Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-11-06T18:48:39Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_IsolamentoBiomonitoradoAtivos.pdf: 1682506 bytes, checksum: d089c22ff8b90442cdf6cdbb24270b26 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-07T12:55:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_IsolamentoBiomonitoradoAtivos.pdf: 1682506 bytes, checksum: d089c22ff8b90442cdf6cdbb24270b26 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-07T12:57:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_IsolamentoBiomonitoradoAtivos.pdf: 1682506 bytes, checksum: d089c22ff8b90442cdf6cdbb24270b26 (MD5) Previous issue date: 2012 / Neste trabalho foi realizado o estudo biomonitorado da toxicidade de frações e metabólitos secundários isolados das folhas de Annona crassiflora Mart., planta conhecida popularmente como araticum ou marolo. Além disso, foi investigada a atividade antimalárica dos compostos isolados e veiculados em nanoemulsões. O fracionamento do extrato etanólico, obtido de suas folhas, foi biomonitorado através do teste de letalidade sobre as larvas de Artemia salina, para a seleção de frações potenciais para obtenção de substâncias bioativas. O fracionamento do extrato etanólico bruto foi realizado através de extração ácida e métodos cromatográficos “flash” e CLAE-PDA. As frações obtidas foram submetidas à prospecção fitoquímica, com reagentes e reveladores para identificação das classes de metabólitos secundários, que levaram à detecção de alcaloides nas frações clorofórmicas (ACF-CI e ACF-CII). Foi isolado o alcaloide majoritário norestefalagina (NOR). Sua identificação foi realizada através de métodos espectrométricos como UV, IV, RMN de 1H e de 13C, DEPT 135, mapas de contornos COSY, HSQC, HMBC e NOESY. Foi também desenvolvido e validado um método CLAE-PDA para quantificação da NOR em nanoemulsões, através da avaliação da linearidade, precisão, exatidão, seletividade e limites de quantificação e detecção para a metodologia escolhida. Nanoemulsões contendo NOR (NE-NOR) foram produzidas e apresentaram tamanho e índice de polidispersão inferiores a 300nm nas concentrações entre 0,1 e 1,0 mg/mL. O potencial zeta das NE foi determinado, mas não foram observadas diferenças significativas entre as formulações testadas, estando todas em torno de -50 mV. A eficiência de encapsulação determinada foi de 22,0; 45,6 e 44,9% nas concentrações de 1,0; 2,0 e 5,0 mg/mL, respectivamente. As NE-NOR nas concentrações de 0,1 e 0,5 mg/mL apresentaram estabilidade de nove meses considerando os parâmetros físico-químicos avaliados. Na determinação da atividade hemolítica da NOR, foi constatado que esta foi inferior a 10% nas concentrações de 0,5 e 2,0 μg/mL. No ensaio de atividade antimalárica, a NOR em solução nas doses de 4,0; 8,0 e 20,0 mg/kg por via intraperitoneal reduziu significativamente (68 a 83%) a parasitemia dos camundongos infectados pelo Plasmodium berghei NK65 no quarto dia de infecção, quando comparada ao grupo controle não tratado. A redução da parasitemia foi de 80 a 84% para a NOR encapsulada nas nanoemulsões nas mesmas concentrações. A formulação de NE-NOR (4 mg/kg) apresentou maior redução da parasitemia ao longo do estudo, revelando seu efeito inibitório tardio sobre a carga parasitária dos animais. ____________________________________________________________________________ / ABSTRACT: This work reports the bioguided study of the toxicity of fractions and secondary metabolites isolated from the leaves of Annona crassiflora Mart. popularly known as “araticum” or “marolo”, as well as the investigation of the antimalarial activity of isolated substances loaded in nanoemulsions. Fractionation of leave’s ethanolic extract was bioguided by the test of lethality using brine shrimp metanauplii. Itallows the selection of potential fractions containing bioactive substances. The crude ethanol extract fractionation was performed by acid-base extraction using flash chromatography and detected by HPLC-PDA. Phytochemical screening of the fractions with reagents enables detection of alkaloids from chloroform fractions (ACF and ACF-CI-CII) and isolation of the major aporphine alkaloid norstephalagine (NOR). Its identification was performed by spectrometric methods such as UV, IR, 1H NMR and 13C NMR, DEPT 135, contour maps COSY, HSQC, HMBC and NOESY. It was developed and validated an HPLC-PDA methodology for quantification of NOR in nanoemulsions, assessed by linearity, precision, accuracy, selectivity and limits of quantification and detection determination of the method. Nanoemulsions containing NOR were developed and presented suitable size distribution and surface charge (-50mV) between 0,1 e 1,0 mg/mL. Encapsulation efficiency was 22,0; 45,6 e 44,9% for the concentrations of 1.0; 2.0 e 5.0 mg/mL respectively. NE-NOR at 0,1 e 0,5 mg/mL had shown good stability following 9 months in all physicochemical parameters evaluated. The hemolytic activity of NOR was lower than 10% at concentrations of 0.5 e 2.0 μg/mL. The antimalarial activity of alkaloid in mice infected with Plasmodium berghei NK65 was also performed. In 4th and 7th days pos-infection, the parasitemia of mice decreased in the range of 70 and 80% for the tested groups, similarly with chloroquine group (90%). The NOR nanoemulsified treated group showed prolonged effect of alkaloid on parasitemia reduction, indicating the maintenance of activity when this substance was associated to nanostructures.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-07-21T16:41:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoTeoricoMecanismo.pdf: 2830037 bytes, checksum: ae7a82304ba39058c29743fd14966f5b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-09-08T16:33:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoTeoricoMecanismo.pdf: 2830037 bytes, checksum: ae7a82304ba39058c29743fd14966f5b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-08T16:33:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoTeoricoMecanismo.pdf: 2830037 bytes, checksum: ae7a82304ba39058c29743fd14966f5b (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A malária é um sério problema de saúde pública mundial, acarretando perdas socioeconômicas e contribuindo para o subdesenvolvimento dos países afetados. Neste contexto, faz-se necessário estudar a relação entre as propriedades eletrônicas e a capacidade antioxidante de derivados quinolínicos na atividade antimalárica, o que servirá de subsídio para propor protótipos eficazes na terapêutica da doença. Nesta dissertação, foram utilizadas técnicas de modelagem molecular, no estudo da relação estrutura e atividade antioxidante correlacionada com a atividade antimalárica, no processo de seleção de grupamentos e parâmetros eletrônicos e conformacionais que permitam aperfeiçoar a atividade farmacológica e reduzir a toxicidade dos derivados. A análise dos valores de HOMO e PI indicou que o tautômero imino-quinolina é, provavelmente, melhor antioxidante que o tautômero amino-quinolina. Também se observou que o equilíbrio dos tautômeros é mais deslocalizado para a estrutura amino-quinolina na fase gasosa, e em água e clorofórmio no método PCM, apresentando valores de barreiras de energia da faixa de 10,78 Kcal/mol, 21,65 Kcal/mol e 22,04 Kcal/mol, respectivamente. Assim pôdese observar que nos derivados análogos de quinolina, os grupos elétrons-doadores mostraram destaque na redução do potencial de ionização, como os grupos amina na posição 8 substituído por um grupo alquilamina. Nos derivados da associação de 4- e 8-amino-quinolina notou-se que a presença de um segundo nitrogênio no grupo quinolina diminui seu potencial antioxidante, com exceção da posição 5, representando o grupo de maior destaque na redução do potencial de ionização e conseqüente provável elevada atividade antioxidante. / Malaria is a serious public health problem worldwide, causing socioeconomic deficits and contributing to subdevelopment in affected countries. In this context is important to study electronic properties, quinoline derivatives antioxidant potential and antimalarial activity relationship to design effective antimalariais prototypes. In this dissertation are used molecular modeling methods to study antioxidant and antimalarial structure-activity relationships selecting moieties and eletronic and conformacional parameters to improve farmacological activity and decrease derivatives toxicity. The HOMO and PI values analysis indicates that imino-tautomer is, probably, better antioxidant than amino-tautomer. It also observed that tautomers equilibrium is favored to amino-quinoline in the gas phase, and in water and chloroform using PCM method, with energy barriers values to 10.78 Kcal/mol, 21.65 Kcal/mol and 22.04 Kcal/mol, respectively. Then, may be noted that in quinoline analogues derivatives the electron-donor groups decrease the ionization potential, as exemple of the amino group at 8-position replaced by an alkylamine group. In 4- 8- amino-quinoline derivatives association observed that presence of quinoline moiety second nitrogen decrease its antioxidant activity, except in the 5-position, representing the most prominent group in the reduction of ionization potential and probably high antioxidant activity.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A malária é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitidos ao homem, principalmente, através da picada do mosquito infectado. O tratamento é realizado por meio do uso de drogas, como a cloroquina, uma vez que não há vacina eficiente contra a doença. Porém, a resistência dos parasitos aos medicamentos tem levado à busca por novas substâncias com atividade antimalárica, inclusive de origem vegetal. Nesse contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a atividade antimalárica de extratos metanólicos de Norantea brasiliensis cultivada sob condições in vivo e in vitro, espécie nativa ocorrente em restingas, com potencial medicinal já comprovado para várias atividades. Foram desenvolvidos protocolos de calogênese e cultura de raízes da espécie visando à definição de um sistema de produção de metabólitos. Para a cultura in vitro, explantes foram inoculados em meio líquido e sólido contendo diferentes fitorreguladores e concentrações. A partir da cultura de tecidos, foram testados extratos do material produzido biotecnologicamente para comparação com o material botânico cultivado no campo. Os testes sobre o potencial antimalárico foram realizados in vivo, utilizando-se camundongos infectados pelo Plasmodium berghei ANKA, e in vitro utilizando o Plasmodium falciparum. Em seguida foram administrados a cloroquina e os extratos vegetais. A parasitemia foi observada seguindo os protocolos já estabelecidos pelo Laboratório de Imunofarmacologia do Instituto Oswaldo Cruz (IOC). Resultados mostraram que explantes foliares e caulinares de plantas germinadas in vitro, inoculados em meio sólido B5 suplementado com 2,0 mg.mL-1 de ANA, são as melhores fontes para a produção de raízes, apresentando maiores valores de peso fresco e peso seco, mostrando-se um sistema promissor para a produção in vitro de metabólitos da espécie. A avaliação da atividade antimalárica in vivo revelou seu potencial a partir de extrato de raízes de planta cultivada in vivo, na concentração de 50 mg/kg apresentando redução significativa da parasitemia quando comparada com o controle não tratado. Paralelamente, nos testes in vitro a concentração de 100 μg/kg do extrato de raízes de planta cultivada in vivo apresentou diferença significativa quando comparada com as outras concentrações testadas e o controle negativo. Além disso, há uma tendência de aumento do efeito inibitório conforme o aumento da concentração do extrato. Os resultados indicam o potencial de atividade antimalárica em raízes de N. brasiliensis, sendo este estudo o primeiro realizado para a espécie / Malaria is an infectious disease caused by protozoa of the genus Plasmodium, transmitted to humans primarily through the bite of an infected mosquito. The treatment is accomplished through the use of drugs such as chloroquine, since there is no effective vaccine against the disease. However, the resistance of parasites to drugs has led to the search for new antimalarial substances, including vegetable. In this context, this study aimed to evaluate the antimalarial activity of methanol extracts of Norantea brasiliensis grown under conditions in vivo and in vitro, native species occurring in salt marshes, with proven medicinal potential for various activities. Protocols were developed callus and culture of roots of species in order to define a system for production of metabolites. For in vitro culture, explants were inoculated in liquid and solid media containing different growth regulators and concentrations. From the tissue culture material were tested extracts biotechnologically produced for comparison with plant material grown in the field. Tests on the potential in vivo antimalarial were performed using mice were infected by Plasmodium berghei ANKA, and in vitro using the Plasmodium falciparum. They were then administered chloroquine and plant extracts. The parasitemia was observed following the protocols established by the Laboratory of Immunopharmacology of the Oswaldo Cruz Institute (IOC). Results showed that stem and leaf explants of in vitro germinated seedlings were inoculated on B5 solid medium supplemented with 2.0 mg.mL-1 ANA, are the best sources for the production of roots, with highest values of fresh weight and dry weight and proved to be a promising system for in vitro production of metabolites of the species. The assessment of antimalarial activity in vivo has shown its potential to extract from plant roots grown in vivo at a concentration of 50 mg/kg showing significant reduction of parasitemia when compared with the untreated control. Similarly, in in vitro tests the concentration of 100 μg/kg of extract of roots of plants grown in vivo showed a significant difference when compared with other tested concentrations and negative control. Furthermore, there is a tendency to increase the inhibitory effect with increasing extract concentration. The results indicate the potential for antimalarial activity in roots of N. brasiliensis, which is the first study conducted for the species.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A malária é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitidos ao homem, principalmente, através da picada do mosquito infectado. O tratamento é realizado por meio do uso de drogas, como a cloroquina, uma vez que não há vacina eficiente contra a doença. Porém, a resistência dos parasitos aos medicamentos tem levado à busca por novas substâncias com atividade antimalárica, inclusive de origem vegetal. Nesse contexto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a atividade antimalárica de extratos metanólicos de Norantea brasiliensis cultivada sob condições in vivo e in vitro, espécie nativa ocorrente em restingas, com potencial medicinal já comprovado para várias atividades. Foram desenvolvidos protocolos de calogênese e cultura de raízes da espécie visando à definição de um sistema de produção de metabólitos. Para a cultura in vitro, explantes foram inoculados em meio líquido e sólido contendo diferentes fitorreguladores e concentrações. A partir da cultura de tecidos, foram testados extratos do material produzido biotecnologicamente para comparação com o material botânico cultivado no campo. Os testes sobre o potencial antimalárico foram realizados in vivo, utilizando-se camundongos infectados pelo Plasmodium berghei ANKA, e in vitro utilizando o Plasmodium falciparum. Em seguida foram administrados a cloroquina e os extratos vegetais. A parasitemia foi observada seguindo os protocolos já estabelecidos pelo Laboratório de Imunofarmacologia do Instituto Oswaldo Cruz (IOC). Resultados mostraram que explantes foliares e caulinares de plantas germinadas in vitro, inoculados em meio sólido B5 suplementado com 2,0 mg.mL-1 de ANA, são as melhores fontes para a produção de raízes, apresentando maiores valores de peso fresco e peso seco, mostrando-se um sistema promissor para a produção in vitro de metabólitos da espécie. A avaliação da atividade antimalárica in vivo revelou seu potencial a partir de extrato de raízes de planta cultivada in vivo, na concentração de 50 mg/kg apresentando redução significativa da parasitemia quando comparada com o controle não tratado. Paralelamente, nos testes in vitro a concentração de 100 μg/kg do extrato de raízes de planta cultivada in vivo apresentou diferença significativa quando comparada com as outras concentrações testadas e o controle negativo. Além disso, há uma tendência de aumento do efeito inibitório conforme o aumento da concentração do extrato. Os resultados indicam o potencial de atividade antimalárica em raízes de N. brasiliensis, sendo este estudo o primeiro realizado para a espécie / Malaria is an infectious disease caused by protozoa of the genus Plasmodium, transmitted to humans primarily through the bite of an infected mosquito. The treatment is accomplished through the use of drugs such as chloroquine, since there is no effective vaccine against the disease. However, the resistance of parasites to drugs has led to the search for new antimalarial substances, including vegetable. In this context, this study aimed to evaluate the antimalarial activity of methanol extracts of Norantea brasiliensis grown under conditions in vivo and in vitro, native species occurring in salt marshes, with proven medicinal potential for various activities. Protocols were developed callus and culture of roots of species in order to define a system for production of metabolites. For in vitro culture, explants were inoculated in liquid and solid media containing different growth regulators and concentrations. From the tissue culture material were tested extracts biotechnologically produced for comparison with plant material grown in the field. Tests on the potential in vivo antimalarial were performed using mice were infected by Plasmodium berghei ANKA, and in vitro using the Plasmodium falciparum. They were then administered chloroquine and plant extracts. The parasitemia was observed following the protocols established by the Laboratory of Immunopharmacology of the Oswaldo Cruz Institute (IOC). Results showed that stem and leaf explants of in vitro germinated seedlings were inoculated on B5 solid medium supplemented with 2.0 mg.mL-1 ANA, are the best sources for the production of roots, with highest values of fresh weight and dry weight and proved to be a promising system for in vitro production of metabolites of the species. The assessment of antimalarial activity in vivo has shown its potential to extract from plant roots grown in vivo at a concentration of 50 mg/kg showing significant reduction of parasitemia when compared with the untreated control. Similarly, in in vitro tests the concentration of 100 μg/kg of extract of roots of plants grown in vivo showed a significant difference when compared with other tested concentrations and negative control. Furthermore, there is a tendency to increase the inhibitory effect with increasing extract concentration. The results indicate the potential for antimalarial activity in roots of N. brasiliensis, which is the first study conducted for the species.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-02-07T15:24:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Edizon V. Lopes.pdf: 4850594 bytes, checksum: f3439ff70178fccde2f5d8fc7e63746f (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-02-07T15:24:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Edizon V. Lopes.pdf: 4850594 bytes, checksum: f3439ff70178fccde2f5d8fc7e63746f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-07T15:24:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Edizon V. Lopes.pdf: 4850594 bytes, checksum: f3439ff70178fccde2f5d8fc7e63746f (MD5) Previous issue date: 2015-04-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Bonamia ferruginea (Choisy) Hallier f., popularly known as cipó-tuíra is a small liana that has velvety, brown-colored leaves and stems. It is used by the Amazonian people in the treatment of malaria. In vitro antiplasmodial activity against Plasmodium falciparum was evaluated for extracts that were prepared by infusion and decoction of stem and leaf, and soxhlet extraction using chloroform, methanol and water as solvents. The methanol and aqueous leaf extracts were tested against Plasmodium berghei in vivo in mice. All extracts were inactive in vitro and in vivo. This work was performed to study the chemical composition of B. ferruginea. We opted for the chromatographic fractionation of the chloroform extract, although it was not considered active (40.6%) inhibition at 50 μg mL-1) against P. falciparum in the in vitro test. From the hexane extract of the stem of B. ferruginea the triterpenes lupeol, friedelin and glutinol were isolated. The chloroform extract of the stem provided the coumarins scopoletin and isofraxidin. A hemiterpene, 2-methyl-1,2,3,4-butanetetrol, was isolated from the ethyl acetate extract of the stem of B. ferriginea. The characterization of the isolated compounds was performed by spectroscopic techniques such as MS and one and two dimensional NMR, and comparison with literature data. / Bonamia ferruginea (Choisy) Hallier f., popularmente conhecida como cipó-tuíra, é uma liana de pequeno porte com caule e folhas aveludadas de cor marrom, utilizada pela população amazônica no tratamento de malária. No presente trabalho, foi avaliada a atividade antiplasmódica in vitro contra o Plasmodium falciparum dos extratos preparados por infusão e decocção de caule e folha, e extratos feitos das mesmas partes da planta, em aparelho de soxhlet com clorofórmio, metanol e água. Os extratos metanólico e aquoso da folha foram testados contra o Plasmodium berghei in vivo em camundongos. Os extratos não apresentaram atividade antimalárica in vitro ou in vivo. Também foi realizado um estudo da composição química de B. ferruginea. Optou-se pelo fracionamento cromatográfico do extrato clorofórmico do caule, mesmo não sendo considerado ativo (40,6% de inibição a 50 μg/mL-1) frente ao P. falciparum no teste in vitro. Do extrato hexânico proveniente do caule de B. ferruginea, foram isolados os triterpenos lupeol, friedelina e glutinol. Do extrato clorofórmico do caule, obtiveram-se as cumarinas escopoletina e isofraxidina e o hemiterpeno 2-metil-1, 2, 3, 4-butanotetrol, isolado do extrato acetato de etila do caule de B. ferriginea. A caracterização das substâncias isoladas foram realizada por técnicas espectroscópicas como EMAR e RMN uni e bidimensional, além de comparação com dados da literatura.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-28T11:14:22Z No. of bitstreams: 1 antonioviniciusdoriguettoferreira.pdf: 2820060 bytes, checksum: 3ecff4ce032ebee730a9907d3248b98a (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-28T12:25:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 antonioviniciusdoriguettoferreira.pdf: 2820060 bytes, checksum: 3ecff4ce032ebee730a9907d3248b98a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T12:25:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 antonioviniciusdoriguettoferreira.pdf: 2820060 bytes, checksum: 3ecff4ce032ebee730a9907d3248b98a (MD5) Previous issue date: 2013-07-30 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As espécies do gênero Andira (Fabaceae), popularmente conhecidas como “angelins”, destacam-se pelo uso popular como febrífugas, vermífugas e antimaláricas. Apesar das evidências da atividade antimalárica das espécies do gênero, existe uma carência de estudos químicos e biológicos em torno da espécie Andira nitida. Desta forma, este trabalho objetivou estabelecer o perfil químico e avaliar o potencial biológico de A. nitida, a fim de encontrar uma possível opção de novos alvos terapêuticos para o tratamento da malária. O perfil químico foi estabelecido por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia em fase líquida de alta eficiência (CLAE), após a análise dos cromatogramas constatou-se a presença de derivados fenólicos, especialmente, flavonoides como as isoflavonas e de derivados de catequina. O conteúdo de derivados fenólicos totais variou de 100-320 mg de equivalente em catequina/g amostra e de 90-280 mg de equivalente em ácido gálico/ g amostra, já o de isoflavonoides de 6,24-11,15 mg de equivalente em biochanina A/g amostra e o de flavonoides totais de 1,20-4,55 mg de equivalente em quercetina/g amostra. As CE50 para o método DPPH variaram de 5,99-31,90 μg/mL. Os valores da atividade antioxidante equivalente ao Trolox (TEAC) para as amostras foram de 0,161-0,693. Foi encontrada forte correlação entre atividade antioxidante por DPPH e o conteúdo de derivados fenólicos (Pearson > 0,9) e entre TEAC e o teor de flavonoides expressos em quercetina (Pearson > 0,83). A fração em hexano e em clorofórmio apresentaram CE50 de 40,5 μg/mL e 136,2 μg/mL, respectivamente, no ensaio de quantificação de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (SRAT). As amostras mais ativas no ensaio antiplasmodial (Teste LDH) foram as frações em hexano e em clorofórmio com 31% de inibição do crescimento de P. falciparum. Já no ensaio de inibição da polimerização da ferriprotoporfirina (FBIT) as CE50 variaram de 0,41-1,12 mg/mL sendo as frações em hexano, clorofórmio e em acetato de etila ativas, juntamente com o extrato lipofílico. In vivo, estas amostras a 200 mg/kg/dia foram ativas no teste de Peters com inibições da parasitemia de 39-75% no sétimo dia após a infeccção. Os resultados indicaram que A. nitida apresenta perfil químico predominante em isoflavonas, corroborado pela quantificação de isoflavonoides, dessa forma ratifica-se o papel das isoflavonas como possíveis marcadores quimiossistemáticos do gênero Andira, além de responsáveis, em parte, pela atividade antimalárica das espécies estudadas até o presente momento. Além disso, as amostras provenientes dos galhos de A. nitida podem ser fontes de substâncias bioativas com pronunciada atividade antioxidante, além de interessante atividade antimalárica. / The Andira species (Fabaceae), popularly known as "Angelins" stand out for popular use as febrifugue, vermifuge and antimalarial. Chemically they are characterized by the presence of phenolic derivatives such as isoflavones. However, despite evidence of antimalarial activity of the genus, there is a lack about chemical and biological studies of Andira nitida. So the present study aimed to establish the chemical profile and assess the biological potential of A. nitida, to find a possible option for new therapeutic targets for the malaria treatment. The chemical profile was established by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC), after analysis of the chromatograms; they showed the predominant presence of phenolic derivatives, especially flavonoids such as isoflavones and catechin derivatives. The contents of phenolic derivatives ranged from 100 to 320 mg catechin equivalent/g sample and from 90 to 280 mg gallic acid equivalent/g sample. The isoflavonoids content ranged from 6.24 to 11.15 mg equivalent biochanin A/g sample and flavonoids content ranged from 1.20 to 4.55 mg quercetin equivalent/g sample. The EC50 for DPPH ranged from 5.99-31.90 μg/mL.Trolox equivalent antioxidant activity (TEAC) values for the samples were 0.161 to 0.693. Strong correlation was found between oxidant activity by DPPH and content of phenolic derivatives (Pearson > 0.9) and between TEAC and the flavonoids content expressed in quercetin (Pearson > 0.83). The fraction in hexane and in chloroform showed EC50 of 40.5 μg/mL and 136.2 μg/mL, respectively; in the quantification of thiobarbituric acid reactive substances assay (TBARS). The more active samples in antiplasmodial assay (LDH testing) were the fractions in hexane and in chloroform with 31% inhibition of P. falciparum growth. In the ferriprotoporphyrin polymerization inhibition assay (FBIT) the EC50 ranging from 0.41 to 1.12 mg/ml and the fractions in hexane, in chloroform and in ethyl acetate were actives along with the lipophilic extract. In vivo, these samples at 200 mg/kg/day (Peters testing) showed parasitaemia inhibitions of 39-75 % in day 7 after infection. The results indicated that A. nitida presents chemical profile composed of isoflavones, corroborated by quantification of isoflavones, and thus confirms the role of isoflavones as potential chemosystematic markers of Andira genus. Futhermore, the samples from A. nitida can be a source of bioactive substances with pronounced antioxidant activity, as well as interesting antimalarial activity thus can be an alternative for future therapeutic applications.

Le paludisme est une maladie endémique sérieuse qui représente une menace importante de santé publique en Afrique, en Asie, Océanie, et en Amérique latine. En Amérique latine, les régions touchées sont principalement centrées autour de l'Amazonie brésilienne. En effet, le Brésil enregistre, chaque année, 100 000 nouveaux cas de paludisme. Aujourd’hui, même les Etats-Unis et l’Europe de l'ouest, qui ne sont pourtant pas des secteurs endémiques, enregistrent un nombre important et croissant de nouveaux cas, essentiellement dus à des voyageurs. Il y a également une recrudescence de la résistance du parasite, à l’origine du paludisme, aux molécules actuellement commercialisés. Par conséquent, la recherche de nouvelles molécules antipaludiques est un enjeu primordial. Nous avons observé que l’acide ursolique, extrait d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa, possédait une activité antipaludique intéressante. Ce travail de thèse a pour but l’extraction, l’hémisynthèse d’analogues de l’acide ursolique et enfin l’évaluation de l’activité antipaludique des composés ainsi obtenus. Le but de ce travail est d'augmenter l'activité antipaludique de l’acide ursolique, initialement décrite, par pharmacomodulation du noyau triterpénique en position 3 et 28. Sept produits naturels ont été extraits et purifiés à partir d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa. Il s’agit des triterpénes de l’acide ursolique et de l’acide oléanolique et les saponosides matésaponines peracetylées ou non. L’optimisation de l’activité antipaludique, par la synthèse de nouveaux analogues triterpéniques, a été basée sur l’hypothèse que l’activité antipaludique initialement observée était due à un mécanisme d’inhibition de la formation de la β-hémozoïne par l’acide ursolique. Ces analogues peuvent être classés selon trois séries : acides ursolique et oléanolique avec des modifications au niveau du cycle A, dérivés ferrocéniques de l'acide ursolique et dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Les meilleures activités ont été observées pour les derivés pipéraziniques de l’acide ursolique. En effet, sept nouveaux analogues ont démontré des activités intéressantes de l'ordre de nanomolaire (IC50 78 to 964 nM). Les activités obtenues représentent ainsi un gain d’activité au moins d’un facteur 100 par rapport à celle de l’acide ursolique. Une étude de structure-activité a été réalisée sur ces dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Ainsi, nous avons démontré l’importance du noyau triterpénique et du groupement acétyle en C-3 pour l’activité antipaludique. De même, l’importance des substitutions au niveau de l’azote terminal de la chaine bis-(3-aminopropyl)pipérazine, notamment de groupements hydrophiles, a aussi été réalisée par une étude de relation structure acivité quantitative (QSAR). Enfin, l’hypothèse que ces composés agissent sur l’inhibition de la formation de β-hémazoïne a été confirmée par des études in vitro (inhibition de la formation de la β-hématine) et de modélisation moléculaire. / A Malária é uma doença endêmica que representa um grave problema de saúde pública na África, Ásia, Oceania e América Latina. Na América latina as principais áreas endêmicas estão na Bacia Amazônica e, infelizmente, são registrados cem mil novos casos clínicos no Brasil anualmente. Atualmente, mesmo nos Estados Unidos e no Oeste da Europa, o número de casos de malária tem aumentado a cada ano devido aos viajantes que vêm de áreas de risco. Este trabalho apresenta a síntese de compostos visando aumentar a atividade antimalárica de triterpenos através de farmacomodulação, especialmente em C-3 e em C-28 dos ácidos ursólico e oleanólico. Sete produtos naturais foram obtidos a partir das espécies sul-americanas Ilex paraguariensis e Ilex dumosa: os triterpenos ácido ursólico e ácido oleanólico e as matessaponinas 1 e 3, bem como, os derivados peracetilados das matessaponinas 1, 2 e 3. Três séries de derivados triterpênicos foram sintetizadas: derivados dos ácidos ursólico e oleanólico com modificações no ciclo A, derivados ferrocênicos e derivados piperazínicos do ácido ursólico. Estes compostos foram testados in vitro frente a cepas de Plasmodium falciparum. Os derivados piperazínicos do ácido ursólico foram os mais ativos. Sete novos análogos apresentaram atividade em concentrações na ordem de nanomolar (IC50 78 a 964 nM), enquanto que a cloroquina apresentou IC50 de 130 nM. Baixos índices de resistência cruzada com a cloroquina foram observados. Este estudo também contribuiu para o melhor entendimento da relação estrutura-atividade (REA) para a classe de derivados piperazínicos do ácido ursólico. Desta forma, foi demonstrada a importância do esqueleto triterpênico e do grupamento acetila em C-3 para a atividade antimalárica. O grupamento piperazina foi identificado como farmacóforo nesta série de compostos. Foi caracterizada a importância de substituintes hidrofílicos no nitrogênio terminal da cadeia lateral bis-(3-aminopropil)piperazina através de um estudo de relação estrutura-atividade quantitativa (QSAR). O possível mecanismo de ação destes compostos foi sugerido via inibição da formação de β-hematina a partir de testes in vitro e de modelagem molecular.

Le paludisme est une maladie endémique sérieuse qui représente une menace importante de santé publique en Afrique, en Asie, Océanie, et en Amérique latine. En Amérique latine, les régions touchées sont principalement centrées autour de l'Amazonie brésilienne. En effet, le Brésil enregistre, chaque année, 100 000 nouveaux cas de paludisme. Aujourd’hui, même les Etats-Unis et l’Europe de l'ouest, qui ne sont pourtant pas des secteurs endémiques, enregistrent un nombre important et croissant de nouveaux cas, essentiellement dus à des voyageurs. Il y a également une recrudescence de la résistance du parasite, à l’origine du paludisme, aux molécules actuellement commercialisés. Par conséquent, la recherche de nouvelles molécules antipaludiques est un enjeu primordial. Nous avons observé que l’acide ursolique, extrait d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa, possédait une activité antipaludique intéressante. Ce travail de thèse a pour but l’extraction, l’hémisynthèse d’analogues de l’acide ursolique et enfin l’évaluation de l’activité antipaludique des composés ainsi obtenus. Le but de ce travail est d'augmenter l'activité antipaludique de l’acide ursolique, initialement décrite, par pharmacomodulation du noyau triterpénique en position 3 et 28. Sept produits naturels ont été extraits et purifiés à partir d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa. Il s’agit des triterpénes de l’acide ursolique et de l’acide oléanolique et les saponosides matésaponines peracetylées ou non. L’optimisation de l’activité antipaludique, par la synthèse de nouveaux analogues triterpéniques, a été basée sur l’hypothèse que l’activité antipaludique initialement observée était due à un mécanisme d’inhibition de la formation de la β-hémozoïne par l’acide ursolique. Ces analogues peuvent être classés selon trois séries : acides ursolique et oléanolique avec des modifications au niveau du cycle A, dérivés ferrocéniques de l'acide ursolique et dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Les meilleures activités ont été observées pour les derivés pipéraziniques de l’acide ursolique. En effet, sept nouveaux analogues ont démontré des activités intéressantes de l'ordre de nanomolaire (IC50 78 to 964 nM). Les activités obtenues représentent ainsi un gain d’activité au moins d’un facteur 100 par rapport à celle de l’acide ursolique. Une étude de structure-activité a été réalisée sur ces dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Ainsi, nous avons démontré l’importance du noyau triterpénique et du groupement acétyle en C-3 pour l’activité antipaludique. De même, l’importance des substitutions au niveau de l’azote terminal de la chaine bis-(3-aminopropyl)pipérazine, notamment de groupements hydrophiles, a aussi été réalisée par une étude de relation structure acivité quantitative (QSAR). Enfin, l’hypothèse que ces composés agissent sur l’inhibition de la formation de β-hémazoïne a été confirmée par des études in vitro (inhibition de la formation de la β-hématine) et de modélisation moléculaire. / A Malária é uma doença endêmica que representa um grave problema de saúde pública na África, Ásia, Oceania e América Latina. Na América latina as principais áreas endêmicas estão na Bacia Amazônica e, infelizmente, são registrados cem mil novos casos clínicos no Brasil anualmente. Atualmente, mesmo nos Estados Unidos e no Oeste da Europa, o número de casos de malária tem aumentado a cada ano devido aos viajantes que vêm de áreas de risco. Este trabalho apresenta a síntese de compostos visando aumentar a atividade antimalárica de triterpenos através de farmacomodulação, especialmente em C-3 e em C-28 dos ácidos ursólico e oleanólico. Sete produtos naturais foram obtidos a partir das espécies sul-americanas Ilex paraguariensis e Ilex dumosa: os triterpenos ácido ursólico e ácido oleanólico e as matessaponinas 1 e 3, bem como, os derivados peracetilados das matessaponinas 1, 2 e 3. Três séries de derivados triterpênicos foram sintetizadas: derivados dos ácidos ursólico e oleanólico com modificações no ciclo A, derivados ferrocênicos e derivados piperazínicos do ácido ursólico. Estes compostos foram testados in vitro frente a cepas de Plasmodium falciparum. Os derivados piperazínicos do ácido ursólico foram os mais ativos. Sete novos análogos apresentaram atividade em concentrações na ordem de nanomolar (IC50 78 a 964 nM), enquanto que a cloroquina apresentou IC50 de 130 nM. Baixos índices de resistência cruzada com a cloroquina foram observados. Este estudo também contribuiu para o melhor entendimento da relação estrutura-atividade (REA) para a classe de derivados piperazínicos do ácido ursólico. Desta forma, foi demonstrada a importância do esqueleto triterpênico e do grupamento acetila em C-3 para a atividade antimalárica. O grupamento piperazina foi identificado como farmacóforo nesta série de compostos. Foi caracterizada a importância de substituintes hidrofílicos no nitrogênio terminal da cadeia lateral bis-(3-aminopropil)piperazina através de um estudo de relação estrutura-atividade quantitativa (QSAR). O possível mecanismo de ação destes compostos foi sugerido via inibição da formação de β-hematina a partir de testes in vitro e de modelagem molecular.

Le paludisme est une maladie endémique sérieuse qui représente une menace importante de santé publique en Afrique, en Asie, Océanie, et en Amérique latine. En Amérique latine, les régions touchées sont principalement centrées autour de l'Amazonie brésilienne. En effet, le Brésil enregistre, chaque année, 100 000 nouveaux cas de paludisme. Aujourd’hui, même les Etats-Unis et l’Europe de l'ouest, qui ne sont pourtant pas des secteurs endémiques, enregistrent un nombre important et croissant de nouveaux cas, essentiellement dus à des voyageurs. Il y a également une recrudescence de la résistance du parasite, à l’origine du paludisme, aux molécules actuellement commercialisés. Par conséquent, la recherche de nouvelles molécules antipaludiques est un enjeu primordial. Nous avons observé que l’acide ursolique, extrait d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa, possédait une activité antipaludique intéressante. Ce travail de thèse a pour but l’extraction, l’hémisynthèse d’analogues de l’acide ursolique et enfin l’évaluation de l’activité antipaludique des composés ainsi obtenus. Le but de ce travail est d'augmenter l'activité antipaludique de l’acide ursolique, initialement décrite, par pharmacomodulation du noyau triterpénique en position 3 et 28. Sept produits naturels ont été extraits et purifiés à partir d’espèces sud americainnes Ilex paraguariensis et Ilex dumosa. Il s’agit des triterpénes de l’acide ursolique et de l’acide oléanolique et les saponosides matésaponines peracetylées ou non. L’optimisation de l’activité antipaludique, par la synthèse de nouveaux analogues triterpéniques, a été basée sur l’hypothèse que l’activité antipaludique initialement observée était due à un mécanisme d’inhibition de la formation de la β-hémozoïne par l’acide ursolique. Ces analogues peuvent être classés selon trois séries : acides ursolique et oléanolique avec des modifications au niveau du cycle A, dérivés ferrocéniques de l'acide ursolique et dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Les meilleures activités ont été observées pour les derivés pipéraziniques de l’acide ursolique. En effet, sept nouveaux analogues ont démontré des activités intéressantes de l'ordre de nanomolaire (IC50 78 to 964 nM). Les activités obtenues représentent ainsi un gain d’activité au moins d’un facteur 100 par rapport à celle de l’acide ursolique. Une étude de structure-activité a été réalisée sur ces dérivés pipéraziniques de l'acide ursolique. Ainsi, nous avons démontré l’importance du noyau triterpénique et du groupement acétyle en C-3 pour l’activité antipaludique. De même, l’importance des substitutions au niveau de l’azote terminal de la chaine bis-(3-aminopropyl)pipérazine, notamment de groupements hydrophiles, a aussi été réalisée par une étude de relation structure acivité quantitative (QSAR). Enfin, l’hypothèse que ces composés agissent sur l’inhibition de la formation de β-hémazoïne a été confirmée par des études in vitro (inhibition de la formation de la β-hématine) et de modélisation moléculaire. / A Malária é uma doença endêmica que representa um grave problema de saúde pública na África, Ásia, Oceania e América Latina. Na América latina as principais áreas endêmicas estão na Bacia Amazônica e, infelizmente, são registrados cem mil novos casos clínicos no Brasil anualmente. Atualmente, mesmo nos Estados Unidos e no Oeste da Europa, o número de casos de malária tem aumentado a cada ano devido aos viajantes que vêm de áreas de risco. Este trabalho apresenta a síntese de compostos visando aumentar a atividade antimalárica de triterpenos através de farmacomodulação, especialmente em C-3 e em C-28 dos ácidos ursólico e oleanólico. Sete produtos naturais foram obtidos a partir das espécies sul-americanas Ilex paraguariensis e Ilex dumosa: os triterpenos ácido ursólico e ácido oleanólico e as matessaponinas 1 e 3, bem como, os derivados peracetilados das matessaponinas 1, 2 e 3. Três séries de derivados triterpênicos foram sintetizadas: derivados dos ácidos ursólico e oleanólico com modificações no ciclo A, derivados ferrocênicos e derivados piperazínicos do ácido ursólico. Estes compostos foram testados in vitro frente a cepas de Plasmodium falciparum. Os derivados piperazínicos do ácido ursólico foram os mais ativos. Sete novos análogos apresentaram atividade em concentrações na ordem de nanomolar (IC50 78 a 964 nM), enquanto que a cloroquina apresentou IC50 de 130 nM. Baixos índices de resistência cruzada com a cloroquina foram observados. Este estudo também contribuiu para o melhor entendimento da relação estrutura-atividade (REA) para a classe de derivados piperazínicos do ácido ursólico. Desta forma, foi demonstrada a importância do esqueleto triterpênico e do grupamento acetila em C-3 para a atividade antimalárica. O grupamento piperazina foi identificado como farmacóforo nesta série de compostos. Foi caracterizada a importância de substituintes hidrofílicos no nitrogênio terminal da cadeia lateral bis-(3-aminopropil)piperazina através de um estudo de relação estrutura-atividade quantitativa (QSAR). O possível mecanismo de ação destes compostos foi sugerido via inibição da formação de β-hematina a partir de testes in vitro e de modelagem molecular.

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