Orientadores: Sophie Françoise Mauricette Derchain, Luiz Carlos Zeferino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T02:58:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_ElianeReginaZambelliMesquitade_D.pdf: 6493304 bytes, checksum: a5f29a6631b19fe71c5a0f57f35863e5 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivos:Avaliar a detecção de Papilomavírus humano (HPV) de alto risco oncogênico pelo teste de Captura Híbrida 11(CH 11)em mulheres com resultado da colpocitologia oncológica sugestiva de atipias de células glandulares (ACG). Sujeitos e métodos: Estes três trabalhos foram realizados através de um estudo de corte transversal com mulheres encaminhadas com ACG ou Adenocarcinoma in situ (AIS) no exame de rastreamento de câncer cervical. Para o terceiro objetivo, estas mulheres foram comparadas com um grupo de pacientes atendidas por lesões escamosas de alto grau (HSIL). O estudo foi realizado no Ambulatório de Patologia Cervical e no Laboratório de Citologia do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM) da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) no período de Novembro de 2001 a Março de 2004. As mulheres foram submetidas à coleta de amostra cervical para citologia convencional e teste de CH 11para detecção do DNA-HPV de alto risco oncogênico, e avaliação colposcópica. Todas mulheres com anormalidades citológicas persistentes ou alterações colposcópicas foram submetidas à biópsia cervical colpodirigida, conização com alça ou a frio. Resultados: No primeiro artigo, foram incluídas 91 mulheres encaminhadas por citologia com ACG, sendo que o resultado da segunda citologia foi normal em 28 casos (31%), com ACG em 17 casos (19%) e 24 casos com HSIL ou lesões mais graves (26%). O teste de CH 2 foi positivo em 36% dos casos, sendo o DNA-HPV detectado em 87% das mulheres com HSIL, em 100% das mulheres com AIS, 24% das mulheres com ACG e em apenas 11% das mulheressem anormalidades citológicas. No segundo artigo, foram avaliadas 146 mulheres encaminhadas por citologia com ACG, ACG associadas a HSIL e AIS, e a prevalência total de DNAHPV de alto risco oncogênico foi de 38%. O DNA-HPVfoi detectado em 93% das mulheres com ACG associado a HSIL e em 71% daquelas citologias com AIS. Já, as mulheres com ACG puras tiveram uma prevalência de 29% na detecção do DNA-HPV. Quarenta e cinco mulheres (30,8%) tinham NIC 2 ou lesões mais graves. O DNA-HPVde alto risco foi detectado em apenas 16% das mulheres que não apresentaram lesões histológicas, em contraste com 96% das mulheres com NIC 2 ou NIC 3 e 75% das mulheres com AIS. As mulheres com carcinoma cervical invasivo, escamoso ou glandular, apresentaram DNA-HPV de alto risco detectável em 85% dos casos. A detecção do DNA-HPV esteve significativamente associada com o diagnóstico histológico de NIC 2 ou lesões mais graves. No terceiro artigo, foram avaliadas 247 mulheres que apresentavam na análise histológica 38 (15%) cervicites, 194 (75%) lesões escamosas e 15 (9%) de neoplasia glandular.Apenas 30% das pacientes com ACG e HPV negativo tiveram alguma lesão glandular ou escamosa em comparação com 76% das mulheres com ACG e HPV positivo. Nas mulheres com ACG e HSIL, a maioria das lesões histológicas, NIC 2 ou mais graves, foi associada ao teste de HPV positivo. A maioria das lesões (95%) encontradas nas pacientes com ACG e HSIL foi de natureza escamosa, e a CH II não contribuiu para a diferenciação de lesões glandulares. Conclusões: A segunda citologia associada ao teste para detecção do DNA-HPV de alto risco oncogênico pode melhorara conduta nas mulheres com ACG detectado na citologia de rastreamento. A detecção do DNA-HPV esteve fortemente associada com a gravidade da lesão histológica cervical nas mulheres com citologia com ACG ou AIS. O teste de HPV pôde auxiliar na identificação de lesões significativas escamosas ou glandulares, porém não foi capaz de discriminar as lesões glandulares das escamosas / Abstract: Objectives: Detection of high-risk human papillomavirus(HPV) DNA by hybrid capture 2 (HC 2) in women referred due to atypical glandular cells (AGC) in the primary screening. Subjects and Methods: A cross-sectional study was conduded on women referred due to AGC or adenocarcinoma in situ (AIS) in the primary screening. These women were compared with a group that had high-grade squamous intraepitheliallesion (HSIL). The study was conduded at the Cervical Patology Ambulatory and Cytology Laboratory of the Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher at the Universidade Estadual de Campinas from November 2001 to March 2004. Cervical sample had been colleded for conventional cytology and HPV testing by HC II. The colposcopy had been performed and all women with persistent cytology abnonnalities or colposcopy abnormalities were submitted a cervical biopsy or conization.Results: In 91 women induded in the first paper, a second Pap smear was taken and HPV-DNA test was performed using HC II. The second Pap smear showed no abnormalities in 28 (31%) cases, ACG in 17 (19%) cases and HSIL or worse in 24 (26%). HC II test was positive in 36% of the altogether cases. Considering the second Pap smear diagnosis, HPV-DNA was deteded in 87% of the women with HSIL, 100% of women with AIS, 24% of women with AGC and only in 11% of the women with no abnormalities. In the second paper, the overall prevalence of HPV-DNA was 38%. HPV-DNA was detected in 93% ofthe women with HSIL associated with AGC and in 71% of women with AIS at Pap smear, being significantly higher when compared with the prevalence (29%) in women with AGC alone. Forty-five women (30.8%) had dinically significant histologicallesions (CIN 2 or worse). High-risk HPV-DNA was detected in only 16% of the women without significant abnormalities in biopsy, in contrast to 96% ofthose who had CIN 2 or CIN 3 and 75% of women with AIS. Women with invasive carcinoma (squamous cells or adenocarcinoma) had over 75% of HPVDNA positivity. The last paper histological analysis disdosed 38 (15%) cervicitis, 194 (75%) squamous lesions and 15 (9%) glandular neoplasia. Only 30% of AGC-HPV negative patients have a pathologically proven cervical lesion, whereas 76% of women with AGC-HPV positive have been diagnosed with some squamous or glandular lesion. In women with AGC-HSIL, the proportion with significant histological lesion was higher when HPV test was positive. Most (95%) of the lesions in patients with AGC-HSIL were of squamous nature, and HPV do not contribute its differentiation trom glandular. Conclusion: The use of the second Pap smear combined with HPV-DNA may improve the management of women with AGC detected in the primary screening. HPV-DNA detection was significantly associated with the severity of cervicallesion (CIN 2 or worst) in women referred for AGC or AIS in their Pap smear. HPV test should help to identify significant squamous or glandular lesion among women referred due to glandular or squamous abnormalitiesat Pap smear, however the test are unable to discriminate glandular from squamous lesion / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Tocoginecologia

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Sophie Françoise Mauricette Derchain / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T06:31:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_SilviaHelenaRabelodos_D.pdf: 2847930 bytes, checksum: ef79106a00058e70bc6551562ff48111 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivo: Analisar a associação do tipo de HPV e das variantes dos HPV 16 e 18 com lesão neoplásica do colo uterino em mulheres cujo exame citológico apresenta anormalidades em células glandulares endocervicais. Métodos: Este estudo de corte transversal analítico incluiu 160 mulheres com citologia cervical de rastreamento, sendo 93 mulheres com células glandulares atípicas sem outras especificações (AGC-SOE), 18 com células glandulares atípicas provavelmente neoplásicas (AGC-NEO), 35 com por AGC associado a lesões intra-epitelias escamosas de alto grau (HSIL) e 14 com adenocarcinoma in situ (AIS). No primeiro atendimento foi colhido material cervicovaginal para pesquisa de DNA de HPV, segundo esfregaço cervical, e foi realizada colposcopia em todas as mulheres. Biópsias e/ou conizações foram realizadas em 129 pacientes. Trinta e uma mulheres encaminhadas por diagnóstico citológico de AGC-SOE com colposcopia normal e segunda citologia com resultado negativo foram seguidas a cada quatro meses com exames citológicos e colposcópicos. Todas as mulheres incluídas foram submetidas a ecografia pélvica. A pesquisa de DNA-HPV foi feita por PCR, utilizando os primers PGMY09 e PGMY11, e a genotipagem foi realizada através de hibridização reversa em pontos. A determinação das variantes de HPV 16 e HPV 18 foi realizada através de sequenciamento. Resultados: Dos 129 casos com avaliação histológica, 75 (58%%) mostraram diagnósticos neoplásicos (intra-epiteliais e invasivos). A maioria dos diagnósticos neoplásicos foi categorizada como de origem escamosa (77%). A prevalência total de HPV foi de 43%. O HPV 16 foi o mais prevalente e esteve significantemente associado a neoplasias escamosas (NIC 2 ou lesão mais grave) e neoplasias glandulares (AIS ou lesão mais grave). O HPV 18 foi o segundo tipo mais prevalente e esteve significativamente associado a neoplasias glandulares. Maior diversidade na distribuição dos tipos foi observada nos diagnósticos histológicos de NIC 2 e NIC 3. As neoplasias glandulares foram exclusivamente relacionadas aos tipos 16 e 18. O estudo de variantes incluiu 24 casos HPV 16 positivos e 6 casos HPV 18 positivos. Variantes Européias e Não Européias (Ásia-Americanas) foram detectadas, respectivamente, em 62% e 38% dos casos HPV 16 positivos. Variantes Européias de HPV 18 também foram mais prevalentes (3/6). Neoplasias glandulares foram mais prevalentes e significativamente associadas a Variantes Ásia-Americas de HPV 16. Variantes Européias de HPV 16 foram mais prevalentes em neoplasias escamosas. Neoplasias glandulares também foram associadas aos HPV 18, mas a análise de suas variantes não foi conclusiva, devido ao pequeno número de casos. Conclusão: Os HPV estão associados ao tipo histológico de neoplasia cervical detectada em mulheres com anormalidades em células glandulares endocervicais, contudo a identificação dos tipos não é suficiente para explicar o padrão histológico, uma vez que o HPV 16 pode estar associado com neoplasias escamosas e glandulares. A associação do HPV 16 com neoplasias escamosas e glandulares é explicada por suas variantes. Variantes Ásia-Americanas associam-se às neoplasias glandulares, enquanto variantes européias associam-se às neoplasias escamosas / Abstract: Objective: To analyze the association between the different genotypes of oncogenic human papillomavirus (HPV) and HPV 16 and HPV 18 variants with histological diagnosis in women referred for glandular endocervical abnormalities in their cervical smear. Methods: This cross sectional study included a series of 160 women. Atypical Glandular Cells (AGC) not otherwise specification (NOS), AGC favor neoplastic (FN) were the only diagnosis in 93 and 18 women respectively. Thirty five patients had both AGC and high grade squamous intraepithelial lesion (HSIL). Fourteen women were diagnosed as adenocarcinoma in situ (AIS). All women were subjected a collection of sample for HPV-DNA testing and second cervical smear and underwent a colposcopic examination. Biopsies or conizations were done in 129 due to colposcopically abnormal area or second abnormal cervical smear result. In 31 women, referred due to AGC-NOS at screening cervical smear with adequate and normal colposcopy and second cervical smear results, follow up each 4 months with new cytology and colposcopy were done and the final diagnosis was considered as non-neoplastic. All women had pelvic ultrasound examination. The HPV-DNA testing was done by PCR using the set of PGMY09 e PGMY11 with genotyping by linear array hybridization. The molecular variants of HPV 16 and 18 were tested using PCR sequencing. Results: Among 129 women with histologic evaluation, 75 (58%) revealed neoplastic diagnoses (intraepithelial and invasive); of them the majority (77%) were of squamous cell origin. The overall prevalence of HPV was 43%. HPV 16 was the most prevalent genotype and was significantly associated with squamous neoplasias (CIN 2 or worse) and glandular neoplasias (AIS or worse). HPV 18 was the second most prevalent and was significantly associated with glandular neoplasias. Major diversity on HPV distribution was observed in Cervical Intraepithelial Neoplasia (CIN) 2 and CIN 3 histologic diagnosis. The variants study included 24 cases HPV 16 positives and 6 cases HPV 18 positives. European Variants and Asian-American Variants were detected in 62% and 38% of HPV positives cases. European variants of HPV 18 also were more prevalent (3/6). Asian-American HPV 16 variants were significantly associated with glandular neoplasia and European variants were more prevalent in squamous neoplasias. Glandular neoplasias also were associated with HPV18 but in this study the analysis of its variants was not conclusive. Conclusion: The HPV genotypes are associated with histological type of the cervical neoplasia, but HPV genotypes is not enough to explain at whole, since the HPV 16 were associated with squamous and glandular neoplasia. The association of HPV 16 with squamous or glandular neoplasia is explained by its variants. Squamous neoplasias were nearly related to HPV 16 European variants and glandular neoplasias were related to HPV 16 Asian-American / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Tocoginecologia

Orientador: Miriam Ap. da Silva Trevisan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T23:45:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cia_ErniMariaMancini_M.pdf: 3667953 bytes, checksum: aa3cf2b084d2b5c513b0f4039558bd10 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A técnica AgNOR pode ser de ajuda para solucionar o problema do diagnóstico diferencial citológico de tumores uroteliais de bexiga, especialmente nos de baixo grau de malignidade versus células uroteliais reacionais, por ser considerada como marcadora de proliferação celular e/ou de malignidade, conforme a literatura especializada tem demonstrado nos diferentes tecidos. Aplicando-se a técnica AgNOR, o objetivo principal foi correlacionar as análises quantitativa (contagem) e qualitativa (morfológica) dos pontos nucleares prata-positivos em células uroteliais de casos controles e neoplásicos, de baixo e alto grau de malignidade. Este estudo compreendeu setenta (70) exames cito lógicos pareados com seus respectivos histopatológicos de carcinomas uroteliais primários vesicais (n=44) e de controles (n=26). As avaliações citológicas foram realizadas em lâminas de sedimento urinário, previamente coradas pela hematoxilina-eosina, descoradas, impregnadas pela prata coloidal, através da técnica AgNOR (PLOTON et aI., 1986) e analisadas com microscopia óptica comum, em objetiva de 40x. Na citologia, os casos positivos para células neoplásicas foram classificados conforme a graduação citológica de KOSS (1992) em: tumores de baixo grau de malignidade (n=19), correspondendo aos graus 1 e 1-2 da classificação histológica de KOSS e tumores de alto grau (n=25), correspondendo aos graus 2, 2-3, e 3. Houve significância estatística entre as diferenças das médias de pontos contados nos casos de neoplasia e nos controles (p<0,001- teste de Mann- Withney) e entre os três grupos juntos (p<0,001- teste de Kruskal-Wallis). Na interseção das curvas da distribuição dos pontos AgNORs, no grupo controle no tumoral (valores logaritmados), determinamos o valor crítico de corte de 2,96 pontos AgNORs. A especificidade da técnica é 96,29%, a sensibilidade é 97,77%, e a acurácia, 97,22%. Pela morfologia das AgNORs há diferença significante entre os casos tumorais e os controles (p<0,001) e entre os de alto e baixo grau de malignidade (p=0,001), aplicando-se dois (2) testes de Fisher. Além disso, a análise discriminatória, pelo método de Jackknive, classifica corretamente 84% dos casos com as variáveis independentes: número médio de AgNORs, o diferencial da variação máxima e mínima de AgNORs para cada caso e o padrão morfológico (homogêneo e heterogêneo). As variáveis dependentes foram: ausência de neoplasia, neoplasia de baixo grau e neoplasia de alto grau. Concluímos, portanto, que a técnica AgNOR, em citologia oncótica urinária, é auxiliar no diagnóstico diferencial das lesões ~esicais, usando-se os critérios quantitativo e qualitativo / Abstract: The oncocytic urinary cytology is a reliable toeI in diagnosis and folow-up of bladder tumor treatment as well as in the research of more agressive forms of bladder cancer. According to the literature it is of great value especially in patients who continue shedding identifiable cancer cells in urinary material after treatment. They are at very high risk for development of invasive bladder cancer (Koss, 1992). AgNOR technique may be helpful for the cytological differential diagnosis of bladder urothelial tumors, especially between those with low malignancy degree and the reactive urothelial cells. This study consisted of paired cytohistological examinations of patients with (n=44) and without (n=26) primary vesical urotelial carcinoma. Evaluations were performed with urinary sediment slides, previously stained by hematoxylin-eosin, unstained, impregnated by colloidal silver (AgNOR technique) and analyzed under common optic microscope (40 x). Control (non neoplastic) and neoplastic cases with low and high malignancy degree were investigated. Our principal aim was to correlate quantitative (counting) and morphological qualitative (subjective) analyses of silver-positive nuclear dots in both cases. The averages of the counted dots showed a statistically significant difference in both cases (p<0, 001 Mann-Withney's test). The grafic of AgNORs distribution of the neoplastic cases is similar to a logarithmic curve (normal log). The critical cut-off value of 2,96 AgNORs dots was determined in the intersection of the distribution curves of AgNOR dots in contrQI, and tumoral groups. There was 2,9% of falses negatives cases below this value and 2,9% of falses positives above it. AgNOR morphology was classified into homogeneous and' heterogeneous pattern. Control group presented the former in all cases. In the neoplastic group with low malignancy degree, 15/19 cases had the homogeneus pattern and in those with high degree, 15/25 had the heterogeneous pattern. According to AgNOR morphology, there are significant differences between tumoral and' control cases (p<0,001) and between those with low and high malignancy degree (p=0,001-Fisher's tests).Thus, AgNOR technique can be useful to aid in the differential diagnosis in oncotic urinary cytology by using qualitative and quantitative criteria / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Simões, José Antonio, Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T14:34:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lessard_TriciaAlbuquerqueRocha_M.pdf: 479763 bytes, checksum: 603ad88ed5dd9e2fd143cdb633df0f9c (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Objetivo: Estudar as alterações citológicas e a flora vaginal nos esfregaços cérvico-vaginais de usuárias de sistema intra-uterino liberador de levonorgestrel (SIU-LNG), por um período de até sete anos. Métodos: O estudo foi realizado no Ambulatório de Planejamento Familiar da Universidade Estadual de Campinas, onde 187 mulheres tiveram o SIU-LNG inserido entre abril e setembro de 1998, ininterruptamente por sete anos consecutivos. Todas as mulheres incluídas faziam parte de um outro estudo para avaliar a eficácia do DIU por esse período de tempo e assinaram um termo de consentimento pós-informado. A cada consulta ginecológica, foram colhidos esfregaços endocervicais e ectocervicais, que foram enviados ao Laboratório de Citopatologia e classificados segundo Bethesda 2001. Todas as mulheres incluídas na análise tinham citologia oncológica prévia negativa denominada citologia oncológica (CO) zero e pelo menos uma citologia pós-inserção. Foram designadas CO1 as citologias colhidas entre seis meses e um ano pós-inserção, CO2 aquelas colhidas entre um ano a dois anos pós-inserção e assim, sucessivamente, até CO7 para as citologias com mais de seis anos pós-inserção. Para a avaliação microbiológica deste estudo, todas as lâminas foram revisadas utilizando como critério diagnóstico a classificação de Bethesda 2001, exceto para a avaliação de vaginose bacteriana que foi considerada a presença de 20% ou mais de clue cells no Papanicolaou. Nos casos inconclusivos, os esfregaços foram enviados para uma médica citopatologista designar o diagnóstico final. A incidência das alterações citológicas e a flora vaginal ao longo dos sete anos de uso do SIU-LNG, foram analisadas através do teste de tendência Cochran-Armitage. Resultados: Durante os sete anos de seguimento do SIU-LNG, houve maior freqüência de infecção por cândida sp nestas usuárias. Não foram encontradas diferenças significativas em relação a qualquer outra alteração microbiológica ao longo dos sete anos de uso. Em relação à presença de alterações citológicas, não foram encontrados resultados estatisticamente significativos, apesar de ter sido observado um aumento na frequência de alterações citológicas no sexto ano de uso do SIU-LNG. Conclusão: O uso prolongado do SIU-LNG esteve associado a uma maior frequência de cândida sp. Entretanto, há a necessidade de se considerar que as queixas clínicas de cândida sp vaginal não foram referidas pelas usuárias, mas sim observadas em seus esfregaços cérvico-vaginais. Em relação a patologia cervical o SIU-LNG mostrou-se seguro, pois não se observou, no Papanicolaou, desenvolvimento de lesões intra-epiteliais de alto grau ou neoplasia cervical ao longo dos sete anos de uso / Abstract: Objective: To evaluate the cytophatological abnormalities and vaginal flora in cervical smears samples women using the Levonorgestrel-releasing intrauterine system (LNG-SIU) for a period of up to seven years. Methods: The study was carried out at the Family Planning Out-patient of the Universidade Estadual de Campinas where 187 women who had an LNG-IUS inserted between April and September of 1998, without exchange. At each gynecological consultation the endocervical and ectocervical samples was collected for smears and sent to the Cytophatology Laboratory where they were stained according to the Papanicolaou technique. Cytopathological evaluation was carried out using 2001 Bethesda System classification. All 187 subjects had normal Pap-smears preinsertion that was nominated Pap-smear (C.O.) zero and, at least, one postinsertion Pap-smear. The postinsertion Pap-smear collected between six months to one year was defined CO1; another one collected between one to two years was defined CO2 and thus, successively, until CO7 for postinsertion Pap-smears collected with more than six years. For this study, all the slides were submitted to a second analysis by a cytologist who considered the presence of 20% or more clue cells as the diagnostic criteria for bacterial vaginosis (BV). In the cases in witch this evaluation did not agree with the initial diagnosis, either with respect to microbiological flora or to cytopathological abnormalities, the smears were then examined by another cytopathologist, who gave the final diagnosis of the smear. The frequency of the cytophatological abnormalities and vaginal flora versus long term use of LNG-SIU was analyzed using Cochrane-Armitage trend test. Results: The cytopathological abnormalities found over the 7 years of follow-up showed no variation in the incidence of any cytopathological lesion or of low-grade or high-grade squamous intraepithelial lesions. With respect a cervicovaginal infections the frequency over the 7 year follow-up period remained constant with respect to any kind of microbiological alteration for every year post-insertion. However, a significant increase incurred in the percentage of cases positive for cândida sp after 4 years of use, which reverted in the 7th year Conclusion: The results of this study have shown that the LNG-SIU may be associated, in some users and after long periods of use with a greater predisposition for cândida sp. Nevertheless, it should be taken into consideration that the clinical complaints of cândida sp were not reported by the users, but were observed in their cervicovaginal smears. These findings also confirm the safety of the LNG-IUS as a contraceptive method throughout 7 years of use, since, according to cervical smear test results, the device was not associated with any increase in intraepithelial lesions that could evolve to cervical cancer, no significant cytopathological alterations being detected over this long period of use / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Objetivo: Avaliar o perfil e conhecimento de cirurgiões-dentistas, da cidade de Anápolis (GO), sobre a técnica de citologia esfoliativa e a aplicabilidade do método no diagnóstico de várias patologias que acometem a cavidade bucal, além de divulgar a técnica. Método: Foram incluídos no estudo 240 cirurgiões-dentistas, com atuação profissional na cidade de Anápolis (GO), que responderam a um questionário auto-aplicável, com perguntas abertas e fechadas, previamente testado, contendo questões demográficas e relacionadas ao conhecimento e utilização da técnica de citologia esfoliativa. Após o preenchimento do questionário, foi entregue ao profissional um manual com informações sobre a técnica a fim de esclarecer quaisquer dúvidas sobre este importante exame complementar de diagnóstico. Em seguida os dados foram analisados estatisticamente (Qui-quadrado, Kruskal Wallis ao nível de 5%). Resultados e Conclusão: a) Cirurgiões-dentistas da cidade de Anápolis (GO) possuem conhecimento insuficiente sobre a técnica da citologia esfoliativa, mas reconhecem de maneira satisfatória as patologias em que a citologia pode ser aplicada; b) Indivíduos que realizam cirurgia e implantodontia relataram mais conhecimento de citologia que aqueles que realizam ortodontia; c) Indivíduos com cursos de atualização ou especialização relataram tanto conhecimento sobre citologia quanto aqueles sem pós-graduação, e mostraram menor conhecimento quanto ao fixador utilizado; d) Divulgação da técnica de citologia, assim como de métodos de prevenção e de diagnóstico precoce de doenças bucais, são necessários. / Objective: To evaluate the profile and knowledge that dentists in the city of Anápolis (GO), Brazil, have of exfoliative cytology and of the applicability of the method for the diagnosis of various diseases that affect the oral cavity, as well as to disseminate information regarding exfoliative cytology. Method: A total of 240 dentists who worked in Anápolis (GO), Brazil, were included in the present study. The dentists completed a previously tested self-administered questionnaire containing open and closed questions regarding demographic data, the knowledge of exfoliative cytology, and the knowledge of the use of this technique. After completing the questionnaire, the dentists received a manual containing information about exfoliative cytology in order to clarify doubts regarding this important complementary test. The data obtained were statistically analyzed by means of the chi-square or Kruskal Wallis test, at a significance level of 5%. Results and conclusion: a) Dentists in Anápolis (GO), Brazil, have little knowledge of exfoliative cytology. However, they can satisfactorily recognize the cases in which the technique can be used; b) Dentists who specialize in surgery and implants reported greater knowledge of the technique than did those who specialize in orthodontics; c) Dentists who had a specialist degree reported as much knowledge of the technique as did those who had only an undergraduate degree; in addition, the latter had greater knowledge of the fixing agent used; and d) Information regarding exfoliative cytology and the methods for the prevention or early diagnosis of oral diseases must be disseminated.

Estudou-se quantitativamente e qualitativamente a citologia, os teores de imunoglobulinas, e a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino contra a Escherichia coli enterotoxigênica (ECET), analisando-se a influência da opsonização prévia destas células. Para tal finalidade foram utilizadas 53 vacas da raça Holandesa, das quais realizou-se a colheita de um total 212 amostras de colostro obtidas antes da primeira e segunda ordenha. As amostras positivas (n=41) ao exame bacteriológico do leite foram excluídas desta pesquisa. Para a análise citológica quantitativa e qualitativa do colostro, foram utilizadas as técnicas de microscopia direta e citocentrifugação, respectivamente. As dosagens das imunoglobulinas (IgG, IgM e IgA) foram realizadas por meio da técnica de imunodifusão radial, utilizando-se Kits comerciais. Para a avaliação da atividade bactericida indireta dos fagócitos e verificação da influência da opsonização prévia da ECET, foram realizados os seguintes ensaios: utilizando somente suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares em meio de cultura (Grupo Controle - C); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET não opsonizada (Grupo NO); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET previamente opsonizada com 10% de sobrenadante de colostro bovino delipidado (Grupo O). A atividade bactericida indireta dos fagócitos foi mensurada por meio da quantidade de nmoles de peróxido de hidrogênio liberado por estas células, nos ensaios C, NO e O. Após as avaliações dos resultados das determinações realizadas, conclui-se que: (1) o colostro bovino de segunda ordenha apresenta maior quantidade de células/mL, que aquele de primeira ordenha; (2) a predominância celular demonstrada com o uso das técnicas de microscopia direta e de citocentrifugação foi de células mononucleares; (3) colostro bovino de segunda ordenha possui maior quantidade de neutrófilos polimorfonucleares, quando comparada àquela da primeira ordenha, utilizando as técnicas de microscópica direta e de citocentrifugação, para a contagem dos tipos leucocitários; (4) os tipos celulares predominantes no colostro bovino de primeira e segunda ordenha foram macrófagos/células epiteliais, seguidos por linfócitos, neutrófilos e eosinófilos, respectivamente, utilizando a técnica de citocentrifugação para diferenciação celular; (5) o colostro bovino de primeira ordenha possui maiores teores de imunoglobulinas das classes G e M, que o da segunda ordenha, havendo predomínio da IgG, sobre a IgM e IgA independente da ordem de ordenha. (6) os fagócitos do colostro bovino de primeira ordenha apresentaram maior atividade celular avaliada pela liberação de peróxido de hidrogênio, que os da segunda ordenha; (7) a estimulação antigênica com ECET não foi suficiente para aumentar a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino; (8) a opsonização da ECET com soro colostral não determinou diferenças significativas na atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino, mensurada pela quantidade de peróxido de hidrogênio liberado por estas células; (9) existe correlação positiva entre os teores de imunoglobulinas da classe M e a quantidade de peróxido de hidrogênio liberado pelos fagócitos do colostro bovino; (10) o comportamento quantitativo observado para as imunoglobulinas e células do colostro bovino, considerando a ordem das ordenhas, sugere que os anticorpos teriam função prioritária na imunidade do neonato, enquanto o aumento de neutrófilos estaria voltado aparentemente para a proteção da glândula mamária. / Bovine collostrum citology, immunoglobulin content and bactericidal activity of phagocytes against enterotoxigenic Escherichia coli were studied qualitatively and quantitatively, analyzing the influence of previous opsonization of the bacterium. In order to achieve this aim, 53 Holstein cows were used to obtain 212 collostrum samples before the first and second milkings. Samples positive (n=41) in the bacteriological examination of milk were excluded from the trial. Direct microscopy and cytocentrifugation were used in the quantitative and qualitative cytological analysis of collostrum, respectively. Immunoglobulin (IgG, IgM and IgA) contents were determined by means of radial immunodiffusion using commercial kits. Indirect bactericidal activity of phagocytes and assessment of the influence of ETEC previous opsonization were carried out as follows: using only a suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes in culture medium (Control group - C); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to a suspension of non-opsonized ETEC (NO group); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to an ETEC suspension previously opsonized with 10% of supernatant of delipidated bovine collostrum (O group). Indirect bactericidal activity of phagocytes was measured by means of the amount of hydrogen peroxide nmoles released by these cells in assays C, NO and O. After results were evaluated, it was concluded that: (1) bovine collostrum obtained in the second milking showed more cells/mL than first milking collostrum; (2) the predominance of mononuclear cells was determined by both direct microscopy and cytocentrifugation; (3) bovine collostrum obtained in the second milking showed greater quantity of polymorphonuclear neutrophils than that of the first milking, as determined in cell type counts by direct microscopy and cytocentrifugation; (4) cell types predominating in bovine collostrum of the first and second milking were macrophages / epithelial cells, followed by lymphocytes, neutrophils and eosinophils, respectively, using cytocentrifugation for cell differentiation; (5) first milking bovine collostrum showed greater levels of immunoglobulins G and M than that of the second milking, with a predominance of IgG compared with IgM and IgA, no matter the milking order; (6) phagocytes in first milking collostrum showed greater cell activity than those in the second milking collostrum, as evaluated by hydrogen peroxide release; (7) antigenic stimulation of ETEC was not enough to increase bactericidal activity of phagocytes in bovine collostrum; (8) ETEC opsonization with collostral serum did not lead to significant differences in bactericidal activity of bovine collostrum phagocytes, as measured by the amount of hydrogen peroxide released by these cells; (9) there was a positive correlation between the contents of immunoglobulin M and the amount of hydrogen peroxide released by phagocytes in bovine collostrum; (10) quantitative behavior observed for immunoglobulins and cells of bovine collostrum considering the milking order, suggest that antibodies would have a essential function in neonate immunity, whereas the increase in neutrophils would apparently be linked to mammary gland protection.

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After consent, cervical samples were collected from 455 women under routine gynecological examination at the Basic Health Units of the city of Coari from September to December 2014. The samples were collected using the cytology collection kit in liquid medium - CML (BD SurePathTM). The cytopathological slides were prepared in the semi-automated BD PrepmateTM and PrepStainTM equipment. A 0.5 mL aliquot was separated to screen hrHPV by the HPV BD Onclarity® assay using the Viper LT system, which identifies six types individually (16/18/31/45/51/52) and eight types per group of genotypes ( P1: HPV33/58; P2: HPV56/59/66 and P3: HPV35/39/68). Our results showed that the blades made by CML were 99.3% classified as satisfactory and 7,3% (33/452) presented altered results. The hrHPV were detected in 70,9% of the cytologies altered, being positive in 77,3% of the cytologies classified as LSIL, 60% of the HSIL cytologies, 50% of the ASCUS cytologies and the most found genotypes were HPV 52 and group of HPV P3 genotypes. Among the 42 normal cytologies selected, 11,9% presented hrHPV infection, being also the most common genotypes HPV 52 and group of HPVP3 genotypes. These data, in addition to tracking women with a real risk for CCU development and confirming the presence and genotypic diversity of hrHPV in this Amazon female sample, reinforce studies in the literature that present CML and molecular tests as fundamental alternative tools in screening and, consequently, CCU reduction, especially in regions where there is a high index of this pathology. / A infecção por HPV é a infeção sexualmente transmissível mais comum em todo o mundo e a persistência do HPV de alto risco (hrHPV) é o principal fator etiológico para o desenvolvimento do Câncer do Colo do Útero (CCU). O CCU é o quarto tipo de câncer mais comum em mulheres no mundo. No Brasil, é o terceiro tipo mais prevalente e, na Região Norte, é a primeira neoplasia entre as mulheres. O exame citopatológico tem sido o método de escolha para o rastreamento das lesões precursoras e do câncer invasivo. A citologia em meio líquido (CML) e a detecção molecular do HPV têm sido consideradas estratégias promissoras para aumentar a eficácia do rastreamento. Este trabalho teve como objetivo detectar hrHPV em mulheres com citologia alterada e num grupo com citologia normal na cidade de Coari-Amazonas. Após consentimento, foram coletadas amostras cervicais de 455 mulheres em exame ginecológico de rotina nas Unidades Básicas de Saúde da cidade de Coari no período de setembro a dezembro de 2014. As amostras foram coletadas utilizando-se o kit de coleta de citologia em meio líquido - CML (BD SurePathTM). As lâminas citológicas foram confeccionadas nos equipamentos semi-automatizados BD PrepmateTM e PrepStainTM. Uma alíquota 0,5 mL foi separada para rastrear hrHPV pelo ensaio HPV BD Onclarity®, através do sistema Viper LT, que identifica seis tipos individualmente (16/18/31/45/51/52) e oito tipos por grupos de genótipos (P1: HPV33/58; P2: HPV56/59/66 e P3: HPV35/39/68). Nossos resultados mostraram que as lâminas confeccionadas por CML foram 99,3% classificadas como satisfatória e 7,3% (33/452) apresentaram resultados alterados. Os hrHPV foram detectados em 70,9% das citologias alteradas, sendo positivo em 77,3% das citologias classificadas como LSIL, 60% das citologias com HSIL, 50% das citologias com ASCUS e os genótipos mais encontrados foram o HPV 52 e o grupo de genótipos HPV P3. Dentre as 42 citologias normais selecionadas, 11,9% apresentaram infecção por hrHPV, sendo, também, os genótipos mais comuns o HPV 52 e o grupo de genótipos HPVP3. Estes dados, além de rastrear mulheres com real risco para o desenvolvimento do CCU e confirmar a presença e a diversidade genotípica de hrHPV nesta amostra feminina amazônica, reforça os estudos na literatura que apresentam a CML e os testes moleculares como ferramentas alternativas fundamentais no rastreio e, consequentemente, redução do CCU, principalmente em regiões onde existe um alto índice desta patologia.

Caulobacter crescentus é uma bactéria gram-negativa que dá origem a duas células filhas a cada divisão celular, a célula móvel e a célula talo, que se distinguem por sua morfologia, programa de desenvolvimento e capacidade de replicação do DNA. O gene alkB de C. crescentus foi identificado num clone que contém os genes de choque térmico dnaK e dnaJ (Gomes et al, 1990). Em E. coli, o gene alkB mostrou estar envolvido, juntamente com os genes alkA e ada, no reparo de lesões do DNA causadas por agentes alquilantes (Teo et al, 1986). O gene alkB de E coli forma um operon com o gene ada, sendo que o gene ada precede o gene alkB. A expressão de ambos os genes é induzida por doses não letais de agentes alquilantes, a nível de transcrição. A seqüência de aminoácidos deduzida da seqüência de nucleotídeos do gene alkB de Caulobacter crescentus mostrou uma identidade de 42,5 % com a proteína AlkB de E. coli (Kondo et al, 1986). Ao contrário do que ocorre em E.coli, este gene não faz parte de um operon com o gene ada e sua expressão não é induzida por agentes alquilantes. Através do ensaio de proteção à nuclease S1 foi demonstrada a existência de um único início de transcrição para este gene. Para medir o nível de expressão do gene alkB foi construída a fusão de transcrição alkB-placZ/290, onde o vetor repórter de transcricão (placZ/290) (Gober & Shapiro, 1992) contendo o gene da (&#946;-galactosidase sem o seu promotor foi ligado ao fragmento Sall/Stul (0,3 kb) que contém apenas a região promotora do gene alkB. Observou-se que a transcrição do gene alkB é regulada durante o ciclo celular de Caulobacter crescentus, apresentando níveis máximos na célula talo. Verificou-se ainda, através do experimento de dupla sincronia, que a proteína AlkB de C. crescentus sintetizada na célula prédivisional é segregada tanto para a célula móvel como para a célula talo, não apresentando um padrão polar de expressão. A resposta adaptativa a agentes alquilantes foi demonstrada em C. crescentus pela detecção de um aumento na sobrevivência aos efeitos letais dos agentes alquilantes em células pré-tratadas com baixas doses destes agentes e pela identificação de uma proteína induzida por agentes alquilantes utilizando anticorpos monoclonais anti-Ada de E. coli. / Caulobacter crescentus is a gram-negative bacterium that yields two different progeny cells at each division cycle, the swarmer cell and the stalked cell, which differ in structure, developmental program and ability to replicate DNA. The alkB gene in Caulobacter crescentus was identified in a clone which contains also the heat shock genes dnaK and dnaJ (Gomes et al, 1990). In Escherichia coli the alkB gene has been shown to be involved, with alkA and ada, in the pathway for repair of DNA alkylation damage (Teo et al, 1986). The E. coli alkB gene forms an operon with the ada gene, being downstream of it. The addition of the alkylating agent MMS to E. coli cultures induces the expression of both ada and alkB, at the level of transcription. The aminoacid sequence deduced from the nucleotide sequence of the C. crescentus alkB gene has shown 42,5% identity with the AlkB protein of E. coli (Kondo et al, 1986). Contrary to what happens in E. coli, the alkB gene of Caulobacter cescentus does not form an operon with the ada gene and its expression is not induced by alkylating agents. S1 nuclease protection assays have shown the presence of a single start of transcription for the alkB gene. To investigate the expression of the alkB gene during the cell cycle of the bacterium, its regulatory region was fused to a promoterless lacZ gene present in the vector placZJ290 (Gober & Shapiro, 1992), and &#946;-galactosidase activity and synthesis, directed by the alkB gene promoter, were determined. It was observed that expression of the alkB gene is cell cycle controlled in Caulobacter. The placZJ290 transcriptional fusion with alkB, expressed in predivisional cells did not display a polar pattern of segregation in Caulobacter crescentus. &#946;-galactosidase synthesized in predivisional cell was partitioned in equal amounts to both cell types after cell division. An adaptive response to alkylation damage has been demonstrated in C. crescentus. The response was detected by the increased resistance to cell killing of pretreated cells with low doses of methylating agents, followed by exposure to higher doses of these agents, and by cross-reactivity of an inducible protein of 39 kDa with E. coli anti-Ada monoclonal antibodies.

Orientador : Luis Guillermo Bahamondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T04:47:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hyppolito_SilviaBomfim_D.pdf: 3914819 bytes, checksum: 512acabba41d360d127a0fb89cd0dc1c (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:33:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8162_1.pdf: 2706638 bytes, checksum: 6b4dbb27d9d0698de9b044a187aec26d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência de lesões anais mediadas pelo HPV em um grupo de 60 pacientes do sexo masculino com diagnóstico de HIV/Aids. Foram analisados os aspectos demográficos, hábitos de vida, estado clínico da infecção pelo HIV e comportamento sexual. Os pacientes foram submetidos à citologia oncótica anal, à anuscopia sob visão colposcópica e à biópsia anal. A média de idade do grupo foi de 41,9 anos e o tempo médio de diagnóstico do HIV de 6,8 anos. Dos pacientes avaliados, 88,3% faziam uso da terapia com anti-retrovirais potentes (TARV) por um tempo médio de 6,5 anos. Os homens que se referiram como homossexuais representaram 43,3% da amostra; os heterossexuais, 41,7% e os bissexuais, 15%. A maioria dos indivíduos (63,3%) referia história de relação anal receptiva e 35,0% informaram ter tido mais de 10 parceiros sexuais masculinos em toda a vida. A prevalência das lesões anais pela anuscopia sob visão colposcópica, citologia anal e histologia foram, respectivamente: 35,0%, 16,7% e 23,3%. Dos pacientes com biópsia anormal, 85,7% eram homossexuais ou bissexuais e 14,3% eram heterossexuais (p = 0,02), e 78,6% referiram mais de 10 parceiros sexuais. A dosagem de linfócitos T CD4 +, carga viral e o uso de TARV não mostraram associação com o diagnóstico de lesão anal. A ocorrência da lesão anal foi elevada nos indivíduos com HIV/Aids, sendo mais prevalente em homossexuais e bissexuais, embora tenha ocorrido também nos heterossexuais