Orientador : Prof. Dr. Élcio Piovesan / Coorientador : Prof. Dr. Renato Nickel / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 06/12/2016 / Inclui referências / Resumo: O Acidente Vascular Cerebral (AVC) é considerado a causa de maior incapacidade grave no mundo, no entanto, sujeitos que sofreram AVC buscam sua independência e autonomia no retorno à atividade de condução de automóveis. Funções motoras, cognitivas e visuais podem estar comprometidas, portanto, para promover a segurança de todos no trânsito estes pacientes devem ser avaliados minuciosamente. O objetivo deste trabalho foi identificar e avaliar a interferência do AVC no retorno a esta atividade, através da avaliação do nível de independência, severidade da lesão, funções cognitivas, motoras, processamento e atenção visual, bem como da mensuração dos motivos para desejo e efetivo retorno à atividade e mudanças de hábitos e rotina, discutir sobre as funções atuais dos sujeitos com as necessárias para elegibilidade à função e descrever o atual processo brasileiro de concessão da Carteira Nacional de Trânsito (CNH) a pessoas com deficiência com a discussão da atuação dos profissionais de saúde na área. O trabalho foi realizado a partir de um estudo descritivo acerca do tema, com pacientes recrutados junto ao Ambulatório de Doenças Cerebrovasculares do Completo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC- UFPR). A amostra realizada foi por conveniência, com total de 18 pacientes, e os participantes da pesquisa foram classificados de acordo com o desejo e efetivo retorno à atividade em grupo retorno (n=9) e grupo pretensão (n=9). No processo de avaliação destes pacientes foram utilizados, a saber: NIHSS (National Institute of Neurological Disorders and Stroke - Stroke Scale), MIF (Medida de Independência Funcional), MoCA (Montreal Cognitive Assessment), UFOV (Useful Field of View), Rapid Pace Walk, Motricity Index, SULFS (Scale for Upper Limb Function in Stroke), Escala Modificada de Ashworth, Escala de Avaliação para Depressão de Hamilton e o questionário ADDA-AVC (Avaliação do Desempenho na Direção de Automóveis - AVC). Os resultados deste estudo apontam para o alto interesse no engajamento na condução de automóvel após o AVC, com vistas à independência, autonomia e maiores oportunidades sociais, de trabalho e lazer. Sujeitos que voltaram a dirigir apresentam déficits cognitivos e visuais significativos que geram alerta quanto à segurança de todos no trânsito e demonstra a necessidade de discussão sobre o atual processo brasileiro de avaliação da condução de pessoas com deficiência. Os indivíduos que pretendem retornar à atividade apresentam déficits significativos e é necessária discussão acerca do processo de reabilitação desses sujeitos, bem como de acesso à informação acerca de outras possibilidades de atividades de mobilidade na comunidade. O atual processo de concessão da CNH a pessoas com deficiência no Brasil apresenta seu enfoque em avaliação física desses sujeitos, no entanto, adaptações veiculares, se voltadas a avaliar a individualidade e funcionalidade do indivíduo, podem compensar a função comprometida, sem impedir o retorno à atividade. O desenvolvimento deste trabalho aponta para possíveis contribuições e importância da inclusão da atuação do terapeuta ocupacional, com seu olhar voltado ao desempenho e funcionalidade do indivíduo, no processo de avaliação, reabilitação e reeducação do desempenho de condução de automóveis, com vistas a promover a segurança de todos no trânsito. Palavras-chave: Acidente Vascular Cerebral, Terapeuta ocupacional, Condução de automóveis. / Abstract: The Stroke (CVA) is considered the most serious cause of disability in the world, however, people who suffered a stroke seek their independence and autonomy when returning to their car driving activity. Motor, cognitive and visual function may be compromised, so patients should be evaluated thoroughly to promote safety in traffic. The objective of this study was to identify and evaluate the interference of stroke in returning to this activity, by analyzing the level of independence, the severity of injury, the cognitive and motor functions, processing and visual attention. Measuring the reasons for the willing of driving and effective return to this activity, habits and routine changes, discussing the current and necessary functions of the people for eligibility to the function and describe the current Brazilian process of granting the National Traffic license (CNH) to people with disabilities with the discussion of the performance of health professionals in the area were also important objectives of this study. The study was conducted from a descriptive study about the subject, with patients recruited from the Cerebrovascular Diseases Clinic in Hospital de Clínicas from Federal University of Paraná (CHC- UFPR). The sample was held for convenience, with a total of 18 patients, and the participants were classified according to the desire and effective return to activity in return group (n = 9) and group claims (n = 9). In the evaluation process of these patients were used: NIHSS (National Institute of Neurological Disorders and Stroke - Stroke Scale), FIM (Functional Independence Measure), MoCA (Montreal Cognitive Assessment), UFOV (Useful Field of View), Rapid Pace Walk, Motricity Index, SULFS (Scale for Upper Limb Function in stroke), Modified Ashworth Scale, Hamilton Depression Rating Scale and ADDA-stroke questionnaire (Performance Assessment of the Car Direction - AVC). The results of this study point to the high interest in engaging in car driving after stroke, focusing the independence, autonomy and greater social, work and leisure opportunities. People who drive after the stroke have significant cognitive and visual deficits that generate alerts about the safety in traffic and it shows the need of discussion about the current Brazilian process of evaluation about the conduct of people with disability. Individuals who wish to return to the activity of driving have significant deficits and it is necessary to discuss about the rehabilitation process of these people, and about the access to information about other possibilities for mobility activities in the community. The current process for CNH concession to people with disabilities in Brazil has its focus on physical assessment of these people, however, vehicle adaptations, if aimed to assess the individuality and individual functionality, can compensate the impaired function without impeding the return to the activity. The development of this work points to possible contributions and the importance of including the role of the occupational therapist, with their gaze focused on the performance and individual functionality in the evaluation process, rehabilitation and re-education of the car driving performance, in order to promote safety in traffic. Keywords: Stroke, Occupational therapist, Drive.

Orientador: Prof. Dr. Ricardo Pasquini / Co-orientadora: Drª. Noemi Farah Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 07/10/2014 / Inclui referências / Resumo: Anemia de Fanconi (AF) é uma doença autossômica recessiva e, em raros casos, ligada ao X, com grande heterogeneidade genética resultante de diferentes mutações em genes cujos produtos estão envolvidos nas vias de reparo do DNA, sendo que 16 subtipos genéticos já foram identificados. A variabilidade fenotípica desta doença dificulta o diagnóstico clínico, sendo necessários testes laboratoriais para sua confirmação. A possível influência do genótipo AF nas manifestações clínicas, como falência progressiva da medula óssea, leucemias e câncer, pode ser melhor definida se a mutação dentro de um subtipo genético for identificada. A pesquisa de mutações é complexa em função do número de genes associados e da variedade de alterações deletérias e não deletérias em cada gene. Os objetivos deste estudo foram identificar o subtipo genético dos pacientes brasileiros com AF, desenvolver uma estratégia de diagnóstico molecular aplicável à rotina clínica e correlacionar os genótipos encontrados com os fenótipos observados. Foram incluídos 255 pacientes AF, atendidos no ambulatório de Anemia de Fanconi do HC/UFPR, entre 1995 e 2012. Foi desenvolvido um teste de triagem para a identificação de 11 mutações frequentes nos genes FANCA, FANCC e FANCG dos pacientes AF brasileiros. Nos casos identificados somente em heterozigose a segunda mutação envolvida foi investigada pela técnica de MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) e (ou) sequenciamento do DNA. Utilizando o teste de triagem proposto foi possível identificar alterações em 128 dos 255 pacientes (50,2%). Foram encontradas mutações no FANCA em 89/255 pacientes, no FANCC em 11/255 e no FANCG em 28/255. Em 71/128 pacientes foram encontradas mutações em homozigose e em 57/128 em heterozigose composta. Em quatro destes 57 a segunda mutação foi identificada ainda na triagem, em 51/57 foi necessário utilizar o MLPA e sequenciamento, e em dois pacientes não foi identificada a segunda mutação. Um total de 52 mutações diferentes foi encontrado, sendo 22 novas alterações ainda não descritas na literatura. O método proposto foi eficiente, pois permitiu a subtipificação genética de 126/255 (49,4%) pacientes. O uso desta estratégia possibilitou diminuir em 29,4% a necessidade do sequenciamento, além de dirigi-lo para um único gene em 20,0% dos casos heterozigotos. A redução do custo e do tempo torna viável a pesquisa de mutações como ferramenta para diagnóstico molecular da AF entre brasileiros. A análise da associação das mutações c.3788-3790delTCT e c.1077-2A>G com o fenótipo e às manifestações clínicas se restringiu aos dados disponíveis, porém foi limitada pelas dificuldades inerentes ao conteúdo dos prontuários. O uso desta estratégia de tipificação molecular em um maior número de pacientes permitirá a investigação mais ampla do efeito destas mutações na evolução clínica da AF. Palavras-chave: Anemia de Fanconi. Mutação-genética. Genes AF. / Abstract: Fanconi Anemia (FA) is an autosomal recessive or X-linked disease, with wide genetic heterogeneity resulting from different mutations in genes which products are involved in DNA repair pathways and 16 genetic subtypes have been identified. The phenotypic variability makes clinical diagnosis difficult and laboratory tests are necessary for confirmation. The possible influence of genotype in clinical manifestations such as progressive bone marrow failure, leukemia and cancer may be better understood if the mutations within a genetic subtype are identified. The mutation's investigation is complex due to the number of associated genes and the variety of deleterious and non-deleterious mutations in each gene. The aims of this study were to identify genetic subtypes of Brazilian patients with FA, to develop a strategy for molecular diagnosis applicable to clinical routine, and to correlate genotypes with phenotypes. 255 patients from Fanconi Anemia Outpatient Clinic of HC/UFPR, from 1995 to 2012 were included. The initial strategy was a screening test which included eleven frequent mutations in FA Brazilian patients. In the heterozygous cases the second mutation was investigated by MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification), and/or DNA sequencing. Using the proposed screening test, mutations were identified in 128 out of 255 patients (50.2%). FANCA mutations were found in 89/255 patients, FANCC in 11/255 patients and FANCG in 28/255 patients. 71/128 patients showed homozygous mutations and 57/128 were found in heterozygosis. In four out of 57 heterozygous the second mutation was identified in the screening test, in 51/57 MLPA and sequencing were required. In two patients the second mutation involved was not identified. A total of 52 different mutations were found, 22 of them are new mutations not previously described. The proposed method was effective because it allowed the genetic subtyping of 126/255 (49.4%) patients. Using this strategy a 29.4% decrease in sequencing demand was observed as well as sequencing was driven to a single gene in 20.0% when heterozygous. Cost and time reduction makes it feasible to search for mutations as a tool for molecular diagnosis of FA Brazilian patients. Analysis of association of the mutations c.3788_3790delTCT and c.1077-2A> G with the phenotype and the clinical manifestations was restricted to the available data, but limited by the difficulties relative to the content of the medical records. The use of this molecular typing strategy in a larger number of patients will allow more extensive investigation of the effect of these mutations in the clinical evolution of FA. Keywords: Fanconi Anemia. Genetic Mutation. FA genes.

Orientador: Prof. Dr. Helio A. G. Teive / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 13/12/2013 / Inclui referências / Resumo: A Paralisia Cerebral é caracterizada por alteração neurológica não progressiva e apresenta desordens posturais e de desenvolvimento. É decorrente de lesão no cérebro imaturo, interferindo na maturação do sistema nervoso central na primeira infância, podendo ocorrer nos períodos pré-natal , peri-natal ou pós-natal. É comum pacientes com paralisia cerebral apresentarem disfagia, seja em fase oral ou fase faríngea. As crianças que apresentam tais dificuldades tendem a apresentar problemas de saúde como aspiração de alimentos, desnutrição, infecções respiratórias, além da demora na ingesta alimentar que torna-se desgastante tanto para a criança como para o cuidador. O estudo da deglutição por videofluoroscopia é a avaliação mais indicada nestes casos pois, reproduz praticamente a situação real da deglutição, porém não é totalmente isento de complicações que incluem exposição a radiação e o risco de aspiração. OBJETIVO: Verificar a ocorrência de pneumonia aspirativa em crianças com paralisia cerebral pós estudo da deglutição por videofluoroscopia. MÉTODO: A população para o presente estudo prospectivo transversal foi de 103 crianças com Paralisia Cerebral, encaminhadas ao setor de Endoscopia Per Oral do Hospital de Clinicas do Paraná, para avaliação da deglutição por videofluoroscopia e após uma semana retornaram para avaliação clinica médica para verificar sinais e sintomas de pneumonia. RESULTADOS: Das crianças que participaram do estudo 46 eram do sexo feminino (44,66%) e 57 do sexo masculino (55,34%), com idade entre 0 e 14 anos. Observou-se que 84 (81,5%) apresentaram disfagia, sendo 24 (23,3%) com disfagia grave, 8 (7,7%) disfagia moderada e 52(50,4%) disfagia leve. Quando relaciona-se a aspiração traqueal durante a realização do estudo da deglutição por videofluoroscopia com a ocorrência de pneumonia aspirativa 1 semana após a realização do mesmo, apesar da ocorrência de aspiração traqueal em 32 (31,07%), nenhuma apresentou pneumonia aspirativa ou complicação infecciosa. CONCLUSÃO: Na população estudada não foi observada presença de pneumonia aspirativa em nenhuma criança, mesmo com aspiração traqueal presente em 32 (31,07%) dos casos e a consistência mais aspirada foi a líquida. Palavras-chave: fluoroscopia; pneumonia aspirativa; criança; paralisia cerebral; transtornos de deglutição. / Abstract: Cerebral palsy is characterized by non-progressive neurological condition associated to postural and developmental disorders . It is caused by injury to the immature brain, interfering with the maturation of the central nervous system in early childhood, occurring in the prenatal , perinatal or postnatal periods. It is common for patients with cerebral palsy to present dysphagia, whether in oral or pharyngeal phase. Children with these difficulties tend to have health problems such as food aspiration, malnutrition, respiratory infections, and prolonged feeding time that becomes stressful for both the child and the caregiver. The videofluoroscopic swallowing study is the most indicated evaluation in these cases, as it virtually generates the actual situation of swallowing, although it is not entirely free from complications, which includes radiation exposure and risk of aspiration. OBJECTIVE: To verify the occurrence of aspiration pneumonia in children with cerebral palsy after videofluoroscopic swallowing study. METHODS: The population for this prospective and cross-sectional study constituted of 103 children with cerebral palsy, referred to the Peroral Endoscopy Sector of Hospital de Clínicas of Paraná, for videofluoroscopic swallowing study who, after a week, returned for medical examination for signs and symptoms of pneumonia. RESULTS: Of the children who participated in the study 46 were female (44.66%) and 57 male (55.34%), aged between 0 and 14 years. Data showed that 84 (81.5%) had dysphagia, being 24 (23.3%) with severe dysphagia, 8 (7.7%) moderate dysphagia and 52 (50.4%) mild dysphagia. When tracheal aspiration during videofluoroscopic swallowing study was related to the occurrence of aspiration pneumonia in a week follow up, the results were absence of infectious complications and pneumonia, even though 32 (31.07%) children had aspirated during the procedure. CONCLUSION: The studied population did not show presence of aspiration pneumonia in any child, even with tracheal aspiration present in 32 (31.07%) cases and the higher incidence of aspiration was liquid consistency. Keywords: fluoroscopy, aspiration pneumonia, child, cerebral palsy, deglutition disorders

Orientadora: Profª. Drª. Iara de Messias-Reason / Co-orientador: Prof. Dr. Renato Nisihara / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 03/09/2014 / Inclui referências / Resumo: A Doença de Crohn (DC) é uma doença inflamatória crônica que pode afetar qualquer parte do trato gastrointestinal. Sendo a artropatia a manifestação extra-intestinal mais observada. Anticorpos anti peptidio cíclico citrulinado (anti-CCP) e fator reumatóide (FR) são marcadores sorológicos utilizados para triagem de artrite reumatóide (AR). O presente estudo teve como objetivo investigar a presença de anticorpos anti-CCP e FR em pacientes com DC no sul do Brasil. Além disso, foi avaliada a presença de artralgia e espondiloartrites (SpA). Pacientes com DC previamente diagnosticados através de exames clínicos, de imagem, endoscópicos e histológicos, no serviço de Gastroenterologia do HC/UFPR em Curitiba-PR, foram incluídos consecutivamente. Os dados clínicos e demográficos foram coletados pela revisão dos seus prontuários. No total, participaram do estudo 100 pacientes, dos quais 60% (60/100) eram do gênero feminino, com idade média de 41,9 ± 12,04 anos (entre 16 e 83 anos). Como grupo controle, foram utilizados soros de 100 indivíduos saudáveis da mesma área geográfica. Artralgias foram queixas presentes em 55% dos pacientes, sendo observadas em 65,5% das mulheres (36/55) e em 34,5% dos homens (19/55). Não foi encontrada associação entre artralgia e o tipo de tratamento utilizado. Seis pacientes (6/100) tinham SpA previamente diagnosticada (três homens, com EA e três mulheres: duas com artrite periférica e uma com artrite axial). No grupo com DC, anti-CCP foi positivo em apenas um caso, enquanto o FR foi positivo em sete pacientes (7%, 7/100). A paciente positiva para anti-CCP (38 anos, FR 36 UI/ml), preenchia os critérios estabelecidos pelo American College of Rheumatology e foi diagnosticada como AR. No grupo controle, o anticorpo anti-CCP foi detectado em um indivíduo (1%) e FR em seis amostras (6%). O presente estudo demonstrou baixa positividade de anticorpos anti-CCP e FR em pacientes com DC. Além disso, verificou-se alta prevalência de artralgia nos pacientes, com seis por cento deles diagnosticados com SpA. Palavras-chave: Doença de Crohn; fator reumatóide; anticorpo anti peptídio cíclico citrulinado; artrite reumatóide; espondiloartrites. / Abstract: Crohn's disease is a chronic inflammatory disease that can affect any part of the gastrointestinal tract. Arthropathy is the most observed extra-intestinal manifestation. Anti-cyclic citrullinated peptide antibodies (anti-CCP) and rheumatoid factor (RF) are serologic markers used in the screening of rheumatoid arthritis (RA). The present study aimed to investigate the presence of anti-CCP antibodies and RF in patients with CD from southern Brazil. In addition, we evaluated the presence of arthralgia and spondyloarthritis (SpA). CD patients, previously diagnosed by clinical data, imaging, endoscopic and histologic findings in the gastroenterology service of HC / UFPR in Curitiba-PR were included consecutively. Clinical and demographic data were collected through a review of their medical charts. A total of 100 patients participated in the study, of which 60% (60/100) were female, mean age 41.9 ± 12.04 years (16 to 83 years). As a controls, sera from 100 healthy individuals from the same geographical area were used. Arthralgia complaints were present in 55% of the patients, most often seen in women (65.5%, 36/55), but also in 34.5% of men (19/55). No association was found between arthralgia and the type of treatment used. Six patients (6/100) had previously been diagnosed with SpA (three men and three women: two with peripheral arthritis and one with axial arthritis). In the group with DC, anti-CCP was positive in only one case, while RF was positive in seven patients (7%, 7/100). The patient positive for anti-CCP (woman, 38 years, FR 36 IU / ml), had RA diagnosis confirmed by criteria established by the American College of Rheumatology. In the control group, the anti-CCP antibodies was detected in one subject (1%) and RF was positive in six samples (6%). The present study showed low positivity for anti-CCP antibodies and RF in patients with CD. In addition, there was a high prevalence of arthralgia in these patients, with six percent of them being diagnosed with SpA. Keywords: Crohn's disease; rheumatoid factor; cyclic citrullinated peptide antibody ; rheumatoid arthritis; spondyloarthritis.

Orientadora: Profª. Drª. Sonia Mara Raboni / Co-orientadora: Profª. Drª. Libera Maria Dalla Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 31/10/2014 / Inclui referências / Resumo: Indivíduos infectados com M. tuberculosis (MTB) sem doença ativa têm infecção latente por tuberculose (ILTB). Pacientes portadores de HIV, por serem imunodeprimidos, são mais propensos a desenvolver TB ativa. A identificação da ILTB permite a intervenção precoce com o uso de quimioprofilaxia e, consequentemente, contribui para uma menor morbidade e mortalidade neste grupo de pacientes. A prova tuberculínica (PT) mantém-se como o método padrão-ouro para diagnóstico de ILTB, apesar de apresentar limitações técnicas. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho do teste imunológico QuantiFERON TB Gold In Tube®, que se baseia na avaliação da resposta do gama interferon para antígenos específicos de MTB, para diagnóstico de ILTB em pacientes com HIV residentes em um país com alta incidência de tuberculose, comparando estes achados com os resultados da PT. Realizou-se um estudo de Coorte, que incluiu 140 pacientes, que foram acompanhados por um período médio de 12 meses (6 a 21 meses). Um total de 115 (82%) e nove (6,4%) pacientes apresentou ambos os testes negativos e positivos, respectivamente. Entre os resultados discordantes observou-se em 12 (8,6%) pacientes IGRA positivo com PT negativa e em quatro (3%) pacientes resultados de IGRA negativo com PT positiva. O coeficiente de Cohen Kappa foi de 0,214, mostrando uma concordância pobre entre as duas técnicas. Comparando os resultados obtidos em ambos os testes, pode-se verificar que não houve evidência estatística de que um ou outro método seja superior (p = 0,08). Não foi observada nenhuma correlação entre os resultados de IGRA e PT e os valores de LT CD4+, embora em pacientes com maior imunossupressão (LT CD4+ <300 células/mm3) observamos testes IGRA positivos e PT não reatoras. No período de acompanhamento, um paciente que apresentava PT e IGRA negativos evoluiu para morte por septicemia, e outro com resultados discordantes (IGRA+/PT-) apresentou conversão da PT. Avaliando as características de desempenho do IGRA, considerando PT como o teste padrão-ouro, a sensibilidade observada foi em torno de 70%, com especificidade de 90%. Considerando os resultados de ambos os testes como verdadeiro positivo, um aumento de 8% na positividade pode ser observado. O tratamento da ILTB neste grupo de pacientes poderá ter impacto sobre a taxa de tuberculose ativa e sobrevivência de portadores do HIV, porém isso ainda precisa ser avaliado ao longo dos anos. Palavras-chave: HIV, Mycobacterium tuberculosis, teste tuberculínico / Abstract: Individual infected with M. tuberculosis (MTB) without active disease can present latent tuberculosis infection (LTBI). These patients in the context of impaired immune systems, such as HIV+, are more likely to progress to active TB. Identification of LTBI allows early intervention with the use of chemoprophylaxis, consequently contributing to a lower morbidity and mortality in this group of patients. Tuberculin skin test (TST) has remained as gold standard method to diagnosis LTBI, despite it presents technical limitations. The aim of this study was to assess the performance of the new immunological test Quantiferon TB Gold in tube, which is based on evaluating the IFN-gamma response to specific MTB antigens, to LTBI diagnosis on HIV patients from a country with high-tuberculosis burden, comparing the findings with TST results. It was a cohort study that included 140 patients, who are followed up for 21 months. A total of 115 (82%) and 9 (6.4%) patients had both tests negative and positive, respectively. Disagreement results occurred in 12 (8.6%) patients, whom had IGRA positive with negative TST and 4 (3%) patients that showed positive TST with negative IGRA. The Cohen Kappa coefficient found was 0.214, showing a poor concordance between both techniques. Comparing the results obtained by both tests, there was no statistical evidence that either method is different, because of the discrepancies occurred in a statistically identical manner (p = 0,08). None correlation between the results and CD4+ LT values was observed, though in patients with lowers CD4+ LT values (<300 cell/mm3) only IGRA tests were positive. In the period of follow up one patient, that presented both negative tests, evolved to death from sepsis, and another with discordant results (IGRA+/TST-) presented TST conversion. Evaluating the operational characteristics of IGRA, considering TST as the gold standard test, the sensitivity observed was around 70% and the specificity 90%. Considering the results of both tests as true positive an incremental of 8% in the positivity could be observed. If the LTBI treatment in this group of patients will have some impact on the rate of active tuberculosis and survival of HIV carriers still need to be evaluated over the years. Keywords: HIV, Mycobacterium tuberculosis, tuberculin skin test.

Orientador: Prof. Dr. Iara José de Mesias Reasson / Orientador: Prof. Dr. Angelica B. Winter Boldt / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 23/05/2014 / Inclui referências / Linha de pesquisa: Associação genética a doenças / Resumo: MASP-2, a serina protease 2 associada à lectina ligante de manose ou ficolinas, é uma proteína-chave na ativação da via das lectinas do complemento. Diversos polimorfismos do gene MASP2 estão associados com concentrações séricas ou grau de atividade funcional de MASP-2. Neste trabalho, investigamos uma possível associação entre polimorfismos de MASP2 e concentrações séricas de MASP-2 com a suscetibilidade à febre reumática (FR) e a cardiopatia reumática crônica (CRC). Foram haplotipados 11 polimorfismos de MASP2 utilizando PCR multiplex sequência-específica em 145 pacientes com história de FR provenientes do sul do Brasil (103 com CRC e 42 sem acometimento cardíaco [FRo]) e 290 controles saudáveis. As concentrações de MASP-2 foram determinadas por ensaio de imunoadsorbância enzimática em 145 pacientes e 145 controles. Os polimorfismos p.377A e p.439H, associados à baixa produção de MASP-2, foram negativamente associados à CRC (p=0,02, OR=0,25). Em contraste, haplótipos com quatro polimorfismos, localizados do intron 9 ao exon 12 (CDVR) e associados a concentrações intermediárias de MASP-2, aumentaram a suscetibilidade a CRC (p=0,02, OR=4,9). Apesar disso, as concentrações de MASP-2 foram mais baixas nos pacientes, do que nos controles, provavelmente devido ao consumo da proteína pela ativação da via das lectinas (medianas 253 vs. 321 ng/ml respectivamente, p<0,0001). Logo, polimorfismos de MASP2 associados à concentração sérica de MASP-2 podem atuar como moduladores no desenvolvimento da FR. A elucidação do papel desempenhado por MASP-2 na suscetibilidade a FR poderá auxiliar no desenho de estratégias de prevenção e tratamento da doença. Palavras-chave: Febre reumática; cardiopatia reumática crônica; MASP-2; polimorfismos de MASP2 / Abstract: MASP-2, the serine protease 2 associated with mannose-binding lectin or ficolins, is a key protein in the activation of the lectin pathway of complement. Several MASP2 gene polymorphisms have been associated with serum levels or degree of functional activity of MASP-2. In this work, we investigated a possible association between MASP2 polymorphisms and MASP-2 serum levels with the susceptibility to Rheumatic Fever (RF) and Rheumatic Heart Disease (RHD). We haplotyped 11 MASP2 polymorphisms with multiplex sequence-specific PCR in 145 patients with history of RF from south Brazil (103 with RHD and 42 without cardiac lesion [RFo]) and 290 healthy controls. MASP-2 levels were determined by enzyme-linked immunoadsorbance assay in 145 patients and 145 controls. The p.377A and p.439H polymorphisms, associated with low MASP-2 production, were negatively associated with RHD (p=0.02, OR=0.25). In contrast, haplotypes comprising four polymorphisms, located from intron 9 to exon 12 (CDVR) and associated with intermediate MASP-2 concentrations, increased the susceptibility to RHD (p=0.02, OR=4.9). Nevertheless, MASP-2 levels were lower in patients than in controls, probably due to protein consumption by the activation of the lectin pathway (medians 253 vs. 321 ng/ml, p<0.0001). Thus, MASP2 polymorphisms associated MASP-2 production may act as immune modulators in the development of RF. The elucidation of the role of MASP-2 in RF susceptibility might help in the design of strategies for RF prevention and treatment. Keywords: Rheumatic fever; rheumatic heart disease; MASP-2; MASP2 polimorphysms.

Orientador : Prof. Dr. Marcelo Mazza do Nascimento / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 09/06/2015 / Inclui referências : f. 52-59 / Resumo: INTRODUÇÃO: O teste de equilíbrio peritoneal (peritoneal equilibrium test) (PET) é o método mais difundido e utilizado para avaliação do transporte de solutos da membrana peritoneal (MP). Outros métodos têm sido descritos a fim de trazer mais informações sobre outros aspectos do transporte de solutos e de água da MP . OBJETIVO: O objetivo principal deste estudo foi de comparar três métodos de avaliação do perfil de transporte da MP: PET tradicional (PET-t, mini PET e PET modificado (PET-mod). MÉTODOS: uma amostra de conveniência de vinte e um pacientes não diabéticos, com idade superior a 18 anos (idade média 58±15 anos) há pelo menos 3 meses (média 18±14 meses) em programa de diálise peritoneal (DP) foram submetidos a realização do PET-t (2,5%-4h) , mini- PET (3,86%-1h) e PET-mod (3,86% - 4h) A concordância entre os três métodos (D/P creatinina, D/D0 glicose) foi verificada por meio da análise análise de variância (ANOVA), coeficiente de correlação de Pearson e análise de Bland-Altman. RESULTADOS: ao se analisar a relação D/P creatinina, entre os três métodos a análise de variância não mostrou diferença significativa entre o PET tradicional e o PET-mod (p=0,746). Por outro lado, isto não foi observado ao se comparar o PET-t e mini-PET (p<0,001) e entre PET- mod e Mini PET (p<0,001) Além disto, houve uma correlação positiva e significativa entre PET-t e PET-mod (r=0,387 ; p=0,009) não se observando tal associação em relação ao PET e mini-Pet (r=0,088 p=0,241). O teste de Bland Altman mostrou que o viés estimado entre PET e PETmod foi -0,029 (p=0,201) e entre o PET-t e miniPET de 0,206 (p<0,001). Ao se avaliar o D/D0 glicose, entre os três métodos, a análise de variância não mostrou diferença significativa entre PET-t e mini-PET (p=0,885) porém com diferença significativa entre PET-t e PET-mod (p=0,003) e entre PET-mod e mini-PET (p=0,002). Além disto, não se observou uma correlação significativa entre PET e PET-mod (r=-0,161 ; p=0,682) e entre PET e Mini Pet (r= 0,002; p=0,586). Pelo teste Bland-Altman o viés estimado entre PET e PET- mod foi 0,124 (p=0,005) e entre PET e mini-PET de -0,013 (p=0,738). CONCLUSÃO: Os resultados apontam uma boa associação entre PET-t e o PET-mod podendo este ser uma alternativa ao PET tradicional por oferecer informações mais acuradas em relação ao perfil de ultrafiltração na DP . Por outro lado, esta associação não se verificou em relação ao Mini-PET. . Palavras chave: diálise peritoneal; teste equilíbrio peritoneal; ultrafiltração; transporte de solutos; PET, MIniPET, PET modificado / Abstract: INTRODUCTION: Peritoneal Equlibration Test (PET) is widely used to evaluate peritoneal transport. New methods have been described to facilitate and improve this evaluation. Here we compared three methods to evaluate peritoneal transport: traditional PET (PET), mini-PET and modified PET (mod- PET). OBJECTIVE: The main objective of this study is to compare three methods to evaluate peritoneal transport: traditional PET, Mini PET and modified PET (mod-PET). METHODS: A convenience sample of twenty-one non-diabetics adults in peritoneal dialysis (PD) for at least 3 months were submitted to PET (2,5%- 4h) , mini-PET (3,86%-1h) and mod-PET (3,86% - 4h). D/P creatinine, D/D0 glucosis and D/P sodium were analised by analysis of variance (ANOVA), Pearson correlation and Bland-Altman test. RESULTS: D/P creatinine ratio was not significant different difference between PET and mod-PET (p=0,746). Besides, there was a significant difference between PET-t and mini-PET (p<0,001) and between mod-PET and mini- PET (p<0,001). There was also a positive and significant correlation between PET-t and mod-PET (r=0,387 ; p=0,009) but not between PET-t and mini Pet (r=0,088 p=0,241). Bland Altman test showed an estimated bias between PET and mod-PET of -0,029 (p=0,201)and between PET and mini- PET 0,206 (p<0,001). D/D0 glucoses had not significant different between PET and mini-PET (p=0,885), PET and PET-mod (p=0,003) and mod-PET and Mini-PET (p=0,002). Moreover, no significative correlation was found between PET and mod-PET (r=-0,161 ; p=0,682) or between PET and Mini- Pet (r= 0,002 (p=0,586). Bland Altman test also showed an estimated bias between PET and mod-PET of 0,124 (p=0,005). Between PET and mini-PET - 0,013 (p=0,738). CONCLUSION: The results shows a good association between PET and Mod-PET .However, this association could not be verified regarding to MiniPET. Key words: peritoneal dialysis; peritoneal equilibration test; solute transport.

Orientador: Profª. Drª. Iara José de Messias Reason / Coorientador: Prof. Dr. Najeh Maissar Khalil / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 26/08/2016 / Inclui referências : f. 117-139 / Resumo: O câncer é uma das doenças que mais preocupa a população mundial atualmente e as projeções futuras são alarmantes. A dificuldade no desenvolvimento de tratamentos com menor custo, efetivos e baixo efeito colateral preocupa a devido o risco de pacientes ficarem sem o atendimento adequado. Apostar em produtos naturais com potenciais terapêuticos talvez seja a solução mais viável a curto prazo. Uma das substâncias que vem obtendo boas respostas clínicas é a capsaicina. Ela é um metabólito secundário utilizado como analgésico e anti-inflamatório, porém, com relatos de respostas antitumorais e cancerígenas. A fim de avaliar o potencial terapêutico da capsaicina e melhorar o direcionamento do fármaco apenas para células tumorais, o presente estudo teve o objetivo de desenvolver nanoformulação de albumina bovina com capsaicina. Entretanto, antes de desenvolver a formulação foi necessário validar o método analítico para identificação e quantificação da capsaicina. O mesmo foi realizado por cromatografia líquida de alta eficiência com volume de injeção de 100?L, fase móvel de metanol:água (15:85, v/v), temperaturas da coluna e amostra em 25 oC, coluna fase reversa C18 (25cm X 4mm), tempo de corrida de 8 minutos e leitura da absorbância em 280 nm. A formulação foi desenvolvida por método de dessolvataçãocoacervação utilizando meio com pH 7, adição do agente dessolvatante (etanol) em 1 mL/min e concentração do reticulante (glutaraldeído) a 8%. Após desenvolver a formulação, a mesma foi validade através de vários métodos analíticos, o que confirmou a estabilidade da formulação (90 dias em ambiente refrigerado) e a reprodutibilidade do método de síntese. As nanopartículas apresentaram forma quasi-esférica, diâmetro de aproximadamente 200 nm e baixo índice de polidispersão. Os testes in vivo analisaram as alterações ocasionadas sobre parâmetros bioquímicos, hematológicos, histológicos e da expressão de citocinas. Diferentemente dos resultados da literatura, houve um discreto aumento da glicemia para capsaicina livre, no entanto, os outros parâmetros bioquímicos ficaram dentro da normalidade. O hemograma da capsaicina livre apresentou alteração na contagem de % de linfócitos, 67 ±4%, contra 37 ±7 e 49±7% do controle e nanopartículas, respectivamente. Por outro lado, os granulócitos da droga livre tiveram redução (21 ± 2%), enquanto o controle (49 ±4%) e nanopartículas de capsaicina (40 ±9%) não tiveram diferença significativa, o que pode representar algum processo inflamatório ou infeccioso. Entretanto, ainda são necessários outros estudos para confirmar alguma hipótese. A análise histológica revelou infiltrados de leucócitos em tecidos pulmonares, sendo esta resposta inflamatória mais intensa com a droga livre. Dentre as citocinas, apenas a expressão de TNF-alfa foi influenciada. Esta citocina apresentou menor expressão plasmática nos grupos com capsaicina livre e nanoencapsulada. Os testes in vivo demonstraram perfil de segurança devido a ausência de alterações nos exames. Sobre a resposta antitumoral in vitro, a nanoformulação obteve excelentes resultados com inibição do crescimento de mais 80% das células B16F10 (modelo de melanoma) na concentração de 250 ug/mL. A IC50 calculada ficou em 31,25 ug/mL durante incubação de 72h. Ao fim desta etapa de estudo, pode-se concluir que o desenvolvimento da nanopartícula de albumina com capsaicina para fins terapêuticos (anti-tumorais) ocorreu com sucesso. A formulação possui controle no diâmetro, liberação da droga, menor toxicidade ao ser comparada com a droga livre e boa resposta antitumoral in vitro. Palavras-chave: Nanopartículas. Capsaicina. Antitumoral. Toxicidade. Albumina. / Abstract: Cancer is currently one of the diseases that most concerns the world population and its future projections are alarming. The difficulty in developing effective, with lower costs and side effects treatments is due to the risk of patients being without adequate attendance. To consider natural products with therapeutic potentials may be the most viable solution at short-term. One of the substances that has been obtaining great clinical responses is capsaicin. It is a secondary metabolite utilized as analgesic and anti-inflammatory, however, with reports of antitumor and anti-carcinogenic responses. In order to evaluate the therapeutic potential of capsaicin and improve the drug's targeting to tumor cells, the present study aimed to develop a bovine albumin nanoformulation with capsaicin. Nonetheless, before developing the formulation it was necessary to validate the analytical method to identify and quantify the capsaicin. This procedure was performed by high-performance liquid chromatography (HPLC) with injection volume of 100 ?L, mobile phase of methanol: water (15:85, v/v), column and sample temperature of 25 oC, reversed-phase column C18 (25cm X 4mm), trial time of 8 minutes and absorbance reading in 280 nm. The formulation was developed by desolvation/ coacervation method using mean with pH 7, 1 mL/min addition of dissolvent agent (ethanol) and reticulant agent concentration (glutaraldehyde) of 8%. After developing the formulation, it was validated through many analytical methods, which confirmed the stability of the formulation (90 days in a refrigerated environment) and reproducibility of the synthesis method. The nanoparticles presented a quasi- spherical form, diameter of approximately 200 nm and a low polydispersity index. In vivo tests analyzed the alterations caused over biochemical, hematological, histological parameters and over the cytokines expression. Differently from the literature, a small rise in glucose level occurred in the group of free capsaicin, however, the other biochemical parameters remain within the reference range. The hemogram of this free capsaicin group presented alterations in lymphocytes % count 67 ±4%, against 37 ±7 and 49±7% of control and nanoparticles groups, respectively. In contrast, the granulocytes of the free drug group reduced (21 ± 2%), while the control group (49 ±4%) and the nanoparticle one (40 ±9%) presented no significant difference, what may represent some inflammatory or infectious process. Still, other studies are necessary to confirm any hypothesis. The histological analysis revealed leukocytes infiltrates in pulmonary tissues, being this inflammatory response more intense with the free drug. Among the cytokines, only the expression of TNF-alfa was influenced. This cytokine showed a lower plasmatic expression in the groups with free and nano encapsulated capsaicin. In vivo tests demonstrated a safe profile due to the absence of alterations in the analyses. About the antitumor response in vitro, the nanoformulation obtained excellent results, inhibiting 80% of B16F40 cells (melanoma mode) in the concentration of 250 ug/mL. The IC50 calculated was 31.5 ug/mL during incubation of 72h. In the end of this study stage, it can be concluded that the development of a nanoparticle of albumin with capsaicin to therapeutic purposes (antitumor) occurred with success. The formulation has control in diameter and drug release, lower toxicity when compared to the free drug and a good antitumor response in vitro. Key-words: Nanoparticles. Capsaicin. Antitumor. Toxicity. Albumin.

Orientador : Prof. Dr. Felipe F. Bondan Tuon / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 09/12/2016 / Inclui referências : f. 46-50;63-65 / Resumo: A ceratite infecciosa e uma causa importante de morbidade ocular e de prejuízo da visão. O diagnostico microbiológico precoce e o tratamento imediato podem evitar um prognostico visual ruim. Os objetivos desse estudo foram: determinar a taxa de positividade das culturas em pacientes com ceratite infecciosa, investigar os fatores associados a culturas positivas, estabelecer as principais etiologias de ceratite em nosso meio e avaliar o grau de concordância entre a cultura e a PCR (reação em cadeia da polimerase) na pesquisa de Acanthamoeba. Pacientes com suspeita de ceratite infecciosa atendidos no serviço de emergência de dois hospitais em Curitiba/PR/Brasil, entre junho de 2014 e abril de 2016 foram selecionados para inclusão no estudo. Os pacientes que preencheram os critérios de inclusão foram submetidos a exame oftalmológico e raspado de córnea para exames laboratoriais. Dados demográficos, historia atual da doença, tratamentos em curso e historia pregressa de comorbidades oculares foram coletados. Setenta e cinco pacientes preencheram os critérios de inclusão. As culturas foram positivas em 41% (31/75) dos exames. Os agentes causadores mais encontrados foram as bactérias (54%;17/31), seguida por fungos (32%;10/31) e Acanthamoeba sp. (16%,5/31)). Os fatores associados com culturas positivas foram o uso de corticoide antes da coleta (p=0,006) e ulceras maiores que 3.62mm2 (p=0,016). Pacientes em uso de antibiótico antes da coleta tiveram maior chance de um resultado de cultura negativo [OR: 3,65 (IC95%: 1,32 - 10,07)]. Em 26 casos foi possível comparar a concordância entre os testes de cultura e PCR na pesquisa de Acanthamoeba. Houve concordância entre os testes em 96% dos casos. A taxa de positividade das culturas de raspado de córnea encontrada foi de 41%. Os agentes infecciosos mais prevalentes foram as bactérias. O tratamento com antibiótico antes da coleta diminuiu a chance de uma cultura positiva, o uso de colírio de corticoide e o tamanho da ulcera maior que 3.62mm2 estão associados a maior probabilidade de uma cultura positiva. Houve uma alta concordância entre os testes de cultura e PCR na pesquisa de Acanthamoeba. Palavras-chave: Ceratite. Ulcera da córnea. Cultura. Antibióticos. Corticosteroides. / Abstract: Infectious keratitis is an important cause of ocular morbidity and visual impairment. Prompt microbiological diagnosis and treatment can avoid a bad outcome. The purposes of this study were: to determine the rate of positive cultures in patients with infectious keratitis, investigate the factors associated with culture positivity, identify the main microorganisms responsible for keratitis in our hospitals and determine the rate of agreement between culture and polymerase chain reaction (PCR) in the identification of Acanthamoeba. Patients with suspected infectious keratitis presenting to the emergency service of two hospitals in Curitiba, PR, Brazil, between June 2014 and April 2016, were recruited for the study. Patients who met the inclusion criteria were submitted to eye examination and corneal scraping for laboratorial tests. Demographic data, current medical history, current treatments and history of ocular comorbidities were obtained. Seventy-five patients fulfilled the inclusion criteria. The culture positivity rate was 41.3% (31/75). The most frequent microorganisms identified were bacteria (54%,17/31), followed by fungi (32%,10/31), and Acanthamoeba sp. (16%,5/31). Two factors were significantly associated with positive cultures: previous treatment with corticosteroid drops (p=0.006) and ulcer size larger than 3.62 mm2 (p=0.016). Patients on topical antibiotics before corneal scraping were more likely to be culture negative [OR: 3.65 (IC95%: 1.32 - 10.07)]. In twenty-six cases the comparison between culture test and PCR test for Acanthamoeba sp. identification was realized. There was agreement between tests in 96% of the cases. The culture positivity rate of corneal scraping was 41.3%. The most frequent microorganisms identified were bacteria. Antibiotic treatment before corneal scraping decreases the probability of a positive culture, corticosteroids treatment and ulcer size larger than 3.62 mm2, are associated with positive cultures. There was a great agreement between the culture test and PCR test in the identification of Acanthamoeba sp. Keywords: Keratitis. Corneal ulcer. Cultures. Antibiotics. Corticoids.

Orientador: Prof. Dr. Hélio Afonso Ghizoni Teive / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 03/08/2017 / Inclui referências : f. 83-90 / Resumo: JUSTIFICATIVA: crises não epilépticas psicogênicas (CNEPs) são comuns. Contudo, há frequente dificuldade diagnóstica e para condução dos casos. Crises epilépticas (CEs) constituem uma emergência médica e sua abordagem imediata e correta é essencial, particularmente em ambiente de pronto atendimento. Várias situações clínicas podem mimetizar CEs, conduzindo a erros e prescrições inadequadas de fármacos antiepilépticos (FAEs), tanto emergencialmente, quanto em ambiente ambulatorial. CNEPs equivocadamente interpretadas como CEs levam a incrementos em morbidade e custo. Emergencistas, enfermeiros, estudantes de Medicina do último ano, médicos residentes e plantonistas em geral são os primeiros a abordar estes casos e sua impressão inicial é extremamente importante na condução dos mesmos. Nosso estudo aborda a fenomenologia das CNEPs, determina a acurácia diagnóstica para esta condição entre os profissionais citados, propõe e valida um instrumento diagnóstico breve, com base semiológica. MÉTODOS: Este estudo foi concebido em duas partes. Na primeira na fase foram avaliadas CNEPs e CEs para identificação de sinais semiológicos que possibilitassem a discriminação entre estes dois tipos de crises. Estes achados foram comparados com os dados descritos na literatura e foram então separados 6 sinais para compor um instrumento clínico, visando a diferenciação de CNEPs e CEs. Na segunda parte deste estudo, quatro grupos de profissionais (53 enfermeiros, 34 médicos emergencistas, 33 estudantes do último ano de Medicina e 12 residentes de Neurologia) participaram de um curto programa de treinamento, consistindo em uma determinação de acurácia diagnóstica inicial (pré-teste), uma sessão de instrução de 30 minutos, incluindo o instrumento diagnóstico breve e finalmente uma nova determinação de acurácia póstreinamento (pós-teste). As curvas de aprendizagem foram estudadas. RESULTADOS: foram identificados 27 sinais observados nas CNEPs e CEs dos pacientes analisados, todos previamente descritos na literatura. Destes foram separados 6 sinais para compor um instrumento para aplicação clínica. Estes sinais tinham como características o fácil e imediato reconhecimento, dispensando a necessidade de dados da história clínica, testemunhos de circunstantes ou dados sobre a duração da crise. As diferentes categorias de profissionais não mostraram diferenças significativas em sua acurácia diagnóstica para CNEPs ou CEs, ao longo das fases de pré e pós-testes. Entretanto, todos os grupos se beneficiaram significativamente do programa de treinamento apresentado. CONCLUSÕES: os resultados obtidos permitiram identificar sinais clínicos com potencial discriminatório entre CNEPs e CEs e produziram validação para um novo instrumento diagnóstico breve, com fundamentação exclusivamente semiológica. Adicionalmente, nossos resultados demonstram que medidas educativas podem contribuir na identificação de CNEPs por equipes em plantões de emergências médicas, o que poderia melhorar o atendimento primário e reduzir custos e a morbi-letalidade nestes pacientes. PALAVRAS-CHAVE: crises não epilépticas psicogênicas, epilepsia, semiologia / Abstract: RATIONALE: Psychogenic nonepileptic seizures (PNES) are common, often misdiagnosed and poorly approached regarding to treatment. Epileptic seizures (ES) are often seen as a medical emergency and their immediate and accurate recognition is pivotal in providing acute care. A number of clinical situations may mimic ES, potentially leading to misdiagnosis at the emergency room and to inadequate prescription of antiepileptic drugs (AED) in the acute and chronic settings. PNES play a major role in this scenario, leading to delay in the correct diagnosis and consequent increase in treatment morbidity and cost. Emergency physicians, nurse clinicians, senior medical students, medical residents and oncall personnel often conduct the initial assessment of these patients and their impression may be decisive in the prehospital approach to seizures. In our study we evaluate PNES phenomenology and sought to investigate the accuracy of PNES diagnosis among these professionals involved in the initial assistance to patients with ES and PNES. We also proposed and validated a brief diagnostic tool for discrimination between PNES and ES. METHODS: this study was designed with two components to be carried out together. First, we evaluated PNES and ES seeking to identify potential discriminators between these seizures. These findings were compared with the literature and we developed a 6-item diagnostic tool aiming to distinguish PNES from ES. On phase two, 53 registered nurses, 34 emergency physicians, 33 senior year medical students, and 12 neurology residents took a short training program consisting of an initial video-based seizure assessment test (pretest), a 30-minute presentation including the 6-item diagnostic tool and then a videobased reassessment (posttest). Baseline and learning curves were determined. RESULTS: We identified 27 signs listed as potential discriminators between PNES and ES, all previously described in the literature. We then set up a brief diagnostic tool including 6 of these signs. Selection was based on easy and immediate recognition of each sign, not requiring information coming from clinical history, witnesses reports or seizure duration. The distinct professional categories showed no significant differences in their ability to diagnose PNES and ES on both pre and posttests. All groups improved diagnostic skills after the instructional program. CONCLUSIONS: Results aided to determine the best identifiable PNES clinical signs and to provide initial validation to a novel diagnostic instrument. In addition, our results showed that educative measures might help in the identification of PNES by first responders, which may decrease the treatment gap. KEY-WORDS: psychogenic nonepileptic seizures, epilepsy, semiology