Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-26T11:54:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-26T11:55:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T11:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) Previous issue date: 2013 / O papiloma vírus humano (HPV) é um vírus que infecta a pele e a mucosa. Está associado ao câncer do colo do útero, por aumentar a probabilidade deste acontecer, mas paralelo a este, outros fatores comportamentais de risco devem ser averiguados. Tendo como foco a investigação da prevalência e os aspectos clínicos epidemiológicos da infecção genital pelo HPV em mulheres de população Urbana e Ribeirinha do município de Santarém-Pará, foi realizado um estudo comparativo, observacional, descritivo e analítico, do tipo transversal, onde houve a seleção de 511 mulheres, sendo 391 mulheres da população Urbana (38,54 ± 11,4 anos de idade) e 120 da população Ribeirinha (37,2 ± 11,7 anos de idade). Para a coleta de dados, realizou-se uma entrevista contendo informações acerca dos fatores que podem estar associados à prevalência de HPV e câncer cervical, além de uma coleta de material biológico que foi analisado através da citologia oncótica, isolamento do DNA e PCR. A tabulação dos dados foi realizada no programa Excel e a análise estatística no aplicativo Bioestat 5.0®. Verificou-se uma baixa prevalência do HPV, comparando-se com resultados de pesquisas de outras regiões. Notou-se homogeneidade dos resultados das mulheres de ambas as populações, divergindo apenas nos tópicos escolaridade, tabagismo atual, número de parceiros sexuais durante a vida e uso de anticoncepcional oral durante a vida. Conclui-se que, apesar da localização geográfica, não há para o município de Santarém uma grande mudança no perfil das mulheres entre dados encontrados na população urbana e na população ribeirinha quanto à epidemiologia do HPV. / The human papilloma virus (HPV) is a virus that infects the skin and mucosa and is associated with cancer of the cervix, by increasing the likelihood of this happening, but parallel to this, other behavioral risk factors should be investigated. Focusing research on the prevalence and the clinical epidemiology of genital infection by HPV in women of urban and riverside municipality of Santarém-Para State proposed a comparative study to be observational, descriptive and analytical , transversal, where there was a selection of 511 women, with 391 women (38.54 ± 11.4 years) and 120 for Urban sample comprised the sample riverfront (37.2 ± 11.7 years). For data collection an interview was conducted, containing information about the factors that may be associated with the incidence of HPV and cervical cancer, plus a collection of biological material that was analyzed by cytology, DNA isolation and PCR . The analysis of these data was performed using the tab in excel and subsequent treatment through statistical software Bioestat 5.0, with the results a low prevalence of HPV compared with surveys from other regions, and homogeneity of results between urban and riverside, differing only in the topics of education, smoking status, number of sexual partners during their lifetime, and oral contraceptive used during life. Concluding that despite geographical location, there is for the municipality of Santarém a big change in the profile of woman between data found in the urban area and the waterfront on the epidemiology of HPV.

O câncer de colo do útero é o segundo tumor mais frequente entre as mulheres brasileiras, os tratamentos disponíveis trazem complicações de curto a longo prazo e estudos que avaliam a qualidade de vida destas mulheres ainda são escassos no Brasil. Isto é justificado pela falta de instrumentos específicos e validados para esta finalidade em língua portuguesa (Brasil). Neste estudo objetivou-se testar as propriedades psicométricas dos questionários EORTC QLQ-CX24 e FACT-CX em uma amostra de mulheres brasileiras com câncer do colo do útero. O estudo é metodológico e foi realizado com 100 mulheres tratadas no Hospital de Câncer de Barretos, por meio de três avaliações (no início do estudo, 15 dias e 18 a 24 meses após o início). Foi testada a consistência interna (alfa de Cronbach), reprodutibilidade (coeficiente de correlação intraclasse), validade convergente (correlação com o questionário SF-36 e com o questionário EORTC QLQ-C30), a validade discriminante pelo estadiamento, tipo de tratamento e autoclassificação de saúde e a responsividade pelo método de distribuição dos dados, além da análise da facilidade de compreensão das questões e dos questionários. Confirmou-se a confiabilidade do questionário EORTC QLQ-CX24, a reprodutibilidade foi baixa nas escalas de preocupação sexual, atividade sexual e prazer sexual, bons resultados observou-se ao avaliar a validade convergente e discriminante. A análise da responsividade não confirmou todas as hipóteses. Ao avaliar o questionário FACT-CX, por meio da consistência interna, exceto pela escala de bem-estar emocional, as demais apresentaram valores de Alpha de Cronbach superiores a 0,70. A reprodutibilidade foi satisfatória nas cinco escalas que compõem o FACT- CX. Na análise da validade convergente, somente as escalas de bem-estar físico e bem-estar emocional mostrou boa correlação com as escalas do SF-36. Em geral, o questionário revelou boa validade discriminante, principalmente em relação a autoclassificação da saúde. Resultado satisfatório encontrou-se na análise da responsividade. Em geral observou-se um bom grau de entendimento das questões e dos questionário. Concluindo os questionários desenvolvidos para medir a QVRS em mulheres com câncer de colo do útero EORTC QLQ-CX24 e FACT-CX obtiveram resultados aceitáveis recomendando-se que outros estudos testem a responsividade por outros métodos / Cervical cancer is the second most common tumor among Brazilian women. Available treatments bring short and long-term complications, and studies assessing the quality of life of these women are still rare in Brazil. Such situation is warranted by the lack of specific and validated tools in (Brazilian) Portuguese for such a purpose. The goal of this study was to test the psychometric properties of EORTC QLQ-CX24 and FACT-CX questionnaires in a sample of Brazilian women affected by cervical cancer. This is a methodological study and it was conducted on 100 women treated at the Barretos Cancer Hospital by way of three assessments (at baseline, 15 days and 18 to 24 months after the onset). We tested the internal consistency (Cronbach\'s alpha), reproducibility (intraclass correlation coefficient), convergent validity (correlation with the SF-36 questionnaire and the EORTC QLQ-C30 questionnaire), the discriminant validity by way of staging, type of treatment and health self-classification and responsiveness by the method of data distribution, as well as the analysis of how easy it was their understanding of questions and questionnaires. The reliability of the EORTC QLQ-CX24 questionnaire was confirmed, reproducibility was low in the scales of sexual worry, sexual activity and sexual enjoyment, and good results were observed when evaluating the convergent and discriminant validity. The analysis of responsiveness did not confirm all hypotheses. Upon evaluation of the FACT-CX questionnaire through internal consistency, except for the scale of emotional well-being, the others showed Cronbach\'s alpha values above 0.70. Reproducibility was satisfactory in the five scales comprising FACT-CX. In convergent validity analysis, only the scales of physical well-being and emotional well-being showed good correlation with the scales of the SF-36. In general, the questionnaire demonstrated good discriminant validity, especially in relation to the self-ratings of health. Satisfactory result was found in the analysis of responsiveness. In general there was a good degree of understanding of questions and questionnaires. In conclusion, questionnaires developed to measure HRQOL in women with cervical cancer such as EORTC QLQ-CX24 and FACT-CX achieved acceptable results, and we do recommended that further studies are performed to assess responsiveness by other methods

O câncer cervical é um dos tipos de câncer mais comuns entre as mulheres, e a infecção persistente pelos HPV-16 e HPV-18 é responsável por 70% dos casos. As vacinas profiláticas disponíveis possuem alta eficácia na prevenção da infecção pelos tipos mais prevalentes de HPV. No entanto, este tipo de abordagem não beneficia mulheres que já apresentam lesões precursoras ou tumores cervicais avançados, e a busca por abordagens terapêuticas para esse tipo de câncer é considerada uma necessidade. A qualidade do antígeno representa um aspecto fundamental para o sucesso de vacinas terapêuticas baseadas em proteínas recombinantes. Neste sentido, os sistemas de expressão em células eucarióticas, como leveduras e células de mamíferos são considerados adequados para a produção de proteínas com aplicação biotecnológica. O objetivo principal deste trabalho contemplou a expressão das proteínas de fusão gDE7E6 do HPV-16 e do HPV-18 e a oncoproteína E7 do HPV-16 em células da levedura Pichia pastoris e expressão da gDE7E6 do HPV-16 e do HPV-18 em células de mamífero HEK293T e CHODG-44 para obtenção de antígenos purificados com futura aplicação em vacinas terapêuticas contra tumores associados ao HPV-16 e HPV-18. Os genes que codificam as proteínas gDE7E6 dos HPV-16 e HPV-18 e da E7 do HPV-16 foram clonados no vetor pPIC9K, os quais foram linearizados por digestão enzimática e utilizados na transformação da P. pastoris. A expressão das proteínas foi analisada nos tempos de 24, 48, 72 e 96 horas, no entanto, não foi observada a produção das proteínas no sobrenadante e nem no lisado celular. Diante desta constatação, iniciamos a expressão das proteínas gDE7E6 do HPV-16 e gDE7E6 do HPV-18 em células de mamíferos HEK293T e CHODG-44. As sequências genéticas das proteínas gDE7E6 do HPV-16 e do HPV-18 foram clonadas no vetor de expressão pNU1 e analisadas por digestão enzimática. Análises de SDS-PAGE e western blot demonstraram a expressão das proteínas gDE7E6 do HPV-16 e do HPV-18 em até 96 horas em células HEK293T. Em paralelo, realizamos a transfecção estável dos plasmídeos contendo as sequencias da gDE7E6 do HPV-16 e gDE7E6 do HPV-18 em células CHO-DG44. Com o intuito de aumentar a expressão das proteínas de interesse na população mista de CHODG-44, realizamos amplificação genômica com metotrexato (MTX), sendo possível observar aumento da expressão das proteínas, conforme aumento gradativo nas concentrações de MTX. Posteriormente, foram feitas tentativas para isolar um clone produtor das proteínas gDE7E6 HPV-16 e HPV-18, através de clonagem por diluição limitante e sistema automatizado, sendo possível isolar um clone para cada construção através de matriz semisólida, confirmado por western blot e citometria de fluxo. Apesar de demonstrar a expressão das proteínas de interesse em sistema de expressão baseado em células de mamífero, o rendimento obtido após a purificação por afinidade ao níquel foi extremamente baixo, o que dificulta a obtenção dos antígenos para fins vacinais. / Cervical cancer is one of the most common cancers among women, and persistent infection with HPV-16 and HPV-18 accounts for 70% of the cases. Available prophylactic vaccines are highly effective in preventing infection by the most prevalent types of HPV. However, this type of approach does not benefit women who already have precursor lesions or advanced cervical tumors, and the search for therapeutic approaches to this type of cancer is considered a necessity. Antigen quality represents a key aspect for the success of therapeutic vaccines based on recombinant proteins. In this sense, expression systems based in eukaryotic cells such as yeast and mammalian cells are considered suitable for the production of proteins with biotechnological applications. The main objective of this work was to express the gDE7E6 fusion proteins HPV-16 and HPV-18 and the E7 oncoprotein HPV-16 in Pichia pastoris and expression of gDE7E6 HPV-16 and HPV-18 in mammalian cells HEK293T and CHODG-44 to obtain purified antigens with future applications in therapeutic vaccines against HPV-16 and HPV-18 associated tumors. The genes encoding the gDE7E6 proteins HPV-16 and HPV-18 and E7 HPV-16 were cloned into the pPIC9K vector, which were linearized by enzymatic digestion and used in the transformation of P. pastoris. Expression of the proteins was analyzed at 24, 48, 72 and 96 hours, however, the production of the proteins in the supernatant and in the cell lysate was not observed. In light of this finding, we initiated the expression of gDE7E6 proteins HPV-16 and HPV-18 in mammalian cells HEK293T and CHODG-44. The genetic sequences of gDE7E6 proteins HPV-16 and HPV-18 were cloned into the pNU1 expression vector and analyzed by enzymatic digestion. SDSPAGE and western blot analyzes demonstrated expression of gDE7E6 proteins HPV-16 and HPV-18 within 96 hours in HEK293T cells. In parallel, we performed stable transfection of plasmids containing gDE7E6 HPV-16 and HPV-18 sequences into CHODG44 cells. In order to increase the expression of the proteins in the mixed population of CHODG-44, we performed genomic amplification with methotrexate (MTX), and it was possible to observe an increase in protein expression, as a gradual increase in MTX concentrations. Therefore, attempts were made to isolate a clone producing gDE7E6 proteins HPV-16 and HPV-18 by limiting dilution and automated system, being possible to isolate one clone for each construct through a semisolid matrix, confirmed by western blot and flow cytometry. Despite observing protein expression in mammalian cell-based expression system, the yield obtained after nickel affinity purification was extremely low, which makes it difficult to obtain the antigens for vaccine purposes.

O Câncer de colo uterino é um dos tumores mais freqüentes em mulheres brasileiras, assim como o câncer de mama. O desenvolvimento do câncer cervical e sua associação aos tipos oncogênicos de Papilomavírus Humanos (HPV) está bem documentada, sendo esta infecção um fator necessário para o desenvolvimento do câncer cervical. Os tipos de HPV 16 e 18 são os mais freqüentemente relacionados a tumores invasivos, denominados, portanto de alto risco. Entretanto, outros fatores como atividade sexual precoce, número de parceiros sexuais, números elevados de gestações e partos, uso prolongado de contraceptivos orais, deficiência nutricional, tabagismo, baixo nível sócio econômico, baixa imunidade e outras doenças sexualmente transmissíveis (DST) são fatores contribuintes para o desenvolvimento dessa patologia. Este estudo tem como objetivo conhecer a freqüência dos HPVs oncogênicos 16 e 18 na população de mulheres de uma área geográfica localizada na zona norte de Porto Alegre, bem como verificar as características associadas à presença deste vírus e sua relação com lesões do colo uterino. Trata-se de um estudo transversal cujo desfecho é a positividade ao HPV, em especial HPV 16 e 18, em mulheres de uma área geográfica localizada na zona norte de Porto Alegre. Um total de 1004 amostras de material do colo do útero foi coletado para realização do exame citopatológico convencional e para a identificação do HPV-DNA através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Colposcopia e biópsia foram realizadas sempre que a citologia estivesse alterada e/ou a PCR para o HPV-DNA fosse positiva. A freqüência de HPV e sua distribuição por faixa etária são descritas, bem como a sua associação com as variáveis estudadas através das Razões de Chances (RC) estimadas por regressão logística múltipla. Observou-se uma freqüência de HPV-DNA de 30,8% na população estudada. Destas 17,8% são mulheres positivas para o HPV 16 e 5,5% para o HPV 18. O fato de mulheres não terem um companheiro fixo (Razão de Chance (RC) =1,42; Intervalo de Confiança (IC) de 95%: 1,10-2,00) mostrou-se associado com a positividade para outros HPVs. O HPV 16 mostrou uma associação positiva com mulheres mais jovens ( 34 anos) (RC=2,48;IC95%:1,22-5,05). Quanto ao HPV 18, as mulheres fumantes mostraram uma associação postiva com o desfecho (RC=3,57; IC95%:1,26 –10,10). Os resultados mostramram uma elevada freqüência do HPV na população analisada, onde o mais freqüente foi o tipo oncogênico HPV 16, o que pode ser muito útil no planejamento da utilização de vacinas para o HPV. Os achados também sugerem uma associação positiva de infecção pelo HPV em mulheres sem companheiro fixo e mulheres jovens com a infecção pelo HPV 16 e mulheres fumantes com a infecção pelo HPV 18.

Objetivo: determinar a viabilidade da identificação do linfonodo-sentinela em pacientes com câncer invasor de colo uterino estádio Ib1. Material e Métodos: 16 pacientes consecutivas com câncer de colo uterino agendadas para histerectomia radical com linfadenectomia pélvica bilateral realizaram estudo para detecção de linfonodo-sentinela. Onze pacientes injetaram 1 mCi de tecnécio 99 (99Tc) em quatro pontos do estroma superficial do colo uterino ao redor do tumor, às 12, 3, 6 e 9 h ( 16 horas antes da cirurgia ). No dia da cirurgia, as pacientes foram submetidas ao mapeamento linfático com gamma-probe e azul patente injetado nos mesmos pontos que o 99Tc.Cinco pacientes realizaram a detecção apenas com azul patente. Resultados: foi detectado pelo menos um (1 a 3 por paciente) linfonodo-sentinela em cada uma das 15 pacientes (93,7 %) que realizaram a técnica combinada.Foi detectado pelo menos 1 linfonodo-sentinela em 4 pacientes ( 80% )com azul patente apenas. A maioria dos linfonodos-sentinela foi localizada nas regiões: obturadora (37 %), ilíaca externa (22,2 %) e inter-ilíacas (18,5 %). Seis pacientes (40 %) tiveram linfonodos-sentinela bilaterais. Dos 27 linfonodos-sentinela detectados, 11 (40,7 %) foram detectados pelo corante, 9 (33,3%) pela radioatividade e 7 (26 %) pela radioatividade e corante. O índice de detecção intra-operatória com o gamma-probe foi de 90,9 % ( 11 pacientes ). Destes, 7 linfonodos foram azul e quente (31,8 %), 6 linfonodos foram apenas azuis (27,2 %) e 9 linfonodos foram apenas quentes (40,9 %). A sensibilidade, especificidade e valor preditivo negativo para a detecção do linfonodo-sentinela foram 100%, 85,7 % e 100 % respectivamente. Conclusão: A combinação do radiofármaco 99Tc e azul patente é efetiva na detecção do linfonodosentinela em câncer de colo uterino inicial. / Objective: to establish the feasibility of sentinel lymph node identification in patients with stages Ib1 invasive cervical cancer. Material and Methods: 16 consecutive patients with cervical cancer, were scheduled for radical hysterectomy with bilateral pelvic lymphadenectomy, were submitted to sentinel lymph node detection. Eleven patients was injected 1 mCi of technetium-99 (99Tc) into four points of the superficial cervical stroma around the tumor, at the 12, 3, 6 and 9 o’clock positions (sixteen hours before surgery ). On the day of the surgery, the patients were submitted to gamma-probe-guided lymphatic mapping and patent blue dye was injected into the same points as the 99Tc. Five patients were submitted to detection with patent blue only. Results: at least one sentinel lymph node (one to three per patient) was detected in each of the 15 patients (93.7%) in whom a combination of both methods was used. At least one sentinel lymph node was detected in four patients ( 80 % ) with patent blue only. Most sentinel lymph nodes were identified in the obturator (37%), external iliac (22.2%) and interiliac (18.5%) regions. Six patients (40%) had bilateral sentinel lymph nodes. Of the 27 sentinel lymph nodes detected, 11 (40.7%) were identified by the blue-dye technique, 9 (33.3%) by radiation, and 7 (26%) by radiation and by the blue-dye technique. The intraoperative detection rate was 90.9% with gamma-probe only ( 11 patients ). Of these, 7 lymph nodes were blue-stained and hot (31.8), 6 were just blue-stained (27.2%) and 9 were just hot (40.9%). Sensitivity, specificity and the negative predictive value for sentinel lymph node detection were 100%, 85,7% and 100 % respectively. Conclusion: the combination of 99Tc and patent blue dye is effective in the detection of sentinel lymph nodes in early-stage cervical cancer.

O câncer cervical acomete anualmente cerca de 470.000 mulheres em todo o mundo e mais de 16.000 mulheres no Brasil. O desenvolvimento do câncer cervical e sua associação ao Papilomavírus Humano (HPV) estão bem documentados, sendo este o fator principal para o desenvolvimento do câncer cervical. A infecção genital por Chlamydia trachomatis é estudada como um co-fator no desenvolvimento de neoplasias intraepiteliais cervicais (NICs) e outras alterações celulares significativas em mulheres com histórico de infecção por HPV. Este estudo tem como objetivo conhecer a prevalência de infecção por HPV e Chlamydia trachomatis em uma amostra de mulheres assintomáticas de uma área geográfica localizada na zona norte de Porto Alegre, bem como verificar as características associadas à presença desta co-infecção e sua relação com lesões cervicais. Trata-se de um estudo transversal cujo desfecho é a positividade ao HPV e à Chlamydia trachomatis em uma amostra de mulheres assintomáticas de Porto Alegre. Um total de 1217 amostras de material do colo do útero foi coletado para realização do exame citopatológico e para a identificação do DNA-HPV e DNA-CT através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Colposcopia e biópsia foram realizadas sempre que a citologia estivesse alterada e/ou a PCR para o HPV-DNA fosse positiva. A prevalência de HPV e Chlamydia trachomatis e sua distribuição por faixa etária são descritas, bem como a sua associação com as variáveis estudadas através das Razões de Chances (RC) estimadas por regressão logística múltipla. Observou-se uma prevalência de HPV-DNA de 28,4% (n=346/1217), de CT-DNA de 12,6% (n=152/1208) e de co-infecção por HPV e CT de 6,5% (n=78/1208). Mulheres não brancas (Razão de Chance (RC) =1,60; Intervalo de Confiança (IC) de 95%:1,10-2,38),assalariadas (RC=1,74; IC95%:1,17-2,60) e com parceiro apresentando história de condiloma genital (RC=2,35; IC95%:1,17-4,72) mostraram-se associadas com a positividade para HPV. A infecção por CT mostrou uma associação positiva com mulheres que iniciaram a vida sexual antes dos vinte anos (RC=1,82; IC95%:1,05-3,15) e assalariadas (RC=1,93; IC95%:1,15-3,25). Quanto à co-infecção por HPV e CT, mulheres com mais de três de parceiros sexuais na vida (RC=2,02; IC 95%:1,12-3,65) apresentaram uma associação positiva com o desfecho. Com relação à citologia, tanto a infecção por HPV quanto a co-infecção apresentaram associação significativa com anormalidades citológicas (p≤0.001). Os resultados mostraram uma elevada prevalência de HPV, de CT e de co-infecção em uma amostra de mulheres assintomáticas reforçando dados relatados na literatura. A associação destas infecções com variáveis sócioeconômicas, de comportamento sexual e com lesões do colo uterino, indicam a importância de medidas para a promoção e prevenção de saúde com este alvo específico dentro da rotina de serviços de atenção primária. Desta forma, acredita-se que estes dados possam ser muito úteis no planejamento de programas, incluindo o controle de Doenças Sexualmente Transmissíveis e a utilização de vacinas para o HPV.

Background: O câncer de colo uterino é um grande problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Atinge cerca de meio milhão de mulheres, sendo que 50 % destas morrem. Os métodos visuais, alternativos á citologia e viáveis para países em desenvolvimento, têm sido avaliados mais intensamente na última década. Objetivos: Avaliar o desempenho da Fotografia Cervical Digital (FCD) na detecção do câncer do colo de útero e de suas lesões precursoras. Métodos: 176 mulheres foram avaliadas pelos métodos de Inspeção Visual com ácido acético (VIA), Inspeção Visual com lugol (VILI), Fotografia Cervical Digital com ácido acético (FCDA) e Fotografia Cervical Digital com lugol (FCDL). Destas, 36 foram classificadas pela histologia. Resultados: A concordância entre avaliadores observou valores de Kappa: Fotografia Cervical Digital com ácido acético, K=0,441, e Fotografia Cervical Digital com lugol, K=0,533. A concordância entre as inspeções a olho nu e as fotografias cervicais digitais após a utilização de ácido acético no colo uterino, K=0,559, e a concordância após a utilização da solução de lugol, K=0,507, considerada como concordância moderada em ambos os casos. Das 36 pacientes com avaliações histológicas, 20 dos 25 casos positivos foram corretamente avaliados tanto pela FCDA, como pela FCDL, demonstrando resultados similares aos descritos anteriormente. Conclusão: A FCD é um método promissor para o rastreamento do câncer de colo de útero e suas lesões precursoras, para países em desenvolvimento. / Background: Uterine cervix cancer is a major public health problem in Brazil and in the world. It affects half a million women with a death rate of 50%. The visual, alternative methods to cytology, considered viable for developing countries, are being assessed more intensively in the last decade. Objective: To evaluate the performance of Cervical Digital Photography (CDP) in detecting cervical cancer and its precursory lesions. Methods: A total of 176 women were evaluated by the following methods: Visual Inspection with Acetic Acid (VIA), Visual Inspection with Lugol’s Iodine (VILI), Cervical Digital Photography with Acetic Acid (CDPA) and Cervical Digital Photography with Lugol’s Iodine (CDPL). Among these, 36 were classified by histology. Results: The correlation between evaluators observed Kappa values: Cervical Digital Photography with acetic acid, K = 0.441, and Cervical Digital Photography with Lugol's Iodine, K = 0.533. The correlation between the naked eye and cervical digital photography inspection after using acetic acid in the uterine cervix, K = 0.559, and the correlation after using Lugol's Iodine solution, K = 0.507, were regarded as moderate in both cases. Of the 36 patients with histological evaluation, 20 of the 25 positive cases were correctly assessed both by the CDPA as well as by CDPL, showing similar results than those described previously. Conclusion: CDP is considered a more promising method for screening the uterine cervix cancer and its precursory lesions in developing countries.

Resumo não disponível.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-27T18:18:34Z No. of bitstreams: 1 SÉRGIO MENEZES AMARO FILHO.pdf: 3118907 bytes, checksum: 5ace372e7cf9ac4518a96c77052798ac (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-27T18:18:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SÉRGIO MENEZES AMARO FILHO.pdf: 3118907 bytes, checksum: 5ace372e7cf9ac4518a96c77052798ac (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O câncer cervical é o terceiro tipo de câncer mais comum entre mulheres no mundo. Dentre outros cofatores, a infecção pelo HPV de alto risco, tem sido bem documentada como fator necessário ao desenvolvimento desse tipo de câncer. A principal ação do HPV envolve a expressão massiva das oncoproteínas virais E6 e E7 que podem formar complexos específicos com proteínas supressoras de tumor, sendo capazes de alterar mecanismos do ciclo celular, modificando a expressão de proteínas celulares. Um dos principais avanços na medicina clínico patológica é o uso dessas proteínas como marcadores de forma a aumentar a acurácia do prognóstico e do próprio estadiamento do câncer cervical. Assim, a fim de reforçar a hipótese de que as proteínas associadas ao ciclo celular Ki-67, MCM-2, p53 e p16INK4a se encontram superexpressas no câncer cervical, foram analisadas em 87 amostras cervicais de pacientes com câncer invasivo (CCI) e 43 cérvix normais. Verificamos também se há uma expressão diferencial que pode ajudar a avaliação do estadiamento clínico da FIGO e quais tipos virais podem induzir a uma expressão diferencial dessas proteínas. Além disso, características sociodemográficas, comportamentais e clínicas das pacientes foram obtidas dos prontuários e analisadas. Para isso, a detecção de DNA de HPV foi realizada pela técnica da PCR e hibridização in situ. A expressão das proteínas foi observada por imunohistoquímica, seguida por quantificação manual e através do software ImagePro Plus. A análise estatística foi feita utilizando o software STATA/SE 10.1 aplicando os testes: Kruskall-Wallis, Student, Fisher e Qui-Quadrado. Nossos resultados mostraram forte associação (p<0,05) do CCI e dos estágios tumorais mais avançados (III e IV) com mulheres superiores a 55 anos, com mais de quatro gestações e sem escolaridade. A prevalência de DNA de HPV por PCR na população total foi de 73,4%. Nos grupos de CCI e controle foram, respectivamente, 94,3% e 29,3%. O tipo mais prevalente foi o HPV16 (70,8%), acompanhado pelo HPV33 (11,2%) e 35 (4,5%). Como esperado, foi observado aumento (p<0,05) na expressão de Ki-67, MCM-2, p53 e p16INK4a no CCI, quando comparados ao controle. A proteína p16INK4a com expressão difusa, citoplasmática e nuclear esteve associada ao câncer. Ki-67 apresentou forte expressão (>50%) conforme o agravamento da doença. Não foi observada associação entre a expressão de MCM-2, p53 e p16, e o estadiamento do tumor. Como conclusões, foram observadas maiores chances no desenvolvimento do CCI em mulheres com idades superiores a 55 anos, com mais de quatro gestações e sem escolaridades, estando esses fatores associados, também, à progressão tumoral. Apenas o marcador Ki-67 associouse ao estágio do CCI. Os tipos mais prevalentes encontrados, HPV16, 33, 35, 67 e 58, sugerem que novos estudos devam ser considerados para implementação de vacinação contra o HPV no Brasil. / Cervical cancer is the thrid most common cancer among women worldwide. Beside others cofactors, infection with high risk HPV has been well documented as a necessary cause for cancer development. The main action involves the expression of massive HPV E6 and E7 viral oncoproteins that can form specific complexes with tumor suppressor proteins that are able of changing mechanisms of the cell cycle, modifying the expression of cellular proteins. One of the major advances in medicine clinical pathology is the use of these proteins as markers in order to improve the accuracy of prognosis and the cervical cancer stages. Thus, in order to reinforce strengthen the hypothesis that the proteins involved in cell cycle Ki-67, MCM-2, p53 and p16INK4a are over expressed in the uterine cervix of patients with cervical cancer, we analyzed 87 samples from patients with invasive cervical cancer (ICC) that were compared with 43 normal cervices (controls). Was verified also whether there is a differential expression that can help to assess the FIGO staging for ICC and which HPV viral types can induce a differential expression of these proteins. Moreover sociodemographic, behavioral and clinical characteristics of patients were obtained from medical records and analyzed. Therefore, the detection of HPV DNA was performed by PCR and in situ hybridization. By means of immunohistochemistry the expression of Ki-67, MCM2, p53 and p16 were analyzed. Statistical analysis was performed using STATA / SE 1.10 by applying the Kruskal-Wallis test, T-Student, chi-square and Fisher. Our results showed a strong correlation (p<0.05) of the CCI and the later stages of the cancer in women over 55 years, more than four pregnancies and no school education. The overall HPV DNA prevalence was 73.4%. On the ICC group and control group the prevalence was, respectively, 94.3% and 29.3%. The most prevalent HPV types were HPV16 (70.8%), HPV33 (11.2%) followed by HPV 35 (4.5%). Women with HPV16 were associated with advanced age (50.8 years) compared to women with other types (58.2 years). As expected, was observed an increase in Ki-67, MCM-2, p53 and p16 expression in CCI (p<0.05), compared to control. The expression of p16 protein with diffuse cytoplasmic and nuclear staining was associated with cancer. The Ki-67 showed a strong expression (> 50%) as the later stage of the disease. There was no association between the expression of MCM-2, p53 and p16 and tumor staging. In conclusion, we observed higher risks of ICC development in older ages, multiple pregancies and no school education. Only the Ki-67 marker was associated with the stage of the ICC. The most prevalent HPV types found, HPV 16, 33, 35, 67 and 58, suggest that new studies should be evaluated and considered on implementation of HPV vaccination in Brazil.

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