L'objectif de cette thèse consiste à développer une approche globale couplant les procédés sol-gel, les propriétés d'auto-assemblage des tensioactifs et l'atomisation séchage afin d'encapsuler directement des principes actifs dans des microsphères nanostructurées. Nous nous attachons en particulier à étudier les variations de la localisation et l'état physique des principes actifs en fonction des paramètres de synthèse. Le but de ce travail est également de mettre en relation les propriétés de libération avec la texture et la composition des microsphères. En parallèle, cette thèse a aussi pour objectifs la découverte de nouvelles familles de matériaux texturés et l'approfondissement des connaissances sur les mécanismes de formation des microsphères mésoporeuses. / For the first time, a new one-pot synthesis approach associating sol-gel, self-assembly andspray-drying allows in forming microspheres with tuneable textures (worm-like mesophases,drug nano-domains, core-shell organisation) and drug delivery properties (from burst todelayed releases). The parameters which control these properties are the surfactant content,the nature of the couples (drug, surfactant) as well as the functionalisation of the siloxanenetwork.

A protoporfirina IX (PpIX) é uma substância fotodinâmicamente ativa, entretanto, devido a sua alta lipofilia apresenta dificuldades para penetrar nas camadas mais profundas da pele, não sendo administrada topicamente. Assim, o objetivo deste trabalho é estudar a influência de diferentes tipos de dendrímeros de poliamidoamina (PAMAM) na solubilidade, penetração cutânea e penetração celular da PpIX com o intuito de melhorar a terapia fotodinâmica tópica (TFD) com esta substância. Os estudos de solubilidade da PpIX na presença dos dendrímeros PAMAM G4, G4.5 e G4-OH mostraram que o dendrímero PAMAM G4.5, foi o que solubilizou a maior quantidade de PpIX seguido do PAMAM-OH G4> PAMAM G4 > tampão HEPES. A partir dos estudos de solubilidade foi possível identificar que a PpIX na presença dos dendrímeros PAMAM G-4.5 e G4-OH apresentam diagramas de solubilidade tipo BS, e BI quando na presença do PAMAM G4. Os estudos de varredura em espectroscopia UV-VIS e fluorescência indicaram a presença de agregados principalmente nos complexos PpIX-PAMAM G-4.5 obtidos. Os complexos solúveis PpIX-PAMAM G4-OH apresentaram tamanho médio de 13,2 nm, e potencial zeta de -3,41. Já os complexos com o dendrímero PAMAM G-4.5 apresentaram uma população bidispersa, com tamanhos de 31 e 391 nm e um potencial zeta de -17,3. A análise de DSC e espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourrier mostraram alterações nas características da PpIX em solução e quando complexada com os dendrímeros. Nos estudos de permeação e retenção cutânea passiva com os complexos contendo 0,006 mg/mL de PpIX, estes não aumentaram a penetração cutânea do fármaco. No entanto, a complexação permitiu que maiores quantidades de PpIX ficassem disponíveis na solução doadora, e um aumento significativo na penetração da PpIX foi observado quando experimentos com 1 mg/mL de PpIX complexada foram conduzidos; ademais notou-se uma possível ação promotora do dendrímero PAMAM G4-OH. Nos estudos de iontoforese verificou-se que a corrente elétrica não aumentou a penetração da PpIX em relação aos experimentos passivos quando o complexo PpIX-PAMAM G4.5 foi estudado, provavelmente devido a maior liberação da PpIX do complexo na presença da corrente elétrica, aumentando os agregados que são grandes o suficientes para não penetrar na pele. Por outro lado, a iontoforese anódica aumentou a penetração do complexo PpIX-PAMAM G4-OH por eletrosmose até as camadas mais profundas da pele, levando a PpIX inclusive até a solução receptora. Os estudos de cultura de células tumorais confirmaram a capacidade dos dendrímeros em aumentar a penetração da PpIX através de membrana. A complexação melhorou a distribuição da PpIX no interior das células e aumentou significativamente a fotocitotoxicidade desta porfirina. / Protoporphyrin IX (PpIX) is a photodynamic active drug that is not topically administered due to its high lipophilicity and consequent low penetration in deep skin layers. The aim of this work is to study the influence of different types of polyamidoamine dendrimers (PAMAM) in PpIX solubility, skin and cell penetration to enhance topical photodynamic therapy (PDT). The solubility studies of PpIX in the presence of PAMAM dendrimers G4, G4.5 and G4-OH demonstrated that the G4.5 solubilized the greatest amount of PpIX, followed by PAMAM G4-OH> PAMAM G4> HEPES buffer. Solubility studies showed that the PpIX in the presence of PAMAM dendrimers G-4.5 and G4-OH presented solubility diagrams of BS type, and BI type in the presence of PAMAM G4. Studies of scanning UV-VIS and fluorescence indicated the presence of aggregates mainly in PpIX-PAMAM G-4.5 solution. The PpIX-PAMAM G4-OH complexes showed a mean size of 13.2 nm and zeta potential of -3.41; the complexes with PAMAM dendrimer G-4.5 had a bi-dispersed population, with sizes of 31 and 391 nm and a zeta potential of -17.3. The analysis of DSC and Fourier transform infrared Fourier showed changes in the characteristics of PpIX when it was complexed with the dendrimers. Passive skin permeation and retention studies with the complexes containing 0.006 mg/ml PpIX had not increased PpIX penetration, however, the complexation allowed greater amounts of PpIX to become available in the donor solution, and experiments with 1 mg/mL of PpIX increased significantly the penetration of the drug. Moreover, dendrimer PAMAM G4-OH seemed to act as a penetration enhancer. Iontophoresis did not increase skin penetration of PpIX compared to passive studies when the PpIX-PAMAM G4.5 was studied, likely because the electric current increased PpIX release from the complexes, forming aggregates large enough to not penetrate through the skin. On the other hand, anodic iontophoresis increased significantly the penetration of the PpIX-PAMAM G4-OH by eletrosmosis, spreading the drug to deep skins layers, also reaching the receiver solution. Studies in cell culture confirmed the ability of dendrimers to increase the penetration of PpIX through the membrane. The complexation improved the distribution of PpIX within the cells and significantly increased photocytotoxic of the porphyrin.

O objetivo deste estudo foi avaliar clinicamente em humanos sistemas semissólidos (géis) e filmes contendo sal de metronidazol e conjugado de benzoato de metronidazol associados à raspagem e alisamento radicular (RAR), para o tratamento de periodontite. Foram avaliados o pH do fluido crevicular, os níveis clínicos de inserção óssea de suporte aos dentes envolvidos no tratamento periodontal, antes e após os tratamentos, além do perfil de liberação dos fármacos por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Participaram do estudo 45 pacientes da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto USP, de ambos os gêneros, os quais possuíam ao menos 2 dentes com periodontite crônica, compondo um total para o estudo de 96 dentes, divididos aleatoriamente em 3 grupos: grupo 1 raspagem e alisamento radicular (RAR) controle ativo; grupo 2 RAR + filme com metronidazol; grupo 3 RAR + gel de metronidazol. As concentrações de metronidazol e o tempo de liberação do fármaco no fluido crevicular gengival foram monitorados, avaliando-se ainda os efeitos dessas formulações com relação a parâmetros clínicos da periodontite. Os efeitos dos tratamentos foram avaliados pelo acompanhamento longitudinal de parâmetros clínicos (profundidade de sondagem, nível clínico de inserção e sangramento à sondagem). Os resultados da análise das concentrações de metronidazol e benzoato de metronidazol na bolsa periodontal dos pacientes foram considerados em avaliação paralela intragrupos e demonstraram que o filme e o gel foram detectados em concentração efetiva até 48 horas após a aplicação in situ, porém não foi observada diferença significante entre os grupos avaliados. Quanto aos valores de pH após o tratamento, eles variaram entre 6 e 8. No nível clínico de inserção houve diferença estatística significante entre os três grupos avaliados, sendo que o grupo que recebeu apenas tratamento periodontal convencional apresentou os melhores valores. Houve redução progressiva do sangramento à sondagem nos tempos T15 e T30 nos três grupos considerados. No que se refere aos parâmetros clínicos, ambas as terapias (gel e filme) foram eficazes em promover a redução na profundidade à sondagem, ganho no nível clínico de inserção e apresentaram melhora na saúde periodontal considerando-se o menor sangramento após a sondagem que o grupo controle (RAR somente). / The objective of this study was to clinically evaluate in humans semisolid (gels) and films systems containing metronidazole and metronidazole benzoate conjugate salts associated with scaling and root planing (SRP) for the treatment of chronic periodontitis. It was evaluated the pH of crevicular fluid and clinical bone attachment levels of the teeth involved in periodontal disease, before and after treatment, in addition to the release profile of drugs by high-performance liquid chromatography (HPLC). The study included 45 patients (both genders), from School of Dentistry of Ribeirão Preto, University of São Paulo, which had at least two teeth with chronic periodontitis, making a total for the study of 96 teeth which were randomly divided into 3 groups: Group 1 - scaling and root planing (SRP) - active control; Group 2 - RAR + film with metronidazole; Group 3 - SRP + gel with metronidazole. The metronidazole concentration and the drug release profile time in gingival crevicular fluid were monitored by evaluating the effects of such formulations, further with respect to clinical parameters of periodontitis. The effects of the treatments were evaluated for longitudinal monitoring of clinical parameters (probing depth, clinical attachment level and bleeding on probing). The results of the analysis of metronidazole and metronidazole benzoate concentrations in periodontal pockets of the patients were considered in a intragroup parallel evaluation and showed that the film and the gel were both detected in effective concentration till 48 hours after in situ application, but there was no difference significant between the groups. As for pH values after treatment, they ranged from 6 to 8. In clinical attachment level it was no statistically significant difference among the three groups, and the group that received only conventional periodontal treatment showed the best values. There was a progressive reduction in bleeding on probing in T15 and T30 times in all the three groups considered. With regard to clinical parameters, both therapies have been effective in promoting reduction in probing depth and gain in clinical attachment level as the control group, and both therapies showed improvement in periodontal health considering minor bleeding after probing that the (SRP alone) control group.

Project process\' hindrances over office architectural design production are common at civil construction sector, implying on schedule loss, reworks and higher costs. Many academic literature approaches to that hindrance resulted from failure in project process. Predominantly failures concern translating customer needs and expectations into design conditions. This research objectives to propose scope of work guidelines, securing customer satisfaction and avoiding unforeseen additional costs, reworks, schedule and project benefit loss. Additionally, for each guideline proposed, it is suggested an accountable for it (project manager, architect or client). The adopted methodology was the research and analysis of project methodologies from academic literatures, contenting responsibilities definitions and design criteria that should be considered on the approved scope of work. Furthermore, the creation and implementation of an interview plan with one Brazilian high concept corporative architecture firm and its three clients, in a way that it is possible to measure client\'s point of view over contracted project process. Results from the interviews identified scope definition and project process planning hindrances. Then, in comparison with academic literatures, main project and scope of work issues were identified and used as base to the scope of work development guidelines. / A produção de projetos de arquitetura e engenharia no setor de construção civil apresenta entraves em seus processos de projeto, que implicam em perda de prazo, aumento de custos de projeto e retrabalhos. Diversos autores abordam falhas na gestão do processo de projeto, principalmente na interpretação das necessidades dos clientes e na definição dos critérios que o projeto deve seguir, alguns não previstos no escopo de contratação entre a empresa de arquitetura e o cliente. Esta pesquisa propõe diretrizes para que as empresas de arquitetura possam, junto ao gerente de projetos dos clientes, definir um escopo de serviços em que retrabalho, custos adicionais, atrasos e a insatisfação do cliente com o processo sejam reduzidos ou evitados. Para cada diretriz, há também a definição de quem é o responsável por executá-la (se o arquiteto ou o cliente). A metodologia utilizada para obtenção desse objetivo foi o levantamento e revisão de bibliografia sobre metodologias de projeto e de contratos de projetos, que auxiliem na definição de responsabilidades, atividades e critérios de projeto. Em acréscimo, foi formulado um roteiro de entrevista e eleita uma empresa de arquitetura corporativa com experiência de mercado no Brasil, assim como três clientes da mesma, de forma a mapear o ponto de vista do cliente sobre o processo empregado pela contratada. Com os resultados das entrevistas, fez-se uma análise comparativa entre os métodos de projeto empregados pela empresa de arquitetura e o encontrado em bibliografia, identificando os principais entraves no desenvolvimento e definição do escopo de serviços. Por fim, tais resultados foram utilizados como base para propor diretrizes para que o escopo de serviços entre arquitetos e clientes prevejam revisões de projeto, traduzam efetivamente as necessidades do cliente e atendam prazos e custos esperados.

O mecanismo de interferência por RNA (RNAi) é um evento de silenciamento gênico através da degradação do RNA mensageiro. Desta forma, a administração de siRNA (molécula efetora do RNAi) é uma terapia promissora para o tratamento de diversas doenças como o câncer. Porém, para a sua efetiva aplicação terapêutica é necessário o desenvolvimento de sistemas de liberação capazes de liberar o siRNA nas células alvo, promover a sua internalização celular e evitar a sua degradação. Dentre os sistemas de liberação, os de liberação localizada, como os sistemas de geleificação in situ, apresentam vantagens sobre administração sistêmica. Formulações fluidas precursoras (FFP) que formam sistemas líquido cristalinos viscosos in situ podem ser obtidas a partir de lipídeos anfifílicos que absorvem água do meio e se rearranjam. Neste contexto, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar o gel formado in situ a partir da FFP (G-FFP), composta por monoglicerídeos (MO), polietilenoimina (PEI), propilenoglicol (PG) e tampão tris, como sistema de liberação localizada de siRNA na terapia do câncer de pele. Os resultados mostraram que o G-FFP é uma mistura de fase cúbica e fase hexagonal. O G-FFP liberou o siRNA de maneira sustentada e complexado ao PEI. A FFP pode ser esterilizada por filtração em membrana e foi capaz de complexar altas concentrações de siRNA (15 mM) e de proteger o siRNA da degradação. A citotoxicidade foi dependente da concentração de FFP e esta quando complexada com siRNA teve a toxicidade diminuída. O siRNA liberado do G-FFP foi internalizado pelas células A431, FaDu, HeLa, A549, WM35/DLC2-GFP e MCF-7/DLC2-GFP. Além disto, siRNAs específicos liberados pelo G-FFP foram capazes de reduzir a expressão da proteína Firefly luciferase em células HeLa e FaDu, pórem não foram capazes de reduzir a expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) nas células A431, HeLa, A549 e FaDu. A redução da expressão de EGFR em células A549 foi observado quando a terapia com siRNA foi combinada com internalização fotoquímica. Destes resultados, pode-se inferir que a transfecção celular do siRNA e o silenciamento gênico promovido por ele foi dependente tanto do tipo de linhagem celular como do alvo desejado. Os estudos in vivo mostraram que ocorre a formação de gel intratumoral e após 3 dias da administração intratumoral da FFP contendo siRNA específico para EGFR houve redução de 30% no tamanho dos tumores comparados aos tumores tratados com FFP sem siRNA. Diante destes resultados, pode-se concluir que o sistema desenvolvido tem potencial como sistema de liberação localizada de siRNA quando aplicado subcutaneamente ou intratumoral, uma vez que complexa o siRNA, promove a sua internalização celular e o siRNA liberado no citoplasma das células pode reduzir a expressão de proteínas de interesse. / RNA interference (RNAi) is a mechanism in which small interfering RNA molecules (siRNA) inhibit gene expression, by causing the messenger RNA degradation. Thus, siRNA is a promising therapy for the treatment of several diseases such as cancer. However, the development of delivery systems able to protect the siRNA from degradation and promote its cell uptake is essential for therapeutic use of siRNA. Among the delivery systems, the localized delivery system such as in situ gelling delivery system, have advantages over systemic administration. Precursor fluid formulations (FFP), which forms in situ viscous liquid crystalline systems, can be obtained from amphiphilic lipids that absorb water from the environment and self-assembling. In this context, the present study aimed to evaluate the in situ gel formed from the FFP (G-FFP), composed of monoglycerides (MO), polyethyleneimine (PEI), propylene glycol (PG) and Tris buffer, as localized delivery system for siRNA in skin cancer therapy. The results showed that the G-FFP is a mixture of cubic and hexagonal phase. The G-FFP sustained release of siRNA and the siRNA is released complexed with PEI. The FFP can be sterilized by membrane filtration at 0.22 ?m. FFP was able to complex high siRNA concentration (15 mM) and protect the siRNA from degradation. The cytotoxicity was dependent on the FFP concentration, when FFP was complexed with siRNA it was observed a decreased in toxicity. The siRNA released from G-FFP was uptake by A431, FaDu, HeLa, A549, WM35/DLC2-GFP and MCF-7/DLC2-GFP cells. In addition, specific siRNAs released from G-FFP were able to reduce the expression of Firefly luciferase in HeLa and FaDu cells, but they were unable to reduce the expression of the epidermal growth factor receptor (EGFR) in A431, HeLa, A549 and FaDu cells. The reduction of expression of EGFR in A549 cells was observed when siRNA therapy was combined with photochemical internalization. From these results, can be inferred that the efficiency of siRNA transfection and knockdown was dependent on both the type of cell line and the desired target protein. In vivo studies showed that the gel was formed in situ after intratumoral injection. 3 days after intratumoral administration of FFP containing EGFR specific siRNA, 30% of reduction in the tumors size compared to tumors treated with FFP without siRNA was observed. Based on these results, could be concluded that the developed system is a potential siRNA delivery system when administered subcutaneously and intratumoral, because it was able to complex siRNA, promoted its cell uptake and the siRNA released into the cytoplasm of the cell may reduce the expression of target proteins

Project process\' hindrances over office architectural design production are common at civil construction sector, implying on schedule loss, reworks and higher costs. Many academic literature approaches to that hindrance resulted from failure in project process. Predominantly failures concern translating customer needs and expectations into design conditions. This research objectives to propose scope of work guidelines, securing customer satisfaction and avoiding unforeseen additional costs, reworks, schedule and project benefit loss. Additionally, for each guideline proposed, it is suggested an accountable for it (project manager, architect or client). The adopted methodology was the research and analysis of project methodologies from academic literatures, contenting responsibilities definitions and design criteria that should be considered on the approved scope of work. Furthermore, the creation and implementation of an interview plan with one Brazilian high concept corporative architecture firm and its three clients, in a way that it is possible to measure client\'s point of view over contracted project process. Results from the interviews identified scope definition and project process planning hindrances. Then, in comparison with academic literatures, main project and scope of work issues were identified and used as base to the scope of work development guidelines. / A produção de projetos de arquitetura e engenharia no setor de construção civil apresenta entraves em seus processos de projeto, que implicam em perda de prazo, aumento de custos de projeto e retrabalhos. Diversos autores abordam falhas na gestão do processo de projeto, principalmente na interpretação das necessidades dos clientes e na definição dos critérios que o projeto deve seguir, alguns não previstos no escopo de contratação entre a empresa de arquitetura e o cliente. Esta pesquisa propõe diretrizes para que as empresas de arquitetura possam, junto ao gerente de projetos dos clientes, definir um escopo de serviços em que retrabalho, custos adicionais, atrasos e a insatisfação do cliente com o processo sejam reduzidos ou evitados. Para cada diretriz, há também a definição de quem é o responsável por executá-la (se o arquiteto ou o cliente). A metodologia utilizada para obtenção desse objetivo foi o levantamento e revisão de bibliografia sobre metodologias de projeto e de contratos de projetos, que auxiliem na definição de responsabilidades, atividades e critérios de projeto. Em acréscimo, foi formulado um roteiro de entrevista e eleita uma empresa de arquitetura corporativa com experiência de mercado no Brasil, assim como três clientes da mesma, de forma a mapear o ponto de vista do cliente sobre o processo empregado pela contratada. Com os resultados das entrevistas, fez-se uma análise comparativa entre os métodos de projeto empregados pela empresa de arquitetura e o encontrado em bibliografia, identificando os principais entraves no desenvolvimento e definição do escopo de serviços. Por fim, tais resultados foram utilizados como base para propor diretrizes para que o escopo de serviços entre arquitetos e clientes prevejam revisões de projeto, traduzam efetivamente as necessidades do cliente e atendam prazos e custos esperados.

基於「服務傳送系統為服務業管理活動的重心」之研究動機，本論文主要 在探討服務傳送系統的內涵、類型及影響其設計與管理的關鍵因素，採用 八個不同業態、業種且具代表性之連鎖服務企業之實證個案進行定性探索 性之研究，據以推論不同類型的連鎖服務業，其服務傳送系統的類型及影 響因素有何不同？服務傳送系統是將服務傳給顧客的過程活動，具有生產 與消費的特性，因此，涵蓋行銷與作業領域的服務傳送系統在設計上應兼 顧服務設計、服務程序的選擇、以及實體環境的呈現等構成要素之配合。 本論文以服務完成量及顧客參與度等構面將服務傳送系統分為連線式、零 工式、專案式等三類型，並以服務工廠型、大量服務型、服務工站型、專 業服務型等四類型的連鎖服務業，分別探討其間的關係，並推演出相關命 題。本論文之研究結論包括(1) 連鎖服務業的服務傳送系統與其服務作業 的標準化程度有關。(2) 不同類型的服務傳送系統，其服務程序的類型之 之選擇亦不同。(3) 不同類型的連鎖服務業，其服務傳送系統的選擇亦不 同，服務工廠型及大量服務型的連鎖服務業傾向於採用連線服務式，其資 訊化程度較高；服務工站型的連鎖服務業傾向於採用零工服務式，其前後 場的服務作業配合程度較高；專業服務型的連鎖服務業傾向於採用專案服 務式，其服務人員的專業程度較高。最後，本研究並提出對連鎖服務業採 行服務傳送系統的類型及影響因素之建議，以及對後續研究之建議。

Thesis (Ph.D. (Nursing))--North-West University, Potchefstroom Campus, 2006.

In this study, pharmaceutical-grade and food-grade linker-based lecithin self-emulsifying delivery systems (SEDS) were developed with a combination of lipophilic and hydrophilic linkers. These additives at suggested concentrations are safe for pharmaceutical and food applications. The ratio of surfactant lecithin and linkers in these systems was optimized to develop surfactant in oil preconcentrates. The preconcentrates containing different surfactant concentrations and oil were diluted with fed state simulated intestinal fluid to produce pseudo-ternary phase diagrams and to identify the formulations that produced self-emulsifying or self-microemulsifying delivery systems. Optimal SEDS preconcentrates were evaluated using a dialyzer model to simulate intestinal uptake. An uptake of 39.6 mg/cm2 for the pharmaceutical-grade SEDS was obtained within 72 minutes, which promises substantial improvement in the bioavailability of hydrophobic actives. The optimal uptake of 12.2 mg/cm2 for food-grade SEDS suggests enhancement in the bioavailability of omega-3 fatty acids.

The goal of this thesis was to develop a new drug-delivering material to deliver anti-inflammatory protein for treating OA. Our central hypothesis for this work is that a controlled release/presentation system will more effectively deliver anti-inflammatory protein therapies to the OA joint. The primary goal of this work was to synthesize a block copolymer that could self-assemble into injectable, sub-micron-scale particles and would allow an anti-inflammatory protein, IL-1ra, to be tethered to its surface for efficient protein delivery. The block copolymer incorporated an oligo-ethylene monomer for tissue compatibility and non-fouling behavior, a 4-nitrophenol group for efficient protein tethering, and cyclohexyl methacrylate, a hydrophobic monomer, for particle stability. We engineered the copolymer and tested it in both in vitro culture experiments and an in vivo model to evaluate protein retention in the knee joint. The rationale for this project was that the rational design and synthesis of a new drug- and protein-delivering material can create a modular polymer particle that can deliver multi-faceted therapies to treat OA. This work characterizes the in vitro and in vivo behavior of our polymer particle system. The protein tethering strategy allows IL-1ra protein to be tethered to the surface of these particles. Once tethered, IL-1ra maintains its bioactivity and actively targets synoviocytes, cells crucial to the OA pathology. This binding happens in an IL-1-dependent manner. Furthermore, IL-1ra-tethered particles are able to inhibit IL-1beta-induced NF-kappaB activation. These studies show that this particle system has the potential to deliver IL-1ra to arthritic joints and that it has potential for localizing/targeting drugs to inflammatory cells of interest as a new way to target OA drug treatments.