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Alterações do perfil de lipoproteinas plasmaticas induzidas pela testosterona são moduladas pela expressão de proteina de transferencia de colesteril ester : estudos em camundongos transgenicos e controles

Casquero, Andrea Camargo 09 October 2001 (has links)
Orientador: Helena Coutinho Franco de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T21:46:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Casquero_AndreaCamargo_M.pdf: 3501727 bytes, checksum: 8ececaad5a1d1a9a80261e09b3310a8d (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Hormônios sexuais modificam o perfil lipoprotéico e o risco de aterosclerose. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de testosterona sobre os lipídeos plasmáticos e enzimas associadas. Camundongos transgênicos (Tg) para proteína de transferência de colesteril-éster (CETP) e controles (não- Tg) foram estudados após 30 dias de castração ou pseudo-cirurgia (sham) e após 14 dias de suplementação com testosterona por injeções subcutâneas diárias de Durateston (DT), Androgenol (AN) ou placebo (PL). As concentrações plasmáticas de colesterol, triglicérides, ácidos graxos livres, glicose e insulina e as atividades da lipase hepática e da CETP foram semelhantes tanto nos animais castrados comparados aos sham quanto nos animais DT comparados .aos PL No entanto, estes tratamentos induziram modificações significativas da distribuição do colesterol nas lipoproteínas nos animais CETP Tg e não-Tg, as quais foram distintas conforme o genótipo. Em tennos relativos, a deficiência de testosterona nos animais não- Tg provocou aumento de 73 % da VLDL e 79 % da LDL e redução de 11 % da HDL, enquanto nos animais CETP Tg castrados houve aumento de 36 % da LDL e redução de 30 % da HDL. Portanto esses resultados sugerem que a expressão da CETP nos camundongos transgênicos amenizou as modificações desfavoráveis nas apoB-LP observadas nos não-Tg. Em estudos cinéticos com LDL e HDL marcadas radioativamente, verificou-se uma tendência de redução da velocidade de remoção plasmática da LDL e redução do tempo de residência da HDL no plasma dos animais castrados, as quais explicam em parte as alterações das respectivas concentrações plasmáticas destas lipoproteínas. Além disso, a atividade endógena da CETP estava aumentada em 20 % nos animais castrados, contribuindo para redução da HDL nestes animais. A suplementação com testosterona em machos não-Tg e fêmeas CETP Tg também modificou os níveis de apoB-LP. Machos não Xl Tg tratados com DT apresentaram aumento de 42 % da VLDL e 72 % na LDL; remeas CETP Tg tratadas com DI apresentaram aumento de 35 % em VLDL. Concluindo, tanto a deficiência corno a suplementação com testosterona tornaram o perfil lipoprotéico dos camundongos mais aterogênico, independentemente da massa de iipase hepática e de CETP. A magnitude dos efeitos sobre as beta- e alfa-lipoproteínas foi te do genótipo, isto é, da expressão da CETP / Abstract: Sex honnones modify the plasma lipoprotein profile and hence the risk of atherosclerosis. ln this study we have investigated the effects of testosterone on plasma lipid and lipoprotein levels and associated enzymes. Transgenic mice (Tg) 1hat express a human cholesteryl ester transfer protein (CETP) minigene with natural flanking sequences and non transgernc (nTg) control mice were studied 30 days after castration or sham operation and 14 days after testosterone supplementation by subcutaneous daily injections of Durateston (DT), Androgenol (AN') Of placebo (PL). Plasma concentrations of cholesterol, triglycerides, free fatty acids, glucose and insulin, as well as the hepatic lipase and CETP activities on exogenous substrates were similar in both conditions, testosterone deficiency (castrated vs. sham) or excess (DT vs. PL) for both groups of mice, CETP Tg and non Tg. However, these treatments induced changes in the cholesterol distribution among plasma lipoproteins that were dependent on the CETP expression. Testosterone deficiency in nTg mice provoked increase of 73 % in VLDL- and 79 % in LDL- and reduction of 11 % in HDL-cholesterol, while in CETP Tg mice there was an elevation of 36 % in LDL- and decrease of 30 % in HDL-cholesterol. Kinetic studies of LDL and HDL labeled with 1311 and 1251, respectively, showed that the LDL fractional plasma removal rate and HDL plasma residence time tend to be lower in CETP Tg castrated as compared to sham mice. These results can explain, at least in pari, the changes in LDL and HDL concentrations in the plasma of the CETP Tg castrated mice. Furthermore, endogenous substrate dependent CETP activity was elevated by 20 % in CETP Tg castrated mice, which contributed to the reduction in HDL-cholesterollevels in these mice. Testosterone ._supplementation induced an increase of 42 % in VLDL- and af 72 % in LDL-cholesterol in X11l, .J the plasma ofnTg mice and a mild 35 % increase in VLDL-cholesterol in plasma offemale CETP Tg mice, while no change was observed in the cholesterol distribution among plasma lipoproteins of male CETP Tg mice. In conclusion, both testosterone deficiency and excess induced a more atherogenic lipoprotein profile in mice, which was independent of the mass ofhepatic lipase and CETP. However, the magnitude ofthe effects were dependent on the CETP expression, which attenuated the elevation on eta-lipoprotein but strengthened the reduction on alpha-lipoprotein cholesterollevels / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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Efeito do tratamento com agonista dos PPARalfa (Ciprofibrato), sobre a homeostase lipidica e glicemica em camundongos geneticamente modificados

Bighetti, Eliete Janaina Bueno 03 August 2018 (has links)
Orientador : Helena Coutinho Franco de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:41:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bighetti_ElieteJanainaBueno_D.pdf: 6502923 bytes, checksum: 6bd3ab4080b90f8b48ce181c742aeb18 (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado
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Dinâmica populacional, infestação natural e aspectos biológicos de Chrysodeixis includens (Walker: 1857) e Spodoptera spp. (Lepidoptera: Noctuidae) em cultivares de soja e algodoeiro Bt que expressam proteínas Cry /

Viana, Daniela de Lima. January 2018 (has links)
Orientador: Antonio Carlos Busoli / Banca: Marcos Doniseti Michelotto / Banca: Raphael de Campos Castilho / Banca: José Roberto Scarpellini / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Resumo: O cenário agrícola no Centro Oeste conta com os chamados sistemas de produção, nos quais os cultivos ocorrem de forma constante e sucessiva durante um mesmo ano agrícola. No entanto, isso tem propiciado problemas cada vez mais frequentes relacionados a alguns grupos de pragas, dentre eles os lepidópteros. Espécies como Chrysodeixis includens e o complexo de Spodoptera vem crescendo de importância, causando prejuízos, principalmente em culturas como a soja e o algodoeiro. Dentre os métodos mais utilizados para o controle de insetos-praga no Brasil, destaca-se o uso de OGM, a partir da inserção de genes da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), com expressão de proteínas com ações inseticidas. Entretanto, um dos grandes problemas é a seleção de populações de pragas resistentes aos cultivos Bt devido ao uso contínuo e inadequado da tecnologia. Diante disso, os objetivos do presente estudo foram avaliar os efeitos de cultivares Bt de soja e algodoeiro, que expressam proteínas inseticidas Cry, sobre os aspectos biológicos de C. includens em laboratório, como também avaliar a dinâmica populacional e a infestação natural de lagartas de C. includens e de Spodoptera spp. em condições de campo, no estado do Mato Grosso. Para o estudo dos aspectos biológicos, utilizou-se lagartas neonatas que foram alimentadas com folhas das cultivares de soja e algodoeiro não Bt e Bt de diferentes tecnologias. Os experimentos de campo foram realizados em área experimental do IMAmt na safra 2016/2017, ut... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The agricultural scenario in the brazilian midwest counts on the socalled production systems, in which crops occur constantly and successively during the same agricultural year. However, this has caused increasingly frequent problems related to some groups of pests, among them the Lepidoptera. Species such as Chrysodeixis includens and the Spodoptera complex have been increasing in importance, causing damage, especially in crops such as soybean and cotton. Among the most used methods for the control of insect pests in Brazil, the use of GMOs, from the insertion of genes of the bacterium Bacillus thuringiensis (Bt), with expression of proteins with insecticidal actions, stands out. However, one of the major problems is the selection of populations of pests resistant to Bt crops due to the continuous and inadequate use of the technology. The objectives of the present study were to evaluate the effects of Bt cultivars of soybean and cotton, which express insecticidal Cry proteins, on the biological aspects of C. includens in the laboratory, as well as to evaluate the population dynamics and the natural infestation of caterpillars C. includens and Spodoptera spp. under field conditions, in the state of Mato Grosso. For the study of the biological aspects, we used caterpillars that were fed with leaves of the cultivars of soybean and non-Bt and Bt cotton of different technologies. Field experiments were carried out in the experimental area of the IMAmt in the 2016/2017 season, usi... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Proliferação celular em gestações naturais e de conceptos bovinos transgênicos e clonados, que expressam a proteína fluorescente verde (GFP) /

Oliveira, Fernanda Paes de. January 2015 (has links)
Orientador: Flávia Thomaz Verechia Pereira / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: Ricardo da Fonseca / Resumo: Para o crescimento placentário e a nutrição fetal, altas taxas de crescimento e diferenciação celular são necessárias para um balanço adequado entre proliferação e morte celular das células placentárias. Estas células possuem propriedades específicas em relação a suas funções metabólicas, endócrinas e angiogênicas, sendo fundamentais para o desenvolvimento do concepto ao longo da prenhez. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de proliferação celular em placentônios provenientes de conceptos bovinos transgênicos clonados (n=5) e de inseminação artificial (IA) (n=18), nos períodos de 60 e 90 dias de gestação, que tiveram seu desenvolvimento interrompido e houve a recuperação do útero gestante. As amostras de placentônio foram recortadas e fixadas em solução aquosa de paraformoldeído a 4% em tampão fosfato de sódio (PBS) a 0,1M pH 7.4, para verificação da morfologia, e realização da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados obtidos foram comparados entre bovinos clonados transgênicos e de IA. Em todos os grupos e períodos gestacionais, o epitélio fetal apresentou marcação positiva para proliferação celular. Aos 60 dias a marcação positiva no epitélio uterino das gestações manipuladas foi pouco evidente em relação às de gestações naturais. Por sua vez aos 90 dias a imunorreatividade dos placentônios dos conceptos clonados, foi muito intensa não só no epitélio, mas também no tecido conjuntivo fetal, fato não observado na gestação natural, onde a reação positiva foi pouco evidente no tecido conjuntivo fetal. Neste estudo foi demonstrado um possível desequilíbrio nos padrões de proliferação celular nos conceptos bovinos clonados transgênicos, pois no início da gestação (60 dias) apresentaram menor atividade proliferativa e aos 90 dias um aumento, podendo ser este fato um dos fatores que levam às anormalidades placentárias. Desse modo os resultados da verificação.. / Abstract: For the placental growth and fetal nutrition, high rates of growth and differentiation are necessary for a proper balance between proliferation and cell death of placental cells. These cells have specific properties in relation to its metabolic, endocrine and angiogenic function and they are fundamental to the development of the fetus throughout pregnancy. In this study, the occurrence of cell proliferation was assessed in placentomes by cloned transgenic bovine conceptuses (n=5) and by artificial insemination (AI), in the 60 and 90 days of gestation, and they development were interrupted and recovering the pregnant uterus. The samples were cut and fixed in paraformaldehyde 4% aqueous solution in sodium phosphate buffer (PBS) 0.1M at pH 7.4, for verification of the morphology and performing immunohistochemistry. The results were compared with bovine cloned and AI. The reults obtained were compared between transgenic cloned bovine conceptuses and AI. In all groups and gestational periods, the fetal epithelium presents positive labeling to cell proliferation. In 60 days gestation the positive labeling of the manipulated gestations was less evident in relation to the natural gestations. On the other hand, in 90 days gestation the immunoreactivity of the placentomes of the cloned conceptuses was more intense, not just in the epithelium, but also in the fetal connective tissue, fact not observed in the natural gestation, were the positive reaction was less evident in the fetal connective tissue. In this study was noted a possible imbalance in the patterns of the cell proliferation in the transgenic cloned bovine conceptuses, because in the early gestation (60 days) they presented a lesser proliferative activity, and in the 90 days a increase, may be this fact one of the factors leading to placental abnormalities. Therefore, the results of verification of cell proliferation and understanding are important for the understanding of possible fails... / Mestre
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Proliferação celular em gestações naturais e de conceptos bovinos transgênicos e clonados, que expressam a proteína fluorescente verde (GFP)

Oliveira, Fernanda Paes de [UNESP] 10 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:41Z : No. of bitstreams: 1 000843813.pdf: 1500567 bytes, checksum: 2816e72bf804aaefb588c0028a1aa523 (MD5) / Para o crescimento placentário e a nutrição fetal, altas taxas de crescimento e diferenciação celular são necessárias para um balanço adequado entre proliferação e morte celular das células placentárias. Estas células possuem propriedades específicas em relação a suas funções metabólicas, endócrinas e angiogênicas, sendo fundamentais para o desenvolvimento do concepto ao longo da prenhez. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de proliferação celular em placentônios provenientes de conceptos bovinos transgênicos clonados (n=5) e de inseminação artificial (IA) (n=18), nos períodos de 60 e 90 dias de gestação, que tiveram seu desenvolvimento interrompido e houve a recuperação do útero gestante. As amostras de placentônio foram recortadas e fixadas em solução aquosa de paraformoldeído a 4% em tampão fosfato de sódio (PBS) a 0,1M pH 7.4, para verificação da morfologia, e realização da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados obtidos foram comparados entre bovinos clonados transgênicos e de IA. Em todos os grupos e períodos gestacionais, o epitélio fetal apresentou marcação positiva para proliferação celular. Aos 60 dias a marcação positiva no epitélio uterino das gestações manipuladas foi pouco evidente em relação às de gestações naturais. Por sua vez aos 90 dias a imunorreatividade dos placentônios dos conceptos clonados, foi muito intensa não só no epitélio, mas também no tecido conjuntivo fetal, fato não observado na gestação natural, onde a reação positiva foi pouco evidente no tecido conjuntivo fetal. Neste estudo foi demonstrado um possível desequilíbrio nos padrões de proliferação celular nos conceptos bovinos clonados transgênicos, pois no início da gestação (60 dias) apresentaram menor atividade proliferativa e aos 90 dias um aumento, podendo ser este fato um dos fatores que levam às anormalidades placentárias. Desse modo os resultados da verificação.. / For the placental growth and fetal nutrition, high rates of growth and differentiation are necessary for a proper balance between proliferation and cell death of placental cells. These cells have specific properties in relation to its metabolic, endocrine and angiogenic function and they are fundamental to the development of the fetus throughout pregnancy. In this study, the occurrence of cell proliferation was assessed in placentomes by cloned transgenic bovine conceptuses (n=5) and by artificial insemination (AI), in the 60 and 90 days of gestation, and they development were interrupted and recovering the pregnant uterus. The samples were cut and fixed in paraformaldehyde 4% aqueous solution in sodium phosphate buffer (PBS) 0.1M at pH 7.4, for verification of the morphology and performing immunohistochemistry. The results were compared with bovine cloned and AI. The reults obtained were compared between transgenic cloned bovine conceptuses and AI. In all groups and gestational periods, the fetal epithelium presents positive labeling to cell proliferation. In 60 days gestation the positive labeling of the manipulated gestations was less evident in relation to the natural gestations. On the other hand, in 90 days gestation the immunoreactivity of the placentomes of the cloned conceptuses was more intense, not just in the epithelium, but also in the fetal connective tissue, fact not observed in the natural gestation, were the positive reaction was less evident in the fetal connective tissue. In this study was noted a possible imbalance in the patterns of the cell proliferation in the transgenic cloned bovine conceptuses, because in the early gestation (60 days) they presented a lesser proliferative activity, and in the 90 days a increase, may be this fact one of the factors leading to placental abnormalities. Therefore, the results of verification of cell proliferation and understanding are important for the understanding of possible fails...
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Trajetorias tecnologicas e meio ambiente : a industria de agroquimicos/transgenicos no Brasil

Martins, Paulo Roberto 25 October 2000 (has links)
Orientador: Arlete Moyses Rodrigues / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Filosofia e Ciências Humanas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_PauloRoberto_D.pdf: 30105817 bytes, checksum: dfa45cbb97a4f0dce892e2bc698e00e7 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A indústria da vida transfonrma de modo fundamental na década de 90 as atividades industriais capitalistas voltadas para o uso, compra, venda e controle do mercado de produtos bio-industriais relativos a alimentos, agricultura e saúde. As empresas transnacionais gigantes produzem sementes, pesticidas, processamento de alimentos, melhoramento de plantas, até produtos veterinários e fármacos. O elo da cadeia produtiva que analisamos é a indústria de pesticidas. Nesta, analisa-se as suas trajetórias tecnológicas da síntese química (agroquímicos) e da biotecnologia (transgênicos) e seus efeitos sobre a sociedade e meio ambiente. Caracteriza-se o processo de constituição da indústria da vida, através das fusões e aquisições, proporcionadas pelas empresas transnacionais gigantes que ao longo de 50 anos atuam no mercado de pesticidas. Demonstra-se como está consolidado o mercado mundial e brasileiro de pesticida. A tecnologia é o elemento central no desenvolvimento desse tipo de indústria. Traçamos um panorama da inovação tecnológica registrada na indústria mundial de agroquímico e de transgênicos. No Brasil, ao final de 1997, 27 firmas pertenciam ao segmento industrial produtor de agroquímicos, das quais 25 foram pesquisadas, com o objetivo de verificar questões relativas às trajetórias tecnológicas. Analisamos os impactos no meio ambiente e na saúde humana decorrentes dos produtos originários da trajetória tecnológica da síntese química e da biotecnologia na agricultura. Destacamos sinteticamente, que a trajetória da biotecnologia é o suporte que viabiliza a reprodução ampliada do capital investido, ao longo de 50 anos na trajetória da síntese química. O processo de competição entre as empresas continuará sendo por inovação de produtos, que terão sua origem na trajetória da biotecnologia. Mas estes, ao exigir a continuidade do uso dos pesticidas nas atividades produtivas agrícolas, irão assegurar o prolongamento da vida útil da trajetória da síntese química. Portanto, não se vislumbra a implementação de uma agricultura sustentável, sem a utilização de pesticida, embora a trajetória tecnológica predominante seja a da biotecnologia / Abstract: In the nineties, industry of !ife has been transfonrmed in a fundamental instrument to the industrial capitalist activities oriented towards the use, purchase, sale and control of the bio-industrial products market related to food, agriculture and health. The gigantic transnational enterprises produce seeds, pesticides, food processing, plant improvement products, even veterinary and pharmaceutical products. The link to the productive chain we analyze is the pesticides industry, in which analyze the technological trajectories of the chemical synthesis (agrochemicals) and of the biotechnology (transgenics) and their effects on society and the environment. The life industry constitution process is characterized by mergers and acquisitions made by gigantic transnational enterprises, which for the past 50 years have been acting in the pesticides market. Technology is the central element in the development of this kind of industry. We trace an overview of the technological innovations registered in the world industries of agrochemicals and transgenics. In Brazil, at the end of 1997, there were 27 companies belonging to the industrial segment producing agrochemicals. Of these, 25 were researched with the objective of verifying matters related to technological trajectories. We analyzed the impacts on the environment and on human health, occurring from products originating from the technological trajectories of the chemical synthesis and biotechnology in agriculture. We point out that the biotechnological trajectory is the support that will enable the enlarged reproduction of capital invested, during these 50 years, in the chemical synthesis trajectory. The competition process between companies will continue to be made through the innovation of products originating from the biotechnology trajectory. But these, when they demand the continuation of the use of pesticides in agricultural productive activities, will ensure the prolongation of the useful life of the chemical synthesis trajectory. Therefore, one does not perceive the implementation of a sustainable agriculture without the utilization of pesticides, even though the technological trajectory may be predominantly that of biotechnology / Doutorado / Doutor em Sociologia
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Efeitos da deleção do gene Cx43 sobre o desenvolvimento fetal de camundongos de diferentes backgrounds genéticos: ênfase na osteogênese / Effects of Cx43 gene deletion on mouse fetal development in different genetics backgrounds: Emphasis in osteogenesis

Chaible, Lucas Martins 03 April 2009 (has links)
Conexinas são proteínas que compõem as junções comunicantes do tipo gap, e a diminuição na sua expressão tem sido relacionada com diversas alterações fisiológicas, entre elas algumas síndromes, malformações genéticas, o aumento da proliferação celular e a carcinogênese. Dentre as isoformas das conexinas presentes nos tecidos animais, a Cx43 é a mais abundante e a mais estudada, tendo a sua importância relatada in vivo em camundongos que tiveram um dos alelos de Cx43 deletado (Cx43+/-), devido a morte desses animais logo após o nascimento devido a malformações cardíacas. Considerando o fato de esse gene ser expresso em dezenas de tipos celulares, tivemos como objetivo avaliar os outros tecidos em busca de anomalias ocorridas durante o desenvolvimento, e a possível interferência do background gentético. Para isso acompanhamos dia-a-dia o último terço gestacional de camundongos de background C57BL/6 e CD1, avaliando histologica e morfologicamente os fetos em busca de anomalias nos animais Cx43+/- e Cx43-/- em relação aos animais Cx43+/+. Exceto pelo tecido ósseo, não encontramos alterações nos órgãos que expressam esse gene, bem como alterações causadas pelo refluxo de sangue causado pela malformação da válvula tricúspide. Durante a osteogênese, por meio da avaliação das costelas e tíbia, percebemos um retardo no desenvolvimento, que se agrava conforme a deficiência do gene Cx43. Percebemos nitidamente que o processo de diferenciação celular ocorre de maneira menos eficiente, atrasando processos como deposição de colágeno e de matriz óssea. Conclui-se que a Cx43 é importante para o desenvolvimento ósseo na fase fetal em camundongos. / Connexins are proteins that compose the gap junctions, and the reduction in its expression has been related with diverse physiological alterations, like some syndromes, malformations, the increase of the cellular proliferation and carcinogenesis. Among isoforms of the connexins in animal cells, the Cx43 is the most abundant and studied, having its importance been shown up in alive mice that had one allele of Cx43 (Cx43+/-) deleted. REAUME et al. related that Cx43-/- mice presented cardiac malformation and died immediately after birth. Considering the fact that this gene is expressed in many cell types, we evaluate the possibility of other tissues also to present alterations during the fetal development. Due to this, we studied the mouse development initiating in 12.5 to 19.5 DE (embryologic day) and evaluated the histology of C57BL/6 and CD1 mice searching for anomalies of Cx43+/- and Cx43-/- mice in relation to the Cx43+/+ animals. We did not find alterations in the main organs that express Cx43, nor alterations due to blood out flow related to cardiac malformations. We only found significant difference was the bones; through the evaluation of the ribs and tibia. It has been observed a delay in the development, that was more important in Cx43 knockout mice. We observed clearly that the process of cellular differentiation occurs in less efficient way, delaying processes as deposition of collagen and bone matrix. In conclusion, this study showed that Cx43 is important for bone development in mice.
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Efeitos da deleção do gene Cx43 sobre o desenvolvimento fetal de camundongos de diferentes backgrounds genéticos: ênfase na osteogênese / Effects of Cx43 gene deletion on mouse fetal development in different genetics backgrounds: Emphasis in osteogenesis

Lucas Martins Chaible 03 April 2009 (has links)
Conexinas são proteínas que compõem as junções comunicantes do tipo gap, e a diminuição na sua expressão tem sido relacionada com diversas alterações fisiológicas, entre elas algumas síndromes, malformações genéticas, o aumento da proliferação celular e a carcinogênese. Dentre as isoformas das conexinas presentes nos tecidos animais, a Cx43 é a mais abundante e a mais estudada, tendo a sua importância relatada in vivo em camundongos que tiveram um dos alelos de Cx43 deletado (Cx43+/-), devido a morte desses animais logo após o nascimento devido a malformações cardíacas. Considerando o fato de esse gene ser expresso em dezenas de tipos celulares, tivemos como objetivo avaliar os outros tecidos em busca de anomalias ocorridas durante o desenvolvimento, e a possível interferência do background gentético. Para isso acompanhamos dia-a-dia o último terço gestacional de camundongos de background C57BL/6 e CD1, avaliando histologica e morfologicamente os fetos em busca de anomalias nos animais Cx43+/- e Cx43-/- em relação aos animais Cx43+/+. Exceto pelo tecido ósseo, não encontramos alterações nos órgãos que expressam esse gene, bem como alterações causadas pelo refluxo de sangue causado pela malformação da válvula tricúspide. Durante a osteogênese, por meio da avaliação das costelas e tíbia, percebemos um retardo no desenvolvimento, que se agrava conforme a deficiência do gene Cx43. Percebemos nitidamente que o processo de diferenciação celular ocorre de maneira menos eficiente, atrasando processos como deposição de colágeno e de matriz óssea. Conclui-se que a Cx43 é importante para o desenvolvimento ósseo na fase fetal em camundongos. / Connexins are proteins that compose the gap junctions, and the reduction in its expression has been related with diverse physiological alterations, like some syndromes, malformations, the increase of the cellular proliferation and carcinogenesis. Among isoforms of the connexins in animal cells, the Cx43 is the most abundant and studied, having its importance been shown up in alive mice that had one allele of Cx43 (Cx43+/-) deleted. REAUME et al. related that Cx43-/- mice presented cardiac malformation and died immediately after birth. Considering the fact that this gene is expressed in many cell types, we evaluate the possibility of other tissues also to present alterations during the fetal development. Due to this, we studied the mouse development initiating in 12.5 to 19.5 DE (embryologic day) and evaluated the histology of C57BL/6 and CD1 mice searching for anomalies of Cx43+/- and Cx43-/- mice in relation to the Cx43+/+ animals. We did not find alterations in the main organs that express Cx43, nor alterations due to blood out flow related to cardiac malformations. We only found significant difference was the bones; through the evaluation of the ribs and tibia. It has been observed a delay in the development, that was more important in Cx43 knockout mice. We observed clearly that the process of cellular differentiation occurs in less efficient way, delaying processes as deposition of collagen and bone matrix. In conclusion, this study showed that Cx43 is important for bone development in mice.
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Estudo dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos no processo neurodegenerativo da Doença de Huntington / Study of cellular and molecular mechanisms related to the neurodegenerative process of Hunting disease

Rosenstock, Tatiana Rosado [UNIFESP] 28 May 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:51Z : No. of bitstreams: 1 Publico-10921a.pdf: 1592777 bytes, checksum: 7d854c386b05884268c8e4a74b23d1dd (MD5). Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:51Z : No. of bitstreams: 2 Publico-10921a.pdf: 1592777 bytes, checksum: 7d854c386b05884268c8e4a74b23d1dd (MD5) Publico-10921b.pdf: 1890621 bytes, checksum: 9a2c7c7f503afda64c4ccccb296a2193 (MD5). Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:51Z : No. of bitstreams: 3 Publico-10921a.pdf: 1592777 bytes, checksum: 7d854c386b05884268c8e4a74b23d1dd (MD5) Publico-10921b.pdf: 1890621 bytes, checksum: 9a2c7c7f503afda64c4ccccb296a2193 (MD5) Publico-10921c.pdf: 1802078 bytes, checksum: abe7bcfbf5434d049fa4830000c4afab (MD5). Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:51Z : No. of bitstreams: 4 Publico-10921a.pdf: 1592777 bytes, checksum: 7d854c386b05884268c8e4a74b23d1dd (MD5) Publico-10921b.pdf: 1890621 bytes, checksum: 9a2c7c7f503afda64c4ccccb296a2193 (MD5) Publico-10921c.pdf: 1802078 bytes, checksum: abe7bcfbf5434d049fa4830000c4afab (MD5) Publico-10921d.pdf: 1224466 bytes, checksum: f4c12de814a5b8f7d7e0b7dec3980e89 (MD5) / Introdução: Alterações no tamponamento do cálcio citosólico (Ca+2 c) podem levar à desordens neurodegenerativas como a Doença de Huntington (DH). Vários mecanismos estão relacionados esses processos tais como a excitotoxicidade, o estresse oxidativo e as interações da proteína huntintina mutante (mhtt) com outras proteínas como a transglutaminase 2 (TG2). Essas alterações podem estar relacionadas com a ativação de mecanismos de morte celular ou autofagia. Objetivo: O objetivo deste projeto foi investigar os mecanismos celulares e moleculares envolvidos no processo de neurodegeneração da DH tais como alterações dos níveis de Ca+2 c relacionados com o transporte de Ca+2 mitocondrial (Ca+2 m) e reticular (Ca+2 RE), disfunção mitocondrial e morte celular, em três modelos experimentais: a) animais transgênicos da linhagem R6/1; b) linfoblastos provenientes de pacientes com DH; c) células MEFs (fibroblastos) normais e knock-outs para a TG2, na presença ou ausência da mhtt. Resultados e Conclusões: Nos camundongos transgênicos R6/1 houve um aumento significante do Ca+2 c em relação aos controles aos 9 meses de idade. Essa alteração parece ser devido a um aumento da liberação do Ca+2 m, do estresse oxidativo, do potencial de membrana mitocondrial (DYm) e do consumo de oxigênio. Os transgênicos não apresentaram diferença quanto à SDH, muito embora haja um aumento desta com o envelhecimento. Além disso, os linfoblastos de pacientes com DH apresentaram alterações do Ca+2 m e do Ca+2 RE, bem como um aumento na taxa de células autofágicas. Por outro lado, nas células de fibroblastos de camundongos embrionários (MEFs), a presença de mhtt parece não afetar a homeostase celular de Ca2+. A ausência da TG2 nestas células, influenciou não somente os níveis de Ca2+ c como também protegeu as células contra autofagia, mesmo na presença de mhtt. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Caracterização dos mecanismos de ação da imunoterapia intravesical com P-MAPA envolvendo as vias de sinalização dor receptores Toll-like (TLR) 2 e 4 na progressão do câncer de bexiga não-músculo invasivo

Rocha, Ana Beatriz Missio Vieira da [UNESP] 17 April 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:56Z : No. of bitstreams: 1 000840998_20151016.pdf: 568585 bytes, checksum: e8f035e4f942fd75fc6ad38083a8fd0d (MD5) Bitstreams deleted on 2015-10-16T13:54:07Z: 000840998_20151016.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-16T13:54:48Z : No. of bitstreams: 1 000840998.pdf: 3047380 bytes, checksum: 4f011bacf1f109d530d0cddd6178474e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Agonistas dos receptores Toll-like (TLRs) podem representar candidatos promissores a serem desenvolvidos como medicamentos contra o câncer. Atualmente, a terapia mais eficaz para o câncer de bexiga urinária não-músculo invasivo (CBNMI) é a imunoterapia com BCG (Bacillus Calmette-Guerin), embora sua utilização esteja limitada a efeitos colaterais de intensidades variadas. Diante deste cenário destaca-se o P-MAPA, que por sua grande versatilidade e mínima citoxicidade, abre uma nova perspectiva para o combate de alguns tipos de cânceres, incluindo o CBNMI. Assim, os objetivos principais deste estudo foram caracterizar os efeitos histopatológicos e moleculares da imunoterapia intravesical com P-MAPA envolvendo as vias de sinalização dos TLRs 2 e 4 no tratamento do CBNMI induzido quimicamente em camundongos selvagens (wild type - WT) e knockouts (-/-) para TLR4 e MyD88. Os efeitos da imunoterapia com P-MAPA foram comparados com o tratamento com BCG. Foram utilizados 20 camundongos fêmeas de cada linhagem (WT, TLR4-/- e MyD88-/-), todos com 60 dias de idade e mantidos no Centro de Medicina Nuclear da Faculdade de Medicina/USP - São Paulo. Os animais foram divididos em 4 grupos de 5 animais, para cada linhagem: Grupo Controle (CTL): recebeu uma dose intravesical de solução fisiológica por 3 semanas consecutivas; Grupo MNU: recebeu uma dose intravesical de N-metil-N-nitrosouréia (MNU) a cada 15 dias, totalizando 3 doses; Grupo MNU+BCG: recebeu uma dose intravesical de BCG por 3 semanas consecutivas; Grupo MNU+P-MAPA: recebeu uma dose intravesical de P-MAPA por 3 semanas consecutivas. Após 09 semanas de experimento, as bexigas urinárias foram coletadas e submetidas às análises histopatológicas e Western Blotting. O presente trabalho demonstrou que a imunoterapia com P-MAPA promoveu distinta ativação do sistema imune inato mediada por TLRs 2 e 4 em relação ao BCG, resultando no aumento da via de sinalização para... / Compounds that are able to act as Toll-like receptors (TLRs) agonists may represent promising candidates to be developed as drugs against cancer. Currently, the most effective therapy for non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC) is immunotherapy with BCG (Bacillus Calmette-Guerin) associated with transurethral resection. However, the use of BCG is associated with side effects of varying strengths and in this scenario highlights the P-MAPA, which in great versatility and minimal cytotoxicity, opens a new perspective for fighting certain types of cancers, including NMIBC. Thus, the main objectives of this study were to characterize the histopathological and molecular effects of intravesical immunotherapy with P-MAPA involving the signaling pathways of TLRs 2 and TLR4 in the NMIBC treatment chemically induced in Wild Type mice (Wild Type - WT) and knockouts (-/-) for TLR4 and MyD88. The effects of P-MAPA immunotherapy were compared with BCG treatment. It were utilized 20 female mice of each strain (WT, TLR4 -/- and MyD88 -/-), all with 60 days of age and kept in the Nuclear Medicine Center, School of Medicine / USP - São Paulo. The animals were divided into 4 groups of 5 animals for each strain: Control Group (CTL): received intravesical dose of saline for 3 consecutive weeks; MNU Group: received a intravesical dose of N-methyl-N-Nitrosourea (MNU) every 15 days, a total of 3 doses; MNU+BCG Group: received received intravesical dose of BCG for 3 consecutive weeks; MNU+P-MAPA Group: received intravesical dose of P-MAPA for 3 consecutive weeks. After 09 weeks of experiment, urinary bladders were collected and submitted to histopathological and Western blotting analysis. The present study showed that P-MAPA immunotherapy led to distinct activation of the innate immune system TLR2 and 4-mediated when compared to BCG, resulting in increased signaling pathway for interferon (TRIF, IRF3, IFN-α and IFN-γ ) and restoration of the p53 protein ...

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