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Isolamento e caracterização de α-fucosidases digestivas em Arachnida. / Isolation and characterization of digestive α-fucosidases in Arachnida.

Rodrigo Moreti da Silva 16 November 2010 (has links)
Os artrópodes constituem as formas mais abundantes de vida animal no planeta. O sistema digestivo dos Arthropoda é uma das mais importantes superfícies de contato com o ambiente. Pouco se conhece a respeito do sistema digestivo dos aracnídeos. Identificamos as principais carboidrases digestivas em três Arachnida modelo: Tityus serrulatus, Amblyomma cajennense e Nephilengys cruentata. As α-fucosidases são glicosídeo hidrolases que catalisam a hidrólise de ligações glicosídicas entre uma fucose ligada a outro carboidrato ou outro tipo de molécula. Estas enzimas são fundamentais no processamento de glicoproteínas e glicolipídeos. Observamos altas atividades de α-fucosidases em todas as espécies estudadas e estas enzimas foram isoladas e caracterizadas. / Arthropods are the most abundant animal life form on the planet. The digestive system of Arthropoda is one of the most important areas of contact with the environment. The study of Arachnida digestive enzymes has been sporadic and remains a largely unexplored area. We identified the most important digestive carbohydrases in three Arachnida models: Tityus serrulatus, Amblyomma cajennense and Nephilengys cruentata. The α-fucosidases are glycoside hydrolases that catalyze the hydrolysis of glycosidic links between a fucose linked to other carbohydrate or another type of molecule. These enzymes are essential in the processing of glycoprotein and glycolipids. We showed that all models tested presented high activities of digestive α-fucosidases and these enzymes were isolated and characterized.
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Estudo do crescimento celular em culturas embriogênicas e não-embriogênicas de cana-de-açúcar. / Study of cell growth in embryogenic and non-embryogenic cultures of sugarcane.

Ludmila Grechi Fim 14 May 2012 (has links)
Muitos estudos têm sido direcionados para gerar melhorias na cultura de cana-de-açúcar, sendo uma das alternativas o uso de técnicas biotecnológicas, como a embriogênese somática (ES). O objetivo deste projeto foi estudar a multiplicação celular na ES de cana-de-açúcar da variedade SP80-3280. Culturas embriogênicas (CE) e não-embriogênicas (CNE) foram monitoradas e parâmetros bioquímicos foram analisados. Foi observado que CE e CNE apresentaram crescimento máximo aos 24 dias de cultivo, sendo que as CE apresentaram maior incremento em matéria fresca. Dos carboidratos analisados, a sacarose foi predominante em CE, enquanto a glicose predominou em CNE. Os conteúdos de glicose e frutose variaram simultaneamente em CE. As concentrações de amido, poliaminas (Pas) totais e a razão entre PAs [Razão PA= Put/(Spd+Spm)] apresentaram maiores valores nas CNE, sendo a espermidina a poliamina predominante em CE e putrescina em CNE. O conteúdo de proteínas totais foi significativamente maior em CE, em todas as fases de crescimento. / Many studies have been directed to generate improvements in the sugarcane cultures, one of the alternative use of biotechnology techniques such as somatic embryogenesis (SE). The objective of this project was to study the cell multiplication in SE of sugarcane, variety SP80-3280. Embryogenic cultures (EC) and non-embryogenic (NEC) were monitored and biochemical parameters were analyzed. Was observed that EC and NEC showed maximum growth to 24 days of culture, and the EC showed greater increase in fresh weight. Of the carbohydrates tested, sucrose was predominant in EC, while glucose was predominant in the NEC. The contents of glucose and fructose varied simultaneously in EC. The concentrations of starch, polyamines (PAs) and the ratio of total PAs [Ratio PA = Put / (Spd + Spm)] showed higher values in the NEC, and the spermidine is predominant polyamine to EC and putrescine is predominant in NEC. The content of total protein was significantly higher in CE, at all stages of growth.
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Caracterização química e enzimática do processo de adoçamento da manga \'Keitt\' / Chemical and enzymatic characterization of the mango Keitt sweetening process

Ana Paula Fioravante Bernardes Silva 16 June 2004 (has links)
Dentre as características que definem um fruto maduro, o adoçamento é um dos mais importantes. Porém, no que concerne à manga, os dados existentes são escassos e pouco esclarecedores. Neste trabalho foi estudada a síntese e a degradação do amido da manga \'Keitt\', nos aspectos químicos (teores de amido, de amilose e de açúcares solúveis), nos aspectos bioquímicos (atividade de enzimas relacionadas à degradação do amido, perfil de enzimas ligadas ao grânulo de amido) e aspecto morfológico do grânulo de amido (preliminar), e o amadurecimento do fruto. A manga \'Keitt\' teve um padrão atípico de fruto climatérico, com a produção de pequenas quantidades de etileno e C02, culminando em picos após o processo de amadurecimento ter sido iniciado. Todo o amido acumulado (cerca de 8 %) durante o desenvolvimento até os 3 dias após a colheita (dpc), foi totalmente degradado a partir dos 5 dpc chegando ao final do amadurecimento com apenas traços do seu conteúdo inicial. Ao mesmo tempo acumulou cerca de 10 % de açúcares solúveis, com predominância da sacarose. As enzimas que potencialmente podem degradar o amido, tiveram perfil de atividade compatível com a sua atuação. Houve um aumento bastante significativo de atividade da α-amilase durante a formação do fruto e da β--amilase durante o amadurecimento do fruto. As fosforilases e isoamilases, embora tivessem atividade suficiente para atuar durante a degradação do amido, demonstraram pelo perfil de atividade terem bastante importância durante a síntese do amido. Os grânulos de amido, como observados por microscopia eletrônica de varredura, tem grânulos redondos, lisos e pequenos (até 20 µm), que diminuem de tamanho durante o amadurecimento da manga. As proteínas ligadas ao grânulo, como visto por eletroforese em condições dissociantes, aumentaram em número e quantidade depois da colheita da manga, mostrando que várias proteínas de alto e baixo peso molecular, aderiram ao grânulo antes do início da degradação. / Sweetening is one of the most important characteristics concerning ripe fruit. However, physiological and biochemical changes associated to mango fruit ripening process, including mango sweetening, is still poor understood. In this work the synthesis and breakdown of the starch were studied focusing starch, amylose, and soluble sugars content. Also the activities of some enzymes that participate in starch metabolism were evaluated during development and ripening of mango \'Keitt\'. Thought Scanning Electron Microscopy, granule starch shape and superficial changes related to the degree of mango ripening, were investigated. Results shown that mango fruit (cv. Keitt) has not a typical profile of ethylene and respiration during the ripening process, with very low leveis of both parameters. There was a massive conversion of the starch accumulated (~8 % )during fruit development to soluble sugar (~10 %), with a predominance of sucrose. The activity of α-amylase increased at least 20 times during fruit development while &#946:-amylase showed detectable activity after fruit harvesting. Starchphosphorylases and isoamylases activities can be linked with both starch synthesis and degradation. Granule starch isolated from mango, showed spherical shape and small size (~20 µm) when the mango achieve full starch content (~3 days after harvest), with about 25 % of amylose. During fruit ripening, granule size suffered superficial corrosion and decreased in size (~6 µm). SDS-PAGE gels showed that after harvesting increased the number of starch bounded proteins with low and high molecular weight, inclusive inside the granule. These proteins can be associated with starch degradation process.
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Avaliação de fontes de carboidrato e proteína e sua utilização na dieta pré-inicial de frangos de corte. / Carbohydrate and protein sources evaluation and its utilization in the diets of newly hatched chicks.

Flavio Alves Longo 06 February 2004 (has links)
Existe uma série de evidências que os pintos de corte na fase pré-inicial têm seu sistema digestório ainda imaturo, implicando em menor capacidade de aproveitamento dos alimentos. Em função desse fato, ingredientes de maior digestibilidade seriam recomendados para proporcionar um desenvolvimento adequado do organismo. Com isso, o objetivo do presente trabalho foi determinar a energia metabolizável aparente corrigida pelo balanço de nitrogênio (EMAn) de ingredientes como fontes de carboidrato e proteína para frangos de corte na fase pré- inicial, bem como avaliar a utilização destes ingredientes sobre o desenvolvimento inicial de órgãos do trato gastrintestinal, desempenho e características da carcaça das aves. Os ingredientes avaliados foram: milho (MI), amido de milho (AMI), amido de mandioca (AMA), glicose (GLI), lactose (LAC) e sacarose (SAC), como fontes de carboidrato; e farelo de soja (FS), soja integral micronizada (SIM), isolado protéico de soja (IS), ovo em pó (OP), plasma sanguíneo (PS), farelo de glúten de milho (GM) e levedura seca (LS), como fontes de proteína. Para a determinação da EMAn foram desenvolvidos vários ensaios de metabolismo utilizando-se o método de coleta total de excretas. Para a avaliação do desempenho, desenvolvimento do trato gastrintestinal e características da carcaça foram conduzidos diversos experimentos, em gaiolas e em piso de galpão experimental, com a inclusão dos ingredientes nas dietas. Os valores de EMAn para a fase pré- inicial das fontes de carboidrato foram: 3.213; 3.269; 3.690; 3.427; 1.225 e 3.524 kcal/kg para MI, AMI, AMA, GLI, LAC e SAC, respectivamente. Para as fontes protéicas a EMAn foi: 2.085; 4.068; 2.110; 5.095; 3.831; 3.374 e 2.037 kcal/kg para FS, SIM, IS, OP, PS, GM e LS, respectivamente. Para as aves criadas em gaiolas pode-se dizer que o desenvolvimento do trato gastrintestinal, de maneira geral, não foi influenciado pelas diferentes fontes de carboidrato, mas o consumo de ração das aves foi aumentado pelo fornecimento de carboidrato de maior disponibilidade na dieta préinicial, contribuindo para um aumento no peso vivo das aves. As diferentes fontes de proteína afetaram o desenvolvimento dos órgãos, mas esse efeito não foi suficiente para explicar as variações no desempenho das aves. A adição de diferentes fontes de proteína e carboidrato, bem como suas misturas, em dietas pré- iniciais de frangos de corte criados sob piso de galpão experimental, promoveram alterações no desempenho e no desenvolvimento do intestino delgado das aves até o sétimo dia de idade, entretanto as diferenças de desempenho não foram mantidas nas fases subseqüentes, contribuindo para que as características da carcaça e composição da carne de perna não apresentassem diferenças no momento do abate. / There are some evidences in the literature that newly hatched chicks have the digestive system still immature, what result in a small capacity to metabolize feed ingredients. So, more digestible ingredients could be recommended to allow an adequate development of the body. Herewith, the objective of this work was to determine the Ncorrected apparent metabolizable energy (EMAn) of carbohydrate and protein sources for newly hatched chicks, and to evaluate the utilization of these ingredients on the early development of gastrointestinal tract organs, performance and carcass characteristics of birds. The ingredients evaluated were: corn (MI), corn starch (AMI), cassava starch (AMA), glucose (GLI), lactose (LAC) and sucrose (SAC), as carbohydrates sources, and soybean meal (FS), micronized full fat soybean (SIM), isolated soy protein (IS), dried whole eggs (OP), blood plasma (PS), corn gluten meal (GM) and dried sugar cane yeast (LS), as protein sources. Several metabolism trials were conducted to determine the EMAn, using the total excreta collection method. To evaluate the performance, gastrointestinal tract development and carcass characteristics, experiments were conducted, in cages and floor pens, using diets containing those ingredients. The EMAn of the carbohydrate sources determined for chicks in the first week were: 3,213; 3,269; 3,690; 3,427; 1,225 and 3,524 kcal/kg for MI, AMI, AMA, GLI, LAC and SAC, respectively. The EMAn for protein sources were: 2,085; 4,068; 2,110; 5,095; 3,831; 3,374 and 2,037 kcal/kg for FS, SIM, IS, OP, PS, GM and LS, respectively. For the birds reared in cages, the results showed, in general, that the different carbohydrate sources did not affect the gastrointestinal tract development, but the feed consumption of the birds was improved by the more available carbohydrate sources in the newly hatched chicks diets, contributing to a higher liveweight of the birds. Otherwise, the different protein sources affected the gastrointestinal tract development, but these effects did not explain the changes on broiler performance. The addition of different protein and carbohydrate sources, and their mixtures, in the diets of newly hatched chicks reared in the floor pens resulted in differences on performance and on small intestine development of the birds until seven days of age, but these differences were not maintained on the following phases, contributing to a similar carcass characteristics and similar chemical composition of the whole leg meat at slaughter time.
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Caracterização de bebidas à base de soja empregando espectroscopia no infravermelho médio com transformada de Fourier por reflexão total atenuada e quimiometria

Rech, André Machado January 2018 (has links)
Neste trabalho, foram estudadas estratégias para caracterização de bebidas à base de soja (BBS), por meio de análises por espectroscopia no infravermelho médio com transformada de Fourier com acessório de reflexão total atenuada (FTIR-ATR). Foram utilizadas 20 amostras comerciais de BBS, de 7 diferentes sabores e 3 diferentes marcas. Os teores estudados nas BBS foram glicídios totais, glicídios redutores, glicídios não redutores, e proteínas totais. Os modelos de regressão multivariada foram construídos por mínimos quadrados parciais (PLS), empregando como seleção de variáveis os métodos de mínimos quadrados parciais por intervalo (iPLS) e mínimos quadrados parciais por sinergismo de intervalos (siPLS). As seleções de variáveis por siPLS apresentaram os melhores resultados para os modelos construídos. Entre as propriedades avaliadas, a de glicídios totais apresentou modelos com erros de calibração e previsão (RMSECV e RMSEP) baixos, e coeficientes de determinação (R2cv e R2prev) próximos de um. Para proteínas totais, os modelos apresentaram resultados promissores, pois também tiveram erros de calibração e previsão (RMSECV e RMSEP) baixos, e coeficientes de determinação (R2cv e R2prev) próximos de um, considerando-se que as amostras reais e não apresentavam uma variabilidade de concentração de proteínas ideal. Para as propriedades de glicídios redutores e glicídios não redutores, não foram obtidos bons resultados para os modelos de regressão. Desta forma, a metodologia proposta apresenta potencial em análises de rotinas para determinação simultânea de glicídios totais e proteínas, atendendo aos requisitos referente às informações nutricionais na rotulagem das BBS, somando-se às vantagens da espectroscopia no infravermelho, tais como rapidez na análise, elevada frequência analítica, pequena quantidade de amostra necessária, baixo custo, não ser destrutiva e ser ambientalmente amigável. / In this work, strategies were studied for the characterization of soy-based beverages (SBB), by means of Fourier transform infrared spectroscopy with attenuated total reflectance (FTIR-ATR). Twenty commercial samples of SBB were used, of 7 different flavors and 7 different brands. The contents studied in SBB were total sugar, reducing sugar, non-reducing sugars, and total proteins. The multivariate regression models were constructed by partial least squares (PLS), with evaluation of the methods by interval partial least squares (iPLS) and by sinergy interval partial least squares (siPLS), for selection of variables. The selections of variables per siPLS presented the best results for the constructed models. Among the evaluated properties, the total sugar content presented models with low calibration and prediction errors (RMSECV and RMSEP), and determination coefficients (R2cv and R2prev) close to one. For total proteins, the models presented promising results, as they also had low calibration and prediction errors (RMSECV and RMSEP), and determination coefficients (R2cv and R2prev) close to one, considering that the actual samples did not present an ideal protein concentration variability. For the properties of reducing sugars and non-reducing sugars, good results were not obtained for the regression models. In this way, the proposed methodology presents potential in routine analysis for simultaneous determination of total glycogen and protein, taking into account the requirements referring to the nutritional information in the SBB labeling, adding to the advantages of the infrared spectroscopy, such as speed in the analysis, high analytical frequency, small amount of sample required, low cost, non destructive and environmentally friendly.
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Efeitos da abreviação do jejum pré-operatório com carboidratos e glutamina na resposta metabólica de pacientes submetidos à colecistectomia videolaparoscópica. Estudo controlado randomizado duplo cego / The effects of the abbreviation of preoperative fasting with carbohydrate and glutamine on the metabolic response after videolaparoscopic cholecystectomy. A double blind randomized trial

Nascimento, Diana Borges Dock 05 April 2012 (has links)
Introdução: O jejum prolongado pré-operatório aumenta a resistência periférica à insulina. Foi investigado se a abreviação do jejum pré-operatório com uma bebida contendo carboidrato e glutamina melhora a resposta orgânica ao trauma cirúrgico. Métodos: Quarenta e oito pacientes adultas, do sexo feminino (19-62 anos) candidatas a colecistectomia videolaparoscópica eletiva. As pacientes foram aleatoriamente divididas em quatro grupos: grupo jejum convencional (grupo Jejum), ou em três grupos para receber três tipos diferentes bebidas oito horas (400 mL) e duas horas antes da indução anestésica (200ml): água pura (grupo Placebo), água mais dextrinomaltose (grupo carboidrato; 12,5% de dextrinomaltose) e grupo glutamina (grupo glutamina; 12,5% de dextrinomaltose e respectivamente 40 e 10g de glutamina). As amostras de sangue foram coletadas no período pré e pós-operatório. Resultados: não houve nenhum evento de aspiração ou regurgitação do conteúdo gástrico manifesto por sinais e sintomas clínicos, durante a indução anestésica, ou em qualquer outro momento do estudo. Também não houve nenhum óbito ou complicação pós-operatória. A média e o erro padrão médio da resistência à insulina determinada pelo HOMA-IR realizada no pós-operatório foi maior (p<0,05) no grupo que permaneceu em jejum (4,3±1,3) quando comparado com os outros três grupos de pacientes (Placebo, 1,6±0,3); carboidrato, (2,3±0,4) e glutamina, (1,5±0,1). A medida da glutationa peroxidase sérica, medida nos dois períodos foi maior no grupo glutamina (40±3,0) que nos grupos carboidrato (32±2,0) e jejum (32±2,0) (p<0,01). Ao se comparar o comportamento da IL-6 sérica em cada grupo estudado no período pré e pós-operatório, observou-se que o grupo glutamina foi o único sem diferença, enquanto nos demais a IL-6 aumentou no pós-operatório (p<0,01). No período pós-operatório a razão proteína-C-reativa/albumina foi maior no grupo jejum quando comparado com os grupos carboidrato (p=0,04) e glutamina (p=0,01). O balanço nitrogenado acumulativo foi menos negativo no grupo glutamina (-2,5±0,8 gN) que nos grupos placebo (-9,0±2,0 gN; p=0,001) e jejum (-6,6±0,4 gN; p=0,04). Conclusão: A abreviação do jejum pré-operatório com uma bebida contendo carboidrato e glutamina melhora a resistência periférica a insulina, a resposta anti-oxidativa e diminui a resposta inflamatória de pacientes submetidas à colecistectomia videolaparoscópica eletiva / Introduction: Prolonged preoperative fasting increases insulin resistance. We investigated whether an abbreviated preoperative fast with glutamine plus a carbohydrate based beverage would improve the organic response after surgery. Methods: Forty-eight female patients (19-62 years) candidates for video-cholecystectomy were randomized to either standard fasting (fasting group) or to fasting with one of three different beverages. Beverages were consumed 8 hours (400 mL; placebo group: water; glutamine group: water with 50 g maltodextrine plus 40 g glutamine; and carbohydrate group: water with 50 g maltodextrine) and 2 hours (200 mL; placebo group: water; glutamine group: water with 25 g maltodextrine plus 10 g glutamine; and carbohydrate group: water with 25 g maltodextrine) before anesthesia. Blood samples were collected pre- and postoperatively. Results: There were no cases of regurgitation during anesthesia. The mean [SEM] postoperative HOMA-IR was greater (p<0,05) in fasted patients (4,3±1,3) than in the other groups (placebo, 1,6±0,3); carbohydrate, (2.3±0,4); and glutamine, (1,5±0,1). Glutathione peroxidase (U/g hemoglobin) was significantly higher (40±3,0) in glutamine group than both carbohydrate (32±2,0) and fasting (32±2,0) groups (p< 0,01). Interleukin-6 increased in all groups except the glutamine group. The C-reactive protein/albumin ratio was higher in fasting subjects than carbohydrate (p=0,04) and glutamine (p=0,01) groups. The nitrogen balance was less negative in glutamine (-2,5±0,8 gN) than both placebo (-9,0±2,0 gN; p=0,001) and fasting (-6,6±0,4 gN; p=0,04) groups. Conclusions: Preoperative intake of a glutamine-enriched carbohydrate beverage improves insulin resistance and antioxidant defenses, and decreases the inflammatory response after videolaparoscopic cholecystectomy
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Frigoconservação e vernalização de mudas de morangueiro (Fragaria x ananassa Duch.) produzidas em sistema de vasos suspensos. / Storage cold and vernalization of strawberries runner (fragaria x ananassa duch.) produced in suspend pots system.

Verdial, Marcelo Fontanetti 14 May 2004 (has links)
Com o objetivo de estudar o sistema de produção de mudas de morangueiro em vasos suspensos e a aplicação das técnicas de frigoconservação e vernalização nas mudas produzidas nesse sistema, foram realizados quatro experimentos no Departamento de Produção Vegetal, ESALQ/USP, Piracicaba/SP, no período compreendido entre janeiro de 2000 e junho de 2003. No primeiro experimento comparou-se o sistema de produção de mudas em vasos suspensos com o sistema convencional. Foram avaliados: matéria seca, teor de carboidratos totais e percentagem de sobrevivência de mudas. Foram utilizadas as cultivares IAC-Campinas, Pelican e IAC-Guarani. Foi utilizado o delineamento experimental em esquema fatorial 3x2 (três cultivares e dois sistemas de produção de mudas), com três repetições. As mudas produzidas em vasos suspensos apresentaram maior percentagem de sobrevivência e maiores teores de carboidratos totais. O segundo e terceiro experimentos tiveram como objetivo avaliar o uso da técnica de frigoconservação em mudas produzidas no sistema de vasos suspensos. As mudas foram acondicionadas em sacos de polietileno e frigoconservadas durante 120 dias em uma B.O.D. a -1 + 1oC. Foram então retiradas da câmara fria e plantadas em bandejas de poliestireno expandido de 128 células preenchidas com vermiculita. As bandejas foram colocadas em uma câmara nebulizadora, onde permaneceram por 21 dias para enraizamento. Em seguida foram transplantadas para vasos de 250ml e levadas para casa de vegetação. Foi avaliada a percentagem de sobrevivência das mudas. No segundo experimento utilizou-se o delineamento experimental inteiramente ao acaso com cinco cultivares (IAC-Campinas, Dover, Pelican, Sequoia e Sweet Charlie) e nove repetições. No terceiro experimento foi utilizado o esquema fatorial 5x2 (cinco cultivares: IAC-Campinas, Oso Grande, Camarosa, Dover e Sweet Charlie; e dois tratamentos de enraizamento: com e sem ácido indol butírico) com quatro repetições. O sistema de frigoconservação adotado apresenou desempenho insatisfatório devido à baixa percentagem de sobrevivência das mudas. O quarto experimento estudou o efeito da vernalização em mudas de cinco cultivares de morangueiro produzidas no sistema de vasos suspensos. As mudas foram plantadas em vasos de 250 ml, preenchidos com substrato formulado com areia e vermiculita (4:1) e mantidas em casa de vegetação durante seis meses. O delineamento experimental utilizado foi o fatorial 5x2, com cinco cultivares (IAC-Campinas, Dover, Sweet Charlie, Cartuno e Oso Grande) com e sem vernalização das mudas, com quatro repetições. Para vernalização, as mudas foram levadas para câmara fria, à temperatura de 10 + 2ºC, e fotoperíodo de 10 h de luz/dia, durante 28 dias. Em seguida, foram transplantadas para dois locais de cultivo com características climáticas distintas, Piracicaba,SP e Caldas,MG. Foram avaliadas as percentagens de sobrevivência, florescimento, frutificação e emissão de estolhos e o peso da matéria fresca e número de frutos produzidos por planta. A sobrevivência de mudas não foi afetada pela vernalização em nenhuma das localidades. Houve efeito significativo no florescimento e na frutificação das plantas vernalizadas apenas em Piracicaba. O estolonamento de plantas foi mais precoce em Piracicaba. Para todas as cultivares a produção de frutos foi e insignificante e comercialmente inviável em ambas as localidades. / With the objective of studying the runners production system in suspended pots under protected cultivation and the application of techniques of stored cold and vernalization of runners produced by this system, four experiments were conducted in the Department of Crop Production, ESALQ, Piracicaba, SP-Brazil. In the first experiment it was compared the conventional strawberry runners production system with the runner production system in suspended pots. For that, it was measured the dry matter and carbohydrates contents in runners and the survival percentage when the runner were transplanted to field production areas. The cultivars IAC-Campinas, Pelican and IAC-Guarani were used, in an experimental design of factorial arrangement 3x2 (three cultivars and two runners production systems), three replications. The runners produced by the system of suspended pots accumulated higher amount of total carbohydrates and the plant survival rate. The second and third experiments had the objective of evaluating the use of a technique of storage cold in runners produced in the system of suspended pots. After the selection, the runners were conditioned in polyethylene bags and storage cold conditions for 120 days in a B.O.D. at -1+1ºC. After that they were removed of the cold camera and planted in trays of expanded polystyrene of 128 cells with vermiculite. The trays were put in a spray chamber 21 days for rooting. After that hey were transplanted to pots of 250mL and then placed in the greenhouse. It was evaluated the percentage of runners survival. In the second experiment it was used the experimental entirely random design, five strawberry cultivars (IAC-Campinas, Dover, Pelican, Sequoia and Sweet Charlie), and nine repetitions. In the threat experiment the factorial outline used was 5x2 (five cultivars: IAC-Campinas, Big Oso, Camarosa, Dover and Sweet Charlie; and two treatments: with and without indol butyric acid) with four repetitions. The storage cold of strawberry runners produced in system of suspended pots lower percentage of survival of seedlings in the two experiments. Therefore, the system of storage cold was not compatible with the type of storage runners. The fourth experiment had the objective of studying the effect of the runner vernalization of five strawberry cultivars produced in suspended pot system. In order to have availability of strawberry runners during the off season, they were planted in pots of 250 mL, filled out with substrate formulated with sand and vermiculite (4:1) and kept in the greenhouse for six months. Completely randomized blocks with the factorial design 5x2, with five strawberry cultivars (IAC-Campinas, Dover, Sweet Charlie, Cartuno and Big Oso) and two treatments (with and without strawberry runners vernalization). For vernalization, the strawberry runners were taken from cold camera to the temperature of 10 + 2ºC, and fotoperiod of 10 h of light/day for 28 days. After that, they were transplanted for two cultivation places with different climatic conditions, Piracicaba/SP and Caldas/MG. They were analyzed the survival percentages, flower blooming, fructification and emission of stolons and the weight and number of fruits produced by plant. The strawberry runners survival was not affected by the vernalization in none of the places. There were only significant effect on flower appearance and fructification of the vernalized plants, only in Piracicaba. The runner emitions were earlier in Piracicaba. For all strawberry cultivars the production of fruits was very low and the produced fruits were unsuitable for commercialization in both places.
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Estudo das alterações da parede celular durante ativação de mecanismos de defesa em Momordica charantia como fator de produção de metabólitos secundários bioativos / Study of cell wall changes during activation of defense mechanisms in Momordica charantia as factor of production of bioactive secondary metabolites

Santos, Vitor Francisco dos 26 September 2014 (has links)
Momordica charantia é uma espécie de planta pertencente à família Cucurbitaceae. No Brasil, é conhecida pelo nome popular de Melão de São Caetano. É encontrada em grande parte do globo terrestre, sendo que no Brasil é observada nas regiões litorâneas e principalmente nas regiões do interior do país. Escolhemos o estudo com Momordica charantia devido suas propriedades terapêuticas conhecidas serem de grande interesse. Ela vem ganhando cada vez mais reconhecimento através de pesquisas científicas realizadas, visto que, já é utilizada a milhares de anos através da cultura popular. Tais pesquisas têm confirmado e entendido cada vez mais as propriedades medicamentosas desta planta e os mecanismos responsáveis por tais funções nesta espécie, sendo as propriedades antidiabéticas, antivirais e anticancerígenas as de maior destaque. Os experimentos realizados em torno da Momordica charantia, na busca destes compostos foram todos realizados utilizando extratos retirados dos próprios tecidos já diferenciados na planta adulta (sementes, folhas, raízes e frutos). Neste trabalho, foi realizado a pesquisa de metabólitos secundários produzidos pela cultura de células em suspensão de Momordica charantia durante a fase de crescimento desta e após a realização de ensaios de elicitação com Ácido Salicílico (AS). Nosso laboratório vem se dedicando aos estudos da composição da parede celular vegetal e suas alterações, bem como dos mecanismos de defesa empregados pelas células em suspensão em condições de estresse biótico e abiótico. O ácido salicílico é um dos hormônios vegetais envolvido em vários mecanismos de respostas que envolve o estresse vegetal e de desenvolvimento da planta tais como o de garantir resistência a patógenos por exemplo. Quando ocorre algum processo de infecção ou lesivo para a planta, ocorre um aumento na concentração de AS no interior da planta. Esse aumento leva a ativação de certas vias metabólicas que culminam na produção de metabólitos secundários e na degradação, fragmentação ou espessamento da parede celular. Como reposta dos ensaios de elicitação realizados podemos comprovar os efeitos do AS mediados na produção de metabólitos secundários que foram aumentados conforme a concentração de AS. Foi utilizado para os ensaios de elicitação AS nas concentrações de 0,5 , 1,0 e 5 mmol/L. Para o monitoramento da cultura e averiguação da efetividade dos ensaios de elicitação foi utilizado a monitoria através da dosagem de proteínas totais, compostos fenólicos totais e açúcares redutores totais tanto liberados para o meio extracelular quanto produzidos no meio intracelular. Foi determinado as variações dos componentes da parede celular durante a fase de crescimento e após os ensaios de elicitação onde foi comprovado que quanto maior a concentração de AS, maiores são os fragmentos de açúcares fragmentados da parede celular. Foi evidenciado também a presença de triterpenos na cultura celular (em comparação com os padrões isolados da planta), tanto na fase de crescimento e também após a indução com os ensaios de elicitação com AS. / Momordica charantia is a plant from the Cucurbitaceae family. In Brazil, it is known by the popular name of Melão de São Caetano. It is found across the whole world, and in Brazil it can be found in coastal and interior regions of the country. The aim to study Momordica charantia is due to its known therapeutic properties that are already used for thousands of years through popular culture. The studies have confirmed and understood various drug-like properties of this plant and the mechanisms responsible for such functions in this species, such as antidiabetic, antiviral and anticancer properties. The researches with Momordica charantia were all performed using extracts obtained from seeds, leaves, roots and fruit. In this work, the isolation and characterization of metabolites as standards from leaves and stems of Momordica charantia was performed. The research of secondary metabolites produced in cell culture suspension of Momordica charantia without elicitor or after elicitation with salicylic acid (SA) was conducted. Salicylic acid is a plant hormone involved in various mechanisms of responses. When the plant suffers an infection or injury, it is followed by an increase in AS concentration. This increase leads to activation of certain metabolic pathways that culminate in the production of secondary metabolites and degradation, fragmentation or cell wall thickening. AS was utilized for the elicitation experiments at 0.5, 1.0 and 5 mmol/L. For the monitoring of plant cell culture, it was determinate the total protein, phenolic compounds and reducing sugars content, into the extra and intra cellular medium. Where it was verified that AS modulates the production of these molecules in culture. After this, we determined the variation in the oligosaccharides in the extracellular medium obtained in the presence or absence of AS. It was observed the degree of polymerization of oligosaccharides higher when increase AS concentration in the medium. In conclusion, this study can demonstrate the effects of SA on the production of secondary metabolites in plant cell culture, which were increased as the concentration of AS increased. The presence of triterpenes in cell culture was confirmed to compare the molecules obtained from culture with that isolated from plant standards.
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Isolamento e análise funcional do gene que codifica uma proteína serina-treonina quinase que modula a expressão de genes regulados por carboidratos em Trichoderma reesei / Isolation and functional analysis of the gene encoding a serine-threonine protein kinase that modulates the expression of genes regulated by carbohydrates Trichoderma reesei

Matheucci Junior, Euclides 09 November 2000 (has links)
O gene TrSNF1, homólogo aos membros da subfamília das proteínas serina-treonina quinases ativadas por AMP (AMPK) e relacionadas a SNF1, foi isolado do fungo filamentoso trichoderma reesei. A seqüência de aminoácidos putativa possui um domínio de quinase com 42% de identidade e 59% de similaridade com outras proteínas quinases da mesma subfamília. Em S. cerevisiae a SNFl é essencial para a expressão de genes reprimidos por glicose, em resposta a privação de glicose do meio de cultura. A expressão de TrSNFl em levedura mutante para SNF1, restaura a função de SNF1. A expressão de um antisense de TrSNFl em T. reesei causa um atraso na expressão do gene regulado por glicose, CBHI. Além disso, em experimento utilizando matrizes de DNA foi possível observar uma alteração da tendência global da expressão gênica entre a cepa selvagem e a cepa antisense. A observação da homologia estrutural com proteínas quinase da mesma subfamília, a similaridade funcional com SNFl de S. cerevisiae, e a alteração no padrão da expressão gênica in vivo, sugerem que TrSNFl pode estar envolvido na regulação do metabolismo de carboidratos em T. reesei. / A gene homologue to the members of the AMP-activated/SNFl protein kinase subfamily, TrSNF1, was isolated from the filamentous fungus Trichoderma reesei. The predicted protein of 692 amino acids has a kinase domain, that share 42 % identity and 59 % similarity to that of serine/threonine protein kinase of this family. In Saccharomyces cerevisiae, the SNFl protein kinase is required for expression of glucose repressed genes in response to withdrawal of glucose from the medium. Expression of the Trichoderma reesei SNF1-related sequence in yeast SNFl mutant restores SNFl function. The TrSNFl antisense expression in T. reesei causes a control alteration in the glucose-regulated gene CBHI. The observed structural identity with the AMP-activated/SNFl protein kinase subfamily, and the functional similarity to the yeast SNFl suggest that the TrSNFl may be involved in the regulation of sugar metabolism in Trichoderma reesei.
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Avaliação da fração carboidratos solúveis em cana-de-açúcar para animais / The evaluation of sugarcane soluble carbohydrate fraction for animal feeding

Cabezas-Garcia, Edward Hernando 03 October 2011 (has links)
Objetivou-se com este estudo comparar diferentes métodos de determinação de carboidratos solúveis (CS) em cana-de-açúcar com o intuito de predizer valor nutritivo da forragem: conteúdo de sólidos solúveis (BRIX), conteúdo aparente de sacarose (POL), carboidratos não fibrosos (CNF), carboidratos solúveis em extrato aquoso (CSA) e carboidratos solúveis em extrato alcoólico (CSOH). Foram conduzidos dois experimentos envolvendo amostras da fração colmo e planta inteira. O primeiro avaliou o valor nutritivo da variedade IAC 86-2480 (terceiro corte) em resposta a dois métodos de colheita: colheita manual (MAN) e colheita mecânica (MEC) durante as fases de cultivo: 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 e 360 dias após colheita (DAC). As estimativas do CS, composição bromatológica (MS, CP, FDN, FDA, DIVMS e DIVMO), assim como da relação FDN/CS foram similares (P>0,05) entre os tratamentos, exceto para CSOH e FDN/CSOH para a fração colmo, e FDN/POL (P<0,05) para a planta inteira. O conteúdo de CS da planta inteira representou aproximadamente 80% do teor observado na fração colmo. Foram identificados três padrões de acúmulo de CS: a) POL e CSOH, b) BRIX, c) CNF. O modelo logístico não ajustou na predição de CSA. Até os 240 e 270 DAC, as relações entre FDN/BRIX e FDN/POL seguiram a mesma tendência para os métodos MAN e MEC respectivamente. Relações entre FDN/CS foram altamente correlacionadas com a digestibilidade da forragem, especialmente a relação FDN/CNF (r>0,8). A análise de componentes principais provou ser ferramenta útil para selecionar variáveis com o intuito de caracterizar valor alimentar em cana-de-açúcar. De acordo com o primeiro componente principal, o valor nutritivo é uma resposta de variáveis bromatológicas da fração fibrosa (ex. FDN, FDA), correspondendo a 54,4 e 64% da variância total da fração colmo e planta inteira respectivamente. No segundo experimento, foram avaliadas possíveis relações entre medidas morfológicas e químicas da planta visando explicar o acúmulo de CS e o valor nutricional da cana-de-açúcar (variedade IAC 93-3046), estabelecida sob dois níveis de adubação no plantio (NPK e NPK associada com esterco 120 kg N ha-1) ao longo da fase de maturação da planta em cana de primeiro corte. As amostras foram colhidas manualmente durante os períodos de 300, 360, 420 e 540 dias após plantio (DAP). Não houve efeito (P>0,05) da adubação na concentração de CS, a exceção das folhas secas (FS), CSA e minerais, na fração colmo. Três padrões de acúmulo de CS foram identificados nas duas frações morfológicas da planta: a) BRIX e CSOH; b) CNF E c) CSA. Embora POL não fosse considerada nesse experimento, as análises das curvas de CS (BRIX e CSOH) confirmaram que a cana atingiu a maturidade no mês de setembro como reportado na literatura. Regressões simples e múltiplas foram consideradas para predizer o acúmulo de CS, MS e o valor nutricional (digestibilidade). O modelo univariado apenas considerou variáveis químicas na predição, exceto para o teor de BRIX. Equações do tipo stepwise melhoraram o ajuste dos modelos (R2 e RQMR) ao considerar variáveis morfológicas, sendo a mais importante nas predições, o número de nós da fração colmo (NN). As equações para MS e CSA tiveram o menor poder de predição tanto nas regressões simples quanto nas múltiplas. A fração FDA foi a principal variável que explicou o valor nutritivo em amostras de cana-deaçúcar. / The objective of this research was to compare some potentialities of soluble carbohydrate (SC) methods currently used in sugarcane for animal feeding purposes: soluble solid content (BRIX), apparent sucrose content (POL), non fibrous carbohydrates (NFC), water soluble carbohydrates (WSC) and ethanol soluble carbohydrates (EtOH). Two trials involving stalk and whole plant sugarcane samples were conducted. The first trial evaluated the nutritive value of IAC 86-2480 variety (second growth) in response to two harvesting methods: manual (MAN) and mechanical (MEC) along of crop growing phase: 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 and 360 days after harvesting (DAH). The SC estimative, chemical composition (DM, CP, NDF, ADF, IVDDM and IVOMD) and NDF/SC relationships were similar (P>0.05) across treatments, except for EtOH and NDF/EtOH relationship at stalk and NDF/POL (P<0.05) at whole plant being MAN and MEC of those cases, respectively more advantageous for each. The whole plant SC content reached represents closer to 80% of total content observed in the stalk fraction. Were identified three typical SC accumulation patterns: a) POL and EtOH, b) BRIX, c) NFC. Until 240 (MAN) and 270 (MEC) DAH, the standardized NDF/BRIX and NDF/POL stalk relationships followed the same trend. NDF/SC relationships were highly correlated with forage digestibility, especially NDF/NFC (r > 0.8). Principal Component Analysis proved to be an useful tool to select variables in order to explain sugarcane feeding value. Therefore as described at the first principal component, the sugarcane feed value is in function of forage fibrous fraction (ex. NDF, ADF), corresponding to 54.4% (stalk) and 64.0% (whole plant) of total variance respectively. The second trial studied possible relationships established between both morphological as chemical plant measurements that could explain SC accumulation and feeding value of IAC 93- 3046 variety, under two levels of fertilisation at planting (NPK and NPK associated with cattle manure 120 kg N ha-1) along of ripening phase under plant crop conditions. Forage samples were collected manually at 300, 360, 420 and 540 days after planting (DAP). There was no effect (P>0.05) of fertilisation on SC dynamics, chemical composition and morphological crop variables, with the exception to dry leaves (DLEAF), water soluble carbohydrates (WSC) and minerals (ASH), in stalk fraction (P<0.05). The age of plant was the main factor responsible of the observed variability. Three SC patterns in sugarcane during this phase were identified: a) BRIX and EtOH, b) NFC e c) WSC. Although POL was not considered in this trial, the analysis of SC curves showed that BRIX and EtOH also reached to maturity in September conforming literature. Simple and multiple (stepwise) regressions were considered to predict SC, DM accumulation and feeding value (digestibility). The univariate models only considered chemical variables to prediction, except to BRIX. Stepwise equations have account also morphological crop variables to improve statistical prediction (R2, RMSE), being the most important: number of nodes (NN). Predictions of DM and WSC had the lowest power performed through simple and multiple equations. ADF fraction best fitted to feeding value prediction (IVDMD, IVOMD) in sugarcane samples.

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