Orientador: Lucia Regina Durrant / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:01:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kamida_HelioMitoshi_D.pdf: 1013300 bytes, checksum: 25000cf80fe0670f1dbbd480e059abad (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

Orientador: Thales Rocha de Mattos Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:19:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goulart_MariadasGracasVilela_D.pdf: 1642987 bytes, checksum: fe38a17584e1588a4dd449524166738d (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

Orientadores: Glaucia Maria Pastore, Gabriela Alves Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:56:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_LauroLuisMartinsMedeirosde_M.pdf: 884946 bytes, checksum: 5186705d88503555f6c035cd82e22868 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador : Nelson E. Duran Caballero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:39:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_JulianoSouza_M.pdf: 3174279 bytes, checksum: 2cc9319f05aa72b5f4ab3d2f02b5efa6 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Helia Harumi Sato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:37:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_LucianaFerracinidos_D.pdf: 770618 bytes, checksum: dd35fe6e118453b7f39ad6ca86bf2519 (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Lucia Helena I. Mei / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T09:34:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Baltieri_RodrigoCirillo_M.pdf: 4467063 bytes, checksum: bcd3f04d5a89551ebe8be98995464a40 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Neste trabalho foram sintetizadas as resinas de N-metilolacrilamida e uréia- formaldeído a partir da reação de condensação da acrilamida e uréia, respectivamente, com o formaldeído. Essas resinas e o monômero de acrilamida foram utilizados na síntese de macro esferas porosas através do gotejamento de suas respectivas soluções em óleo de silicone quente. Foram sintetizadas esferas de poli (Nmetilolacrilamida), poli (uréia- formaldeído), poliacrilamida e poliacrilamidas recobertas por N-metilolacrilamida. As resinas assim como as esferas foram caracterizadas por espectroscopia de infra-vermelho(I.V.). As esferas foram ainda caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura(MEV), poro simetria de mercúrio e área superficial (BET). As esferas de poli (N-metilolacrilamida), poli (uréia-formaldeído) e poliacrilamida apresentaram estruturas porosas como verificado por análises microscópicas, por poro simetria e pela área superficial. Sua principal utilização foi em Imunoensaios do tipo ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay), onde as esferas serviram como suporte para imobilização de imunoglobulina(lg) em análises de anti-imunoglobulina (a-Ig) de camundongo, marcada com peroxidase. As respostas destes testes foram analisadas em função da; variação da concentração de Ig e de a- Ig, variação do pH de imobilização e variação do polímero-suporte . Os resultados obtidos mostraram que as esferas sintetizadas apresentam boas respostas frente a imobilização de imunoproteínas, com exceção. da poliacrilamida a qual não foi possível analisar devido sua dissolução no meio reacional. Dentre as esferas testadas, as de N-metilolacrilamida apresentaram melhores resultados dando respostas até diluição de 1 :64000 de a-Ig e 1 J.lg/ml de solução de Ig para imobilização em pH 4,5. As esferas foram também analisadas quanto a sua capacidade de imobilizar a lipase para estudos posteriores de seu uso em reação de esterificação catalizada por esta enzima. A quantidade de lipase imobilizada foi maior em pH=4,O; porém as melhores propriedades catalíticas foram observadas em pH 7,0 / Abstract: The work presented here concems the synthesis of N Methylolacrylamide (NMA) and Urea-formaldehyde (DF) resins through the polycondensation reactions of the acrylamide and urea with formaldehyde. Theses resins and the acrylamide monomers were used in the synthesis of macrospheres. Their solutions were dropped in hot silicon oil; after that macrospheres of poly (N-methylolacrylamide), poly (urea-acrylamide), polyacrylamide and polyacrylamide coated with N-Methylolacrylamide were obtained. The resins and the macrospheres were characterized by using infrared spectroscopy (FTIR). The macrospheres were analysed by scanning electron microscopy (SEM), mercury porosimetry and superficial area(BET). The macrospheres of poly (N-methylolacrilamide), poly (ureaformaldehyde) and polyacrilamide showed porosity as verified by electronic microscopy, mercury porosimetry and superficial area. The macrospheres were used in immunoassay, type ELISA(Enzime Linked Immunosorbent Assay), as support to immobilize mouse immunoglobulin(lg) in assays using mouse anti-immunoglobulin(a-Ig) labeled with horseradish peroxidase (HRP). The parameters as the pH of the imobilization, the concentration of Ig and a- Ig and the support were varied to analyse their influences in the ELISA assays. The polyacrylamide spheres were not analysed because they were soluble in the reaction medium, but the other macrospheres showed excell_nts results in the ELISA assays. The poly (N-metilolacrylamide) macrospheres showed the best results of all. Responses were obtained up to a diluition. In preliminary studies the macrospheres were used to immobilize lipase and then they were tested in the esterification reaction of the 3-Benzyloxy1,2-propenediol with vynil acetate. It was observed that the best pH value for the lipase immobilization is 4,0 but its catalytic efficiency was observed at pH=7,0 / Mestrado / Ciencia e Tecnologia de Materiais / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Hilary Castle de Menezes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-24T15:58:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PalaciosCabrera_HectorAbel_M.pdf: 9817369 bytes, checksum: 98c422472ec8a27de246e309de1315b6 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: 0 abacaxi ou ananás pertence à família Bromeliacea (Subclasse monocotiledóneas), Pertence ao gênero Ananas mill e ã espécie Ananas comosus (L), a qual abrange iodas as variedades atualmente cultivadas de abacaxis. O "mill juice"' é um subproduto da indústria de abacaxi que é elaborado com as cascas, extremidades e miolo de abacaxi- Em alguns países, este subproduto é utilizado para aumentar o rendimento do suco simples feito com a polpa, e também para substituir a água no xarope de sacarose para a produção de abacaxi enlatado. Este subproduto esta tendo uma grande demanda em países que elaboram bebidas de alta qualidade, embora não existam dados na bibliografia sobre a composição, características sensoriais, microbiológicas e detecção de resíduos de pesticidas do "'mill juice"(NOOMHORM et al 1998; SPROGO et al 1997; APV 1996). A utilização do "Mill juice" na forma de sucos integrais, ou misturas com outros sucos, também não é reportada. O presente trabalho teve corno objetivo caracterizar e estudar a estabilização das partículas suspensas do suco extraído dos subprodutos de abacaxi (cascas, miolo e extremidades) havaiano variedade Smooth Cayenne. Na caracterização foram realizados as seguintes determinações no suco: composição centesimal, contagem microbiológica de bolores, bactérias, leveduras e esporos de bolores íermorresistentes. e detecção de resíduos de pesticidas. No que diz respeito ã estabilização, neste trabalho foi estudado o efeito do homogeneizador a pressão, da hidrólise da goma nativa do suco e da atividade da enzima pectinamtilesterase sobre o comportamento das partículas suspensas no suco. / Abstract: The pineapple or ananas, belongs to the family Bromellacea (subclass: monocotoledoneas). The species Ananas comosus (L) belongs to the genus Ananas mill, which includes all the currently cultivated varieties of pineapple, "mill juice" is a subproduct of the pineapple industry, elaborated from the peel, core and tops and tails. In some countries this sub-product is used to increase the yield of the single strength juice made from the pulp, and also to substitute the water in the sucrose syrup used in the production of canned pineapple. There is a great demand for this sub-product in countries which produce high quality beverages, although there is no information in the literature with respect to its composition, sensory characteristics, microbiology or presence of pesticide residues (NOOMHORM et al 1998; SPROGO et al 1997; APV 1996). The use of "mill juice'^ in the form of whole juice or mixtures with other juices, has not been reported. This present work aimed at characterizing and studying the cloud stabilization of the juice extracted from pineapple by-products (peel, core and toops and tails) of the Hawaian variety Smooth cayenne The following determinations were carried out to characterize the juice: proximate composition, microbiological counts (moulds, bacteria, yeasts, heat resistant moulds) and the presence of pesticide residues. With respect to cloud stabilization, the behaviour of the particles in suspension was studied as a result of homogenizing under pressure, hydrolysing the native gum of the juice and as a function of the activity of the natural enzyme pectin methyl esterase. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Eulazio Mikio Taga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T20:29:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ThelmaLopesda_M.pdf: 4447485 bytes, checksum: c7c9ff90037e1b28d23b82044ec65119 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A proteína tirosina fosfatase de baixa massa molecular relativa (20 kDa) do rim de carneiro foi purificada 1.291 vezes até a homogeneidade, com rendimento de 4%, através de um procedimento envolvendo fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia de troca-iônica em SP-Sephadex com eluição por íon afinidade e cromatografia de exclusão molecular (Sephacryl S-200). A enzima 1 ¿1 purificada apresentou uma A.E. de 99,4 µmol min mg . O estudo do efeito do pH na atividade enzimática revelou uma faixa de pH ótimo de 4,0 a 5,5. A enzima apresentou uma atividade máxima a 57°C. A atividade da enzima foi pouco sensível a diversos compostos, reagentes redutores de tióis e íons metálicos, exceto pela inibição por Zn2+, CU2+, Hg2+ e Ag+ e, pela ativação por guanosina. A energia de ativação para a hidrólise do pNPP, determinada pelo gráfico de Arrhenius, foi de 54,5 kJ mol-1 K-1. Dos substratos testados, o pNPP, o B-Naftil-P, a FMN e a Tyr-P foram os únicos hidrolisados significativamente com Km de 0,08 mmol L-1; 0,37 mmol L-1; 10,9 mmol L-1 e 0,51 mmol L-1, respectivamente. A análise dos parâmetros cinéticos na presença de BSA 1 mg mL-1 (no meio de diluição ou no meio de reação) para os substratos pNPP e B Naftil-P, mostrou um aumento na Km e na Vmax, enquanto que para a Tyr-P a Km diminuiu. A Km para a hidrólise da FMN não foi alterada. A Ea para a hidrólise do pNPP, na presença de BSA no meio de reação ou no meio de diluição, foi similar à obtida na ausência de BSA. Nos estudos de estabilidade térmica observamos que os diversos compostos testados (Pi, BS_ Glicerol e DTT) somente protegeram a enzima quando utilizados em conjunto. Isoladamente não houve proteção significativa. O estudo de inibidores demonstrou insensibilidade ao tartarato e fluoreto, e inibição por vanadato (Ki, 0,18 µmol L-1), piridoxal-5-P (Ki, 3,7 µmol L-I), Pi (Ki, 0,6 mmol L-1), molibdato de amônio (Kic, 0,1 mmol L-1 e Kia, 0,2 mmol L-1) e pCMB. Assim como para o pNPP, o vanadato era um inibidor competitivo com relação a FMN e Tyr-P, com valores de Ki de 0,34 nmol L-1 e 0,48µmol L-1, respectivamente / Abstract: A low molecular weight sheep kidney protein tyrosine phosphatase was purified 1291-fold to homogeneity, with 4% recovery, by a procedure involving ammonium sulfate fractionation, SP-Sephadex ion-exchange chromatography with ion-affinity elution and molecular exc1usion chromatography. The purified 1 ¿1 enzyme had a specific activity of 99.4 J!mol min mg . The pNPP hydrolysis reaction catalyzed by this enzyme had a broad pH optimum of 4.0-5.5 and maximal activity at 57°C. Reducing thiol compounds, metal ions and other different compounds did not significantly affect the enzyme activity except for the inhibition by Zn2+, CU2+, Hg2+, Ag+ and activation by guanosine. An activation energy value of 54.5 µmofl K-1 was determined from Arrhenius plot for the hydrolysis of pNPP. The apparent Km values obtained, at 37°C and pH 5.0, for the best substrates were 0.08 mmol L-1, 0.37 mmol L-1, 0.51 mmol L-1 and 10.9 mmol L-1 for pNPP, B-Naphthyl-P, FMN and Tyr-P, respectively. Kinetic parameters in the presence of 1 mg mL-1 BSA, in the reaction medium or in the enzyme dilution medium, showed an increase in Km and Vmax for the substrates pNPP and B-Naphthyl-P. For the substrates Tyr-P and FMN, the Km decreased or was not. affected, respectively. The activation energy was not also affected in the presence of BSA. The following compounds Pi, DTT, BSA, and glycerol only protected the enzyme against thermal inactivation if used together. The enzyme was inhibited by vanadate (Ki, 0.18 µmol L-1), pyridoxal-5-P (Ki, 3.7 µmol L-1), inorganic phosphate (Ki, 0.6 mmol L-1), ammonium molybdate (Kic, 0,1 mmol L-1 e Kia, 0,2 mmol L-1) and pCMB. Both tartrate and fluoride were ineffective inhibitors. As observed for pNPP, was a competitive inhibitor, in relation to FMN and Tyr-P, with the following Ki values: 0.34 nmol L-1 and 0.48 µmol L-1 respectively / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Hiroshi Aoyama / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T19:01:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_CarmenVerissima_D.pdf: 6306570 bytes, checksum: 7e2d3f29ed75ce5b46cfeb7b2e85985c (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: As quatro isofonnas de fosfatases ácidas purificadas de sementes de soj:quiescentes foram caracterizadas do ponto de vista fisico-químico e cinético. A isofonnas AP1, AP2, AP3A e AP3B apresentaram pontos isoelétricos de 4,9, 5,7 9,8 e 7,4, e quantidade de carboidratos totais de 30, 25, 18 e 10%, respectivamente Somente as isoformas AP 1 e AP3A apresentaram feITo em suas estruturas. As 4 isoformas apresentaram alta atividade catalítica à 80°C quando o pNPP foi utilizado como substrato, no entanto, quando TyrP foi utilizada, esta temperatura foi de 60 °C e para o PPi a temperatura máxima foi em tomo de 60°C para as isoformas AP 1 AP2 e AP3B e de 50°C para a isoformas AP3A. Estudos de estabilidade térmica foram realizados pré incubando-se as isoformas na ausência do substrato. Todas as isoformas perderam 20% da atividade quando pré incubadas a 60°C por 60 min. A 70°C as isoformas AP3A e AP3B mantiveram 30% de atividade residual. Todas a isoformas foram inativadas quando pré incubadas a 80°C. Estudos de estabilidade térmica na presença de alguns possíveis protetores, mostraram que os produtos da reação com o pNPP (pNP e fosfato) eram responsáveis pela estabilização de toda isoformas, favorecendo a alta atividade catalítica a 80°C. As 4 isoformas não foram significativamente afetadas por compostos que interagem com grupos -SH (pCMB, H2O2, CU²+), indicando a ausência de tais grupos no sítio ativo. Piridoxal fosfato também não apresentou efeito inibitório, (que mostra que estas enzimas não contêm resíduos de lisina essenciais para catálise. Todas as isoformas foram inibidas competitivamente pelo fosfato, vanadatc pervanadato, fluoreto e molibdato. A determinação das constantes de inibição (Ki revelou que o molibdato é o inibidor mais potente para todas as isoformas. A ConA apresentou efeito ativador somente para a isoformas API, o qual era dependente d4 substrato utilizado. As isoformas AP 1 e AP2 mostraram uma maior especificidade por substrato: que AP3A e AP3B. Foram realizados estudos cinéticos detalhados utilizando-S4 PEP, PPi, TyrP, Glic6P e Frut6P como substratos. Os resultados cinético: mostraram que estas isoformas poderiam participar em diferentes rotas metabólicas / Abstract: The four isoforms of acid phosphatase (AP1, AP2, AP3A and AP3B) purified from mature soybean seeds, had their physico-chemical and kinetil properties detennined. The APl, AP2, AP3A and AP3B isofonns presentel isoeIectric points of 4.9, 5.7, 9.8 and 7.4 and total carbohydrate of 30, 25, 18 anl 10%, respectiveIy. Among the four isoforms only APl and AP3A presented iron u their structures. The four isoforms of soybean seeds acid phosphatases presentel high activities, even at temperatures above 80°C when pNPP was utilized a: substrate. On the other hand, Iowest optimum temperature values were obtainec using other substrates. With tyrosine phosphate, the maximum activity was observec at 60°C, and when PPi was used as substrate, the optimum temperature values wen 60°C for APl, AP2 and AP3B, and 50°C for AP3A. In order to investigate the thermal stability of the four acid phosphatases, the enzymes were preincubated it the absence of substrate. The four isoforms Iost only 20% activity at 60°C, afier 60 min; the isoforms AP3A and AP3B retained 30% of activity at 70°C, after 60 min; alI the isoforms were inactivated at 80°C, after 5 min. In order to verify whether the enzymatic forms could be protected against thermal inactivation, we tested some compounds with different characteristics. The best protective effect was observec when the enzymes were incubated in the presence of both reaction products, p-nitrophenoI and inorganic phosphate. The soybean seeds acid phosphatases were not significantly affected by compounds that interacted with -SH residues (pCMB, H2O2, CU²+), indicating th absence of such residues in the active sites. Pyridoxal phosphate had no effecl suggesting that lysine residues were not important to the enzyme catalysis. The four acid phosphatase isoforms API, AP2, AP3A and AP3B wer competitively inhibited by phosphate, vanadate, molybdate and fluoride; inhibitio: constant studies showed that molybdate was the most potent inhibitor. The AP soform was activated by lectin (ConA), which effect was dependent on the substrat utilized. The AP 1 and AP2 isoforms showed higher substrate specificity whe: compared with AP3A and AP3B. Detailed kinetic properties were studied using PEP, PPi, TyrP, Gluc6P an, Frut6P as substrate. These studies suggest that these isoforms could participated I different metabolic routes / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientadores: Luiz Gonzaga Santoro, Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T02:29:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_SuzanaTellesdaCunha_D.pdf: 1684860 bytes, checksum: 7f7eca120c793c7bfa6bd13bb0f72b16 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A via de degradação da lisina em plantas é catalizada pela enzima bifuncional lisina cetoglutarato redutase (LKR) / sacaropina desidrogenase (SOH). A LKR condensa lisina e a-cetoglutarato em sacaropina usando NAOPH como cofator e a SOH converte a sacaropina em a-aminoadipato-õ-semialdeido e ácido glutâmico, usando NAO+ como cofator. No presente trabalho foi demonstrado, em Phaseo/us vu/garis, a participação desta enzima no catabolismo de lisina. A atividade foi medida em diferentes tecidos desta espécie. O hipocótilo apresentou maior atividade específica em plantas estioladas, seguidas pela folha, vagem e raiz, com valores muito inferiores. Sementes e cotilédones não demonstraram presença mensurável da enzima. A LKRlSOH também foi encontrada em plântulas de feijão carioca 80 crescidas in vitro à partir de sementes cujo cotilédone foi retirado previamente. Usando o sistema in vitro, a resposta enzimática à adição de lisina no meio de crescimento foi testada, demonstrando que o substrato não causa alterações na atividade. A precipitação de proteínas do tecido de hipocótilo em concentrações crescentes de PEG 8000 revelou dois platõs de atividade, levantando a hipótese de haver duas isoformas da enzima. Essa possibilidade foi reforçada posteriormente devido à respostas diferentes à inibidores de fosfatase, os quais revelaram que a LKRlSOH em feijão é uma fosfoproteína, assim como já foi observado em outras plantas. A enzima do hipocótilo foi isolada por métodos cromatográficos, indicando ser um polipeptídeo bifuncional. No entanto, dependendo do procedimento de purificação, a enzima pode eluir como um monõmero de 94kOa, contendo apenas a atividade da SOH, ou como um dímero de 190kOa, com ambas atividades eluindo conjuntamente. As condições de iluminação durante o crescimento da planta revelaram exercer influência na atividade da LKRlSOH / Abstract: The pathway of Iysine catabolism in plants is catalyzed by the bifunctional enzyme lysine ketogltutarate reductase (LKR) /saccharopine dehydrogenase (SOH). LKR condenses lysine and "alfa" ketoglutarate into saccharopine, using NAOPH as a cofactor and SOH converts saccharopine into a-aminoadipate õ-semialdehyde and glutamic acid, using NAO+ as a cofactor. In the present work it was demonstrated, in Phaseolus vulgaris , the participation of this enzyme in lysine catabolism. The activity was measured in different tissues from this species. The hipocotyl presented the highest specific activity in etiolated plants, followed by the leaf, pod and root, with much lower values. Seeds and cotyledons did not present any measurable activity. LKRlSOH was also found in carioca 80 seedlings grown, in vitro, from seeds whose cotyledon was previously removed. Using the in vitro system, the response to Iysine in the growing medium was tested revealing that the substrate didn't result in any change in enzyme activity. The precipitation of proteins from hipocotyl tissue with increasing concentrations of PEG 8000 revealed two p/atos of enzyme activity, raising the hypothesis that two isoforms of this enzyme are present. This possibility was subsequently reinforced due to different responses to phosphatase inhibitors, which revealed that LKRlSOH in P. vulgaris is a phosphoprotein, as observed with other plants. The hipocotyl enzyme was isolated by chromatographic methods, showing it to be a bifunctional polypeptide. However, depending on the purification procedure, it may elute as a monomer of 94 kOa containing only SOH activity, or as a dimer of 190 kOa where both activities elute together. Light conditions during plant growth were shown to influence the activity of LKRlSOH / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências