age of clinical manifestations (early or late-onset) of the disease; 2) to correlate TLR2 and TLR4 expression with TNF-α, IL-10 and IL-12 by monocytes stimulated with lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli and peptidoglycan (PGN) of Gram-positive bacteria in pregnant women with early-onset or late-onset PE; 3) to verify if the parameters studied may differentiate early-onset or late-onset PE. We studied 92 pregnant women, 32 normotensive and 60 women with PE, paired for gestational age. Preeclamptic pregnant women were classified according to onset of clinical manifestations in early-onset PE (<34 weeks gestation, n=30) and late-onset PE (≥ 34 weeks gestation, n=30). Monocytes from peripheral blood obtained from preeclamptic and normotensive pregnant women were incubated for 18h in the absence or presence of LPS or PGN. Expression of TLR2 and TLR4 receptors present on the surface of monocytes, was detected by flow cytometry, using specific monoclonal antibodies labeled with fluorochromes. To analyze NF-κB, monocytes were incubated with or without LPS or PGN for 30 min and the nuclear extract obtained was employed for NF-κB determination. Monocytes were further cultured in the presence or absence of LPS and PGN and the supernatant obtained after 18h cultivation was aspirated and used for TNF-α, IL-10, IL-12p40 and IL-12p70 determination by ... / Mestre
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