Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stefanie Nolte.pdf: 1509773 bytes, checksum: dbef289d8b9a1e611bef15b9a6d2f33c (MD5) Previous issue date: 2013-02-21 / Introduction: Psoriasis is a skin inflammatory disease characterized by keratinocytes hyperproliferation and their incomplete differentiation in the epidermis. Treatment aims to reduce the psoriatic plaques formation; however, many therapeutic regimens do not produce satisfactory results. Searching for new alternatives, this study evaluated the possible effect of the TTHL compound, isolated from the ethanolic extract of Combretum leprosum, on HaCaT proliferation.Methods: The cellular viability was assessed 24 hours after the treatment with different concentrations of TTHL through MTT and neutral red methods. To evaluate the TTHL anti-proliferative activity, the cells were treated with different concentrations of TTHL, in alternate days (96 hours) and analyzed through MTT and Cyquant methods. The cell cycle was evaluated by flow citometry. The possible toxicity by the topical application of the TTHL (0.3 mg/ear) was assessed in vivo, through skin atrophy, by measuring ear thickness of animals and histology.Results: The MTT assay showed, after 24 hours, that TTHL presents cytotoxic activity in HaCaT cells, at the concentrations of 5, 7, 9 and 10 μM, decreasing, respectively, 53.54, 89.53, 89.69 and 90.30 ± 5.84% the cellular viability compared to the control group. The neutral red assay, in the same concentrations, decreased 39.83%, 48.67%, 47.78% and 50.44 ± 4.42%, respectively. In the cellular proliferation assay, the 5, 7 and 10 μM concentrations decreased 24.27%, 59.25% and 82.30% ± 5.96% the cells number, as showed in the MTT method, and 30.30%, 59.59% e 90.90% ± 6.03% as showed in the Cyquant method. The cell cycle assay showed that, at the concentrations of 5, 7 and 10 μM, the non-viable cells number was higher and statistically significant when compared to the control group. Through the skin atrophy assay was possible to conclude that TTHL does not cause atrophy.Conclusion: TTHL is capable of reducing cell viability. These data suggest that TTHL might be a possible tool for the treatment of hyperproliferative diseases, among them, psoriasis. However, additional studies are needed to verify the action mechanism and triterpene safety. / Introdução: A psoríase é uma doença inflamatória cutânea caracterizada pela hiperproliferação e diferenciação incompleta de queratinócitos na epiderme. O tratamento tem como objetivo reduzir a formação de placas psoriáticas, porém muitos regimes terapêuticos não produzem resultados satisfatórios. Buscando alternativas, este trabalho avaliou o possível efeito do composto TTHL, isolado do extrato etanólico de Combretum leprosum, sobre a proliferação de HaCaT. Métodos: A viabilidade celular foi avaliada 24 horas após o tratamento com diferentes concentrações de TTHL, através do método de MTT e vermelho neutro. Para avaliar a atividade antiproliferativa, as células foram tratadas com diferentes concentrações de TTHL, em dias alternados e analisadas através do método de MTT e Cyquant. O ciclo celular foi avaliado por citometria de fluxo. A possível toxicidade pela aplicação tópica do TTHL foi avaliada in vivo, pelo ensaio de atrofia cutânea, através da medida da espessura da orelha dos animais e histologia. Resultados: No ensaio de MTT, após 24 horas, o TTHL, apresentou atividade citotóxica nas células HaCaT, nas concentrações de 5, 7, 9 e 10 μM, diminuindo, respectivamente em 53,54, 89,53, 89,69 e 90,30 ± 5,84% a viabilidade celular quando comparado ao grupo controle. No ensaio de vermelho neutro, essas mesmas concentrações diminuíram 39,83%, 48,67%, 47,78% e 50,44 ± 4,42%, respectivamente. No ensaio de proliferação celular, nas concentrações de 5, 7 e 10 μM, observou-se diminuição de 24,27%, 59,25% e 82,30% ± 5,96% no número de células, conforme o método de MTT e 30,30%, 59,59% e 90,90% ± 6,03% conforme o método de Cyquant. No ensaio de ciclo celular observou-se que nas concentrações de 5, 7 e 10 μM o número de células não viáveis foi maior e estatisticamente significante quando comparado com o grupo controle. Através do ensaio de atrofia cutânea foi possível concluir que o TTHL não causa atrofia. Conclusão: O TTHL é capaz de diminuir a viabilidade celular. Esses dados sugerem que o TTHL possa ser uma possível ferramenta para o tratamento de doenças hiperproliferativas, dentre elas, a psoríase. Entretanto, estudos adicionais são necessários para verificar o mecanismo de ação e segurança do triterpeno.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gisele C Parabocz.pdf: 1495859 bytes, checksum: 56f08069e8fd4cf1a7e0f79f60114e3e (MD5) Previous issue date: 2013-02-18 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / Obesity has become epidemic in XXI century and it is estimated that there are about 1.4 billion overweight adults. The existing subclinical chronic inflammation in obesity is associated with increased risk of cardiovascular disease. Adipose tissue, in addition to its energy function, has endocrine role through the secretion of adipokines. In obesity, adipocytes become dysfunctional, producing excess proinflammatory adipokines at the expense of anti-inflammatory. This inflammatory process is the link between obesity and atherogenesis. Thus, inflammation markers are potential targets for prevention, diagnosis and treatment of atherosclerosis. Myeloperoxidase (MPO), an enzyme found primarily on neutrophils, participates on innate defense mechanisms of the body through the production of oxidizing species that have antimicrobial activity. However, these oxidants and MPO act in events that feature key role in atherogenesis, such as oxidation of LDL-cholesterol, consumption of nitric oxide and activation of proteases. Therefore, the MPO has become subject of research and many studies have shown its value as predictor of cardiac risk in certain situations. However, its usage is not yet standardized and its benchmark values are not well established for laboratory diagnosis. The aim of this study was to evaluate the levels of MPO and other biomarkers in different Body Mass Index (BMI) ranges. The results indicated significant differences between the groups in the following parameters: systolic and diastolic blood pressure, HDL-cholesterol, triglycerides/HDL rate, HDL/LDL rate and white blood cells count. Elevated levels of hs-CRP were observed in the groups with obese individuals, but no significant changes were observed to serum MPO. Therefore, serum levels of MPO did not provide information on clinically significant laboratory differentiation of groups. / A obesidade tornou-se a epidemia do século XXI, estimando-se a existência de 1,4 bilhão de adultos com excesso de peso. A inflamação crônica subclínica existente na obesidade é associada com o aumento do risco de doenças cardiovasculares. O tecido adiposo, além de sua função energética, possui papel endócrino por meio da secreção das adipocinas. Na obesidade, os adipócitos tornam-se disfuncionais, produzindo, em excesso, adipocinas pró-inflamatórias, em detrimento das anti-inflamatórias. O desencadeamento do processo inflamatório é a ligação entre a obesidade e a aterogênese. Desta forma, marcadores de inflamação são alvos em potencial para a prevenção, diagnóstico e tratamento da aterosclerose. A mieloperoxidase (MPO) é uma enzima presente principalmente em neutrófilos, participante dos mecanismos de defesa inata do organismo, através da produção de espécies oxidantes que possuem atividade antimicrobiana. Contudo, os oxidantes originados e a própria MPO participam de eventos que apresentam papel fundamental na aterogênese, tais como oxidação do LDL-colesterol, consumo de óxido nítrico e ativação de proteases. Destarte, a MPO tornou-se objeto de pesquisa e muitos estudos demonstram seu poder preditor de risco cardíaco em determinadas situações. Não obstante, seu uso ainda não está padronizado e os valores referenciais não estão bem estabelecidos para o diagnóstico laboratorial. O objetivo deste trabalho foi avaliar os níveis de MPO e outros biomarcadores em indivíduos com diferentes faixas de Índice de Massa Corporal (IMC). Os resultados obtidos indicaram diferenças significativas entre os grupos nos seguintes parâmetros: pressão arterial sistólica e diastólica, HDL colesterol, taxa triglicerídeos/HDL, taxa HDL/LDL e contagem de leucócitos. Níveis elevados de PCR-us foram observados nos grupos com indivíduos obesos, porém não se constataram alterações significativas para a MPO. Portanto, os níveis séricos de MPO não forneceram informações laboratoriais clinicamente significativas na diferenciação dos grupos estudados.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THAIS LATANSIO DE OLIVEIRA.pdf: 1760436 bytes, checksum: 6934360fd3823c3b79ce5e2d581fe222 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / The Synadenium grantii Hook f. species is a plant of the Euphorbiaceae family and is popularly known as cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota among other names. Its latex has been used traditionally in the region of “Campos Gerais” as "garrafada", obtained from this dilution in water (18 drops into 1 liter). Its medicinal applications are widespread in Brazilian popular culture to cure various types of cancer, among other diseases, such as inflammation and ulcers. However, there are no scientific studies that prove these effects besides little is known about the chemical constitution of the species. The aims of this study was to conduct a phytochemical study of S. grantii latex; evaluate its antitumor activity in vitro against melanoma cell line (B16F10); analyze the changes in the distribution of tumor cells in cell cycle phases and also to evaluate the antitumor activity of latex in vivo and histological changes in animals treated with the popular way to use latex plant. The evaluation phytochemical latex was carried out by chromatographic procedures (column chromatography and thin layer chromatography) and spectroscopic procedures (1H NMR and 13C) from which was obtained the isolation and characterization of a triterpenoid and steroid identified as euphol respectively and citrostadienol. Evaluation of the cytotoxicity was determined by the reduction method of MTT ([3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) and by exclusion with Trypan Blue. For the tests in vitro, látex concentrations of 0.012 μg/well to 48.8 mg/well were tested and also two isolated compounds (Euphol and Citrostadienol) at concentrations of 2.5 mg/mL - 250μg/mL. To assess changes in the cell cycle, the cells were analyzed by flow cytometry and histological evaluation was performed by hematoxylin-eosin. The cytotoxic assays demonstrated that the S. grantii latex was able to reduce the growth and viability of the cell lines showing concentration and time dependent effect in both methodologies evaluated. In addition, induced cell cycle arrest in S- G2/M phase. Isolated substances only citrostadienol showed a reduced cytotoxic activity in vitro against B16F10 lineage. In vivo assays demonstrated a reduction of 40% in the size of tumours in mice treated with the popular way to use latex but the histological evaluation of organs analyzed (tumor, lung, liver and lymph nodes) was similar in the treated and untreated animals. / A espécie Synadenium grantii Hook. f. é uma planta pertencente a família Euphorbiaceae, sendo conhecida popularmente como cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota e outros. Seu látex tem sido usado tradicionalmente na região dos Campos Gerais na forma de uma “garrafada”, obtida da diluição deste em água (18 gotas em 1 litro). Suas aplicações medicinais são muito difundidas na cultura popular brasileira para a cura de vários tipos de câncer, além de outras enfermidades, como inflamações e úlcera. No entanto, não existem estudos científicos que comprovem esses efeitos além de pouco se saber sobre a constituição química da espécie. Assim, os objetivos deste trabalho foram realizar um estudo fitoquímico do látex de S. grantii; avaliar sua atividade antitumoral in vitro frente a linhagem celular de melanoma (B16F10); analisar as modificações na distribuição das células tumorais nas fases do ciclo celular e ainda avaliar a atividade antitumoral do látex in vivo bem como as alterações histológicas dos animais tratados com a forma popular de uso do látex da planta. A avaliação fitoquímica do látex foi realizada através de procedimentos cromatográficos (cromatografia em coluna e cromatografia em camada delgada) e espectroscópicos (RMN de 1H e 13C) da qual se obteve o isolamento e caracterização de um triterpeno e um esteroide identificados como eufol e citrostadienol respectivamente. A avaliação da citotoxicidade foi determinada pelo método de redução do MTT (brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio) e pelo método de exclusão com Azul de Trypan. Para a realização dos ensaios in vitro, foram testadas concentrações do látex entre 1,7 μg/poço a 4,88 mg/poço e também as duas substâncias isoladas (Eufol e Citrostadienol) nas concentrações de 2,5 μg/mL - 250μg/mL. Para avaliação das modificações no ciclo celular, as células foram submetidas à análise por citometria de fluxo e a avaliação histológica foi realizada através da coloração hematoxilina-eosina. Os ensaios citotóxicos demonstraram que o látex de S. grantii foi capaz de diminuir o crescimento e a viabilidade das linhagens celulares em estudo apresentando efeito concentração e tempo dependentes nas duas metodologias avaliadas. Além disso, induziu parada do ciclo celular na fase S-G2/M. Das substâncias isoladas somente o citrostadienol apresentou uma reduzida atividade citotóxica in vitro frente a linhagem B16F10. Nos ensaios in vivo pode se observar uma diminuição em 40% no tamanho dos tumores dos camundongos tratados com a forma popular de uso do látex mas a avaliação histológica dos órgãos analisados (tumor, pulmão, fígado e linfonodos) foi semelhante no grupo tratado e não tratado.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Kovalski Silverio.pdf: 1423306 bytes, checksum: 68729da0a75b158004d6a33911081b96 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Septic shock, which is triggered by microbial products, is mainly characterized by an inadequate tissue perfusion caused by a decreased in blood pressure, vascular damage, hyporeactivity to vasoconstrictors and disseminated intravascular coagulation, which can lead to multiple organ dysfunction and death. Nitric oxide (NO) is an important player in the pathogenesis of sepsis and septic shock, having both protective and deleterious effects. Trials of nonselective NOS inhibitors have shown increased mean arterial pressure, but also increased pulmonary artery pressure and reduced cardiac output. Thus, despite the intense research, there was no clinical progress so far. Perhaps this is due to lack of compression of NO signaling pathways. There is a knowledge gap on the role of the NO-guanylate cyclase- guanosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate (cGMP) pathway during the early stages of sepsis. Most work has studied the role of cGMP by inhibiting the enzyme responsible for its production (guanylate cyclase), however, in this work we chose to try the increased cGMP levels by inhibiting an enzyme responsible for their degradation, phosphodiesterase 5 (PDE5). In the early stages of shock occurs an intense release of vasoconstrictors agents, which can lead to ischemia damage. In this scenario, cGMP could play a key role counterbalancing these agents and preventing tissue damage. Sildenafil, a type-5 cGMP phosphodiesterase inhibitor, increase GMP at smooth muscle cells and promotes vasodilation .Thus, the purpose of this study was to investigate the effect of treatment with sildenafil in the early stages of sepsis. Male Wistar rats were divided into 2 groups of 16 animals each and submitted to either Cecal Ligation and Puncture (CLP) or the sham procedure. Eight hours after the procedure, the CLP and sham groups were randomly assigned to receive sildenafil (10 mg/kg orally) or vehicle. Twenty-four hours after the CLP or sham procedure, the mean arterial blood pressure, systolic and diastolic blood pressure and vascular reactivity to phenylephrine were evaluated. Additionally, blood samples were collected for measurement of nitric oxide (nitrate and nitrite), urea, creatinine, AST, ALT, lactate and CK.; hematological analyzes were also performed. Statistical significance was analyzed by two-way ANOVA followed by post hoc Bonferroni. The results shows that the CLP was able to reproduce the main characteristics of humans sepsis like as, systemic inflamation, hypotension, reduced response to vasoconstrictors, hypoxia and tissue damage. Interestingly, treatment with sildenafil improved and the organ hypoperfusion at early stages of sepsis reducing organ injury. Thus, phosphodiesterase inhibition may be a useful therapeutic strategy if administered at the proper window of opportunity. / O choque séptico, que é desencadeado por produtos microbianos, é caracterizado principalmente por uma perfusão tecidual inadequada causada pela diminuição da pressão arterial, lesão vascular, hiporreatividade a vasoconstritores e coagulação intravascular disseminada, o que pode levar à disfunção de múltiplos órgãos e morte. O óxido nítrico (NO) tem um importante papel na patogênese da sepse e choque séptico, tendo efeitos tanto protetores como deletérios. Ensaios clínicos com inibidores não seletivos da NOS (óxido nítrico sintase) motraram melhora nos níveis da pressão arterial média, porém houve também um aumento da pressão da artéria pulmonar e redução do débito cardíaco. Assim, apesar da investigação intensa, não houve progressos clínicos até agora. Talvez isso se deve à falta de compreensão do NO e suas vias de sinalização. Há por exemplo uma lacuna sobre o papel da enzima guanilato ciclase solúvel e do segundo mensageiro guanosina 3',5'- monofosfato cíclico (cGMP) durante os momentos iniciais da sepse. A maioria dos trabalhos tem estudado o papel do cGMP através da inibição da enzima responsável pela sua produção (guanilato ciclase), porém, neste trabalho optamos por tentar o aumento dos níveis de cGMP através da inibição de uma enzima responsável pela sua degradação, a fosfodiesterase 5 (PDE5). Nos primeiros estágios de choque ocorre uma intensa liberação de agentes vasoconstritores, o que pode levar a danos por isquemia. Neste cenário, o cGMP pode desempenhar um papel chave para contrabalançar esses agentes e impedir danos nos tecidos. O sildenafil, um inibidor de fosfodiesterase do tipo 5, aumenta cGMP em células do músculo liso promovendo vasodilatação. Assim, o propósito do presente estudo foi investigar o efeito do tratamento com sildenafil nas fases iniciais da sepse. Ratos Wistar machos foram divididos em 2 grupos de 16 animais cada e submetidos ao procedimento CLP (Cecal Ligation and Puncture) ou à falsa cirurgia (sham). Oito horas após o procedimento, os grupos CLP e sham foram aleatoriamente divididos para receber sildenafil (10 mg / kg por via oral) ou veículo. Vinte e quatro horas após o procedimento CLP ou sham, a pressão arterial média, sistólica e diastólica e reatividade vascular à fenilefrina foram avaliadas. Além disso, amostras de sangue foram coletadas para a dosagem de óxido nítrico (nitrato e nitrito), uréia, creatinina, AST, ALT, lactato e CK; análises hematológicas também foram realizadas. A significância estatística foi analisada por ANOVA de duas vias seguida de post hoc Bonferroni. Os resultados mostram que o modelo CLP foi capaz de reproduzir as principais características da sepse como inflamação sistêmica, hipotensão, redução da resposta ao vasoconstritores, hipóxia e dano tecidual. Interessantemente, o tratamento com sildenafil melhorou a hipoperfusão em estágios iniciais de sepse reduzindo a lesão de órgãos. Sendo assim, inibidores das fosfodiasterases, como o sildenafil, podem ser ferramentas terapêuticas úteis para o tratamento da sepse, desde que administrados na correta janela de oportunidade.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DEBORA.pdf: 1139278 bytes, checksum: 191ff40c879efded12bdb95a873d58d6 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this study was to test the potential neuroprotective action of Hypericum perforatum alcoholic extract on dopaminergic neurons lesioned in rat by the toxin 6-hydroxydopamine (6-OHDA) as an animal model of PD. The 6-OHDA was stereotaxically infused in rats into the medial forebrain bundle unilaterally to test rotational behavior and bilaterally to other tests. Hypericum perforatum was administered at doses of 100, 200 and 400 mg/kg by gavage for 35 days, starting 28 days before the treatment of the lesion. In the test of rotational behavior, a unilateral lesion with 6-OHDA caused an increase in the number of contralateral rotations and this effect was reversed by treatment with Hypericum perforatum. In the sucrose preference test was significant reduction in depressive-like behavior in animals injured with 6-OHDA-treated and Hypericum perforatum. In the forced swimming test, 6-OHDA animals treated with Hypericum perforatum kept less time immobile when compared to 6-OHDA animals treated with vehicle. In the open field test, we observed a significant reduction of locomotor function in the injured groups with 6-OHDA, however, according to results obtained in the forced swimming test, the motor impairment did not affect the immobility time. In the social recognition test, animals treated with 6-OHDA Hypericum perforatum performed significantly better than animals treated with 6-OHDA vehicle. In the olfactory discrimination test, there was no difference in the ability to discriminate odors, and possibly did not olfaction loss in animals injured with 6-OHDA. These results suggest that Hypericum perforatum reduced the death of dopaminergic neurons. This potential neuroprotection was confirmed by analysis of Immunodetection of proteins (Western Blot) by expression of the enzyme tyrosine hydroxylase (TH). Together, these results characterize the Hypericum perforatum as a possible drug to be used in the treatment of PD. / O objetivo deste estudo foi testar o potencial neuroprotetor do extrato alcoólico do Hypericum perforatum sobre neurônios dopaminérgicos de ratos lesionados pela toxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA) como modelo animal de DP. Ratos tiveram 6-OHDA estereotaxicamente infundida no feixe prosencefálico medial, unilateralmente para o teste de comportamento rotatório e bilateralmente para os demais testes. O Hypericum perforatum foi administrado nas doses de 100, 200 e 400 mg/Kg por gavagem durante 35 dias, iniciando–se o tratamento 28 dias antes da lesão. No teste de comportamento rotatório, a lesão unilateral com 6-OHDA causou um aumento no número de rotações contralaterais e esse efeito foi revertido pelo tratamento com Hypericum perforatum. No teste de preferência a sacarose houve redução significativa do comportamento tipo depressivo nos animais lesados com 6-OHDA e tratados com Hypericum perforatum. No teste de natação forçada, os animais 6-OHDA tratados com Hypericum perforatum permaneceram menos tempo imóveis quando comparados aos animais tratados com veículo. No teste do campo aberto, foi observada redução significativa da função locomotora nos grupos lesados com 6-OHDA, no entanto, de acordo com os dados obtidos no teste de natação forçada, o prejuízo motor não influenciou o tempo de imobilidade. No teste de reconhecimento social, animais 6-OHDA tratados com Hypericum perforatum tiveram um desempenho significativamente melhor do que os animais 6-OHDA tratados com veículo. No teste de discriminação olfativa, não houve diferença na capacidade de discriminação de odores, sendo que possivelmente não houve prejuízo na olfação dos animais lesados com 6-OHDA. Esses resultados sugerem que o Hypericum perforatum reduziram a morte dos neurônios dopaminérgicos. Essa possível neuroproteção foi confirmada através da análise de Imunodetecção de proteínas (Western Blot), através da expressão da enzima Tirosina Hidroxilase (TH). Em conjunto, esses resultados caracterizam o Hypericum perforatum como possível fármaco a ser utilizado no tratamento da DP.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Renato Olchanheski Junior.pdf: 1811415 bytes, checksum: 57ce362be4cfc124e9a1788156185688 (MD5) Previous issue date: 2014-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Periodontitis is defined as a disease characterized by the formation of a biofilm which promotes colonization of microorganisms responsible for the initiation of a local inflammatory process. Studies have shown that the inflammatory process is not restricted to the oral cavity, reaching the circulation and causing systemic effects, such as endothelial dysfunction. The dysfunction is mainly characterized by reduced nitric oxide production/ bioavailability which increased platelet aggregation, leukocyte adhesion and rolling, and result in a loss in the ability of vasodilation. Therefore predisposing to an increased risk of cardiovascular disease. According to research by our group, animals with experimental periodontitis showed a decrease in endothelium-dependent vasodilator response fourteen days after the induction of periodontitis, however, this reduced vasodilator response is not evident twenty one days. The purpose of this study was to evaluate a possible increase in compensatory mechanisms of vasodilation in animals with experimental periodontitis. For this, rats received ligatures for induction of periodontitis, or were sham. Twenty one days after the procedure, the animals were prepared for blood pressure recording. Two consecutive dose-response curves to acetylcholine and sodium nitroprusside were obtained before and 20 min after LNAME (NOS inhibitor) + indometacin (COX inhibitor) + TEA (selective inhibitor of potassium channels) or LNAME or indometacin, or TEA or indometacin + TEA or Apamin + TRAM-34 injection. Only the selective and simultaneous blockade of small and intermediate-conductance calcium-activated potassium channels by selective inhibitors (Apamin and TRAM-34, respectively) was able to reduce acethylcholine-induced reduction on blood pressure at periodontitis animals. The inhibition of NOS, COX and use of a non-selective inhibitor of potassium channels, did not change the endothelium-depended vasodilatation. Altogether, these results show that IKca and SKca may balance the endothelial function and therefore mask the impairment on NO production and endothelial dysfunction. / A periodontite é definida como uma doença caracterizada pela formação de um biofilme dental, que favorece a colonização de microrganismos que iniciam um processo inflamatório local. Este processo inflamatório não fica restrito a cavidade bucal, ele ganha a circulação causando efeitos sistêmicos, como a disfunção endotelial. A disfunção é caracterizada principalmente pela redução da produção e biodisponibilidade de óxido nítrico, predispondo o indivíduo a um aumento no risco de doenças cardiovasculares. Trabalhos recentes mostram que animais com periodontite experimental apresentam uma disfunção endotelial quatorze dias após a indução da periodontite, porém, esta redução da resposta vasodilatadora não é evidente vinte e um dias após o mesmo procedimento. A proposta do presente trabalho foi avaliar um possível aumento de mecanismos compensatórios de vasodilatação em animais com periodontite experimental. Para isso, os ratos receberam as ligaduras para indução da periodontite, ou passaram pela falsa-cirurgia. Vinte e um dias após o procedimento, todos os animais passaram pela administração intravenosa de três doses crescentes de acetilcolina e nitroprussiato de sódio. Em seguida, os animais receberam as seguintes administrações: LNAME (inibidor da NOS) + indometacina (inibidor da COX) + TEA (inibidor não seletivo dos canais de potássio), ou LNAME, ou indometacina, ou TEA, ou administração de indometacina + TEA ou Apamina (inibidor seletivo dos SKCa) + TRAM-34 (inibidor seletivo dos IKCa). Após um período de 20 minutos, todos os grupos passaram por uma nova administração dos dois agentes vasodilatadores. Vinte e um dias após a indução da periodontite, os animais, não apresentaram disfunção, e a inibição de NOS, COX e a utilização de um inibidor não seletivo dos canais de potássio, evidenciou uma alteração no tempo de vasodilatação do grupo ligadura. A combinação dos demais inibidores não resultou em alterações significativas. A administração de inibidores de SKCa e IK Ca resultou em uma diminuição do tempo da resposta vasodilatadora dependente de endotélio, demonstrando a importância destes canais no mecanismo de compensação vasodilatadora 21 dias após a indução da doença periodontal.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOSILAINE TONIN RIBAS.pdf: 1837470 bytes, checksum: be68534292ab10fcde99fb22913162f3 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / During pregnancy, some physiological changes occur in women, mostly lipid changes and development of insulin resistance. Probably, these changes are associated with increased hepatic effect of estradiol, progesterone and placental lactogen during this period, because progestins are known to alter the profile of LDL cholesterol and decrease the activity of hepatic lipase. The occurrence of such changes can indicate increased risk in these women, in developing atherogenic diseases in the future. Furthermore, this population also noted an increase in the number of neutrophils and monocytes into the peripheral circulation, especially of women with preeclampsia which has the consequence that the production and secretion mechanism of myeloperoxidase (MPO). Thus, it becomes important to investigate metabolic and inflammatory changes which occur during pregnancy, to assist in the diagnosis and prognosis of future cardiovascular disease in these individuals and myeloperoxidase can be studied as a novel biomarker associated with cardiovascular risk and occurrence of oxidative stress. Addition of serum MPO, the determination of the total antioxidant capacity and identification of other laboratory abnormalities, such as markers of inflammation (CRP, alpha-1-acid glycoprotein and leukocytes) for the prevention, diagnosis and treatment of possible future cardiac events or markers such as glycosylated hemoglobin (HbA1c) and glucose to identify the occurrence of gestational diabetes, are useful in assessing the quality of life of the pregnant woman and the developing fetus. Thus, the aim of this study was to evaluate biochemical and immunological for correlation with cardiovascular risk in pregnant women each trimester parameters. Total cholesterol, triglycerides, serum total antioxidant capacity (ABTS), compared ABTS/albumin, total protein, acid uric: results statistically different between the control (non-pregnant) and pregnant women (first, second and third quarter) the following parameters were obtained acid uric and leukocytes. Elevated levels of CRP between groups of pregnant women, which qualifies as a useful parameter for laboratory monitoring of pregnancy, were observed. However, no significant changes in MPO levels, which thus appears to be a suitable for risk prediction of cardiovascular disease in pregnant women were observed marker. / No período gestacional, algumas mudanças fisiológicas ocorrem nas mulheres, principalmente alterações lipídicas e desenvolvimento de resistência à insulina. Provavelmente, tais alterações estão associadas ao aumento do efeito hepático da progesterona, estradiol e lactogênio placentário nesse período, pois os progestogênios são conhecidos por alterar o perfil de colesterol LDL e diminuir a atividade da lipase hepática. A ocorrência de tais alterações pode indicar probabilidade aumentada, nestas mulheres, em desenvolver doenças aterogênicas no futuro. Além disso, nessa população, nota-se também um aumento do número de neutrófilos e monócitos para a circulação periférica, principalmente das mulheres com préeclâmpsia, que tem como consequência desse mecanismo a produção e secreção da mieloperoxidase (MPO). Assim, torna-se importante investigar quais alterações metabólicas e inflamatórias ocorrem na gestação, para auxiliar no diagnóstico e prognóstico de doenças cardiovasculares futuras nesses indivíduos e se a mieloperoxidase pode ser estudada como um novo biomarcador relacionado ao risco cardiovascular e ocorrência de estresse oxidativo. Além da MPO sérica, a determinação da capacidade total antioxidante e identificação de outras alterações laboratoriais, tais como marcadores de inflamação (PCR-us, alfa-1-glicoproteína ácida e leucócitos) para a prevenção, diagnóstico e tratamento de possíveis eventos cardíacos futuros ou marcadores como hemoglobina glicosilada (HbA1c) e glicose que identifiquem ocorrência de diabetes gestacional, são úteis na avaliação da qualidade de vida da gestante e do desenvolvimento fetal. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar parâmetros bioquímicos e imunológicos para a correlação com risco cardiovascular em gestantes a cada trimestre de gestação. Foram obtidos resultados estatisticamente diferentes entre os grupos controle (não gestante) e gestantes (primeiro, segundo e terceiro trimestre) nos seguintes parâmetros: colesterol total, triglicerídeos, capacidade antioxidante total no soro (ABTS), relação ABTS/albumina, proteínas totais, acido úrico e leucócitos. Foram observados níveis elevados de PCR-us entre os grupos de gestantes, o que a qualifica como parâmetro útil no acompanhamento laboratorial da gestação. Entretanto, não foram observadas alterações significativas nos níveis de MPO, que desta forma, parece não ser um marcador apropriado para a predição de risco de doença cardiovascular em mulheres grávidas.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marissa Giovanna Schamne.pdf: 3175915 bytes, checksum: cd148ffb822e2d056d16fd1b808434b1 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Currently Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease, and yet there is no effective therapy to control the progression of the disease, current treatments only relieve symptoms. The aim of this study was to evaluate the neuroprotective ability of statins on dopaminergic neurons from rats injured by the neurotoxin 6-hydroxydopamine (6-OHDA), which was used as an animal model for PD. In order to test this hypothesis, the animals underwent stereotaxic surgery for infusion of 6-OHDA into the medial forebrain bundle in order to cause the death of dopaminergic neurons. Two different methodologies were used in this study regarding dopaminergic injury, 1) bilateral infusions for tests of social recognition, preference for sucrose, forced swimming test and open field, 2) unilateral infusion for test rotational behavior. The animals were treated for 10 days (3 days before surgery and for 7 days after) with vehicle, simvastatin or pravastatin 10 mg/kg. Statins with two different solubility were tested to evaluate if the effect occurs only on the central nervous system or if there is a peripheral effect too. In the social recognition test the animals 6-OHDA treated with statins had a significantly better performance than those of group 6-OHDA+vehicle. In the forced swimming test, animals 6-OHDA treated with statins spent less time immobile compared with animals of the 6-OHDA+vehicle. In the rotational behavior test the number of contralateral rotations in animals 6-OHDA treated with statins was significantly smaller when compared with animals of group 6-OHDA+vehicle. These results suggest that statins may have decreased the death of dopaminergic neurons. To confirm this hypothesis, the Western Blot test was performed for expression of the enzyme tyrosine hydroxylase (TH). It’s still necessary to conduct further tests to confirm the neuroprotective potential of statins. / A doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais comum na atualidade, e ainda não há nenhuma terapia eficaz para controlar a progressão da doença, os tratamentos atuais apenas aliviam os sintomas. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade neuroprotetora das estatinas sobre os neurônios dopaminérgicos de ratos com lesão pela neurotoxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA) como modelo animal da DP. Para testar tal hipótese, os animais foram submetidos à cirurgia estereotáxica para a infusão de 6-OHDA no feixe prosencefálico medial (FPM) a fim de provocar a morte de neurônios dopaminérgicos. Duas metodologias diferentes foram empregadas neste estudo para a lesão dopaminérgica, 1) infusão bilateral para os testes de reconhecimento social, preferência à sacarose, natação forçada e campo aberto, 2) infusão unilateral para o teste do comportamento rotatório. Os animais foram tratados durante 10 dias (3 dias antes da cirurgia e por mais 7 dias após) com veículo, sinvastatina ou pravastatina na dose de 10 mg/kg. Foram testadas duas estatinas com solubilidades diferentes para avaliar se o efeito acontece apenas sobre o sistema nervoso central ou se há efeito periférico. No teste do reconhecimento social os animais dos grupos 6-OHDA tratados com as estatinas tiveram um desempenho significativamente melhor do que os animais do grupo 6-OHDA+veículo. No teste da natação forçada, os animais do grupo 6-OHDA tratados com estatinas ficaram menos tempo imóveis quando comparados com os animais do grupo 6-OHDA+veículo. No teste do comportamento rotatório, o número de rotações contralaterais dos animais lesionados e tratados com as estatinas foi significativamente menor quando comparado com os animais do grupo 6-OHDA+veículo. Esses resultados sugerem que as estatinas possam ter diminuído a morte de neurônios dopaminérgicos. Para confirmar essa hipótese, foi realizada a técnica de Western Blot para a expressão da enzima tirosina hidroxilase (TH) no FPM. Mais alguns testes precisam ainda ser realizados para confirmar o potencial neuroprotetor das estatinas.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yvanna Carla Salgado.pdf: 1951579 bytes, checksum: e426d3a8c9453f597957b8a5550337a0 (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The medicinal plants study has led to the discovery of pharmacologically active substances. The species Psychotria nuda (Cham. and Schltdl.) Wawra is a shrubby plant distributed in the Atlantic Forest at the east coast of Brazil and haven’t phytochemical studies and no description of their biological activities until the present moment. This study evaluated the antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activity. The hydroalcoholic extract showed no antimicrobial activity against strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans. However, in antioxidants tests, the extract showed antioxidant action scavenger of cationic radical ABTS+ (IC50: 33,48 ± 1,99 g/mL), and was able to reduce lipid peroxidation induced by AAPH radical on erythrocytes (IC50: 31,59 ± 4,14 g/mL for 3 hours incubation) without cytotoxic effect in these cells. It showed a moderate antioxidant activity of hypochlorous acid (IC50: 359,24 ± 4,57 g/mL) and reduced activity to scavenger DDPH radical (IC10: 118,76 ± 28,83 g/mL), superoxide anion (IC15: 196,92 ± 0,270 g/mL), and the enzymatic oxidation induced by HRP (IC20: 104,15 ± 18,15 g/mL). We observed high cytotoxicity assessment models of cell viability by MTT in epithelial HaCaT cells (CL50: 7,72 ± 1,22 g/mL) and a moderate citotoxicity for the strain of mouse embryonic fibroblast NIH3T3 (CL50: 61,65 ± 5,12 g/mL). In assay of neutral red dye incorporation in both lineage cells, we observed a high cytotoxicity in HaCaT cells (CL50: 6,07 ± 0,79 g/mL), but no effect of the extract over NIH3T3 cells at the used concentrations. The extract showed potential antioxidant and cytotoxic activity, and evaluation of crude extract allow us to conducting further research to identify the biologically active molecules / O estudo de plantas medicinais tem levado a descoberta de substâncias farmacologicamente ativas. A espécie Psychotria nuda (Cham. e Schltdl.) Wawra é uma planta arbustiva que se encontra distribuída na Floresta Atlântica na costa leste do Brasil e não possui estudos fitoquímicos aprofundados e nem descrição completa de suas atividades biológicas até o momento. O presente trabalho buscou avaliar a atividade antimicrobiana, antioxidante e citotóxica da espécie. O extrato hidroalcoólico não demonstrou atividade antimicrobiana frente às cepas de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans. Entretanto, nos ensaios antioxidantes, o extrato apresentou ação sequestradora do radical catiônico ABTS+ (IC50: 33,48 ± 1,99 g/mL), e foi capaz de reduzir a peroxidação lipídica induzida pelo radical AAPH em eritrócitos (IC50: 31,59 ± 4,14 g/mL para 3 horas de incubação) sem exercer atividade citotóxica nestas células. Demonstrou uma atividade moderada sobre o ácido hipocloroso (IC50: 359,24 ± 4,57 g/mL) e reduzida para os modelos de captação do radical DDPH (IC10: 118,76 ± 28,83 g/mL), ânion superóxido (IC15: 196,92 ± 0,270 μg/mL), e no modelo enzimático de oxidação induzida pelo HRP (IC20: 104,15 ± 18,15 μg/mL). Observamos uma elevada citotoxicidade no modelo de viabilidade celular pelo MTT frente à linhagem epitelial HaCaT (CL50: 7,72 ± 1,22 g/mL) e moderada citotoxicidade para a linhagem de fibroblastos embrionários de camundongo NIH3T3 (CL50: 61,65 ± 5,12g/mL). No ensaio de citotoxicidade de incorporação do corante vermelho neutro para ambas linhagens, observamos uma elevada citotoxicidade (CL50: 6,07 ± 0,79 /mL) frente à linhagem HaCaT; porém nenhum efeito do extrato sobre a linhagem NIH3T3 nas concentrações testadas. O extrato demonstrou uma potencial atividade antioxidante e citotóxica, e a avaliação do extrato bruto permite a condução de pesquisas para identificação de moléculas biologicamente ativas.

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-16T12:05:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SimulacaoComputacionalCarreador.pdf: 3774025 bytes, checksum: 81acf0e349802065278d75156ff30d33 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-29T15:49:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SimulacaoComputacionalCarreador.pdf: 3774025 bytes, checksum: 81acf0e349802065278d75156ff30d33 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-29T15:49:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SimulacaoComputacionalCarreador.pdf: 3774025 bytes, checksum: 81acf0e349802065278d75156ff30d33 (MD5) Previous issue date: 2017-10-19 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A constante evolução dos sistemas de liberação controlada de fármacos impulsionou a busca de novas estratégias, para a obtenção de formulações potencialmente promissoras. A simulação computacional e a modelagem molecular podem fornecer efetivas contribuições para um design e avaliação de sistemas complexos, como nanocarreadores lipídicos contendo insumos naturais. Neste trabalho, um carreador lipídico nanoestruturado (CLN) foi proposto utilizando triacilgliceróis da gordura de cupuaçu e do ácido cáprico/caprílico, a cera de carnaúba, o tween 80®, o pluronic® e um enantiômero do cetoconazol. Ensaios experimentais foram realizados para avaliar a cristalinidade e os eventos térmicos das misturas lipídicas, que demonstraram que a mistura M03 apresentou menor valor de entalpia (-15,17 J/g) e maior alargamento nos picos do difratograma, sugerindo estrutura de menor cristalinidade. Simulações computacionais foram realizadas para elucidar as estruturas 3D, estudar as propriedades moleculares e eletrostáticas, bem como as interações intermoleculares com o fármaco. A docagem molecular da M03 com o cetoconazol mostrou interação do tipo ligações de hidrogênio, com distância de ligação de 2,62 a 3,50Å e energia de afinidade -5,3 Kcal/mol. O modelo tridimensional do CLN mostrou boa distribuição das moléculas e após simulação de dinâmica molecular, o sistema se manteve estável (energia de -1895,47 KJ/mol), com interações do tipo ligação de hidrogênio moderada a fraca e distância de 2,45 a 3,50Å. Perfis RDF estabelecidos demonstram interações de forte intensidade entre o cetoconazol e o tween 80, entre a água e o pluronic, entre o pluronic e o SOO e entre o tween 80 e o SOO, todos com interações ocorridas no raio ≥2Å de distância. Estes resultados podem ser utilizados como suporte para direcionar o desenvolvimento futuro de uma formulação de CLN, antecipando os testes experimentais e auxiliando na obtenção de formulações prósperas. / The constant evolution of the drug delivery systems boosted the search for new strategies, to obtain potentially promising formulations. Computational simulation and molecular modeling can provide effective contributions to the design and evaluation of complex systems, such as lipid nanocarriers containing natural inputs. In this work, a nanostructured lipid carrier (NLC) was proposed using triacylglycerols of cupuaçu fat and capric/caprylic acid, carnauba wax, tween 80®, pluronic® and an enantiomer of ketoconazole. Experimental tests were carried out to evaluate the crystallinity and thermal events of the lipid mixtures, which demonstrated that the M03 mixture had a lower enthalpy value (-15,17 J/g) and greater widening of the diffractogram peaks, suggesting a lower crystallinity structure. Computational simulations were performed to elucidate 3D structures, to study molecular and electrostatic properties, as well as intermolecular interactions with the drug. The molecular docking of M03 with ketoconazole showed interaction of the hydrogen bond type, with bond distance of 2,62 to 3,50Å and affinity energy of -5,3 Kcal/mol. The three-dimensional CLN model showed good molecular distribution and after simulation of molecular dynamics, the system remained stable (energy -1895,47 KJ / mol), with moderate to weak hydrogen bonding interactions and a distance of 2,45 to 3,50Å. RDF profiles established demonstrate strong interactions between ketoconazole and tween 80, between water and pluronic, between pluronic and SOO, and between tween 80 and SOO, all interactions occurring within the radius ≥2Å of distance. These results can be used as support to guide the future development of a CLN formulation, anticipating the experimental tests and helping to obtain thriving formulations.