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Avaliação antifúngica e citotoxicidade do ácido peracético e extrato de Camellia sinensis (chá verde) em Candida spp. /

Majewski, Marta. January 2011 (has links)
Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Luana Marotta Reis Vasconcelos / Banca: Thaís Cachulé Paradella / Banca: Célia Regina Gonçalves e Silva / Banca: Graziella Nuemberg Back Brito / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a atividade antifúngica e a citotoxicidade do ácido peracético e extrato vegetal de Camellia sinensis a (chá verde) e também avaliar o efeito antifúngico da anfotericina B e fluconazol em 22 cepas de Candida spp. isoladas da cavidade bucal de pacientes HIV positivos. Para determinação da concentração fungicida mínima e concentração inibitória mínima (CFM e CIM) em células planctônicas, foram realizadas diluições seriadas do extrato e do ácido peracético em placas de 96 poços em caldo RPMI tamponado, em suspensões padronizadas de cada cepa de Candida (106 células/mL). Após determinação da concentração do extrato e do ácido peracético no CIM e CFM, foi preparado o biofilme de cada cepa em placas de 24 poços utilizando-se corpos-de-prova de resina acrílica (n=10), as quais foi adicionado 0,1 mL da suspensão de Candida e 2mL caldo BHI sacarosado. As placas foram incubadas e mantidas a 37° por 5 dias. Após a incubação, os corpos-de-prova foram lavados em solução fisiológica e colocados em imersão por 5 minutos no ácido peracético ou no extrato vegetal. Os corpos-de-prova foram sonicados e realizadas diluições seriadas, 0,1 ml de cada diluição foi semeada em placas de ágar Sabouraud em duplicata e incubadas em estufa bacteriológica (37ºC/48 h). Posteriormente foi realizada a contagem das unidades formadoras de colônia (UFC/mL). Os dados foram avaliados estatisticamente utilizando-se teste de Mann Whitney (p<0,05) para o biofilme, observação visual para CIM e CFM, Tukey e Anova para citotoxicidade. Foi avaliada a citotoxicidade do ácido peracético e extrato de chá verde em macrófagos de camundongos (RAW 264.7), para verificar a viabilidade celular... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study was to evaluate the in vitro antifungal activity and cytotoxicity of peracetic acid and plant extract from the Camellia sinensis (green tea) and also to evaluate the antifungal effect of amphotericin B and fluconazole in 22 strains of Candida spp. isolated from the oral cavity of HIV positive patients. To determine the minimum fungicidal concentration and minimum inhibitory concentration (CFM and CIM) in planktonic cells, were performed serial dilutions of the extract and peracetic acid in 96-well plates in RPMI broth buffered in standardized suspensions of each strain of Candida (106 cells / mL). After determining the concentration of the extract and peracetic acid in CIM and CFM, the biofilm was prepared for each strain in 24-well plates using body-of-proof acrylic resin (n = 10), which was added 0, 1 mL of the suspension of Candida sucrose and 2 ml BHI broth. The plates were incubated at 37 ° and maintained for 5 days. After incubation, the bodies of the test piece was washed in saline and placed for 5 minutes immersion in peracetic acid or the plant extract. The bodies of the test piece were sonicated and serial dilutions performed, 0.1 ml of each dilution was seeded on Sabouraud agar plates in duplicate and incubated in a bacteriological incubator (37 º C/48 h). Was subsequently performed the counting of colony forming units (CFU / mL). The data were statistically analyzed using Mann Whitney test (p <0.05) for the biofilm, visual observation for CIM and CFM, ANOVA and Tukey for cytotoxicity. We evaluated the cytotoxicity of peracetic acid and green tea extract in mouse macrophages (RAW 264.7) to verify the cell viability of these substances. The results showed that there was feasibility of peracetic acid and green tea extract in the cells analyzed. The antifungal agents have... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Perfil genômico e sensibilidade a antifúngicos de amostras sequenciais de Candida spp. isoladas da cavidade oral de indivíduos infectados pelo vírus da imunodeficiência humana

Moris, Daniela Vanessa [UNESP] 30 July 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-30Bitstream added on 2014-06-13T19:41:21Z : No. of bitstreams: 1 moris_dv_dr_botfm.pdf: 1043909 bytes, checksum: a3e3da4bf9a24a4eae82aa1e80f2e7fc (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A candidíase oral continua sendo a principal doença oportunística associada à infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) e importante marcador da progressão da doença, com o aumento da imunodepressão. Os objetivos deste trabalho foram: Caracterizar por métodos fenotípicos as amostras de Candida spp. isoladas da cavidade bucal de indivíduos infectados pelo HIV; identificar a prevalência das espécies isoladas; identificar as espécies do complexo C. psilosis pelo método da reação em cadeia da polimerase (PCR) e análise do perfil genético gerado pela enzima de restrição “BanI” pela técnica de restrição de fragmentos de DNA polimórfico (RFLP); identificar as amostras de C. dubliniensis pelo método de PCR e determinar sua prevalência; analisar a similaridade genética das amostras de C. albicans coletadas em episódios sequenciais de colonização e infecção, pelo método de amplificação aleatória de DNA polimórfico (RAPD); determinar o perfil de sensibilidade das amostras isoladas aos antifúngicos fluconazol (FLC), cetoconazol (CTC), itraconazol (ITC) e anfotericina B (AMB), utilizando-se o método EUCAST. Foram avaliadas 318 amostras isoladas de indivíduos infectados pelo HIV, atendidos no Ambulatório Especial de Moléstias Infecciosas e Parasitárias ou na Enfermaria de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP. O material da cavidade bucal foi colhido por meio de swabs estéreis, e semeado em Sabouraud Dextrose. A identificação foi realizada pelo CHROMagar ®TM Candida e pelo sistema Api 20C AUX bioMeriaux (St. Louis, Mo). C. albicans, C. parapsilosis, C.metapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. dubliniensis e C. krusei foram as espécies identificadas. A prevalência do complexo C. psilosis foi de 4.7%, distribuídos em 2,2% de C. parapsilosis e 2,5% de C. metapsilosis; todas as amostras do complexo C. psilosis... / Not available
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Avaliação da atividade antifúngica dos extratos de buchenavia tomentosa sobre Candida spp. /

Teodoro, Guilherme Rodrigues. January 2011 (has links)
Resumo: O interesse pelo desenvolvimento de terapias alternativas para o controle de Candida spp., como a pesquisa de compostos naturais com potencial antifúngico, vem crescendo. Estes micro-organismos são importantes causadores de infecções e têm se tornado resistente aos antifúngicos convencionais. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica de extratos de Buchenavia tomentosa sobre Candida spp. Inicialmente foi realizado screening por meio de teste de difusão em ágar de extratos de B. tomentosa obtidos por diferentes métodos para seleção dos dois mais ativos. A seguir, esses extratos foram caracterizados quimicamente através da técnica de espectrometria de massas por injeção direta. As concentrações inibitória mínima e fungicida mínima (CIMs e CFMs) foram determinadas para amostras padrão, isolados clínicos obtidos de pacientes com candidose bucal e cepas de origem hospitalar de Candida spp. Os resultados do screening demonstraram que os extratos aquosos B (5 minutos/100 °C) e C (60 minutos/55 °C) foram os mais ativos. As CIMs encontradas, em mg/ml, variaram de 0,2 a 25. As CFMs foram verificadas apenas paras cepas de C. krusei (3,12 a 6,25 mg/ml) e para 4 cepas de C. tropicalis (6,25 a 12,5 mg/ml). As cepas mais sensíveis aos extratos foram C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei e C. parapsilosis e as cepas mais resistentes foram C. albicans e C. tropicalis. O extrato B foi mais efetivo para todos os isolados, exceto para C. glabrata. O ácido gálico, corilagina e kaempferol foram encontradas apenas no extrato B. Conclui-se que, exceto os extratos A e E para C. tropicalis, todos os extratos de B. tomentosa tiveram ação antifúngica para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The interest on the development of alternative therapies for Candida spp. control, as searching of natural compounds with antifungal potential, has increased. These microorganisms are important causative agents of infections and the resistance to conventional antifungals has been growing. The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of Buchenavia tomentosa extracts on Candida spp. Screening by using agar diffusion test was performed to select two most active extracts. Then, the extracts were chemically characterized by direct infection mass spectrometry. Minimal inhibitory and fungicide concentrations (MICs and MFC) were determined for standard strains, clinical isolates from oral candidosis patients and nosocomial isolates. The findings of screening showed that aqueous extract B (5 min./100 °C) and C (60 min./55 °C) were the most active. Values of MIC found in, mg/ml, varied from 0.2 to 25. Values of MFC were observed for C. krusei (3.12 to 6.25 mg/ml) and for 4 C. tropicalis isolates (6.25 to 12.5 mg/ml). The most susceptible species were C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei and C. parapsilosis and the most resistant were C. albicans and C. tropicalis. Extract B was effective against all the isolates, except for C. glabrata. Galic acid, corilagin and kaempferol were found only in extract B. It could be concluded that, except extracts A and E against C. tropicalis, all extracts of B. tomentosa had antifungal activity against Candida spp. Besides, the aqueous extracts B and C were the most effective / Orientador: Cristiane Yumi Koga Ito / Coorientador: Fernanda Lourenção Brighenti / Banca: Mônica Fernandes Gomes / Banca: Sônia Khouri / Mestre
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Estudo da atividade antifúngica e perfil de expressão de proteínas em leveduras do gênero Candida após tratamento com extratos de Kielmeyera rubriflora /

Scorzoni, Liliana. January 2008 (has links)
Orientador: Maria José Soares Mendes Giannini / Banca: Helena Siqueira Silva / Banca: Maristela Pereira / Resumo: As novas descobertas tecnológicas e o avanço da medicina têm proporcionado a sobrevida de muitos pacientes. No entanto, estes passam a ser mais suscetíveis a infecções, principalmente por fungos. O aumento dessas infecções tem gerado problemas no tocante ao diagnóstico, bem como na terapêutica empregada. A disponibilidade de antifúngicos na prática médica é relativamente pequena, algumas vezes ineficiente e com toxicidade elevada. Recentemente, houve um agravante do quadro devido ao surgimento de resistência a determinadas drogas, o que reforçou a demanda por novas alternativas terapêuticas. Nosso país é privilegiado pela grande biodiversidade. A busca por novos alvos, o entendimento dos mecanismos de virulência, bem como os de resistência microbiana são fundamentais diante do quadro atual. O objetivo deste estudo foi pesquisar extratos e substâncias de plantas com atividade antifúngica para Candida albicans e C. krusei, selecionar os de maior atividade e verificar o perfil de proteínas de ambas as leveduras, antes e após o contato com a substância de origem vegetal, realizando sua caracterização. Os extratos acetato de etila (AcOEt) e etanólico (EtOH) de Kielmeyera rubriflora foram os que apresentaram maior atividade antifúngica. Os componentes protéicos de C. albicans sem tratamento e tratados com 1400 mg/mL de fluconazol e 1000 mg/mL dos extratos AcOEt e EtOH foram analisados por SDS-PAGE e eletroforese bidimensional. O tratamento com fluconazol revelou modificações na expressão de nove proteínas, que variaram seus pIs de 5,64 a 6,67 e massa molecular de 59,1 a 17,4 kDa, enquanto que os extratos de plantas influenciaram na expressão de 10 e 11 proteínas, respectivamente. O extrato AcOEt influenciou na expressão de proteínas na faixa de pIs de 5,7 a 5,2, massa molecular de 90,5 a 18,8 kDa, enquanto que o...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The new discoveries and technological advances in medicine have provided the survival of many patients. However, they become more susceptible to infections, mainly by fungi. The increase in these infections has created problems regarding the diagnosis and the therapy employed. The availability of antifungals in medical practice is relatively small, inefficient and sometimes with high toxicity. Recently, there was an aggravating problem due to the emergence of resistance to certain drugs, which increased the demand for new alternative therapies. Our country is privileged in biodiversity. The search for new targets, the understanding of the mechanisms of virulence, as well as, the microbial resistance is essential before the current framework. This study aimed to find extracts of plants and substances with antifungal activity to Candida albicans and C. krusei, select the extracts with the best activity and verify the profile of proteins of both yeasts, before and after contact with the ethyl acetate (AcOEt) and ethanol (EtOH) extracts from Kielmeyera rubriflora, performing its characterization. The AcOEt and EtOH extracts from K. rubriflora had the greater antifungal activity. The C. albicans and C. krusei cells proteins untreated and treated with 1400 mg / mL of fluconazole and 1000 mg / mL of AcOEt and EtOH extracts were analyzed by SDS-PAGE and two-dimensional electrophoresis. Treatment with fluconazole revealed changes in the expression of nine proteins, which varied its pIs of 6.67 to 5.64 and molecular weight of 59.1 to 17.4 kDa, while the plants extracts influenced the expression of 10 and 11 proteins, respectively. The AcOEt extract influenced the expression of proteins in the range from pIs of 5.7 to 5.2, molecular weight of 90.5 to 18.8 kDa, while the EtOH in pIs of 5.8 to 7.4, and mass molecular of 89.2 to 16.3 kDa. The plants extracts ...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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OCORRÊNCIA DE INFECÇÃO NOSOCOMIAL POR Candida spp. NO HOSPITAL UNIVERSITÁRIO CASSIANO ANTONIO DE MORAES (HUCAM) E AVALIAÇÃO DAS DROGAS ANFOTERICINA B E VORICONAZOL NA INIBIÇÃO DE FORMAÇÃO DE BIOFILME PELAS ESPÉCIES ISOLADAS.

RIBEIRO, A. D. 09 August 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T15:34:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6739_DISSERTAÇÃO Aline Dias Ribeiro.pdf: 1995821 bytes, checksum: 257ebf9537bf0f4881b2a7d2bf130050 (MD5) Previous issue date: 2013-08-09 / INTRODUÇÃO: Infecções de corrente sanguínea por fungos têm se destacado principalmente pelo crescente número de casos de candidemia (infecções por Candida spp neste sítio). Atualmente, este fungo figura como um dos sete patógenos mais comuns em infecções nosocomiais, apresentando taxas de mortalidade bruta entre 40 e 70% e atribuída, de 50%. Formação de biofilme é frequentemente associada a persistente infecção por Candida spp. e dificulta o tratamento devido à elevada resistencia que as células fúngicas adquirem a drogas antifungicas, nestas circunstâncias. OBJETIVOS: Determinar a incidência de candidemias no Hospital Universitário Cassiano Antônio de Moraes (HUCAM), entre 1º de março de 2011 a 30 de dezembro de 2012; determinar as taxas de prevalência das espécies de Candida spp.e testar a potencial atividade das drogas anfotericina B e voriconazol na inibição de formação de biofilme pelas espécies isoladas. MATERIAIS e MÉTODOS: Informações sobre o número total de admissões e de pacientes-dia, na UTI e UTIN do HUCAM foram fornecidos pelo setor de estatística e as 32 cepas de Candida spp., obtidos de sangue, urina e ponta de cateter foram isoladas no laboratório de Análises Clínicas deste hospital. Para as análises de inibição de formação de biofilme foram utilizados os testes estatísticos de Wilcoxon, de Sinais e de Mann-Whitney. RESULTADOS: O setor do HUCAM com maior incidência de candidemia foi a UTIN (8,6/10.000 pacientes-dia e 14,2/1.000 internações). Candida spp foi 5º microrganismo mais isolado das ICS, com predomínio de espécies não-albicans (81%), sendo C. parapsilosis a espécie mais frequente. Na UTIN, a frequência de candidemia por C. albicans foi de 67% e a única espécie não-albicans isolada foi Candida parapsilosis. Na avaliação da inibição de formação de biofilme foi constatado que as concentrações de anfotericina B estatisticamente significantes foram: 128 µg/mL para as epécies C. albicans, C parapsilosis e C tropicalis e 64 µg/mL para as espécies agrupadas em outros. Voriconazol foi capaz de inibir formação de biofilme apenas para isolados da espécie C. albicans e na maior concentração testada (16 µg/mL). CONCLUSÕES: A maior incidência de candidemia no HUCAM foi encontrada para recém-nascidos internados na UTIN. A distribuição das espécies de Candida variou de acordo com setores do hospital, mas sofreu pouca alteração em relação ao período estudado. No geral, anfotericina B foi mais eficaz que voriconazol na inibição de formação de biofilme por espécies de Candida.
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Caracterização molecular de espécies de Candida isoladas de portadores de AIDS e de portadores de Câncer atendidos em Hospitais-Escola de Maceió, Alagoas

ARAÚJO, Maria Anilda dos Santos January 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:04:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4601_1.pdf: 2137880 bytes, checksum: 605be6ce7fea7cac8ba5dea9e8468fba (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foi realizada a caracterização molecular de espécies de Candida isoladas de espécimens clínicos de pacientes portadores de AIDS e de portadores de Câncer atendidos em Hospitais-Escola de Maceió-Alagoas; também foi verificada a diversidade genética em níveis específicos e intraespecífico das leveduras isoladas. Foram coletadas amostras de sangue, secreção da orofaringe e urina de pacientes portadores de AIDS atendidos no setor de Infectologia do Hospital Dia HUPAA/UFAL e no Hospital Escola Dr. Hélvio Auto, como também de pacientes portadores de câncer atendidos no Setor de Oncologia do Hospital Universitário Prof. Alberto Antunes/UFAL, sendo analisado 405 amostras clínicas. Após isolamento, as leveduras foram purificadas e identificadas. Entre 135 pacientes analisados foi observada uma ocorrência de 35% de isolados de leveduras, sendo a secreção de orofaringe o espécimen clínico do qual houve prevalência (78%), seguido de urina (22%). Entre as espécies de maior ocorrência está Candida albicans (63%), seguida de C. glabrata (22%), C. guilliermondii (18%), C. parapsilosis (14%) e C. tropicalis (8%). Posteriormente, foi realizada a caracterização molecular das espécies de leveduras, pela análise dos produtos de PCR amplificados com iniciador para a região ITS do rDNA, de ISSR (GTG)5 e com iniciadores espécie-espécificos CALB1 e CALB2 para C. albicans. Os marcadores moleculares utilizados mostraram-se eficientes, reprodutíveis e auxiliaram na identificação convencional constituindo-se em ferramentas apropriadas para caracterização genética entre espécies de Candida
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Avaliação da incidência e fatores prognósticos de candidemias em um hospital de ensino

Bassetto, Carolina Nogueira Gomes January 2020 (has links)
Orientador: Ricardo de Souza Cavalcante / Resumo: Introdução. A candidemia tem-se tornado cada vez mais frequente nos hospitais e apresentado elevada mortalidade. Conhecer a epidemiologia e os fatores prognósticos permite melhor manejo clínico desta infecção. Diante disto, este estudo teve por objetivo avaliar a incidência da candidemia em um hospital de ensino durante os últimos anos, a mortalidade, a prevalência das espécies causadoras da infecção, bem como os fatores prognósticos. Métodos. Este foi um estudo de coorte não concorrente, com pacientes atendidos no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu (HCFMB), que apresentaram diagnóstico de candidemia durante sua internação, entre os anos de 2012 e 2019. Os dados clínicos foram obtidos a partir do prontuário médico. Para a avaliação dos fatores associados ao prognóstico, em análise univariada e múltipla, foi utilizado o modelo de Regressão Proporcional de Cox. Foram consideradas significativas as variáveis com valores de p inferiores a 0,05. Resultados. Ocorreram 314 episódios de candidemia em 288 pacientes. A taxa de incidência foi de 1,66/1000 admissões. A espécie mais prevalente foi Candida albicans (38,8%), seguida de complexo C. parapsilosis (20,4%), C. tropicalis (15,3%), C. glabrata (10,8%) e C. krusei (2,5%). Na população pediátrica houve predomínio de complexo C. parapsilosis (p<0,0001) e C. glabrata nos adultos (p=0,002). A taxa de mortalidade em 30 dias foi de 43,4%, sendo maior em adultos do que pacientes pediátricos (19,3% vs 54,0%; p<0,01)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction. Candidemia has become increasingly frequent in hospitals and has shown high mortality. Knowing the epidemiology and prognostic factors allows better clinical management of this infection. In view of this, this study aimed to evaluate the incidence of candidemia in a teaching hospital during the past few years, mortality, the prevalence of species causing the infection, as well as prognostic factors. Methods. Non-concurrent cohort study was carried out, with inpatients at the Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina de Botucatu (HCFMB), who presented a diagnosis of candidemia during their hospitalization, between the years 2012 and 2019. The clinical data were obtained from the medical records. For the assessment of factors associated with prognosis, in univariate and multiple analysis, the Cox Proportional Regression model was used. Variables with p values below 0.05 were considered significant. Results. There were 314 episodes of candidemia in 288 patients. The incidence rate was 1.66 / 1000 admissions. The most prevalent species was Candida albicans (38.8%), followed by C. parapsilosis complex (20.4%), C. tropicalis (15.3%), C. glabrata (10.8%) and C. krusei (2.5%). In the pediatric population, there was a predominance of the C. parapsilosis complex (p <0.0001) and C. glabrata in adults (p=0.002). The 30-day mortality rate was 43.4%, being higher in adults than pediatric patients (19.3% vs 54.0%; p<0.01). Independent factors of mortality were liver cirrhos... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Produção de biofilme e perfil de suscetibilidade a antifúngicos de isolados de Candida spp. em episódios de candidemia no Hospital das Clínicas da FMRP-USP / Biofilm production and antifungal susceptibility profile of Candida spp. isolates from candidemia episodes from the Hospital das Clínicas da FMRP-USP

Cardoso, Bárbara 14 June 2017 (has links)
Candida spp. constitui o grupo mais importante de fungos patogênicos oportunistas, que está associado a elevadas taxas de mortalidade. As principais espécies causadoras de infecções sanguíneas são: C. albicans, C. glabrata, C. parapsilosis e C. tropicalis. Conhecer a distribuição das espécies e padrões de suscetibilidade aos antifúngicos é fundamental para o estabelecimento de medidas de controle da candidemia. A patogenicidade dessas leveduras depende de alguns fatores de virulência como a capacidade de escapar dos mecanismos de defesa do hospedeiro e a capacidade de formação de biofilme. Biofilmes são comunidades microbianas organizadas aderidas a uma superfície sólida, biótica ou abiótica, e envolvidas por uma matriz polissacarídica extracelular. Eles podem apresentar resistência a antimicrobianos e ser fontes de infecções crônicas e persistentes, e a sua relação fungo-hospedeiro é pouco conhecida. O objetivo desse estudo foi avaliar o impacto da formação de biofilme sobre o perfil de suscetibilidade a antifúngicos, de espécies de Candida isoladas em episódios de candidemia no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. Foram isoladas 70 amostras de Candida spp. através de hemoculturas, e características dos pacientes foram avaliadas, através da análise dos prontuários médicos. A espécie mais prevalente foi C. albicans, seguida por C. parapsilosis (sensu latu), C. glabrata e C. tropicalis a menos frequente. A Concentração Inibitória Mínima dos antifúngicos anfotericina B (AMB), caspofungina (CAS), fluconazol (FLC) e voriconazol (VOR) foi determinada em células planctônicas dos 70 isolados de Candida spp., de acordo com as diretrizes do CLSI. Dentre os isolados, um de C. albicans foi resistente ao FLC e VOR; todos os isolados de C. glabrata e um isolado de C. parapsilosis foram suscetíveis dose dependente ao FLC, dois isolados de C. glabrata foram suscetíveis dose dependente à CAS e um isolado de C. tropicalis foi suscetível dose dependente ao VOR. A capacidade de formação de biofilme pelos isolados foi analisada, e de acordo com a atividade metabólica, todos os isolados de C. albicans, C. glabrata e C. tropicalis foram capazes de formar biofilme em placas de poliestireno, em 24 horas, e 50% dos isolados de C. parapsilosis não foram capazes de formar biofilme. Biofilmes de cada espécie foram visualizados por microscopia eletrônica de varredura, e demonstraram diferenças estruturais de acordo com cada espécie. A Concentração Erradicatória Mínima dos antifúngicos aos biofilmes de todos os isolados foi determinada. AMB e CAS mostraram atividade contra biofilmes de Candida spp., contudo, biofilmes de certos isolados requereram concentrações maiores que as necessárias para inibir o crescimento de células planctônicas; FLC e VOR, no geral, não possuem ação eficaz contra biofilmes de Candida spp.. Quando isolados de C. albicans, com diferentes perfis de formação de biofilme, foram avaliados quanto a sua virulência in vivo no hospedeiro invertebrado Galleria mellonella, foi obervada uma tendência de maior virulência no grupo de isolados previamente classificados com alta formação de biofilme. Os resultados obtidos refletem a influência da formação de biofilme na suscetibilidade dos isolados clínicos aos antifúngicos comumente utilizados na prática médica / Candida spp. is part of the most important group of opportunistic pathogenic fungi, which is associated with high mortality rates. The main species causing bloodstream infections are: C. albicans, C. glabrata, C. parapsilosis and C. tropicalis. The knowledge about these species´ distribution and their antifungal susceptibility profiles is essential to establish measures to control candidemia. The pathogenesis of these yeasts depends on some virulence factors, such as their ability to escape host defense and their capacity of forming biofilm. Biofilms are organized microbial communities adhered to a biotic or abiotic solid surface and surrounded by an extracellular matrix; they can be resistant to antimicrobial agents and the source of chronic and persistent infections, and its fungal-host relationship is still little known. The aim of this study was to evaluate the impact of biofilm formation on antifungal susceptibility profile of Candida species isolated from candidemia episodes at the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. A total of 70 Candida spp. samples were isolated through blood culture, and the patients\' characteristics were evaluated through the analysis of their medical records. The most isolated species was C. albicans, followed by C. parapsilosis (sensu latu), C. glabrata, and C. tropicalis the least frequent. The Minimal Inhibitory Concentration for the antifungal agents amphotericin B (AMB), caspofungin (CAS), fluconazole (FLC) and voriconazole (VOR) were determined in planktonic cells for the 70 Candida spp. isolates, following CLSI guidelines. Among the isolates, one C. albicans isolate was resistant to FLC and VOR; all the C. glabrata and one C. parapsilosis isolates were susceptible dose dependent to FLC; two C. glabrata isolates were susceptible dose dependent to CAS, and one C. tropicalis isolate was susceptible dose dependent to VOR . The isolates´ ability to form biofilm was analyzed and according to the metabolic activity, all the C. albicans, C. glabrata and C. tropicalis isolates were able to form biofilm in polystyrene plates, in 24 hours, and 50% of the C. parapsilosis isolates were not able to form biofilm. Biofilms of each species were visualized through scanning electron microscopy and structural differences were seen according to each species. The Minimal Eradication Concentrations of the antifungal to the biofilms were determined. AMB and CAS showed activity against Candida spp. biofilms, however, some isolates needed concentrations much higher than the used to inhibit planktonic growth; FLC and VOR in general were not efficient against Candida spp. biofilms. When C. albicans isolates, which showed different biofilm formation profiles, were tested about their in vivo virulence using the invertebrate host Galleria mellonella, it was possible to observe a propensity of the high biofilm formers isolates to be more virulent. The results reflect the effect of biofilms on clinical isolates susceptibility to antifungal drugs commonly used during medical practice.
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Candida spp. em escovas dentais e eficácia de antimicrobianos na sua desinfecção / Candida spp. on toothbrushes and efficacy of antimicrobial agents for their disinfection.

Rodrigues, Andresa Piacezzi Nascimento 21 May 2009 (has links)
Os objetivos foram avaliar a presença de Candida spp. em escovas dentais; a eficácia do Periogard® e do Neem Sattiva®, em spray, na desinfecção destas escovas; a atividade antimicrobiana, in vitro, do Neem Sattiva®, do Periogard® e da solução de gluconato de clorexidina a 0,5% por meio da Diluição Inibitória Máxima (DIMax); e a capacidade de Candida spp. formar biofilme, in vitro, sobre as cerdas e hastilhas de escovas dentais (empregando a técnica de cultura microbiana e a microscopia eletrônica de varredura). Participaram do estudo clínico randomizado 61 estudantes de Odontologia da FORP USP. O estudo foi realizado em três etapas. Em cada etapa, os voluntários receberam escovas novas e realizaram a escovação dentária sem dentifrício, por dois minutos. Cada solução foi borrifada sobre as cerdas das escovas por seis vezes. Após quatro horas à temperatura ambiente, as escovas foram submetidas ao processamento microbiológico para o isolamento e identificação das espécies de Candida. A DIMax dos antissépticos foi realizada utilizando o método da diluição em ágar. As escovas dentais de 37,3% dos indivíduos estavam contaminadas por Candida spp. (C. albicans, C. parapsilosis e Candida sp.). O Periogard® e o Neem Sattiva®, em spray, inibiram o crescimento de Candida spp. em 40,9 e 9,1% das escovas, respectivamente. Portanto, o spray de Periogard® foi mais eficaz que o spray de Neem Sattiva® para esse propósito. As DIMaxs do Neem Sattiva®, do Periogard® e da solução de clorexidina a 0,5% frente a 63 cepas de Candida spp. foram 1/10, 1/20 e 1/40, respectivamente. Candida spp. foram capazes de formar biofilme, in vitro, sobre hastilhas (polietileno de baixa densidade) de escovas dentais. O mesmo não ocorreu nas cerdas de náilon. / The purposes were to evaluate the presence of Candida spp. on toothbrushes; the efficacy of Periogard® and Neem Sattiva®, in spray, in the disinfection of these toothbrushes; the in vitro antimicrobial activity of Neem Sattiva®, Periogard® and solution containing 0.5% chlorhexidine gluconate by the Maximum Inhibitory Dilution (MID); and the ability of Candida spp. to form biofilm in vitro on the bristles and small sticks of toothbrushes (using the microbial culture technique and scanning electron microscopy). In the randomized clinical study participated 61 students matriculated at the Dentistry course of the FORP USP. The study was performed into three phases. In each phase, volunteers received new toothbrushes and performed toothbrushing with no dentifrice, during two minutes. Each solution was sprayed six times on the toothbrush bristles. After four hours at room temperature, toothbrushes were submitted to microbiological processing for the isolation and identification of Candida species. MID of antiseptics was performed using the agar dilution method. Toothbrushes used by 37.3% of subjects were contaminated by Candida spp. (C. albicans, C. parapsilosis and Candida sp.). Periogard® and Neem Sattiva®, in spray, inhibited growth of Candida spp. in 40.9 and 9.1% of toothbrushes, respectively. Therefore, Periogard® spray was more efficacious than Neem Sattiva® spray for this purpose. MID of Neem Sattiva®, Periogard® and solution containing 0.5% chlorhexidine against 63 Candida spp. strains were 1/10, 1/20 and 1/40, respectively. Candida spp. were able to form biofilm in vitro on the toothbrush small sticks (low-density polyethylene). This did not occur on the nylon bristles.
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EFEITO CLÍNICO DO USO TÓPICO DE UNCARIA TOMENTOSAWILLD D.C.EM PACIENTES COM ESTOMATITE PROTÉTICA

Tay Chu Jon, Lidia Yileng 30 July 2013 (has links)
Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2018-09-11T12:20:53Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Lidia Yileng.pdf: 2407431 bytes, checksum: 8e4f36ecd67d4196231ab479788b77c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T12:20:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Lidia Yileng.pdf: 2407431 bytes, checksum: 8e4f36ecd67d4196231ab479788b77c2 (MD5) Previous issue date: 2013-07-30 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / A Estomatite protética (EP) é uma doença inflamatória crônica que afeta usuários de prótese removível, sendo a Candida spp. o principal agente etiológico. Uncaria tomentosa, conhecida como unha de gato, é utilizada usualmente na medicina alternativa para o tratamento de diversas doenças. O propósito deste estudo clínico randomizado duplo cego foi determinar a eficácia de um gel de Uncaria tomentosa Willd D.C. contra a EP. Cinquenta pacientes portadores de EP foram distribuídos aleatoriamente em três grupos para receber tratamento contra a doença: grupo M: gel de miconazol 2% como controle positivo; grupo P: gel de hydroxietilcelulose (natrosol) como placebo; e grupo UT: gel de Uncaria tomentosa 2% como o grupo experimental. Os pacientes receberam uma bisnaga contendo o medicamento de acordo com o grupo e foram instruídos para aplicar o gel na base da prótese três vezes ao dia durante uma semana. Além disso, instruções sobre a higiene bucal e das próteses foram prescritas a todos os pacientes. Os pacientes foram avaliados inicialmente (dia 0), após uma semana de tratamento (dia 7) e uma semana após terminado o tratamento (dia 14). A efetividade do tratamento foi avaliada clinicamente pela utilização dos critérios de Newton para grau de EP. Além disso, exame micológico foi realizado contando as unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL) de amostras tomadas da mucosa do palato e da superfície interna da prótese. AsCandida spp.foram identificadas com o HiCrome Candida Agar e submetidas ao teste bioquímico Api 20 C AUX. Não houve diferença significativa entre os três grupos (p>0,05) segundo o teste estatístico Kruskal-Wallis e o teste de comparação múltipla de Dunn. Pôde-se observar clinicamente uma diminuição no grau de EP e na análise microbiológica redução significativa da contagem de UFC/mL, após uma semana de tratamento (p<0,05) a qual permaneceu semelhante após 14 dias (p>0,05) nos três grupos avaliados. Foi possível reconhecer C. albicans, C. tropicalis, C. glabrata e C. krusei encontradas nas amostras dos pacientes com EP. Pode-se concluirque o gel de Uncaria tomentosa teve o mesmo efeito que o agente antifúngico miconazol 2%. / Denture stomatitis is a chronic oral disease that affects denture wearers. It presents as an inflammatory reaction in denture-bearing patients, under maxillary prosthesis. Candida spp. has been reported as the principal etiological agent. Despite the existence of a great number of antifungal agents, treatment failure is observed frequently. Uncaria tomentosaWilld D.C., known as cat’s claw, is habitually used in alternative medicine for the treatment of several diseases. The aim of this clinical study was to determine the efficacy of Uncaria tomentosa gel against denture stomatitis (DS). Fifty patients with DS were randomly assigned into three groups to receive either 2% miconazole gel as a positive control (Group M) or 1.5% hydroxyethylcellulose (natrosol) as a placebo group (Group P) or 2% Uncaria tomentosa gel as the experimental group (Group UT). All patients received their treatment on admission and were told to apply the gel on the base of the denture three times a day for a period of 1 week. In addition, instructions for oral and denture hygiene were prescribed to all patients. DS level was registered initial (day 0), after 1 one week of treatment (day 7) and 7 days after treatment (day 14). The effectiveness of treatment was assessed clinically using Newton’s criteria for severity degree of DS; mycological examination was performed counting colony-forming units per milliliter (CFU/mL) from samples of the palatal mucosa and from the tissue surface or the upper denture. Candida spp. were identified with HiCrome Candida and submitted to the biochemical test API 20 C AUX. Results were statistically evaluated using Kruskal-Wallis test and Dunn’s multiple comparsion test. Clinically it was observed decrease in the severity of DS in all groups (p<0.05). At the mycological examination, significant reduction in number of CFU/ml after one week of treatment (p<0.05) which remained after 14 days (p>0.05) were found in the three groups with no significant difference among the three groups (p < 0.05). It was possible to identifyC. albicans, C. tropicalis, C. glabrata and C. krusei found on the samples of DS patients. Furthermore, it was observed that Uncaria tomentosa gel has the same effect as the antifungal agent.

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