Submitted by Kaio Cesar Chaboli Alevi null (kaiochaboli@hotmail.com) on 2017-10-25T20:00:43Z No. of bitstreams: 1 Tese - Kaio Cesar Chaboli Alevi.pdf: 6336538 bytes, checksum: 5a9d88497fb58e1707e975f604c42855 (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-31T17:15:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alevi_kcc_dr_sjrp.pdf: 6336538 bytes, checksum: 5a9d88497fb58e1707e975f604c42855 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-31T17:15:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alevi_kcc_dr_sjrp.pdf: 6336538 bytes, checksum: 5a9d88497fb58e1707e975f604c42855 (MD5) Previous issue date: 2017-10-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A taxonomia e a sistemática dos triatomíneos baseiam-se, principalmente, em caracteres morfológicos. No entanto, existem espécies muito semelhantes ou até mesmo idênticas (espécies crípticas) do ponto de vista morfológico. Dessa forma, novas abordagens são necessárias para caracterizar um táxon e análises citogenéticas têm se mostrado como importantes ferramentas para a caracterização taxonômica e o conhecimento evolução desses vetores. Assim, o presente trabalho teve como objetivos principais: caracterizar os subcomplexos Brasiliensis, Rubrovaria, Matogrossensis, Maculata e Rubrofasciata; auxiliar na revalidação de Triatoma bahiensis; avaliar o status específico de Rhodnius montenegrensis, Rhodnius sp. (afim de R. neglectus), T. pintodiasi, T. lenti e T. sherlocki; analisar a relação evolutiva da tribo Rhodniini; caracterizar o fenômeno de persistência nucleolar na subfamília Triatominae e analisar a variabilidade genética intraespecífica de T. sordida proveniente do Brasil. Os resultados obtidos permitiram caracterizar citogeneticamente as espécies do subcomplexo Brasiliensis; revalidar T. bahiensis e corroborar que essa espécie, bem como T. lenti e T. petrocchiae são membros do subcomplexo Brasiliensis; corroborar o status específico de T. lenti, T. sherlocki e T. bahiensis pela presença de barreira de isolamento reprodutivo pós-zigótica (desmoronamento do híbrido); sugerir que durante a muda imaginal, os triatomíneos cessam a meiose e estimulam a espermiogênese para diminuir os gastos energéticos e garantir a chance de paternidade; caracterizar citogeneticamente os subcomplexos Matogrossensis e Rubrovaria e distingui-los dos outros subcomplexos da América do Sul; reagrupar as espécies dos subcomplexos Matogrossensis, Sordida, Maculata e Rubrovaria, com base na disposição do DNAr 45S; propor a criação de um novo subcomplexo (subcomplexo T. vitticeps), com base em dados fenotípicos e genotípicos; caracterizar citogeneticamente o subcomplexo Maculata e diferenciar T. wygodzinskyi e T. arthurneivai; diferenciar T. rubrofasciata de todas as outras espécies de triatomíneos pela citotaxonomia e cariossistemática; corroborar, por meio da análise cariotípica e das espermátides, que a tribo Rhodniini é um grupo monofilético; caracterizar a evolução cromossômica no grupo pallescens e relacionar a perda de heterocromatina com a ocupação de diferentes ambientes; corroborar o status específico de R. montenegrensis (com base na posição do DNAr 45S) e de T. pintodiasi (com base no comportamento meiótico e na distância genética para o gene mitocondrial 16S); demonstrar que R. neglectus não apresenta variação cromossômica intraespecífica e descrever uma nova espécies do gênero Rhodnius, a saber, R. taquarussuensis sp. n.; discorrer sobre a evolução cariotípica nas tribos Rhodniini, Triatomini e Cavernicolini; confirmar o fenômeno de persistência nucleolar como uma sinapomorfia de Triatominae e, por fim, demonstrar que T. sordida do Brasil não apresenta variação cromossômica intraespecífica e corroborar o status desses vetores como T. sordida sensu strito. Esses resultados mostraram-se de extrema importância para elucidar várias questões sobre a biologia, taxonomia e evolução dos triatomíneos. / The taxonomy and systematics of triatomines are mainly based on morphological characters. However, there are very similar or even identical species (cryptic species) from the morphological point of view. Thus, new approaches are necessary to characterize a taxon and cytogenetic analyzes have been shown as important tools for the taxonomic characterization and the evolutionary knowledge of these vectors. Thus, the main objectives of this study were: characterize the Brasiliensis, Rubrovaria, Matogrossensis, Maculata and Rubrofasciata subcomplexes; assist in the revalidation of Triatoma bahiensis; evaluate the specific status of Rhodnius montenegrensis, Rhodnius sp., T. pintodiasi, T. lenti and T. sherlocki; analyze the evolutionary relationship of the Rhodniini tribe; characterize the nucleolar persistence phenomenon in the Triatominae subfamily and analyze the intraspecific genetic variability of T. sordida from Brazil. The results obtained allowed characterize cytogenetically the species of the Brasiliensis subcomplex; revalidate T. bahiensis and corroborate that this species, as well as T. lenti and T. petrocchiae are members of the Brasiliensis subcomplex; corroborate the specific status of T. lenti, T. sherlocki and T. bahiensis by the presence of a post-zygotic reproductive isolation barrier (collapse of the hybrid); suggest that during the imaginal molt, cell division is disrupted (reduce energy costs) and the differentiation into sperm is stimulated (ensure the paternity of the adult male); characterize cytogenetically the Matogrossensis and Rubrovaria subcomplexes and distinguish them from other subcomplexes of South American; regroup the species of the Matogrossensis, Sordida, Maculata and Rubrovaria subcomplexes, based on the arrangement of the 45S rDNA; propose the creation of a new subcomplex (T. vitticeps subcomplex), based on phenotypic and genotypic data; characterized cytogenetically the Maculata subcomplex and differentiate the T. arthurneivai and T. wygodzinskyi; differentiate T. rubrofasciata from all other triatomine species by cytotaxonomy and karyosystematics; corroborate, by means of karyotypic and spermatids analysis, the monophyly of the Rhodniini tribe; characterize the chromosomal evolution in the pallescens group and relate the loss of heterochromatin with the occupation of different environments; corroborate the specific status of R. montenegrensis (based on the position of the 45 rDNA) and T. pintodiasi (based on meiotic behavior and genetic distance for the 16S mitochondrial gene); demonstrate that R. neglectus does not present intraspecific chromosomal variation and describe a new species of the genus Rhodnius, namely, R. taquarussuensis sp. n.; discuss karyotype evolution in the Rhodniini, Triatomini and Cavernicolini tribes; confirming the nucleolar persistence phenomenon as a Triatominae synapomorphy, and, finally, demonstrate that T. sordida from Brazil does not present intraspecific chromosome variation and corroborate the status of these vectors as T. sordida sensu strito. These results were extremely important to elucidate several questions about the biology, taxonomy and evolution of triatomines. / FAPESP: 2013/19764-0

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GeorgeHFS_DISSERT.pdf: 1763122 bytes, checksum: 18e2cb37f905538f998bc0737edfeb96 (MD5) Previous issue date: 2010-12-03 / Trypanosoma cruzi infection was evaluated in 390 resident individuals in different rural communities of Caic? municipality, State of Rio Grande do Norte (RN). Of 28 investigated communities the soroprevalence of T. cruzi infection was 2.8% in eight rural communities individuals. The epidemiological characteristics of seropositive shown that the age ranged from 22 to 64 years, being significantly raised from 31 years (90.9%). The female gender was predominant and low education degree. Those individuals reported that they never donated blood, but they had direct contact with triatomines bug. The isolation of the parasite was performed by blood culture and xenoculture methods to determine the genetic variability of the samples. Twenty seven T. cruzi isolates were analyzed by RAPD as genetic marker using three random primers (M13-40, gt11-F and L15996). The T. cruzi isolates showed 73.7% of shared bands considering the average obtained with the three primers, and were genetically well correlated. Using this marker it was possible to separate the populations of the parasite in three distinct groups. The first group composed by isolates obtained of triatomines and humans from four different districts (Caic?, Cara?bas, Serra Negra doNorte and Governador Dix-Sept Rosado); the second contained isolates obtained of triatomines of two different species (T. brasiliensis and P. lutzi) captured in Cara?bas and Serra Negra do Norte. The third grouped isolates obtained from humans of Angicos and Caic? municipalities. In different localities of distinct mesoregions, State of RN, a profile genetic well correlated was identified among all isolates and the presence of three distinct groups of the parasite circulating among vertebrate and invertebrate hosts / A infec??o pelo Trypanosoma cruzi foi avaliada em 390 indiv?duos residentes em diferentes comunidades rurais do munic?pio de Caic?, Estado do Rio Grande do Norte (RN). De 28 comunidades investigadas a soropreval?ncia da infec??o pelo T. cruzi foi 2,8% em indiv?duos de oito comunidades rurais. As caracter?sticas epidemiol?gicas dos indiv?duos com sorologia reativa demonstraram que, a idade variou de 22 a 64 anos, sendo significativamente mais elevada a partir de 31 anos (90,9%). O g?nero feminino foi predominante e baixo grau de escolaridade. Esses indiv?duos relataram que nunca doaram sangue, mas tiveram contato direto com triatom?neos. O isolamento do parasito foi realizado usando os m?todos de hemocultura e xenocultura para determinar ? variabilidade gen?tica das amostras. Em 27 isolados foi realizada a t?cnica de RAPD como marcador gen?tico usando tr?s iniciadores aleat?rios (M13-40, λgt11-F e L15996). Os isolados do T. cruzi se mostraram bem correlacionados, com 73,7% de bandas compartilhadas, quando a an?lise foi realizada considerando a m?dia obtida com os tr?s iniciadores. Com este marcador foi poss?vel separar as popula??es do parasito em tr?s grupos distintos. O primeiro grupo composto por isolados obtidos de triatom?neos e humanos procedentes de quatro munic?pios distintos (Caic?, Cara?bas, Serra Negra do Norte e Governador Dix-Sept Rosado); o segundo agrupou os demais isolados obtidos de triatom?neos de duas esp?cies diferentes (T. brasiliensis e P. lutzi) capturadas em Cara?bas e Serra Negra do Norte. O terceiro grupo reuniu as amostras isoladas apenas de seres humanos procedentes dos munic?pios de Angicos e Caic?. Em diferentes munic?pios de mesorregi?es distintas do Estado do RN foi identificado um perfil gen?tico bem correlacionado entre todos os isolados e a presen?a de tr?s grupos gen?ticos distintos do parasito, circulando entre hospedeiros vertebrados e invertebrados

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-06-05Bitstream added on 2014-06-13T20:59:18Z : No. of bitstreams: 1 melo_mff_me_arafcf.pdf: 1115008 bytes, checksum: 9a5a596fd14f6e615ac5cc20ccd8fe88 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A doença de Chagas representa um dos mais sérios problemas médico-sanitários da América Latina. Nos 21 países endêmicos, estima-se que 18 a 20 milhões de pessoas estejam infectadas e cem milhões estão sob risco. No Brasil apenas o benznidazol está disponível para o tratamento apresentando alta incidência de efeitos adversos e ineficácia na fase crônica da doença. O desenvolvimento de fármacos mais eficazes e com menor toxicidade contra a doença de Chagas é necessário, e para tal é importante o conhecimento dos alvos terapêuticos para o planejamento racional por novos compostos. Estudos demostraram que a tripanotiona redutase (TR) é a enzima chave do metabolismo anti-oxidativo do T. cruzi. Os nitrofuranos atuam como substratos da TR e são também efetivos inibidores enzimáticos da redução do tripanotiona dissulfeto. Entre os compostos nitrofurânicos, o nitrofural apresentou atividade contra T. cruzi, mas alta toxicidade por via oral e severos efeitos adversos. A latenciação de fármacos é um dos métodos de modificação molecular que tem como objetivo melhorar as características de fármacos protótipos. Sabendo disto, Chung (1996) sintetizou uma série de pró-fármacos recíprocos seletivos de nitrofural e primaquina, culminando na obtenção do derivado hidroximetilnitrofural (NFOH). Este se mostrou mais ativo de todos os derivados sintetizados, tanto em formas amastigotas quanto em tripomastigotas nos ensaios in vitro contra T. cruzi. Os compostos que possuem grupos nitro na sua molécula geralmente apresentam atividade mutagênica, estudos indicaram que a latenciação do nitrofural em NFOH foi capaz de diminuir a atividade mutagênica em aproximadamente 4 vezes. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi iniciar os estudos de toxicidade do derivado... . / The Chagas' disease represents one of the most serious sanitary medical problems of Latin America. In the 21 endemic countries, it is estimated that 18 to 20 million people are infected and 100 million are under risk. Only one drug is available in Brazilian market: benznidazole, which shows high side effects and is ineffective in the chronic phase of the disease. The development of more efficient drugs with lower toxicity against the Chagas disease is necessary and for it, it is important the knowledge of therapeutic targets for the design of new compounds. Studies showed that trypanothione reductase (TR) is a key enzyme of the antioxidant metabolism of T. cruzi. Nitrofurans act as substrates of TR and are also effective enzymatic inhibitors of the reduction of trypanothione disulfide. Among the nitrofurans conpounds, nitrofurazone presented activity against T cruzi, but showed high toxicity by oral route and severe side effects. Latentiation is one process of molecular modification, which has the purpose to improve pharmaceutical and physical-chemical properties and decrease drug toxicity. In this way, Chung (1996) has synthesized the prodrug hydroxymethylnitrofurazone (NFOH), showing high activity in amastigotes forms in vitro assay against T. cruzi. Nitrocompounds generally presents mutagenic activitys. Studies suggested that the latentiantion of nitrofurazone giving NFOH was able to reduce toxicity activity in four times. According to this, the purpose of this work was to accomplish toxicity studies of the derivative compound. The results obtained in the tests acute toxicity in mice and rate suggested a lower toxicity of NFOH, obtaining a median lethal dose in relation to NF...(Complete abstract, click electronic address below).

Orientador: Hugo Hyung Bok Yoo / Resumo: A Doença de Chagas é uma doença progressiva e incapacitante, principalmente quando a função cardiopulmonar é acometida. É possível também que, esta associação esteja relacionada com a fraqueza muscular respiratória devido ao processo incapacitante, mostra alguns sintomas como, cansaço aos esforços e fadiga, que pode exacerbar-se quando associada à Hipertensão Pulmonar, e como sintomas inicias apresenta uma importante dispneia e considerável limitação nas atividades de vida diária. O presente estudo teve como objetivo avaliar a musculatura respiratória, qualidade de vida, perfil de ansiedade e depressão em pacientes com forma crônica indeterminada de Doença de Chagas associada à Hipertensão Pulmonar. Foram avaliados 107 pacientes, separados em três grupos: G1(grupo controle, n=08), G2 (grupo chagásico, n=93) e G3 (grupo chagásico sugestivo de hipertensão pulmonar, n=06). Todos os indivíduos foram submetidos à avaliação clínica, da espirometria pré e pós-broncodilatador, distância percorrida no teste de caminhada de seis minutos, avaliação da musculatura respiratória através da mensuração da PImáx e PEmáx, avaliação do estado de saúde, por meio do Medical Outcomes Study 36 - item Short-Form Health Survey (SF - 36) e da Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão. Os pacientes avaliados tinham idade média de 55 ± 8,8 anos, sendo 58 do sexo masculino (54%), 23 % eram tabagistas, em relação à classe funcional, 53 indivíduos do G2 estavam na classe funcional I e 5... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chagas Disease is progressive and incapacitating, especially when cardiopulmonary function is affected. It may be related to respiratory muscular weakness due to an incapacitating process, causing such symptoms as: tiredness upon exertion and fatigue, which may be exacerbated when associated with Pulmonary Hypertension. The present study aimed to evaluate the respiratory musculature, quality of life, profile of anxiety and depression in patients with indeterminate chronic Chagas Disease associated with Pulmonary Hypertension. We evaluated 107 patients, separated into three groups: G1(control group, n=08), G2 (Chagastic group, n=93) and G3 (Chagastic group suggestive of Pulmonary Hypertension, n=06). All individuals were submitted to clinical evaluation, spirometry, six-minute walking test, evaluation of respiratory musculature by measurement of PImax and PEmax, evaluation health state and hospital scale of anxiety and depression. In the evaluation of PImax and PEmax, there was no statistically significant difference among the three groups studied. G3 differed statistically in the real distance covered in the six-minute walking test in relation to G1 and G2; and for the predicted distance, G1 (p<0.05) was statistically significant in relation to G3. The spirometric values, evaluation of the Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS) and the SF-36 questionnaire did not differ among the groups. Therefore, patients with the indeterminate chronic form of Chagas... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Aparecido Antonio Camacho / Banca: Raimundo Souza Lopes / Banca: Denise Saretta Schwartz / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Mary Marcondes / Resumo: O trabalho teve como objetivo descrever as características clínicas da infecção natural pelo T. cruzi em cães residentes em uma área rural do estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Foram utilizados métodos sorológicos convencionais e não convencionais em 75 cães residentes na área e avaliação cardiovascular e da bioquímica sérica em quatro animais confirmadamente chagásicos. Foram usados os testes de reação de imunofluorescência indireta (RIFI), ELISA com antígenos da forma epimastigota do T. cruzi (EAE ELISA) e ELISA com antígeno excretado e secretado da forma tripomastigota do T. cruzi (TESA-ELISA), que detectaram anticorpos em 45,33% (n=34), 24,0% (n=18) e 12,0% (n=09) dos cães, respectivamente. A real prevalência da infecção foi confirmada como 10,7% (n=08) pela técnica de immunoblotting com antígeno secretado e excretado da forma tripomastigota do T. cruzi (TESA-blot). O teste com melhor índice de concordância (Kappa; 0,93), sensibilidade (100%) e especificidade (98,5%) foi o TESA-ELISA, que quando associado à RIFI igualou-se aos dados obtidos com o TESA-blot (10,7%). Três dos quatro animais chagásicos apresentaram aumento da silhueta cardíaca direta, aumento da duração de onda P e do complexo QRS. Um cão apresentou bloqueio de ramo direto e outro, bloqueio atrioventricular de primeiro grau e parada sinusal. Notou-se, também, espessamento de parede livre de ventrículo esquerdo em diástole, redução da fração de encurtamento e inversão dos picos de velocidade das onda E e A, indicando disfunção sistólica e diastólica...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study was conduted to describe the clinical characteristics of the natural infection caused by the T. cruzi in dogs residing in a rural area of Mato Grosso do Sul, Brazil. Conventional and nonconventional diagnosis methods were used in 75 dogs living in this area for screening T. cruzi infection. Cardiovascular and biochemical serum were also performed in four confirmed positive dogs. The following tests were used: indirect immunofluorescence test (IFAT), enzyme-linked immunosorbent assay with T .cruzi. epimastigote antigens (EAE ELISA) and enzymelinked immunosorbent assay with T.cruzi excreted-secreted trypomastigote antigens (TESA-ELISA) with detected antibodies in 45,33% (n=34), 24,0% (n=18) and 12,0% (n=09) of the dogs, respectively. The real prevalence of the infection was confirmed as 10,7% (n=08) by immunoblotting test with T. cruzi excreted-secreted antigens (TESAblot). The test with the best concordance index (Kappa; 0,93), sensibility (100%) and specifity (98,5%) was the TESA-ELISA, which, when associated with IFAT had the same as results those obtained with the TESA-blot (10,7%). Three out of the four chagasic animals showed enlarged cardiac silhouette on x-ray and an increase of the P-wave duration and QRS complex in electrocardiogram. Two dogs presented conduction disturbances, right bundle block in one dog and the first-degree atrioventricular block and sinus arrest in another...(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor

Orientador: Chung Man Chin / Banca: Chung Man Chin / Banca: Regina Maria Barreto Cicarelli / Banca: Veni Maria Andres Felli / Banca: Adélia Emilia de Almeida / Banca: Carlota de Oliveira Rangel Yagui / Resumo: A doença de Chagas ou Tripanossomíase americana é ainda um dos maiores problemas endêmicos na América Latina desde sua descoberta 100 anos atrás. Em 2006, havia aproximadamente 7,6 milhões de casos de infecção por Trypanosoma cruzi nos 21 países latino americanos. Cerca de 90 milhões de pessoas estão sobre o risco de contrair a infecção. O número de mortes e novos casos atribuídos a essa doença são respectivamente 21.000 e 200.000 no ano de 2000. Dois fármacos são usados particularmente para tratar esta doença, nifurtimox e benznidazol que são ativos somente na fase aguda da doença. No Brasil, somente benznidazol é disponível no mercado, por causa da resistência do nifurtimox às cepas de T. cruzi. Ambos os fármacos causam efeitos adversos graves que incluem polineuropatia periférica, agranulocitose e trombocitopenia púrpura. Embora o papel exato do sistema imune na patogenia não é totalmente entendido, é aceito que o sistema imune tenha um papel importante na proteção da infecção parasitária. Antígenos produzidos por T. cruzi afetam a função celular e induzem uma resposta caótica no hospedeiro, como a transialidase (TS) que é essencial para sobrevivência do parasita. TS é uma enzima envolvida na invasão de células hospedeiras mamíferas, na proteção contra componentes do sistema complemento e induz apoptose severa nas células do sistema imune, e que a administração de anticorpos é capaz de neutralizar esta enzima. Outro antígeno, J-18, um derivado recombinante da glicoproteína gp82, é capaz de se ligar à mucosa gástrica e isto é crucial para o estabelecimento da infecção oral. Então, um anticorpo contra esta glicoproteína poderia ser útil para inibir a invasão na mucosa gástrica. Cruzipaína é outra enzima importante do T. cruzi e suas funções parecem ser participar da nutrição, mecanismos de defesa e replicação do parasita... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chagas disease or American trypanosomiasis is still one of the major endemic problems in Latin America since its discovery 100 years ago. In 2006, there were approximately 7.6 million cases of Trypanosoma cruzi infection in 21 Latin American countries. Around 90 million people are at risk of contracting the infection. The number of deaths and new cases attributed to this disease are respectively 21,000 and 200,000 in the year 2000. Two drugs are particularly used to treat this disease; nifurtimox and benznidazol are active only in its acute phase. In Brazil, just benznidazol is available in the market, because nifurtimox resistant to T. cruzi strains. Both drugs cause severe side-effects including peripheral sensitive polyneuropathy, agranulocytosis and thrombocytopenic purpura. Although the exact role of the host immune system in the pathogenesis is not still fully understood, it is accepted that the immune system plays an important role in protection from parasitic infection. Antigen derivatives from T. cruzi affect cellular function and induce chaotic immune system host response, like trans-sialidase (TS) being essential for the parasite survival. TS is an enzyme involved in the invasion of mammalian host cells, in the protection against components of complement system and induces severe apoptose in cells of the immune system, and that antibodies administration is able to neutralize this enzyme. Another antigen, J-18, a recombinant glyprotein gp82 derivative, is able to bind to gastric mucin and this is crucial for the establishment of T. cruzi infection by oral route. Then, an antibody against this glycoprotein could be useful to inhibit the gastric mucin invasion. Cruzain is another important enzyme of T. cruzi and its functions seem to participate in nutrition, defense host mechanisms and replication of intracellular parasite. While there are no strong inhibitors against TS... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Simone Baldini Lucheis / Resumo: A Leishmaniose Visceral e a Doença de Chagas são importantes zoonoses negligenciadas do ponto de vista de saúde pública. Animais domésticos, como o cão, e animais silvestres, como os gambás, fazem parte do ciclo destas zoonoses como fontes de infecção para os vetores. O estudo foi realizado em cinco municípios da Regional de Saúde de Três Lagoas, Mato Grosso do Sul, em 2013 e 2014, com objetivo de identificar a ocorrência da infecção natural por Leishmania spp e Trypanosoma cruzi em gambás (Didelphis albiventris) e cães domiciliados, descrever aspectos epidemiológicos dessas doenças na população canina e humana, seus vetores, e a distribuição espacial da Leishmaniose Visceral Canina usando técnicas do georrefenciamento. Amostras de sangue dos cães foram submetidas a análises sorológicas e moleculares, e a dos gambás somente as análises moleculares. Em relação à pesquisa de anticorpos contra a Leishmania spp., as provas sorológicas de 683 amostras dos cães, revelaram reagentes 320 amostras ao Dual Path Platform, 300 amostras ao Enzyme Linked Immunosorbent Assay e 116 a Reação de Imunofluorescência Indireta. Para Trypanosoma cruzi, pela Reação de Imunofluorescência Indireta, quatro amostras do município de Três Lagoas foram reagentes. Das 683 amostras de sangue total, dos cães submetidas à Reação em Cadeia pela Polimerase, todas foram negativas para Trypanosoma cruzi e obteve-se êxito na amplificação de Leishmania spp em 17 amostras. As 39 amostras de sangue total dos gambás fo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL ) and Chagas disease (CD ) are important neglected zoonoses in accordance with public health. Domestic animals such as dogs and wildlife such as possums , are part of these zoonoses cycles as reservoirs and sources of infection for vectors. The study was conducted in five Regional Health of the municipalities of Três Lagoas , Mato Grosso do Sul in 2013 and 2014 , in order to verify the occurrence of natural infection with Leishmania infantum and Trypanosoma cruzi in opossums (Didelphis albiventris) and the pet dogs, and describe the characteristics of diseases in human and canine population , vectors , and the spatial distribution of canine Visceral Leishmaniasis using techniques georrefenciamento. In dog´s blood there were performed serological analysis and molecular tests ande the samples of the opossums were performed molecular tests. Regarding the research for Leishmania antibodies the techniques serological to 683 dog samples, showed reagent 320 samples to Dual Path Platform, 300 samples to Enzyme Linked Immunosorbent Assay and 116 to Immunofluorescence Antibody Test. For Trypanosoma cruzi, the test Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) four samples of Três Lagoas municipality were reactive. Of the samples from dogs 683 submitted to the Polymerase Chain Reaction were all negative by Trypanosoma cruzi gave successful amplification Leishmania spp in 17 of them. The 39 samples of the opossums were all negative by PCR to Leishmania spp. and Trypa... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Chagas disease is one of the most serious parasitic diseases in Latin America, with social and economic impact that far outweigh the combined effects of other parasitic diseases such as malaria, leishmaniasis and schistosomiasis. Chagas´ disease has two well-defined phases: acute and chronic phase. The acute phase lasts approximately two to three months. After this phase, the individual enters an asymptomatic state, which characterizes the early chronic phase. In the chronic phase of the disease, the destruction of enteric nervous system (ENS) components leads to the development of megacolon. The megacolon is characterized by colon dilatation associated with an inflammatory infiltrate which is the main cause of enteric neurons destruction. These neurons, when suffer some aggression, may exhibit a regeneration process. Knowing the existence of various types of enteric neurons with different functions, this study aimed to evaluate the detailed regeneration process of ENS neuronal subclasses from chagasic patients with megacolon and non-infected individuals. For this, we used a marker of neuronal regeneration (GAP-43) associated with a pan-neuronal marker (Peripherin) and various neuropeptides markers (cChat, substance P, neuropeptide Y, VIP and NOS). Thus, to assess the ability of various subclasses of neuronal regeneration, we verified that the levels of regeneration cChat, substance P and neuropeptide Y are similar in Chagas´ patients and non-infected individuals. However, VIP and NOS neuronal regeneration levels are increased in chagasic patients when compared to non-infected individuals. We believe that the increase in regeneration rate of these neurons may be a consequence of the selective neuronal destruction, representing an attempt to replenish neuronal classes most affected. / A doença de Chagas é uma das doenças parasitárias mais graves da América Latina, com impacto social e econômico que muito superam os efeitos combinados de outras doenças parasitárias, como malária, leishmaniose e esquistossomose. A doença de Chagas apresenta duas fases bem definidas: a fase aguda e a fase crônica. A fase aguda tem duração de aproximadamente dois ou três meses. Após esta fase, o individuo entra em um estado assintomático, o que caracteriza o início da fase crônica. Na fase crônica da doença, a destruição de componentes do sistema nervoso entérico (SNE) leva ao desenvolvimento do megacólon. O megacólon é caracterizado pela dilatação do cólon associada a um infiltrado inflamatório que é a principal causa da destruição de neurônios entéricos. Estes neurônios, quando sofrem alguma agressão, podem apresentar um processo de regeneração. Sabendo da existência de vários tipos de neurônios entéricos com diferentes funções, este trabalho teve como objetivo a avaliação detalhada do processo de regeneração das subclasses neuronais do SNE de pacientes chagásicos portadores de megacólon e de indivíduos não infectados. Para isso, utilizamos um marcador de regeneração de neurônios e terminações nervosas (GAP-43) associado com um marcador pan-neuronal (Peripherina) e com marcadores de vários neuropeptídeos (cChat, substância P, neuropeptídeo Y, VIP e NOS). Desta forma, ao avaliar a capacidade de regeneração das várias subclasses neuronais, aferimos que os níveis de regeneração de cChat, substância P e neuropeptídeo Y são semelhantes em pacientes chagásicos e indivíduos não infectados. No entanto, a regeneração de neurônios positivos para VIP e NOS estão aumentados em pacientes chagásicos em comparação com indivíduos não infectados. Acreditamos que o aumento na taxa de regeneração desses neurônios seja consequência da destruição seletiva desses tipos neuronais, representando uma tentativa do organismo de repor classes neuronais mais lesadas. / Mestre em Ciências da Saúde

A doença de Chagas é uma doença tropical negligenciada de alta prioridade nos programas de pesquisa e desenvolvimento da Organização Mundial da Saúde (OMS). Endêmica em 21 países da América Latina, a doença tem recentemente se tornado uma preocupação de saúde em outras regiões do planeta, como a América do Norte, Europa, Oceania e Ásia. Causada pelo parasita Trypanosoma cruzi, a doença de Chagas atinge 8-10 milhões de pessoas, de acordo com estimativas da OMS. Os únicos dois medicamentos disponíveis para o tratamento da doença são ineficazes e causam graves efeitos adversos. Este panorama tem evidenciado a urgência por novos agentes terapêuticos. O objetivo desta dissertação de mestrado é o desenvolvimento de modelos de relações quantitativas entre a estrutura e atividade (QSAR, na sigla inglesa para quantitative structure-activity relationships) para uma série de derivados piridínicos inspirados em um composto líder com potente ação anti-T. cruzi. Os modelos de QSAR foram gerados com os métodos holograma QSAR (HQSAR, na sigla inglesa para hologram QSAR); análise comparativa dos campos moleculares (CoMFA, na sigla inglesa comparative molecular field analysis); e análise comparativa dos índices de similaridade estrutural (CoMSIA, na sigla inglesa para comparative molecular similarity indices analysis). Os modelos identificaram as principais características estruturais que determinam a potência biológica destes compostos. Além disso, os modelos possuem alta consistência estatística e elevada capacidade de predição para novas moléculas. Os resultados apresentados revelam a utilidade dos modelos de QSAR no planejamento de novos antichagásicos mais potentes dentro da diversidade química explorada. / Chagas disease is a neglected tropical disease of high priority for the World Health Organization (WHO) drug discovery and development programs. Endemic in 21 countries in Latin America, the disease has recently become a public health problem in other regions of the planet, such as North America, Europe, Oceania and Asia. Caused by the parasite Trypanosoma cruzi, Chagas disease affects 8-10 million people worldwide, according to WHO. The only two available drugs are ineffective and cause serious side effects. These drawbacks have demonstrated the urgency for novel therapeutic agents. The main goal of this masters dissertation is the development of quantitative structure-activity relationships models (QSAR) for a series of pyridine derivatives having prominent activity against T. cruzi. The compounds were inspired in the structure of a lead compound with potent anti-T. cruzi action. The QSAR models were created using the methods hologram QSAR (HQSAR); comparative molecular field analysis (CoMFA); and comparative molecular similarity indices analysis (CoMSIA). The resulting models have identified key molecular features that determine the biological potency of the compounds. Furthermore, these models possess high statistical consistency and distinct ability to predict the potency of new molecules. The results reported reveal the usefulness of the developed QSAR models in the design of new antichagasic agents within this structural diversity.

A doença de Chagas é uma das doenças tropicais negligenciadas prioritárias para a Organização Mundial da Saúde (OMS). Endêmica na América Latina, é considerada atualmente um problema de saúde mundial, afetando diversos países na América do Norte, Europa, Ásia e Oceania. Estima-se que 8-10 milhões de pessoas estejam infectadas com o protozoário Trypanosoma cruzi. O tratamento disponível é limitado a dois fármacos que apresentam baixa eficácia e sérios efeitos adversos, o que torna evidente a urgência por novas alternativas terapêuticas. Esta dissertação de mestrado tem como objetivo o desenvolvimento de estudos das relações quantitativas entre a estrutura e atividade (QSAR, na sigla inglesa para quantitative structure-activity relationships) para duas séries de derivados do fenarimol com atividade anti-T. cruzi. Os compostos selecionados possuem considerável potência in vitro contra o parasita, além de atividade in vivo em modelos experimentais da doença, o que caracteriza o seu potencial para estudos em química medicinal. Neste contexto, estratégias de planejamento de fármacos foram utilizadas para a geração de modelos de QSAR preditivos. Foram utilizados os métodos holograma QSAR (HQSAR, na sigla inglesa para hologram QSAR); análise comparativa dos campos moleculares (CoMFA, na sigla inglesa para comparative molecular field analysis); e análise comparativa dos índices de similaridade estrutural (CoMSIA, na sigla inglesa para comparative molecular similarity indices). Os modelos gerados possuem alta capacidade de correlação interna e de predição externa, indicando também um conjunto de características estruturais responsáveis pela atividade anti-T. cruzi. Os resultados apresentados neste trabalho são úteis no planejamento de novos derivados do fenarimol com propriedades antichagásicas. / Chagas\' disease is considered by the World Health Organization (WHO) as one of the top neglected tropical diseases. Endemic in Latin America, it is currently a global public health problem, affecting several countries in North America, Europe, Asia and Oceania. The disease, caused by the protozoan parasite Trypanosoma cruzi, affects around 8-10 million people worldwide. The available treatment is limited to two drugs that present low efficacy and severe side effects, highlighting the urgent need for new therapeutic options. This masters dissertation focuses on the development of quantitative structure-activity relationships (QSAR) models for two series of fenarimol derivatives with activity against T. cruzi. The selected compounds exhibit substantial in vitro potency against the parasite, as well as in vivo activity in experimental models of the disease, which point out their potential for further studies in medicinal chemistry. In this context, drug design strategies were applied for the generation of predictive QSAR models. The methods employed were hologram QSAR (HQSAR); comparative molecular field analysis (CoMFA); and comparative molecular similarity indices (CoMSIA). The models possess high internal and external consistency, also indicating a set of structural features related to their anti-T. cruzi activity. The results reported herein are useful for the design of new fenarimol derivatives as new antichagasic agents.