MIRANDA, Yokiny de Araújo Silva, também é conhecida em citações bibliográficas por: SILVA, Yokiny de Araújo. / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-30T19:13:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Yokiny de Araújo Silva Miranda.pdf: 6537960 bytes, checksum: aa49370a99c2f689a67fd4e42c5ede47 (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-07-30T19:31:18Z (GMT) / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-30T19:32:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Yokiny de Araújo Silva Miranda.pdf: 6537960 bytes, checksum: aa49370a99c2f689a67fd4e42c5ede47 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-31T22:14:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Yokiny de Araújo Silva Miranda.pdf: 6537960 bytes, checksum: aa49370a99c2f689a67fd4e42c5ede47 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-31T22:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Yokiny de Araújo Silva Miranda.pdf: 6537960 bytes, checksum: aa49370a99c2f689a67fd4e42c5ede47 (MD5) Previous issue date: 2017-06-08 / CAPES / O exercício intervalado de alta intensidade (EIAI) melhora de forma aguda a resposta vasodilatadora em obesos. Diferentes protocolos de exercício podem modificar o estresse de cisalhamento e resultar em efeitos distintos sobre o fluxo sanguíneo. Até o momento, nenhum estudo examinou a influência do tempo de recuperação do exercício intervalado de alta intensidade nas respostas vasodilatadora, inflamatória e afetiva em obesos. Doze indivíduos obesos, insuficientemente ativos, foram submetidos a três sessões experimentais com delineamento cruzado-randomizado: 1 sessão controle (repouso) e 2 sessões de EIAI com a mesma carga de trabalho (10 estímulos de 1 min a 92 VO2 máx), variando apenas no tempo de recuperação, sendo uma sessão de 1 min (EIAI 1) e outra com recuperação de 3 min (EIAI 3). As medições de fluxo sanguíneo muscular no antebraço (FSA) e condutância vascular (CV) foram realizadas através da técnica de pletismografia de oclusão venosa, a pressão arterial (PA) foi registrada de modo não invasivo, de forma automática, minuto a minuto, por meio de um equipamento oscilométrico DIXTAL, e a frequência cardíaca (FC) foi obtida pelo eletrocardiograma. Todas essas variáveis foram mensuradas antes e após 10, 30 e 60 min. Além disso, foram realizadas coletas sanguíneas antes e 1 h após cada sessão experimental para análise das citocinas inflamatórias. As respostas perceptivas (afeto e percepção subjetiva de esforço) foram coletadas após cada estímulo de alta intensidade. O FSA aumentou significativamente e de forma semelhante após ambas as sessões de exercício EIAI 1: Δ10 = +0,5 (-0,4 a 0,1); Δ30 = +0,9 (0,6 a 1,4); Δ60 = +0,7 (0,4 a 1); EIAI 3: Δ10 = +0,8 (0,6 a 1); Δ30 = +0,9 (0,6 a 1,1); Δ60 = +0,6 (0,3 a 0,8), a CV também aumentou significativamente EIAI 1: Δ10 = +0,8 (0,2 a 1,3); Δ30 = +1,1 (0,7 a 1,7); Δ60 = +0,7 (0,4 a 1); EIAI 3: Δ10 = +1 (0,8 a 1,3); Δ30 = +1,1 (0,8 a 1,3); Δ60 = +0,7 (0,5 a 0,9). A PAS não apresentou alterações significativas após as sessões EIAI 1: Δ10 = -0,1 (-4,7 a 4,4); Δ30 = +1,1 (-3,3 a 5,2); Δ60 = +1,9 (-4,6 a 8,4); EIAI 3: Δ10 = -4,2 (-9,4 a 0,6); Δ30 = -2,3 (-6,3 a 1,0); Δ60 = -4,5 (-10 a 1,1), diferentemente a PAD apresentou uma redução estatisticamente significativa EIAI 1: Δ10 = -3,8 (-7,3 a -0,2); Δ30 = -1,5 (-4,4 a 1,4); Δ60 = +0,9 (2,9 a 4,6); EIAI 3: Δ10=-3,5 (-6,9 a -0,3); Δ30 = -2,3 (-6,3 a 1); Δ60 = -2,3 (-6,8 a 1,8) e PAM também reduziu significativamente (EIAI 1: Δ10 = -2,3 (-6,2 a 1,3); Δ30 = -0,5 (-3,7 a 2,7); Δ60 = +1,5 (-3,1 a 6,1); EIAI 3: Δ10 = -3,7 (-7,2 a -0,7); Δ30 = -2,8 (-6,4 a 0,4);Δ60 = -3,1 (-6,9 a 0,6). Foram encontradas alterações significativas quando comparamos a resposta da FC após EIAI 1 com a sessão controle nos momentos após 10 min [Δ10 = +15 (7,9 a 22,3)] e 30 min [Δ30 = +10 (7,9 a 22,3)] o mesmo não aconteceu após 60 min [Δ60 = +3,9 (-2,7 a 10,7)] o EIAI 3 não apresentou alterações significativas [Δ10 = +5,3 (-3,7 a 13,6); Δ30 = +1,5 (-6 a 8,3); Δ60 = -8 (-23 a 3,7)]. As citocinas inflamatórias e as respostas perceptivas não apresentaram resultados estatisticamente significativos (p > 0,05). Contudo, a análise do effect size mostrou uma diferença moderada (d = 0.65) entre os protocolos para o afeto a favor da sessão EIAI 3. Os resultados sugerem que o EIAI, independentemente do tempo de recuperação, proporcionou uma melhoria na resposta vasodilatadora, a qual ocasionou uma redução na PAD e PAM em obesos; tais ajustes são importantes para reduzir o risco cardiovascular nessa população. / High intensity interval exercise (HIIE) improves acutely the vasodilatory response in obese patients. Different exercise protocols can modify shear stress and result in distinct effects on blood flow. Up to now, no study has examined the influence of recovery time of high intensity interval exercise on vasodilator, inflammatory and affective responses in obese subjects. Twelve non-active, obese individuals underwent three experimental sessions with a randomized crossover design: 1 control session (rest) and 2 HIIE sessions with the same workload (10 stimuli of 1 min at 92 VO2 max) and varying only as to the recovery time, one of them with a 1-min recovery (HIIE 1) and the other one with a 3-min recovery (HIIE 3). Measurements of forearm muscular blood flow (FBF) and vascular conductance (VC) were performed using the venous occlusion plethysmography technique, blood pressure (BP) was recorded noninvasively, automatically, minute by minute, with the aid of a DIXTAL oscillometric device, and the heart rate (HR) was obtained by the electrocardiogram. All these variables were measured before and after 10, 30 and 60 min. In addition, blood samples were collected before and 1 h after each experimental session for analysis of inflammatory cytokines. The perceptual responses (affection and subjective perception of effort) were collected after each high-intensity stimulus. FBF increased significantly and similarly after both exercise sessions HIIE 1: Δ10 = +0,5 (-0,4 a 0,1); Δ30 = +0,9 (0,6 a 1,4); Δ60 = +0,7 (0,4 a 1); EIAI 3: Δ10 = +0,8 (0,6 a 1); Δ30 = +0,9 (0,6 a 1,1); Δ60 = +0,6 (0,3 a 0,8), VC also increased significantly HIIE: Δ10 = +0,8 (0,2 a 1,3); Δ30 = +1,1 (0,7 a 1,7); Δ60 = +0,7 (0,4 a 1); EIAI 3: Δ10 = +1 (0,8 a 1,3); Δ30 = +1,1 (0,8 a 1,3); Δ60 = +0,7 (0,5 a 0,9). The SBP did not present significant alterations after the HIIE 1: Δ10 = -0,1 (-4,7 a 4,4); Δ30 = +1,1 (-3,3 a 5,2); Δ60 = +1,9 (-4,6 a 8,4); HIIE 3: Δ10 = -4,2 (-9,4 a 0,6); Δ30 = -2,3 (-6,3 a 1,0); Δ60 = -4,5 (-10 a 1,1), differently the DBP presented a statistically significant reduction HIIE 1: Δ10 = -3,8 (-7,3 a -0,2); Δ30 = -1,5 (-4,4 a 1,4); Δ60 = +0,9 (2,9 a 4,6); HIIE 3: Δ10= -3,5 (-6,9 a -0,3); Δ30 = -2,3 (-6,3 a 1); Δ60 = -2,3 (-6,8 a 1,8) and MBP also reduced significantly (HIIE 1: Δ10 = -2,3 (-6,2 a 1,3); Δ30 = -0,5 (-3,7 a 2,7); Δ60 = +1,5 (-3,1 a 6,1); HIIE 3: Δ10 = -3,7 (-7,2 a -0,7); Δ30 = -2,8 (-6,4 a 0,4);Δ60 = -3,1 (-6,9 a 0,6). Significant changes were found when we compared the HR response after HIIE 1 with the control session at moments after 10 min [Δ10 = +15 (7.9 to 22.3)] and 30 min [Δ30 = +10 (7.9 to 22.3)] did not occur after 60 min [Δ60 = +3.9 (-2.7 to 10.7)] HIIE 3 did not show significant changes [Δ10 = +5.3 (-3.7 to 13.6), Δ30 = +1.5 (-6 to 8.3) (P <0.05), but the effect size analysis showed a moderate difference (d = 0.65) between the protocols for affect in favor of the EIAI 3 session. The results suggest that HIIE, regardless of the recovery time, caused an improvement in the vasodilator response, which in turn resulted in a reduction in DBP and MBP in obese patients; such adjustments are important to reduce the cardiovascular risk in this population.

Orientadores: Ronei Luciano Mamoni, Maria Heloisa Souza Lima Blotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T10:37:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Longhi_LarissaNaraAlegrini_M.pdf: 6631958 bytes, checksum: 45b4fc2e64262b037302e0269ebd8f71 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Tradicionalmente o papel das células NK na resposta imunológica tem sido associado com a resistência à infecção viral e tumores, porém estudos recentes apontam para a participação destas células na resposta imunológica contra outras doenças infecciosas. O objetivo deste estudo foi avaliar a possível participação de células NK (CD56+CD3-) na resposta imunológica ao fungo Paracoccidioides brasiliensis. Foram utilizadas células CD56+ isoladas por meio imunomagnético provenientes de pacientes com paracoccidioidomicose e de indivíduos controle. As células CD56+ foram avaliadas quanto à capacidade citotóxica direta contra leveduras de P. brasiliensis (cepa virulenta - Pb18 e avirulenta - Pb265) e contra células-alvo (monócitos) infectadas com leveduras de ambas as cepas. Também foi avaliada a expressão dos constituintes dos grânulos citotóxicos (granzima A, B, perforina e granulisina), receptores de ativação (NKG2D) e de inibição (KIR2DL2/L3/S2 e KIR3DL1), marcadores de ativação (CD69 e CD25), assim como a produção de citocinas (IFN-g e TNF-a) por meio de PCR em tempo real e por citometria de fluxo. A participação da IL-15 na ativação das células NK foi avaliada pela adição da citocina recombinante em alguns experimentos. Para avaliar a participação dos grânulos na atividade citotóxica direta e contra células-alvo em alguns experimentos as células foram tratadas com inibidores específicos (SrCl, concanamicina A ou EGTA). Os resultados demonstraram que células de pacientes apresentam resposta citotóxica (direta e contra células-alvo) inferior àquela observada nos indivíduos controle. A citotoxicidade direta foi dependente de grânulos, mas independente de perforina, enquanto que a citotoxicidade contra células-alvo foi dependente de perforina. A expressão de granulisina (RNAm e proteína) foi maior nas células de indivíduos controle. Além disso, observamos que células CD56+ apresentam a capacidade de secretar essa proteína após o estímulo com leveduras de P. brasiliensis. Também observamos que as células CD56+ de doadores normais são ativadas (aumentam a expressão de CD69 e CD25) quando estimuladas com o fungo, enquanto as células NK de pacientes não mostraram esse aumento, a não ser quando estimuladas com IL-15. Estes resultados demonstraram que as células CD56+ podem participar ativamente da resposta imunológica contra o P. brasiliensis, podendo contribuir tanto para a morte direta do fungo como de células infectadas, e que a granulisina pode desempenhar um papel preponderante no controle da infecção pelo P. brasiliensis. Outro fato importante observado foi que as células CD56+ quando estimuladas por células leveduriformes de P. brasiliensis produzem e secretam IFN-g, uma citocina com atuação importante na ativação de outras células do sistema imunológico como macrófagos e linfócitos, e dessa forma pode contribuir para o desenvolvimento da resposta imunológica adquirida subseqüente à infecção. / Abstract: Besides their role in viral infection and tumor resistance, recent studies have showed that NK cells also participate in the immune response against other infectious diseases. The aim of this study was to evaluate the possible role for NK cells (CD56+) in the immune response against the fungi Paracoccidioides brasiliensis. CD56+ cells from patients with paracoccidioidomycosis and healthy individuals were isolated by immmunomagnetic columms and antibodies. We evaluated the capacity of the direct killing of P. brasiliensis yeast cells (Pb18 virulent strain and Pb285 avirulent strain), as well as, the ability to kill infected target cells (monocytes infected with either virulent or avirulent strains). The CD56+ cells also were assessed in order to evaluate the expression of citotoxic granules (granzyme A, B, perforin and granulysin) and the expression of the activation receptor NKG2D, the inhibition receptors KIR2DL2/L3/S2 and KIR3DL1 and the activation molecules CD69 and CD25. We also determine the capability of production and release of cytokines (IFN-g and TNF-a) using Real Time PCR, flow cytometry and ELISA. The role of IL-15 was analyzed by the addition of recombinant cytokine in some experiments. To determine if the cytotoxic activity was dependent of granules, cell cultures were supplemented with specific inhibitors which prevent granule release. The results showed that cells from patients present a lower citotoxic response when compared to healthy individuals. The direct citotoxicity seems to be granule-dependent but independent on perforin, whereas the citotoxicity against target cells showed to be perforin dependent. It was observed an augmented expression of granulysin (mRNA and protein) in cells from controls, and that CD56+ cells are able to produce and release granulysin after stimulation with P. brasiliensis yeast cells. Furthermore, the analyses of CD56+ cells from controls showed elevated expression of CD25 and CD69 after the stimulus with yeast cells, while cells from patients are only activated in the presence of IL-15. These results demonstrated that CD56+ cells can participate actively of the immune response against the P. brasiliensis infection either by destroying directly yeast cells or by the recognition and killing of infected cells. Granulysin is the possible mediator of the cytotoxic effect observed in this study, once this protein is produced and released by CD56+ cells. Another important data is the finding that CD56+ cells are able to produce IFN-g after the stimulus, which could influence the subsequent acquired immunological response by stimulating others cells as macrophages and lymphocytes. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:18:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bittencourt_DanielGuimaraes_D.pdf: 5225734 bytes, checksum: ea3f70896c1c0f195c224d7e3f6d2bcc (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Introdução: Gastrosquise é o defeito congênito de fechamento da parede abdominal, com herniação das alças intestinais. O contato prolongado do intestino com o líquido amniótico promove alterações inflamatórias, acarretando imaturidade e dismotilidade intestinal; além do retardo de crescimento intra-uterino. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração materna de corticosteróide sobre o processo inflamatório intestinal de fetos de ratos com gastrosquise, através da análise morfológica, histológica e bioquímica. Materiais e Métodos: Utitízou-se o modelo experimental para a criação de gastrosquise em fetos de ratas Spreague-Dowley aos 18,5 dias de gestação (termo da gestação = 22 dias). Dois grupos de fetos foram estudados: com e sem administração materna de dexametasona. Cada grupo foi composto por fetos submetidos a gastrosquise e seus respectivos controles. Morfometria: Avaliou-se o peso fetal (PC), peso (PI) e comprimento intestinal (Cl). Histologia: Mediu-se o diâmetro das alças intestinais (DI), espessura da mucosa e submucosa (MU), das camadas musculares longitudinal (ML) e circular (MC) e serosa (SE). Bioquímica: Incluiu dosagens intestinais de proteína e das citocinas: interleucina (IL)-l, IL-6, IL-10, fator de necrose tumoral-alfa e interferon-gama. As diferenças entre os Grupos e subgrupos foram testadas pelo método ANOVA, com valores significativos de p<0,05. Resultados: Morfometria: Fetos com gastrosquise têm PC e Cl reduzidos e PI elevado (p<0.005). No grupo onde houve administração de dexametasona observou-se redução significativa (p<0.005) do PC e PI. Histologia: Fetos com gastrosquise apresentaram DI aumentado em ambos os grupos (P<0.0001). As quatro camadas da parede intestinal: MU, ML, MC e SE apresentaram-se mais espessas nos fetos com gastrosquise. Bioquímica: As dosagens de proteína intestinal estavam reduzidas nos fetos com gastrosquise. A administração de dexametasona elevou o conteúdo de proteína intestinal. As dosagens de citocinas intestinais não mostraram diferenças significativas entre fetos do mesmo grupo, tampouco em relação à administração de corticosteróide. Conclusões: Fetos de rato submetidos à gastrosquise experimental apresentaram PC reduzido, que foi acentuado pela administração de dexametasona. O PI elevado e Cl reduzido dos fetos com gastrosquise podem refletir o intenso processo inflamatório intestinal intra-uterino, sendo que a administração de dexametasona foi capaz de reduzir o PI. A histologia demonstrou que o aumento do PI nos fetos com gastrosquise foi relacionado ao aumento da espessura de todas as camadas da parede intestinal. As dosagens de proteína intestinal, reduzidas nos fetos com gastrosquise, podem sugerir uma baixa taxa de proliferação celular. A administração de dexametasona reduziu o déficit de proteína intestinal. Não houve um padrão distinto de ativação de citocinas intestinais para os fetos com gastrosquise / Abstract: Background: Gastroschisis is the congenital anomaly of the abdominal wall closure. The eviscerated bowel is exposed to the amniotic fluid, which leads to an intestinal inflammatory reaction. The goal in the treatment of gastroschisis is to prevent intestinal injury, as well as the motility, absorptive and infectious complications. Purpose: The author evaluated the effects of maternal corticosteroid administration on the intestines of rats submitted to fetal gastroschisis, through morphometrical, histological and biochemical analysis. Methods: A fetal gastroschisis rat model was used. Pregnant rats were submitted to surgery on day 18.5 of pregnancy (term = 22 days). Two groups were assessed: with and without maternal dexamethasone adnmristration. Each group was composed by gastroschisis, control and sham fetuses. Morphometry: Fetal body weight, intestinal weight and intestinal length were assessed. Histology: Analysis involved measures of intestinal loop diameter, total intestinal wall, mucosal and submucosal, both circular and longitudinal muscles layers and serosal thickness. Biochemics: The intestinal cytokine profile: EL-1, IL-6, IL-10, tumor necrosis factor, gamma- interferon and protein content were assessed. Differences between groups and subgroups were tested by the ANOVA method with a significant p value <0.05. Results: Dexamethasone promoted a decrease in all the morphometric data, except in the intestinal length. There was a decreased intestinal protein content in gastroschisis fetuses. Dexamethasone increased the intestinal protein content in gastroschisis, control and sham fetuses. In both groups, all histological parameters were increased in gastroschisis fetuses (p<0.0001). It could not be identified a particular profile of cytokine for gastroschisis fetuses. Conclusions: Rat fetuses submitted to experimental gastroschisis had decreased body weight and increased intestinal weight. Histological analysis demonstrated that the increased intestinal weight was related to an increased thickness of all intestinal wall layers in gastroschisis fetuses. Dexamethasone triggered a substantial decrease in intestinal weight, and increased the intestinal protein content in gastroschisis fetuses. It may be useful in managing the intestinal damage in gastroschisis / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia

Orientadores: Jacks Jorge Junior, Maria Elvira Pizzigatti Correa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T19:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kellermann_MicheleGassen_D.pdf: 1376117 bytes, checksum: 09db31adee16534a2115ee880eb7d6c4 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A mucosite oral é uma complicação comum do transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH) e está associada à citotoxicidade das drogas utilizadas durante o regime de condicionamento. Os efeitos debilitantes da mucosite podem causar aumento da morbidade, aumento do risco de infecções sistêmicas e queda de qualidade de vida dos pacientes durante o período imediato pós-condicionamento. Os mecanismos envolvidos na fisiopatologia da mucosite oral são complexos e ainda não foram completamente elucidados. É conhecido o papel da IL-1, IL-6 e do TNF na etiopatogenia da mucosite, como parte do grupo de agentes desencadeadores do processo inflamatório, iniciado pela liberação de radicais livres originados a partir da citotoxicidade das drogas quimioterápicas utilizadas nos esquemas de condicionamento. Variações genotípicas, como polimorfismos, podem contribuir na suscetibilidade individual aos efeitos secundários do tratamento antineoplásico. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar retrospectivamente a influência dos polimorfismos IL1B-511C/T, IL1B+3953C/T, IL1RN VNTR íntron 2, TNF-308G/A e IL6-174G/C na mucosite oral, situação final e sobrevida pós-TCTH. A análise dos polimorfismos foi realizada através de reações de PCR utilizando DNA genômico obtido de amostras de sangue periférico de 55 pacientes submetidos ao transplante de células-tronco hematopoéticas alogênico e autólogo. Os resultados demonstraram correlação entre o polimorfismo no gene IL1B+3953C/T e a gravidade da mucosite oral. Os pacientes que expressaram os genótipos IL1B+3953TT e IL1B+3953CT, desenvolveram mucosite oral grave. Ao avaliar apenas os pacientes submetidos ao TCTH alogênico, essa relação foi mantida, contudo, não foi estatisticamente significante. Os resultados também revelaram que pacientes com mucosite oral grave apresentavam menor sobrevida pós-transplante e maior mortalidade em relação aos pacientes com mucosite leve a moderada. Adicionalmente, os resultados deste estudo demonstraram que a presença dos genótipos IL1B+3953TT e IL1B+3953CT, associados com mucosite oral grave também estavam relacionados com maior mortalidade e menor sobrevida global pós-TCTH. Concluindo, os resultados deste trabalho demonstraram a correlação do polimorfismo no gene IL1B+3953C/T com a gravidade da mucosite oral, situação final e sobrevida pós-TCTH / Abstract: Mucositis is a frequent complication of high-dose chemoradiotherapy regimens commonly used as conditioning therapy before hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). The debilitanting effects of mucositis can result in impair quality of life and increase the risk of sepsis in patients submitted to HSCT. The mechanisms involved in the pathobiology of oral mucositis are complex and has not been fully elucidated. Its well known the role of IL-1, IL-6 and TNF in pathogenesis of mucositis, as part of the group of agents triggering the inflammatory process, initiated by free radicals arising from the toxicity of chemotherapy drugs used in conditioning regimens. Genotypic variations, such as polymorphisms, can contribute to individual susceptibility to side effects of anticancer treatment. Thus, the goal of this study was to evaluate retrospectively the influence of polymorphisms IL1B-511C/T, IL1B+3953C/T, IL1RN VNTR, TNF- 308G/A e IL6-174G/C in oral mucositis and survival post-HSCT. The analysis of polymorphisms was performed by PCR reactions using genomic DNA extracted from peripheral blood samples from 55 patients undergoing autologous and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. The results showed a significant correlation between IL1B+3953C/T polymorphism and severity of oral mucositis. Patients who expressed the genotypes IL1B+3953TT and IL1B+3853CT, developed severe oral mucositis. When only the patients undergoing allogeneic HSCT were evaluated, this relationship was maintained, although not statistically significant. The results also reveled that patients with severe oral mucositis had a lower overall survival after transplantation and increased mortality compared to patients with mild to moderate mucositis. This study showed an association between IL1B+3953TT and IL1B+3953CT genotypes and higher mortality and lower overall survival after HSCT. In conclusion, our results demonstrated the correlation of IL1B+3953C/T polymorphism with oral mucositis severity and survival after HSCT / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T13:52:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paim_BrunoAlves_D.pdf: 3170914 bytes, checksum: d4f5cbbb9bfc262aef0879eaf9d377d6 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Neste trabalho, o estresse oxidativo em mitocôndrias isoladas de fígados de camundongos knockout para o receptor de LDL (LDLr-/-) foi caracterizado por apresentar um menor conteúdo de isocitrato mitocondrial, uma reduçãoda razão GSH/GSSG e um maior conteúdo de proteínas oxidadas quando comparados a camundongos controles. A maior produção de EROs pelas mitocôndrias de camundongos LDLr-/- foi prevenida quando as mesmas foram incubadas na presença de isocitrato exógeno, o qual é capaz de manter NADPH completamente reduzido. Resultados semelhantes foram obtidos quando os animais foram tratados com solução de citrato solução de citrato de sódio 55 mM/ ácido cítrico 67 mM durante duas semanas, onde houve uma redução na produção de EROs pelas mitocôndrias isoladas de fígado assim como uma recuperação parcial no consumo de oxigênio mantido por substratos endógenos bem como no perfil de oxidação dos nucleotídeos de piridina. Os linfócitos de camundongos LDLr-/- também apresentaram elevação na produção de EROs, celular e mitocondrial bem como uma elevação nos níveis de Ca2+, citosólico e mitocondrial, quando comparados a camundongos controles. Uma vez que [Ca2+] intracelular tem demonstrado participar na modulação da resposta Th1 e Th2 e no processo de ativação linfocitária, decidimos estudar algumas citocinas em camundongos LDLr-/-. As citocinas Th1 (IL-2 e TNF- a) e Th2 (IL-4 e IL-10) se mostraram elevadas quando comparadas a camundongos controles. A elevação das citocinas Th1 e Th2, a geração de EROs e as elevações das concentrações de Ca2+ foram parcialmente inibidas após tratamento dos camundongos com verapamil, um antagonista de canal de cálcio tipo L. Os resultados nos levam a concluir que o estresse oxidativo observado em mitocôndrias isoladas de fígados de camundongos LDLr-/- ocorre em resposta a uma redução no conteúdo de substratos endógenos redutores de NADPH e que pode, ao menos em parte, ser corrigido após suplementação oral com solução de citrato. Além do mais, foi demonstrado que o Ca2+, em linfócitos isolados de baços de camundongos LDLr-/-, possui papel fundamental modulando a geração de EROs e a produção de citocinas. Estas alterações são provavelmente relacionadas com o processo de ativação linfocitária, em razão das lesões ateroscleróticas observadas no arco aórtico dos camundongos LDLr-/-, formadas espontaneamente / Abstract: In this work, oxidative stress in liver mitochondria isolated from LDLr-/- mice was further characterized by showing a lower mitochondrial isocitrate content, lower matochondrial GSH/GSSG ratio and a higher liver content of protein carbonyls as compared to control mice. The higher rate of ROS production in LDLr -/- mitochondria was also prevented by the presence of exogenous isocitrate which maintains NADP+ fully reduced. Similar results were obtained when the annimals were treated with drinking water containing 55 mM sodium citrate/67 mM citric acid during two weeks, when was observed lower levels of ROS production, an improve in the rate of oxygen consumption supported by NADP-linked substrates as well as a higher capacity to sustain reduced NAD(P)H in liver mitochondria. The spleen lymphocytes isolated from k/o mice also showed higher ROS generation by lymphocyte mitochondria and whole cell, and higher levels of cytosolic and mitochondrial Ca2+ compared to control mice. As intracellular Ca2+ has been shown to affect Th1 and Th2 priming and lymphocyte activation we evaluated some cytokines in LDL receptor k/o mice compared to controls. Th1 cytokines (interleukin-2 and TNF-a), as well as Th2 cytokines (interleukin-10 and interleukin-4) were higher in k/o mice than in control. The increase of Th1 and Th2 cytokines, ROS generation, and Ca2+ concentration were partially inhibited by treatment of the k/o mice with verapamil, an L-type Ca2+ channel antagonist. In conclusion, the data demonstrate that the liver mitochondrial oxidative stress in hypercholesterolemic LDL receptor knockout mice is the result of a low content of mitochondrial NADPH-linked substrates in the intact animal that can be, at least in part, replenished by oral administration of citrate. Also, we demonstrate that Ca2+ presents a central role in spleen mononuclear cell from hypercholesterolemic LDL receptor knockout mice modulating ROS generation and cytokines production. These alterations are probably related to lymphocyte activation due the expontaneous atherosclerotic lesion observed in aortic arch of k/o mice / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

O extrato de Ascaris suum (Asc total), preparado a partir de uma mistura de vermes machos e fêmeas (albergando ovos), suprime a resposta imune específica a ovalbumina (OA). A partir do fracionamento deste extrato por gel filtração demonstrou-se que componentes protéicos de alto peso molecular (PM), eluídos no primeiro pico (PI), eram supressores da resposta a OA e os eluídos no terceiro pico (PIII) estimularam uma resposta maior de anticorpos IgE anti-Asc. Uma resposta do tipo Th2 foi preferencialmente estimulada por este extrato, sendo as citocinas IL-4 e IL-10 atuantes na supressão dos parâmetros da resposta anti-OA mediados por células Th1. Em algumas espécies de helmintos a resposta Th2 é estimulada de forma estágio-específica. Assim, analisamos neste trabalho quais dos componentes do Asc total seriam responsáveis pelo efeito supressor. Verificamos que os extratos dos vermes adultos apresentaram perfis cromatográficos semelhantes ao do extrato total. O perfil cromatográfico do Asc O foi distinto, com um segundo pico (PII) mais evidente e apresentou um quarto pico de menor PM. O fracionamento eletroforético confirmou uma concentração de proteínas com PM entre 107 e 52 kDa e a presença de proteínas adicionais entre 27,2 e 19 kDa neste extrato. Os extratos de vermes e dos ovos suprimiram a resposta imune celular específica a OA, avaliada por reações de hipersensibilidade tardia, resposta proliferativa de células de linfonodos drenantes e secreção de citocinas por estas células. A produção de anticorpos IgG1 e IgG2a anti-OA foi também diminuída acentuadamente pelos mesmos extratos. Observamos, ainda, que as citocinas predominantes na resposta aos extratos dos vermes e dos ovos foram diferentes, com maior secreção de IL-4 e IL-10 nos primeiros e IFN-g no segundo. Com relação às diferentes frações do Asc O, a produção de anticorpos IgE anti-OA foi suprimida por componentes de PI e PIII, enquanto que os de PII estimularam a síntese maior de IgE anti-Asc O. Os componentes de PIV não tiveram nenhum efeito. Nossos resultados indicam que o efeito supressivo do Asc total é uma propriedade que pode ser atribuída aos vermes machos e fêmeas. No entanto, o extrato preparado a partir dos ovos também apresenta este efeito, o qual parece ser mediado por mecanismos diferentes. / The extract of Ascaris suum (whole Asc), prepared from male and female worms (with stored eggs) suppress the specific immune response to ovalbumin (OA). This extract was fractionated by gel filtration and high and low molecular weight (MW) proteins were obtained in the first (PI) and third peak (PIII), respectively. PI suppressed the OA-specific cellular and humoral responses and PIII stimulated more anti-Asc IgE antibodies. The whole Asc stimulated a Th2 response predominantly, with high levels of IL-4 and IL-10. These cytokines had an important role in the down-regulation of the Th1 response to OA. In some helminthic infections the Th2 response is stimulated by specific stages of the life cycle. Thus, in this work we investigated which components of whole Asc were responsible for immunosuppression. The worm extracts presented similar chromatographic profiles. The profile of Asc O was distinct, with the second peak being more evident and showing a fourth peak with much lower MW components. By polyacrylamide gel electrophoresis we observed a high concentration of proteins between 107 and 52 kDa. In addition, some bands between 27,2 and 19 kDa were only present in this extract. The extracts from worms and eggs suppressed the cell-mediated immune response to OA, measured by delayed-type hypersensitivity, proliferative response of draining lymph node cells and cytokine secretion. The anti-OA IgG1 and IgG2a antibody production were as drastically reduced by these extracts. The cytokines IL-4 and IL-10 were mainly secreted in response to worm extracts, whereas the egg extract stimulated more IFN-g. Regarding the different fraction of Asc O, PI and PIII components diminished the anti-OA IgE antibody production, whereas PII components stimulated higher anti-Asc O IgE synthesis. PIV components did not display any effect. Our results indicate that the immunosuppressive effect of whole Asc is due to male and female body components. However, extracts prepared from eggs do also display this effect, that seems to be mediated by different mechanisms.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8706_1.pdf: 1817930 bytes, checksum: f2ac6cbb0fce841bf670e49e6225a371 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Objetivo: Revisar a literatura científica acerca do papel do interferon gama (IFN-y) na doença atópica, especificamente asma. Métodos: Pesquisados dados do Medline e Lilacs nos últimos 10 anos. Resultados: Vários autores discutem a importância da relação entre a secreção de IFN-y e o componente atópico per se, por outro lado é questionado se esta citocina tem relação direta com a doença asmática, independente do estado atópico. Foi verificada a existência de várias pesquisas relacionando asma e IFN-y; entretanto, os resultados destas pesquisas se apresentam controversos. Conclusão: Ainda não se chegou a uma conclusão definitiva do verdadeiro mecanismo de atuação desempenhado pelo IFN-y na doença asmática, é indiscutível a importância de novas pesquisas esclarecedoras sobre este assunto

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T21:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gontijo_BrunaAguiar_M.pdf: 901672 bytes, checksum: 6bc049b20d4924d05f816322f4e366f8 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A Leptina é um hormônio produzido principalmente pelo tecido adiposo, estudos sugerem sua relação com o aumento do processo inflamatório observado no diabetes mellitus tipo 1 (DM-1) em camundongos NOD (diabético não obeso), modelo experimental desta doença. Neste estudo, analisou-se o efeito da leptina sobre a viabilidade das células em cultura e na expressão de citocinas pro-inflamatórias (TNFa, IFN?, IL1ß, IL-12 e IL-2) por RT-PCR. Além disso, analisou-se a resposta induzida pela leptina em cultura de células esplênicas, após o estímulo in vivo com adjuvante Completo de Freund (CFA). Os resultados sugerem que a leptina modula a expressão de citocinas pro-inflamatórias, sendo esta modulação específica para cada citocina estudada, sem relação dose dependência, mas de acordo com a resposta imunológica desencadeada pelo efeito do CFA em camundongos NOD e Balb-C / Abstract: Leptin is a hormone produced mainly by the adipocites, studies suggest that can be related with the inflammatory process in type 1 Diabetes (IDDM) observed in NOD mice (diabetic non-obese), a classic experimental model of autoimmune diabetes. In this study, we analyze the leptin effect on cell culture viability and pro-inflammatory cytokines expression in NOD and BALB-C mice spleen cells. The spleen cells were cultivated 24, 48 and 72 hours with different leptin concentrations and the pro-inflammatory cytokines expression (TNFa, IFN?, IL1ß, IL-2, IL-12) were addressed by RT-PCR. Furthermore, we studied the leptin-induced spleen cell response in culture, after in vivo Complete Freund Adjuvant (CFA) stimulation. Our results suggest that leptin can modulates the proinflammatory cytokines expression without relation to dependent on the dose but in accordance with the status of immune response promoted by CFA effect in Balb-C and NOD mice / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Joni Augusto Cirelli / Resumo: As cisteíno-peptidases e as citocinas desempenham um papel importante no inicio e progressão dos processos imuno-inflamatórios, dentre estes, a doença periodontal. As fitocistatinas são cistatinas derivadas das plantas, inibidoras naturais das cisteíno- peptidases. Entre elas a Citrus CPI-2, derivada da laranja e a Cane CPI-4, derivada da cana-de-açúcar tem sido recentemente investigadas. O estudo das mesmas pode levar a novas terapias para o controle da doença periodontal, bem como outras doenças imuno- inflamatórias. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito inibitório das fitocistatinas (Cane CPI-4 e Citrus CPI-2) sobre mediadores da inflamação. Em estudo in vitro, foi avaliado o efeito da atividade inibitória das fitocistatinas sobre a expressão gênica (RT-PCR em tempo real) das catepsinas B e K e citocinas pró-inflamatórias (IL- 1β, IL-6 e TNF-α) em células de linhagem macrofágica de camundongos (RAW 264.7), após 12 e 24h de estímulo com Porphyromonas gingivalis inativada por calor. Em estudo in vivo, foi avaliada a ação de diferentes concentrações das fitocistatinas sobre a produção de TNF- a por células sanguíneas de ratos submetidos à injeção de LPS de E.coli . Todos os animais foram submetidos à implementação de cânulas na veia femoral para à injeção de LPS de E.coli e na artéria femoral para a extração de sangue em 6 diferentes tempos (de 30 a 180 minutos) após o estimulo com LPS de E.coli (IV, 100 Ug/Kg). A quan... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cysteine proteinases and the cytokines play an important role in the initiation and progression of immune-inflammatory processes such as periodontal disease. The phytocystatins are cystatins derived from plants and they are natural inhibitors of cysteine proteinases. Among them, the Citrus CPI-2 derived from orange and Cane CPI- 4 derived from sugar cane have been investigated. The study of them may lead to new therapies for the control of periodontal disease and other immune inflammatory diseases. The overall objective of this study was to evaluate the effect of phytocystatins CaneCPI- 4 and CitrusCPI-2 on mediators of inflammation. The aim of the in vitro study was to assess the inhibitory activity of phytocystatins on gene expression (RT-PCR) of cathepsins B and K and pro-inflammatory cytokines (IL- 1β and IL-6 and TNF-α) in murine macrophage cells (RAW 264.7) after 12 and 24 hours of stimulation with heatinactivated bacteria Porphyromonas gingivalis. The aim of the in vivo study was to assess the inhibitory activity of both phytocystatins in the production of TNF-α by blood cells of rats submitted by an injection of lipopolysaccharide (LPS) of E.coli. All animals were subjected to the implementation of cannulas to femoral artery and vein for blood collection at 6 different time points (from 30 to 180 minutes) after LPS stimulus (IV, 100 ug/kg). Quantification of TNF-α was performed by ELISA. According to the results of the in vitro study, Citrus CPI-2 showed a signifi... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8941_1.pdf: 2187591 bytes, checksum: 68e5147d4e8f8ccd762bb4c00dcf703d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Introdução: As citocinas desempenham um papel vital na regulação do sistema imunológico participando da patogênese de várias doenças auto-imunes, incluindo a síndrome de Sjögren. O objetivo deste estudo foi investigar a influência dos polimorfismos genéticos da interleucina-6, interleucina-10, fator de necrose tumoral alfa e interferon-gama na artrite reumatóide (AR), síndrome de Sjögren secundária (SSs) à artrite reumatóide e controles saudáveis (C). Materiais e métodos: Uma amostra de 138 pacientes foi dividida em três grupos, RA (n=66), SSs (n=20) e C (n=52). Os pacientes foram submetidos a avaliação clínica mediante aplicação do teste de Schirmer, teste de fluxo salivar em repouso, biópsia de glândulas salivares menores e testes sorológicos para diagnóstico da SS e evolução da AR. Amostras de células da mucosa oral foram coletadas e o DNA isolado foi submetido a genotipagem mediante as técnicas de Restriction Fragment Length (IL-6, IL-10 e TNF-a) e PCR alelo-específica (IFN-y). Esses dados foram analisados e comparados com o polimorfismo de cada citocina. Resultados: Não houve diferenças significativas nos genótipos e freqüências alélicas das citocinas entre SSs e AR. As freqüências dos polimorfismos de IL-6-174GC e TNF-a -308GA em pacientes com artrite reumatóide (AR + SSs), foram significativamente diferentes dos pacientes controles. Os portadores do alelo G (IL-6) e A (TNF-a) foram significativamente associados com maior suscetibilidade à artrite reumatóide, mas não à SSs. O polimorfismo de IL-6 foi associado com a infiltração linfocitária em glândulas salivares menores, teste de Schirmer e com anti-CCP positivos. O polimorfismo de TNF-a foi igualmente associado à positividade de anti-CCP, anti-SSA e proteína C reativa. Conclusão: Estes resultados sugerem que os polimorfismos genéticos de IL-6 -174GC e TNF-a -308GA parecem estar associados com a susceptibilidade à AR, mas não à SSs. Ainda, o polimorfismo de IL-6 parece influenciar de alguma forma a presença de infiltrado inflamatório em glândulas salivares e lacrimais