O presente estudo visou verificar o efeito sobre alguns parâmetros da seleção por gradiente de Percoll® e da adição de plasma seminal do sêmen eqüino preservado a +4oC. O primeiro experimento avaliou a taxa de recuperação de espermatozóides após seleção por Percoll® em diferentes protocolos de centrifugação. Foram realizadas 5 coletas de sêmen de um garanhão. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração. Foram retiradas duas amostras de 4 mL, diluídas em leite desnatado UHT com concentrações de 50 e 100 x 106 espermatozóides por mL cada. Cada uma destas amostras foi dividida em 4 alíquotas de 1 mL, que foram então colocadas sobre Percoll® e submetidas a diferentes tempos e velocidades de centrifugação. V1 - 200 g (5 min) + 800 g (10 min); V2 - 800 g (10 min); V3 - 800 g (15 min); V4 - 800 g (20 min). Após esse processo, o sobrenadante foi desprezado e o pellet de cada alíquota ressuspendido com 0,5 mL de leite UHT. As 8 amostras foram novamente avaliadas para concentração, motilidade e vigor. O segundo experimento estudou o efeito da adição de plasma seminal de diferentes qualidades ao sêmen eqüino selecionado por gradiente de Percoll® e resfriado a +4°C por até 72 horas. Foram utilizados 40 ejaculados de 4 garanhões, sendo dois com boa qualidade de sêmen e dois com baixa qualidade de sêmen. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração e preparadas cinco frações de 100x106 espermatozóides, diluídas 1:1 (v/v) em EDTA-Glicose. Quatro delas, constituídas por 1mL a 2mL, foram depositadas sobre Percoll®. A fração restante foi centrifugada em tubo de vidro de 10 mL, sob as mesmas condições de tempo e velocidade das demais amostras. Foi realizada centrifugação por 5 minutos em 200 g, seguida de 10 minutos em 800 g. O sobrenadante foi descartado e o pellet ressuspendido com leite UHT desnatado compondo os seguintes tratamentos: Sp: 1,5 mL de leite UHT desnatado sem adição de plasma seminal; Hp: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal homólogo; Ap: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal do pool de alta qualidade; Bp: 1,425mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L plasma seminal do pool de baixa qualidade; Cc: foi centrifugada sem seleção por Percoll®, teve seu sobrenadante descartado e ressuspendida com 2 mL de leite UHT; C : uma amostra de sêmen diluído em leite UHT foi mantida como controle no processo de armazenamento. As amostras foram resfriadas a +4°C e examinadas a cada 24h até as 72 horas em relação à motilidade, funcionalidade de membrana (teste hiposmótico) e integridade de membrana (CFDA/PI). A seleção por gradiente descontínuo de Percoll® 90/45% mostrou-se efetiva na recuperação de espermatozóides com motilidades progressiva e total. A adição de 5% de plasma seminal ou a ausência de plasma não influenciaram os valores da motilidade das amostras selecionadas por gradiente de Percoll®. A seleção por Percoll não influenciou na percentagem de células com membrana plasmática funcional. Concentrações superiores a 2% de plasma seminal resultaram em decréscimo do número de células com membrana funcional, enquanto que as amostras sem plasma seminal apresentaram os melhores resultados e o grupo controle, que apresentava a maior percentagem de plasma, os piores. A utilização de Percoll® não separou células com alteração de membrana. A percentagem de células com membrana completamente íntegra foi significativamente maior nas amostras que sofreram processo de centrifugação, independentemente da seleção. O processo de seleção por Percoll® foi efetivo na recuperação de espermatozóides de eqüino com motilidade progressiva, mas não selecionou espermatozóides quanto à funcionalidade nem à integridade de membrana. Concentrações inferiores a 2% de plasma seminal melhoraram a funcionalidade de membrana. A ausência de plasma seminal melhorou os resultados de integridade das membranas plasmática e acrossomal; e a adição de plasma de alta qualidade não melhorou a motilidade de espermatozóides selecionados por Percoll®.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-06T17:28:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 271392 bytes, checksum: 7952ed24ad381c13402059af0dade485 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-06T17:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 271392 bytes, checksum: 7952ed24ad381c13402059af0dade485 (MD5) Previous issue date: 2002-01-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foi conduzido um experimento objetivando encontrar se há efeito da adição de óleo vegetal na dieta de eqüinos da raça Mangalarga Marchador sobre o desempenho desses animais em provas de resistência através da mensuração de parâmetros bioquímicos, hematológicos e fisiológicos. Utilizou-se oito cavalos castrados divididos em dois tratamentos. No Tratamento 1, quatro cavalos receberam dieta com 28,50% de óleo de soja degomado na matéria natural e no Tratamento 2 outros quatro animais receberam a dieta sem óleo. Foram realizadas seis provas na modalidade regularidade a 11,25 km/h em um mesmo percurso de 30km Os cavalos foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado utilizando-se o esquema de parcelas subdivididas, tendo nas parcela os tratamentos e nas subparcelas as provas. A concentração média de lactato, glicose, uréia, ácidos graxos não esterificados, proteína total, albumina, globulina, aspartato amino transferase (AST) e lactato desidrogenase (LDH), hemoglobina; o eritrograma; o leucograma; o hematócrito; a frequência cardíaca; a frequência respiratória; a temperatura retal; a perda de peso e a perda de água corporal não diferiram significativamente entre os tratamentos antes, durante e viiapós o esforço físico. Os níveis de cloretos no soro e de CK no plasma diferiram (p<0,05) entre os tratamentos. Os animais do Tratamento 2 apresentaram em média uma maior redução dos níveis de cloretos no soro. Esta diminuição pode estar relacionada a maior perda de cloro no suor, refletindo uma necessidade maior de dissipação do calor em conseqüência da maior produção de calor ou menor eficiência na perda de calor pelos cavalos, que não receberam óleo, do Tratamento 2. Porém, a temperatura retal não diferiu (p>0,05) entre os Tratamentos, logo os animais de ambos Tratamentos conseguiram manter a temperatura retal dentro da normalidade. Verifica-se que, provavelmente, os animais do Tratamento 2 utilizaram mais carboidratos para produção de energia que os animais que receberam óleo na dieta. Então, pode ter ocorrido uma maior produção de calor nos cavalos do Tratamento 2 em conseqüência do maior metabolismo de carboidratos que, por sua vez, tem maior incremento calórico que o metabolismo dos ácidos graxos. Os níveis maiores de CK para os cavalos que receberam óleo podem ser uma adaptação fisiológica desses animais. Possivelmente, essa adaptação tem a finalidade de produzir mais e, por mais tempo, energia no início do exercício. As concentrações de glicose na Coleta 1 (repouso) foram superiores para os animais do Tratamento 1, contribuindo para uma maior disponibilidade deste substrato energético no início da prova, proporcionando, juntamente com a creatina fosfato, o tempo hábil para que as gorduras pudessem ser mobilizadas e utilizadas para produção de grande parte da energia necessária para a atividade física. A utilização de óleo de soja degomado na dieta de cavalos de enduro que competem em provas de até 30 km não alterou os parâmetros bioquímicos, hematológicos e fisiológicos empregados na avaliação do desempenho dos animais nas provas de enduro, exceto as concentrações de cloretos no soro e a atividade enzimática da creatina quinase. Neste experimento, possivelmente não ocorreu efeito do óleo na dieta porque a exigência energética para estas competições é baixa e pode ser suprida, sem maiores problemas, com a utilização de volumoso de boa qualidade e ração concentrada à base de carboidratos. / An experiment was conducted to determine whether there is effect of adition of vegetal oil in the diet of equines of the race Mangalarga Marchador on these animals performance in tests of resistence by means of biochemical, haematological and physiological parameters mensuration. Eight gelded horses divided in two treatments were utilized. In Treatment 1, four horses received 28,50% degummed soybean oil in natural matter, and, in Treatment 2, others four animals received oil less diet. Six tests in regularity modality, at 11,25 Km, in a same distance of 30 km, were done. Horses were distributed in a entirely randomized block, using subdivided parts scheme, having in the part the treatment and, in the subdivided part, the tests. Mean concentration of lactate, glycose, urea, non-esterified fatty acids, total protein, albumin, globuline, amino- transferase aspartate (ATS), lactate dehidrogenase (LDH), haemoglobin, eritrograme, leukograme, haematocrite, cardiac frequency, rectal temperature, loss of weight and loss of corporal water did not significantly differ among treatments before, during and after physical effort. Chloride levels in the serum and of CK in the plasma differed (p< 0.05) between treatments. Animals in ixTreatment 2 presented, on average, a higher reduction in levels of chloride in the serum. This reduction may be related to a higher loss of chloride in the sweat, reflecting a need of higher heat dissipation in consequence of higher production of heat or lower efficiency in loss of heat by the horses that did not receive oil, in Treatment 2. However, rectal temperature did not differ between treatments, then, animals from both treatments attained to maintain the temperature within normality. It is verified that probably animals in Treatment 2 used more carbohydrates for energy production than animals that received oil in the diet. Then, a higher production of heat may have occurred in Treatment 2, in consequence of higher metabolism of carbohydrates that, in turn, has higher calorific increment than fatty acids metabolism. Higher CK levels for horses that received oil may be a physiological adaptation of these animals. Possibly, this adaptation has the finality of producing more energy and for a longer space of time at the beginning of the exercise. Glycose concentrations, in Gathering 1 (rest), were higher for animals of Treatment 1, contributing to a higher disponibility of this energetic substract at the beginning of the test, proportionating jointly with phosphate creatine the ideal time so that fats could be mobilized and utilized for production of this large portion of the energy needed for physical activity. Utilization of a degummed soybean oil in endurance horses diet that compete in tests of until 30 km did not alter the biochemical, haematological and physiological parameters employed in the evaluation of the animals performance in endurance tests except chlorides concentration in the serum and the enzimatic activity of creatine kinase. In this experiment, possibly did not occur oil effect on the diet because energetic demand for these competitions is low and can be supplied by utilization of good quality volumous and carboydrates-based concentrated ration without larger problems.

Salmonelose é uma importante enfermidade entérica em equinos de todas as idades, e em potros também nos casos de septicemia. Esse trabalho descreve a epidemiologia, sinais clínicos, achados patológicos e os sorovares associados em 10 casos de equinos necropsiados, quatro potros e seis adultos, com diagnóstico de salmonelose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) entre 2003 e 2012. Os principais sinais clínicos observados foram diarreia, anorexia e hipertermia. As lesões observadas localizavam-se principalmente no cólon maior e ceco e eram caracterizadas por conteúdo líquido em grande quantidade, hemorragias, com mucosas edemaciadas e ulceradas, por vezes recobertas por material friável amarelado e aderido. Em três casos tais lesões foram visualizadas também no intestino delgado. Os achados microscópicos caracterizavam-se por infiltrado predominante neutrofílico, associado com necrose de mucosa, por vezes com deposição de fibrina formando uma pseudomembrana, necrose dos centros linfoides e alterações vasculares como edema e trombose. Os tecidos foram marcados nos dez casos pela técnica de imuno-histoquímica (IHQ) utilizando anticorpo policlonal anti-salmonella na diluição de 1:1000. Dos sete isolados cinco foram sorotipificados e os sorovares Typhimurium, Anatum, estiveram associados em dois casos cada enquanto Muenster esteve em um. O diagnóstico foi baseado no isolamento bacteriano e/ou teste de (IHQ) associado às lesões. O método de IHQ auxiliou na identificação do antígeno bacteriano e foi importante como diagnóstico complementar de salmonelose. / Salmonellosis is an important enteric disease in horses of all ages, and in foals is also important in cases of septicemia. This paper describes the main pathological, epidemiologic and clinical findings, and associated serovars in 10 cases of horses necropsied; four foals and six adults diagnosed with salmonellosis by the Setor de Patologia Veterinária, from Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) between 2003 and 2012. The main clinical signs observed were diarrhea, anorexia and hyperthermia. These lesions were mainly located in the colon and cecum and were characterized by a large content of liquid, hemorrhagic areas, with swollen and ulcerated mucosa, sometimes covered with yellowish friable material adhered. In three cases, these lesions were also observed in the small intestine. The microscopic findings were characterized predominantly by neutrophils infiltration, associated with mucosal necrosis, sometimes with fibrin deposition forming a pseudomembrane, and lymphoid follicle necrosis centers, oedema and vascular thrombosis. The diagnosis was based on bacteriological isolation, of seven cases, and / or immunohistochemical test positive, of ten cases, associated with lesions. The tissues were labelled by immunohistochemistry (IHC) using polyclonal antibody at a dilution of 1:1000. Five out of seven bacteriological isolation were serotyped and the serovars Typhimurium and Anatum, were associated in two cases each, and Muenster in one case. The IHC method helped in the identification of bacterial antigen and was important as complementary diagnosis of salmonellosis.

O presente estudo visou verificar o efeito sobre alguns parâmetros da seleção por gradiente de Percoll® e da adição de plasma seminal do sêmen eqüino preservado a +4oC. O primeiro experimento avaliou a taxa de recuperação de espermatozóides após seleção por Percoll® em diferentes protocolos de centrifugação. Foram realizadas 5 coletas de sêmen de um garanhão. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração. Foram retiradas duas amostras de 4 mL, diluídas em leite desnatado UHT com concentrações de 50 e 100 x 106 espermatozóides por mL cada. Cada uma destas amostras foi dividida em 4 alíquotas de 1 mL, que foram então colocadas sobre Percoll® e submetidas a diferentes tempos e velocidades de centrifugação. V1 - 200 g (5 min) + 800 g (10 min); V2 - 800 g (10 min); V3 - 800 g (15 min); V4 - 800 g (20 min). Após esse processo, o sobrenadante foi desprezado e o pellet de cada alíquota ressuspendido com 0,5 mL de leite UHT. As 8 amostras foram novamente avaliadas para concentração, motilidade e vigor. O segundo experimento estudou o efeito da adição de plasma seminal de diferentes qualidades ao sêmen eqüino selecionado por gradiente de Percoll® e resfriado a +4°C por até 72 horas. Foram utilizados 40 ejaculados de 4 garanhões, sendo dois com boa qualidade de sêmen e dois com baixa qualidade de sêmen. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração e preparadas cinco frações de 100x106 espermatozóides, diluídas 1:1 (v/v) em EDTA-Glicose. Quatro delas, constituídas por 1mL a 2mL, foram depositadas sobre Percoll®. A fração restante foi centrifugada em tubo de vidro de 10 mL, sob as mesmas condições de tempo e velocidade das demais amostras. Foi realizada centrifugação por 5 minutos em 200 g, seguida de 10 minutos em 800 g. O sobrenadante foi descartado e o pellet ressuspendido com leite UHT desnatado compondo os seguintes tratamentos: Sp: 1,5 mL de leite UHT desnatado sem adição de plasma seminal; Hp: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal homólogo; Ap: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal do pool de alta qualidade; Bp: 1,425mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L plasma seminal do pool de baixa qualidade; Cc: foi centrifugada sem seleção por Percoll®, teve seu sobrenadante descartado e ressuspendida com 2 mL de leite UHT; C : uma amostra de sêmen diluído em leite UHT foi mantida como controle no processo de armazenamento. As amostras foram resfriadas a +4°C e examinadas a cada 24h até as 72 horas em relação à motilidade, funcionalidade de membrana (teste hiposmótico) e integridade de membrana (CFDA/PI). A seleção por gradiente descontínuo de Percoll® 90/45% mostrou-se efetiva na recuperação de espermatozóides com motilidades progressiva e total. A adição de 5% de plasma seminal ou a ausência de plasma não influenciaram os valores da motilidade das amostras selecionadas por gradiente de Percoll®. A seleção por Percoll não influenciou na percentagem de células com membrana plasmática funcional. Concentrações superiores a 2% de plasma seminal resultaram em decréscimo do número de células com membrana funcional, enquanto que as amostras sem plasma seminal apresentaram os melhores resultados e o grupo controle, que apresentava a maior percentagem de plasma, os piores. A utilização de Percoll® não separou células com alteração de membrana. A percentagem de células com membrana completamente íntegra foi significativamente maior nas amostras que sofreram processo de centrifugação, independentemente da seleção. O processo de seleção por Percoll® foi efetivo na recuperação de espermatozóides de eqüino com motilidade progressiva, mas não selecionou espermatozóides quanto à funcionalidade nem à integridade de membrana. Concentrações inferiores a 2% de plasma seminal melhoraram a funcionalidade de membrana. A ausência de plasma seminal melhorou os resultados de integridade das membranas plasmática e acrossomal; e a adição de plasma de alta qualidade não melhorou a motilidade de espermatozóides selecionados por Percoll®.

Submitted by TAÍS CASONATO RODRIGUES null (tais_casonato@yahoo.com.br) on 2018-03-05T21:15:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertação final 23.02 Pdf aprovação.pdf: 1150748 bytes, checksum: bc5df633130f674e214de7cf2191a095 (MD5) / Approved for entry into archive by Isabel Pereira de Matos null (isabel@fmva.unesp.br) on 2018-03-06T19:15:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rodrigues_tc_me_araca_int.pdf: 1150748 bytes, checksum: bc5df633130f674e214de7cf2191a095 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T19:15:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rodrigues_tc_me_araca_int.pdf: 1150748 bytes, checksum: bc5df633130f674e214de7cf2191a095 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Sete equinos hígidos, de ambos sexos, foram utilizados para este experimento, com objeto de avaliarmos as diferenças de temperatura do casco do animal, antes e após o ferrageamento a quente, com auxílio de termógrafo infravermelho, por duas avaliações com intervalo de 45 entre elas. O teste t de Student pareado foi escolhido para análise estatista, e foram considerados valores significativos para diferentes momentos do ferrageamento quando p<0,05. Houve diferença significativa de temperatura em quase todas imagens realizadas do casco quando comparadas as temperaturas anteriores e posteriores ao ferrageamento a quente. Embora as temperaturas tenham se elevado após ferrageamento, este aumento não ultrapassou a temperatura corpórea fisiológica (37,5ºC-38,5ºC). Não houve danos ao estojo córneo como linhas de estresse e rachaduras. Não houve falha no crescimento do casco entre os ferrageamentos. Os animais não manifestaram dor, e tão pouco alteram o comportamento durante o procedimento. Os parâmetros vitais não apresentaram diferença significativa entre os momentos. Por estes resultados, é possível aventar que o ferrageamento a quente é uma prática segura e não causa danos ao casco. / Thermography has been widely used in veterinary medicine, mainly in diagnostic, prognostic and preventive aid. The aim of this study was to observe the temperature of toracic hooves, the anterior limbs, before and after the hot fitting, with the help of a thermograph, to establish a temperature pattern after the shoeing and to infer if it can cause damages to the hoof equine. Although the forged horseshoe reaches very high temperatures, the hoof temperature rise did not exceed physiological temperature values. Based on the maintenance behavior during the procedure, maintenance of the normal values in the physical examinations and with the conservation of the hoof growth, between one shoeing and another, it is possible to infer that the hot fitting is a safe practice and does not cause damage to the hoof.

Salmonelose é uma importante enfermidade entérica em equinos de todas as idades, e em potros também nos casos de septicemia. Esse trabalho descreve a epidemiologia, sinais clínicos, achados patológicos e os sorovares associados em 10 casos de equinos necropsiados, quatro potros e seis adultos, com diagnóstico de salmonelose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) entre 2003 e 2012. Os principais sinais clínicos observados foram diarreia, anorexia e hipertermia. As lesões observadas localizavam-se principalmente no cólon maior e ceco e eram caracterizadas por conteúdo líquido em grande quantidade, hemorragias, com mucosas edemaciadas e ulceradas, por vezes recobertas por material friável amarelado e aderido. Em três casos tais lesões foram visualizadas também no intestino delgado. Os achados microscópicos caracterizavam-se por infiltrado predominante neutrofílico, associado com necrose de mucosa, por vezes com deposição de fibrina formando uma pseudomembrana, necrose dos centros linfoides e alterações vasculares como edema e trombose. Os tecidos foram marcados nos dez casos pela técnica de imuno-histoquímica (IHQ) utilizando anticorpo policlonal anti-salmonella na diluição de 1:1000. Dos sete isolados cinco foram sorotipificados e os sorovares Typhimurium, Anatum, estiveram associados em dois casos cada enquanto Muenster esteve em um. O diagnóstico foi baseado no isolamento bacteriano e/ou teste de (IHQ) associado às lesões. O método de IHQ auxiliou na identificação do antígeno bacteriano e foi importante como diagnóstico complementar de salmonelose. / Salmonellosis is an important enteric disease in horses of all ages, and in foals is also important in cases of septicemia. This paper describes the main pathological, epidemiologic and clinical findings, and associated serovars in 10 cases of horses necropsied; four foals and six adults diagnosed with salmonellosis by the Setor de Patologia Veterinária, from Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) between 2003 and 2012. The main clinical signs observed were diarrhea, anorexia and hyperthermia. These lesions were mainly located in the colon and cecum and were characterized by a large content of liquid, hemorrhagic areas, with swollen and ulcerated mucosa, sometimes covered with yellowish friable material adhered. In three cases, these lesions were also observed in the small intestine. The microscopic findings were characterized predominantly by neutrophils infiltration, associated with mucosal necrosis, sometimes with fibrin deposition forming a pseudomembrane, and lymphoid follicle necrosis centers, oedema and vascular thrombosis. The diagnosis was based on bacteriological isolation, of seven cases, and / or immunohistochemical test positive, of ten cases, associated with lesions. The tissues were labelled by immunohistochemistry (IHC) using polyclonal antibody at a dilution of 1:1000. Five out of seven bacteriological isolation were serotyped and the serovars Typhimurium and Anatum, were associated in two cases each, and Muenster in one case. The IHC method helped in the identification of bacterial antigen and was important as complementary diagnosis of salmonellosis.

O presente estudo visou verificar o efeito sobre alguns parâmetros da seleção por gradiente de Percoll® e da adição de plasma seminal do sêmen eqüino preservado a +4oC. O primeiro experimento avaliou a taxa de recuperação de espermatozóides após seleção por Percoll® em diferentes protocolos de centrifugação. Foram realizadas 5 coletas de sêmen de um garanhão. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração. Foram retiradas duas amostras de 4 mL, diluídas em leite desnatado UHT com concentrações de 50 e 100 x 106 espermatozóides por mL cada. Cada uma destas amostras foi dividida em 4 alíquotas de 1 mL, que foram então colocadas sobre Percoll® e submetidas a diferentes tempos e velocidades de centrifugação. V1 - 200 g (5 min) + 800 g (10 min); V2 - 800 g (10 min); V3 - 800 g (15 min); V4 - 800 g (20 min). Após esse processo, o sobrenadante foi desprezado e o pellet de cada alíquota ressuspendido com 0,5 mL de leite UHT. As 8 amostras foram novamente avaliadas para concentração, motilidade e vigor. O segundo experimento estudou o efeito da adição de plasma seminal de diferentes qualidades ao sêmen eqüino selecionado por gradiente de Percoll® e resfriado a +4°C por até 72 horas. Foram utilizados 40 ejaculados de 4 garanhões, sendo dois com boa qualidade de sêmen e dois com baixa qualidade de sêmen. Imediatamente após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor e concentração e preparadas cinco frações de 100x106 espermatozóides, diluídas 1:1 (v/v) em EDTA-Glicose. Quatro delas, constituídas por 1mL a 2mL, foram depositadas sobre Percoll®. A fração restante foi centrifugada em tubo de vidro de 10 mL, sob as mesmas condições de tempo e velocidade das demais amostras. Foi realizada centrifugação por 5 minutos em 200 g, seguida de 10 minutos em 800 g. O sobrenadante foi descartado e o pellet ressuspendido com leite UHT desnatado compondo os seguintes tratamentos: Sp: 1,5 mL de leite UHT desnatado sem adição de plasma seminal; Hp: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal homólogo; Ap: 1,425 mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L de plasma seminal do pool de alta qualidade; Bp: 1,425mL de leite UHT desnatado acrescido de 75 L plasma seminal do pool de baixa qualidade; Cc: foi centrifugada sem seleção por Percoll®, teve seu sobrenadante descartado e ressuspendida com 2 mL de leite UHT; C : uma amostra de sêmen diluído em leite UHT foi mantida como controle no processo de armazenamento. As amostras foram resfriadas a +4°C e examinadas a cada 24h até as 72 horas em relação à motilidade, funcionalidade de membrana (teste hiposmótico) e integridade de membrana (CFDA/PI). A seleção por gradiente descontínuo de Percoll® 90/45% mostrou-se efetiva na recuperação de espermatozóides com motilidades progressiva e total. A adição de 5% de plasma seminal ou a ausência de plasma não influenciaram os valores da motilidade das amostras selecionadas por gradiente de Percoll®. A seleção por Percoll não influenciou na percentagem de células com membrana plasmática funcional. Concentrações superiores a 2% de plasma seminal resultaram em decréscimo do número de células com membrana funcional, enquanto que as amostras sem plasma seminal apresentaram os melhores resultados e o grupo controle, que apresentava a maior percentagem de plasma, os piores. A utilização de Percoll® não separou células com alteração de membrana. A percentagem de células com membrana completamente íntegra foi significativamente maior nas amostras que sofreram processo de centrifugação, independentemente da seleção. O processo de seleção por Percoll® foi efetivo na recuperação de espermatozóides de eqüino com motilidade progressiva, mas não selecionou espermatozóides quanto à funcionalidade nem à integridade de membrana. Concentrações inferiores a 2% de plasma seminal melhoraram a funcionalidade de membrana. A ausência de plasma seminal melhorou os resultados de integridade das membranas plasmática e acrossomal; e a adição de plasma de alta qualidade não melhorou a motilidade de espermatozóides selecionados por Percoll®.

Aborto, natimortalidade e mortalidade perinatal são importantes causas de perdas econômicas na criação de equinos. Dessa forma, estudos sobre as causas dessas ocorrências e os principais agentes envolvidos são necessários para que medidas profiláticas eficientes sejam implantadas e que as perdas sejam reduzidas. O presente estudo teve como objetivo investigar as causas das perdas reprodutivas em equinos e resultou em dois artigos. O primeiro artigo descreve as principais causas de aborto, natimortalidade e mortalidade perinatal em equinos diagnosticadas no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul no período 2000-2015. Neste período um total de 107 casos foram analisados e desses, 77 correspondiam a fetos abortados, 16 eram natimortos e 14 correspondiam à morte perinatal. A causa dessas perdas foi estabelecida em 50,46%, com a seguinte distribuição: causas infecciosas corresponderam a 29,9%, enquanto as causas não infecciosas a 12,1% e miscelâneas a 8,41%. A maior prevalência das causas infecciosas foi a de origem bacteriana, em especial relacionadas a Streptococcus spp. As causas não infecciosas mais encontradas foram torção do cordão umbilical e insuficiências placentárias. Dentre as miscelâneas, as malformações congênitas foram as mais diagnosticadas. No segundo artigo descreve-se a ocorrência de dois casos de aborto equino associados a placentites por Pasteurella pneumotropica, caracterizando os achados macroscópicos, histopatológicos e bacteriológicos. Esta é a primeira descrição de placentite devido à infecção por Pasteurella pneumotropica em equinos. / Abortion, stillbirth and perinatal mortality are major causes of economic losses in the creation of horses. Thus, studies on the causes of these events and the main actors involved are necessary for effective prophylactic measures are implemented and that the losses are reduced. This study aimed to investigate the causes reproductive losses in horses and resulted in two papers. The first paper describes the main causes of abortion, stillbirth and perinatal mortality in horses diagnosed in the Setor de Patologia Veterinaria of Universidade Federal do Rio Grande do Sul in the period 2000-2015. During this period 107 cases analyzed by macroscopic examination, microscopic and additional test of these, 77 corresponded aborted fetuses, 16 were stillborn and 14 corresponded to perinatal death. The cause of these losses was set at 50.46%, with the following distribution: infectious causes accounted for 29.9%, while non-infectious causes 12.1% and miscellany to 8.41%. The higher prevalence of infectious causes was of bacterial origin, in particular related to Streptococcus spp. Non-infectious causes more were found torsion of the umbilical cord and placental insufficiencies. Among the miscellany, congenital malformation were diagnosed. In the second paper describes the occurrence of two equine abortion associated with placentitis by Pasteurella pneumotropica, featuring macroscopic, histopathological and bacteriological findings. This is the first description of placentitis due to Pasteurella pneumotropica infection in horses.

O líquido folicular é o microambiente do oócito durante sua maturação in vivo que é, em parte constituído por exsudato do soro sanguíneo e por substâncias produzidas localmente, que estão relacionados com a atividade metabólica das células ovarianas. Tais substâncias podem ser essenciais para a proliferação e diferenciação das células somáticas bem como na maturação e posterior fertilização de um oócito competente. A busca por biomarcadores capazes de predizer a saúde de um folículo ou a capacidade do oócito em se tornar um embrião saudável é objeto de estudo na medicina reprodutiva humana e veterinária. Para tanto é essencial o conhecimento a nível molecular dos constituintes do liquido folicular e suas funções. O objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil proteico do líquido folicular de éguas submetidas à indução de ovulação, com dois diferentes protocolos usuais na prática clínica, utilizando eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. Para tanto 19 amostras de liquido folicular de éguas que tiveram sua ovulação induzida por dois diferentes protocolos (1000UI hCG IV, Grupo H, ou 1000UI hCG IV + 1,5mg de acetato de deslorelina IM, Grupo H + G) foram submetidos a eletroforese 2D e posterior análise dos géis no PDQuest. Os valores de proteína total foram significativamente diferente nos Grupo H e Grupo H+G, 63,97 ± 6,97 e 73,07 ± 6,42, respectivamente. O número máximo de spots em um mesmo gel foi de 157 e o mínimo de 34, com média de 90 spots para o Grupo H e 83 spots para o Grupo H+G. Os 19 géis foram avaliados e a porcentagem máxima de spots relacionados foi de 52% e a mínima de 0%. Com média de 37,8% de similaridade entre spots para o Grupo H e 22% para o Grupo H+G. Estes resultados são de grande importância devido à escassez de trabalhos com proteômica de liquido folicular de éguas induzidas a ovulação e demonstram que a associação entre hCG e acetato de deslorelina aumenta a concentração de proteínas no líquido folicular em folículos pré-ovulatórios (>35 mm). / Follicular fluid is the oocyte microenvironment during its in vivo maturation. It is partly composed by blood serum exudate, and also by locally produced substances, related to ovarian cells metabolic activity. These substances may be essential for somatic cells proliferation and differentiation, as well as on the oocyte maturation and fertilization. The search for biomarkers able to predict oocyte ability to grow into a healthy embryo are targets on human and veterinary reproductive medicine. It is essential to know the components of follicular fluid and their functions. The aim of the present study was to evaluate protein profile of the follicular fluid in mares with inducted ovulation, in two different protocols, using 2D electrophoresis in polyacrylamide gel. 19 follicular fluid samples from mares in which ovulation induction was performed with two different protocols (1000UI hCG IV or 1000UI hCG IV + 1,5mg deslorelin acetate IM), submitted to 2D electrophoresis, and gel analysis on PDQuest. Total protein values were significantly different in Group H and Group H+G, 63,97 ± 6,97 and 73,07 ± 6,42, respectively. The highest number of spots on a same gel was 157 and the minimum was 34, with a mean of 90 spots to Group H and 83 spots for Group H+G. All of the19 gels were evaluated according to MasterGel and the highest percent of related spots was 52% and the lowest, 0%, with mean similarity between spots 37,8% to Group H and 22% to Group H+G. These results are of great importance, due to lack of works on follicular fluid proteomics using fluid from mares with induced ovulation, and demonstrate that the association hCG + deslorelin acetate increase proteins concentration on pre-ovulatory follicles fluid.

O embrião equino apresenta um desenvolvimento dinâmico por um longo período entre a fertilização, sua entrada no útero, fixação e posterior invasão trofoblástica após o 36º dia da gestação. Durante todo este período o concepto é sustentado pelo histotrofo endometrial. Estas características dos equídeos favorecem o seu uso com modelo experimental in vivo para estudos nos desenvolvimentos e interações fetal e maternal. Os estudos em endométrio equino tiveram foco em eventos fisiológicos nas diferentes fases do ciclo estral, enquanto os estudos aos primeiros momentos da gestação são escassos. O entendimento do processo de remodelação e morfofisiologia do endométrio após a entrada do embrião no útero não é completamente entendido. O objetivo deste trabalho foi estudar a morfofisiologia endometrial da gestação na égua envolvendo os períodos pós-fixação e peri-implantação, por histologia e microscopia eletrônica de varredura. A característica mais marcante da transformação ou adaptação endometrial à gestação foi o quase total desaparecimento das células ciliadas na superfície epitelial em ambos cornos uterinos. A capacidade de secreção das células microvilosas também passou por mudanças com o avanço gestacional. Muitas células secretórias ingurgitadas e protusas formam a maioria da população do epitélio, onde o histotrofo se acumula, e apresentaram erosões em sua superfície, provavelmente pela secreção apócrina de vesículas. A superfície epitelial apresentou pleomorfismo celular e pseudoestratificação, promovida por intensa hiperplasia celular, acompanhada de adensamento das glândulas endometriais, desde o 21º dia da gestação diminuído após o 36º dia. Linfócitos, provavelmente uNK, foram encontrados no epitélio luminal do endométrio já aos 21 dias de gestação em ambos cornos, gravídico e não gravídico. Foi evidenciado o septamento no epitélio luminal, com sulcos formados aos 35 e 36 dias, tornando-se mais profundos aos 42 dias de gestação. Toda esta evolução e adaptação contínua aconteceram principalmente no corno gravídico acompanhados em menor intensidade pelo corno não gravídico. / The equine embryo plays a dynamic development for a long period between fertilization, its entry into the uterus, fixes and subsequent trophoblastic invasion after day 36 of gestation. Throughout this period, the conceptus is supported by endometrial histotrophe. These equids characteristics favor their use as an in vivo experimental model for studying the changes and interactions in fetal and maternal development. Studies in equine endometrium were focused on physiological events in the different phases of the estrous cycle, while studies in early moments of pregnancy are scant. The process of endometrial remodeling and morphophysiology after the maternal recognition of pregnancy is not completely understood. The objective of this work was to study the endometrial morphophysiology in the mare comprising post-fixation and peri-implantation periods, by histology and scanning electron microscopy. The most striking feature of endometrial transformation or adaptation to pregnancy was the almost total ciliated cells disappearance of the epithelial surface in both uterine horns. In addition, the secretory capacity of microvillus cells underwent changes with gestational age. Many engorged and protruded secretory cells were the majority epithelium population where histotroph accumulates, and showed erosions on its surface, probably by apocrine vesicle secretion. The epithelial surface also showed cellular pleomorphic and pseudostratified epithelium as a result of intense cell hyperplasia. It was accompanied by thickening of the endometrial glands from day 21 of gestation, then decreasing after the 36th day. Lymphocytes, probably uNK, were found in the luminal epithelium of the endometrium since 21st day of gestation in both pregnant and not pregnant horns. Septation was evidenced in the luminal epithelium, with sulci formed at 35 days, becoming deeper at 42 days of pregnancy. All this continued evolution and adaptation occurred mainly in the gravid horn accompanied in less intensity by non-gravid horn.