Orientador: Daniel Barrera-Arellano / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-25T22:46:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BellaCruz_Alexandre_D.pdf: 21404382 bytes, checksum: 97f6251301b8d7a6fc9fd7deedbdf327 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Extratos bruto de lipase (EB) obtidos a partir de farelo de arroz previamente desengordurado, foram extraídos com três diferentes soluções: 1(CaCb 10mM), 2 (Sacarose 0,6M, KCI 10mM, MgCb 1mM, Ditiotreitol 2mM) e 3 (Sacarose O,4M, DitiotreitoI2mM). A metodologia de superfície de resposta foi aplicada, sendo os fatores (variáveis) estudados: pH (6,0; 7,0 e 8,0) e tempo de extração (1h, 2h e 3h). A temperatura de extração foi fixada em 4°C. Os extratos obtidos apresentaram diferentes graus de atividade de lipase, sendo que o extrato bruto que apresentou a maior atividade específica de lipase, foi a solução 1 (13,5mU/mg). Realizou-se a purificação parcial deste extrato bruto através de dois métodos distintos de precipitação de lipase, resultando em extrato semipurificado com acetona (ESP-acetona) e extrato semi-purificado com sulfato de amônio (ESP-sulfato amônio), que apresentaram atividade específica de 50,7mU/mg e 63mU/mg, respectivamente. Os extratos semi-purificados foram imobilizados por adsorção sobre vários suportes, dos quais poliamida e sílica, apresentaram os maiores índices de atividade específica de lipase, correspondente a 48,4mU/mg e 48,2mU/mg respectivamente para o ESP-acetona e 59,3mU/mg e 59,7mU/mg para o ESP-sulfato amônio. Dos ESP imobilizados, avaliou-se sua capacidade hidrolítica sobre diferentes triacilgliceróis e de síntese de ésteres utilizando diferentes substratos. A tributirina seguida do óleo de oliva e óleo de arroz, foram os substratos que apresentaram os maiores índices de hidrólise. A reação entre álcool metílico e ácido butírico apresentou o maior índice de conversão de ácidos em ésteres para os ESP imobilizados em poliamida e álcool butírico e ácido butírico para os ESP imobilizados sobre sílica. Avaliouse o comportamento de atividade de lipase de todos os extratos durante 8 meses. Os ESP acetona e sulfato de amônio imobilizados apresentaram atividade cerca de 2,4 a 2,6 vezes maior que os ESP não imobilizados. O extrato bruto armazenado congelado a -18°C, apresentou atividade de lipase muito reduzida e o EB refrigerado a 4°C, não mais apresentou atividade no tempo final do experimento / Abstract: Crude lipase extracts (CE), obtained from previously defated rice bran, were extracted with three different solutions: 1 (CaCb 10mM), 2 (Sucrose 0.6M, KCI 10mM, MgCb 1mM, Dithiothreitol 2mM) and 3 (Sucrose O.4M, Dithiothreitol 2mM). The surface response methodology was applied, being pH (6.0, 7.0 and 8.0) and time of extraction (1:00, 2:00 and 3:00) the studied factors (variables). The extraction temperature was settled in 4°C. The obtained extracts have presented different degrees of lipase activity, and the crude extract that presented the largest specific activity of lipase, was the solution 1 (13.5mU/mg). The partial purification of this crude extract was accomplished through two different methods of lipase precipitation; resulting in semi-purified extract with acetone (SPE-acetone) and semi-purified extract with ammonium sulfate (SPE-ammonium sulfate), that presented specific activity of 50.7mU/mg and 63mU/mg, respectively. The semipurified extracts were immobilized by adsorption on several supports, from which polyamide and silica presented larger lipase specific activity corresponding to 48.4mU/mg and 48.2mU/mg, respectively, for the SPE-acetone and 59.3mU/mg and 59.7mU/mg for the SPE-ammonium sulfate. Immobilized SPE were evaluated regarding their hydrolytic capacity on different triacylglycerols and esters synthesis using different substrate. The tributyrin, followed by the olive oil and rice oil, were the substrate that presented the largest hydrolysis rates. The reaction between methilic alcohol and butyric acid presented the largest acids in esters conversion rate for SPE immobilized in polyamide and butyric alcohol and butyric acid for SPE immobilized on silica. The behavior of lipase activity of ali the extracts has been evaluated for 8 months. The SPE acetone and immobilized ammonium sulfate presented about 2.4 to 2.6 times more activity than the not immobilized SPE. The frozen stored crude extract at -18°C, for 8 months presented a very reduced lipase activity and CE refrigerated at 4°C, has not presented activity in the same time anymore / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Sergio R. P. Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T22:41:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pardo_AnaPauladeSouza_M.pdf: 11410425 bytes, checksum: f6efb6637f258eb5a7298cfac9025725 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Metaloproteases da matriz (MMPs) representam uma família de enzimas proteolíticas que participam da degradação da matriz extracelular. Estas enzimas são secretadas na forma de pró-enzimas inativas (zimógeno), sendo então ativadas na matriz extracelular por clivagem do pró-peptídeo. Todos os membros desta família apresentam um íon zinco e cálcio ligado ao seu sítio ativo. As MMPs estão envolvidas em fenômenos fisiológicos e patológicos, como o desenvolvimento das glândulas salivares e dos dentes, e na doença periodontal, respectivamente. Diversos íons metálicos divalentes, como zinco e cobre, estão contidos em materiais odontológicos, como o amálgama dental, e a interação entre metais e o meio ambiente oral têm sido assunto em pesquisa odontológica. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi estudar o efeito de sais de diversos metais divalentes sobre a atividade de MMPs secretadas por células do tecido gengival. Fragmentos de tecido gengival foram incubados a 37° C por 24 h em DMEM e as enzimas secretadas foram caracterizadas por iminoprecipitação como MMP-2 e MMP-9. Posteriormente, o efeito destes metais sobre a atividade das MMPs foi testado utilizando zimografia de gelatina e também contra a degradação do colágeno tipo I desnaturado in vitro. Metais divalentes, como o zinco e cobre, mostraram potente efeito inibidor sobre a atividade da forma ativa e zimógeno da MMP-2 e MMP-9 / Abstract: Matrix Metalloproteinases (MMPs) are a family of proteolytic enzymes that mediates the degradation of extracellular matrix. They are secreted as inactive proenzymes (zymogen), and they are thought to be activated in the tissue by cleavage of the propeptide. All members of this family have zinc and calcium binding to the active site. The MMPs take part in physiologic and pathologic events, as developmental of salivary glands and teeth and periodontal disease, respectively. Several divalent metal íons, as zinc and copper, are contained in dental materiaIs, as dental amalgam, and the interaction between metal íons and the oral environrnent is a major subject in dental research. The aim of this work was to study the effect of several of divalent metaIs on the activity of MMPs secreted by gingival tissue .cells. Gingival explants were cultured at 37° C for 24 h in DMEM and the secreted enzymes were characterized as MMP-2 and MMP-9 by immunoprecipitation. After, the effect of metaIs on the activity of the MMPs was tested using gelatin zymography and also against denatured collagen type I degradation in vitro. Divalente metaIs, as zinc and cupper, inhibited active and zimogen forms of MNrP-2 and MMP-9 / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

Orientador : Graciliano de Oliveira Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:54:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ValdineteLinsda_D.pdf: 3383607 bytes, checksum: 7f0160b6620a8f046ea43c3f16a5fe39 (MD5) Previous issue date: 1991 / Doutorado

Orientador: Rodney Carlos Bassanezi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Matematica, Estatistica e Computação Científica / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiazRodrigues_LuizAlberto_M.pdf: 1881024 bytes, checksum: c8ad74e992bd76da5f42f36d1f582c22 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Não informado. / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Matemática Aplicada

Orientador: Edison Bittencourt / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Campinas / Made available in DSpace on 2018-07-14T06:36:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_VicelmaLuiz_M.pdf: 4096970 bytes, checksum: 2fcd20c5adc08d5da4086a02455e194d (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: A técnica de imoblização de enzimas vem sendo muito pesquisada atualmente, devido à possibilidade de sua utilização em processos enzimáticos que requerem alto custo na recuperação deste catalisador do meio reacional. As enzimas utilizadas nesse estudo foram a invertase e a amiloglicosidase imobilizadas nas resinas N-metilolacrilamida e uréia-formaldeído na forma pulverizada e impregnadas em microcamadas sobre malhas de poliéster. Neste trabalho foram estudadas a síntese e a caracterização das resinas, a preparação dos suportes, a caracterização das enzimas em fase líquida, e a influência de parâmetros importantes no desempenho das enzimas imobilizadas e no processo de imobilização, tais como: temperatura, pH, força iônica da solução tampão, estabilidade do catalisador após uso prolongado, agitação, concentração de enzimas nos suportes, grau de retenção das resinas nos tecidos, tempo de estocagem, estabilidade térmica e a conversão em função do tempo de reação. Foi desenvolvido ainda um estudo cinético das enzimas, imobilizadas em reator de leito fixo e um estudo da estabilidade operacional em reatores de leito fixo e de leito fluidizado. Os resultados experimentais conduziram à determinação de condições ótimas de operação, e mostraram um comportamento cinético segundo a equação de Michaelis-Menten, para ambas as enzimas em fase líquida e imobilizadas. O reator de leito. fixo comportou-se, aproximadamente, como um reator tubular ideal. A estabilidade operacional mostrou um tempo de meia-vida para as enzimas imobilizadas, um pouco superior aos valores obtidos em outros trabalhos. De maneira geral, apesar de se: verificar uma queda significativa na atividade catalítica das enzimas imobilizadas, relativa às enzimas livres, os resultados obtidos com esses suportes mostraram-se superiores aos encontrados por vários pesquisadores. / Abstract: Enzyme immobilization is presently being investigated widely due to the possibility of its application in enzymatic processes with high cost of catalyst recuperation from the reaction medium. In this study, invertase and-amiloglicosidase were immobilized in N-metilolacrylamide and urea-formaldehyde resins impregnated in microlayers on polyester lattice, and polymerized resins pulverized by ball milling. Items studied were synthesis, resin characterization, lattice preparation, enzyme characterization in the liquid phase, and the influence of parameters important to immobilized performance and the immobilization process, such as temperature, pH, ionic force of the buffer solution, catalyst stability after prolonged use, agitation, enzyme concentration, level of retention of enzyme, storage time, thermal stability and conversion as function of reaction time. Also studied were kinetics of immobilized enzymes in a fixed bed reactor and operational stability in fixed and fluidized beds reactors. Optimum operating conditions were determined Kinetic behavior of both enzymes in the liquid and immobilized phases was according to the Michaelis-Menten equation. The fixed bed reactor performed approximately like an ideal tubular reactor. The half life of immobilized enzymes was found be slightly superior to that obtained by other workers. In general, catalytic activity of immobilized enzymes is significantly lower than that free enzymes. Results obtained superior to those obtained by other workers. / Mestrado / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Paulo Bobbio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Tecnologia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-15T04:18:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Park_YongKun_D.pdf: 2599752 bytes, checksum: 20e36d31652d348e3984265277d55f85 (MD5) Previous issue date: 1972 / Resumo: Não informado. / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências

Magíster en Ciencias de la Ingeniería - Mención Química / Ingeniero Civil con Mención en Biotecnología / La industria biotecnológica precisa del uso de enzimas optimizadas, en particular, de termoestabiliad elevada ya que procesos industriales como la elaboración de biocombustibles de segunda generación requieren temperaturas de operación por sobre las temperaturas óptimas para la mayoría de las enzimas. El diseño de nuevas enzimas modificando enzimas ya existentes puede ser un proceso extensivo en términos experimentales y analíticos y no asegura necesariamente un grado determinado de mejora. En el presente trabajo se desarrolló una nueva herramienta para el mejoramiento de la termoestabilidad de enzimas con énfasis en dinámica molecular. Se diseñó un procedimiento para simular el comportamiento de la estructura de la proteína estudiada a tres diferentes temperaturas, 300, 350 y 400K. Se elaboró un nuevo índice de flexibilidad usando análisis de componentes principales, el valor if, que a partir de la simulación, permite determinar las regiones más flexibles y candidatas a ser rigidizadas para mejorar la termoestabilidad. Las estructuras de las variantes diseñadas a partir de lo anterior se simularon para evaluar su grado de mejora en términos de la flexibilidad y compactación. El procedimiento se validó mediante su aplicación a las estructuras de las enzimas Cel7A de Talaromyces emersonii y Cel7B de Melanocarpus albomyces. Se recuperaron regiones identificadas en otro estudio como flexibles y se encontraron nuevas regiones para ser rigidizadas. De la aplicación del procedimiento a la enzima Cel72 se obtuvieron 3 nuevas enzimas de las cuales dos mostraron reducir la compactación respecto de la nativa y una mostró reducir la flexibilidad de la estructura. Se diseñó una estrategia para mejorar la termoestabiliad de enzimas, fue posible identificar regiones flexibles y se vieron cambios en la flexibilidad y compactación de variantes respecto de sus enzimas nativas. El procedimiento aquí descrito tiene el potencial de ser una herramienta rápida y de bajo costo, sin embargo, se requerirá de ensayos de termoestabilidad de las enzimas aquí propuestas para validar experimentalmente el procedimiento.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-04-18T18:17:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese de Alessandro V. P. de Albertini - 2006_2010 - versão 11 11 2015 16.24min..pdf: 4036921 bytes, checksum: 49a14b32a7c8ccf9836a36b1d8581841 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T18:17:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese de Alessandro V. P. de Albertini - 2006_2010 - versão 11 11 2015 16.24min..pdf: 4036921 bytes, checksum: 49a14b32a7c8ccf9836a36b1d8581841 (MD5) Previous issue date: 2010-08-27 / CAPES / Suportes vítreo-cerâmicos foram desenvolvidos a partir da sinterização das cinzas volantes de carvão mineral da Termelétrica Presidente Medici, Candiota-RS/Brasil para imobilização covalente de enzimas. A enzima invertase (β-fructofuranosidase, E.C. 3.2.1.26) foi tomada como exemplo. Invertase foi covalentemente imobilizada em suportes cerâmicos de vidro (GCS), obtida a partir de cinzas volantes de carvão (CFA) com polivinilpirrolidona (PVP) e estearato de magnésio adicionado como aditivo temporário. As amostras GCS contendo Pb (CH3COO) 2 , (GCSPb ) ou ZnSO4 (GCSZn) foram obtidos em várias temperaturas de sinterização ( 1000-1200 °C ) e tempos (1-3 h) . Os valores aparentes de porosidade, absorção de água, densidade e resistência à compressão uniaxial foram estudados por planejamento fatorial e diferenças morfológicas por microscopia eletrônica de varredura. A melhor covalente imobilizado derivado invertase foi em GCSZn (1200 °C / 1 h ) com 4398 ± 59,75 U / g GCS. No entanto, 95,83 % de actividade invertase imobilizada foi obtido usando um protocolo económico com a concentração de 0,636 mM de 3- aminopropiltrietoxi -silano (3-APTES ) e 0,576 mM de glutaraldeído. O derivado GCSZn-invertase manteve 100% da atividade inicial após nove reutilizações (5.476,19 ± 155,49 U / g GCSZn). O derivado escolhido contendo a cerâmica com enzima ligada covalentemente (invertase-GCSZn) foi demonstrada por difracção de raios - X (XRD). Não houve qualquer alteração no pH óptimo (4.6) , mas aumentou a temperatura óptima de 55 °C para a invertase livre a 60 °C durante derivado imobilizado . A energia de ativação diminuiu após a imobilização (37,31 ± 3,40 kJ / mol) , apesar de invertase livre ( 51,34 ± 5,21 kJ / mol). Houve uma melhora na constante de Michaelis -Menten para hidrólise de sacarose após a imobilização ser 15 vezes menor em relação ao de invertase livre (0,30 ± 0,01 mmol). Após dez reutilizações a 25 ± 2 °C , a invertase imobilizada perdeu apenas 9 % da actividade inicial , mas à temperatura óptima ( 60 °C ) , a redução atividade foi cerca de 70 % , o que é economicamente viável sob o ponto de vista energético para aplicação industrial. De acordo com as propriedades físicas obtidas em cerâmica que foi preparada com álcool polivinílico foi também desenvolvida para ser testadas em um inédito sistema de fluxo contínuo. Esse sistema permitiu a desestabilização de caminhos preferenciais ou “zonas mortas” da solução de sacarose entre cerâmicas no bioreator e nas suas regiões interiores; permitindo assim, uma melhor performance do biocatalisador imobilizado e consequentemente a total hidrólise da sacarose em menor tempo de reação. A cerâmica obtida do resíduo, cinzas volantes de carvão mineral, mostrou ser uma alternativa biotecnológica promissora como suporte de imobilização invertase para a produção de açúcar invertido e devendo ser usada para imobilização outras enzimas de interesse industrial. / Glassy-ceramic supports have been developed from the sintering of fly ash from coal Thermoelectric President Medici, Candiota-RS / Brazil for covalent immobilization of enzymes. The enzyme invertase (β-fructofuranosidase, EC 3.2.1.26) has been taken as an example. Invertase was covalently immobilized on glass ceramic substrates (GCS) obtained from coal fly ash (CFA) with polyvinylpyrrolidone (PVP) and magnesium stearate added as a temporary additive. The GCS sample containing Pb (CH3COO)2, (GCSPb) or ZnSO4 (GCSZn) were obtained at various sintering temperatures (1000-1200 °C) and times (1-3h). The apparent porosity values, water absorption, density and resistance to uniaxial compression were studied by factorial design and morphological differences by scanning electron microscopy. The best covalently immobilized invertase was derived in GCSZn (1200 °C/1h) with 4398±59.75 U/g GCS. However, 95.83% of immobilized invertase activity was obtained using a cheap protocol with the concentration of 0.636 mM 3-aminopropyltriethoxy silane (3-APTES) and glutaraldehyde 0.576 mM. The GCSZn-derived invertase retained 100% of the initial activity after nine reuses (5476.19±155.49 U/g GCSZn). The derivative chosen containing the ceramic enzyme linked covalently (invertase-GCSZn) was demonstrated by diffraction X-ray (XRD). There was no change in the optimum pH (4.6) but increased the temperature optimum of 55 °C for invertase free at 60 °C for immobilized derivative. The activation energy decreases after immobilization (37.31±3.40 kJ / mol), although free invertase (51.34±5.21 kJ / mol). There was an improvement in -Menten Michaelis constant for sucrose hydrolysis after immobilization to be 15 times lower compared to the free invertase (0.30 ± 0.01 mmol). After ten reuses at 25 ± 2 ° C, the immobilized invertase lost only 9% of the initial activity, but the optimum temperature (60 °C) reduction activity was about 70%, which is economically feasible from the point of view industrial. According to the physical properties obtained ceramic that was prepared with polyvinyl alcohol was also developed to be tested in a unique continuous flow system. This system allowed the destabilization of preferred paths or "dead zones of sucrose solution in the bioreactor between ceramics and its hinterland; thus allowing a better performance of fixed biocatalyst and therefore the hydrolysis of sucrose into shorter reaction. The obtained residue ceramics, coal fly ash, proved to be a promising alternative as biotechnological invertase immobilization support for the producing of invert sugar and should be used to immobilize other enzymes of industrial interest.

Tesis presentada a la Universidad de Chile para optar al grado de Magíster en Bioquímica área de Especialización en Toxicología y Diagnóstico Molecular / En los Errores Innatos del Metabolismo (EIM), los cultivos de fibroblastos (FB) a partir de biopsia de piel, han sido desarrollados con el objetivo de obtener material para la determinación enzimas deficientes en este tipo de patologías y establecer un diagnóstico definitivo. Este tipo de diagnóstico es realizado en laboratorios especializados, debido a la complejidad en el manejo y mantención de los cultivos de FB. El envío de muestras de FB a estos centros debe ser realizado en condiciones que garanticen la viabilidad de las células durante el trayecto, con el objetivo de evitar un retraso en el diagnóstico, lo que podría ocasionar daño neurológico irreversible o la muerte de estos pacientes. Entre los EIM, el grupo de Enfermedades de Depósito Lisosomal (EDL) han sido ampliamente diagnosticadas mediante análisis enzimático sobre muestras de FB. La detección de enzimas lisosomales deficientes en muestras de FB permite confirmar el diagnóstico en este tipo de patologías. El uso de gotas de sangre seca (GSS) en papel filtro ha permitido el desarrollo de Programas de Pesquisa Neonatal para diversos EIM, ya que se ha demostrado ampliamente la estabilidad de metabolitos y enzimas en GSS en papel filtro. Además, la toma de muestra, el transporte y almacenamiento de muestras en este tipo de soporte se ven facilitados. El objetivo de este estudio fue evaluar la estabilidad de la actividad específica de betagalactosidasa, enzima lisosomal deficiente en la Gangliosidosis GM1, un tipo de EDL, en muestras de lisados de FB obtenidos a partir de la línea celular 3T3-L1 y dispuestos en papel filtro. Las muestras fueron sometidas a distintas condiciones de tiempo y temperatura de almacenaje para la evaluación de la actividad enzimática. Las muestras mantenidas a 4°C mostraron estabilidad de la actividad enzimática de betagalactosidasa hasta al menos los 28 días de almacenaje. Las muestras re-almacenadas a 4°C y - 70°C presentaron una mayor estabilidad de la actividad de beta-galactosidasa, en comparación con otras temperaturas de re-almacenaje estudiadas / In Inborn Errors of Metabolism (IEM), fibroblasts (FB) cultures from skin biopsy have been developed in order to obtain material for the determination of deficient enzymes in this type of pathologies and to establish a definitive diagnosis. This type of diagnosis is performed in specialized laboratories, due to the complexity of sample handling and FB culture maintenance. Shipment of FB samples to these centers must be carried out under conditions that guarantee the viability of the cells during the journey, in order to avoid a delay in diagnosis, which may cause irreversible neurological damage or death of these patients. Among the IEM, the Lysosomal Storage Diseases (LSD) group, has been widely diagnosed by enzymatic analysis of FB samples. The detection of deficient lysosomal enzymes in FB samples allows us to confirm the diagnosis in this type of pathology. The use of dried blood spots (DBS) on filter paper has allowed the development of Neonatal Screening Programs for various IEM, because the stability of metabolites and enzymes in DBS on filter paper has been widely demonstrated. Furthermore, sample collection, transport and storage of samples in this type of support are facilitated. The aim of this study was to evaluate the stability of the beta-galactosidase, a lysosomal enzyme that is deficient in GM1 gangliosidosis, a type of EDL, in fibroblasts lysates obtained from the 3T3- L1 cell line and collected on filter paper. Samples were studied under different conditions of time and temperature of storage for the enzymatic activity assessment. Samples kept at 4°C maintained the stability of enzyme activity for at least 28 days of storage. Samples stored at 4°C and -70°C showed increased stability when are re-stored in these temperatures.

Orientador : Iracema de Oliveira Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:08:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DelBianchi_VanildoLuiz_M.pdf: 2713030 bytes, checksum: 375c6183b3def05ca13b3c497e1aa0e6 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Foram examinadas vinte linhagens de fungos (dez já cadastradas e dez isoladas da natureza) com o intuito de se obter a que produzisse um extrato enzimático proteolítico de melhor atuação em meio ácido através de uma fermentação semi-sólida, verificando-se que Aspergillus awamori NRRL 3112 produz alta atividade enzimática em pH ácido ao ser comparado às demais linhagens. A produção do extrato bruto extracelular foi obtida em erlenmeyers de 250 mL, a 37°C, utilizando-se 2,0g de farinha de soja enriquecida com 10% de sacarose ou 5% de extrato de levedura, umedecida em solução-tampão acetato pH 7,9, à proporção de 1:1 (sólido/liquido). Nestas condições, o extrato enzimático é obtido em 32 horas. Este extrato enzimático apresenta uma atividade máxima a pH 3 e a 50°C, uma estabilidade térmica entre 20 a 60°C quando incubado por 10 horas a essas temperaturas, e uma estabilidade entre os pH 2 e 8. Apresentaram pequena redução na atividade enzimática os íons cálcio, zinco, ferro e lítio, enquanto que os íons magnésio, bário, cobre, manganês e potássio, além de EDTA, mostraram ter uma influência positiva na atividade da enzima. / Abstract: Twenty strains of molds were examined in order to obtain the one that produces proteolytic enzymatic extract of better performance in acid medium from a semi-solid fermentation. Aspergillus awamori NRRL 3112 produced high enzymatic activity compared with other strains. The extracelular raw extract production was obtained in 250 mL erlenmeyers, at 37°C, with 2,0g of soybean flour enriched with 10% of sucrose or 5% of yeast extract, moistened with buffer acetate solution pH 7.9 at rate of 1:1 (w/v). Under these conditions, the enzymatic extract is obtained in 32 hours. The enzymatic extract presents the highest activity at pH 3 and at 50°C, a thermic stability between 20 and 60°C, when incubated during 10 hours, and a pH stability between 2 and 8. Ions calcium, zinc, lithium and iron presented a little reduction in the enzymatic activity whereas ions magnesium, barium, copper, potassium, manganese, besides EDTA, proved to have a positive influence. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos