O viés atencional e a fissura para pistas associadas ao consumo do crack, além do perfil do consumidor e padrão de consumo de crack, foram temas explorados na presente tese. Para fins de abarcar a temática pretendida foram construídos três artigos. O primeiro artigo “Profile and Pattern of Crack Cocaine Consumption among Inpatients in a Brazilian Psychiatric Hospital” teve por objetivo principal a descrição do perfil e padrão de uso de crack de dependentes em tratamento tipo internação. O artigo “Avaliação do Viés Atencional em Usuários de Cocaína: Revisão Sistemática da Literatura” teve o intuito de revisar os estudos sobre viés atencional (VA) para pistas relacionadas à cocaína, descrevendo as principais tarafes e métodos utilizados. Por último, o terceiro artigo “Medidas de Reatividade a Pistas na Dependência de Crack: Viés Atencional e Fisssura” descreveu o processo de construção de uma tarefa de avaliação do VA ou Visual Probe Task para pistas associadas ao consumo do crack e, também, avaliou o VA e fissura em relação a essa substância. Dependentes químicos tendem a alocar a atenção para estímulos/pistas relacionados às substâncias de abuso, fenômeno descrito como VA. A revisão da literatura sobre VA para pistas associadas à cocaína mostrou que essa relação ainda não foi bem descrita através da Visual Probe Task, tendo em vista que a maioria dos estudos utilizou a tarefa de Stroop para avaliação do VA. Em relação especifica ao crack, forma fumada de cocaína não foram encontrados estudos prévios com emprego de Visual Probe Task avaliando o VA. Portanto, nessa tese uma tarefa de atenção visual foi desenvolvida para avaliação do VA em dependentes de crack em tratamento do tipo internação. Da mesma forma, o perfil de 53 dependentes de crack em tratamento (tipo internação) foi explorado, eles eram jovens adultos (M=27,5 anos; DP=7,3), poliusuários de drogas, com várias tentativas anteriores de cessação do consumo. Então, no terceiro artigo, um experimento para avaliar VA e fissura em relação ao crack em 53 dependentes de crack (em tratamento internação), 24 dependentes de álcool (em tratamento internação) e em outro grupo composto de 17 indivíduos que nunca consumiram substâncias psicoativas, há exceção do álcool (mas sem preencher critério de uso abusivo) foi descrito. Na tarefa de atenção visual desenvolvida, os participantes tiveram que pressionar uma tecla em um teclado de computador para identificar um alvo que poderia estar localizado tanto ao lado esquerdo quanto direito do campo visual. A localização do alvo foi encoberta por um de 12 pares de imagens relacionadas ao crack e seus controles pareados por stimulus onset asynchronies (SOA) 50, 500, 2000ms. O auto-relato de fissura foi obtido antes e depois da tarefa de atenção visual. Apenas os dependentes de crack exibiram VA para pistas relacionadas ao crack no SOA 2000ms (M=28,7; DP=101), mas não em outros SOAS, indicando padrão de manutenção da atenção para os estímulos. Somente dependentes de crack apresentaram aumento de fissura após a tarefa, enquanto os outros grupos não. Apesar das dificuldades intrínsecas relacionadas ao trabalho com dependentes de crack em tratamento e poliusuários de drogas, o presente estudo parece ser o primeiro a avaliar o VA em dependentes de crack com emprego de Visual Probe Task (tarefa de atenção visual). / The attentional bias (AB) to cocaine crack cues and craving related to cocaine crack were explored in this thesis. Furthermore, the consumer profile and the pattern of crack consumption were evaluated. For purposes of embracing the intended thematic three articles were constructed. The first article “Profile and Pattern of Crack Cocaine Consumption among Inpatients in a Brazilian Psychiatric Hospital” aimed to describe the profile and pattern of crack use among dependents inpatients. The article “Assesment ofAttentional Bias in Cocaine Users: Systematic Review of the Literature” was developed to review studies on AB to cocaine related cues, describing the main tasks and methods. Lastly, the third article “Measures of Cue Reactivity in Cocaine Crack Dependence: Attentional Bias and Craving” described the process of constructing a Visual Probe Task to evaluate Ab to crack cues and also assessed the AB and craving in relation to crack. Addicts tend to allocate attention to substance-related stimuli, a phenomenon described as AB. A review of recent literature about AB to cocaine showed that this relationship has not yet been described through a Visual Probe Task, given that most studies used the Stroop task. In relation to crack cocaine no studies were found yet using Visual Probe Task. Therefore, in this thesis, a Visual Probe Task was designed to evaluate AB in addicts to cocaine crack. Similarly, the profile of 53 cocaine crack inpatients was described, they were young adults (M=27.5 years; SD=7.3), polydrug users, with several previous cessation attempts. Then, in the third article a experiment to evaluate AB and craving in 53 cocaine crack addicted inpatiens, 24 alcohol-addicted inpatients and another group of 17 individuals who did not consume any psychoactive substances, except alcohol (but excluding alcohol abuse) was described. On performing the Visual Probe Task developed in our laboratory, participants had to press a key in a computer keybord to identify a probe located either on the left or right visual field. Probe location was covered by one of 12 pairs of crack-cocaine and matched control pictures for stimulus onset asynchronies (SOA) 50, 500 and 2000ms. Self-reported craving was assessed before and after task performance. Only crack dependents group exhibited AB related to crack cues in SOA 2000ms (M=28.7; SD=101) but not others SOAs, indicating a pattern of maintenance of attention towards the stimulus. Just crack dependents group presented increased craving after task performance, whereas other groups did not report craving for crack cocaine. Despite intrinsic difficulties related to work with polidrug inpatients, the present study is likely to be the first to assess AB in crack addicts using a Visual Probe Task.

A cocaína (COC) é um alcaloide presente nas folhas de espécies do gênero Erytroxylum novagranatense e Erytroxylum coca. Possui grande efeito estimulante sobre o Sistema Nervoso Central (SNC) e por isso é utilizada como droga de abuso. Dentre os principais metabólitos estão a benzoilecgonina (BZE), éster metil anidroecgonina (EMA) e anidroegonina (AEC), sendo que os dois últimos são provenientes de pirólise (consumo do crack através do fumo ou inalação). Ainda, o cocaetileno (CE) é biotransformado após a ingestão conjunta de COC e etanol. O consumo de substâncias psicoativas (SPA), dentre elas a COC e seus derivados, traz diversos prejuízos à saúde dos usuários, principalmente quando se considera a interação causada pelos compostos adulterantes, adicionados à droga para aumentar lucros e mimetizar os efeitos desejados. Ainda, o uso associado ao trânsito, é uma preocupação crescente em toda a sociedade, pois eleva em números consideráveis a chance da ocorrência de acidentes de trânsito. A detecção de SPA pode ser feita em uma variedade de matrizes biológicas, sendo que cada uma possui suas particularidades, incluindo diferentes janelas de detecção. Análises realizadas em fluido oral (FO), urina e sangue são recomendadas por guias nacionais e internacionais para a detecção de SPA e se complementam pois identificam as drogas intactas e seus produtos de biotransformação em diferentes concentrações e períodos de tempo. A correlação de concentração entre essas matrizes não é bem estabelecida, sendo que diversos estudos reportados na literatura trazem resultados controversos. A validação de métodos analíticos ou bioanalíticos é etapa crucial para a realização de análises seguras e que não deixem margem de dúvida na interpretação dos resultados, caracterizando-se como de extrema importância em todas as áreas da toxicologia. Nesse sentido, foram desenvolvidos e validados métodos para a detecção simultânea de COC, BZE, CE, EMA e AEC em FO, urina e plasma, utilizando cromatografia líquida acoplada a detector de massas (CL-EM), além de três métodos para análise de COC e compostos adulterantes em amostras de apreensão, sendo dois deles qualitativos, utilizando cromatografia gasosa acoplada à detector de massas (CG-EM) e cromatografia gasosa portátil acoplada à detector de massas íon trap (CG-EM-IT) e um quantitativo utilizando cromatografia líquida acoplada à detector de massas sequencial (CL-EM/EM). Ainda, um estudo de correlação foi aplicado a fim de avaliar a concentração dos metabólitos entre as matrizes biológicas coletadas simultaneamente. As etapas de preparação das amostras nos métodos bioanalíticos compreenderam precipitação de proteínas com acetonitrila, seguida de filtração para urina e plasma e diluição em tampão seguida de filtração para FO. As curvas de calibração foram lineares entre 4,25 e 544,00 ng/mL para FO, e entre 5,00 e 320,00 ng/mL para urina e plasma. Os limites inferiores de quantificação foram iguais à menor concentração das curvas de calibração. Os limites de precisão e exatidão intra e inter-dias mantiveram-se dentro dos limites de ±20% para o limite de quantificação e ±15% para os demais controles preconizados pelas guias regulatórias. Os métodos desenvolvidos foram aplicados satisfatoriamente em 110, 116 e 113 amostras de FO, urina e plasma, respectivamente, coletadas de usuários de múltiplas drogas. Os resultados mostraram alta prevalência destes analitos nesta população, especialmente COC e BZE, presentes em 75,8 e 75,0% dos casos, respectivamente. Em relação ao método analítico quantitativo, este se mostrou preciso, exato e linear na faixa de 50 – 2000 ng/mL, todos os demais parâmetros se mantiveram dentro dos limites preconizados. Levamisol (LEV), fenacetina (FEN), cafeína (CAF), hidroxizina (HDZ) e benzocaína (BZC) foram os adulterantes mais encontrados dentre as 166 amostras de apreensão analisadas. O método qualitativo por CG-EM foi efetivo para ser utilizado como método de screening para todos os compostos, equanto que o método por CG-EM-IT apresentou restrições de aplicação para alguns compostos. Os capítulos apresentados nesse trabalho abrangem de uma maneira geral a análise de COC e seus derivados em amostras biológicas e material apreendido, assim como trazem uma abordagem em relação aos problemas relacionados ao uso e tráfico de drogas em diferentes cenários. Os métodos desenvolvidos neste trabalho podem ser aplicados, além da área de trânsito e controle de materias apreendidos, em diferentes áreas de conhecimento como laboratórios de toxicologia clínica, forense e no próprio meio científico. / Cocaine (COC) is an alkaloid which is found in the leaves of Erytroxylum novagranaense and Erytroxylum coca. COC has a strong stimulant effect on central nervous system (CNS) and this is the reason for its classification as drug of abuse. Benzoylecgonine (BZE), anhydroecgonine methyl ester (AEME) and anhydroecgonine (AEC) are among its main metabolites. AEME and AEC are pyrolysis products that forms as a result of crack-cocaine consumption through smoking or inhalation. Additionally, cocaethylene (CE) is biotransformed after the ingestion of cocaine and alcohol. The use of psychoactive substances (SP), including cocaine and its derivatives, can cause several issues to the health of its users specially when the interactions caused by cutting agents added to the drugs to increase the profits and mimic the effects are taken into consideration. Furthermore, the use of SP combined with driving is an emerging problem since it increases the chances of traffic accidents. The detection of SP can be done in a variety of biological matrices that each has their own particularities such as different windows of detection. The guidelines recommend analysis in oral fluid (OF), urine, and blood for the detection of SP. These three matrices complement each other because it is possible to identify drugs and the products of biotransformation in varying concentrations and periods of time. The coefficient of correlation between those three matrices is not very well established since many studies report conflicting results. The validation of analytical or bioanalytical methods is an important step to ensure accurate results and it is considered essential in every area of toxicology. Therefore, methods for the detection of COC, BZE, AEME, AEC and CE in OF, urine and plasma were developed and validated using liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS). Likewise, three methods (two qualitative and one quantitative) for the detection of COC and known cutting agents in seized drugs were developed using gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS), portable gas chromatography toroidal ion trap mass spectrometry (GC-TMS), and liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). A correlation study was done to evaluate the drug concentrations in the three matrices collected simultaneously. OF was diluted in buffer while urine and plasma were precipitated using acetonitrile. Calibration curve ranges were prepared at 4.25 – 544 ng/mL for oral fluid, and 5 – 320 ng/mL for urine and plasma. The lowest concentration of the calibration curves were designated as the lower limit of quantification. The calculated precision and accuracy values were within the limits stipulated by the guidelines (±20% for the limit of quantification and ±15% for the rest of the quality controls). The methods were fully validated and proved to be suitable for analysis of 110, 116, and 113 samples of OF, urine, and plasma, respectively, that were collected from drug users. The results showed high prevalence of SP drugs in this population. Particularly of note, COC and BZE were found in 75.8 and 75.0% of the cases, respectively. The analytical quantitative method proved to be precise, accurate, and linear in the range of 50 – 2000 ng/mL; all the other parameters were within the limits stipulated. Levamisole (LEV), phenacetin (PHN), caffeine (CAF), hydroxyzine (HYDZ), and benzocaine (BZC) were the adulterants most prevalent in the 166 samples analyzed. The analytical qualitative method by GC-MS was shown to be effective as screening method for all the compounds, while the analytical method by GC-TMS was limited due to its incompatibility with certain target compounds. The chapters presented in this work comprise the analysis of cocaine and its derivatives in biological matrices and seized material, as well as an approach relating to the analysis of samples from impaired driving and similar scenarios. The methods developed in this work can be further applied to other areas of science and research including clinical toxicology, general laboratories and forensic laboratories.

Introdução: o crack é uma forma extremamente aditiva de cocaína, provocando intensa fissura e um comportamento persistente e intenso de busca pela droga com negligência da alimentação. A alimentação insuficiente pode levar à carência de tiamina. O uso de latas e folhas de alumínio na confecção de cachimbos para o consumo de crack aumenta a exposição de usuários de crack a este metal. Deficiência de tiamina somada a acúmulo cerebral de alumínio pode inibir o metabolismo energético dependente da glicose, levando à neurodegeneração e, possivelmente, à encefalopatia de Wernicke. Objetivos: avaliação dos níveis sanguíneos de tiamina difosfato e de alumínio de dependentes de crack e comparação com os de controles. Método: estudo transversal controlado, avaliou 35 dependentes de crack e 35 controles, do sexo masculino, com 18 anos ou mais. Os casos foram recrutados entre pacientes internados na Unidade de Adição do Hospital de Clínicas de Porto Alegre ou na Emergência em Saúde Mental IAPI, os controles foram recrutados entre as pessoas que circulam na área ambulatorial do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Todos participantes tiveram seu peso e estatura medidos e sangue coletado para determinação dos níveis de tiamina difosfato e de alumínio. Os casos passaram, também, por uma breve avaliação neurológica. Resultados: as características dos casos são semelhantes à amostra do principal estudo nacional sobre o uso de crack no Brasil: sexo masculino, cerca de 30 anos de idade, com baixa escolaridade, desempregados, usuários de múltiplas substâncias psicoativas, consumidores de crack há aproximadamente 8 anos. O índice de massa corporal dos casos foi significativamente mais baixo (p<0.0001). Seis casos (17.65%) apresentaram índice de massa corporal abaixo do normal. Dois casos apresentaram nível de tiamina abaixo dos valores de referência, enquanto os níveis dos controles estavam acima deste limite. Comparando os resultados do primeiro quartil do nível sanguíneo de tiamina dos casos (N= 9; mediana 3.6μg/dL, amplitude interquartil 3.05μg/dL -4.10μg/dL) com o dos controles (N=14, mediana 4.3μg/dL, amplitude interquartil 3.7μg/dL-4.4μg/dL), os casos apresentaram níveis significativamente mais baixos (p=0.024). Os níveis de alumínio dos casos que tiveram as amostras de sangue coletadas até 24h após o último consumo da substância, foram maiores (mediana1.85μg/L, amplitude interquartil0.65-4.425μg/L) que os dos controles (mediana 0.95μg/L, amplitude interquartil 0.7-1.22μg/L), mas esta diferença não atingiu significância estatística (p=0.07). Conclusões: dependentes de crack tem índice de massa corporal menor e estão mais expostos ao alumínio que os controles. Alguns tem deficiência de tiamina, a qual pode levar à encefalopatia de Wernicke e declínio cognitivo. Portanto, tiamina parenteral profilática deve ser considerada para alguns dependentes de crack. / Background: Crack-cocaine is an extremely additive form of cocaine and its compulsive use can last days until exhaustion, driving its users to neglect feeding. Poor feeding may cause thiamine deficiency. In Brazil, crack-cocaine is usually smoked in pipes made of aluminum cans or with aluminum foils. Insufficient brain levels of thiamine plus brain aluminum accumulation, may impair glucose energy metabolism, promoting neurodegeneration and possibly Wernicke’s encephalopathy. Objectives: The aim of this study was to evaluate thiamine and aluminum blood levels in crack-cocaine addicts and compare them to healthy controls. Methods: cross-sectional controlled study, included 35 crack-cocaine addicts and 35 healthy controls, all males, 18 or older. Cases were recruited at the Addiction Unit of Hospital de Clínicas de Porto Alegre or at the Mental Health Emergency IAPI, controls were recruited between people circulating in the outpatient clinic area of Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Weight and height were measured and blood samples collected for determination of thiamine diphosphate and aluminum levels. Cases were also submitted to a brief neurological examination. Results: cases characteristics were similar to the sample of the main national study related to crack-cocaine use in Brazil: mainly males, about 30 years old, with low education level, unemployed, multiple drug abusers, consuming crack-cocaine for approximately 8 years. Body mass index was significantly lower in cases (p<0.0001). Six cases (17.65%) had body mass index lower than normal, while no control was below this limit. Two cases presented thiamine levels below the laboratory reference range, while controls were all above this limit. Comparing the lower quartile of thiamine blood levels, cases (3.6 μg/dL) had significantly lower levels of thiamine than controls (4.3μg/dL) (p=0.024). Blood aluminum median of crack-cocaine addicts (1.85μg/L, interquartile range 0.65-4.425μg/L) whose samples were drawn until 24h after last drug consumption was higher than controls (0.95μg/L, interquartile range 0.7-1.22μg/L), but the difference did not achieve statistical significance (p=0.07). Conclusions: Crack-cocaine addicts have lower BMI and are more exposed to aluminum in comparison to healthy controls. Also, some of them have thiamine deficiency which may lead to Wernicke’s encephalopathy and cognitive impairment. Thus, prophylactic parenteral thiamine should be considered to some crack-cocaine addicts.

O fenômeno do crack na atualidade tem despertado atenção em virtude da gravidade das consequências sociais e de saúde vivenciadas pelos usuários, que pode chegar ao extremo de causar experiências de situação de rua. Embora as pessoas vivam nas ruas por diferentes razões, os usuários de crack têm potencializadas as características vinculadas à situação de rua, podendo provocar marginalização e dificuldades de permanecer junto às famílias. Diante do exposto, o objetivo desta pesquisa foi compreender como ocorre a trajetória de usuários de crack para a situação de rua na perspectiva de seus familiares. Estudo qualitativo que utilizou a abordagem sistêmica como referencial teórico e a narrativa como referencial metodológico. O estudo foi desenvolvido no Centro de Atenção Psicossocial em Álcool e Drogas II do município de Ribeirão Preto, São Paulo, inicialmente a partir de grupos terapêuticos de família e posteriormente por indicações dos profissionais do serviço. Participaram 11 familiares de usuários de crack escolhidos intencionalmente de acordo com critérios previamente estabelecidos. Foram utilizados os seguintes instrumentos de coleta dos dados: 1) questionário com informações socioeconômicas e demográficas dos familiares e das familias, 2) questionário com dados dos usuários, 3) genograma, 4) entrevista em profundidade com enfoque narrativo e sistêmico, a partir de uma questão disparadora e 5) diário de campo. A dinâmica das entrevistas seguiu a composição dos instrumentos de coleta de dados, sendo que todos os participantes foram entrevistados duas vezes. Após a transcrição integral da primeira entrevista, foi elaborado um relatório contendo os principais tôpicos abordados pelos sujeitos, bem como a construção de questões para aprofundamento na segunda entrevista. As narrativas produzidas por meio de ambas entrevistas foram agrupadas e transcritas em sua totalidade. Foi utilizada a análise temática indutiva e validação das categorias por juízes. Verificou-se que os familiares compreenderam a trajetória dos seus entes para a situação de rua a partir de dois momentos principais, configurando as categorias do estudo: um anterior ao processo da situação de rua, onde eles recorreram ao passado para narrar eventos sobre a história de vida dos usuários, intitulado \"No caminho das pedras\": o retorno ao passado para explicar o presente; e um posterior, onde eles narraram sobre eventos relacionados especificamente à iniciação ao uso de crack e ao processo da situação de rua, denominado de \"Há um nóia entre nós\": a compreensão familiar sobre a ocorrência da situação de rua. Conclui-se que estratégias de prevenção ao uso de drogas devem se iniciar precocemente, especialmente no sistema escolar, e que ações que levem conhecimento a respeito das drogas para o sistema familiar dos usuários de crack é uma necessidade urgente / The crack cocaine phenomenon nowadays has attracted attention due to the gravity of the social and health consequences experienced by users that can reach the extreme to lead homelessness experiences. Although people living on streets for different reasons, crack cocaine users have potentiated the characteristics linked to homelessness, which may cause marginalization and difficulties to remain with families. The aim of this research was to comprehend how happens the crack cocaine user\'s trajectories to the street situation from the families\' perspective. Qualitative study that used the systems approach as a theoretical framework and the narrative as methodological framework. The study was conducted in a Psycho-Social Care Centre for substance misuse of Ribeirão Preto city, São Paulo, firstly from family therapy groups and later by indications of professionals from this service. The participants were 11 families of crack users intentionally chosen according to criteria established previously. The following data collection instruments were used: 1) questionnaire with socioeconomic and demographic information of the relatives and the families, 2) questionnaire with user\'s data, 3) genogram, 4) in-depth interview with narrative and systemic focus, from a guiding question and 5) field diary. The dynamic of the interviews followed the composition of the data collection instruments, and all participants were interviewed twice. After the full transcript of the first interview, was prepared a report containing the main topics addressed by the subjects, as well as construction of questions for deepening in the second interview. The narratives produced by both interviews were grouped and transcribed fullly. Was used the inductive thematic analysis and validation of the categories by judges. Was found that the family understands the crack cocaine user\'s trajectories from two moments, configuring the categories of study: one before the process of the street situation, where they return to the past to narrate events about the life history of the users, entitled \"On the road of stones\": the return to the past to explain the present\"; and later, where they narrated about related events specifically related to the initiation to the crack cocaine use and the process of homelessness, called \"There is a nut among us\": the familiar understanding of the occurrence of the street situation. In conclusion, we belive that drug use prevention strategies should begin early, especially in the school system, and actions to take knowledge about drugs to the family system of crack cocaine users is urgent need

A cocaína é uma droga amplamente utilizada, e seu abuso está associado a inúmeros problemas de ordem física, psiquiátrica e social. Anormalidades em recém-nascidos têm sido reportadas devido aos efeitos tóxicos da cocaína durante o desenvolvimento fetal. O mecanismo pelo qual a cocaína causa danos neurológicos é muito complexo e envolve interações da droga com diversos sistemas de neurotransmissão, como o aumento dos níveis extracelulares de dopamina e radicais livres e a modulação de fatores de transcrição. Neste estudo investigamos a toxicidade causada pela cocaína em culturas primárias de estriado e mesencéfalo e cultura de linhagem de células dopaminérgicas (PC 12). Observamos que a exposição à cocaína causou morte destas células. Na cultura primária de mesencéfalo, a morte celular foi revertida pelo prétratamento com superóxido dismutase (SOD). A exposição à cocaína também induziu a inibição do prolongamento dos neuritos nessas culturas primárias. Já na cultura de células PC 12, a cocaína ativou os fatores de transcrição NF-kB e CREB (após 6 horas), que regulam a transcrição de genes envolvidos na morte celular. O GBR 12909 (inibidor da recaptação de dopamina), a lidocaína (anestésico local) e a dopamina não ativaram o NF-kB de maneira semelhante à cocaína, porém, a diminuição da atividade do NF-kB após pré-tratamento das células com SCH 23390, antagonista do receptor D1, sugere que a ativação do NF-kB pela cocaína ocorre, pelo menos parcialmente, via ativação de receptores D1. O NF-kB parece exercer um papel protetor nas células PC 12, pois sua inibição com PDTC e Salicilato de Sódio aumentou a indução de morte celular pela cocaína. O aumento do RNAm do BDNF, também pode estar relacionado à proteção exercida por este fator de transcrição. A diminuição do Bcl-2, o aumento da atividade da caspase 3 e o aumento da caspase 3 clivada sugerem a participação da via de apoptose na morte celular induzida pela cocaína. A compreensão dos mecanismos de morte celular regulados pela cocaína no cérebro futuramente contribuirá para o desenvolvimento de novas terapias para dependentes, a qual poderá ajudar na interrupção do desencadeamento dos processos degenerativos. / Cocaine is a drug deeply used and its abuse is associated with physical, psychiatric and social problems. Abnormalities in newly born have been demonstrated due to the toxics effects of cocaine during fetal development. The mechanism by which cocaine causes neurological damages is very complex and involves interactions of the drug with several neurotransmitter systems, such as the increase of extracellular levels of dopamine and free radicals, and modulation of transcription factors. In this study we investigated the cocaine toxicity in striatum and mesencephalic primary cultures, and dopaminergic cells (PC 12). We observed that cocaine exposure causes death to these cells. In the mesencephalic primary culture, the cellular death was blunted by superoxide dismutase (SOD) pretreatment. Cocaine exposure also induced inhibition of neurite lengthening in these primary cultures. In PC 12 cells, cocaine activated the transcription factors NFkB and CREB (after 6 hours), which regulate genes involved in cellular death. GBR 12909, an inhibitor of dopamine reuptake; lidocaine, a local anesthetic; and dopamine did not activate NFkB as cocaine did, however, the attenuation of NFkB activity after the pretreatment of the cells with SCH 23390, a D1 receptor antagonist, suggests that the activation of NFkB by cocaine is, at least partially, due to activation of D1 receptors. NFkB seems to have a protective role in these cells, because its inhibition with PDTC and Sodium Salicilate increased cellular death caused by cocaine. The increase in BDNF RNAm, can also be related to the protective role of this transcription factor. The decrease in Bcl-2, the increase in caspase 3 activity, and the increase in caspase 3 cleavage suggest that apoptose participates in the development of cocaineinduced cell death. The understanding of the mechanisms by which cocaine induces cell death in the brain will contribute to the development of new therapies for drug abusers, which can help the interruption of the progress of degenerative processes.

Resumo não disponível.

Introdução: Este estudo examina o sujeito social que constitui a Cracolândia, território na área de Luz, cidade de São Paulo. Assume-se que o fenômeno da Cracolândia é parte da questão social e, portanto, não pode ser atribuída ao uso de drogas, ou ao efeito do crack. A análise dos trabalhos científicos levantados na revisão da literatura, indexados na base de dados Scopus, permitiu perceber a conformidade da maior parte da produção científica com os fundamentos da moderna saúde pública, que busca identificar os grupos vulneráveis ao consumo de crack, deixando de fora da equação a dimensão estrutural que conforma a questão social e as dimensões da produção e da circulação do crack, como uma droga ilícita. O objetivo geral é o compreender o sujeito social que constitui a Cracolândia e os objetivos específicos são: identificar a reprodução social dos indivíduos que frequentam ou que vivem na Cracolândia; analisar as trajetórias de vida desses sujeitos e levantar a presença de consumo de crack e a percepção do papel do consumo em suas vidas e nas vidas dos usuários em geral. O objetivo político é o de propor uma nova base para políticas públicas na região da Cracolândia, a partir da compreensão da realidade de quem frequenta ou vive na região. Método: Este é um estudo de caso, uma pesquisa qualitativa desenvolvida sob os fundamentos teóricos do materialismo histórico e dialético, no campo da Saúde Coletiva, que se pauta pela explicação social a respeito do fenômeno do uso de drogas. Utilizou-se entrevistas, desenvolvendo-se um instrumento de coleta de dados com duas partes: a) variáveis para a composição do Índice de Reprodução Social das famílias dos participantes e b) questões abertas sobre a trajetória de vida dos indivíduos, o lugar que a Cracolândia e o crack ocupam nessas trajetórias. O trabalho de campo foi realizado na Cracolândia, usando a técnica de bola de neve. Foram entrevistados dez participantes, nove homens e uma mulher. Resultados: Os resultados mostram que quase todos os entrevistados vieram de outros estados do Brasil, tendo imigrado por diversos motivos: ameaças à vida, para escapar de penas de prisão, perseguição política e, especialmente, para buscar melhores condições sociais. Viver na Cracolândia para todos parece ter uma dimensão de proteção forte, procurada por conta da marginalização, atributo da questão social, um processo histórico inerente às sociedades capitalistas. Assim, o grupo chegou à Cracolândia pela ausência de proteção social, processo agravado pelo modelo capitalista neoliberal. Com relação ao uso de drogas, sete relataram o uso de crack e de drogas lícitas. Conclusão: Conclui-se que a categoria central para a compreensão do sujeito social que constitui a Cracolândia é a questão social e não a questão do uso de drogas ou crack particularmente. As pessoas que frequentam ou moram na Cracolândia estão essencialmente expostas a processos de empobrecimento e marginalização resultantes da reestruturação produtiva do capitalismo e da desproteção social, que reduziu empregos formais e brutalmente expandiu o exército de reserva, que é parcialmente representado pelo grupo social que constitui a Cracolândia de São Paulo. / Introduction: This study examines the social subject (group) that constitutes the Cracolândia, territory in the Luz area, city of São Paulo. We assume that the phenomenon of the São Paulos Cracolândia is part of the social question and therefore cannot be attributed to the drug use, or to the crack itself. The scientific papers raised in the literature review indexed in the Scopus database allowed realizing their compliance with the foundations of the modern public health, which is seeking to identify vulnerable groups to the crack consumption, leaving out of the equation the structural dimension of the social problem, and the dimension of the production and circulation of the crack. The overall objective is to understand the social subject that constitutes the Cracolândia, and the specific objectives are: to identify the social reproduction of individuals staying or living in Cracolândia; to analyze the life histories of these subjects and to raise the existence of crack use and perception of the role of consumption in their lives and the lives of users in general. The political purpose is to propose a new basis for public policy in the Cracolândia region, from understanding the reality of who stays or lives in that region. Method: This is a qualitative research case study developed under the theoretical foundations of Dialectical and Historical Materialism, in the field of Collective Heath which outlines the social explanation of the phenomenon of drug use. We used the interviews and developed an instrument to collect data with two parts formed by: a) variables for composition of the Social Reproduction Index of the participants families, and b) opened questions about the life trajectory of the individuals, the place which Cracolândia and crack use occupy in these trajectories. Fieldwork was conducted in Cracolândia using the snowball technique. Ten participants were interviewed, nine men and one woman. Results: The results show that: almost all respondents came from other states of Brazil, having immigrated for different reasons: threats to life, to escape imprisonment, political persecution and especially searching for better social conditions. Living in Cracolândia for all seems to have a strong protective dimension, sought because of the marginalization, occasioned by the social question, an inherent historical process of capitalist societies. The interviewed also came to the Cracolândia for the lack of social protection, aggravated by the neoliberal capitalist model. With respect to drug use, seven reported using crack and all used licit drugs. Conclusion: we conclude that the central category for understanding the social group that constitutes Cracolândia lies in the social issue and not in the issue of drug use itself. People are primarily exposed to processes of impoverishment andmarginalization resulting from the productive restructuring of capitalism that has reduced formal jobs and mechanisms of social protection and brutally expanded the reserve army, which is partially represented by the social group that constitutes the São Paulo´s Cracolândia

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2016-08-04T10:28:25Z No. of bitstreams: 2 Tese - Sheila Mara Pedrosa - 2016.pdf: 2718904 bytes, checksum: 57d2507cd8f59db6d764336f5aa87e03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-04T11:51:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Sheila Mara Pedrosa - 2016.pdf: 2718904 bytes, checksum: 57d2507cd8f59db6d764336f5aa87e03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-04T11:51:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Sheila Mara Pedrosa - 2016.pdf: 2718904 bytes, checksum: 57d2507cd8f59db6d764336f5aa87e03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Drug use has always permeated human existence, being seen in certain social groups as a natural behavior since it relieves aches and pains at times and produces stimulation, and exciting and others. The cocaine is a drug which consumption has grown last years in South America, especially in Brazil, and one of its types, the crack, is the most consumed. This illicit drug, stimulates the central nervous system, often leads to dependent person to take damage in the physical, economic and social context. The isolation to which the person dependent on crack is exposed sets in extreme situation of social vulnerability that expose the consequences of a larger and broader social context that transcends the act of using the drug. The objective of this study was to understand the meanings of the harmful use of crack by people in addiction treatment. Qualitative approach of strategic social research held in a psychiatric hospital with 39 participants divided into eight focus groups. Field observation was performed with records in a field notebook. The meetings were recorded and later transcribed and analyzed through the interpretation of meanings method. Data revealed three themes that were discussed in the light of theoretical social vulnerability proposed by Robert Castel. The first, "discovery of crack and other drugs" describes the motivations to use and differentiates the trial crack with other drugs. The cited reasons were curiosity, excessive liberty of parents and relief to some disappointment in life, and also the influence of friends. The "pain of pleasure" describes the time after the trial crack when installing the dependence, leading to a cycle of short periods of attempted abstinence, relapse and incessant consumption. In his speech, although the crack has been considered the drug which, paradoxically, provides pleasure and relief to suffering leads to unbridled consumption, uncontrollable craving, loss at work, sale of goods and separation from family, conflict with drug traffickers and police, regardless in this study of purchasing power. Finally, in the "return to life" participants describe the desire for change of life after reaching an extreme situation of drug use, lack of money, conflicts in their social environment. The feeling of despair for not wanting to use the crack and not be able to do it because of addiction is also highlighted. Results showed that even before the crack addiction participants were already in a situation of social vulnerability. The approach of people in treatment for crack addiction should be done to reduce the distance between these people and the family, society and health services, which is the starting point for health professionals in the proposition of health promotion actions. / O uso de drogas sempre permeou a existência humana, sendo visto em determinados grupos sociais como um comportamento natural uma vez que alivia dores e sofrimentos em alguns momentos e produz estímulo e entusiasmo entre outros. A cocaína é uma das drogas cujo consumo tem crescido nos últimos anos na América do Sul, e em especial no Brasil, sendo uma de suas apresentações, o crack a mais consumida. Essa droga ilícita, estimulante do sistema nervoso central, muitas vezes leva a pessoa dependente a ter prejuízos no âmbito físico, econômico e social. O isolamento ao qual a pessoa dependente do crack está exposta configura-se em situação extrema de vulnerabilidade social que se expõem a consequências de uma conjuntura social maior e mais abrangente que transcende o ato de usar a droga. O objetivo deste estudo foi compreender os significados do uso nocivo de crack por pessoas em tratamento da dependência. Pesquisa social de abordagem qualitativa, na modalidade estratégica realizada em um hospital psiquiátrico com 39 participantes distribuídos em oito grupos focais. Foi realizada observação do campo com registros em diário de campo. As reuniões foram gravadas e posteriormente transcritas e analisadas por meio do método de interpretação de sentidos. Emergiram três categorias temáticas que foram discutidas à luz teórica da vulnerabilidade social proposta por Robert Castel. A primeira, “descoberta do crack e outras drogas” descreve as motivações para o uso e diferencia a experimentação do crack com o de outras drogas. As motivações citadas foram a curiosidade, excesso de liberdade dos pais e alívio para alguma decepção da vida e, também a influência de amigos. A categoria “dor do prazer” descreve o momento após experimentação do crack quando se instala a dependência, levando a um ciclo de períodos curtos de tentativa de abstinência, recaída e consumo incessante. Em suas falas, embora o crack tenha sido considerado a droga que, paradoxalmente, proporciona prazer e alívio aos sofrimentos, leva ao consumo desenfreado, fissura incontrolável, prejuízos no trabalho, venda de bens e afastamento da família, conflito com traficantes e policiais, independentemente, nesse estudo, de poder aquisitivo. Por último, na categoria “retomar a vida” os participantes descrevem o desejo de mudança de vida após chegarem a uma situação extrema de uso da droga, falta de dinheiro, conflitos em seu meio social. Apontam ainda, o sentimento de desespero por não mais quererem usar o crack e não serem capazes disso em virtude da dependência. Os resultados permitiram observar que antes mesmo da dependência do crack os participantes já se encontravam numa situação de vulnerabilidade social. A abordagem de pessoas em tratamento da dependência do crack deve ser realizada no sentido de reduzir a distância entre essas pessoas e a família, sociedade e serviços de saúde, sendo esse o ponto de partida para profissionais de saúde na proposição de ações de promoção da saúde.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-05-29T17:37:09Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludmyla Santos Tavares - 2017.pdf: 3302208 bytes, checksum: 2c09a6f32925fa84f5c2ccb2eabbcf69 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-30T10:35:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludmyla Santos Tavares - 2017.pdf: 3302208 bytes, checksum: 2c09a6f32925fa84f5c2ccb2eabbcf69 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-30T10:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludmyla Santos Tavares - 2017.pdf: 3302208 bytes, checksum: 2c09a6f32925fa84f5c2ccb2eabbcf69 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-04-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The analysis of drugs of abuse in non-conventional biological fluids is attracting a lot of interest due to recent legislation changes in Brazil and a greater police surveillance. However, complex matrix samples have a large amount of endogenous, exogenous and other interfering compounds that make direct analysis impossible in analytical systems. In this way, sample preparation has been presented as an important tool for rapid and sensitive analytical methods. The miniaturized sample preparation technique called disposable pipette extraction (DPX) has shown to be promising once it integrates the clean-up and pre-concentration of samples. Restricted access materials (RAM) are a class of materials that allow the exclusion of endogenous compounds and the extraction of analytes in a single step. In this manner, in this work a RAM extraction phase has been developed for DPX applied to the analysis of cocaine in oral fluid via liquid chromatography coupled with mass spectrometry (DPX-RAM/LC-MS). The proposed method was optimized using a 24 factorial design. According to the results obtained, the better efficiency of extraction was obtained in the following conditions: pH 9, 10 extractions cycles (draw/eject), 3 desorption cycles (draw/eject) and acetonitrile as desorption solvent. The DPX-RAM/LC-MS method showed to be linear from 10 to 100 ng.mL-1 and have R2 = 0,999. As an alternative to sample preparation and a previous separation step, it was also evaluated in this work, a direct injection system for the mass spectrometer (MS) employing an ambient ionization source called Paper Spray Ionization (PSI). For this purpose, molecularly imprinted polymers (MIP) for the analysis of cocaine were synthetized directly on the surface of a cellulose membrane and employed as paper in a PSI system. The membrane containing MIP showed to be more selective and had a greater intensity of signal when compared to the chromatographic paper normally used for PSI. MIP-PSI method showed to be linear from 1 to 100 ng.mL-1 and have R2 = 0,998.The methods proposed are precise and accurate with obtained values bellow 15%, recovery above 80% and the limits of detection and quantification are lower than the ones found in the literature. Both techniques were standardized and validated according to ANVISA’s normative. / As análises de drogas de abuso em fluidos biológicos não convencionais têm atraído muito interesse devido às recentes mudanças nas legislações nacionais e maior fiscalização policial. No entanto, amostras com matrizes complexas apresentam grande quantidade de compostos endógenos, exógenos e outros interferentes que inviabilizam a análise direta em sistemas analíticos. Neste sentido, o preparo de amostras tem se apresentado como importante ferramenta para métodos analíticos rápidos e sensíveis. A técnica miniaturizada de preparo de amostras, conhecida como extração em ponteiras descartáveis (DPX) tem se mostrado promissora uma vez que integra o clean-up e a pré-concentração das amostras. Os materiais de acesso restrito (RAM) são uma classe de materiais que permitem a exclusão dos compostos endógenos e a extração dos analitos de interesse em uma única etapa. Assim sendo, neste trabalho foi desenvolvida uma fase extratora RAM para DPX e aplicada à análises de cocaína em fluido oral por cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas (DPX-RAM/LC-MS). O método proposto foi otimizado utilizando um planejamento fatorial 24 e segundo os resultados obtidos, a maior eficiência de extração foi obtida nas seguintes condições: pH 9, 10 ciclos de extração (aspirar/dispensar), 3 ciclos de dessorção (aspirar/dispensar) e acetonitrila como solvente de dessorção. O método DPXRAM/LC-MS mostrou-se linear de 10 a 100 ng.mL-1 com R2 = 0,999. Como alternativa ao preparo de amostras e a separação prévia foi também avaliado, neste trabalho, um sistema para injeção direta no espectrômetro de massas (MS) pela técnica de ionização ambiente conhecida como Paper Spray Ionization (PSI). Para tanto, polímeros molecurlamente impressos (MIPs) para análise de cocaína foram sintetizados diretamente na superfície de uma membrana filtrante e empregados como papel em sistema PSI. A membrana contendo o MIP mostrou ser mais seletiva e apresentou maior intensidade no sinal quando comparada com o papel cromatográfico usualmente utilizado para PSI. O método PSI-MS mostrou-se linear de 1 a 100 ng.mL-1 com R2 = 0,998. Os dois métodos apresentaram valores de exatidão e precisão abaixo de 15%, recuperação acima de 80% e os limites de quantificação e detecção abaixo dos encontrados na literatura. Ambas técnicas foram padronizadas e validadas de acordo com as normativas da ANVISA.

O uso de drogas por mulheres em idade reprodutiva é considerado um grave problema de saúde pública mundial. O mecônio é a primeira excreção do recém-nascido e tem sido utilizado como uma matriz alternativa em análises toxicológicas. A extração em fase sólida (SPE) é um método amplamente utilizado para a purificação e concentração dos analitos em amostras biológicas no campo da análise forense. A maioria dos produtos de SPE convencionais requerem volumes relativamente grandes de solventes levando a um custo acrescido por amostra e um aumento no tempo de processamento da amostra. As ponteiras de extração com fase sólida modificada (DPX) foram utilizadas como uma alternativa aos cartuchos SPE tradicionais. A técnica combina eficiência e rapidez no procedimento de extração, com redução significativa no consumo de solvente e na quantidade de amostra. O objetivo desse estudo foi desenvolver e validar um método para a determinação de nicotina, cotinina, cocaína, benzoilecgonina, cocaetileno e éster metil anidroecgonina em amostras de mecônio usando DPX e cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC/MS). Os resultados da validação indicaram uma extração eficiente, exata e precisa, com recuperação entre 50-98%, exatidão entre 92-106%, precisão intra-ensaio 4-12% e precisão inter-ensaio 6 a 12%. As curvas de calibração foram lineares com valores de R2 superiores a 0,99; os limites de detecção (LOD) variaram entre 2,5-15 ng/g e os limites de quantificação (LOQ) entre 10-20 ng/g. O método DPX-GC/MS mostrou ser eficaz para análise traços de drogas presentes em amostras de mecônio. Após desenvolvimento e validação, o método foi aplicado em 50 amostras de mecônio coletadas no berçário da Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) na cidade de Ribeirão Preto - São Paulo, Brasil. / Drug abuse by pregnant women is considered a serious public health problem worldwide. Meconium is the first excretion in newborns and has been used as an alternative matrix to evaluate in utero drug exposure. Solid phase extraction (SPE) is widely employed to prepare and cleanup samples in the field of forensic analysis. Most SPE products require large volumes of solvent, which culminates in longer sample processing times; increased cost per sample and higher limits of detection. Disposable Pipette Extraction tips (DPX) have been used as an alternative to traditional SPE cartridges. They combine efficient and rapid extraction with reduced solvent consumption. The purpose of this study was to develop and validate a method to determine nicotine, cotinine, cocaine, benzoylecgonine, cocaethylene and methyl ester anhydroecgonine in meconium using DPX and GC/MS. Validation results indicated extraction efficiency, ranged between 50-98%, accuracy 92-106%, intra-assay precision 4-12% and inter-assay precision 6 to 12%. Linear calibration curves resulted in R2 values greater than 0.99; limits of detection ranged from 2.5 - 15 ng/g and the limit of quantitation from 10 - 20 ng/g. The DPX-GC/MS method provided to selectively analyze trace concentrations of drugs in meconium samples. Finally, the developed and validated method was applied to 50 meconium samples collected at the nursery of Maternidade do Complexo Aeroporto (MATER) in the city of Ribeirão Preto - São Paulo, Brazil.