Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-03-10T12:54:12Z No. of bitstreams: 1 JeffersonBCS_DISSERT.pdf: 1486317 bytes, checksum: f7580d6ec5ee35a2be605d2dd55fbfdf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-10T12:54:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JeffersonBCS_DISSERT.pdf: 1486317 bytes, checksum: f7580d6ec5ee35a2be605d2dd55fbfdf (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Honey bees play an important role in both economic and environmental part. However, in recent years there has been observed a decline in the worldwide bee colonies, causing concern among researchers and beekeepers. Exposure to pesticides can cause serious problems for bees and pollination services. Therefore, it is extremely important to determine the toxicity of insecticides, which are used for pest control. The aim of this study was to determine the toxicity of the products (Actara® 250 WG - Thiamethoxam); (Evidence® 700WG - Imidacloprido1); (Orfeu® 200WG - Acetamiprid); (Focus® 500WG - Clothianidin) and (Nuprid® 700WG Imidacloprido2) on Apis mellifera, for it was evaluated some toxicological endpoints, such as lethal time (LT50) topical and oral lethal dose (LD50) topical and lethal concentration (LC50) by intake, and to determine the hazard ratio (HQ). For that bees were exposed to insecticides in different concentrations and mortality data submitted to analysis of survival and logit regression. Independent of all tested insecticides exposure caused the death of 100% of the bees with the TL50, ranging from 0.68 to 3.85h for topical exposure, and exposure for 4.2h at 0.64 with respect to CL50 and DL50, the Thiamethoxam , Imidacloprido1, Acetamiprid, Clothianidin, and Imidacloprido2, presented their values for LD50, 7.5, 38, 57, 131, 10.5 ng / bees and LC50, 5.56, 24.4, 278, 50.8, 6,8 ng.μl-1 . As for the risk coefficient (HQ) all regardless of culture or pest insecticides had a higher HQ to 50, ranging from 157.7 (Acetamiprid used in cotton for control of Aphis gossypii) to 66666.7 (thiamethoxam used in breakfast control Leucoptera coffeella and Dysmicoccus texensis), showing the highest level of danger of these pesticides to bees / As abelhas melíferas apresentam um importante papel tanto na parte econômica como ambiental. Entretanto, nos últimos anos tem sido observado um declínio em nível mundial das colônias de abelhas, causando preocupação entre pesquisadores e apicultores. A exposição aos agrotóxicos pode acarretar sérios problemas para as abelhas e aos serviços de polinização. Nesse sentido, é de extrema importância determinar a toxicidade de inseticidas que são utilizados para o controle de pragas. O objetivo desse trabalho foi determinar a toxicidade dos produtos (Actara® 250 WG – Tiametoxam); (Evidence® 700WG – Imidacloprido1); (Nuprid® 700WG Imidacloprido2); (Orfeu® 200WG – Acetamiprido) e (Focus® 500WG – Clotianidina) sobre abelhas Apis mellifera, tendo sido avaliados alguns parâmetros toxicológicos, como Tempo Letal (TL50) para a aplicação tópica e oral, Dose letal (DL50) para aplicação tópica e Concentração letal (CL50) por ingestão, além de determinar o coeficiente de periculosidade (HQ). Para isso abelhas foram expostas aos inseticidas em diferentes concentrações e os dados de mortalidade submetidos às análises de sobrevivência e regressão Logit. Independente da forma de exposição todos os inseticidas testados ocasionaram a morte de 100% das abelhas, com a TL50, variando entre 0.68 a 3.85h para exposição tópica e 0.64 a 4.2h para exposição oral. Para a DL50 e CL50, o tiametoxam, Imidacloprido1, imidacloprido2, acetamiprido, e o clotianidina apresentaram os respectivos valores para as DL50, 7.5, 38, 57, 131, 10.5 ng/abelhas e CL50, de 5.56, 24.4, 278, 50.8, 6,8 ng.μl-1 respectivamente. Quanto ao Coeficiente de Risco (HQ) todos os inseticidas independente da cultura ou praga apresentaram um HQ maior que 50, variando de 157,7 (acetamiprido utilizado no algodão para o controle do Aphis gossypii) a 66.666,7 (tiametoxam utilizado no café para o controle da Leucoptera coffeella e Dysmicoccus texensis), mostrando o altíssimo nível de periculosidade destes inseticidas para as abelhas / 2017-03-10

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2095_1.pdf: 1057308 bytes, checksum: 50b74bfcc18e94fbc43b4e4cb86c8001 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / A família Meliaceae compreende 50 gêneros que estão distribuídos predominantemente nos trópicos de todo mundo. São plantas geralmente arbóreas, as flores são pequenas em inflorescência, hermafroditas. A espécie Azadirachta indica A. Juss, conhecida popularmente por nim e amargosa é originária da Ásia. Diferentes partes da planta apresentam propriedades medicinais como atividade antiviral, antibacteriana, antifúngica, antidiabética, antiinflamatória, antiséptica, contra doenças de pele, anti-úlcera e antitumoral. O nim apresenta atividade contra insetos causando repelência e atraso no desenvolvimento. Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade aguda (CL50 e DL50) e as atividades farmacológicas (antiinflamatória e antitumoral) em roedores do extrato hidroalcoólico das folhas de A. indica. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda, por via oral, observação das alterações comportamentais resultantes da administração de cada dose. Os animais tratados apresentaram reações tóxicas, sendo comportamentais estimulantes os efeitos mais pronunciados. Em todas as doses administradas não houve óbito dos animais. De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que o extrato hidroalcoólico das folhas de A. indica possui baixa toxicidade quando administrado por via oral. Também foi avaliada a concentração letal 50% (CL50) em larvas de Artemia salina e o valor encontrado da CL50 foi de 617,25537 μg/ml indicando que o extrato possui toxicidade moderada em larvas de Artemia salina. Na avaliação da atividade antiinflamatória foi utilizado o modelo de edema de pata induzido por carragenina em ratos, com administração por via oral. Os resultados obtidos indicam que o extrato das folhas de A.indica apresenta atividade edematogênica, sendo capaz de aumentar o tamanho do edema durante o processo inflamatório. No estudo da atividade antitumoral, o extrato hidroalcoólico das folhas de A. indica foi analisado frente às linhagens Carcinoma de Ehrlich e Sarcoma 180. O extrato produziu uma redução dos tumores, com 63,8% e 18,01% (não significativa) de inibição tumoral para os animais portadores de Carcinoma de Ehrlich tratados com doses de 250 e 500mg/kg/v.o respectivamente e para dose de 1000mg/kg/v.o houve um aumento não significativo dos pesos dos tumores. Para o animais portadores de Sarcoma 180 não foi observada inibição tumoral significativa para as doses de 250, 500 e 1000mg/kg/v.o

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6190_1.pdf: 2047093 bytes, checksum: 26508c8ce6954ef97f2c71b79161d818 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Vernonia brasiliana é um arbusto perene que varia entre 0,5 e 2,5m de altura conhecida popularmente por assa-peixe, hervea-préa ou tramanhém utilizada principalmente no tratamento de doenças do sistema respiratório e digestivo. Estudos científicos já comprovaram atividades antimalárica e antimicrobiana deste vegetal. O nosso trabalho teve como objetivo avaliar a toxicidade aguda e as atividades farmacológicas (antiinflamatória e antineoplásica em roedores) das folhas da V. brasiliana. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda, por via intraperitoneal, com notificação das alterações comportamentais resultantes da administração de cada dose. Os animais tratados apresentaram reações tóxicas, sendo as reações comportamentais excitatórias e estimulantes os efeitos mais pronunciados. Verificamos também efeitos depressores e a taxa de mortalidade cresceu progressivamente com o aumento da dose. Os dados histológicos demonstraram que todos os animais que receberam o EHE de V. brasiliana apresentaram fígado com algum grau de congestão vascular. O aparecimento de novos efeitos adversos após 24h da administração e a permanência de vários sintomas (72h) demonstraram que a droga possui reações cumulativas. De acordo com a DL50 obtida, o extrato de V. brasiliana pode ser considerado moderadamente tóxico quando administrado por via intraperitoneal. Na avaliação da atividade antiinflamatória utilizou-se o modelo de edema de pata induzido por carragenina em ratos, com administração do extrato por via intraperitoneal. Os resultados encontrados apresentaram indicativos de combate ao processo inflamatório numa ação tardia, que foi conferido a partir da 5ª hora após administração da maior dose estudada (150mg/Kg). Em relação a atividade antineoplásica frente as linhagens Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich, o extrato produziu significativa redução dos tumores, com 93,88% de inibição tumoral para os animais portadores do Sarcoma 180 (31,25mg/kg) e 86,70% para os portadores do Carcinoma de Ehrlich (62,5 mg/Kg). A análise histopatológica demonstrou que o extrato ocasionou um maior número de áreas necróticas, em ambas as linhagens. Ao analisarmos a especificidade tumor-hospedeiro de cada linhagem em relação às diferentes doses de V. brasiliana, observamos que o extrato apresentou efeito mais significante frente ao Sarcoma 180 do que sobre o Carcinoma de Ehrlich

Made available in DSpace on 2016-06-02T18:55:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4432.pdf: 1388434 bytes, checksum: d65f99bf92f697e1cf8e1d2b5a5fc2f9 (MD5) Previous issue date: 2012-05-09 / Financiadora de Estudos e Projetos / Melipona scutellaris bee, known as "uruçu" belong to the tribe Meliponini, popularly called stingless bees. This bee is endemic in northeastern Brazil and is distinguished by its ease of domestication and management, significant honey production and potential for pollination in greenhouses and open field. The insecticide fipronil acts on the insect nervous system by blocking the chloride channels through of the receptors gamma-aminobutyric acid (GABA) and glutamate (GluCl). Widely used in Brazil and more than 70 countries is considered highly toxic to bees, which is why its use was banned in France in 2004. Toxicological studies of pesticides to bees use mostly as a model species A. mellifera bee, which sublethal doses of fipronil can cause behavioral changes related to core tasks for the colony, such as feeding and foraging. However, differences in susceptibility between species of bees to insecticides may expose native bees there is a greater risk. The aim of this study was to determine the topical LD50 and oral LC50 of insecticide fipronil for stingless bee M. scutellaris and evaluate the effects of fipronil sublethal doses and concentrations in the locomotor activity and in the Proboscis Extension Reflex (PER) these bees. Foragers were collected in the output of three different colonies, consisting of three repetitions with ten bees each and they were placed in plastic pots of 250 mL. Bees subjected to topical treatments were anesthetized with CO2 and received 1.0 μL insecticide solution on pronotum with previously established doses (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 5.0 ng of fipronil / μL solution), applied with a repetitive automatic micropipette. Bees subjected to oral contamination received sucrose solution contaminated with concentrations of fipronil determined previously (0.0, 0.005, 0.01, 0.03, 0.05, and 0.5 ng a.i./ μL sucrose solution) for 24 hours. The insecticide fipronil was considered highly toxic to these bees, both topically and orally. The topical intoxication resulted in a LD50 (48 hours) was 0.41 ng / bee (4.1 ng / g bee). The oral contamination resulted in a LC50 (48 hours) was 0.011 ng / μL of sucrose solution or, considering the amount of food they forage M. scutellaris consume daily in an oral LD50 of 0.6 ng a.i. / bee. The topic sublethal dose 0.05 ng a.i./bee and oral sublethal concentration 0.0011 ng a.i./ μL sucrose solution were cause significant changes for the locomotor activity these bees. The PER don't was a functional methodology for M. scutellaris bees. Results show that the bee M. scutellaris is more sensitive to fipronil than A. mellifera and that fipronil sublethal dose and concentrations affected the locomotor activity these bees. / A abelha Melipona scutellaris, conhecida como uruçu , pertencem à tribo Meliponini, popularmente chamadas de abelhas sem ferrão. Essa abelha é endêmica do nordeste brasileiro e se destaca por sua fácil domesticação e manejo, expressiva produção de mel e potencial para polinização em ambientes protegidos e campo aberto. O inseticida fipronil atua no sistema nervoso dos insetos bloqueando os canais de cloro através dos receptores ácido gama-aminobutírico (GABA) e glutamato (GluCl). Amplamente usado no Brasil e em mais de 70 países é considerado altamente tóxico para abelhas, motivo pelo qual seu uso foi proibido na França em 2004. Estudos toxicológicos de inseticidas para abelhas utilizam em sua grande maioria como espécie modelo a abelha A. mellifera, na qual doses subletais de fipronil causam alterações comportamentais relacionadas a tarefas fundamentais para a colônia, como alimentação e forrageamento. No entanto, diferenças quanto à suscetibilidade entre as espécies de abelhas aos inseticidas poderiam estar expondo as abelhas nativas a um maior risco. O objetivo desse trabalho foi determinar a DL50 tópica e a CL50 oral do inseticida fipronil para abelhas sem ferrão M. scutellaris e avaliar os efeitos das doses e concentrações subletais desse inseticida na atividade locomotora e no Reflexo de Extensão da Probóscide (REP) dessas abelhas. As forrageiras foram coletadas na saída de três colmeias diferentes, consistindo em três repetições formadas por dez abelhas cada e colocadas em potes plásticos de 250 mL. Abelhas submetidas aos tratamentos tópicos foram anestesiadas com CO2 e receberam 1.0 μL de solução de inseticida no pronoto com doses previamente estabelecidas (0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 e 5.0 ng de fipronil/μL de solução), aplicadas com uma micropipeta automática repetitiva. Abelhas submetidas aos tratamentos de contaminação oral receberam solução de sacarose com as concentrações de fipronil determinadas anteriormente (0.0, 0.005, 0.01, 0.03, 0.05, e 0.5) durante 24 horas. O inseticida fipronil foi considerado altamente tóxico para essas abelhas, tanto por via tópica como oral. A intoxicação tópica resultou em uma DL50 (48 horas) de 0.41 ng i.a./abelha (4.1 ng i.a./g de abelha). A contaminação oral resultou em uma CL50 (48 horas) de 0.011 ng i.a./μL de solução de sacarose ou, considerando a quantidade de alimento que as forrageiras de M. scutellaris consomem por dia, em uma DL50 oral de 0.6 ng i.a./abelha. A dose subletal tópica de 0.05 ng i.a./abelha e a concentração subletal oral de 0.0011 ng i.a. /μL de solução de sacarose causaram alterações significativas para a atividade locomotora dessas abelhas. O REP não foi uma metodologia funcional para abelhas M. scutellaris. Os resultados mostram que a abelha M. scutellaris é mais sensível ao fipronil que A. mellifera e que doses e concentrações subletais desse inseticida afetam a atividade locomotora dessas abelhas.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-10-17T19:20:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diogo Nery Maciel - 2016.pdf: 6569625 bytes, checksum: 88b08e397d1fe85ad26417e8b0f2a08c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-10-18T17:16:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diogo Nery Maciel - 2016.pdf: 6569625 bytes, checksum: 88b08e397d1fe85ad26417e8b0f2a08c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T17:16:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diogo Nery Maciel - 2016.pdf: 6569625 bytes, checksum: 88b08e397d1fe85ad26417e8b0f2a08c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-09-13 / The increase in insecticide application for control the rice stalk stink bug Tibraca limbativentris Stal (Hemiptera: Pentatomidae) in irrigated rice in Brazil, has been reported by producers as responsible for loss of effectiveness of some insecticides commonly used to manage this insect and this is the base of this investigation. The insecticides used in this study were: bifenthrin, carbosulfan, etophenprox, λ-cyhalothrin, and thiametoxam. Six populations of insects were collected in producing areas of the states of Tocantins, Goiás and Santa Catarina, Brazil. Insect adults of each population were submitted to discriminant concentrations (LC95s) previously determined for the population collected in natural habitat in Santo Antônio de Goiás, and used as standard susceptible population. The frequency of individuals resistant in the population of Formoso do Araguaia was 76% for carbosulfan, 86% for bifenthrin, 72% for etofenprox, 80% for L-cyalothrin, and 80% for thyamethoxam. Although the frequencies of resistant individuals can be considered low to moderate, it is first report of resistance of T. limbativentris to insecticides. These results indicate the resistance development to other insecticides with different mode of actions, with emphasis to the stink bug populations of Formoso do Araguaia-TO. These results also indicates a possible occurrence of crossed a resistance or multiple in that population. / O aumento no uso de inseticidas ​​para o controle do percevejo-do- colmo Tibraca limbativentris Stal 1860 (Hemiptera: Pentatomidae) em lavouras de arroz irrigado no Brasil, associado a relatos de produtores sobre perda de eficácia dos produtos comumente usados, embasaram a condução desta investigação sobre a possível ocorrência de resistência aos inseticidas: bifentrina, carbosulfan, etofenproxi, lambda-cialotrina e tiametoxan. As populações de insetos foram coletadas em seis áreas de produção de arroz irrigado nos estados de Tocantins, Goiás e Santa Catarina, Brasil. Insetos adultos destas populações foram estabelecidos em gaiolas teladas de criação em casa de vegetação e em laboratório foram submetidos a concentrações discriminantes (LC 95 s) estimadas para a população de Santo Antônio de Goiás, coletada em ambiente natural e usada como população-padrão de susceptibilidade. As frequências de mortalidade de indivíduos para a população de Formoso do Araguaia foi de 76% para o inseticida carbosulfan, 86% para bifentrina, 72% para etofenproxi, 80% para L-cialotrina e de 80% para o inseticida tiametoxan. Embora as frequências de indivíduos resistentes encontradas sejam consideradas de baixas a moderadas, trata-se do primeiro registro de T. limbativentris resistentes a inseticidas e, já se percebe a extensão do problema com relação ao desenvolvimento de resistência a produtos de diferentes grupos e modos de ação, principalmente na região produtora de Formoso do Araguaia- TO. Os resultados desta pesquisa indicam uma possível ocorrência de resistência cruzada ou múltipla nessa população.

Submitted by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2015-03-20T22:54:55Z No. of bitstreams: 2 Efeito da associação entre os probióticos Saccharomyces boulardii e Bacilus cereus var. Toyoi sobre a proteção contra desafio com Salmonella Typhimurium em camundongos.pdf: 950556 bytes, checksum: d9746b0e55dab14349d49ea0ff188774 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2015-03-20T23:36:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Efeito da associação entre os probióticos Saccharomyces boulardii e Bacilus cereus var. Toyoi sobre a proteção contra desafio com Salmonella Typhimurium em camundongos.pdf: 950556 bytes, checksum: d9746b0e55dab14349d49ea0ff188774 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2015-03-20T23:36:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Efeito da associação entre os probióticos Saccharomyces boulardii e Bacilus cereus var. Toyoi sobre a proteção contra desafio com Salmonella Typhimurium em camundongos.pdf: 950556 bytes, checksum: d9746b0e55dab14349d49ea0ff188774 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-20T23:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Efeito da associação entre os probióticos Saccharomyces boulardii e Bacilus cereus var. Toyoi sobre a proteção contra desafio com Salmonella Typhimurium em camundongos.pdf: 950556 bytes, checksum: d9746b0e55dab14349d49ea0ff188774 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-11-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da associação entre os probióticos Saccharomyces boulardii e Bacillus cereus var. Toyoi sobre a proteção e a sobrevivência de camundongos contra a colonização intestinal, translocação e lesões intestinais após desafio com S. Typhimurium. Os animais foram alimentados 20 dias com rações contendo S. boulardii e B. Toyoi, administrados individualmente ou em associação, nas concentrações de 8 e 7 log UFC. g-1 de ração, respectivamente. Animais do grupo controle receberam ração comercial sem probióticos. No 10º dia após o início da administração dos probióticos, os animais foram desafiados por gavagem com 5,17 log UFC de S. Typhimurium (DL50). Proteção contra colonização de S. Typhimurium foi avaliada após eutanásia dos camundongos que sobreviverem após 10 dias, através de contagens de células viáveis do patógeno presentes nas fezes e intestino delgado. Para a avaliação da ocorrência de translocação, 2/3 dos órgãos (fígado e baço) foram macerados, ressuspensos em 1 mL de solução salina a 0,9% estéril e contagens de células viáveis do patógeno, em UFC.ml-1, foram realizadas em placas de XLD. Para a avaliação da ocorrência de lesão, 1/3 do intestino delgado foi avaliado através de histopatologia. O experimento foi repetido duas vezes. S. boulardii não protegeu os camundongos da morte induzida por S. Typhimurium e da ocorrência de lesões intestinais. Não houve sinergismo entre os dois micro-organismos avaliados. Entretanto, S. boulardii, assim como B. Toyoi reduziram a eliminação de S. Typhimurium pelas fezes e preveniram a translocação do patógeno para o fígado dos camundongos que sobreviveram ao desafio. B. Toyoi protegeu os animais da morte induzida pela infecção com S. Typhimurium e da ocorrência de lesões e o efeito obtido pela associação, ocorreu, provavelmente, devido somente ao efeito de B. Toyoi. Assim, novos estudos serão realizados para avaliar os efeitos da associação destes probióticos frente ao desafio com S. Typhimurium e para avaliar as causas do efeito antagônico apresentado entre eles sobre a persistência deste patógeno nas fezes dos animais e sobre a translocação para o fígado. / This study aimed to evaluate the effect of the association between the Saccharomyces boulardii and Bacillus cereus var. Toyoi probiotics on the survival and protection of mice against the occurrence of intestinal colonization, translocation and intestinal lesions after the challenge with S. Typhimurium. The animals were fed for 20 days with diet containing S. boulardii and B. Toyoi, administered individually or in association, in the food concentrations of 8 and7 log CFU. g-1, respectively. The control group animals were fed with commercial food without probiotics. On the 10th day after the start of administration of probiotics, the animals were challenged by the gavages with 5.17 log CFU of S. Typhimurium (LD50). Protection against colonization of S. Typhimurium was evaluated after euthanasia of the mice, which survived after 10 days, through the viable cell counts of the pathogen presented in the small intestine and stool. To evaluate the incidence of translocation, 2/3 of the organs (liver and spleen) were macerated, and resuspended in 1 ml of saline solution in 0.9% sterile, and viable cell counts of the pathogen were performed. To evaluate the occurrence of injury, 1/3 of the small intestine was evaluated through histopathology. The experiment was repeated twice. S. boulardii did not protect the mice from induced death by S. Typhimurium and the occurrence of intestinal lesions. For this reason, it was not possible to assess the occurrence of synergism between the two micro-organisms evaluated. However, S. boulardii as well as B. Toyoi reduced the elimination of S. Typhimurium through the stool and prevented the translocation of the pathogen to the liver of mice that survived the challenge. B. Toyoi protected animals from induced death through the infection with S. Typhimurium and through the occurrence of injuries, and the effect obtained by the association was, probably, due only by the effect of B. Toyoi. Thus, further studies will be conducted to evaluate the effects of the combination of these probiotics facing the challenge with S. Typhimurium and to assess the causes of the antagonistic effect presented among them on the persistence of this pathogen in the stool of animals and on the translocation to the liver.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The sensitivity of ten isolated of Colletotrichum lindemuthianum the systemic fungicides was evaluated in vitro and in vivo, in experimental design was completely random with three replications. In the study in vitro, it was evaluated the percentage of germination of spores of the fungus when submitted to the benzimidazol fungicides: carbendazin and methyl tiophanate and the estrobilurins: azoxystrobin and pyraclostrobina. The methodology consisted in incorporate the fungicide to the agar at the final concentrations of 0; 0,1; 1,0; 10 and 100 ppm. With the germination data the DL50 (rate capable to inhibit 50% of the germination of spores) was calculated. For each fungicide was calculated the DL50, being observed differences in the sensitivity of isolated of C. lindemuthianum. Considering the fungicide carbendazin, race 65 presented low sensitivity while races 08, 81, 321 had been moderately sensible to this fungicide. In the case of the estrobilurins, all the isolated ones had revealed highly sensible to the fungicides azoxystrobin and pyraclostrobin, proving the effect of this chemical group on the germination of spores. In the in vivo evaluation, it was evaluated the DL50 having considered the injuries of C. lindemuthianum formed from the inoculation of a known concentration of spores in detached bean leaves submitted to the final concentrations of 0; 0,5; 1,0; 5,0; 10,0 and 50,0 ppm of tebuconazol and epoxiconazol. It was not observed difference among isolates, considering the classification of sensitivity proposed by Edgington al. (1971). However, it was verified great amplitude of values of DE50 between the isolated ones. Race 321 presented moderate sensitivity to the epoxiconazol, races 08 and 65 with relatively bigger values of DE50. The same occurred with race 81 with regard to epoxiconazol. The alteration in the sensitivity on C. lindemuthianum isolates, when submitted to the group of the benzimidazoles, was related to the frequency and pressure of selection imposed by repeated fungicides application. Regarding the triazoles, it was not observed differences in the classification of sensitivity between the isolates, showing that the use of these fungicides in the control of anthracnose did not produce a similar selective effect as observed with the fungicides tebuconazol and epoxyconazol. / A sensibilidade in vitro e in vivo de dez isolados de Colletotrichum lindemuthianum a fungicidas sistêmicos foi avaliada in vitro e in vivo, em delineamento experimental inteiramente casualizado com três repetições. No estudo in vitro foi avaliada a porcentagem de germinação de conídios do fungo quando submetidos aos fungicidas benzimidazóis: carbendazin e tiofanato metílico e estrobilurinas: azoxistrobina e piraclostrobina. Foi utilizada a metodologia do fungicida incorporado ao agar nas concentrações finais de 0; 0,1; 1,0; 10 e 100 ppm. Com os dados de germinação foi calculada a DL50 (dose efetiva capaz de inibir 50% da germinação de esporos) para cada fungicida, sendo observadas diferenças na sensibilidade dos isolados de Colletotrichum lindemuthianum com relação aos fungicidas testados. Considerando o fungicida carbendazin, a raça 65 apresentou baixa sensibilidade enquanto as raças 08, 81, 321 foram moderadamente sensíveis a este fungicida. No caso das estrobilurinas, todos os isolados mostraram-se altamente sensíveis aos fungicidas azoxistrobina e piraclostrobina, comprovando o efeito esporocida desse grupo químico. Na avaliação in vivo, foi avaliada a a DL50 considerando as lesões de C. lindemuthianum formadas a partir da inoculação de uma concentração conhecida de esporos em folhas destacadas de feijão submetidas a concentrações finais de 0; 0,5; 1,0; 5,0; 10,0 e 50,0 ppm de tebuconazole e epoxiconazole. Não houve diferença quanto à classificação de sensibilidade proposta na escala adaptada de Edgington et al. (1971), embora tenha sido verificada grande amplitude de valores de DE50 entre os isolados. A raça 321 apresentou moderada sensibilidade a epoxiconazole, ficando as raças 08 e 65 com valores de DE50 relativamente maiores. O mesmo ocorreu com a raça 81 com relação ao epoxiconazole. A alteração na sensibilidade de isolados de C.lindemuthianum quando submetidos ao grupo dos benzimidazóis está relacionada a origem, freqüência e pressão de seleção imposta pela aplicação repetida desses fungicidas em determinados locais onde predominam determinados grupos de raças fisiológicas. Com relação aos triazóis não houve diferenças na classificação de sensibilidade entre os isolados, mostrando que a utilização desses fungicidas no controle da antracnose não produziu um efeito seletivo similar ao observado com os fungicidas tebuconazole e epoxiconazole, considerando a mesma população do patogeno.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo de sousa Vieira.pdf: 1862129 bytes, checksum: 7cc8be40ceb11c75c5ec56b362ffec29 (MD5) Previous issue date: 2009-04-14 / The animal replacement in expirements has been very encouraged by government and other institutions. However, in drugs development the animal replacement is not yet a reality, like at oral acute systemic tests. The validation of in vitro protocols is necessary for data generation with reproducibility, repetability and accuracy. In this study was validated at the Laboratório de Farmacologia e Toxicologia Celular- Faculdade de Farmácia/Universidade Federal de Goiás the protocol already validated by three laboratories (two in the USA and one at United Kingdom) and coordinated by ICCVAM: In Vitro Cytotoxicity Methods for Estimating Starting Doses for Acute Systemic Toxicity Tests, using the neutral red uptake in BAL/c 3T3-A31 cell line. It was used the grandisine, a lignan, and its major metabolite taken by fungi biodegradation. Our research group has identified a potential anti-tumoral action of grandisine, data not yet published. After in house validation we estimated the LD50 of grandisin and 4-O-demethylgrandisin: 617.72 mg/kg and 429.95 mg/kg, respectively. Both were classified under the GSH category 4. / A substituição ou redução do uso de animais em experimentos para a avaliação de toxicidade tem sido bastante encorajada e tem recebido grandes incentivos, inclusive financeiros, governamentais e institucionais. No entanto, a substituição completa da maioria dos testes mandatórios por agências reguladoras do setor ainda não é realidade, a exemplo, o teste de toxicidade oral aguda sistêmica. Neste contexto, se aplica a validação de testes in vitro para estimar dados in vivo. No presente trabalho, realizamos a validação in house do protocolo internacional e multilaboratorial recomendado pelo Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods (ICCVAM): Utilização da Citotoxicidade In Vitro na Estimativa de Doses Iniciais para Testes de Toxicidade Oral Aguda Sistêmica. Para tal, utilizamos o método de captação do corante vermelho neutro e a linhagem celular fibroblástica de camundongos BALB/c 3T3-A31. Dentre as substâncias recomendadas pelo ICCVAM para a validação do método foram investigadas 9 substâncias. A metabolização de produtos pelo organismo vivo é uma grande limitação dos testes in vitro. Utilizamos a grandisina, um tipo de ligana com grande potencial antitumoral e seu metabólito majoritário como substâncias modelos. Com utilização do metabólito conseguimos transpor esta barreira dos testes in vitro. Os resultados demonstraram que os dados obtidos estão em consonância com os dados da literatura sendo possível classificar ambas as substâncias na categoria GHS 4: grandisina e 4-Odemetilgrandisina: 617,72 mg/kg and 429,95 mg/kg, respectivamente.

Les abeilles et les parasitoïdes de pucerons courent le risque d'exposition à des insecticides qui ne leur sont pas destinés. Nos objectifs consistent à évaluer ce risque sur le terrain et à contribuer à mettre au point des tests de toxicité létale et sublétale en laboratoire pour les deux types d'insectes. <br />A Madagascar, nous avons mené une enquête pour déterminer l'impact de pratiques paysannes en matière de protection de cultures d'agrumes sur les abeilles, et une expérimentation en parcelle de choux pour évaluer les effets de traitements insecticides sur les Hyménoptères parasites de pucerons. En France, nous avons déterminé en laboratoire les toxicités aiguës de la deltaméthrine, de la lambda cyhalothrine, du chlorpyriphos éthyle et du pyrimicarbe, pour les abeilles et le parasitoïde de pucerons, Aphidius ervi. Nous avons analysé, chez l'abeille, certaines causes de variabilité des doses létales à 50%. Nous avons également déterminé les effets d'insecticides sur le comportement d'orientation olfactive en olfactomètre chez l'abeille et A. ervi. <br />A Madagascar, le traitement pendant la floraison existe et les apiculteurs constatent des effets négatifs sur leurs ruches. L'expérimentation en parcelle de chou montre que le traitement insecticide contribue à retarder l'action des Hyménoptères parasites de pucerons. <br />En laboratoire, la toxicité varie en fonction du mode de pénétration et de la nature des matières actives. Chez l'abeille, les toxicités par ingestion collective et individuelle ne sont pas toujours comparables. L'importance du phénomène de trophallaxie dans cette différence a été précisée. Ainsi, la valeur de DL50 exprimée en ng/abeille dépend des conditions expérimentales. Les abeilles et A. ervi ayant survécu aux traitements insecticides et testés en olfactomètre, ne montrent pas ou peu de changement de comportement d'orientation vis-à-vis de l'odeur utilisée. Par contre, les abeilles recevant des DL20 et DL50 de deltaméthrine ont une capacité locomotrice réduite. Cette perturbation pourrait avoir des effets non négligeables sur les insectes auxiliaires dans un environnement pollué par les insecticides

Botulinum toxin type A (BTTA) is a polypeptide with 1296 amino acids and its used in some pathologies like hyperhidrosis and migraine, but the cosmetic area is the most important application. BTTA is produced from broth-culture synthesized by the Clostridium botulinum as a single peptide with 150 kDa. Reversed-phase liquid chromatography (RP-LC) method was developed and validated for the assessment of botulinum toxin type A in biopharmaceutical formulations. A RP-LC method was carried out on a Zorbax 300 SB C18 column (150 mm x 4.6 mm i.d.), maintained at 45 ºC. The mobile phase A consisted of 0.05 M sodium sulphate buffer, pH 2.8, and the mobile phase B was acetonitrile, run isocratically at flow rate 0.3 mL/min. Cromatographic separation was obtained with retention time of 11.4 min, and was linear over the concentration range of 0.2-100 IU/mL (r2 = 0.9999) with photodiode array (PDA) detection at 214 nm. The limits of detection and quantitation were 0.04 and 0.16 IU/mL, respectively. Specificity was established in degradation studies, which also showed that there was no interference of the excipients. Equally, the accuracy was 100.31% with bias lower than 0.80%. The method was correlated with in vivo and in vitro bioassays. Moreover, the in vitro cytotoxicity test of related proteins and higher molecular weight forms showed significant differences (p <0.05) compared to intact molecule. The validated methods were applied for the determination of BTTA in biopharmaceutical-derived products, giving mean values of the estimated content/potencies 1.16% lower compared to the in vivo bioassay. It is concluded that represents a contribution to establish new alternatives to monitor stability, quality control and thereby assure efficacy of the biotechnology-derived product. / A toxina botulínica tipo A (BTTA) é um polipeptídio constituído de 1296 aminoácidos e é recomendada para patologias, como hiperhidrose e enxaqueca, mas é especialmente usada como cosmético. A toxina botulínica é produzida através do processo de fermentação bacteriana e após sucessivas etapas de purificação resulta em uma proteína com 150 kDa responsável pelo seu efeito biológico. No presente trabalho foi desenvolvido e validado método por cromatografia líquida em fase reversa (CL-FR) para a avaliação de potência de BTTA em formulações de produtos biofarmacêuticos. No método foi utilizada coluna Zorbax 300 SB C18 (150 mm x 4,6 mm d.i.), mantida a 45 ºC. A fase móvel A foi constituída por tampão sulfato de sódio 0,05 M, pH 2,8, e a fase móvel B por acetonitrila, eluídas em vazão isocrática de 0,3 mL/min. O método utilizou detector de arranjo de diodos (DAD) a 214 nm. A separação cromatográfica foi obtida em 11,4 min, sendo linear na faixa de concentração de 0,2-100 UI/mL (r2 = 0,9999). Os limites de detecção e quantificação foram 0,04 e 0,16 UI/mL, respectivamente. A especificidade foi avaliada em estudos de degradação, que também demonstraram que não houve interferência dos excipientes. A exatidão foi 100,31 com bias inferior a 0,80. O método validado foi correlacionado com bioensaios in vivo e in vitro. Além disso, realizou-se o teste de citotoxicidade in vitro das formas degradadas, as quais apresentaram diferença significativa em relação a forma intacta (p <0,05). O método proposto foi aplicado para avaliação da potência de BTTA em formulações biofarmacêuticas, e os resultados foram comparados com o bioensaio in vivo, observando-se diferença das médias de teor/potência de 1,16% inferior para o método cromatográfico. Contribuíu-se assim para estabelecer procedimentos que aprimoram a caracterização ou o controle da qualidade, garantindo a segurança e eficácia do produto biotecnológico.