O eugenol é um composto fenólico natural que apresenta atividade antioxidante e antimicrobiana e o seu uso como substituto de aditivos sintéticos em alimentos tem sido proposto. Contudo, pela sua instabilidade frente aos agentes externos (luz, oxigênio e calor), seu uso no processamento de alimentos é comprometido. Assim, a microencapsulação é uma alternativa viável para sua aplicação. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito da variação das condições operacionais do atomizador (temperatura do ar de entrada e vazão de alimentação) na obtenção de eugenol microencapsulado em carragena, e estudar a influência da combinação de carragena e proteína do farelo de arroz, albumina sérica bovina e proteína do soro de leite com baixo teor de lactose na microencapsulação de eugenol. Em uma primeira etapa, um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) do tipo 22 com duas variáveis independentes (temperatura do ar de secagem e vazão de alimentação), três pontos centrais e quatro pontos axiais, foi desenvolvido para avaliar as condições operacionais de atomização. A quantificação do eugenol, recuperação (RE %) e a eficiência de encapsulação (EE %) foi avaliadada por espectrofometria UV-Vis e a morfologia por microscopia ótica. Na segunda etapa, a influência do uso de carragena em combinação com proteína do farelo de arroz, albumina sérica bovina e proteína do soro de leite com baixo teor de lactose foi avaliada por meio de um planejamento de mistura do tipo simplex-centroid. A caracterização das microcápsulas foi determinada pela RE % e EE % por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), análise termogravimétrica acoplada à espectrofotometria de infravermelho e, morfologia por microscopia eletrônica de varredura. Para o DCCR, o valor máximo de RE% obtido foi de 12% e as condições operacionais estudadas não influenciaram significativamente (p > 0,05). Já a EE% variou de 18,0 a 84,8% e, o termo quadrático para vazão de alimentação apresentou influência significativa (p ≤ 0,05) na resposta avaliada. Para o planejamento simplex-centroid, o valor médio de RE % das microcápsulas variou de 37,9 a 104,5% e o de EE% de 0,0 a 79,4%, sendo que ambas as respostas foram influenciadas (p ≤ 0,05%) pelos agentes encapsulantes da formulação. A albumina sérica bovina apresentou boa propriedade de estabilização da suspensão (RE % = 86,5) e em combinação com proteína de farelo do arroz possibilitou maior EE % (79,4). As microcápsulas exibiram diâmetro médio entre 3,4 a 4,6 µm e a morfologia das microcápsulas produzidas com a combinação da albumina sérica bovina e a proteína do farelo de arroz apresentaram superfícies esféricas com ausência de fissuras ou deformações. As análises térmicas e de FTIR, confirmam a eficiência de encapsulação do processo, indicando uma possível interação entre os agentes encapsulantes e o eugenol. / Eugenol is a natural phenolic compound with antioxidant and antimicrobial activity and its use as substitute the synthetic additives in food has been suggested. However, due eugenol instability to extern agents (light, oxygen and hot), its use in food processing has been hampered. Therefore, microencapsulation is a viable alternative for your application. The aims of this work were evaluate the effect of variation of operating conditions of spray drying (inlet air temperature and feed flow rate) in obtainment eugenol microencapsulated in carrageenan, and study the influence of combination of carrageenan and protein from rice bran protein, bovine serum albumin and, whey protein with low lactose content in the eugenol microencapsulation. Composite Central Desing (CCD) of type 22 with two independent variables (inlet air temperature, and feed flow rate), three key points and four axial points, were developed to assess the operational conditions of spray dryer. Eugenol quantification, recovery (% ER) and encapsulation efficiency (EE%) of process were evaluated by UV-Vis spectrophotometry and morphology by optical microscopy. In the second stage of the study, the influence of the use of carrageenan in combination with rice bran protein, bovine serum albumin and whey protein with low lactose content was evaluated by simplex-centroid desing. Microcapsules were characterizated by Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) (ER and EE%), thermogravimetric analysis coupled to the infrared spectrophotometry, and morphology by scanning electron microscopy (SEM). In the CCD, the maximum ER% value was 12% and the operating conditions studied did not influence significantly (p > 0.05). EE% varied from 18.0 to 84.8% and the quadratic term to feed flow rate presented significant influence (p ≤ 0.05) in the evaluated answer. In the simplex-centroid mixture desing the ER% average of microcapsules ranged from 37.9 to 104.5% and EE% 0.0 to 79.4%, being that both responses were influenced (p ≤ 0.05%) by encapsulating agents of formulation. Bovine serum albumin presented good stabilizing property of suspension (ER% = 86.5) and in combination with rice bran protein resulted greater EE% (79.4). Microcapsules exhibited a average diameter range from 3.4 to 4.6 µm and the microcapsules morphology produced combination with the bovine serum albumin and protein rice bran showed surface with absence no cracks or deformation. Thermal and FTIR analysis confirmed the encapsulation efficiency of the process, observed a possible interaction between the encapsulating agents and eugenol.

O eugenol é um composto fenólico natural que apresenta atividade antioxidante e antimicrobiana e o seu uso como substituto de aditivos sintéticos em alimentos tem sido proposto. Contudo, pela sua instabilidade frente aos agentes externos (luz, oxigênio e calor), seu uso no processamento de alimentos é comprometido. Assim, a microencapsulação é uma alternativa viável para sua aplicação. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito da variação das condições operacionais do atomizador (temperatura do ar de entrada e vazão de alimentação) na obtenção de eugenol microencapsulado em carragena, e estudar a influência da combinação de carragena e proteína do farelo de arroz, albumina sérica bovina e proteína do soro de leite com baixo teor de lactose na microencapsulação de eugenol. Em uma primeira etapa, um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) do tipo 22 com duas variáveis independentes (temperatura do ar de secagem e vazão de alimentação), três pontos centrais e quatro pontos axiais, foi desenvolvido para avaliar as condições operacionais de atomização. A quantificação do eugenol, recuperação (RE %) e a eficiência de encapsulação (EE %) foi avaliadada por espectrofometria UV-Vis e a morfologia por microscopia ótica. Na segunda etapa, a influência do uso de carragena em combinação com proteína do farelo de arroz, albumina sérica bovina e proteína do soro de leite com baixo teor de lactose foi avaliada por meio de um planejamento de mistura do tipo simplex-centroid. A caracterização das microcápsulas foi determinada pela RE % e EE % por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), análise termogravimétrica acoplada à espectrofotometria de infravermelho e, morfologia por microscopia eletrônica de varredura. Para o DCCR, o valor máximo de RE% obtido foi de 12% e as condições operacionais estudadas não influenciaram significativamente (p > 0,05). Já a EE% variou de 18,0 a 84,8% e, o termo quadrático para vazão de alimentação apresentou influência significativa (p ≤ 0,05) na resposta avaliada. Para o planejamento simplex-centroid, o valor médio de RE % das microcápsulas variou de 37,9 a 104,5% e o de EE% de 0,0 a 79,4%, sendo que ambas as respostas foram influenciadas (p ≤ 0,05%) pelos agentes encapsulantes da formulação. A albumina sérica bovina apresentou boa propriedade de estabilização da suspensão (RE % = 86,5) e em combinação com proteína de farelo do arroz possibilitou maior EE % (79,4). As microcápsulas exibiram diâmetro médio entre 3,4 a 4,6 µm e a morfologia das microcápsulas produzidas com a combinação da albumina sérica bovina e a proteína do farelo de arroz apresentaram superfícies esféricas com ausência de fissuras ou deformações. As análises térmicas e de FTIR, confirmam a eficiência de encapsulação do processo, indicando uma possível interação entre os agentes encapsulantes e o eugenol. / Eugenol is a natural phenolic compound with antioxidant and antimicrobial activity and its use as substitute the synthetic additives in food has been suggested. However, due eugenol instability to extern agents (light, oxygen and hot), its use in food processing has been hampered. Therefore, microencapsulation is a viable alternative for your application. The aims of this work were evaluate the effect of variation of operating conditions of spray drying (inlet air temperature and feed flow rate) in obtainment eugenol microencapsulated in carrageenan, and study the influence of combination of carrageenan and protein from rice bran protein, bovine serum albumin and, whey protein with low lactose content in the eugenol microencapsulation. Composite Central Desing (CCD) of type 22 with two independent variables (inlet air temperature, and feed flow rate), three key points and four axial points, were developed to assess the operational conditions of spray dryer. Eugenol quantification, recovery (% ER) and encapsulation efficiency (EE%) of process were evaluated by UV-Vis spectrophotometry and morphology by optical microscopy. In the second stage of the study, the influence of the use of carrageenan in combination with rice bran protein, bovine serum albumin and whey protein with low lactose content was evaluated by simplex-centroid desing. Microcapsules were characterizated by Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) (ER and EE%), thermogravimetric analysis coupled to the infrared spectrophotometry, and morphology by scanning electron microscopy (SEM). In the CCD, the maximum ER% value was 12% and the operating conditions studied did not influence significantly (p > 0.05). EE% varied from 18.0 to 84.8% and the quadratic term to feed flow rate presented significant influence (p ≤ 0.05) in the evaluated answer. In the simplex-centroid mixture desing the ER% average of microcapsules ranged from 37.9 to 104.5% and EE% 0.0 to 79.4%, being that both responses were influenced (p ≤ 0.05%) by encapsulating agents of formulation. Bovine serum albumin presented good stabilizing property of suspension (ER% = 86.5) and in combination with rice bran protein resulted greater EE% (79.4). Microcapsules exhibited a average diameter range from 3.4 to 4.6 µm and the microcapsules morphology produced combination with the bovine serum albumin and protein rice bran showed surface with absence no cracks or deformation. Thermal and FTIR analysis confirmed the encapsulation efficiency of the process, observed a possible interaction between the encapsulating agents and eugenol.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES

Durante muito tempo, os fármacos quirais de origem sintética foram comercializados predominantemente como racematos. Atualmente, sabe-se que os enantiômeros de um fármaco quiral podem apresentar propriedades farmacocinéticas, farmacodinâmicas e toxicológicas bastante distintas. Assim sendo, técnicas analíticas enantiosseletivas são fundamentais para a pesquisa e para o controle da qualidade desses fármacos. O cetoprofeno e o fenoprofeno são dois fármacos quirais, pertencentes à classe dos agentes antiinflamatórios não-esteróides derivados do ácido propiônico. Seus enantiômeros apresentam significativas diferenças farmacodinâmicas. Por essa razão, pretendeu-se desenvolver, no presente trabalho, métodos de separação enantiomérica para ambos os fármacos. Para tanto, utilizou-se a técnica de cromatografia a líquido de alta eficiência em fase estacionária quiral (coluna Whelk-O 1), nos modos normal e reverso. Abordagens uni- e multivariadas foram utilizadas para desenvolver e otimizar os métodos de separação. Pôde-se observar que a enantiosseletividade exibida pela coluna Whelk-O 1 em fase normal é superior àquela exibida em fase reversa. Empregando a CLAE em fase normal, foi possível desenvolver métodos de separação apropriados para os enantiômeros de ambos os fármacos. Em fase reversa, no entanto, apenas os enantiômeros do fenoprofeno puderam ser separados satisfatoriamente. / For a long time, the synthetic chiral drugs were marketed mainly as racemates. Currently, it is known that enantiomers of chiral drugs may exhibit quite different pharmacokinetic, pharmacodynamic and toxicological properties. Therefore, enantioselective analytical techniques are critical to the research and quality control of these drugs. Ketoprofen and fenoprofen are two chiral drugs, belonging to the class of propionic acid-derived nonsteroidal anti-inflammatory agents. Their enantiomers show significant pharmacodynamic differences. For that reason, we aimed to develop, in this work, separation methods for the enantiomers of both drugs. In order to do so, it was used the high-performance liquid chromatography technique and the Whelk-O 1 column as the chiral stationary phase, under normal- and reversed-phase modes. Uni- and multivariate approaches were used to develop and optimize the separation methods. It was noted that the enantioselectivity exhibited by the Whelk-O 1 column under normal-phase mode is higher than that exhibited under reversed-phase mode. Under normal-phase mode, it was possible to achieve an appropriate separation for the enantiomers of both drugs. Under reversed-phase mode, however, only the enantiomers of fenoprofen could be successfully separated.

Durante muito tempo, os fármacos quirais de origem sintética foram comercializados predominantemente como racematos. Atualmente, sabe-se que os enantiômeros de um fármaco quiral podem apresentar propriedades farmacocinéticas, farmacodinâmicas e toxicológicas bastante distintas. Assim sendo, técnicas analíticas enantiosseletivas são fundamentais para a pesquisa e para o controle da qualidade desses fármacos. O cetoprofeno e o fenoprofeno são dois fármacos quirais, pertencentes à classe dos agentes antiinflamatórios não-esteróides derivados do ácido propiônico. Seus enantiômeros apresentam significativas diferenças farmacodinâmicas. Por essa razão, pretendeu-se desenvolver, no presente trabalho, métodos de separação enantiomérica para ambos os fármacos. Para tanto, utilizou-se a técnica de cromatografia a líquido de alta eficiência em fase estacionária quiral (coluna Whelk-O 1), nos modos normal e reverso. Abordagens uni- e multivariadas foram utilizadas para desenvolver e otimizar os métodos de separação. Pôde-se observar que a enantiosseletividade exibida pela coluna Whelk-O 1 em fase normal é superior àquela exibida em fase reversa. Empregando a CLAE em fase normal, foi possível desenvolver métodos de separação apropriados para os enantiômeros de ambos os fármacos. Em fase reversa, no entanto, apenas os enantiômeros do fenoprofeno puderam ser separados satisfatoriamente. / For a long time, the synthetic chiral drugs were marketed mainly as racemates. Currently, it is known that enantiomers of chiral drugs may exhibit quite different pharmacokinetic, pharmacodynamic and toxicological properties. Therefore, enantioselective analytical techniques are critical to the research and quality control of these drugs. Ketoprofen and fenoprofen are two chiral drugs, belonging to the class of propionic acid-derived nonsteroidal anti-inflammatory agents. Their enantiomers show significant pharmacodynamic differences. For that reason, we aimed to develop, in this work, separation methods for the enantiomers of both drugs. In order to do so, it was used the high-performance liquid chromatography technique and the Whelk-O 1 column as the chiral stationary phase, under normal- and reversed-phase modes. Uni- and multivariate approaches were used to develop and optimize the separation methods. It was noted that the enantioselectivity exhibited by the Whelk-O 1 column under normal-phase mode is higher than that exhibited under reversed-phase mode. Under normal-phase mode, it was possible to achieve an appropriate separation for the enantiomers of both drugs. Under reversed-phase mode, however, only the enantiomers of fenoprofen could be successfully separated.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The acrylamide monomer is used mainly for the production of polyacrylamides, flocculation aids used in water supply systems. While its polymeric form does not pose health risks, the World Health Organization warns of the presence of residual acrylamide in flocculants, which would be responsible for releasing this contaminant in tap water. Acrylamide is considered as probably carcinogenic to humans, and has its standard for drinking water set at 0.5 μg L -1 in Brazil and in the United States, and 0.1 μg L-1 in Europe. Given the concern of the possibility of drinking water intake with the presence of acrylamide and lack of constant monitoring of this parameter, the objective of this study was to evaluate the application of photolytic processes for degradation of acrylamide and develop analytical methodology to quantify the acrylamide levels in trait, based on the Brazilian benchmark. The study was conducted following up the following steps: (I) development of bench photolytic reactor in Engineering Laboratory of Environment - LEMA, the Federal University of Santa Maria - UFSM; (II) conducting initial tests of direct photolysis (UV) photolysis combined with hydrogen peroxide (UV / H2O2) and use of hydrogen peroxide in the built reactor; (III) acrylamide analysis of development in the range of 0.5 to 5 mg L-1 via liquid chromatography with ultraviolet detection for monitoring the degradation in Environmental Analytical Chemistry Laboratory - LQAA, from the Chemistry Institute of the Federal University of Rio Grande do Sul - IQ-UFRGS; (IV) adequacy of degradation parameters and carrying out final tests of photolysis with lamp cooled reactor and analysis of results and preparation of the degradation kinetics, the LQAA; (V) defining parameters for most appropriate method of solid phase extraction to acrylamide; and (VI) adequacy of liquid chromatography via acrylamide analysis methodology of high efficiency with ultraviolet detection for a lower concentration range and validation of the method. The results demonstrated that acrylamide is slowly degraded via direct photolysis (k = 0.0143 mg L-1 min-1) and almost instantaneously when adding hydrogen peroxide (UV/H2O2), although alone peroxide has no effect. As for the method SPE according to the literature, active carbon is the most efficient for solid concentration of acrylamide. Thus, activated carbon was used cartridge for this step to give a satisfactory recovery of 72% acrylamide. The method developed via HPLC-UV showed good results as to the validation parameters of standard solutions. Same quality was not obtained when evaluated SPE-HPLC-UV conjunction with real fortified sample, probably due to the large number of possible interferences present in drinking water, coupled with the high solubility of acrylamide and difficulty of retention. The improvement of these analytical conditions should be required to make feasible the use of this method for the analysis of drinking water. / A acrilamida é um monômero utilizado principalmente para produção de poliacrilamidas, auxiliares de floculação empregadas em sistemas de abastecimento de água. Embora sua forma polimérica não represente riscos à saúde, a Organização Mundial da Saúde alerta para a presença de residuais de acrilamida nos floculantes, o que seria responsável por liberar esse contaminante na água tratada. Acrilamida é considerada como provavelmente carcinogênica para humanos, e tem seu padrão para água potável estabelecido em 0,5 μg L-1 no Brasil e nos Estados Unidos da América, e de 0,1 μg L-1 na Europa. Diante da preocupação da possibilidade de ingestão de água potável com a presença de acrilamida e da falta de monitoramento constante desse parâmetro, o objetivo desse trabalho foi avaliar a aplicação de processos fotolíticos para degradação da acrilamida e desenvolver metodologia analítica capaz de quantificar a acrilamida em níveis traço, baseado no valor de referência brasileiro. O estudo foi realizado seguindo-se as seguintes etapas: (I) desenvolvimento de reator fotolítico de bancada no Laboratório de Engenharia do Meio Ambiente - LEMA, na Universidade Federal de Santa Maria UFSM; (II) realização de testes iniciais de fotólise direta (UV), fotólise conjugada com peróxido de hidrogênio (UV/H2O2) e uso de peróxido de hidrogênio no reator construído; (III) desenvolvimento de análise de acrilamida na faixa de 0,5 a 5 mg L-1 via cromatografia a líquido com detecção por ultravioleta para acompanhamento da degradação, no Laboratório de Química Analítica Ambiental LQAA, do Instituto de Química da Universidade Federal do Rio Grande do Sul IQ-UFRGS; (IV) adequação dos parâmetros de degradação e realização dos testes finais de fotólise com reator de lâmpada resfriada, bem como análise dos resultados e avaliação da cinética de degradação, no LQAA; (V) definição de parâmetros para escolha do método mais adequado de extração em fase sólida para acrilamida; e (VI) adequação da metodologia de análise de acrilamida via cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por ultravioleta para uma menor faixa de concentração e validação do método. Os resultados demonstraram que a acrilamida é lentamente degradada via fotólise direta (k = 0,0143 mg L-1 min-1) e, praticamente, de forma instantânea quando se adiciona peróxido de hidrogênio (UV/H2O2), embora, isoladamente, o peróxido não tenha qualquer efeito. Quanto ao método de EFS, de acordo com a literatura, o carvão ativo é o mais eficiente sólido para concentração de acrilamida. Assim, foi utilizado cartucho de carvão ativo para essa etapa, obtendo-se uma recuperação satisfatória de 72 % de acrilamida. O método desenvolvido via CLAE-UV demonstrou bons resultados quanto aos parâmetros de validação em soluções padrão. No entanto, os resultados não foram tão bons quando esta metodologia (EFS-CLAE-UV) foi aplicada à amostra real fortificada, provavelmente pela presença de grande quantidade de interferentes na água potável, aliada à grande solubilidade da acrilamida e dificuldade da sua retenção. A melhoria dessas condições analíticas deve ser pretendida a fim de tornar viável a utilização do método para análise de acrilamida em água potável.

O monitoramento terapêutico da concentração de vancomicina é uma forma de melhorar a segurança e a eficiência no tratamento com este antibiótico. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é considerada padrão ouro para a quantificação desta droga. No entanto a análise exige que sejam realizados vários procedimentos de purificação e análise da amostra, o que reduz sua aplicabilidade ao uso clínico. Atualmente, não há consenso quanto aos níveis séricos adequados ao tratamento do neonato ou de como as doses devem ser ajustadas. Este trabalho propõe um protocolo de monitorização terapêutica da vancomicina e desenvolve e valida um método simplificado, de baixo custo e menor volume de amostra necessário para quantificação da concentração sérica da vancomicina através de CLAE com detecção por arranjo de diodos. As amostras foram extraídas por precipitação de proteínas com ácido trifluoroacético (ATF), o sobrenadante foi injetado diretamente no sistema cromatográfico. A fase móvel consistiu de ATF à concentração de 0,014% (pH 2.800) em água ultrapura e acetonitrila (92:8, v/v), sob fluxo de 2 mL/min por eluição em método isocrático e temperatura de 40 oC. As respostas foram monitoradas no comprimento de onda de 230,9 nm. A validação foi conduzida de acordo com a resolução da RDC n.o 27, de 17 de maio de 2012 da ANVISA. O analito e o padrão interno (7-hidroxicumarina) foram eluídos em torno de 5.1 min e 10.3 min respectivamente. A linearidade do método foi determinada entre 2 e 70 mg/L com correlação linear de superior a 0.999. O método mostrou-se adequado a aplicação proposta, com vantagens volume de amostra exigido, o processo de extração simplificado e resultados satisfatórios com relação às precisão, exatidão, estabilidade e seletividade. O método de análise testado em 17 amostras reais de 10 pacientes com resultados satisfatórios. O protocolo de monitorização terapêutica foi adequadamente desenvolvido. / Therapeutic monitoring of vancomycin concentration can improve the safety and efficiency of the treatment with this antibiotic. High-performance liquid chromatography (HPLC) is considered gold standard for quantification for this drug. However the analysis requires multiple procedures for purification and analysis of the sample, which reduces their applicability for clinical use. There`s currently no consensus on vancomycin serum target levels and dose adjustment among newborns. This paper proposes a vancomycin therapeutic monitoring protocol and develops and validates a low cost, simplified method, with smaller sample volume requirement for serum concentration of vancomycin determination by using HPLC with diode array. Samples were extracted by protein precipitation with trifluoroacetic acid (TFA), supernatant was injected directly into the chromatographic system. Mobile phase consisted of TFA 0.014% (pH 2.800) in ultrapure water and acetonitrile (92:8, v /v) under flow rate of 2 mL / min eluting in isocratic method in 40oC. Response were monitored at a wavelength of 230.9 nm. Validation was conducted in accordance with the resolution of the RDC No. 27 of May 17, 2012 ANVISA. Vancomycin and internal standard (7-hydroxycoumarin) were eluted at approximately 5.1 min. and 10.3 min respectively. Linearity was assessed between 2 and 70 mg /L with linear correlation greater than 0.999. The method proved to be suitable for the proposed application, with the advantages of less sample volume required, simplified extraction and achieved satisfactory results of precision, accuracy, stability and selectivity. This method was tested in 17 real samples from 10 patients with satisfactory results. The drug monitoring protocol was successfully developed.

CAPES / As análises de rotina de quantificação dos ácidos orgânicos e açúcares são comumente métodos demorados que envolvem o uso e preparo de inúmeros reagentes, necessitam de profissional treinado, disponibilidade de equipamentos específicos e são onerosos. Neste contexto, tem sido crescente o investimento em pesquisas que tenham como finalidade o desenvolvimento de métodos substitutivos aos de referência, sendo estes mais rápidos, baratos e simples, e a espectroscopia no infravermelho têm se destacado nesse sentido. No presente estudo foram desenvolvidos modelos de calibração multivariada para a determinação simultânea e quantitativa dos ácidos ascórbico, cítrico, málico, tartárico e dos açúcares sacarose, glicose e frutose, bem como os sólidos solúveis totais em sucos e néctares de fruta e modelos de classificação por ACP. Utilizou-se o método de espectroscopia no infravermelho próximo (Near Infrared, NIR) em associação ao método de regressão de mínimos quadrados parciais (PLS). Foram utilizadas 42 amostras entre sucos e néctares de fruta comercialmente disponíveis no comércio local. Para a construção dos modelos foram realizadas as análises de referência com uso da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e a refratometria para a análise dos sólidos solúveis totais. Posteriormente, a aquisição dos espectros foi realizada em triplicata, na faixa espectral de 12.500 a 4.000 cm-1. Os melhores modelos foram aplicados na quantificação dos analitos em estudo em amostras de sucos naturais e sucos produzidos na Região Sudoeste do Paraná. Os sucos utilizados na aplicação dos modelos também passaram por análises físico-químicas. A validação da metodologia cromatográfica demostrou resultados satisfatórios, visto que as curvas de calibração externa obtiveram R2 acima de 0,98 e coeficientes de variação (%CV) para repetibilidade e precisão intermediária abaixo de 8,83%. Por meio da Análise de Componentes Principais (PCA) foi possível separar as amostras de sucos em dois grandes grupos, uva e maçã e tangerina e laranja, enquanto que para os néctares os grupos separaram goiaba e abacaxi de uva e maçã. Diferentes métodos de validação, além de pré-processamentos que foram empregados separadamente e em combinação, obtiveram modelos de calibração multivariados com erros quadráticos médios de previsão (RMSEP) e validação cruzada (RMSECV) abaixo de 1,33 e 1,53 g.100 mL-1 respectivamente e R2 acima de 0,771, exceto para ácido málico. As análises físico-químicas possibilitaram a caracterização das bebidas, incluindo a faixa de pH de trabalho (variação de 2,83 a 5,79) e acidez dentro dos parâmetros da legislação para cada sabor. Os modelos de regressão comprovaram a possibilidade de se determinar simultaneamente os ácidos ascórbico, cítrico, málico e tartárico com sucesso, além da sacarose, glicose e frutose por meio de apenas um espectro, sugerindo que os modelos são economicamente viáveis para o controle de qualidade e padronização de produto na indústria de processamento de sucos de frutas e néctares. / The routine analysis for quantization of organic acids and sugars are generally slow methods that involve the use and preparation of several reagents, require trained professional, the availability of special equipment and is expensive. In this context, it has been increasing investment in research whose purpose is the development of substitutive methods to reference, which are faster, cheap and simple, and infrared spectroscopy have been highlighted in this regard. The present study developed multivariate calibration models for the simultaneous and quantitative determination of ascorbic acid, citric, malic and tartaric and sugars sucrose, glucose and fructose, and soluble solids in juices and fruit nectars and classification models for ACP. We used methods of spectroscopy in the near infrared (Near Infrared, NIR) in association with the method regression of partial least squares (PLS). Were used 42 samples between juices and fruit nectars commercially available in local shops. For the construction of the models were performed with reference analysis using high-performance liquid chromatography (HPLC) and refractometry for the analysis of soluble solids. Subsequently, the acquisition of the spectra was done in triplicate, in the spectral range 12500 to 4000 cm-1. The best models were applied to the quantification of analytes in study on natural juices and juice samples produced in the Paraná Southwest Region. The juices used in the application of the models also underwent physical and chemical analysis. Validation of chromatographic methodology has shown satisfactory results, since the external calibration curve obtained R-square value (R2) above 0.98 and coefficient of variation (%CV) for intermediate precision and repeatability below 8.83%. Through the Principal Component Analysis (PCA) was possible to separate samples of juices into two major groups, grape and apple and tangerine and orange, while for nectars groups separated guava and grape, and pineapple and apple. Different validation methods, and pre-processes that were used separately and in combination, were obtained with multivariate calibration models with average forecast square error (RMSEP) and cross validation (RMSECV) errors below 1.33 and 1.53 g.100 mL-1, respectively and R2 above 0.771, except for malic acid. The physicochemical analysis enabled the characterization of drinks, including the pH working range (variation of 2.83 to 5.79) and acidity within the parameters Regulation for each flavor. Regression models have demonstrated the possibility of determining both ascorbic acids, citric, malic and tartaric with successfully, besides sucrose, glucose and fructose by means of only a spectrum, suggesting that the models are economically viable for quality control and product standardization in the fruit juice and nectars processing industry.

CAPES / As análises de rotina de quantificação dos ácidos orgânicos e açúcares são comumente métodos demorados que envolvem o uso e preparo de inúmeros reagentes, necessitam de profissional treinado, disponibilidade de equipamentos específicos e são onerosos. Neste contexto, tem sido crescente o investimento em pesquisas que tenham como finalidade o desenvolvimento de métodos substitutivos aos de referência, sendo estes mais rápidos, baratos e simples, e a espectroscopia no infravermelho têm se destacado nesse sentido. No presente estudo foram desenvolvidos modelos de calibração multivariada para a determinação simultânea e quantitativa dos ácidos ascórbico, cítrico, málico, tartárico e dos açúcares sacarose, glicose e frutose, bem como os sólidos solúveis totais em sucos e néctares de fruta e modelos de classificação por ACP. Utilizou-se o método de espectroscopia no infravermelho próximo (Near Infrared, NIR) em associação ao método de regressão de mínimos quadrados parciais (PLS). Foram utilizadas 42 amostras entre sucos e néctares de fruta comercialmente disponíveis no comércio local. Para a construção dos modelos foram realizadas as análises de referência com uso da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e a refratometria para a análise dos sólidos solúveis totais. Posteriormente, a aquisição dos espectros foi realizada em triplicata, na faixa espectral de 12.500 a 4.000 cm-1. Os melhores modelos foram aplicados na quantificação dos analitos em estudo em amostras de sucos naturais e sucos produzidos na Região Sudoeste do Paraná. Os sucos utilizados na aplicação dos modelos também passaram por análises físico-químicas. A validação da metodologia cromatográfica demostrou resultados satisfatórios, visto que as curvas de calibração externa obtiveram R2 acima de 0,98 e coeficientes de variação (%CV) para repetibilidade e precisão intermediária abaixo de 8,83%. Por meio da Análise de Componentes Principais (PCA) foi possível separar as amostras de sucos em dois grandes grupos, uva e maçã e tangerina e laranja, enquanto que para os néctares os grupos separaram goiaba e abacaxi de uva e maçã. Diferentes métodos de validação, além de pré-processamentos que foram empregados separadamente e em combinação, obtiveram modelos de calibração multivariados com erros quadráticos médios de previsão (RMSEP) e validação cruzada (RMSECV) abaixo de 1,33 e 1,53 g.100 mL-1 respectivamente e R2 acima de 0,771, exceto para ácido málico. As análises físico-químicas possibilitaram a caracterização das bebidas, incluindo a faixa de pH de trabalho (variação de 2,83 a 5,79) e acidez dentro dos parâmetros da legislação para cada sabor. Os modelos de regressão comprovaram a possibilidade de se determinar simultaneamente os ácidos ascórbico, cítrico, málico e tartárico com sucesso, além da sacarose, glicose e frutose por meio de apenas um espectro, sugerindo que os modelos são economicamente viáveis para o controle de qualidade e padronização de produto na indústria de processamento de sucos de frutas e néctares. / The routine analysis for quantization of organic acids and sugars are generally slow methods that involve the use and preparation of several reagents, require trained professional, the availability of special equipment and is expensive. In this context, it has been increasing investment in research whose purpose is the development of substitutive methods to reference, which are faster, cheap and simple, and infrared spectroscopy have been highlighted in this regard. The present study developed multivariate calibration models for the simultaneous and quantitative determination of ascorbic acid, citric, malic and tartaric and sugars sucrose, glucose and fructose, and soluble solids in juices and fruit nectars and classification models for ACP. We used methods of spectroscopy in the near infrared (Near Infrared, NIR) in association with the method regression of partial least squares (PLS). Were used 42 samples between juices and fruit nectars commercially available in local shops. For the construction of the models were performed with reference analysis using high-performance liquid chromatography (HPLC) and refractometry for the analysis of soluble solids. Subsequently, the acquisition of the spectra was done in triplicate, in the spectral range 12500 to 4000 cm-1. The best models were applied to the quantification of analytes in study on natural juices and juice samples produced in the Paraná Southwest Region. The juices used in the application of the models also underwent physical and chemical analysis. Validation of chromatographic methodology has shown satisfactory results, since the external calibration curve obtained R-square value (R2) above 0.98 and coefficient of variation (%CV) for intermediate precision and repeatability below 8.83%. Through the Principal Component Analysis (PCA) was possible to separate samples of juices into two major groups, grape and apple and tangerine and orange, while for nectars groups separated guava and grape, and pineapple and apple. Different validation methods, and pre-processes that were used separately and in combination, were obtained with multivariate calibration models with average forecast square error (RMSEP) and cross validation (RMSECV) errors below 1.33 and 1.53 g.100 mL-1, respectively and R2 above 0.771, except for malic acid. The physicochemical analysis enabled the characterization of drinks, including the pH working range (variation of 2.83 to 5.79) and acidity within the parameters Regulation for each flavor. Regression models have demonstrated the possibility of determining both ascorbic acids, citric, malic and tartaric with successfully, besides sucrose, glucose and fructose by means of only a spectrum, suggesting that the models are economically viable for quality control and product standardization in the fruit juice and nectars processing industry.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Cocaine is a stimulant that features a strong ability to cause dependence. Often adulterants are added to this drug in order to mimic its action or minimize its adverse effects. When there are other pharmacologically active components in the drug composition, severe problems can occur to users’ health, such as intoxication symptoms. Thus, the aim of this study was to develop a method for the determination of the main adulterants of cocaine (caffeine, levamisole, lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine) in human urine. The high-performance liquid chromatography with a photodiode array detector and the dispersive liquid-liquid microextraction based on solidification of floating organic drop were used as analysis technique and as sample preparation technique, respectively. The reversed-phase chromatographic separation was obtained with a C18 column (250 x 4.6 mm; 5 μm; 80 Å) in gradient elution mode using acetonitrile-trifluoroacetic acid 0.026% (v/v) at 1 mL min-1 as mobile phase, at 25°C, and detection at 235 nm. The analysis time was 25 min. Under optimum conditions, human urine samples were alkalized with 0.5 mol.L-1 sodium phosphate buffer (pH 10) and added sodium chloride (20% m/v). Acetonitrile (150 μL) and 1-dodecanol (30 μL) were used as dispersive and extraction solvent, respectively. The method presented linear range of 312.5 – 3125 ng.mL−1 for caffeine and levamisole and 187.5 – 1875 ng.mL−1 for lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine, with limit of quantification of 187.5 ng.mL-1 to lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine and 312.5 ng.mL-1 for caffeine and levamisole. Recovery mean values were between 6.0 and 42.6%. The method showed good precision and accuracy, with within- and between-run relative standard deviation and relative error less than 15%. The samples were stable after freeze-thaw cycle and short-term room temperature stability tests. Additionally, this method was applied in samples of urine of five cocaine users and at least one adulterant was identified in all samples. It is expected that this method will contribute to the precision in the diagnosis of cocaine adulterants’ intoxication and to the proper planning of therapeutic measures. / A cocaína é uma droga estimulante que apresenta capacidade de causar dependência. Frequentemente são adicionados a esta droga adulterantes com o intuito de mimetizar sua ação ou minimizar seus efeitos adversos. Quando há nessa droga outros componentes farmacologicamente ativos, agravos à saúde dos usuários podem ocorrer, como quadros de intoxicação. Assim, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de determinação dos principais adulterantes da cocaína (cafeína, levamisol, lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina) em urina humana. A cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de fotodiodos foi utilizada como técnica de análise e a microextração líquido-líquido dispersiva com solidificação da gota orgânica flutuante, como técnica de preparo das amostras. A separação cromatográfica dos analitos em fase reversa foi obtida em uma coluna C18 (250 x 4,6 mm; 5 μm; 80 Å) em modo gradiente e usando acetonitrila-ácido trifluoroacético 0,026% (v/v) a 1 mL.min-1 como fase móvel (25°C e detecção a 235 nm). O tempo de análise foi de 25 min. Para o preparo da amostra, a urina foi alcalinizada com tampão fosfato de sódio 0,5 mol.L-1 (pH 10) e adicionada de cloreto de sódio (20% m/v). Acetonitrila (150 μL) e 1-dodecanol (30 μL) foram utilizados como solvente dispersor e extrator, respectivamente. O método apresentou intervalos lineares de concentração de 312,5 – 3125 ng.mL−1 para cafeína e levamisol e de 187,5 – 1875 ng.mL−1 para lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina, com limite de quantificação de 187,5 ng.mL-1 para lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina e 312,5 ng.mL-1 para cafeína e levamisol. Os valores médios de recuperação variaram de 6,0 a 42,6%. O método mostrou boa precisão e exatidão intra e intercorrida com coeficientes de variação e erros relativos menores que 15%. As amostras apresentaram-se estáveis após ciclos de congelamento-descongelamento e após serem mantidas por 24h em temperatura ambiente. Ainda, o método foi aplicado em cinco amostras de urina de usuários de cocaína e pelo menos um adulterante foi identificado em todas as amostras. Espera-se que este método possa contribuir para a precisão no diagnóstico das intoxicações por adulterantes da cocaína e para o adequado planejamento das medidas terapêuticas.