Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-07Bitstream added on 2014-06-13T19:40:32Z : No. of bitstreams: 1 silva_ncc_dr_botib.pdf: 675325 bytes, checksum: 770804101b6bf91187e2941b56d767bb (MD5) / Staphylococcus sp é agente comum da mastite bovina, causando grandes perdas econômicas na pecuária brasileira. Esse micro-organismo possui fatores de virulência bastante conhecidos como a produção de hemolisinas, leucotoxinas e superantígenos como a toxina do síndrome do choque tóxico e enterotoxinas. Além disso, várias espécies de Staphylococcus podem adquirir genes de resistência aos antibióticos β lactâmicos. O objetivo do estudo foi caracterizar molecularmente isolados de Staphylococcus sp provenientes de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de várias regiões do estado de São Paulo. Foram realizadas coletas de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de diferentes fazendas no estado de São Paulo e realizados testes fenótipicos de resistência a antimicrobianos e de virulência (Toxina de Panton Valentine, sindrome do choque tóxico e toxinas esfoliativas), além de testes moleculares como Pulse Field Gel Eletrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) e Spa typing para comparação entre as cepas epidemiologicamente importantes e da tipagem do cromossomo cassette estafilocócico em cepas meticilina reistentes. As cepas resistentes a meticilina apresentaram amplo perfil de resistência e genes de resistência importantes e pouco relatados, sendo observados genes como fexA, lsaE, lnuB. Foram detectados dois novos spatyping (t10852 e t10856), bem como um novo alelo yqiL e um novo ST (2493). Os ECNs apresentaram resistências à maioria dos antibióticos estudados e foi observado a uma deleção no gene ermC, que codifica a resistência à eritromicina. / Staphylococcus sp. is the common agent of bovine mastitis, causing big economic losses in Brazilian cattle. This micro-organism have virulence factors have been well known as the production of hemolysin, and leucotoxinas toxin superantigens such as toxic shock syndrome and enterotoxins. In addition, several Staphylococcus species can acquire antibiotic resistance genes β lactamics. The objective of the study is to characterize molecularly Staphylococcus sp. from milk of cows with subclinical mastitis in various regions of the state of São Paulo. Samples were coleted from milk of cows with subclinical and clinical mastitis from different farms in the state of São Paulo. Tests were performed phenotypic antimicrobial resistance and virulence (toxin Panton Valentine, toxic shock syndrome and exfoliative toxins), molecular tests as Eletrophoresis Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) and spa typing for comparison between epidemiologically important strains, as well as the typing of strains in staphylococcal cassette chromosome methicillin reistentes. Methicillin-resistant strains showed broad resistance profile and resistance genes important and underreported were detected as fexA, lsaE, lnuB. Two new spatyping (t10852 and t10856) were detected as well as a new allele yqiL and a new ST (2493). The ECN showed resistance to most antibiotics and was observed the deletion in ermC gene encoding resistance to erythromycin.

Orientador: José Carlos de Figueiredo Pantoja / Banca: Hélio Langoni / Banca: Paulo Fernando Machado / Resumo: Os objetivos foram descrever e identificar fatores da cama associados à concentração bacteriana no leite e na cama, índices epidemiológicos de mastite e higiene animal em rebanhos alojados no sistema de compostagem. Três fazendas foram visitadas mensalmente durante um ano. Amostras foram colhidas do leite do tanque e de casos de mastite para exame microbiológico. Foram avaliados escores de limpeza do flanco, perna, teta e úbere. Amostras da cama foram coletadas para estimar concentrações bacterianas e características físico-químicas. Matéria orgânica, densidade e a relação carbono-nitrogênio foram associados a concentrações bacterianas na cama. A temperatura na camada profunda foi maior do que a da superfície, mas não o suficiente para diminuir substancialmente as concentrações de bactérias totais, estreptococos e coliformes na cama. Exceto em situações de erros de manejo, parâmetros como a temperatura, matéria orgânica, umidade, densidade e relação carbono-nitrogênio foram mantidas dentro de limites de controle durante o estudo. Coliformes e estreptococos ambientais foram os patógenos mais freqüentes isolados nos casos de mastite clínica. A prevalência de mastite causada por patógenos ambientais que podem causar surtos de mastite intratável não foi preocupante. Surtos de mastite ambiental não foram observados. Os resultados do presente estudo indicam que níveis baixos de umidade e densidade da cama estão associados a diminuição do risco de mastite clínica e melhora da limpeza dos animais, respectivamente. Os resultados desta pesquisa podem ser usados para reduzir o risco de mastite de animais alojados em sistema de compostagem / Abstract: Os objetivos foram descrever e identificar fatores da cama associados à concentração bacteriana no leite e na cama, índices epidemiológicos de mastite e higiene animal em rebanhos alojados no sistema de compostagem. Três fazendas foram visitadas mensalmente durante um ano. Amostras foram colhidas do leite do tanque e de casos de mastite para exame microbiológico. Foram avaliados escores de limpeza do flanco, perna, teta e úbere. Amostras da cama foram coletadas para estimar concentrações bacterianas e características físico-químicas. Matéria orgânica, densidade e a relação carbono-nitrogênio foram associados a concentrações bacterianas na cama. A temperatura na camada profunda foi maior do que a da superfície, mas não o suficiente para diminuir substancialmente as concentrações de bactérias totais, estreptococos e coliformes na cama. Exceto em situações de erros de manejo, parâmetros como a temperatura, matéria orgânica, umidade, densidade e relação carbono-nitrogênio foram mantidas dentro de limites de controle durante o estudo. Coliformes e estreptococos ambientais foram os patógenos mais freqüentes isolados nos casos de mastite clínica. A prevalência de mastite causada por patógenos ambientais que podem causar surtos de mastite intratável não foi preocupante. Surtos de mastite ambiental não foram observados. Os resultados do presente estudo indicam que níveis baixos de umidade e densidade da cama estão associados a diminuição do risco de mastite clínica e melhora da limpeza dos animais, respectivamente. Os resultados desta pesquisa podem ser usados para reduzir o risco de mastite de animais alojados em sistema de compostagem / Mestre

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-14Bitstream added on 2015-04-09T12:48:09Z : No. of bitstreams: 1 000814014.pdf: 1627484 bytes, checksum: ce0b86b09943b35b985a7f8be30c27d6 (MD5) / Infecções pelo hemoprotozoário T. vivax causam grandes prejuízos à pecuária da África e Américas Central e do Sul. Surtos devido a este protozoário têm ocorrido com frequência cada vez maior no Brasil. O conhecimento das alterações que ocorrem durante a evolução desta enfermidade podem ser de grande valia. Para tanto foram estudados os sinais clínicos, parasitemia, alterações hematológicas, bioquímicas, sorológicas e anatomopatológicas de três bovinos naturalmente infectados (grupo N) e outros três experimentalmente infectados (grupo E) pelo T. vivax. com média de peso de 500 kg e 548 kg, respectivamente. O período pré-patente foi de dois a três dias (grupo E). Animais do grupo N apresentaram perda de peso intensa (140 Kg). No grupo E observou-se constante diminuição da contagem global de eritrócitos, teor de hemoglobina e volume globular (VG). O leucograma revelou alterações mais evidentes para o grupo E, com leucopenia por neutropenia e linfopenia durante a fase aguda da enfermidade. O grupo N apresentou um quadro de leucocitose por neutrofilia. Foram observados diminuição do colesterol total, colesterol ligado ao HDL, albumina, aspartato aminotransferase (AST), lactato desidrogenase (LDH) e aumento da glicose, globulinas, proteínas e fosfatase alcalina (FA) para o grupo E. Os animais do grupo E mostraram-se positivos tanto para Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) quanto para o ensaio de imunoabsorção enzimático (ELISA), fato que não ocorreu no grupo N, sendo este positivo para RIFI e alternando entre períodos positivos e negativos frente ao ELISA. No proteinograma, os bovinos do grupo E apresentaram inicialmente um incremento de ceruloplasmina, com posterior redução; valores elevados de transferrina praticamente por todo o período experimental; e um aumento inicial de haptoglobina com posterior redução. O grupo N apresentou valores baixos de ceruloplasmina, transferrina e ... / Infections by T. vivax cause great losses to livestock in Africa and Central and South America. Outbreaks due to this parasite have been occurred with increasing frequency in Brazil. Knowledge of changes that occur during the development of disease can be of great value. In order to evaluate clinical signs, parasitemia, hematologic, biochemical, serological and pathological changes caused by T. vivax, three naturally (group N) and three experimentally (group E) infected bovines by T. vivax, with an average weight of 500 and 548 kg, respectively, were studied. The observed prepatent period was two to three days (group E). Animals of group N showed severe weight loss (140 kg). Reduction of erythrocyte numbers, hemoglobin concentration and PCV were observed in group E. WBC showed pronounced changes for group E, such as severe neutropenia and lymphopenia during the acute phase of the illness. Group N showed leukocytosis by neutrophilia. Decrease in total cholesterol, HDL cholesterol, albumin, aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase (LDH), and increased in glucose, globulin, protein, and alkaline phosphatase (ALP) were observed in group E. Animals from group E were positive for both Immunofluorescence Assay (IFA) and for the Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), which did not occur in group N that was positive in IFAT and alternating between positive and negative periods in ELISA. Proteinogram of group E showed initially an increase of ceruloplasmin, which was later reduced, high values of transferrin almost the entire experimental period. On the hand, haptoglobin showed an initial increase with subsequent reduction in group E. In group N, low levels of ceruloplasmin, transferrin and haptoglobin were observed. Histopathological examination showed alterations mainly in were liver, spleen, heart, lung, lymph node, kidney and central nervous system. Changes mainly consisted in mononuclear inflammatory infiltrate in liver ...

Orientador: Vera Lucia Mores Rall / Coorientador: João Pessoa Araujo junior / Banca: Ary Fernandes Junior / Banca: Carlos Henrique Camargo / Banca: José Paes de Almeida Nogueira / Banca: Lina Casale Aragon-Alegro / Resumo: Staphylococcus sp é agente comum da mastite bovina, causando grandes perdas econômicas na pecuária brasileira. Esse micro-organismo possui fatores de virulência bastante conhecidos como a produção de hemolisinas, leucotoxinas e superantígenos como a toxina do síndrome do choque tóxico e enterotoxinas. Além disso, várias espécies de Staphylococcus podem adquirir genes de resistência aos antibióticos β lactâmicos. O objetivo do estudo foi caracterizar molecularmente isolados de Staphylococcus sp provenientes de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de várias regiões do estado de São Paulo. Foram realizadas coletas de leite de vacas com mastite clinica e subclínica de diferentes fazendas no estado de São Paulo e realizados testes fenótipicos de resistência a antimicrobianos e de virulência (Toxina de Panton Valentine, sindrome do choque tóxico e toxinas esfoliativas), além de testes moleculares como Pulse Field Gel Eletrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) e Spa typing para comparação entre as cepas epidemiologicamente importantes e da tipagem do cromossomo cassette estafilocócico em cepas meticilina reistentes. As cepas resistentes a meticilina apresentaram amplo perfil de resistência e genes de resistência importantes e pouco relatados, sendo observados genes como fexA, lsaE, lnuB. Foram detectados dois novos spatyping (t10852 e t10856), bem como um novo alelo yqiL e um novo ST (2493). Os ECNs apresentaram resistências à maioria dos antibióticos estudados e foi observado a uma deleção no gene ermC, que codifica a resistência à eritromicina. / Abstract: Staphylococcus sp. is the common agent of bovine mastitis, causing big economic losses in Brazilian cattle. This micro-organism have virulence factors have been well known as the production of hemolysin, and leucotoxinas toxin superantigens such as toxic shock syndrome and enterotoxins. In addition, several Staphylococcus species can acquire antibiotic resistance genes β lactamics. The objective of the study is to characterize molecularly Staphylococcus sp. from milk of cows with subclinical mastitis in various regions of the state of São Paulo. Samples were coleted from milk of cows with subclinical and clinical mastitis from different farms in the state of São Paulo. Tests were performed phenotypic antimicrobial resistance and virulence (toxin Panton Valentine, toxic shock syndrome and exfoliative toxins), molecular tests as Eletrophoresis Pulse Field Gel Electrophoresis (PFGE), Multiloccus Sequence Typing (MLST) and spa typing for comparison between epidemiologically important strains, as well as the typing of strains in staphylococcal cassette chromosome methicillin reistentes. Methicillin-resistant strains showed broad resistance profile and resistance genes important and underreported were detected as fexA, lsaE, lnuB. Two new spatyping (t10852 and t10856) were detected as well as a new allele yqiL and a new ST (2493). The ECN showed resistance to most antibiotics and was observed the deletion in ermC gene encoding resistance to erythromycin. / Doutor

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-12-16T08:30:10Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958308 bytes, checksum: 9c5736945cebbeb560b27c1893c60060 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-16T08:30:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958308 bytes, checksum: 9c5736945cebbeb560b27c1893c60060 (MD5) Previous issue date: 2014-03-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tomando como base clones de Pichia pastoris transfretados com o gene desenhado a partir do peptídeo sintético SBbo23290, iniciou-se a produção do antígeno recombinante em leveduras Pichia pastoris. O material recuperado foi filtrado e concentrado em membranas de Amicon, com tamanho de filtro de 30 kDa e 3 kDa. Para garantir o máximo de proteína antigênica purificada, para ser usada em teste como candidato vacinal em Bovinos Bos taurus taurus com idade entre 8-12 meses, os quais receberam três imunizações subcutâneas com intervalo de 30 dias do peptídeo recombinante rBbo23290 mais saponina, 30 dias após da ultima imunização, os bovinos foram desafiados com amostra virulenta de B. bovis avaliando-se parâmetros clínicos como; hematócrito, parasitemia e temperatura, além do acompanhamento do desenvolvimento da resposta imune humoral, mediante quantificação de IgG total. Os parâmetros hematológicos e a temperatura foram analisados semanalmente durante o período de imunização, e diariamente a partir do 7o dia pós-desafio com o parasita. Os exames sorológicos foram realizados semanalmente durante todo o experimento, os resultados deste experimento demostraram que o peptídeo recombinante tem atividade imunogênica que foi comprovado com o incremento nos níveis de IgG total, mas na hora do desafio biológico evidenciou-se alguma possível falha na diluição do imunógeno ou uma alta dose na inoculação do parasita patogênico, o qual desenvolveu uma resposta diferente da esperada em alguns dos animais vacinados, mesmo assim conseguiu- se demostrar que o peptídeo recombinante possui atividade imunogênica, e pode ser considerado como um potente candidato vacinal para o controle da doença causada pela B. bovis. Precisam-se estudos adicionais para medir e quantificar o tipo de resposta produzida pela imunização, a dosificação ideal para obter a melhor resposta imune nos bovinos. Também, análise das variáveis físicas químicas e biológicas do peptídeo rBbo23290 para entender a influência do tipo e a intensidade da resposta imunológica dos animais no momento da inoculação e no desafio biológico. / Pichia pastoris clones expressing the synthetic peptide SBbo23290 were used to produce this recombinant antigen. The recombinant peptide rBbo 23290 with saponin was used to vaccinate bovines Bos taurus taurus. The animals were then challenged with virulent strain Babesia bovis. As clinical parameters were monitored: hematocrit, hemoglobine, parasitemy, and temperature. Furthermore, the IgG was quantified. Our results showed that some of the vaccinated animals presented an unexpected reaction. This could be due either to a mistake on the dilution of the peptide, or to an unproved higher inoculation of the pathogen strain. Nevertheless, it was demonstrated that our synthetic antigen was immunogenic, based on the increase total levels of IgG. Therefore, it could be considered as a candidate to control bovine babesiosis by B. bovis. Nonetheless, future research is needed to measure and quantify the response activated by the immunization. Furthermore, a suitable dose should be established, aiming to obtain an optimal immunological response. Moreover, it will be worthy to analyze physical, chemical, and biological parameters of this protein, which probably influence the immunological response of the animals.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-12-13T12:08:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-13T12:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / Mastite é uma inflamação da glândula mamária e é apontada como a maior causa de perdas econômicas na cadeia láctea mundial. As espécies de Streptococcus estão entre os principais patógenos da mastite. É notável a emergência de patógenos resistentes aos compostos tradicionalmente usados para o controle de doenças. Dessa forma, novas alternativas têm sido buscadas nos produtos naturais, destacando-se as plantas. Rheedia brasiliensis é muito utilizada na medicina popular brasileira com diversos fins terapêuticos. Foi isolado de seu fruto a benzofenona 7-epiclusianona. Uma boa estratégia para aumentar a atividade antimicrobiana é complexar moléculas ativas com metais. Assim, foi sintetizado um complexo metálico composto por duas moléculas de 7-epiclusianona com cobre. O objetivo do presente trabalho foi verificar a atividade de 7-epiclusianona (7-epi) e do complexo metálico 7- epiclusianona-cobre (7-epi-Cu) sobre bactérias do gênero Streptococcus isoladas de mastite bovina, e avaliar a citotoxidade dessas moléculas sobre células MAC-T. Foram utilizados para esse estudo quatro isolados de mastite bovina, dois de Streptococcus agalactiae (SA3930 e SA4038) e dois de Streptococcus uberis (SU959 e SU3580). Eles foram submetidos ao teste de concentração inibitória mínima (CIM) através da microdiluição em caldo, e também foi determinada a concentração bactericida mínima (CBM) em caldo. A curva de tempo de morte foi traçada a partir da contagem de Unidades Formadoras de Colônias em tempos pré-determinados durante 24 horas com os isolados submetidos à CIM e à CBM. O conteúdo de proteína no sobrenadante foi determinado pela centrifugação da suspensão bacteriana tratada com a CIM dos dois compostos, através do método de Bradford. Para avaliar a indução da aderência, foi utilizada uma concentração subinibitória dos compostos. O efeito citotóxico dos compostos foi medido através dos ensaios do MTT e da captação de vermelho neutro sobre células MAC-T. As médias obtidas nos ensaios de MTT, vermelho neutro, teste de liberação de proteínas e avaliação da aderência foram comparas pelo ANOVA seguido pelo Tukey. O nível de significância adotado foi 95% (p<0,05). As CIMs encontradas para os compostos 7-epi e 7-epiCu foram de 7,8 μg mL -1 para as cepas SA4038, SU959 e SU3580. A cepa SA3930 foi resistente a maior concentração testada (125 μg mL -1 ). A CBM para SA4038 com 7-epi foi 15,6 μg mL -1 , para as demais combinações composto/isolado foi 31,3 μg mL -1 . A dinâmica da curva de tempo de morte para os compostos mostrou ação bacteriostática de uma maneira tempo/dose-independente. Não foi evidenciada a presença de proteína no sobrenadante das culturas tratadas com os compostos. 7-epi e 7-epi-Cu que, em subdose, não induziram a aderência das bactérias S. agalactiae e S. uberis. Ambos compostos não apresentaram atividade citotóxica quando na CIM para as células MAC-T, porém foram tóxicos na concentração 7×CIM. Os compostos testados apresentaram excelentes resultados quanto à sua atividade contra essas bactérias Gram-positivas. Uma vez que os resultados dos dois compostos avaliados foram semelhantes, seria mais recomendada a utilização de 7-epi, por ser mais simples e barata sua produção. / Mastitis is an inflammation of the mammary gland and is identified as the major cause of economic losses in global dairy chain. Streptococcus species are among the main mastitis pathogens. It is remarkable the emergence of resistant pathogens to compounds traditionally used for disease control. Thus, new alternatives have been researched in natural products, especially plants. Rheedia brasiliensis is widely used in Brazilian folk medicine with various therapeutic purposes. It was isolated from its fruit the benzophenone 7- epiclusianone. A good strategy to enhance the antimicrobial activity is complex active molecules with metals. Then it was synthesized a metal complex with two molecules of 7-epiclusianone with copper. The aim of this study was to determine the activity of 7-epiclusianone (7-epi) and the metal complex 7- epiclusianone-copper (7-epi-Cu) on bovine mastitis isolated Streptococcus spp, and assess the cytotoxicity of these molecules on MAC-T cells. Were used for this study four bovine mastitis isolates, two Streptococcus agalactiae (SA3930 and SA4038) and two Streptococcus uberis (SU959 and SU3580). They were subjected to a minimum inhibitory concentration test (MIC) by broth microdilution and minimum bactericidal concentration (MBC) test in broth. Time- kill curve was plotted from Forming Units Colony count at predetermined times during 24 hours with the isolates submitted to the CIM and CBM. The protein content in the supernatant was determined by centrifugation of bacterial suspension treated with MIC of both compound by Bradford’s method. To evaluate the induction of adhesion one sub-inhibitory concentration of the compounds was used. Cytotoxic effect of the compounds was measured through MTT assay and neutral red uptake on MAC-T cells. The average obtained in the MTT assay, neutral red uptake, protein leakage and adherence evaluation were compared by ANOVA followed by Tukey. The significance level was 5% (p <0.05). The MICs found for compounds 7-epi and 7 –epi-Cu was 7.8 μg mL -1 to SA4038, SU959 and SU3580 strains. SA3930 strain was resistant to the highest concentration tested (125 μg mL -1 ). CBM for SA4038 with 7-epi was 15.6 μg mL -1 , for the other combinations compound/strain was 31.3 μg mL -1 . Time-kill curve dynamic of compounds showed bacteriostatic action in a manner time/dose independent. There was no evidence of protein in supernatant of cultures treated with the compounds. 7-epi-7-epi-Cu, in sub-doses, no induced S. agalactiae and S. uberis adhesion. Compounds tested showed no cytotoxic activity when at the MIC for the MAC-T cells, but were toxic in 7×CIM. Two compounds tested had excellent results for their activity against these Gram- positive bacteria. Since results of both compounds evaluated were similar, would most recommended use of 7-epi, because its simpler and cheaper production.

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:19Z : No. of bitstreams: 1 000851773.pdf: 1542638 bytes, checksum: db0fc6c12e50c0ce57a7bd6219c505f8 (MD5) / Os objetivos foram descrever e identificar fatores da cama associados à concentração bacteriana no leite e na cama, índices epidemiológicos de mastite e higiene animal em rebanhos alojados no sistema de compostagem. Três fazendas foram visitadas mensalmente durante um ano. Amostras foram colhidas do leite do tanque e de casos de mastite para exame microbiológico. Foram avaliados escores de limpeza do flanco, perna, teta e úbere. Amostras da cama foram coletadas para estimar concentrações bacterianas e características físico-químicas. Matéria orgânica, densidade e a relação carbono-nitrogênio foram associados a concentrações bacterianas na cama. A temperatura na camada profunda foi maior do que a da superfície, mas não o suficiente para diminuir substancialmente as concentrações de bactérias totais, estreptococos e coliformes na cama. Exceto em situações de erros de manejo, parâmetros como a temperatura, matéria orgânica, umidade, densidade e relação carbono-nitrogênio foram mantidas dentro de limites de controle durante o estudo. Coliformes e estreptococos ambientais foram os patógenos mais freqüentes isolados nos casos de mastite clínica. A prevalência de mastite causada por patógenos ambientais que podem causar surtos de mastite intratável não foi preocupante. Surtos de mastite ambiental não foram observados. Os resultados do presente estudo indicam que níveis baixos de umidade e densidade da cama estão associados a diminuição do risco de mastite clínica e melhora da limpeza dos animais, respectivamente. Os resultados desta pesquisa podem ser usados para reduzir o risco de mastite de animais alojados em sistema de compostagem / Os objetivos foram descrever e identificar fatores da cama associados à concentração bacteriana no leite e na cama, índices epidemiológicos de mastite e higiene animal em rebanhos alojados no sistema de compostagem. Três fazendas foram visitadas mensalmente durante um ano. Amostras foram colhidas do leite do tanque e de casos de mastite para exame microbiológico. Foram avaliados escores de limpeza do flanco, perna, teta e úbere. Amostras da cama foram coletadas para estimar concentrações bacterianas e características físico-químicas. Matéria orgânica, densidade e a relação carbono-nitrogênio foram associados a concentrações bacterianas na cama. A temperatura na camada profunda foi maior do que a da superfície, mas não o suficiente para diminuir substancialmente as concentrações de bactérias totais, estreptococos e coliformes na cama. Exceto em situações de erros de manejo, parâmetros como a temperatura, matéria orgânica, umidade, densidade e relação carbono-nitrogênio foram mantidas dentro de limites de controle durante o estudo. Coliformes e estreptococos ambientais foram os patógenos mais freqüentes isolados nos casos de mastite clínica. A prevalência de mastite causada por patógenos ambientais que podem causar surtos de mastite intratável não foi preocupante. Surtos de mastite ambiental não foram observados. Os resultados do presente estudo indicam que níveis baixos de umidade e densidade da cama estão associados a diminuição do risco de mastite clínica e melhora da limpeza dos animais, respectivamente. Os resultados desta pesquisa podem ser usados para reduzir o risco de mastite de animais alojados em sistema de compostagem

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-25Bitstream added on 2014-06-13T18:41:52Z : No. of bitstreams: 1 santos_cep_dr_jabo.pdf: 1168209 bytes, checksum: 2540911ef2f78572789deec0360b9d72 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Mato Grosso (FAPEMAT) / Pythium insidiosum causa doença de pele e ocasionalmente de outros tecidos de mamíferos e aves que vivem em estreito contato com águas contaminadas. Pelas características bioclimáticas e ambientais da região do Pantanal, estima-se que seja uma das áreas com maior prevalência do mundo. Não obstante, certifica-se na literatura compilada poucos estudo enfatizando aspectos epidemiológicos nessa região, sendo esse o principal objetivo dessa pesquisa. As normais climatológicas foram obtidas de duas estações metereológicas de Instituição pública, que abrange a sub-região do estudo, complementados por dados dispostos em outras fontes. Obteve-se validação de 76 casos em equideos e sete bovinos, através do ELISA-teste, PCR, histopatologia e isolamento do agente. A doença apresentou dinâmica sazonal, com picos de incidência emergindo após os maiores índices pluviométricos. Evidenciaram-se também, um número expressivo de enfermidades confundíveis, coinfecções e reinfecções, demonstrando frágil imunidade do hospedeiro equino ao patógeno. Cabe ressaltar ainda, que ferramentas de diagnóstico são pouco utilizadas a campo. Resposta significativa relativa à imunoterapia (Pitium Vac®) no grupo de equideos tratados e aumento do intervalo de reinfecções, indica que o fármaco poderá ser aperfeiçoado, de modo a agregar características profiláticas, além das terapêuticas / The disease caused by Pythium insidiosum affects the skin and occasionally other tissues of mammals and birds which live in close contact with contaminated water. Due to its bio-climatic and environmental characteristics, the Pantanal region is estimated to be one of the areas with higher prevalence of pythiosis in the world. However, few studies have focused on epidemiological aspects this region, the main objective of this work. Climatological normals were obtained from two meteorological stations of a public institution which covers the subregion studied. Data from other sources were also used to complement the study. Seventy six cases of pythiosis in equidae and seven in cattle were confirmed by ELISA-test, PCR, histopathology and isolation of Pythium insidiosum. The disease showed seasonal dynamics with peaks of incidence emerging after the wettest pluviometric gradients. Similar diseases, co infections and reinfections were also realized, suggesting a suppression of equine immune system to Pythium insidiosum. It is worth mention that diagnosis tests tools available are not widely adopted in the field. Significant response on immunotherapy (Pitium Vac®) in equine treated group and increased of the intervals the reinfection, indicating that the drug could be improved by adding prophylactic and therapeutical properties

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-24Bitstream added on 2014-06-13T19:20:18Z : No. of bitstreams: 1 reis_ro_dr_botfmvz.pdf: 1007324 bytes, checksum: 536ddb6ef3848f47cd6253ed5d8bd393 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o objetivo de verificar possíveis alterações hematológicas e bioquímicas que ocorrem no sangue bovino obtido de animal hígido e parasitado com Babesia bigemina, quando conservado em bolsas plásticas contendo Citrato-fostato-dextrose-adenina (CPDA-1) e os efeitos da Riboflavina e radiação ultravioleta na inativação de Babesia bigemina. Na primeira etapa o grupo I foi formado por bolsas plásticas contendo sangue proveniente de bovinos saudáveis e o grupo II foi formado por bolsas plásticas contendo sangue de bovinos parasitados com Babesia bigemina. Foi determinado Contagem total de hemácias e leucócitos, Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio, Sódio, Potássio e Lactato a cada três dias durante 21 dias. Na segunda etapa foi realizado Esfregaço Sanguíneo Corado, Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa antes e após aplicação da Riboflavina e radiação ultravioleta, em seguida, o sangue foi inoculado em bezerros esplenectomizados. Esses exames foram repetidos nos dias sete, 14 e 21 pós-inoculação. O sangue conservado apresentou redução da contagem de hemácias e leucócitos, da Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio e Sódio e ocorreu um aumento na concentração de Potássio e Lactato no decorrer de 21 dias. Observou-se que o sangue armazenado em bolsas plásticas sofre alterações hematológicas e bioquímicas após 21 dias de conservação. A Babesia bigemina não foi eliminada pela adição da Riboflavina e exposição à luz ultravioleta. Novos estudos devem ser realizados para verificar a eficácia desta técnica na inativação de patógenos que podem ser transmitidos por meio da transfusão sanguínea / The aim of this study was to verify the possible hematological and biochemical alterations that occur in bovine blood obtained from healthy animals and from the ones infected with Babesia bigemina when kept in plastic bags with CPDA-1, and to verify the effectiveness of the treatment with Riboflavin in the inactivation of the Babesia sp. In the first part of the experiment, group I was formed by plastic bags with blood obtained from healthy bovines and group II by plastic bags with blood obtained from bovines infected with Babesia bigemina. In both groups the Red Blood Cells Count, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen, White Blood Cells, Sodium, Potassium and Lactate was determined every three days, during 21 days. In a second phase the stained blood smear, indirect immunofluorescence reaction and quantitative Polimerase Chain Reaction to diagnose before and after the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation. The blood was inoculated in esplenectomized bovine. These exams were repeated on the days 7, 14 and 21 after the inoculation. In both groups the preserved blood presented reduction in the number of Erythrocytes, Leukocytes, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen and Sodium and an increase of the Potassium and Lactate concentration occurred in the period of 21 days. The results were considered statistically significant (p<0,01). This way it was observed that the blood preserved in plastic bags suffers hematological and biochemical alterations after 21 days of conservation. Babesia bigemina was not eliminated by the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-19Bitstream added on 2014-06-13T20:01:50Z : No. of bitstreams: 1 cunha_phj_dr_botfmvz.pdf: 906459 bytes, checksum: 1c46d15a3567c37751ba16d75a76cb82 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo da tese foi de verificar os achados clínicos e laboratoriais da polioencefalomalacia (PEM) em bovinos ocasionada pela ingestão de dieta com alto teor de enxofre ou pelo herpesvírus bovino 5 (BoHV-5). No primeiro estudo realizouse indução de PEM pelo consumo excessivo de enxofre. Foram utilizados 10 bezerros, sendo que quatro bovinos ingeriram ração sem sulfato de sódio (G1), enquanto seis consumiram ração com sulfato de sódio (G2). Exames físicos e laboratoriais (hemograma, fibrinogênio plasmático e proteína plasmática, pH fluido ruminal, concentração do sulfeto de hidrogênio ruminal, líquido cerebrospinal e histopatológico) foram realizados. Um bezerro do grupo G2 apresentou sinais neurológicos e em todos do mesmo grupo detectou-se elevados valores de sulfeto de hidrogênio ruminal. Histologicamente as principais alterações observadas foram necrose neuronal cortical e lesões hemorrágicas nos núcleos basais, tálamo, mesencéfalo, ponte e bulbo. A ingestão de dieta com alto teor de enxofre (0,52%) induziu PEM nos bezerros. No segundo estudo foi realizada inoculação experimental em seis bezerros com o BoHV-5 pela via intranasal com instilação de 0,5mL do inóculo em cada narina, totalizando a dose viral de 107,2 DICT50/mL. Durante 30 dias pós-infecção foram realizados exames físicos e os mesmos testes laboratoriais descritos no primeiro artigo. Foi investigada a presença do vírus em seis porções do encéfalo, no gânglio do trigêmeo e no líquido cefalorraquidiano (LCR) pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Um bezerro apresentou sinais de encefalopatia. Pleocitose foi identificada no bezerro sintomático e nos assintomáticos. No exame histopalógico notou-se necrose cerebrocortical, encefalite e meningite não supurativa. A infecção experimental com o BoHV-5 ocasionou PEM nos bezerros, podendo ser assintomática. / The aim of this thesis was to verify clinical and laboratorial aspects of polioencephalomalacia (PEM) in cattle caused by excess sulphur intake or by bovine herpesvirus 5 (BoHV-5). The first paper describes an experimental model to induced PEM with high sulphur intake. Ten calves were fed an experimental diet, four without sodium sulfate (G1) and six with (G2). The calves were clinically evaluated and laboratorial tests were performed (hematology, plasma fibrinogen, plasma protein, ruminal fluid pH, ruminal hydrogen sulfide concentration, cerebrospinal fluid, gross and histopathological). High ruminal hydrogen sulfide concentration was detected in calves consuming sodium sulfate diet (G2). One out of six calves fed with highsulfate diet developed neurological signs. Cortical neuronal necrosis and hemorrhagic lesions in basal nuclei, thalamus, midbrain, pons and medulla oblongata were detected in calves from group G2. PEM in calves can result from excess sulphur intake (0.52% dry matter). In the second paper, six calves were experimentally infected with BoHV- 5 with 0.5 mL of virus suspension (107,2 TCID50) in each nasal cavity. During the 30 days of experimental postinfection (p.i.) calves were clinically evaluated. Laboratorial tests were performed as described for the first study. Virus detection was investigated in six brain regions, trigeminal ganglia and cerebrospinal fluid (CSF) by polimerase chain reaction (PCR) assay. One out of the six calves developed signs of neurological disease. It was possible to detect CSF pleocytosis in all symptomatic and asymptomatic calves. The histology revealed cerebrocortical necrosis and non suppurative encephalitis and meningitis. PEM was induced in calves by experimental infection with BoHV-5 and can remain asymptomatic.