Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: José Luiz De Lorenzo / Banca: Cristiane Yumi Koga Ito / Banca: Jamil Awad Shibli / Banca: Leonardo Marchini / Resumo: O objetivo desse trabalho foi analisar in vitro a aderência de Streptococcus sanguinis, Candida albicans e associações destes microrganismos com Streptococcus mutans às superfícies dos implantes dentários tratados com jateamento de fosfato de cálcio, anodização, duplo ataque ácido e os de superfície lisa, com ou sem a prévia incubação em saliva ou plasma sanguíneo. Foram selecionados 120 implantes, sendo 30 de cada superfície para cada microrganismo e associações estudadas. Para análise da aderência, foram preparadas suspensões de microrganismos contendo 106 células/ml em espectrofotômetro. Além disso, cada microrganismo e associações foram divididos em três grupos: em um, o implante foi removido da embalagem e colocado diretamente no caldo, em outro, foi previamente embebido em saliva humana por uma hora e no último em plasma humano, também por uma hora. Os implantes foram acondicionados separadamente em poços de placas de cultura de células contendo caldo sacarosado (placa in vitro) e a suspensão do microrganismo. Após 24h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, os implantes foram lavados três vezes durante um minuto em solução salina estéril e colocados em sonicador com 10 ml de salina para dispersão das células aderidas. A seguir, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura específico para cada microrganismo. Após 48h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/ml) e os dados foram submetidos a análise de variância (ANOVA), teste de tukey, com nível de significância de 5%. Para ilustrar a aderência dos microrganismos, foram selecionados o microrganismo Streptococcus sanguinis, e as associações Streptococcus sanguinis e Candida albicans e Streptococcus sanguinis, Streptococcus mutans... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study has been to analyze, in vitro the adherence of Streptococcus sanguinis, Candida albicans and associations of those microorganisms with Streptococcus mutans to the surfaces of dental implants treated with calcium phosphate jetting, anodization, double acid attack and to those of smooth surface, with or without previous saliva or blood plasma incubation. Ten implants from each surface were selected for every studied microorganism and association. In order to analyze the adherence, suspensions of microorganisms bearing 106 viable cells/ml in spectrophotometer were prepared. Additionally, every microorganism and association was divided in three groups: in the first, an implant was removed from its wrap and put right away into the sauce; the second, it was previously drenched into saliva for one hour; and the last one, into plasma, for one hour, as well. The implants were separately placed in culturing plaque wells of cells containing saccharose sauce (in vitro plaque) and the microorganism's suspension. After 24 hours of incubation time at 37 °C and 5% of CO2, the implants were taken washed three times for a minute in saline sterile solution and put in a sonicator holding 10 ml of saline in order to disperse adherent cells. Then, seriated dilutions were done, and sowing in culture media specific for each of the. After a 48hincubation time at 37°C and 5% of CO2, a counting was carried, of the colony forming units (UFC/ml) and the data were submitted to the ANOVA, Tukey test, at a significance level of 5%. To illustrate the adherence of the microorganisms, some samples were exposed to electronic sweeping microscopy. The results did show great microorganism adherence to the surfaces studied, mainly when associated forming a biofilm. The anodized surface... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Coorientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Livia Nordi Dovigo / Banca: Cristina Kurachi / Resumo: Nos últimos anos o aumento na incidência da candidose superficial ou invasiva causada por espécies emergentes e resistentes aos medicamentos tem sido atribuído a disseminação do uso de antibióticos e/ou agentes imunossupressores. A candidose é considerada uma doença oportunista de alta incidência em pacientes que utilizam medicamentos imunossupressores após transplante de órgãos, antibióticos de amplo espectro, terapias antineoplásicas e nos que possuem imunossupressão relacionada à síndrome da imunodeficiência adquirida. A Terapia Fotodinâmica (Photodynamic Therapy ou PDT) utiliza a combinação de luz (visível) e um composto fotossensível. A maior aplicação da PDT ocorre no tratamento de câncer, entretanto, a técnica está difundindo-se para o tratamento de outras doenças como infecções microbianas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da PDT mediada pela Curcumina, na ausência e na presença do surfactante brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB), com uma fonte de luz do tipo LED, sobre suspensões planctônicas de isolados clínicos das espécies C. albicans e C. glabrata fluconazol-resistentes, bem como de cepas ATCC. Após a PDT, foram obtidas diluições seriadas de cada amostra e alíquotas foram plaqueadas para a contagem das células viáveis (ufc/mL). O metabolismo celular para todas as condições experimentais também foi avaliado por meio do ensaio de redução do 2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]2H-tetrazolium-carboxanilida (XTT). Também foi avaliada a capacidade de adesão/formação de biofilme dessas cepas após a PDT. Para isso, amostras obtidas da fase de adesão e da fase madura dos biofilmes foram monitoradas pela contagem de células viáveis (ufc/mL). Os resultados permitem observar que a utilização da PDT com curcumina em micelas de CTAB em suspensões planctônicas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In recent years the increase in the incidence of superficial or invasive candidiasis caused by species emerging drug-resistant and has been attributed to widespread use of antibiotics and/or immunosuppressive agents. Candidiasis is considered an opportunistic disease of high incidence in patients taking immunosuppressive drugs after organ transplantation, broad-spectrum antibiotics, anticancer therapies and who has immunosuppression related to acquired immunedeficiency syndrome. Photodynamic Therapy (PDT) uses a combination of (visible) light and a photosensitive compound. The largest application of PDT occurs in the treatment of cancer, however, the technique is diffusing in the treatment of other diseases such microbial infections. The aim of this study was to evaluate the effect of PDT mediated by Curcumin, in the absence and presence of surfactant cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) with a light source type LED on planktonic suspensions of clinical isolates of the species C. albicans and C. glabrata Fluconazole-resistant strains as well as strains ATCC. After PDT, serial dilutions were collected and aliquots of each sample were plated for viable cell count (cfu/ml). Cellular metabolism for all experimental conditions was also assessed by reduction assay of 2,3-bis [2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]-2H-tetrazolium carboxanilide (XTT). It was also evaluated the ability of adhesion/biofilm formation of these strains after PDT. For this, samples of the accession and the mature phase biofilms were monitored by viable cell count (cfu/mL). The results allow to observe that the use of PDT with curcumin in CTAB micelles in planktonic suspensions was able to decrease metabolism (XTT) strains of C. albicans and C. glabrata susceptible and resistant to fluconazole, however, the reduction in viable cell count... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Eduardo Bagagli / Banca: Marcia de Souza Carvalho Melhem / Banca: Paulo José Fortes Villas Boas / Resumo: Leveduras oportunistas do gênero Candida são capazes de disseminar-se em hospedeiros susceptíveis, num processo crescente nos últimos anos. Um fator complicador destes quadros ocorre quando estas leveduras são capazes de produzir biofilme, principalmente quando associadas a cateteres ou outros dispositivos médicos, elevando o poder de penetração e invasão em órgãos do hospedeiro. Por também conferir maior resistência às drogas antifúngicas do que as células dispersas, o biofilme fúngico tornou-se um dos maiores problemas no combate a estas infecções. A base genética da produção de biofimes nestas leveduras é complexa, porém já foi determinado o envolvimento de genes da família ALS, codificadores de glicoproteínas de adesão. Dentre os oito genes desta família (ALS1 ao ALS7 e ALS9), destaca-se o papel de ALS3. O gene ALS3, assim como todos os outros genes da família, apresenta uma estrutura composta por 3 domínios. O domínio 5', região bem conservada; um domínio central que apresenta motifs de 108pb repetidos em tandem, com variações de tamanho entre os genes da mesma família e entre o mesmo gene em diferentes espécies, em uma mesma espécie e até mesmo entre alelos de uma mesma cepa, e o domínio 3, menos conservado que o domínio 5', que pode apresentar variações de tamanho e de algumas seqüências de aminoácidos. Tendo em vista a crescente incidência de infecções por esse microrganismo em todo o mundo, o presente estudo objetivou investigar a freqüência das diferentes espécies de Candida em nossa região e caracterizá-las quanto à susceptibilidade a drogas antifúngicas e produção de biofilme, e possível correlação da produção de biofilme com polimorfismos de tamanho do gene ALS3. Os resultados obtidos confirmam a crescente incidência de espécies não-albicans, principalmente isoladas de infecções invasivas como cultura... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Opportunistic yeasts of the genus Candida are able to disseminate into the bloodstream in susceptible hosts, in an increasing course in the recent years. A complicating factor is when these yeasts are capable of producing biofilms, especially associated with catheters or other medical devices. Biofilm also confers greater resistance to antifungal drugs than dispersed cells, so the fungal biofilm has become one of the greatest problems in combating these infections. The genetic basis of the biofim production by yeasts is complex, but it has been know the involvement of ALS gene family, encoders of adhesion glycoproteins. Among the eight genes of this family (ALS1 to ALS7 and ALS9), the ALS3 are considered the most important. The ALS3 gene, such as the others members of the family, have three general domains: the 5'domain, conserved, with approximately 1300-pb; followed by a central domain consisting entirely of tandem-repeats of a 108-pb sequence, that are somewhat variable; and the 3' domain, which is least conserved in length and sequence. Considering the increase incidence of these infections worldwide, the aims of this study were identify the frequency of Candida species in our region, to characterize the profile of antifungal susceptibility; to quantify the biofilm production and to correlate this production with the ALS3 gene length polymorphism. Our data confirm the increase incidence of non-albicans species, mainly when obtained from invasive infections, such as blood and peritoneal fluid, in which C. parapsilosis was the most frequent isolated species. The same was also observed to biofilm production, in which isolates obtained from invasive infections (blood and peritoneal fluid) are more biofilm producers than that obtained from vaginal secretion and urine. Among the different species, isolates of non-albicans also are more biofilm producers than C. albicans. Polimerase... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadora: Debora de Barros Barbosa / Coorientador: Douglas Roberto Monteiro / Banca: Alessandra Marçal Agostinho / Banca: Margarete Teresa Gottardo de Almeida / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade da molécula de quorum sensing farnesol na formação de biofilmes simples e misto de Candida albicans ATCC 10231 e Streptococcus mutans ATCC 25175. Inicialmente o farnesol foi diluído em metanol e posteriormente em saliva artificial (SA). Os testes de concentração inibitória mínima (CIM) do farnesol contra as células de Candida albicans ATCC 10231 e Streptococcus mutans ATCC 25175 em suspensão foram baseados no método da microdiluição. O farnesol diluído nas concentrações de 1,56, 3,125, 6,25, 12,5, 25, 50, 70, 150 e 300 mM foi aplicado sobre os biofilmes de Candida albicans e Streptococcus mutans (formação) e após 48 horas de contato sua atividade antibiofilme foi determinada por meio da quantificação da biomassa total (coloração com violeta cristal (CV)), enumeração das unidades formadoras de colônias (UFCs) e atividade metabólica (XTT). Foi ainda realizada uma curva de tempo de morte celular para os dois microrganismos estudados. Após o tratamento com o farnesol, a matriz dos biofilmes foi extraída e analisada em termos de concentração de proteínas e carboidratos, além do teste de pH para S. mutans e verificação das atividades enzimáticas de proteinase, fosfolipase e hemolítica para Candida albicans, ainda a estrutura dos biofilmes foi analisada por meio da microscopia eletrônica de varredura. Os resultados de CIM foram de 150 mM para C. albicans e de 6.25 mM para S. mutans. O farnesol diminuiu a formação de biofilmes simples e mistos, com reduções significativas de 37-90% e 64-96%, respectivamente para a biomassa total e atividade metabólica. Para os biofilmes simples, concentrações de farnesol iguais ou maiores que 3,125 mM promoveram reduções significativas (1,3-4,2 log10; p < 0,05) nas UFCs, enquanto que para os biofilmes mistos reduções... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the activity of a quorum sensing molecule, farnesol, in biofilm formation of Candida albicans ATCC 10231 and Streptococcus mutans ATCC 25175. Initially farnesol was diluted in methanol and then in artificial saliva (AS). Minimum inhibitory concentration tests (MIC) of farnesol against Candida albicans ATCC 10231 cells and Streptococcus mutans ATCC 25175 suspension were based on the microdilution method. Farnesol was prepared at concentrations of 1.56, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 70, 150 and 300 mM, and placed in contact with biofilms in formation of Candida albicans and Streptococcus mutans for 48 hours. Its antibiofilm activity was determined by quantifying the total biomass (stained with crystal violet (CV)), enumeration of colony forming units (CFUs) and metabolic activity (XTT). It was further carried out a cell death time curve for both microorganisms studied. After the treatment with farnesol, the matrix of the biofilm was extracted and analyzed in terms of protein and carbohydrates, in addition to the pH test for S. mutans and examination of enzymatic activities of proteinase, fosfolipase and hemolytic for Candida albicans. The structure of biofilms was analyzed by scanning electron microscopy. The MIC values were 150 mM for C. albicans and 6.25 mM for S. mutans. Farnesol decreased the formation of single and mixed biofilms, with significant reductions of 37-90% and 64-96% respectively for the total biomass and metabolic activity. For single biofilms, farnesol concentrations equal to or higher than 3.125 mM promoted significant reductions (1,3-4,2log10; p <0.05) in the CFU for single biofilms, while in mixed biofilms the reductions (0,67-5,32log10; p <0.05) were noted at concentrations of 1.56 mM. For cell death curve after an hour in contact with those microorganisms, farnesol reduced 1 log10... / Mestre

Fungos patogênicos, como Cryptococcus neoformans e Candida albicans, são uma das mais frequentes causas de infecções oportunistas em todo o mundo, sendo capazes de sobreviver, proliferar e escapar de macrófagos, células de primeira linha da resposta imune de hospedeiros mamíferos. Macrófagos geralmente expõem o patógeno intracelular a um ambiente tóxico, caracterizado por pH ácido, presença de espécies reativas, como também de peptídeos antimicrobianos. Neste contexto, há uma competição entre o patógeno intracelular e o hospedeiro mamífero por nutrientes essenciais, como por exemplo, metais de transição. Cobre é um metal de transição essencial para a vida aeróbica, porém pode ser tóxico em altas concentrações e, devido a isto, diversos organismos desenvolveram mecanismos regulatórios para controlar suas concentrações. O objetivo deste trabalho foi avaliar a modulação da homeostase de cobre durante a interação entre macrófagos e células de C. neoformans ou C. albicans. Neste trabalho, foi possível demonstrar que a presença de cobre contribui para uma menor atividade fungicida de macrófagos infectados. Também, o pré-carregamento das células fúngicas com cobre alterou a sensibilidade de ambas leveduras patogênicas à atividade anti-fúngica. Além disso, foi demonstrado que a expressão de transportadores de cobre (CTR1 e ATP7A) e proteínas ligadoras de cobre (ceruloplasmina e metalotioneína 1) de macrófagos foram moduladas em resposta à infecção por estes fungos patogênicos. Entretanto, essa regulação pode envolver mecanismos mais complexos, como estratégias do patógeno para subverter a ação antimicrobiana de macrófagos. / Pathogenic yeasts, such as Cryptococcus neoformans and Candida albicans, are one of the most frequent causes of the opportunistic infections worldwide, being able to survive, proliferate and escape from macrophages, the first line cells engaged in the immune defense of the mammalian host. Macrophages generally expose the intracellular pathogen to a toxic environment, which is characterized by acid pH, presence of reactive species, as well the presence of antimicrobial peptides. In this context, there is a competition between intracellular pathogen and mammalian host for essential nutrients, such as transition metals. Copper is an essential transition metal for aerobic life, but can be toxic at high concentrations and, therefore, many organisms have evolved highly regulated mechanisms for controlling its concentration. In this work, we aim is evaluate a modulation of copper homeostasis during interaction between macrophages and C. neoformans or C. albicans cells. This work demonstrated that the presence of copper resulted in a lower fungicidal activity of infected macrophages. Also, the pre-loading of fungal cells with copper can alter the sensitivity of both pathogenic yeasts to an antifungal activity. In addition, we showed that the expression of macrophage copper transporters (CTR1 and ATP7A) and copper-binding proteins (ceruloplasmin and metallothionein 1) are modulated in response infection by pathogenic fungi. However, this regulation may involve more complex mechanisms, such as strategies of pathogen to subvert the antimicrobial action of macrophages.

Fungos patogênicos, como Cryptococcus neoformans e Candida albicans, são uma das mais frequentes causas de infecções oportunistas em todo o mundo, sendo capazes de sobreviver, proliferar e escapar de macrófagos, células de primeira linha da resposta imune de hospedeiros mamíferos. Macrófagos geralmente expõem o patógeno intracelular a um ambiente tóxico, caracterizado por pH ácido, presença de espécies reativas, como também de peptídeos antimicrobianos. Neste contexto, há uma competição entre o patógeno intracelular e o hospedeiro mamífero por nutrientes essenciais, como por exemplo, metais de transição. Cobre é um metal de transição essencial para a vida aeróbica, porém pode ser tóxico em altas concentrações e, devido a isto, diversos organismos desenvolveram mecanismos regulatórios para controlar suas concentrações. O objetivo deste trabalho foi avaliar a modulação da homeostase de cobre durante a interação entre macrófagos e células de C. neoformans ou C. albicans. Neste trabalho, foi possível demonstrar que a presença de cobre contribui para uma menor atividade fungicida de macrófagos infectados. Também, o pré-carregamento das células fúngicas com cobre alterou a sensibilidade de ambas leveduras patogênicas à atividade anti-fúngica. Além disso, foi demonstrado que a expressão de transportadores de cobre (CTR1 e ATP7A) e proteínas ligadoras de cobre (ceruloplasmina e metalotioneína 1) de macrófagos foram moduladas em resposta à infecção por estes fungos patogênicos. Entretanto, essa regulação pode envolver mecanismos mais complexos, como estratégias do patógeno para subverter a ação antimicrobiana de macrófagos. / Pathogenic yeasts, such as Cryptococcus neoformans and Candida albicans, are one of the most frequent causes of the opportunistic infections worldwide, being able to survive, proliferate and escape from macrophages, the first line cells engaged in the immune defense of the mammalian host. Macrophages generally expose the intracellular pathogen to a toxic environment, which is characterized by acid pH, presence of reactive species, as well the presence of antimicrobial peptides. In this context, there is a competition between intracellular pathogen and mammalian host for essential nutrients, such as transition metals. Copper is an essential transition metal for aerobic life, but can be toxic at high concentrations and, therefore, many organisms have evolved highly regulated mechanisms for controlling its concentration. In this work, we aim is evaluate a modulation of copper homeostasis during interaction between macrophages and C. neoformans or C. albicans cells. This work demonstrated that the presence of copper resulted in a lower fungicidal activity of infected macrophages. Also, the pre-loading of fungal cells with copper can alter the sensitivity of both pathogenic yeasts to an antifungal activity. In addition, we showed that the expression of macrophage copper transporters (CTR1 and ATP7A) and copper-binding proteins (ceruloplasmin and metallothionein 1) are modulated in response infection by pathogenic fungi. However, this regulation may involve more complex mechanisms, such as strategies of pathogen to subvert the antimicrobial action of macrophages.

Objetivos: definir os dados demográficos, as doenças de base e os fatores de risco associados aos episódios de candidemia ocorridos na Santa Casa Complexo Hospitalar entre 17/02/1995 e 31/12/2003; identificar as espécies envolvidas nestes episódios de candidemia e determinar a mortalidade global entre estes pacientes. Métodos: estudo de coorte retrospectivo não-controlado com inclusão de todos os casos consecutivos de candidemia diagnosticados na instituição entre 17/02/1995 e 31/12/2003. Como critério de inclusão no estudo, foi exigida a presença de sinais ou sintomas temporalmente relacionados ao isolamento de Candida em hemocultivo coletado de veia periférica. Resultados: 210 pacientes com candidemia foram incluídos (infecção nosocomial em 91,0%). O sexo feminino foi mais prevalente (51,4%) e a idade mediana foi de 41,0 anos. A doença de base mais prevalente foi câncer (neoplasias sólidas 30,5% e hematológicas 9,0%). Candida albicans foi a espécie mais freqüente (38,1%), seguida de Candida parapsilosis (27,6%) e Candida tropicalis (15,7%); candidemia por Candida glabrata ocorreu em 3,8%, e por Candida krusei, em 2,4%. Procedimentos cirúrgicos foram realizados em 43,8%, cateter venoso central estava presente em 74,8%, cateter urinário em 57,1%, ventilação mecânica em 48,6% e nutrição parenteral em 33,8%; o número mediano de antimicrobianos foi 4,0 por paciente (glicopeptídeos 54,3%, carbapenêmicos 25,7%). A maioria dos pacientes com candidemia comunitária (52,6%) havia sido hospitalizada nos 60 dias anteriores à candidemia; em 21,1%, Candida foi isolada de cateter; insuficiência renal crônica (p<0,001) e hemodiálise (p=0,027) foram mais freqüentes no grupo de candidemia comunitária do que no nosocomial; a distribuição das espécies de Candida foi semelhante entre os grupos. Comparadas aos adultos, as crianças com candidemia nosocomial foram mais expostas a antimicrobianos de amplo espectro (p<0,001), ventilação mecânica invasiva (p=0,002) e nutrição parenteral (p<0,001). Candidemia nosocomial por Candida parapsilosis foi mais freqüente em crianças (p=0,002), bem como o isolamento de Candida de cateteres (p=0,019); crianças foram mais freqüentemente tratadas com anfotericina B do que adultos (p<0,001), os quais receberam mais fluconazol (p=0,013). Entre os pacientes com câncer e candidemia nosocomial, tratamento prévio com corticosteróides (p=0,004), quimioterapia (p<0,001) e cefepima (p=0,004) foram mais comuns naqueles com malignidades hematológicas; cirurgias foram mais comuns em pacientes com tumores sólidos (p<0,001), principalmente do trato gastrointestinal (p=0,016); a distribuição das espécies de Candida foi semelhante entre os grupos. Candidemia breakthrough (“de escape”) ocorreu em 10,5% dos pacientes com candidemia nosocomial; a maioria destes vinha em uso de anfotericina B em doses terapêuticas, por período mediano de 6,5 dias; o isolamento de Candida de sítios outros que o sangue foi mais freqüente nestes pacientes (p=0,028). A mortalidade dos pacientes com candidemia foi 50,5%, sem diferenças estatisticamente significativas entre pacientes com candidemia comunitária ou nosocomial, com câncer ou outros diagnósticos e com infecção breakthrough ou não-breakthrough; a mortalidade foi maior em adultos do que em crianças (p=0,005). Conclusões: espécies não-Candida albicans foram os principais agentes de candidemia; assim como em outros estudos brasileiros, a prevalência de espécies como Candida glabrata e Candida krusei foi baixa. Fatores de risco já descritos na literatura foram freqüentemente encontrados, e a distribuição dos mesmos variou de acordo com as diferentes características dos pacientes estudados. A mortalidade em pacientes com candidemia foi semelhante \à descrita na literatura.

Submitted by Romulus Lima (romulus.lima@ufpe.br) on 2015-03-12T17:46:46Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO José Robson Neves Cavalcanti Filho.pdf: 853299 bytes, checksum: f5df497c46cc3c25f784a5b6906e7e46 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T17:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO José Robson Neves Cavalcanti Filho.pdf: 853299 bytes, checksum: f5df497c46cc3c25f784a5b6906e7e46 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / A frequência de infecções fúngicas invasivas devido a fungos patógenos oportunistas aumentou claramente nos últimos anos, sendo Candida albicans responsável por grande parte dos casos. Esta levedura pode causar infecções superficiais de pele e mucosas, é a espécie mais encontrada nas infecções vaginais. Assim, é importante a busca de novas fontes de moléculas bioativas anti-C. albicans. Buchenavia tetraphylla (Combretaceae) é uma espécie neotropical, distribuída desde Cuba ao Rio de Janeiro, sendo uma planta etnomedicinal utilizada por comunidades tradicionais da região Nordeste do Brasil. Em pesquisa recente utilizando folhas da B. tetraphylla foi comprovada sua atividade antimicrobiana. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos orgânicos de folhas de Buchenavia tetraphylla frente a Candida albicans, além de analisar o potencial citotóxico e antioxidante do extrato mais ativo. A triagem fitoquímica foi realizada por cromatografia em camada delgada, onde foram observada a presença de hidrocarbonetos, açúcares, glicosídeos, terpenos, taninos e flavonóides. A atividade antimicrobiana, foi determinada pelo método de microdiluição em caldo utilizando 10 linhagens de C. albicans. Os valores de CMI dos extratos variaram a partir de 0,15625 mg/mL a 2,5 mg/mL. Como o extrato metanólico apresentou melhor resultado anti-C. albicans, sua ação combinada com fluconazol foi testada sendo obsevado efeitos aditivos e sinérgicos. Nas células tratadas com o extrato metanólico no valor do CMI foram observadas modificações externas, apresentando maiores rachaduras e encolhimento celular que podem ser atribuído à perda do volume citosólico. Em relação a atividade hemolítica do mesmo extrato testado acima, foi observado um IC50 igual a 3,935 ±0,3088 mg/mL e para atividade antioxidante um IC50 de 64,66 (±1,81 μg/mL). Assim, estes resultados estimulam novas pesquisas sobre aspectos farmacológicos e citotóxicos dos extratos de B. tetraphylla a fim de apoiar a sua aplicação como agente antimicrobiano.

Orientadores: Altair Antoninha Del Bel Cury, Renata Cunha Matheus Rodrigues-Garcia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:46:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira-Cenci_Tatiana_M.pdf: 1048789 bytes, checksum: e19520a3c91fdd0a8f929e43936e3dcc (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A candidose é a infecção oral fúngica mais comum diagnosticada em humanos, com prevalência de até 67% em usuários de prótese. Embora tenha sido inicialmente associada apenas a Candida albicans, outras espécies podem ser responsáveis por mais de 50% dos casos de infecção. Ainda, fatores como presença de saliva e bactérias parecem desempenhar importante papel na colonização por Candida. Assim, este estudo objetivou verificar a influência destes fatores na a:fesão de duas espécies de Candida (Candida albicans e Candida glabrata) sobre a superfície de resinas acrílicas e reembasadores. Corpos de prova (2,5x1 ,2xO,2 cm) confeccionados com duas resinas acrílicas (convencional e de microondas) e dois reembasadores (temporário e permanente) tiveram sua rugosidade (Ra) e energia livre de superfície (ELS) mensuradas, sendo aleatoriamente divididos de acordo com a exposição aos fatores: presença ou ausência de saliva, presença ou ausência de bactérias e espécie de Candida. Os espécimes foram levados a uma câmara de fluxo utilizando-se uma bomba peristáltica para perfusão de cultura de bactérias seguida por uma das espécies de Candida, ou apenas a cultura de uma das espécies de Candida. A contagem das células de Candida aderidas foi realizada em microscópio óptico (400x). Os dados foram submetidos à análise de variância para Ra e adesão, e ao teste de Kruskal-Wallis para ELS (a=0,05). O reembasador temporário apresentou a maior Ra, seguido do permanente, enquanto as resinas acrílicas exibiram as menores rugosidades (p<0,0001). Os valores de ELS foram similares para os materiais, mas diferentes do reembasador temporário (p<0,0001). A adesão de C. albicans e C. glabrata variou de 3,2 a 564,4 e 3,2 a 1400,4 cel/mm2 respectivamente, com diferenças estatísticas (p<0,05) em alguns grupos. O reembasador temporário mostrou maiores níveis de adesão. A colonização foi diminuída pela saliva, enquanto na presença de bactérias e saliva houve aumento da adesão (p<0,05). Estes resultados sugerem que a adesão inicial das duas espécies de Candida foi fortemente afetada pela rugosidade, presença de saliva e bactérias, mas não pela energia livre de superfície / Abstract: Candida-associated stomatitis is reported in up to 67% of a population wearing dentures. Recently, disease-associated Candida species have shifted from C. albicans to norralbicans species. Since factors such as presence of saliva and oral bacteria appear to play a major role in the initial phases of yeasts adhesion, this study aimed to determine whether these factors produced differences in acrylic resins and denture liners C. albicans and C. glabrata adherence. Samples (2.5x1.2xO.2 em) of two acrylic resins (heat and microwavecured) and two denture liners (soft and hard) were prepared and had their surface free energy (SFE) and surface roughness (Ra) measured and were randomly divided according to their exposure to the following factors: saliva coating or uncoating, presence or absence of bacteria and Candida species. Specimens were assayed in a flow chamber connected to a peristaltic pump for perfusion of bacteria culture plus one of the Candida species culture or only the Candida culture (control). Adhesion was determined by count on a light microscope (400 x). Statistical analyses was performed by ANOVA (Ra and Candida species adhesion) and Kruskal-Wallis (SFE) (a=.05). Soft liner presented the roughest surface, followed by the hard liner, whereas acrylic resins exhibited the smoothest surfaces (p<.0001). The SFE values of ali materiais were similar but different from the soft liner (p<.0001). C. albicans and C. glabrata adhesion on the materiais ranged fr0m 3.2 to 564.4, and 3.2 to 1400.4 cells mm-2 respectively, with statistically signific,ant differences (p<.05) in some cases. The soft liner exhibited the highest levels of adhesion. The overall colonization was significantly decreased by saliva (p<.Oq), while bacteria increased the adhesion in the presence of saliva. These results taken together suggest that initial adhesion of Candida species was strongly affected by the surface roughness, presence of saliva and bacteria, but not by surface free energy / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-07-31T15:06:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcelo Augusto da Eira Corrêa.pdf: 3302859 bytes, checksum: 38417d5930f880c0e2b8cebbe92fda6a (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-04T15:09:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcelo Augusto da Eira Corrêa.pdf: 3302859 bytes, checksum: 38417d5930f880c0e2b8cebbe92fda6a (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-04T15:16:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcelo Augusto da Eira Corrêa.pdf: 3302859 bytes, checksum: 38417d5930f880c0e2b8cebbe92fda6a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-04T15:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcelo Augusto da Eira Corrêa.pdf: 3302859 bytes, checksum: 38417d5930f880c0e2b8cebbe92fda6a (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Candidemia is a bloodstream infection caused by Candida. Its incidence varies between 1.27 and 3.9 cases per 1000 admissions in Brazil and from 0.29 to 1.95 cases per 1,000 admissions in the world. C. albicans is the main agent with an incidence ranging from 25.9 % to 59 %. This study aimed to determine the incidence of candidemia in 11 Hospital Units Manaus (public and private) and to determine the genetic diversity among isolates of Candida albicans and identify the existence of cryptic species Candida parapsilosis complex. The C. albicans isolates were subjected to molecular typing technique for multilocus sequencing (MLST) and identified as C. parapsilosis, were subjected to PCR/RFLP. Altogether 101 isolates were studied of the genus Candida. The overall incidence was found to be 2.31 cases per 1,000 admissions and 0.61 cases per 1000 patients/day. The genus Candida was the second cause of bloodstream infections in the studied hospitals, representing 8.6 % of all cases. The most prevalent species was Candida albicans representing 35.64 % of the cases followed by Candida tropicalis with 30.69 %. The male (68,24 %) was most affected by these infections than females (31,76 %). The overall mortality rate was 37.21 % and the species with the highest mortality rates Candida tropicalis was 53.85%. 58 different alleles were identified by the technique of MLST and one allele for the gene SYA1 has been set as a new allele. Their combinations represented 25 different genotypes, of which 15 were identified as new genotypes and sent to the curator for analysis. Of the 22 isolates originally described as C. parapsilosis, three were reidentified as C. orthopsilosis and C. metapsilosis. Of the 25 genotypes found for C. albicans was the main STD 90 and this data differ from the data found in Brazil and in the world , pointing DST 69 as the most common . Were identified for the first time in our region , blood stream infections by C. parapsilosis cryptic species complex with three cases of C. orthopsilosis and one case of C. metapsilosis. / Candidemia é a infecção de corrente sanguínea causada por leveduras do gênero Candida. Sua incidência varia entre 1,27 e 3,9 casos por 1000 internações no Brasil e 0,29 a 1,95 casos por 1000 internações no mundo. C. albicans é o principal agente etiológico com uma incidência que varia entre 25,9% a 59%. Este trabalho teve como objetivo verificar a incidência de candidemia em 11 Unidades Hospitalares de Manaus (públicas e privadas), bem como determinar a diversidade genética entre os isolados de Candida albicans e identificar a existência de espécies crípticas do complexo Candida parapsilosis. Os isolados de Candida albicans foram submetidos à técnica de tipagem molecular por sequenciamento de multilocus (MLST) e os identificados como C. parapsilosis, foram submetidos à PCR/RFLP. Ao todo foram estudados 101 isolados do gênero Candida. A incidência geral encontrada foi de 2,31 casos por 1000 internações e 0,61 casos por 1000 pacientes/dia. O gênero Candida foi o segundo causador das infecções de corrente sanguínea nas unidades hospitalares estudadas, representando 8,6% de todos os casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans representando 35,64% dos casos seguida por Candida tropicalis com 30,69%. O gênero masculino (68,24%) foi mais acometido por essas infecções do que o gênero feminino (31,76%). A taxa de mortalidade geral foi de 37,21% e a espécie que apresentou maiores taxas de mortalidade foi Candida tropicalis com 53,85%. Foram identificados 59 alelos diferentes pela técnica de MLST sendo que um alelo para o gene SYA1 foi configurado como novo alelo. Suas combinações representaram 25 genótipos diferentes, sendo que 15 foram identificados como novos genótipos. Dos 22 isolados inicialmente descritos como C. parapsilosis, três foram reidentificados como C. orthopsilosis e uma como C. metapsilosis. Dos 25 genótipos encontrados para C. albicans o principal foi o DST 90 e esse dado diverge dos dados encontrados no Brasil e no mundo, que apontam o DST 69 como o mais comum. Foram identificadas pela primeira vez em nossa região, infecções de corrente sanguíneas por espécies crípticas do complexo C. parapsilosis, com três casos de C. orthopsilosis e um caso de C. metapsilosis.