Objetivos: definir os dados demográficos, as doenças de base e os fatores de risco associados aos episódios de candidemia ocorridos na Santa Casa Complexo Hospitalar entre 17/02/1995 e 31/12/2003; identificar as espécies envolvidas nestes episódios de candidemia e determinar a mortalidade global entre estes pacientes. Métodos: estudo de coorte retrospectivo não-controlado com inclusão de todos os casos consecutivos de candidemia diagnosticados na instituição entre 17/02/1995 e 31/12/2003. Como critério de inclusão no estudo, foi exigida a presença de sinais ou sintomas temporalmente relacionados ao isolamento de Candida em hemocultivo coletado de veia periférica. Resultados: 210 pacientes com candidemia foram incluídos (infecção nosocomial em 91,0%). O sexo feminino foi mais prevalente (51,4%) e a idade mediana foi de 41,0 anos. A doença de base mais prevalente foi câncer (neoplasias sólidas 30,5% e hematológicas 9,0%). Candida albicans foi a espécie mais freqüente (38,1%), seguida de Candida parapsilosis (27,6%) e Candida tropicalis (15,7%); candidemia por Candida glabrata ocorreu em 3,8%, e por Candida krusei, em 2,4%. Procedimentos cirúrgicos foram realizados em 43,8%, cateter venoso central estava presente em 74,8%, cateter urinário em 57,1%, ventilação mecânica em 48,6% e nutrição parenteral em 33,8%; o número mediano de antimicrobianos foi 4,0 por paciente (glicopeptídeos 54,3%, carbapenêmicos 25,7%). A maioria dos pacientes com candidemia comunitária (52,6%) havia sido hospitalizada nos 60 dias anteriores à candidemia; em 21,1%, Candida foi isolada de cateter; insuficiência renal crônica (p<0,001) e hemodiálise (p=0,027) foram mais freqüentes no grupo de candidemia comunitária do que no nosocomial; a distribuição das espécies de Candida foi semelhante entre os grupos. Comparadas aos adultos, as crianças com candidemia nosocomial foram mais expostas a antimicrobianos de amplo espectro (p<0,001), ventilação mecânica invasiva (p=0,002) e nutrição parenteral (p<0,001). Candidemia nosocomial por Candida parapsilosis foi mais freqüente em crianças (p=0,002), bem como o isolamento de Candida de cateteres (p=0,019); crianças foram mais freqüentemente tratadas com anfotericina B do que adultos (p<0,001), os quais receberam mais fluconazol (p=0,013). Entre os pacientes com câncer e candidemia nosocomial, tratamento prévio com corticosteróides (p=0,004), quimioterapia (p<0,001) e cefepima (p=0,004) foram mais comuns naqueles com malignidades hematológicas; cirurgias foram mais comuns em pacientes com tumores sólidos (p<0,001), principalmente do trato gastrointestinal (p=0,016); a distribuição das espécies de Candida foi semelhante entre os grupos. Candidemia breakthrough (“de escape”) ocorreu em 10,5% dos pacientes com candidemia nosocomial; a maioria destes vinha em uso de anfotericina B em doses terapêuticas, por período mediano de 6,5 dias; o isolamento de Candida de sítios outros que o sangue foi mais freqüente nestes pacientes (p=0,028). A mortalidade dos pacientes com candidemia foi 50,5%, sem diferenças estatisticamente significativas entre pacientes com candidemia comunitária ou nosocomial, com câncer ou outros diagnósticos e com infecção breakthrough ou não-breakthrough; a mortalidade foi maior em adultos do que em crianças (p=0,005). Conclusões: espécies não-Candida albicans foram os principais agentes de candidemia; assim como em outros estudos brasileiros, a prevalência de espécies como Candida glabrata e Candida krusei foi baixa. Fatores de risco já descritos na literatura foram freqüentemente encontrados, e a distribuição dos mesmos variou de acordo com as diferentes características dos pacientes estudados. A mortalidade em pacientes com candidemia foi semelhante \à descrita na literatura.

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:25:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2000-06-14. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:29:53Z : No. of bitstreams: 1 000127134.pdf: 1653433 bytes, checksum: a86ba2adfc63a2d23fea7089b1555de7 (MD5) / Este trabalho objetivou avaliar a microbiota bacteriana e fúngica das cavidades anoftálmicas, próteses oculares e olhos contralaterais de 43 usuários de prótese ocular em resina acrílica, unilateral, e relacionar a quantidade de secreção conjuntival presente nessas cavidades com a microbiota conjuntival, frequência de limpeza, tempo de uso e tempo decorrido desde o último polimento da prótese. Todos os pacientes apresentavam secreção conjuntival e microbiota Gram positiva nas cavidades anoftálmicas, Os microrganismos mais frequentemente isolados das 43 cavidades anoftálmicas, por ordem decrescente de freqüência, foram: Staphyfococcus coagulase negativos, Staphylococcus aureus, Candída albicans, Proteus mirabilis, Citrobacter koseriana, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter sakazakii e Enterobacter aerogenes. Microbiota Gram negativa foi isolada de oito cavidades e fúngica, de três. O estudo estatístico dos dados evidenciou relação não significativa entre a quantidade de secreção conjuntival e a presença de microbiota Gram negativa• nas cavidades; e entre a quantidade de secreção conjuntival e a frequência de limpeza da prótese ocular. Correlação, estatisticamente significativa, foi constatada entre a quantidade de secreção conjuntiva! e o tempo de uso e o tempo decorrido desde o último polimento da prótese / The purpose of this work was to evaluate the bacterial and fungic microbiota of the anophthalmic sockets, ocular prosthesis and fellow eyes of forty three acrylic resin prosthesís carrying patients, and thereby relate the amount of conjunctival discharge to the presence of organisms, frequency of prosthesis cleaning, time of use and elapsed time since the last prosthesis polishing. All patients showed conjunctival discharge and Gram positive organisms in the anophthalmic sockets. The predominant organisms in the anophthalmic sockets were Staphylococcus coagulase negative, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Proteus mirabilis, Citrobacter koseriana, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter sakazakii e Enterobacter aerogenes. Gram negative bacteria were found in eight anophthalmic sockets and fungi in three. No relation was found between the amount of the conjunctival discharge and the presence of Gram negative bacteria in the anophthalmic socket, nor with the frequency of prosthesis cleaning. However, there was a significant relation between the amount of conjunctival discharge and time of prosthesis use, as well as time elapsed since the last prosthesis polishing

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-06-21. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:29:56Z : No. of bitstreams: 1 000173857.pdf: 1867638 bytes, checksum: a211eb025ce7f15bfc62bf54b3bdfed5 (MD5) / A Candidose bucal e um dos processos infecciosos micóticos mais comuns da cavidade oral e existe suscetibilidade aumentada para o mesmo durante o período neonatal principalmente devido à imaturidade dos mecanismos de defesa e a falta de uma microbiota bucal balanceada. Para verificar a presença de Candida spp. na cavidade bucal de lactentes foram examinados inicialmente cem bebês, nos quais foi feita coleta de material do dorso da língua com swab nas primeiras 24 horas de vida. Trinta e três recém-nascidos deste grupo foram acompanhados durante os primeiros quatro meses de vida sendo realizada mensalmente coleta de material da cavidade oral e avaliação das condições gerais de saúde, nutrição e higiene. A análise do material obtido nesse período mostrou positividade para Candida spp. em 64 (48,5%) das 132 amostras. A doença foi observada em 27,3% dos recém nascidos acompanhados. Candida albicans foi a espécie encontrada mais frequentemente (44,6%), e esteve presente em nove dos 11 casos de candidose bucal. Verificou-se com a ananmese que os possíveis fatores de risco para o grupo estudado foram o uso de chupeta e mamadeira, e, a introdução de outros tipos de alimento. Conclui-se que Candida albicans e a espécie prevalente nesta faixa etária / Oral candidosis is one of the most frequent mycotic infectious diseases of the oral cavity and there is increased susceptibility to this infection during the neonatal period due to immaturity of the defense mechanisms and the lack of a balanced buccal microbiota. To verify the presence of Candida spp. in the oral cavity of infants were examined initially a hundred babies from which were collected material of the lingual dorsum with swabs in the first 24 hours of life. Thirty-three newborn of this group were accompanied during the first 120 days of life and were submitted monthly to a material collection of the oral cavity and an evaluation of general conditions of health, nutrition and hygiene. The analysis of the material collected during this period showed positivity to Candida ssp. in 64 (48,5%) of the 132 samples. Disease was observed in 27,3% of those 33 newborns. Candida albicans was the most frequent species (44,6%) and it was present in nine of the 11 cases of oral candidosis. The anamnesis showed that the possible risk factors were pacifier use, bottle feeding and introduction of different food types. It was concluded that Candida albicans is the prevalent species in this age band

Orientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Gilberto Leite Braga Ubida / Banca: Lívia Nordi Dovigo / Banca: Marlise Inêz Klein Furlan / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below) / Doutor

Orientador: Eunice Teresinha Giampaolo / Banca: Ana Paula Dias Ribeiro / Banca: Dalva Cruz Laganá / Banca: Janaína Habib Jorge / Banca: João Neudenir Arioli Filho / Resumo: Este estudo avaliou dois vernizes experimentais (M e P) em três diferentes concentrações (25, 30 e 35%) na prevenção da adesão e formação de biofilme multiespécies (Candida albicans, Candida glabrata e Streptococcus mutans) e sua associação com a escovação na remoção do biofilme e sua recolonização. Corpos-de-prova lisos e rugosos de uma resina acrílica foram confeccionados e divididos em grupos experimentais, de acordo com o verniz e concentração, além de grupos controle (sem verniz). Metade das amostras foi exposta em saliva (30 minutos). Posteriormente, realizou-se a adesão (90 minutos) ou a formação do biofilme multiespécies (48 horas). Para a avaliação da capacidade de remoção do biofilme aderido, corpos-de-prova contaminados foram escovados (30 segundos) e para a recolonização, além da escovação, as amostras foram incubadas por período adicional de 48 horas. Os micro-organismos remanescentes foram mensurados pelos ensaios de XTT e UFC. Para os testes de adesão e formação do biofilme, os grupos experimentais apresentaram, em geral, menor absorbância comparados com o controle, porém esta diferença não foi significante para a contagem de colônias, exceto para o S. mutans na formação do biofilme. A rugosidade, em geral, não promoveu alteração em qualquer dos testes realizados. A saliva não promoveu alterações na adesão dos micro-organismos, mas alterou a quantidade de biofilme formado. Houve remoção efetiva do biofilme com a escovação e com a recolonização. Conclui-se que os vernizes fotopolimerizáveis experimentais reduziram discretamente a adesão e formação do biofilme. Além disso, a escovação foi efetiva na remoção e recolonização do biofilme multiespécies. / Abstract: This study evaluated the ability of two experimental coatings (M and P) at 25, 30 and 35% concentrations to modify the surface characteristics of a denture base resin and prevent the adhesion and biofilm formation of multi-species, as well as the effectiveness of brushing on biofilm removal and their recolonization. Specimens with smooth and rough surfaces were prepared and divided into experimental groups, according to the coating and concentration, and controls group (without coating). A half of specimens were exposed to saliva (30 minutes). The microorganisms adhesion (Candida albicans, Candida glabrata and Streptococcus mutans) was performed for 90 minutes and the biofilm formation was performed for 48 hours. For effectiveness of toothbrushing in biofilm elimination test, contaminated specimens with biofilm were exposed to toothbrushing in a brushing machine (30 seconds) and for recolonization, after brushing, the specimens were incubated again for 48 hours. Microorganisms quantification was measured by XTT and UFC tests. The adhesion and biofilm development showed that the experimental groups were, in general, lower absorbance compared with the control, but this difference was not significant for colony counting, except for S. mutans in biofilm formation. The roughness, in general, did not cause any change in all tests performed. Saliva did not change the adhesion of microorganisms, but reduce the biofilm formation. There was effective biofilm removal with brushing and recolonization tests. It was concluded that the experimental photopolymerised coatings slightly reduced adhesion and biofilm formation. Furthermore, toothbrushing was effective in multi-species biofilm removal and their recolonization. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-19Bitstream added on 2014-06-13T19:49:33Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_acmob_me_botib.pdf: 365893 bytes, checksum: 7a173728f136f9b95dc827e38a28e865 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Leveduras oportunistas do gênero Candida são capazes de disseminar-se em hospedeiros susceptíveis, num processo crescente nos últimos anos. Um fator complicador destes quadros ocorre quando estas leveduras são capazes de produzir biofilme, principalmente quando associadas a cateteres ou outros dispositivos médicos, elevando o poder de penetração e invasão em órgãos do hospedeiro. Por também conferir maior resistência às drogas antifúngicas do que as células dispersas, o biofilme fúngico tornou-se um dos maiores problemas no combate a estas infecções. A base genética da produção de biofimes nestas leveduras é complexa, porém já foi determinado o envolvimento de genes da família ALS, codificadores de glicoproteínas de adesão. Dentre os oito genes desta família (ALS1 ao ALS7 e ALS9), destaca-se o papel de ALS3. O gene ALS3, assim como todos os outros genes da família, apresenta uma estrutura composta por 3 domínios. O domínio 5’, região bem conservada; um domínio central que apresenta motifs de 108pb repetidos em tandem, com variações de tamanho entre os genes da mesma família e entre o mesmo gene em diferentes espécies, em uma mesma espécie e até mesmo entre alelos de uma mesma cepa, e o domínio 3, menos conservado que o domínio 5’, que pode apresentar variações de tamanho e de algumas seqüências de aminoácidos. Tendo em vista a crescente incidência de infecções por esse microrganismo em todo o mundo, o presente estudo objetivou investigar a freqüência das diferentes espécies de Candida em nossa região e caracterizá-las quanto à susceptibilidade a drogas antifúngicas e produção de biofilme, e possível correlação da produção de biofilme com polimorfismos de tamanho do gene ALS3. Os resultados obtidos confirmam a crescente incidência de espécies não-albicans, principalmente isoladas de infecções invasivas como cultura... / Opportunistic yeasts of the genus Candida are able to disseminate into the bloodstream in susceptible hosts, in an increasing course in the recent years. A complicating factor is when these yeasts are capable of producing biofilms, especially associated with catheters or other medical devices. Biofilm also confers greater resistance to antifungal drugs than dispersed cells, so the fungal biofilm has become one of the greatest problems in combating these infections. The genetic basis of the biofim production by yeasts is complex, but it has been know the involvement of ALS gene family, encoders of adhesion glycoproteins. Among the eight genes of this family (ALS1 to ALS7 and ALS9), the ALS3 are considered the most important. The ALS3 gene, such as the others members of the family, have three general domains: the 5’domain, conserved, with approximately 1300-pb; followed by a central domain consisting entirely of tandem-repeats of a 108-pb sequence, that are somewhat variable; and the 3’ domain, which is least conserved in length and sequence. Considering the increase incidence of these infections worldwide, the aims of this study were identify the frequency of Candida species in our region, to characterize the profile of antifungal susceptibility; to quantify the biofilm production and to correlate this production with the ALS3 gene length polymorphism. Our data confirm the increase incidence of non-albicans species, mainly when obtained from invasive infections, such as blood and peritoneal fluid, in which C. parapsilosis was the most frequent isolated species. The same was also observed to biofilm production, in which isolates obtained from invasive infections (blood and peritoneal fluid) are more biofilm producers than that obtained from vaginal secretion and urine. Among the different species, isolates of non-albicans also are more biofilm producers than C. albicans. Polimerase... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-30. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:17:14Z : No. of bitstreams: 1 000865632.pdf: 903176 bytes, checksum: 3e51870d6b17dcc44625fae1468b3e9d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade da molécula de quorum sensing farnesol na formação de biofilmes simples e misto de Candida albicans ATCC 10231 e Streptococcus mutans ATCC 25175. Inicialmente o farnesol foi diluído em metanol e posteriormente em saliva artificial (SA). Os testes de concentração inibitória mínima (CIM) do farnesol contra as células de Candida albicans ATCC 10231 e Streptococcus mutans ATCC 25175 em suspensão foram baseados no método da microdiluição. O farnesol diluído nas concentrações de 1,56, 3,125, 6,25, 12,5, 25, 50, 70, 150 e 300 mM foi aplicado sobre os biofilmes de Candida albicans e Streptococcus mutans (formação) e após 48 horas de contato sua atividade antibiofilme foi determinada por meio da quantificação da biomassa total (coloração com violeta cristal (CV)), enumeração das unidades formadoras de colônias (UFCs) e atividade metabólica (XTT). Foi ainda realizada uma curva de tempo de morte celular para os dois microrganismos estudados. Após o tratamento com o farnesol, a matriz dos biofilmes foi extraída e analisada em termos de concentração de proteínas e carboidratos, além do teste de pH para S. mutans e verificação das atividades enzimáticas de proteinase, fosfolipase e hemolítica para Candida albicans, ainda a estrutura dos biofilmes foi analisada por meio da microscopia eletrônica de varredura. Os resultados de CIM foram de 150 mM para C. albicans e de 6.25 mM para S. mutans. O farnesol diminuiu a formação de biofilmes simples e mistos, com reduções significativas de 37-90% e 64-96%, respectivamente para a biomassa total e atividade metabólica. Para os biofilmes simples, concentrações de farnesol iguais ou maiores que 3,125 mM promoveram reduções significativas (1,3-4,2 log10; p < 0,05) nas UFCs, enquanto que para os biofilmes mistos reduções... / The aim of this study was to evaluate the activity of a quorum sensing molecule, farnesol, in biofilm formation of Candida albicans ATCC 10231 and Streptococcus mutans ATCC 25175. Initially farnesol was diluted in methanol and then in artificial saliva (AS). Minimum inhibitory concentration tests (MIC) of farnesol against Candida albicans ATCC 10231 cells and Streptococcus mutans ATCC 25175 suspension were based on the microdilution method. Farnesol was prepared at concentrations of 1.56, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 70, 150 and 300 mM, and placed in contact with biofilms in formation of Candida albicans and Streptococcus mutans for 48 hours. Its antibiofilm activity was determined by quantifying the total biomass (stained with crystal violet (CV)), enumeration of colony forming units (CFUs) and metabolic activity (XTT). It was further carried out a cell death time curve for both microorganisms studied. After the treatment with farnesol, the matrix of the biofilm was extracted and analyzed in terms of protein and carbohydrates, in addition to the pH test for S. mutans and examination of enzymatic activities of proteinase, fosfolipase and hemolytic for Candida albicans. The structure of biofilms was analyzed by scanning electron microscopy. The MIC values were 150 mM for C. albicans and 6.25 mM for S. mutans. Farnesol decreased the formation of single and mixed biofilms, with significant reductions of 37-90% and 64-96% respectively for the total biomass and metabolic activity. For single biofilms, farnesol concentrations equal to or higher than 3.125 mM promoted significant reductions (1,3-4,2log10; p <0.05) in the CFU for single biofilms, while in mixed biofilms the reductions (0,67-5,32log10; p <0.05) were noted at concentrations of 1.56 mM. For cell death curve after an hour in contact with those microorganisms, farnesol reduced 1 log10... / FAPESP: 13/23592-0

Submitted by JÉSSICA DIAS SANTOS (jediassantos@gmail.com) on 2017-01-30T14:38:16Z No. of bitstreams: 1 disseta-jessica.pdf: 3763757 bytes, checksum: 397b3e007401ec2c427cd05e78053ab7 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-02-02T19:38:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_jd_me_sjc.pdf: 3763757 bytes, checksum: 397b3e007401ec2c427cd05e78053ab7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T19:38:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_jd_me_sjc.pdf: 3763757 bytes, checksum: 397b3e007401ec2c427cd05e78053ab7 (MD5) Previous issue date: 2017-01-19 / O objetivo desse estudo foi sintetizar mantas não tecidas de nanofibras (NFs) de Polietilmetacrilato (PEMA) com adição de nistatina (NYS) e avaliar a atividade antimicrobiana nas resinas reembasadoras rígidas e macias. Realizou- se o teste microbiológico da CIM de NYS para a inativação da C. albicans. NFs foram sintetizadas pela técnica da eletrofiação, utilizando-se solução de PEMA puro e NYS e PEMA. Para a síntese das NFs de PEMA, foi produzida uma solução de PEMA dissolvido em Dimetilformamida (DMF) e 1,1,2,2 Tetracloroetano (TCE), logo após foram adicionadas duas concentrações de NYS (10 e 20 mg/ml) obtidas do teste CIM. As amostras foram analisadas em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Análise de molhabilidade, Análise de Difratometria de Raios-X (DRX) e Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). Após a análise em MEV foi realizada a média dos diâmetros das fibras com Software ImageJ. As atividades antimicrobianas foram avaliadas por meio do teste de difusão em ágar. As NFs de PEMA apresentaram diâmetro menor, o padrão NF/PEMA apresentou 0,42µm enquanto que a NF/20 1,14 µm e a NF/10 foi de 0,87 µm. As fibras foram consideradas hidrofóbicas por meio da análise de molhabilidade. O DRX e o FTIR comprovaram a presença de PEMA e sugeriram a presença de NYS. O teste de difusão em ágar demonstrou que as fibras não conseguiram inibir a proliferação de C. albicans. / The objective of the study was to synthesize nanofibers (NFs) of Polyethylmethacrylate (PEMA) with addition of Nystatin (NYS) and to evaluate an antimicrobial activity in rigid and soft resins. Microbiological testing of NYS MIC for inactivation of C. albicans was performed. NFs were synthesized using the electrochemical technique using pure PEMA and NYS and PEMA solutions. For a synthesis of PEMA NFs, a solution of PEMA dissolved in Dimethylformamide (DMF) and 1,1,2,2 Tetrachloroethane (TCE) was produced, following doses of NYS concentrations (10 and 20 mg / ml) obtained from the CIM. As samples were analyzed in Scanning Electron Microscopy (SEM), Goniometer, X-ray Diffraction Analysis (XRD) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). After an SEM analysis, a mean of the fiber diameters was performed with ImageJ Software. The antimicrobial activities were evaluated by means of the agar diffusion test. As the PEMA NFs presented smaller diameter, the NF / PEMA standard showed 0.42 μm whereas NF / 20 1.14 μm and the NF / 10 was 0.87μm. The fibers were considered hydrophobic by means of the wettability analysis. The DRX and the FTIR proved a presence of PEMA and suggested a presence of NYS. The diffusion test on agar demonstrated that as fibers failed to inhibit a proliferation of C. albicans.

Submitted by LÍVIA MARA ALVES FIGUEIREDO (livia.figueiredo@fosjc.unesp.br) on 2017-06-06T17:36:01Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao mestrado final Livia.pdf: 1565199 bytes, checksum: f314f31c7fc2eba675f89a17f244abd2 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-06-06T17:49:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 figueiredo_lma_me_sjc.pdf: 1565199 bytes, checksum: f314f31c7fc2eba675f89a17f244abd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T17:49:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 figueiredo_lma_me_sjc.pdf: 1565199 bytes, checksum: f314f31c7fc2eba675f89a17f244abd2 (MD5) Previous issue date: 2017-05-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A terapia fotodinâmica (TFD) tem demonstrado ação antimicrobiana sobre as leveduras do gênero Candida, sendo considerada uma técnica promissora para o tratamento de candidose. Recentemente foi relatado que a aplicação de TFD também pode resultar em ativação do sistema imunológico, contribuindo para a melhora da infecção. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a ação da TFD e da terapia laser sobre a resposta imunológica à candidose experimental utilizando Galleria mellonella como modelo hospedeiro de infecção. Larvas de G. mellonella foram infectadas com diferentes cepas de Candida albicans e, após 30 min, foram tratadas com TFD mediada por azul de metileno e laser diodo emitido em 660 nm. A seguir, as larvas foram incubadas a 37°C por sete dias e analisadas diariamente para determinação da curva de sobrevivência. Para o estudo da resposta imunológica, após os tempos de 3, 6, 18 h da TFD foram realizados testes de determinação da densidade de hemócitos na hemolinfa de G. mellonella. Os dados obtidos na curva de sobrevivência foram avaliados pelo teste de Log-rank (Mantel Cox) e os resultados da análise imunológica por análise de variância ANOVA e teste de Tukey, com significância de 5%. Os resultados obtidos demonstraram que tanto para a cepa ATCC 18804 como para a cepa clínica 17 de C. albicans, a TFD prolongou a sobrevivência das larvas de G. mellonella infectadas por uma dose fúngica letal. Entretanto, houve diferença estatisticamente significante entre os grupos PDT e controle somente com cepa ATCC (p=0,0056). Foi verificado também que a infecção pela cepa ATCC 18804 de C. albicans em G. mellonella levou a uma redução no número de hemócitos na hemolinfa, e o tratamento com TFD e terapia laser conseguiram aumentar o número de hemócitos, mas sem apresentar diferença estatística significante. Foi possível concluir com esse estudo que a TFD bem como a terapia laser influenciaram de maneira positiva na melhora da infecção por C. albicans no modelo de G. mellonella. / Photodynamic therapy (PDT) has demonstrated antimicrobial activity on the yeast of the genus Candida and is considered a promising technique for the treatment of candidiasis. Recently it was reported that the application of PDT may also result in activation of the immune system, contributing to the improvement of the infection. The objective of this study is to evaluate the action of PDT and laser therapy on the immune response to experimental candidiasis using Galleria mellonella as host of the infection. G. mellonella larvae were infected with different Candida albicans strains and, after 30 min were treated with methylene blue-mediated PDT and laser diode emitted at 660 nm. Then, the larvae were incubated at 37° C for seven days and analyzed daily in order to determine the survival curve. For the study of the immunological response, after intervals of 3, 6, 18 h of the PDT, tests were performed to determine the density of hemocytes in the hemolymph of G. mellonella. The data obtained in the survival curve were evaluated by the Log-rank test (Mantel Cox) and the results of the immunological analysis by analysis of variance ANOVA and Tukey test, with significance of 5%. The results demonstrated that for both the ATCC 18804 strain and the C. albicans clinical strain 17, PDT prolonged the survival of the infected G. mellonella larvae by a lethal fungal dose. However, there was a statistically significant difference between the PDT and the control groups only with ATCC strain (p = 0.0056). It was also found that infection by the C. albicans ATCC 18804 strain in G. mellonella led to a reduction in the number of hemocytes in the hemolymph, and the treatment with PDT and laser therapy succeeded in increasing the number of hemocytes but without significant statistical difference . It was possible to conclude from this study that PDT as well as laser therapy positively influenced the improvement of C. albicans infection in the G. mellonella model.

Submitted by Luana Sauvesuk null (luana_sauvesuk@hotmail.com) on 2017-10-26T17:07:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado- Luana Sauvesuk - UNESP-FOA 26.10 pós defesa.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-31T18:02:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sauvesuk_l_me_araca.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-31T18:02:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sauvesuk_l_me_araca.pdf: 4367747 bytes, checksum: 5e1aa26820a5d96f8ddb932295fee7aa (MD5) Previous issue date: 2017-10-16 / O presente estudo revisou na literatura trabalhos entre 2006 e 2017 relacionados à fitossíntese de nanopartículas de prata (AgNP) e destacar a variedade de plantas passíveis de serem utilizadas e o quanto estas influenciam as características e propriedades dessas nanopartículas. Avaliou-se também como a temperatura (25, 50, 70 e 95°C) e a concentração de extrato da casca de romã (Punica granatum) (7, 14 e 28 mg mL-1) interferem na efetividade da reação fitoquímica por meio da quantificação dos íons Ag+ livres na solução de AgNP. A atividade antifúngica das AgNP produzidas foi avaliada por meio do método da microdiluição (CLSI M27-A2) contra cepas padrão (ATCC) de Candida albicans e Candida glabrata. As AgNP foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios-X e espectroscopia UV/visível. O extrato da casca desidratada da romã foi obtido por maceração seguido de percolação em etanol (70%) e desidratado em rota-evaporador. Quantificou-se os fenóis totais expressos em ácido gálico por método colorimétrico e o ácido elágico por HPLC, sendo respectivamente 158,61 e 4,21 mg mL-1. Foram revisados mais de duzentos artigos relacionados à fitossintese de AgNP, onde cerca de cento e setenta plantas foram utilizadas para esta síntese e sendo a maioria delas geograficamente concentradas nos continentes asiático e europeu. As AgNP fitossintezadas no presente estudo apresentaram concentração de íons livres de Ag+ proporcional à quantidade de extrato utilizada na reação e maior nas temperaturas mais elevadas, e foram efetivas contra ambas cepas padrão de Candida avaliadas. / The present work reviewed in the literature studies of phythosynthesis of silver nanoparticles (AgNP) between 2006 and 2017, highlighting the variety of plants used to and how they can influence the characacteristics and properties of AgNP. This work also evaluated the influence of temperature (25, 50, 70 and 95°C) and concentration of peel extract of pomegranate (Punica granatum) (7, 14 and 28 mg mL-1) on the effectiveness of phytosynthesis reaction by quantifying the free Ag+ ions in the AgNP soluction. The antifungal activity of AgNP against reference strains (ATCC) of Candida albicans and Candida glabrata were evaluated by the microdilution method (CLSI M27-A2). AgNP were characterized through scanning electron microscopy (SEM), X-Ray diffraction and UV-Vis spectroscopy. The pomegranate peel was dehydrated and the hydroalcoholic extract was obtained by maceration followed by percolation, and then obtained the crude extract using a rotary evaporator. Total phenols expressed in galic acid and elagic acid were quantified in the extract using a colorimetric method and by HPLC, and the values found were 158.61 and 4.21 mg mL-1, respectively. It was found more than two hundred studies using about an hundred seventy plants to synthesize AgNP, being the majority of those plants from the Asiatic and European Continents. The AgNp phytosynthesized in the present study presented the concentration of free Ag+ ions proportional with the quantity of pomegranate peel extract and it was high when the temepratures used in the reaction were above 50ºC. Also, AgNP were effective against both Candida reference strains evaluated.