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Ácaros na cultura de soja: genótipos, danos e tamanho de amostra / Spider mites on soybean: genotypes, damage and sample size

Fiorin, Rubens Alex 29 August 2014 (has links)
The study aimed to evaluate the influence of soybeans genotypes on spider mites populations, quantify the occurring damage from spider mite attack and determinate leaflet number collected from different genotypes to estimate the spider mite population. Two studies were carried, in São Sepé (20 genotypes) and in Santa Maria (25 genotypes). The experiments were carried in randomized block design with four replications in 4,5 and 5,0 x 25 m experimental units. Weekly samplings were carried collecting 25 leaflets from the medium stratum and 25 leaflets from the superior soybean plant stratum in each genotype and evaluated an area of 20 cm2 of each leaflet. To determinate the sample size was used the data from evaluations which at least one genotype presented average population superior to one spider mite cm-2. To estimate spider mite number was considered the number of immature + adults spider mites, averages were compared with t bootstrap test. Sample size was estimated for an amplitude of 2 and 4 spider mites 20cm-2 and the optimal sample size calculus. To quantify spider mite damage in each genotype was maintained infested plots and not infested plots by pulverizations of acaricide. The predominant specie was Mononychellus planki. Population of spider mites vary in different genotypes and concentrates on the plant superior stratum. The necessary sample size is crescent as population grows, at the beginning of the infestation, 50 leaflets are enough with CIA95% (confidence interval amplitude with 1-p=0,95) maximum equal to 2 spider mites 20cm-2. To quantify higher populations 150 leaflets is necessary with CIA95% maximum equal to 4 spider mites 20cm-2. Yield variation as response to spider mite populations attack depend on the studied genotype and to all genotypes there is difference between the infested and not-infested plots. Average damage on Santa Maria experiment was 493 kg ha-1 and São Sepé 427 kg ha-1 and average gain of 33,4%. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência de genótipos de soja na população de ácaros, quantificar os danos decorrentes do ataque de ácaros e determinar o número de folíolos a serem coletados em diferentes genótipos para a quantificação de sua população. Para isto, foram realizados dois experimentos localizados nos municípios de São Sepé (20 genótipos) e Santa Maria (25 genótipos). Os experimentos foram conduzidos no delineamento blocos ao acaso, com quatro repetições em parcelas de 4,5 e 5,0 x 25 m. Foram realizadas amostragens semanais através da coleta de 25 folíolos do extrato médio e 25 do extrato superior das plantas em cada genótipo, avaliando uma área de 20 cm2 por folíolo. Para a determinação do tamanho de amostra foram utilizados os dados das avaliações em que pelo menos um genótipo apresentou população média superior a um ácaro.cm-². Para o número de ácaros, utilizou-se os valores de imaturos + adultos, comparando as médias dos genótipos pelo teste t bootstrap. Foi estimado o tamanho de amostra para amplitudes de 2 e 4 ácaros 20cm-2 e realizado o cálculo do tamanho ótimo de amostra. Para quantificação dos danos dos ácaros manteve-se, em cada genótipo, parcelas infestadas e sem infestação, através de aplicação de acaricidas. A espécie predominante foi Mononychellus planki. A população de ácaros é diferente em função do genótipo e concentra-se na parte superior das plantas. O tamanho de amostras necessário é crescente em função do incremento da população de ácaros, no início das infestações 50 folíolos suficientes com AIC95% (amplitude do intervalo de confiança com 1-p=0,95) máxima igual a 2 ácaros 20cm-2. Para quantificação de populações mais elevadas são necessários 150 folíolos com AIC95% máxima igual a 4 ácaros 20cm-2. A variação no rendimento de grãos pelo ataque de ácaros depende do genótipo avaliado e, comparando a área controlada com a não controlada, há diferença para todos os genótipos. O dano médio no experimento de Santa Maria foi de 493 kg ha-1 e no de São Sepé 427 kg ha-1, com ganho médio de 33,4%.
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Percurso da noção de drogas: por uma problematização do proibicionismo.

Silva, Flávia Costa da 01 April 2010 (has links)
This present work, inserted in the research line called formation, knowledge and professional development linked to the post graduation program in Education at the Santa Maria Federal University, aims to understand the conceptions about drugs among a group of academical students who are in a period of training for teachers. The analysis is guided by the perspective of Michel Foucault about the conformation of the discursive and no discursive practices. Also is made a brief comment about the concept that permeates educational practices on drugs. With the purpose of contributing for emergency of education practices founded in a no prohibitionist point of view, was introduced the experience of harm reduction program on the municipal office of health in Santa Maria developed during the period between july 2002 and march 2009. / A presente dissertação de mestrado está inserida na linha de pesquisa Formação, Saberes e Desenvolvimento Profissional do Programa de Pós-graduação em Educação da Universidade Federal de Santa Maria UFSM. Teve como objetivo compreender que concepções sobre drogas circulavam entre um grupo de estudantes universitários em formação docente. Os dados foram analisados a partir da perspectiva foucaultiana sobre a conformação das práticas discursivas ao não-discursivo. Também foi realizado um breve comentário sobre noções proibicionistas que permeiam as práticas educacionais sobre drogas. Com o propósito de contribuir para a emergência de práticas educacionais pautadas em pressupostos não proibicionistas do uso de drogas, foi apresentada a experiência do Programa de Redução de Danos da Secretaria Municipal de Saúde de Santa Maria/RS durante o período que compreende julho de 2002 a março de 2009.
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Metodologias para a determinação das propriedades de impacto de baixa energia de laminados metal-fibra / Methodologies to determine low-energy impact properties of fiber-metal laminates

Alan Rodrigo Marinho Gualberto 13 June 2008 (has links)
Aplicações dos laminados híbridos metal-fibra incluem, além da indústria aeronáutica, as indústrias naval e automobilística. Diferentemente do setor aeronáutico, pesquisas sobre impactos mecânicos nas duas outras áreas da mobilidade são freqüentemente limitadas pela disponibilidade de equipamentos laboratoriais, de modo que é desejável o desenvolvimento de procedimentos de baixo custo para a determinação da resistência e tolerância a danos por impacto dos materiais de construção. Neste trabalho, a resistência a danos por impacto transversal do laminado híbrido metal-fibra Glare-5® foi determinada via três diferentes metodologias. A primeira utiliza um aparato sofisticado aparato Laser-Doppler para monitorar a aceleração e desaceleração de um impactador esférico de aço com 5 mm de diâmetro durante o evento do choque mecânico. O segundo método se baseia apenas nos valores de carga (força aplicada) vs. o tempo de impacto para a obtenção da energia absorvida pelo material. O terceiro considera somente os dados da velocidade do impactador, ou projétil, imediatamente antes e após o impacto. Concluiu-se que os valores de energia obtidos segundo as duas primeiras metodologias são similares, com o Laser-Doppler gerando resultados levemente não-conservadores, comprovando assim a possibilidade da derivação da resistência ao impacto do laminado através de um experimento simples e rápido, que utiliza apenas uma célula de carga digital para a monitoração da força aplicada em função do tempo. O terceiro método apresentou resultados substancialmente superiores às duas primeiras metodologias, sendo classificado como inadequado aos propósitos do projeto. Determinou-se que o laminado híbrido Glare-5®; absorve entre 60% e 80% da energia disponibilizada em impactos ditos leves, no intervalo de 1 a 6 Joules. Por fim, comprovou-se que a rigidez do material (módulo de elasticidade) é a propriedade residual (numa base de tolerância a danos) mais clara e consistentemente degradada pelo impacto previamente aplicado ao material. / Applications of hybrid fiber-metal laminates include, besides aeronautical industry, the automotive and naval industries. Unlike aeronautical field, impact research activities in the former areas of mobility industry are frequently limited by available laboratory equipment, so that it would be desirable to develop low-cost procedures to determine impact resistance and tolerance properties of construction materials. In this work, the transversal (trans-thickness) impact resistance and tolerance of hybrid fiber-metal laminate Glare-5® have been determined via three different methodologies. The first one utilizes sophisticated apparatus comprising a Laser-Doppler device to monitor deceleration/re-acceleration of 5 mm-diameter steel-ball impactor during the mechanical shock event. The second approach merely relies on the force (applied load) vs. impact time for determining the absorbed energy during the dynamic process. The third methodology requires only impactor velocity data points, immediately before and after the impact. It has been concluded that the energy values obtained from Laser- Doppler and load cell methods are very similar, with the former method producing slightly non-conservative results, allowing one to rapidly derive the impact resistance of hybrid laminate materials through very simple experimental set-ups employing digital load cells only. The third method presented somewhat higher results as compared to the concurrent techniques, so that it has been considered as inadequate for the research purposes. This study has shown that the fibre-metal laminate Glare absorbs between 60% and 80% of the apported impact energy during light impact events (ranging from 1 to Joules). Last, but not the least, materials stiffness was the most clearly and consistently imparted residual mechanical property (in a damage tolerance basis) due to the previous applied impact loading.
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Comparação entre métodos de inspeção não-destrutiva aplicados a peças compósitas laminadas sólidas estruturais aeronáuticas / Comparing nondestructive inspection methods applied to aeronautical grade solid structural composite laminated parts

Marcos Miranda 27 June 2011 (has links)
Diversos métodos de ensaios não-destrutivos (Ultrasom, Radiografia, Termografia e Shearografia) foram empregados na inspeção de peças laminadas estruturais compósitas sólidas de matriz polimérica manufaturadas pela indústria aeronáutica. Concluiu-se que Ultrasom pulso-eco convencional de contato foi a técnica mais abrangente na indicação de descontinuidades (danos/defeitos de manufatura) considerando-se peças planas e curvas, não obstante tenha falhado na detecção de trincas longas e bem definidas localizada na alma de componentes co-curados. Radiografia convencional por filmes exibiu um potencial interessante como método alternativo, ou complementar ao de Ultrasom. Termografia infravermelha foi a técnica mais veloz na indicação de descontinuidades, sendo uma valiosa alternativa para um mapeamento rápido em inspeções preliminares seguidas pela aplicação de técnicas complementares. Shearografia realizada com equipamento da empresa Photonita detectou inclusões em peça plana compósita, porém a interpretação dos resultados obtidos em geometrias mais complexas se mostrou duvidosa. O uso de equipamento shearográfico da empresa Dantec indicou posições em regiões curvas que podem estar associadas à presença de defeitos/danos locais, porém uma confirmação cabal desta relação não foi efetivada. Evidências visuais da profusa presença de danos/defeitos de manufatura, além da existência de detalhes construtivos nas peças compósitas mais complexas, sugerem que estas descontinuidades podem ter sensibilizado, em maior ou menor extensão, os equipamentos END, juntamente com a eventual presença de delaminações/falhas de adesão nas respectivas peças avaliadas. / Several nondestructive methods (Ultrasonics, Radiography, Thermography and Shearography) were employed for inspection of structural polymer matrix composite laminated parts manufactured by aircraft industry. Is has been concluded that conventional pulse-echo contact Ultrasonics was the most comprehensive technique to indicate discontinuities (manufacture damages/defects) in flat and curved parts, although it has failed to detect long and well-defined cracks in co-cured components. Conventional film radiography exhibited good potential as alternative or complementary method to Ultrasonics. Infrared thermography was the fastest technique to indicate discontinuities, so that it is a valuable option for rapid mapping in preliminary inspection followed by the application of complementary techniques. Sherography by means of Photonita equipment detected inclusions in flat panels, but the interpretation of results from pieces with more complex geometries was dubious. A shearographic of the Dantec device indicated positions in curved regions which might possibly be associated to the presence of damages/defects, however this relationship could not be definitively established. Visual evidences of the profuse existence of manufacture damages/defects, besides constructive details in more complex composite parts, suggest that theses discontinuities might have affected to some extent the NDT equipments, along with the eventual presence of delaminations/lack of adhesion on the respective evaluated parts.
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[pt] A COMUNICABILIDADE DO CASO CARLOS EDUARDO DE ALBUQUERQUE MARANHÃO: CAMINHOS E DESCAMINHOS DE UM DISCURSO DE RESISTÊNCIA NA CRACOLÂNDIA PAULISTA / [en] THE COMUNICABILITY OF THE CASE CARLOS EDUARDO DE ALBUQUERQUE MARANHÃO: COURSES AND DISCOURSES OF RESISTENCE IN THE CRACKLAND OF SÃO PAULO

MARIA HADDOCK LOBO 08 July 2021 (has links)
[pt] Este trabalho analisa um discurso de resistência gravado em 2017 na Cracolândia de São Paulo e observa sua viralização e circulação até sua transformação em um caso. A pesquisa investiga como a fala de Carlos Eduardo é seguidamente compartilhada (re-entextualizada) e quais são os efeitos discursivos destas circulações textuais. Mediadas por categorias da antropologia linguística contemporânea, as análises de dados interrelacionam a história da pesquisa, os temas maiores e a perspectiva da mídia corporativa sobre o caso. É uma pesquisa de natureza qualitativa, posicionada e implicad(íssima), pois é atravessada pela relação afetiva prévia entre o autor do discurso e a pesquisadora. A conclusão a que se chega é que o hibridismo do lugar social de Cadu é o próprio germe de sua mobilidade, que se manifesta no uso hábil das funções poéticas, no manejo dos índices que reúne. A transformação do caso em notícia abre por sua vez rotas de espraiamento (de comunicabilidade) diferentes das imaginadas (projetadas) no local de produção deste discurso (o coletivo antiproibicionista de redutores de danos A Craco Resiste). O entrelugar social de Cadu e seu lugar de exceção são grifados em narrativas focadas em sua biografia e os temas-tabu indiciados no discurso são apagados pela notícia espetacular de seu resgate improvável. / [en] The present work analyses a discourse of resistance recorded in 2017 in the Crackland of São Paulo and follows its process of going viral until it turns into a proper case. This research investigates: the way Carlos Eduardo s speech is repeatedly shared (re-entextualized) and which are the discourse effects of such textual circulations. Under the mediation of categories from the contemporary linguistic anthropology, the data analysis intertwines the story of this research with broader themes and the perspective of corporative media. Located in the tradition of qualitative research, this work positions itself as highly engaged and committed since it is directly connected to the personal relationship between the author of the discourse at stake and the present re-searcher. The conclusion is that the hybridism that defines Cadu s social place represents the germ of his mobility, which is expressed through his dexterous poetical faculties and the way he manages to access them. The transformation of the case into news opens up space for spreading routes of communicability which are distinct from the ones projected in its discoursive production site - the harm reduction anti-prohibitionist collective A Craco Resiste. Cadu s social inbetween place, as well as his exceptionalism, are highlighted throughout narratives focused in his biography while the taboo issues that come up in the discourse level are overcast by breaking news of his unlikely rescue.
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[en] DRUG EDUCATION AT SCHOOLS: CONCEPTS AND PRACTICES OF TEACHERS THAT CONCLUDED A DISTANCE LEARNING COURSE ON THE SUBJECT / [pt] EDUCAÇÃO SOBRE DROGAS NA ESCOLA: CONCEPÇÕES E PRÁTICAS DE PROFESSORES EGRESSOS DE UM CURSO EAD SOBRE O TEMA

ALINE SILVA MACHADO 01 June 2023 (has links)
[pt] Os usos de substâncias psicoativas tiveram ampliação em sociedades ocidentais a partir do século XIX, tendo alguns se tornado alvo de proibição. Dentro do tema das drogas, podem ser destacados diversos tópicos relevantes para debate, como os tipos de uso e as possibilidades de prevenção a riscos relacionados. Riscos estes que podem ser tanto da esfera individual quanto do âmbito social. Compondo sua relevância social, o consumo de álcool e outras drogas por jovens leva a uma defesa do debate deste tema nas escolas. Esta tese objetivou compreender práticas e concepções de educadores egressos do curso Educação, Drogas e Saúde nas Escolas, ministrado através da Fundação Centro de Educação Superior a Distância do Estado do Rio de Janeiro (Cecierj). Os instrumentos de pesquisa foram questionários aplicados em formulários online e entrevistas semiestruturadas realizadas também a distância, devido à pandemia de covid-19. Foi feita uma análise estatística descritiva das questões objetivas do questionário, enquanto as questões abertas e as entrevistas foram investigadas através da Análise de Conteúdo (BARDIN, 2016). Foram encontrados educadores que valorizam e utilizam abordagens dialógicas e se orientam pela perspectiva da redução de danos. Sobre o desenvolvimento destes trabalhos, foram relatados diferentes empecilhos, como a dificuldade de estabelecer parcerias por falta de interesse no tema ou receios ligados a tabus e a tendência para abordagens proibicionistas. Também há preocupações com possíveis acusações de apologia às drogas, medo de reprovação por parte dos responsáveis e por parte de agentes ligados ao tráfico de drogas nos entornos das escolas. Apesar disso, destacaram-se relatos sobre projetos desenvolvidos com participação ativa e interessada dos estudantes. Estes projetos foram influenciados pela formação em educação sobre drogas, apresentando indicadores de qualidade. Destaca-se, porém, sua dependência das iniciativas individuais dos educadores, que não possuem respaldo institucional e de políticas públicas para formação continuada no tema para o trabalho em si. / [en] The use of psychoactive substances expanded in Western society from the 19th century onwards, with some becoming the target of prohibition. Within the topic of drugs, several relevant topics can be highlighted for debate, such as types of use and possibilities for preventing related risks. These risks can be both individual and social. Due to its social relevance, the consumption of alcohol and other drugs by young people leads to a defense of the debate on this topic in schools. This thesis aimed to understand practices and conceptions of educators who graduated from the course Education, Drugs and Health in Schools, taught through the Center for Distance Higher Education Foundation of the State of Rio de Janeiro (Cecierj). Research instruments included questionnaires applied through online forms and semi-structured interviews conducted remotely due to the COVID-19 pandemic. A descriptive statistical analysis of the objective questions of the dialogue was carried out, while the open questions and interviews were investigated using Content Analysis (BARDIN, 2016). Educators were found who value and use dialogical approaches and are guided by the perspective of harm reduction. Regarding the development of these works, different obstacles were reported, such as the difficulty of establishing partnerships due to lack of interest in the subject or concerns related to taboos and the tendency towards prohibitionist approaches. There are also concerns about possible accusations of drug promotion, fear of disapproval by those responsible and by agents linked to drug trafficking in school environments. Despite this, reports on projects initiated with active and interested participation of students. These projects were influenced by training in drug education, presenting quality indicators. It stands out, however, its dependence on individual initiatives of educators, who do not have institutional support and public policies for continuing training in drug education and for the work itself.
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Influência do Gene APE1/REF-1 nas Respostas Celulares das Linhagens de Glioblastoma ao Quimioterápico Temozolomida / Influence of APE1/REF-1 Gene on Cellular Responses of Glioblastoma Cells to Chemotherapeutic Temozolomide

Montaldi, Ana Paula de Lima 05 September 2013 (has links)
A proteína APE1 (do inglêsApurinic/Apyrimidinicendonuclease 1/ Redox Factor-1 - APE1/REF-1) é uma enzima multifuncional, cuja expressão encontra-se frequentemente aumentada em gliomas. Além de apresentar atividade no reparo por excisão de base (BER), o gene APE1 também atua como fator de redução, mantendo fatores de transcrição (FTs) em um estado reduzido ativo. A via BER de reparo do DNA tem sido apontada como um possível fator de resistência a terapias baseadas no uso de agentes alquilantes, tais como temozolomida (TMZ). No presente trabalho, utilizou-se a estratégia de inibição da transcrição do gene APE1 pelo método de RNA interferente(siRNA) e tratamento com a droga TMZ nas células de glioblastoma (GBM), T98G (resistente à TMZ) e U87MG (sensível à TMZ), a fim de verificar a influência do silenciamento do gene APE1 sobre as respostas celulares à droga avaliadas por vários ensaios, bem como os efeitos sobre a expressão transcricional dos genes alvos dos FTs regulados por APE1. O silenciamento de APE1 e o tratamento das células T98G com a TMZ foram eficazes no sentido de reduzir a proliferação e a capacidade clonogênica, além de intervir na progressão do ciclo celular com bloqueio na fase S. Tais efeitos foram acompanhados pelo aumento da indução de danos no DNA e da expressão de H2AX fosforilada (H2AX), o que justifica a queda na sobrevivência celular. O mesmo efeito não foi observado nas células U87MG silenciadas para APE1 e tratadas com a TMZ, havendo o predomínio dos efeitos causados pela TMZ, exceto por uma leve indução de danos no DNA e de H2AX. Adicionalmente, nas células T98G silenciadas e tratadas, verificou-se uma moderada indução de apoptose, que foi observada ao longo dos tempos avaliados (1 a 10 dias), com uma leve indução de caspase-3 (5 dias); nessas células, observou-se também a indução (3,8 vezes) de morte celular autofágica (5 dias). Entretanto, nas células U87MG,a indução de apoptose foi baixa e não houve indução de morte por autofagia, sugerindo outros mecanismos de morte envolvidos na eliminação dessas células em resposta ao tratamento com a TMZ. O silenciamento de APE1 causou uma redução acentuada na invasão das células T98G, de forma similar à observada nas células somente tratadas com a TMZ, sendo que a combinação (silenciamento de APE1 e tratamento com a droga) resultou em um efeito aditivo, enquanto que nas células U87MG a combinação foi eficaz no sentido de reduzir a proporção de células invasivas, fato não observado nas condições isoladas. Os genes COX2 e VEGF, alvos dos FT NFB e HIF-1 (regulados por APE1) foram reprimidos nas células T98G enquanto que o gene VEGF foi induzido nas células U87MG, entretanto, tais alterações no padrão de expressão transcricional foram observadas somente em resposta ao tratamento com a TMZ, independentemente do silenciamento de APE1, indicando nenhuma mudança na atividade redox de APE1, possivelmente pela existência de proteínas APE1 remanescentes na célula. Além disso, a expressão proteica de NFBp65(ser563) foi aumentada em ambas as linhagens silenciadas e tratadas com a TMZ, provavelmente devido à inibição da proliferação celular. Em geral, os resultados do presente trabalho demonstraram que a estratégia de inibição do gene APE1 (participante da via BER) mostrou-se potencialmente viável, suportando a contribuição do BER na resistência à TMZ, visto que nas condições testadas, observou-se uma sensibilização das células de GBM, com efeito restrito às células de GBM resistentes (linhagem T98G), sendo pouco eficaz no sentido de sensibilizar as células sensíveis (linhagem U87MG) a esse agente. Assim, há que considerar as características genéticas de cada linhagem de GBM, visto que estas são cruciais para as respostas apresentadas pelas células aos tratamentos empregados. / APE1 (Apurinic/Apyrimidinic endonuclease 1/ Redox Factor-1 - APE1/REF-1) protein is a multifunctional enzyme whose expression is often increased in gliomas. Besides presenting activity in base excision repair (BER), APE1 also acts as a reduction factor, maintaining transcription factors (TFs) in an active reduced state. The BER pathway has been implicated as a possible factor of resistance to therapies based on the use of alkylating agents such as temozolomide (TMZ). In the present study, we have been using a strategy of small interference RNA (siRNA) to down-regulate the APE1 gene under conditions of treatment with TMZ in T98G (resistant to TMZ) and U87MG (sensitive to TMZ), glioblastoma (GBM), in order to determine the effects of APE1 gene silencing on cellular responses to this drug, evaluated by several assays, as well as the effects on the transcriptional expression of target genes of TFs regulated by APE1. APE1 silencing and TMZ treatment was effective to reduce the cell proliferation and clonogenic capacity of T98G cells, in addition to interfering in the cell cycle progression (S-phase arrest). These effects were accompanied by induction of DNA damage and phosphorylation of H2AX (H2AX), which may explain the decrease in cell survival. The same effect was not observed in silenced U87MG and TMZ-treated cells, being observed a predominance of the effects caused by TMZ itself, except for a slight induction of DNA damage and H2AX. Additionally, in silenced T98G and TMZ-treated cells, there was a moderate induction of apoptosis, as observed over time (1 to 10 days), with a slight induction of caspase-3 (on day 5); for those cells, we also observed autophagic induction (3.8 fold) at day 5. However, the induction of apoptosis and autophagy in U87MG cells was very low, suggesting that other mechanisms of cell death might be involved in the elimination of GBM cells under TMZ treatment. APE1 silencing caused a marked reduction on the invasiveness of T98G cells, similarly to that observed in TMZ treated cells, while the combination (APE1 silencing and drug treatment) led to an additive effect. For U87MG, the treatment combination was effective in reducing the proportion of invasive cells, in spite of an absence of any effect produced by each isolated condition tested. Regarding to the expression profile of target genes of TFs regulated by the APE1 redox activity, it was observed that COX2 and VEGF genes, targets of FTs NFB and HIF-1, were down-regulated in T98G while VEGF gene showed induced in U87MG cells; however, such alterations in the transcriptional expression pattern were observed only in response to TMZ treatment, independently of APE1 gene silencing, indicating no change in the APE1 redox activity, possibly due to the presence of APE1 remaining proteins inside cells. In addition, NFBp65(ser563) protein expression was increased in both cell lines (silenced and treated with TMZ), probably due to the reduced cell proliferation rates. In general, the present results show that the strategy of APE1 gene knockdown was potentially viable, supporting the BER contribution of the mechanism of TMZ resistance, since under the conditions tested, there was a sensitization of GBM cells. However, this effect was restricted to the resistant cell line (T98G cells). Thus, it should be considered the genetic characteristics of each GBM cell line, since these are crucial to the cellular responses to the conditions tested in the present work.
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Respostas a danos no DNA envolvidas na recuperação do bloqueio da replicação e transcrição em células humanas. / DNA damage responses involved in the recovery of replication and transcription blockage in human cells.

Lima, Leonardo Carmo de Andrade 14 July 2014 (has links)
A luz ultravioleta (UV) bloqueia a replicação e transcrição devido à formação de lesões que distorcem o DNA. Descobrimos que a depleção da quinase ATR promove a indução precoce de apoptose após irradiação com luz UVB em fibroblastos humanos imortalizados com SV40 e que mesmo células proficientes em reparo de DNA e síntese translesão foram incapazes de alcançar a mitose após depleção de ATR. Essa quinase também representa um alvo promissor para sensibilizar tumores com mutações em p53 ao quimioterápico cisplatina e ao indutor de estresse oxidativo cloroquina. Além do bloqueio da replicação, danos no DNA bloqueiam a síntese de RNA. Utilizamos sequenciamento para mapear RNA nascentes e analisar a recuperação da transcrição em escala genômica. Genes mais longos são mais inibidos por luz UV, mas o nível de expressão gênica não contribui para a recuperação da transcrição. Além disso, o reparo de DNA é similar entre genes com recuperação da transcrição distinta e outras regulações, além da remoção de lesões no DNA, devem existir para que a síntese de RNA recomece. / Ultraviolet (UV) light stalls replication and transcription due to the formation of lesions that distort DNA. We found that ATR silencing promotes early induction of apoptosis after UVB light in human fibroblasts immortalized with SV40 and even cells proficient in DNA repair and translesion synthesis were unable to reach mitosis after ATR depletion. This kinase is also a promising target for sensitizing tumors with p53 mutations to chemotherapeutic that block replication, such as cisplatin, and the oxidative stress inducer chloroquine. In addition to blocking the replication, DNA damage arrest the synthesis of RNA. We used next-generation sequencing to map and analyze the nascent RNA transcription recovery genome-wide. We confirmed that longer genes are more inhibited following UV light, however, the level of gene expression does not contribute to the recovery of transcription. Moreover, DNA repair is similar among genes with different recovery of transcription and further regulation, besides DNA damage removal, must exist to promote resumption of RNA synthesis.
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Alterações na Cinética de Reparo do DNA e nos Perfis de Expressão de Genes de Resposta ao Estresse em Linfócitos de Portadores da Doença de Alzheimer. / Lymphocytes of Patients with Alzheimer\'s Disease display different DNA Damage Repair Kinetics and Expression Profiles of Stress Response Genes.

Leandro, Giovana da Silva 13 September 2011 (has links)
A Doença de Alzheimer (DA) é uma demência senil neurodegenerativa crônica, que causa um grande impacto na saúde pública. Apesar de o estresse oxidativo ter sido largamente associado ao processo de envelhecimento e à patogênese das doenças neurodegenerativas (incluindo DA), a literatura sobre o papel do estresse oxidativo no desenvolvimento da DA ainda é escassa assim como para seus fatores de risco. O presente trabalho teve o objetivo avaliar se os linfócitos de pacientes com DA apresentam alterações nos níveis de expressão de alguns genes associados à respostas ao estresse, tais como SOD1, TP53, ATM, ATR, FEN1, FANCG, CDKN1A e MTH1; além de ADAM10 e ADAM17, associados diretamente a patologia. Além disso, foi proposto também avaliar os níveis de danos no DNA e a cinética de reparo dos linfócitos desses indivíduos quando tratados com peróxido de hidrogênio (H2O2), um agente indutor de danos no DNA. As amostras de sangue foram coletadas de pacientes com DA (idade entre 65 a 80 anos) e indivíduos idosos de mesma idade para analisar a expressão gênica protéica por Western blot (n=6) e a expressão transcricional por PCR quantitativa em tempo real (n=7). O ensaio cometa foi realizado para analisar os danos no DNA e a cinética de reparo em linfócitos de pacientes com DA (n=8), indivíduos idosos de mesma idade (n=8) e jovens sadios (n=5; faixa etária entre 18 e 28 anos), cultivados por 48h e tratados com H2O2 por 1h, e analisados em diferentes tempos de recuperação: 0; 0,5; 2 e 6 horas. A análise da expressão gênica por PCR em tempo real mostrou que o gene FANCG, cuja função está relacionada ao controle do ciclo celular e ao reparo do DNA, estava induzido em portadores de DA; o gene CDKN1A, envolvido na resposta a danos no DNA, também se apresentou induzido em portadores de DA. No entanto, não foram observadas alterações com diferenças significativas nos perfis transcricionais dos genes ATM, ATR, FEN1 e MTH1 entre portadores de DA e controles. Em relação às proteínas analisadas, foi observada uma sutil diminuição nos níveis da SOD1 em DA, mas não houve diferenças para ADAM10 e ADAM17. Além disso, observou-se um aumento da expressão da proteína TP53, enquanto a análise da forma fosforilada (serina 15) apresentou baixos níveis de indução. Esses resultados são compatíveis com a ausência de diferença nos níveis de expressão dos genes ATM e ATR. Em relação à análise de indução de danos no DNA e à cinética de reparo, os resultados mostraram diferenças significativas entre os portadores de DA e os controles, o que pode sugerir que os mecanismos envolvidos no processamento do dano oxidativo são diferentes na patologia de Alzheimer quando comparados ao processo de envelhecimento per se. Finalmente, os resultados obtidos sustentam a hipótese de que as vias de reparo do DNA podem estar comprometidas na DA. Além disso, foi mostrado que linfócitos do sangue periférico humano podem refletir pelo menos algumas das alterações associadas à doença, o que incentiva maiores investigações nessas células que possam fornecer biomarcadores com potencial para contribuir na caracterização da DA. / Alzheimers disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder that causes a high impact on public health. Although oxidative stress has been associated with the aging process and the pathogenesis of neurodegenerative diseases (including AD), the literature is still scarce regarding the risk factors for the disease and the role of oxidative damage in the development of AD. The purpose of the present work was to study whether lymphocytes of AD patients display alterations in the expression levels of several genes related to stress responses, such as SOD1, TP53, ATM, ATR, FEN1, FANCG, CDKN1A, MTH1; and the genes ADAM10 and ADAM17 directly associated with the pathology. In addition, our objective was to evaluate the levels of DNA damage and repair kinetics in lymphocytes treated with hydrogen peroxide (H2O2). Blood samples were collected from AD patients (age between 65 and 80 years) and elderly individuals in order to analyze protein expression by Western blot (n=6) and transcript expression by quantitative real time PCR (n=7). The comet assay was used to investigate DNA damage and repair kinetics in lymphocytes of AD patients (n=8), elderly age-matched individuals (n=8), and young healthy individuals (n=5; age between 18 and 28 years). In order to accomplish that, lymphocytes were cultured for 47h, treated with H2O2 for 1h, and analyzed at different recovery times: 0, 0.5, 2, and 6h. The analysis of gene expression by real time qPCR showed that FANCG (implicated in cell cycle control and DNA repair) and CDKN1A (involved in the response to DNA damage stimulus) were both up-regulated in AD patients when compared to controls. In contrast, alteration in transcript profiles of ATM, ATR, FEN1, and MTH1 genes were not significantly different between groups of patients and controls. A small decrease in SOD1 protein levels was detected in AD patients; but, the proteins ADAM10 and ADAM17 expression levels was not different. Moreover, the expression of TP53 was increased in AD patients, while only low levels of TP53-phospho-Ser15 could be found; the latter is consistent with the fact that alterations in the expression levels of ATM and ATR were not observed. Regarding the analysis of DNA damage and repair kinetics, results showed significant differences between AD patients and controls, suggesting that the mechanisms involved in the oxidative DNA damage processing are different in the pathology of Alzheimers disease compared to the process of aging itself. Therefore, the results of the present study support our hypothesis that repair pathways may be compromised in AD. In addition, we showed that peripheral lymphocytes may reflect at least some alterations associated to the disease, encouraging further investigation to search for biomarkers present in these cells that might characterize AD.
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Atuação da(o) psicóloga(o) no CAPSAD e suas representações em relação ao uso de álcool e outras drogas / A atuação da(o) psicóloga no CAPSad e suas representações em relação ao uso de álcool e outras drogas

Oliveira, Aline Tambory de 13 March 2017 (has links)
À luz da teoria interacionista do desvio esta pesquisa tem como objetivo estudar as representações de psicóloga(o)s que trabalham em CAPSad em relação ao uso de álcool e outras drogas. Partimos da hipótese de que as psicóloga(o)scontratadas na instituição teriam como representação o uso abusivo de drogas como comportamento desviante e o usuário como doente. O método de pesquisa escolhido foi entrevistas semiestruturadas realizadas em quatro CAPSad. A pesquisa foi dividida em duas partes, sendo a primeira delas realizada como projeto piloto em um município que contava apenas com aquela unidade e teve a participação de duas psicóloga(o)s e a segunda realizada em três unidades do CAPSad numa mesma região na cidade de São Paulo que teve como participação cinco psicóloga(o)s. Para levantamento destas representações consideramos as políticas de saúde mental na área de álcool e outras drogas, a influência da Reforma Psiquiátrica e o Conceito de redução de danos, além da história das drogas e do proibicionismo no Brasil e no mundo / Through the deviance interactionist theory this research aims to study the representation of CAPSad psychologists regarding the use of alcohol and other drugs. We set out the hypothesis that the psychologists contracted in the institution would have representation the abusive use of drugs such as deviant behavior and the user as a sick. The method chosen was semi-structured interviews carried out in four CAPSad. The survey was divided into two parts, the first of them performed as a pilot project in a city that there is only one unit and had the participation of two psychologists and the second held in three CAPSad units in the same region in the city of São Paulo that had the participation of five psychologists. To identify these representations we consider mental health policies in the area of alcohol and other drugs, the influence of the psychiatric reform and the concept of harm reduction, beyond the story of drugs and the prohibition in Brazil and in the world

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