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Alterações biomecânicas da córnea de suínos induzidas pela confecções de lamelas pediculadas de diferentes espessuras por laser de femtossegundo / Biomechanical changes after flap creation with different thicknesses with the femtosecond laser in swinish cornea

Medeiros, Fabricio Witzel de 22 July 2011 (has links)
Objetivo: Investigar as alterações biomecânicas da córnea de suínos induzidas pela confecção de lamelas pediculadas de diferentes espessuras pelo laser de femtossegundo. Métodos: Para a formação dos dois grupos, 12 olhos de porcos foram usados: lamelas pediculadas de 100 e de 300 micrômetros confeccionadas pelo laser de femtossegundo. Cada olho foi submetido aos seguintes exames, antes da criação das lamelas: topografia por rasterstereography, Ocular Response Analyzer (ORA), tomografia do segmento anterior por coerência óptica para a avaliação paquimétrica corneal e das lamelas criadas e sistema de velocidade de onda (SVO), que mede a velocidade de propagação de ondas acústicas entre dois transdutores posicionados na superfície corneal antes e imediatamente, após a feitura da lamela. O primerio passo foi desenhado para o estudo das diferenças em relação à histerese corneal, fator de resistência corneal, mudanças na curvatura e velocidade de propagação de onda acústica entre córneas com lamelas finas e espessas. Posteriormente, as lamelas foram amputadas, e as medidas do sistema de velocidade de onda foram repetidas. Resultados: A média de espessura das lamelas ± desviopadrão (DP) foi de 108,5±6,9 (8,5% da espessura total) e 307,8±11,5 m (22,9% da espessura total), para os grupos de lamelas finas e espessas, respectivamente (p< 0,001). Histerese corneal e o fator de resistência corneal não apresentaram diferença estatística, após a criação de lamelas finas (p = 0,81 e p = 0,62, respectivamente). Histerese corneal foi significantemente mais baixa, depois da confecção de lamelas mais espessas (8,0±1,0 para 5,1±1,5 mmHg para medidas pré e pós-operatórias, respectivamente, p = 0,003, diminuição de 36,25%) e fator de resistência corneal também mostrou significante diminuição nesse grupo, após o procedimento cirúrgico; valores médios pré e pós-operatórios de 8,2±1,6 e 4,1±2,5 mmHg respectivamente (p= 0,007), diminuição de 50%. A ceratometria média simulada apresentou maiores valores, após a confecção das lamelas mais espessas em relação ao pré-operatório (ceratometria pré e pós-operatória de 39,5±1 D e 45,9±1,2 D, respectivamente, p= 0,003). Para o grupo de lamelas finas, não houve diferença estatisticamente significante (ceratometria pré e pós-operatória de 40,6±0,6 D e 41,4±1,0 D, respectivamente, p=0,55). Em relação ao Sistema de Velocidade de Onda, após a criação das lamelas e sua amputação, houve diminuição da velocidade de propagação acústica, embora na maior parte das posições não fosse estatisticamente significante. Conclusão: Nas condições experimentais estabelecidas por este estudo, a criação de lamelas de maior espessura pareceu exercer efeito mais relevante sobre a biomecânica da córnea de suínos / Purpose: To study the impact of programmed flaps at two different thicknesses on the biomechanical properties of the swine corneas. Methods: Twelve pig eyes were enrolled in this study and were formed two groups: 100m and 300 m flaps performed with the femtosecond laser. Each eye had the following procedure before the flap creation: raster photograph topographic maps, Ocular Response Analyzer (ORA), Optical Coherence Tomography to measure the pachymetry and flap thickness and Surface Wave Velocity system which is a prototype system that measures sonic wave propagation time between two transducers positioned on the corneal surface before and after flap creation. This first step was designed to investigate the differences in respect to corneal hysteresis, corneal resistance factor, curvature change and ultrasonic wave propagation between the groups with thinner and thicker flaps. After this initial procedure, flap amputation was performed and new measurements with the surface wave velocity system were taken again. Results: Measured flap thicknesses averaged 108.5±6.9 (8.5% of the total cornea) and 307.8±11.5 m (22.9% of the total cornea) for thin and thick flap groups, respectively (p< 0.001). Hysteresis and corneal resistance factor did not change significantly after flap creation in the thin flap group (p = 0.81 and p = 0.62, respectively). With thicker flaps, both parameters decreased significantly from 8.0±1.0 to 5.1±1.5 mmHg (p=0.003, reduction of 36.25%) and from 8.2±1.6 to 4.1±2.5 mmHg, respectively (p = 0.007), reduction of 50%. Simulated keratometry values increased in the thick flap group (from 39.5±1 D to 45.9±1.2 D, p=0.003) after flap creation and not in the thin flap group (from 40.6±0.6D to 41.4±1.0D, p= 0.55). Regarding surface wave velocity analysis, the surgical procedures induced lower values in some positions although most of them did not present statistically different results. Conclusion: In this experimental model, thicker flaps seemed to have a greater effect on the biomechanics of the swinish cornea
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Avaliação multidimensional da dor no pós-operatório da ceratectomia fotorrefrativa e fatores preditivos de dor / Improved multidimensional pain evaluation and predictors of early postoperative pain after photorefractive keratectomy

Renato Garcia 11 November 2016 (has links)
OBJETIVOS: Validar o uso de questionários multidimensionais, como o Inventário Resumido da Dor (BPI) e o Questionário de Dor de McGill (MPQ) no pós-operatório da ceratectomia fotorefrativa (PRK). Comparar o perfil da dor no pós-operatório da PRK entre os dois olhos operados sob as mesmas condições e verificar preditores de dor como sexo, estado de ansiedade, conhecimento prévio da cirurgia e equivalente esférico do erro refrativo (EEER). MÉTODOS: Oitenta e seis olhos de 43 pacientes submeteram-se à PRK com intervalo de 14 dias entre cada olho. Uma hora antes da cirurgia, os pacientes responderam ao Inventário de Estado de Ansiedade (IDEA). No pós-operatório os pacientes receberam tratamento usual para dor e responderam aos questionários Escala Visual Analógica (EVA), BPI e MPQ após uma, 24, 48, 72 e 96 horas. Estudaram-se a consistência interna e as correlações de cada questionário. Compararam-se as pontuações de dor e a ansiedade entre primeiros e segundos olhos operados usando o teste de Wald, pareados através do teste t de Student. Utilizou-se o teste de Wald para comparar o comportamento da dor de acordo com sexo e EEER. RESULTADOS: Os questionários MPQ e BPI demonstraram alta consistência interna. Os questionários apresentaram pontuações mais elevadas na primeira mensuração da EVA (4.93 ± 2.38), MPQ - Índice de Estimativa de Dor (PRI) (26.95 ± 10.58), BPI - Índice de Intensidade de Dor (IID) (14.53 ± 7.36) e o BPI - índice de Interferência Funcional de Dor (IIFD) (22.30 ± 15.13), reduzindo-se gradativamente a cada momento subseqüente de avaliação. O MPQ-PRI na subescala subjetiva, apresentou curva de dor com redução lentificada. Todas as escalas apresentaram redução média estatisticamente significativa de um momento para o outro (p < 0.05) no pósoperatório, exceto no MPQ-PRI Subjetivo. Observaram-se correlações positivas entre as subescalas BPI e MPQ com a EVA (p < 0.05). Não houve diferença estatisticamente significativa nas pontuações de dor da EVA, BPI e MPQ-PRI entre ambos os olhos para todos os momentos avaliados. Os pacientes estavam menos ansiosos antes da PRK do segundo olho (p < 0.001), mas isto não apresentou correlação com níveis de dor após a cirurgia. O sexo e o conhecimento prévio do procedimento cirúrgico não influenciou significativamente em qualquer das escalas de dor. O EEER entre -3D to -5D correlacionou-se (p=0.035) com o BPI. CONCLUSÃO: O BPI e o MPQ apresentaram boas propriedades psicométricas em relação a confiabilidade e validade. Questionários multidimensionais fornecem uma avaliação mais abrangente sobre o perfil de dor após a PRK, se comparados à EVA, principalmente nos aspectos afetivos e cognitivos. O perfil da dor pósoperatória da PRK apresentou-se similar em ambos os olhos sob as mesmas condições. O EEER entre -3D to -5D foi o único fator preditor deste estudo para elevado nível de dor pós-operatória / PURPOSE: to validate the use of multidimensional questionnaires, such as the Brief Pain Inventory (BPI) and the McGill Pain Questionnaire (MPQ) in the postoperative photorefractive keratectomy (PRK). To compare the profiles of postoperative PRK pain between both eyes operated under the same conditions and to verify the preoperative predictors of pain such as gender, anxiety, knowledge of the procedure, and spherical equivalent refractive error (SERE). METHODS: eighty-six eyes of 43 patients with myopia underwent PRK in both eyes at an interval of 14 days between the procedures. One hour before surgery, subjects answered the State Anxiety Inventory (SAI). After surgery, usual PRK pain treatment was given and subjects answered to the Visual Analogue Scale (VAS), BPI and MPQ pain questionnaires at one, 24, 48, 72 and 96 hours intervals. The internal consistency was evaluated and convergent validity of each questionnaire was assessed using correlation testing. Pain scores and anxiety were compared between each eye using the Wald test and paired Student t test. Wald test was also used to test gender and SERE for each eye separately. RESULTS: both BPI and MPQ questionnaires showed internal consistency higher than 0.70. Subjects reported higher postoperative pain scores at the first measurement of the VAS (4.93 ± 2.38), MPQ - Pain Rating Index (26.95 6 10.58), BPI - Pain Severity Index (14.53 ± 7.36), and BPI- Pain Interference Index (22.30 ± 15.13) with decreasing scores at each subsequent observation period in all scales. All scales showed statistically significant (p < 0.05) pain reduction from one measurement to the next postoperatively, except the MPQ-PRI Evaluative. The majority of the scales and subscales showed a statistically significant (p < 0.05) direct correlation with the VAS at all of the evaluation periods. There were no statistically significant differences between the two eyes at all examination intervals regarding the VAS, BPI, and MPQ scores. Subjects were less anxious on average before the second surgery compared to the first surgery (p < 0.001), but this finding was not related to pain ratings after surgery. Gender and knowledge of the procedure did not significantly interfere with any scale of pain. The SERE between -3 D (diopters) and -5 D (p=0.035) revealed interference on the BPI. CONCLUSION: the BPI and the MPQ showed good psychometric properties regarding reliability and validity. The multidimensional questionnaires expanded the assessment of the PRK postoperative pain profile, compared to VAS, mainly in cognitive and affective aspects. The profiles of postoperative pain after PRK were similar between both eyes under the same conditions. In this study, a high SERE was the only predictor for increased pain after PRK
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Avaliação do potencial da associação de dendrímeros e iontoforese para a administração ocular de fármacos / Evaluation of the combination of dendrimers and iontophoresis for ocular drug administration

Souza, Joel Gonçalves de 22 September 2014 (has links)
A administração tópica de colírios é a maneira mais conveniente de se tratar doenças oculares. O grande desafio para a tecnologia farmacêutica é garantir que o fármaco administrado nessa forma farmacêutica chegue ao local de ação em concentrações adequadas, com efeitos adversos reduzidos, tempo de ação prolongado e dose única. Para tanto, o desenvolvimento de sistemas de liberação e de estratégias adequadas de administração tornam-se necessários. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da iontoforese na penetração ocular de dendrímeros de poliamidoamina (PAMAM) de geração 4, com diferentes grupos superficiais (PAMAM G4, catiônico e PAMAM G3.5, aniônico), preparar complexos desses dendrímeros com um anti-inflamatório modelo, a dexametasona (Dexa), e avaliar a influência da associação de dendrímeros e iontoforese na penetração corneal da Dexa em modelos ex vivo e in vivo. Complexos Dexa-PAMAM foram obtidos e caracterizados por espectroscopia de infravermelho e ressonância magnética nuclear (H1-RMN, 13C-RMN e DOSY), espalhamento dinâmico de luz e espectroscopia UV/vis para avaliar a formação dos complexos, seu tamanho e potencial zeta, além de alterações na solubilidade da Dexa. A velocidade de liberação da Dexa dos complexos foi verificada por estudos de liberação in vitro utilizando membrana sintética. A penetração e distribuição dos PAMAMs na córnea e sua influência na penetração da Dexa foi avaliada ex vivo utilizando córnea de porco, microscopia confocal de varredura a laser (MCVL) e cromatografia de ultra performance aliada a um detector de massas para quantificação do fármaco permeado. A citotoxicidade dos PAMAMs foi avaliada em cultura de células epiteliais da retina e células epiteliais da córnea. Por fim, verificou-se in vivo a influência da iontoforese e dos PAMAMs sobre a quantidade de Dexa no humor aquoso de olhos de coelhos. Os estudos de caracterização indicaram que a Dexa foi incorporada aos PAMAMs e que esses complexos apresentaram cerca de 50 nm de tamanho médio pela técnica de NTA, com a presença de partículas pequenas e agregadas quando dispersos em meio fisiológico e potencial zeta de + 6,4 mV e -18,5 mV para Dexa-PAMAM G4 e Dexa-PAMAM G3.5, respectivamente. A solubilidade aparente da Dexa aumentou 3,9 e 10,3 vezes nos complexos com PAMAM G4 e PAMAM G3.5, respectivamente. O PAMAM G3.5 e PAMAM G4 diminuiram 82 e 1,7 vezes, respectivamente, o coeficiente de difusão da Dexa. Os estudos ex vivo indicaram que a iontoforese foi capaz de direcionar os dendrímeros para dentro da córnea, além de aumentar 2,9, 5,6 e 3,0 vezes a quantidade de Dexa permeada a partir das formulações que continham Dexa livre, Dexa-PAMAM G4 e Dexa-PAMAM G3.5, respectivamente. Aumentou também a quantidade de Dexa retida na córnea em aproximadamente 2 vezes para todas as formulações. Os experimentos de citotoxicidade evidenciaram a maior toxicidade do PAMAM G4 e sua dependência da concentração e tempo de incubação. Por fim, os experimentos in vivo mostraram que a iontoforese aumentou a concentração de Dexa no humor aquoso cerca de 2, 2,5 e 6,6 para a Dexa livre, Dexa-PAMAM G4 e Dexa-PAMAM G3.5, respectivamente. Portanto, a associação de dendrímeros PAMAM com a iontoforese representa uma estratégia promissora para a administração tópica direcionada e sustentada de fármacos na córnea. / Topical administration of eye drops is the most convenient way for treatment of eye diseases. The challenge for the pharmaceutical technology is to ensure that the drug administered in the eye drops reaches the site of action in appropriate concentrations with reduced side effects, prolonged effect and single dose. Therefore, the development of drug delivery systems and appropriate strategies become necessary. The objective of this work was to evaluate the influence of iontophoresis in the ocular penetration of generation 4 polyamidoamine dendrimers (PAMAM) with different surface groups (PAMAM G4, cationic, and PAMAM G3.5, anionic), prepare complexes of these dendrimers with an anti-inflammatory drug model, dexamethasone (Dexa), and evaluate the influence of dendrimers and iontophoresis association on Dexa cornea penetration using ex vivo and in vivo models. Dexa-PAMAM complexes were obtained and characterized by infrared spectroscopy, nuclear magnetic resonance (H1-NMR, 13C-NMR and DOSY), dynamic light scattering and UV/VIS spectroscopy to evaluate the formation of the complexes, their size and zeta potential, as well as changes in drug solubility. Dexa release rate from complexes was determined from the in vitro release studies using synthetic membrane. The penetration and distribution of PAMAMs into the cornea and their influence in the ex vivo Dexa penetration was assessed using pig\'s cornea, confocal scanning laser microscopy (CSLM) and ultra performance chromatography coupled to a mass spectrometer for quantification of the drug permeated. PAMAMs cytotoxicity was assessed in culture of retina epithelial cells and cornea epithelial cells. Finally, the influence of iontophoresis and PAMAMs on Dexa concentration in the aqueous humor of rabbit eyes was evaluated in vivo. The characterization results showed that Dexa was incorporated to PAMAMs and that these complexes had an average size of approximately 50 nm using the NTA technique, with the distribution of small particles and aggregates when dispersed in physiological medium. The zeta potential of Dexa-PAMAM G4 and Dexa PAMAM G3.5 complexes were +6.4 mV and -18.5 mV, respectively. PAMAM G4 and G3.5 PAMAM enhanced Dexa solubility by 3.9 and 10.3-fold, respectively. PAMAM G3.5 and PAMAM G4 decreased by 82 and 1.7-fold Dexa diffusion coefficient. The ex vivo studies indicated that iontophoresis directed dendrimers into the cornea, increasing the amount of Dexa permeated by 2.9, 5.6 and 3.0-fold for the formulations containing free Dexa, Dexa-PAMAM G4 and Dexa-PAMAM G3.5, respectively. Iontophoresis also increased approximately 2-fold the amount of drug retained into the cornea for all formulations. The cytotoxicity experiments revealed that PAMAM G4 toxicity was dependent on the concentration and incubation time. Finally, the in vivo experiments showed that iontophoresis increased Dexa concentration in the aqueous humor by 2, 2.5 and 6.6-fold for free Dexa, Dexa-PAMAM G4 and Dexa-PAMAM-G3.5, respectively. Therefore, the combination of iontophoresis with PAMAM dendrimers represents a promising strategy for targeted and sustained topical drug delivery to the cornea.
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Efeito do S-nitroso-N-acetilpenicilamina sobre receptores vaniloide de potencial transitório 1 em córnea de camundongos / Effect of S-nitroso-N-acetylpenicillamine on transient receptors potencial vanilloid type 1 in córnea of mice

Larissa Domenegueti Ferreira 10 June 2016 (has links)
Introdução: Receptores TRPV1 são canais catiônicos nociceptivos não seletivos. Eles desempenham um papel na sensação de dor na córnea. No presente trabalho, descreveremos a resposta do TRPV1 na córnea de camundongos e TRPV1 -/- a estímulos químicos e o efeito do SNAP sobre este receptor. Métodos: camundongos C57BL/6 e TRPV1 -/- foram comparados. As observações incluíram o influxo de cálcio na cultura, observação direta e o comportamento de limpeza do olho após o desafio na córnea com 1µM da capsaicina (CAP) com ou sem 1mM do colírio SNAP. Resultados: As características da superfície ocular não eram diferentes entre ambos os genótipos, exceto que a sensibilidade para CAP é inferior em TRPV1 -/- (p = 0,0019 e 0,0095, respectivamente). A imunocoloração revelou que TRPV1 é expresso na camada basal do epitélio da córnea, apenas nos camundongos C57BL/6. CAP estimula o influxo de cálcio em cultura de células epiteliais e a sensibilidade corneana em C57BL/6 in vivo foi reduzida na presença do SNAP (p = 0,0329 e 0,01, respectivamente). Conclusão: A ausência dos receptores TRPV1 no epitélio da córnea não afeta o fenótipo da superfície ocular de camundongos. A resposta para tirar colírios revelou que ela poderia funcionar como uma terapia analgésica devido ao seu antagonismo com o TRPV1. / TRPV-1 receptors are non-selective nocioceptive cation channels. They play a role in cornea sensation. In the present work we describe the response of corneas of TRPV1-/- and mice to chemical stimuli and the effect of SNAP on this receptor. TRPV1-/- and C57BL/6 mice were compared. The observations included the calcium influx in culture, direct observation and the behavior of eye wipe after corneal challenge with 1?M Capsaicin (CAP) with or not 1mM SNAP eye drops. Ocular surface characteristics were not different between both genotypes, except that the sensitivity to CAP is lower in TRPV1-/- (p=0.0019 and 0.0095, respectively). Immunostaining revealed that TRPV 1 is expressed in the basal layer of the cornea epithelia, only in the C57 mice. CAP stimulated calcium influx in epithelial cells in culture and cornea sensitivity in C57 mice in vivo was reduced in the presence of SNAP (p=0.0329 and 0.01, respectively). The absence of TRPV-1 receptors in the cornea epithelia did not affect the ocular surface phenotype in mice. The response to SNAP eye drops revealed that it could work as an analgesic therapy due to its antagonism to the TRPV1.
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Características clínicas e imunológicas de pacientes com ceratocone e alergia ocular: um estudo transversal com ênfase na análise da inflamação da superfície ocular / Clinical and immunological characteristics of patients with keratoconus and ocular allergy: a cross sectional study with emphasis on the analysis of ocular surface inflammation

Sandrin, Leda das Neves Almeida 15 December 2016 (has links)
Objetivo: Comparar as características inflamatórias da superfície ocular de pacientes com ceratocone (CE) às de pacientes com alergia ocular (AO). Métodos: Realizou-se um estudo transversal, envolvendo 134 participantes, divididos em três grupos: alergia ocular (AO)(n=55), ceratocone com ou sem alergia ocular associada (CE) (n=61) e controle (CO) (n=18). Os participantes do estudo foram recrutados e avaliados em clínica privada na cidade de Chapecó-SC, no período de polinização, em dezembro de 2013 e de outubro de 2014 a janeiro de 2015. Para análise dos grupos, todos os pacientes foram avaliados clinicamente por especialistas em alergia e oftalmologia e submetidos a exame de tomografia de córnea com tecnologia de Scheimpflug (Pentacam HRR), medida da osmolaridade da lágrima por impedanciometria (TearLabR) em ambos os olhos e preenchimento de questionários padronizados para alergia ocular (QA) e para doença de superfície ocular (OSDI). Em 107 de 134 pacientes (CE=50, AO=42, CO=15) foram dosadas as citocinas IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-31, IL-33, IL-17 A, IL-23, TNF-alfa, TNF-beta e INF-gama na lágrima, por meio de tecnologia multiplex com beads magnéticas. A coleta das amostras de lágrimas (5 microlitros no mínimo) foi realizada por meio de aspiração no menisco lacrimal temporal inferior, com capilares de vidro em um único olho. As amostras foram congeladas imediatamente após coleta e mantidas a -80 oC, até o momento da dosagem e análise em agosto de 2016. Resultados: Constatou-se alta prevalência de alergia no grupo com ceratocone 68,85% (42/61), sendo que 42,62% (26/61) dos pacientes desse grupo apresentaram alergia ocular. A intensidade do prurido ocular foi maior nos pacientes AO e no grupo CE, do que no grupo controle (p < 0,001 e p=0,047) e maior no grupo AO do que no CE (p < 0,001). As citocinas INF-gama, IL-13, IL-15, IL-17A, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-31, TNF-beta foram estatisticamente mais elevadas no grupo AO, quando comparadas ao grupo CE. No grupo controle, houve correlação direta da diferença absoluta da osmolaridade (delta osmol) com o nível encontrado para todas as citocinas dosadas. Observou-se, ainda, correlação direta entre níveis de IL-1beta, IL-6 e TNF-alfa com OSDI (p=0,044, p=0,010 e p=0,047) no grupo CE. A osmolaridade foi maior no grupo CE, quando comparado ao AO (p=0,043). Conclusões: Pacientes com ceratocone apresentaram alterações inflamatórias na superfície ocular, tais como: correlação direta do índice OSDI com IL-1beta, IL-6 e TNF-alfa na lágrima; intensidade de prurido mais elevada que no grupo controle e osmolaridade maior que no grupo com AO. No grupo AO, observou-se índices OSDI maiores que no grupo controle e aumento de várias citocinas dosadas, quando comparadas ao grupo CE. Nos pacientes controle, a instabilidade no filme lacrimal (delta osmol), correlacionou-se diretamente com a inflamação ocular (citocinas dosadas). Observou-se alta prevalência de formas leves de alergia ocular no grupo CE (40,98%) e apenas um caso de alergia ocular grave (ceratoconjuntivite atópica [1,3%]), esses dados estão em desacordo com a maior parte da literatura disponível sobre o assunto. Em conjunto, os achados do presente estudo podem estar relacionados a características específicas da região estudada / Purpose: To compare the inflammatory profile of the ocular surface of patients with keratoconus with that of patients with ocular allergy. Methods: A cross sectional study was carried out and involved 134 participants, divided into three groups: ocular allergy group (OA) (N=55), keratoconus with or without ocular allergy (KC) (N=61) and a control group (CO) (N=18). The study participants were recruited and evaluated in a private clinic in the city of Chapecó-SC, during the pollination period in 2013 (December) and from 2014 to 2015 (October to January). In order to analyze the three groups, all patients were evaluated clinically by allergy and ophthalmology specialists, submitted to a corneal tomography exam with Scheimpflug technology (Pentacam HRR), to impedanciociometry to assess tear osmolarity (Tear LabR) of both eyes and to standardized questionnaire rates for ocular allergy (AQ) and for ocular surface disease index (OSDI). Cytokines (IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-31, IL-33, IL-17 A, IL-23, TNF-alfa, TNF-beta and INF-gama) levels were assessed in 107 out of 134 patients using multiplex technology with magnetic beads. Tear collection of at least 5 microliters was carried out on a single eye by suction in the inferior temporal lacrimal meniscus with glass capillaries. The samples were frozen at -800C, immediately after collection to the time of dosing and analysis in August 2016. Results: The prevalence of allergy in the keratoconus group was 68.85% (42/61), within the same group 42.62% (26/61) of the patients had ocular allergy. Ocular pruritus intensity was higher in the OA group and in the KC group than in the control group (p < 0,001 e p=0,047), and higher in the OA group than in the KC group (p < 0,001). Cytokines INF-gama, IL-13, IL-15, IL-17A, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-31, TNF-beta were statiscally higher in the OA group in comparision to the KC group. In the control group, there was a positive correlation of the difference measurement of osmolarity (osmol delta) between the eyes with all cytokines dosed. In the KC group, IL-1beta, IL-6 e TNF-alfa correlated positively with OSDI (p=0,044, p=0,010 e p=0,047). Tear osmolarity was higher in the KC group than in the OA group (p=0,043). Conclusions: Patients with keratoconus had inflammatory changes in the ocular surface, such as: direct correlation between OSDI and tear IL-1beta, IL-6 and TNF-alpha levels; higher pruritus intensity than the control group and higher osmolarity than the OA group. In the OA group, OSDI levels were higher than in the control group and some cytokines had higher levels than the KC group. In the control patients, tear film instability (delta osmol) was direct correlated to ocular inflammation (dosed cytokines). In the KC group, there was a high prevalence of mild forms of ocular allergy (40.98%) and only one case of severe ocular allergy (atopic keratoconjunctivitis [1.3%]). However, most studies avaiable have associated keratoconus with severe forms of ocular allergy. Together, these findings may be related to specific characteristics of the region of study
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Avaliação do endotélio da córnea de coelhos (oryctolagus cuniculus) em diferentes faixas etárias utilizando a microscopia especular

Brambatti, Gustavo January 2013 (has links)
O endotélio é uma monocamada de células achatadas, poligonais e interligadas que recobrem a superfície posterior da córnea, sendo fundamental na manutenção da transparência desta estrutura. Apesar dos coelhos (Orictolagus cuniculus) serem amplamente utilizados em pesquisas oftálmicas, não existem avaliações detalhadas referentes ao endotélio da córnea desta espécie em diferentes idades. Objetivou-se estudar os parâmetros morfológicos e morfométricos do endotélio da córnea de coelhos de diferentes idades, utilizando-se a microscopia especular. Foram estudados 36 bulbos oculares de 18 coelhos, machos ou fêmeas, de diferentes faixas etárias divididos em três grupos com seis animais cada, designados por: G I (animais com idade de seis meses); G II (animais com 1 ano de idade) e G III (animais com quatro anos de idade). A densidade celular endotelial média nos animais dos grupos G I, G II e G III foi de respectivamente 2307,16± 319,04, 1894,75 ± 170,81 e 1818,66 ± 245,11 células/mm2. A área celular média foi de respectivamente 364,43 ± 39,36, 374,79 ± 48,46 e de 378.50 ± 02,97 μm2 para G I, G II e G III. O pleomorfismo médio ou porcentagem de células hexagonais no endotélio central do olho direito e esquerdo de coelhos foi respectivamente de 65,40 ± 23,39% e de 75,15 ± 10,44%, com variação de 42,01 a 88,80% e de 60,71 a 81,60%. Os resultados apontam decréscimo da densidade, do pleomorfismo, e aumento da área celular média com o aumento da idade. O endotélio da córnea de coelhos sofre alterações decorrentes do avanço da idade. / The corneal endothelium is a monolayer of interconnected flattened polygonal cells that cover the back surface of the cornea, it is essential for the maintenance of its transparency. Due to the complete lack of data on the endothelial cells of rabbits (Orictolagus cuniculus) it`s ophthalmic widely used in research, no data relating to corneal endothelium in this species correlating their age. Therefore aimed to assess cell density, the average cell area and morphology of the corneal endothelium of rabbits at different ages. It was studied 36 eyes of 18 rabbits, male or female, of different ages. Rabbits were divided into three groups with 6 animals each, designated by: G I (animals aged six months), G II (animals with 1 year) and G III (animals with four years of age). The mean endothelial cell density in the animals of G I, G II and G III were respectively 2307,16± 319,04, 1894,75 ± 170,81 e 1818,66 ± 245,11 células/mm2. The average cell area was respectively 364,43 ± 39,36, 374,79 ± 48,46 e de 378.50 ± 02,97 μm2 for GI, G II and G III. The pleomorphism medium or percentage of hexagonal cells in the endothelium of the central right and left eyes of rabbits was respectively 65.40 ± 23.39% and 75.15 ± 10.44%, ranging from 42.01 to 88.80 %, and 60.71 to 81.60%. The results indicate a decrease in density, pleomorphism, and increased in average cell area with increasing age. The corneal endothelium of rabbits changes with advancing age.
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Estudo sobre a deformação da córnea utilizando o sistema de tonometria de não contato integrado a uma câmera de Scheimpflug em olhos saudáveis / Evaluation of corneal deformation analyzed with non-contact tonometer system integrated with an ultra-high-speed (UHS) Scheimpflug camera in healthy eyes

Valbon, Bruno de Freitas 23 September 2016 (has links)
OBJETIVOS: 1) Avaliar os parâmetros de biomecânica ocular provenientes do Corvis ST (Oculus Corvis ST, Scheimpflug Technology; Wetzlar, Germany) obtidos de olhos saudáveis de uma população de pacientes brasileiros. 2) Correlacionar os parâmetros derivados do Corvis ST com a idade de pacientes jovens saudáveis. 3) Verificar se as técnicas de facoemulsificação (FC) e do laser de femtosegundo (LFS), empregadas na correção cirúrgica de catatara, influenciam os parâmetros de biomecânica ocular provenientes do Corvis ST. 4) Analisar as alterações da deformação da córnea observadas em um caso de ectasia pós LASIK com flap espesso. MÉTODOS: 1) Estudo clínico transversal conduzido em 90 pacientes (90 olhos saudáveis). Foram avaliados 11 parâmetros derivados do sistema de tonometria de não contato integrado com a câmera ultrarrápida de Scheimpflug (Oculus Corvis ST, Scheimpflug Technology; Wetzlar, Germany), a saber: deformidade de amplitude (DA); pressão intraocular; 1st A time; tempo de concavidade máxima; 2nd A time; 1st A Length (tempo da primeira aplanação); 2nd A Length (tempo da segunda aplanação); raio de curvatura de maior alcance; raio de curvatura normal; velocidade de entrada (Vin) e de saída (Vout). Estes parâmetros foram correlacionados com a espessura central corneana mensurada pela Tomografia de Córnea e Segmento Anterior (Pentacam® - Oculus, Wetzlar, Germany). 2) Estudo clínico observacional, retrospectivo, conduzido em 89 pacientes (89 olhos saudáveis). Os parâmetros derivados do Corvis ST foram correlacionados com a idade dos pacientes. 3) Estudo clínico prospectivo, envolvendo 151 olhos de 127 pacientes com diagnóstico de catarata nuclear. Setenta e cinco olhos de 65 pacientes foram submetidos à técnica do laser de femtosegundo (AlconLenSx, Aliso Viejo, USA) e 76 olhos de 62 pacientes à facoemulsificação convencional (Alcon Infinit, Fort Worth, USA). Foram avaliados os 11 parâmetros de biomecânica ocular derivados do Corvis ST antes (Pré) e após as cirurgias de catarata (D1, primeiro dia de pósoperatório). A densitometria do cristalino (scattering) foi realizada pelo PNS (Pentacam Nucleus Staging). 4) Avaliação com tomografia de coerência óptica de espessura dos flaps corneanos pós Lasik e análise dos parâmetros biomecânicos provenientes do Corvis ST em uma córnea com ectasia pós Lasik. RESULTADOS: 1) A média de idade dos pacientes foi de 35,80 ± 12,83 anos. A média do equivalente esférico foi de -3,29 ± 3,69 dioptrias. A média da espessura central corneana foi de 547,50 ± 32,00 ?m Os valores dos 11 parâmetros biomecânicos obtidos de olhos saudáveis, foram os seguintes: deformidade de amplitude 1,05 ± 0,08 mm; tempo de concavidade máxima 18,38 ± 0,93 ms; pressão intraocular 16,43 ± 2,15 mmHg; tempo da primeira aplanação (1st A time) 8,32 ± 0,33 ms; tempo da segunda aplanação 23,80 ± 0,44 ms; raio de curvatura de maior alcance 11,09 ± 2,06 mm; raio de curvatura normal 7,59 ± 0,67 mm; tempo da primeira aplanação (1st A Length) 2,07 ± 0,38 mm; tempo da segunda aplanação (2nd A Length) 2,37 ± 0,47 mm; velocidade de entrada (Vin) 0,21 ± 0,05 m/s e velocidade de saída (Vout) -0,33 ± 0,07 m/s. 2) A média de idade dos pacientes foi de 27,50 ± 6,30 anos. O tempo de concavidade máxima alcançada da córnea (HC-time) foi o único dos 11 parâmetros que apresentou correlação significativa com a idade (p=0,04, rs=0,18). 3) A média de idade dos pacientes dos grupos LFS (laser de femtosegundo) e FC (facoemulsificação convencional) foram, respectivamente, 67,6 ± 9,9 anos e 68,4 ± 11,8 anos. No grupo LFS, 9 dos 11 parâmetros foram estatisticamente significativos entre o Pré e D1; e no grupo FC, 7 dos 11 parâmetros foram estatisticamente significativos entre o Pré e D1. Entre os 11 parâmetros biomecânicos avaliados, somente o tempo de concavidade máxima da córnea (HC-time) foi significativamente diferente entre os dois grupos em D1 (p=0,0387). 4) Paciente do sexo feminino, 45 anos, submetida à Lasik em ambos os olhos. Com a utilização da tomografia de coerência óptica (OCT Rtvue, OptoVue, Fremont, CA,USA) foram identificados: um flap com espessura central de 392 ?m no OD e dois cortes, sendo um flap incompleto profundo e o outro mais fino superiormente, no OE. Os parâmetros derivados do Corvis ST como a deformidade de amplitude são diferentes em ambos os olhos. CONCLUSÕES: 1) Os valores de 8 dos 11 parâmetros derivados do Corvis ST foram influenciados pela espessura central da córnea, porém esta influência foi baixa. 2) Em olhos saudáveis de pacientes jovens foi obtida correlação significativa entre a idade e o tempo de concavidade máxima, que é o tempo do início de aplanação até a concavidade máxima alcançada da córnea. 3) O laser de femtosegundo para cirurgia de catarata e a técnica de facoemulsificação convencional induziram alterações nas propriedades biomecânicas da córnea no D1. Dos 11 parâmetros biomecânicos estudados apenas o tempo de concavidade máxima da córnea apresentou diferença significativa entre os grupos (LFS e FC) no D1. 4) A ectasia unilateral após LASIK pode ocorrer devido a flap espesso com falência biomecânica da córnea / PURPOSE: 1) To evaluate ocular biomechanical metrics given by the CorVis ST (Oculus, Inc., Berlin, Germany) in a population of healthy Brazilian patients. 2) To correlate parameters derived from corneal deformation resulting from non-contact tonometry integrated with an ultra-high-speed (UHS) Scheimpflug camera (Oculus Corvis ST, Scheimpflug Technology; Wetzlar, Germany) with age in normal eyes from young patients. 3) To evaluate the changes of corneal biomechanical after femtosecond laser - assisted cataract (FS) and to compare the parameters derived by Corvis ST between standard phacoemulsification (SP) and femtosecond laser - assisted in cataract surgery. 4) To report a case of post-LASIK corneal ectasia due to a thick flap, while the contralateral eye did not develop ectasia after an incomplete deep flap cut, followed by a thinner flap Lasik procedure. METHODS: 1) An observational and cross-sectional study involving 1 eye randomly selected from 90 healthy patients. Studied parameters (including deformation amplitude, first applanation time, highest concavity time, second applanation time, first applanation length, second applanation length, curvature radius highest concavity, curvature radius normal, velocity in, and velocity out) derived from the CorVis ST were correlated to central corneal thickness from the Pentacam (Oculus, Inc.). Differences between data on the basis of gender were evaluated. 2) Observational, retrospective study involving one eye randomly selected from study participants, totaling 89 healthy eyes. The Scheimpflug images were taken with an ultra-high-speed camera during each measurement by the Corvis ST. The deformation amplitude (DA) and other parameters (e.g., pachy apex, intraocular pressure, 1st A time, highest concavity-time, 2nd A time, 1st A Length, 2nd A Length, Wing-Dist, curvature radius highest concavity, curvature radius normal, Vin, Vout) measured by the corvis ST were correlated with age. 3) Prospective study: 151 eyes of 127 patients were underwent cataract surgery. 75 eyes of 65 patients were with femtosecond laser-assisted (FS)(Alcon Len Sx, Aliso Viejo,USA) and 76 eyes of 62 patients with standard phacoemulsification (SP) (Alcon Infinit, FortWorth, USA). 4) Case Report. RESULTS: 1) About the first study: Mean patient age was 35.80 ± 12.83 years (range: 21.07 to 78.84 years). Mean central corneal thickness was 547.50 ± 32.00 ?m (range: 490 to 647 ?m) and mean spherical equivalent refraction was -3.29 ± 3.69 diopters (range: -9.50 to +10.37 diopters). Mean deformation amplitude was 1.05 ± 0.08 mm (range: 0.91 to 1.26 mm). Highest concavity time was 18.38 ± 0.93 ms (range: 16.95 to 21.07 ms). Intraocular pressure was 16.43 ± 2.15 mm Hg (range: 11.50 to 21.0 mm Hg). First applanation time was 8.32 ± 0.33 ms (range: 7.53 to 9.12 ms) and second applanation time was 23.80 ± 0.44 ms (range: 22.76 to 24.95 ms). First applanation length (max) was 2.07 ± 0.38 mm (range: 1.20 to 3.10 mm) and second applanation length (max) was 2.37 ± 0.47 mm (range: 1.33 to 4.12 mm). Curvature radius highest concavity was 11.09 ± 2.06 mm (range: 7.58 to 15.98 mm) and curvature radius normal was 7.59 ± 0.67 mm (range: 6.82 to 11.02 mm). Velocity in was 0.21 ± 0.05 m/s (range: 0.16 to 0.72 m/s) and velocity out was -0.33 ± 0.07 m/s (range: - 0.72 to -0.20 m/s). Studied parameters were not associated with gender. 2) Mean patient age was 27.50 ± 6.30 years. The highest concavity-time was the only studied parameter statistically significantly correlated to age (i.e., p=0.04, rs=0.18). 3) In relation the surgery of cataract: In group of FS, 9 of 11 parameters derived from Corvis ST were statistically significant (ss). In group of SP, 7 of 11 parameters derived from Corvis ST were ss. Only the HC - time was statistically significant between two groups (FS;SP) with p = 0.0387. 4) Corneal OCT identified a deep meniscos-shaped Lasik flap, with a central thickness of a 392 ?m in the right eye, and a incomplete deep peripheral cut in the left eye with a thinner meniscos-shaped LASIK flap. CONCLUSIONS: 1) Eight of 11 ocular biomechanical metrics given by the CorVis ST were associated with central corneal thickness, but the influence of central corneal thickness on these measurements was low. 2) In healthy eyes, age and pressure or biomechanics as derived from the Corvis ST parameters were not associated with exception to highestconcavity-time, i.e., the time from starting until the highest concavity is reached. 3) The use of the femtosecond laser- assisted system for cataract surgery and standard phacoemulsification induzed changes of biomechanical properties of the cornea by Corvis ST. Only 1 of 11 parameters studied was different statistically in two groups. 4) Unilateral ectasia after LASIK may occur due to a thick flap which leads to biomechanical failure of the cornea
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Efeito do S-nitroso-N-acetilpenicilamina sobre receptores vaniloide de potencial transitório 1 em córnea de camundongos / Effect of S-nitroso-N-acetylpenicillamine on transient receptors potencial vanilloid type 1 in córnea of mice

Ferreira, Larissa Domenegueti 10 June 2016 (has links)
Introdução: Receptores TRPV1 são canais catiônicos nociceptivos não seletivos. Eles desempenham um papel na sensação de dor na córnea. No presente trabalho, descreveremos a resposta do TRPV1 na córnea de camundongos e TRPV1 -/- a estímulos químicos e o efeito do SNAP sobre este receptor. Métodos: camundongos C57BL/6 e TRPV1 -/- foram comparados. As observações incluíram o influxo de cálcio na cultura, observação direta e o comportamento de limpeza do olho após o desafio na córnea com 1µM da capsaicina (CAP) com ou sem 1mM do colírio SNAP. Resultados: As características da superfície ocular não eram diferentes entre ambos os genótipos, exceto que a sensibilidade para CAP é inferior em TRPV1 -/- (p = 0,0019 e 0,0095, respectivamente). A imunocoloração revelou que TRPV1 é expresso na camada basal do epitélio da córnea, apenas nos camundongos C57BL/6. CAP estimula o influxo de cálcio em cultura de células epiteliais e a sensibilidade corneana em C57BL/6 in vivo foi reduzida na presença do SNAP (p = 0,0329 e 0,01, respectivamente). Conclusão: A ausência dos receptores TRPV1 no epitélio da córnea não afeta o fenótipo da superfície ocular de camundongos. A resposta para tirar colírios revelou que ela poderia funcionar como uma terapia analgésica devido ao seu antagonismo com o TRPV1. / TRPV-1 receptors are non-selective nocioceptive cation channels. They play a role in cornea sensation. In the present work we describe the response of corneas of TRPV1-/- and mice to chemical stimuli and the effect of SNAP on this receptor. TRPV1-/- and C57BL/6 mice were compared. The observations included the calcium influx in culture, direct observation and the behavior of eye wipe after corneal challenge with 1?M Capsaicin (CAP) with or not 1mM SNAP eye drops. Ocular surface characteristics were not different between both genotypes, except that the sensitivity to CAP is lower in TRPV1-/- (p=0.0019 and 0.0095, respectively). Immunostaining revealed that TRPV 1 is expressed in the basal layer of the cornea epithelia, only in the C57 mice. CAP stimulated calcium influx in epithelial cells in culture and cornea sensitivity in C57 mice in vivo was reduced in the presence of SNAP (p=0.0329 and 0.01, respectively). The absence of TRPV-1 receptors in the cornea epithelia did not affect the ocular surface phenotype in mice. The response to SNAP eye drops revealed that it could work as an analgesic therapy due to its antagonism to the TRPV1.
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Estudo da reprodutibilidade do exame de microscopia especular de córnea em amostras com diferentes números de células / Reproducibility study of the corneal specular microscope in samples with different number of cells

Holzchuh, Ricardo 19 August 2011 (has links)
INTRODUÇÃO: O endotélio corneal exerce papel primordial para a fisiologia da córnea. Seus dados morfológicos gerados pelo microscópio especular (MEC) como densidade endotelial (DE), área celular média (ACM), coeficiente de variação (CV) e porcentagem de células hexagonais (HEX) são importantes para avaliar sua vitalidade. Para interpretar estes dados de forma padronizada e reprodutível, foi utilizado um programa estatístico de análise amostral, Cells Analyzer PAT. REQ.(CA). OBJETIVO: Demonstrar valores de referência para DE, ACM, CV e HEX. Demonstrar o percentual de células endoteliais marcadas e desconsideradas no exame ao marcar-se 40, 100 e 150 células em uma única imagem do mosaico endotelial e o perfil do intervalo de confiança (IC) das variáveis estudadas ao se considerar 40, 100, 150 e tantas células quantas indicadas pelo CA. Demonstrar o erro amostral de cada grupo estudado. MÉTODOS: Estudo transversal. Os exames de MEC foram realizados com o aparelho Konan NONCON ROBO® SP-8000, nos 122 olhos de 61 portadores de catarata (63,97 ± 8,15 anos de idade). As imagens endoteliais caracterizaram se pelo número de células marcadas e consideradas para cálculo dos seguintes dados: DE, ACM, CV e HEX. Os grupos foram formados de 40, 100, 150 células marcadas numa única imagem endotelial e Grupo CA em que foram marcadas tantas células quanto necessárias em diferentes imagens, para obter o erro relativo calculado inferior ao planejado (0,05), conforme orientação do programa CA. Estudou-se o efeito do número de células sobre IC para as variáveis endoteliais utilizadas. RESULTADOS: A média dos valores de referência encontrados para DE foi 2395,37 ± 294,34 cel/mm2; ACM 423,64 ± 51,09 m2; CV 0,40 ± 0,04 e HEX 54,77 ± 4,19%. O percentual de células endoteliais desconsideradas no Grupo 40 foi 51,20%; no Grupo 100, 35,07% e no Grupo 150, 29,83%. O número médio de células calculado inicialmente pelo CA foi 247,48 ± 51,61 e o número médio de células efetivamente incluídas no final do processo amostral foi 425,25 ± 102,24. O erro amostral dos exames no Grupo 40 foi 0,157 ± 0,031; Grupo 100, 0,093 ± 0,024; Grupo 150, 0,075 ± 0,010 e Grupo CA, 0,037 ± 0,005. O aumento do número de células diminuiu a amplitude do IC nos olhos direito e esquerdo para a DE em 75,79% e 77,39%; ACM em 75,95% e 77,37%; CV em 72,72% e 76,92%; HEX em 75,93% e 76,71%. CONCLUSÃO: Os valores de referência da DE foi 2395,37 ± 294,34 cel/mm2; ACM foi 423,64 ± 51,09 m2; CV foi 0,40 ± 0,04 e HEX foi 54,77 ± 4,19%. O percentual de células endoteliais desconsideradas no Grupo 40 foi 51,20%; no Grupo 100 foi 35,07% e no Grupo 150 foi 29,83%. O programa CA considerou correto os exames nos quais 425,25 ± 102,24 células foram marcadas entre duas e cinco imagens (erro relativo calculado de 0,037 ± 0,005). O aumento do número de células diminuiu a amplitude do IC para todas as variáveis endoteliais avaliadas pela MEC / INTRODUCTION: Corneal endothelium plays an important role in physiology of the cornea. Morphological data generated from specular microscope such as endothelial cell density (CD), average cell area (ACA), coefficient of variance (CV) and percentage of hexagonal cells (HEX) are important to analyze corneal status. For a standard and reproducible analysis of the morphological data, a sampling statistical software called Cells Analyzer PAT. REC (CA) was used. PURPOSE: To determine normal reference values of CD, ACA, CV and HEX. To analyze the percentage of marked and excluded cells when the examiner counted 40, 100, 150 cells in one endothelial image. To analyze the percentage of marked and excluded cells according to the statistical software. To determine the confidence interval of these morphological data. METHODS: Transversal study of 122 endothelial specular microscope image (Konan, non-contact NONCON ROBO® SP- 8000 Specular Microscope) of 61 human individuals with cataract (63.97 ± 8.15 years old) was analyzed statistically using CA. Each image was submitted to standard cell counting. 40 cells were counted in study Group 40; 100 cells were counted in study Group 100; and 150 cells were counted in study Group 150. In study group CA, the number of counted cells was determined by the statistical analysis software in order to achieve the most reliable clinical information (relative error < 0,05). Relative error of the morphological data generated by the specular microscope were then analyzed by statistical analysis using CA software. For Group CA, relative planned error was set as 0.05. RESULTS: The average normal reference value of CD was 2395.37 ± 294.34 cells/mm2, ACA was 423.64 ± 51.09 m2, CV was 0.40 ± 0.04 and HEX was 54.77 ± 4.19%. The percentage of cells excluded for analysis was 51.20% in Group 40; 35.07% in Group 100; and 29.83% in Group 150. The average number of cells calculated initially by the statistical software was 247.48 ± 51.61 cells and the average number of cells included in the final sampling process was 425.25 ± 102.24 cells. The average relative error was 0.157 ± 0.031 for Group 40; 0.093 ± 0.024 for Group 100; 0.075 ± 0.010 for Group 150 and 0.037 ± 0.005 for Group CA. The increase of the marked cells decreases the amplitude of confidence interval (right and left eyes respectively) in 75.79% and 77.39% for CD; 75.95% and 77.37% for ACA; 72.72% and 76.92% for CV; 75.93% and 76.71% for HEX. CONCLUSION: The average normal reference value of CD was 2395.37 ± 294.34 cells/mm2, ACA was 423.64 ± 51.09 m2, CV was 0.40 ± 0.04 and HEX was 54.77 ± 4.19%. The percentage of excluded cells for analysis was 51.20% in Group 40; 35.07% in Group 100 and 29.83% in Group 150. CA software has considered reliable data when 425.25 ± 102.24 cells were marked by the examiner in two to five specular images (calculated relative error of 0.037 ± 0.005). The increase of the marked cells decreases the amplitude of confidence interval for all morphological data generated by the specular microscope
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Morfologia e morfometria das células do endotélio da córnea de equinos utilizando a microscopia eletrônica de varredura

Silva, Géssica Maria Ribeiro da January 2018 (has links)
O conhecimento da morfologia endotelial nas diferentes regiões da córnea é de suma importância para avaliação de endotélios corneanos saudáveis e doentes e de suas respostas ao uso de medicações. O objetivo do presente estudo foi descrever a morfologia do endotélio nas regiões central e periférica superior da córnea saudável de equinos, medir a área média das células pentagonais, hexagonais e heptagonais presentes nas regiões avaliadas, calcular o polimegatismo de cada tipo celular e correlacionar estes parâmetros entre os diferentes formatos celulares. Foram estudados dez equinos, machos ou fêmeas, de diferentes idades, provenientes de um abatedouro licenciado. Imagens da superfície posterior do endotélio da córnea foram obtidas com uso de microscopia eletrônica de varredura. A morfologia do endotélio de diferentes regiões da córnea foi avaliada. Além disso, foi correlacionada a variabilidade do tamanho celular médio com a morfologia endotelial. A análise estatística foi conduzida usando o teste de análise de variância (ANOVA) seguido do teste de Tukey (Post-Hoc), com nível de significância de 5%. As amostras avaliadas foram compostas em sua maioria por células hexagonais (60,5%), pentagonais (21,4%) e heptagonais (16,9%), células com quatro, oito ou nove lados compuseram 1,3%. A área celular média das células pentagonais foi 203,58 μm², das hexagonais foi 223,84 μm² e nas heptagonais foi 270,54 μm². O polimegatismo encontrado foi de 16% nas células pentagonais e hexagonais e de 20% nas heptagonais. A morfologia das células endoteliais de equinos saudáveis não diferiu entre as regiões central e periférica superior da córnea, sugerindo que a região central é representativa da região periférica. As células com sete lados apresentaram polimegatismo maior em relação às células de seis e de cinco lados. / The knowledge of the endothelial morphology in the different regions of the cornea is important for the evaluation of healthy and sick corneal endothelium and its response to drugs. In order to describe the endothelial morphology in the central and superior peripheral regions of the equines’ cornea, evaluate area from pentagonal, hexagonal and heptagonal cells present in the evaluated regions, calculate the polimegathism and correlate these parameters, two healthy corneas were collected of ten equine, male or female, of different ages. Images of the posterior surface of the corneal endothelium were taken with scanning electron microscope. The endothelial morphology was studied in the different regions of the equines’ cornea. In addition, the polimegathism and morphology was also correlated. A statistical analysis was conducted using the Analysis of Variance (ANOVA) followed by Tukey's Test (Post-Hoc), with a 5% level of significance. In the central region, the endothelium consisted of 58.8% hexagonal cells, 22.6% pentagon, 17.1% heptagonal and 1.4% cells with either four, eight or nine sides. In the superior peripheral region, 62.1% of the cells were hexagonal, 20.2% pentagon, 16.6% heptagonal and 1.1% cells with four or eight sides. The average cell area of the pentagonal cells was 210.77 ± 31.53 μm² in the central region and 196.39 ± 34.35 μm² in the superior peripheral region; in hexagonal cells, the average cell area found in the central region was 216.12 ± 37.09 μm² and 231.56 ± 34.95 μm² in the superior peripheral region; and in cells with seven sides, the average cell area was 261.76 ± 55.29 μm² in the central region and in the superior peripheral region was found 279.32 ± 52.37μm². When not considering the corneal regions, the polymegathism found was 16% in the pentagonal and hexagonal cells and 20% in the heptagonal cells. The morphology results obtained did not differ between the central and peripheral regions of the cornea, suggesting that the central region is representative of the peripheral region. The highest coefficient of variation was seen in cells with seven sides.

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