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Identificação e caracterização de genes cry3, vip1, vip2 E vip1/vip2 em isolados de Bacillus thuringiensis E toxicidade em larvas de Anthonomus grandis (Boheman, 1883) (Coleoptera: curculionidae) /Alves, Meire de Cássia. January 2011 (has links)
Resumo: O controle biológico utilizando microrganismos vem sendo estudado como uma alternativa ao uso de agroquímicos. Estes pesticidas poluem o ambiente, além de serem tóxicos a diversas espécies vegetais e animais. Diante disso, a bactéria Bacillus thuringiensis é um importante entomopatógeno que vem sendo utilizado na agricultura pelo fato de secretar proteínas que são tóxicas a insetos pertencentes a diversas ordens. Dentre os diversos genes de B. thuringiensis que codificam proteínas tóxicas, as classes vip1, vip2 e cry3 destacam-se como alternativa para o controle de insetos-praga da ordem Coleoptera. O presente trabalho objetivou a identificação e caracterização molecular, por meio da técnica de PCR-RFLP, dos genes cry3, vip1, vip2 e vip1/vip2 em uma coleção de B. thuringiensis, quanto a possíveis polimorfismos existentes, procurando relacioná-los à toxicidade em larvas de Anthonomus grandis. Da análise de 1078 isolados de B. thuringiensis, foram encontrados 151 isolados positivos para os genes em estudo e 14 perfis polimórficos, indicando a presença de subclasses destes genes. Os resultados obtidos nos ensaios de toxicidade indicam que os polimorfismos gênicos podem apresentar interferência na toxicidade das proteínas, sendo que a toxina Cry3 apresentou uma maior efetividade na mortalidade em larvas de A. grandis. Os resultados também evidenciaram que a PCR-RFLP mostrou-se apropriada para a detecção da variabilidade genética em B. thuringiensis, permitindo a identificação de haplótipos / Abstract: Biological control using microorganisms is being studied as an alternative to the use of agrochemicals. These pesticides pollute the environment, being toxic to many species of plants and animals. For these reasons, the bacterium Bacillus thuringiensis is an important entomopathogen that has been used in agriculture, once it produces proteins that are toxic to many target insect orders. Among several genes from B. thuringiensis that encode toxic proteins there are vip1, vip2 and cry3 classes that stand as an alternative for controlling insect pests belonging the Coleoptera order. The objective of this work was to identify and characterize molecularly, through PCR-RFLP, the genes cry3, vip1, vip2 and vip1/vip2 in a collection of B. thuringiensis, for possible polymorphisms exist, trying to relate them to the toxicity in Anthonomus grandis larvae. Analysis of 1078 isolates of B. thuringiensis, were found 151 positive isolates for the genes under study and 10 polymorphic profiles, which indicate the presence of subclasses of the genes. These results obtained in tests toxicity indicate that polymorphisms gene may have interference with the toxicity of the protein, and the toxin Cry3 showed a greater effectiveness in mortality in A. grandis larvae. These results also showed that the PCR-RFLP proved to be suitable for the detection of genetic variability in B. thuringiensis, allowing the identification of haplotypes / Orientador: Janete Apparecida Desidério / Coorientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Maria Inês Tiraboschi Ferro / Banca: José Roberto Postali Parra / Mestre
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Comportamento alimentar e distribuição vertical de botões florais atacados por Anthonomus grandis Boh. em cultivares de algodoeiro /Grigolli, José Fernando Jurca. January 2012 (has links)
Orientador: Antonio Carlos Busoli / Banca: Marcos Gino Fernandes / Banca: Arlindo Leal Boiça Júnior / Resumo: O conhecimento do comportamento de uma praga é fundamental para o entendimento da intensidade de seus danos. O objetivou deste trabalho foi estudar o comportamento de alimentação e produção de danos por Anthonomus grandis em cinco cultivares de algodoeiro, avaliando as épocas de maior e menor preferência alimentar e de oviposição de A. grandis, a distribuição vertical no dossel das plantas de botões florais com orifícios de alimentação e oviposição, a preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o respectivo tempo de abscisão. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso em esquema de parcelas subdivididas com oito repetições. Semanalmente foram avaliadas 5 plantas/parcela. Para o estudo da preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o tempo para sua abscisão, utilizou-se 20 botões florais ao acaso por cultivar, avaliados acompanhados diariamente. NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910 foram utilizadas para alimentação em todo período de florescimento e frutificação das plantas e FMT-701 e FMX-993 apenas no início e no final deste período. DeltaOPAL, FMX-910 e FMX-993 foram utilizadas para oviposição em todo período de florescimento e frutificação das plantas e NuOPAL e FMT-701, apenas no início e no final deste período. Botões florais do terço superior foram mais preferidos para oviposição e botões florais dos terços médio e superior para alimentação. A preferência alimentar foi maior sobre botões florais com 2 dias em NuOPAL e FMX-910 e com 7 dias em DeltaOPAL, FMT-710 e FMX-993. Nas 5 cultivares o tempo para abscisão dos botões florais foi 1 a 2 dias após a primeira punctura de alimentação / Abstract: The knowledge of a pest behavior is essential for the damage intensity understanding. The objective was to study the feeding behaviour and damage output by Anthonomus grandis in five cotton cultivars. It was evaluated the period of A. grandis major and minor feeding and oviposition preference, the within-plant distribution of flower buds with feeding and oviposition punctures on the plant canopy, the feeding preference for squares at different ages and also the square abscission time after the first feeding puncture. It was used a randomized block design in a split plot design with eight repetitions. Evaluations were performed weekly on five plants per plot. For feeding preference for squares at different ages and the time for its abscission after the first feeding puncture study, were observed in 20 plants/cultivar 20 randomly squares, which were monitored daily. NuOPAL, DeltaOPAL, and FMX-910 were used for feeding throughout the flowering and fruiting period, and FMT-701 and FMX-993 only at the beginning and end of this period. DeltaOPAL, FMX-910, and FMX-993 were used for oviposition throughout the flowering and fruiting period, and NuOPAL and FMT-701 only at the beginning and end of this period. It was observed a feeding preference for flower buds on the medium ans upper parts of the plants and oviposition preference for flower buds on the upper part of the plants for all five cultivars. The boll weevil feeding preference was on squares with two days on NuOPAL and FMX-910 and seven days on DeltaOPAL, FMT-701, and FMX-993. The square abscission time was 1 to 2 days after the first feeding puncture in all cultivars / Mestre
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