Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Banca: José Camisão de Souza / Banca: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: Cássia Maria Barroso Orlandi / Resumo: Raças zebuínas (Bos taurus indicus) e seus cruzamentos têm papel fundamental na pecuária brasileira, e a raça Gir, em especial, acrescenta rusticidade e produtividade nas suas descendentes leiteiras. A produção in vitro de embriões bovinos é uma biotécnica de alto valor econômico, que, aliada à utilização de sêmen sexado para cromossoma X, possibilita a multiplicação com fêmeas de valor genético superior. Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar a produção in vitro (PIV) de embriões de doadoras da raça Gir na Fazenda Experimental da EPAMIG, em Uberaba, MG. O experimento 1 (EXP 1) visou verificar o efeito da ablação do folículo dominante sobre os resultados da PIV. No experimento 2 (EXP 2) os efeitos da estação do ano, idade da doadora, DNA mitocondrial materno e efeito do touro sobre a PIV foram estudados. No EXP 1, 42 multíparas e primíparas foram submetidas à aspiração de oócitos (OPU) a partir dos 15 dias pós-parto e a intervalos de 21 dias, sendo efetuada (65 sessões de OPU) ou não (115 sessões de OPU) a ablação do folículo dominante 3 dias antes da aspiração. Das 198 aspirações realizadas foram coletados 3.884 oócitos viáveis, que resultaram em 1.114 blastocistos. O número médio de oócitos viáveis aspirados e de blastocistos por sessão foi de 20,0 ± 10,6 e de 5,70 ± 4,9, respectivamente. Não foram identificados efeito da ordem de parto e aspiração, do dia após o parto para início da coleta e da condição corporal da doadora nos resultados da PIV. No entanto, a produção de blastocistos por sessão foi superior (5,65±1,02 vs. 3,78±0,97) nas vacas que sofreram ablação do folículo dominante (p<0,05). No EXP 2 foram avaliadas 363 aspirações de 85 doadoras fertilizadas com 23 touros diferentes que geraram 6.084 oócitos viáveis, 2.537 embriões, 1.105 gestações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Zebu breeds (Bos taurus indicus) and its crosses have an essential role on the Brazilian cattle industry, and the Gyr breed, especially, incorporates hardiness and productivity onto its dairy descendants. The in vitro production of bovine embryos is a biotechnique of high economic value, which, combined to the use of sex-sorted semen bearing X chromosomes, allows for the multiplication of superior genetic value dams. Two experiments were conducted to evaluate the in vitro production (IVP) of embryos from Gyr donor cows at the EPAMIG Research Farm in Uberaba, MG, Brazil. Experiment 1 (EXP 1) aimed to verify the effect of ablation of the dominant follicle on IVP results. In experiment 2 (EXP 2), the effects of season, donor age, mitochondrial DNA and sire on IVP were studied. In EXP 1, 42 multiparous and primiparous cows underwent ovum pick up (OPU) after removal (65 OPU sessions- DFR) or non removal (115 OPU sessions- Control) of the dominant follicle 3 days before aspiration, starting from 15 days postpartum at approximately 21 day-intervals. Of the 180 OPU sessions performed, 3,884 viable oocytes were collected, which resulted in 1,114 blastocysts. The overall average numbers of oocytes aspirated and viable blastocysts per session were 20.0 ± 10.6 ± 4.9 and 5.70, respectively. OPU session, parity, calving to OPU interval and donor body condition did not influence IVP results. However, the production of blastocysts per session was higher (5.65 ± 1.02 vs. 3.78 ± 0.97) in DFR-cows (P <0.05). In EXP 2, a total of 363 OPU sessions from 85 donors was studied. Semen from 23 different bulls was used for in vitro fertilization, yielding 6,084 viable oocytes, 2,537 embryos and 1,105 pregnancies overall. Thirty and sixty-day day pregnancy rates after embryo transfer were 41.7% and 39.5%, respectively... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Roberto Calderon Gonçalves / Banca: Nereu Carlos Prestes / Banca: Francisco Leydson Formiga Feitosa / Resumo: O Brasil é líder mundial na produção de embriões por fertilização in vitro (FIV). A FIV contribui para o melhoramento genético do rebanho, contudo, alguns trabalhos indicam que os bezerros nascidos por FIV são mais susceptíveis à doença neonatal e têm maiores taxas de mortalidade neonatal quando comparados a outras técnicas de produção de bezerros como a inseminação artificial (IA) e monta natural. Portanto, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a influência da forma de concepção, FIV e IA, na sanidade e desenvolvimento de bezerros Brahman nascidos por FIV (Grupo FIV, n = 80) e IA (Grupo IA, n = 20) do nascimento à desmama. Todos os bezerros amostrados eram provenientes de uma mesma propriedade e mamaram o colostro de forma direta ou indireta até seis horas após o nascimento. Amostras sanguíneas destinadas à determinação da atividade sérica da gamaglutamiltransferase (GGT), da gamaglobulina e da concentração sérica de proteína total (PT) foram colhidas de todos os bezerros às 24 horas de vida com o objetivo de avaliar a transferência de imunidade passiva. A duração da gestação e o peso ao nascimento foram significantemente maiores nos bezerros do grupo FIV. Contudo, não foi observada diferença estatística no peso à desmama nos bezerros dois grupos estudados. Também não foi evidenciada diferença significante na ocorrência de partos distócicos, de assistência à ingestão do colostro, de falha de transferência de imunidade passiva (FTIP) e de enfermidades do nascimento à desmama entre os bezerros dos grupos FIV e IA. O peso ao nascimento, a forma de ingestão do colostro e a ocorrência de distocia não foram correlacionados com a FTIP em nenhum dos grupos estudados. Portanto, nas condições estudadas a forma de concepção, FIV ou IA, não influenciou a sanidade e desenvolvimento de bezerros da raça Brahman, e nem interferiu na aquisição de imunidade passiva / Abstract: Recent data ranked Brazil as the leading country in the production of in vitro-fertilization (IVF) bovine embryos. IVF embryos contributes to the genetic improvement, however, some reports indicate that calves derived from IVF embryos are more susceptible to neonatal disease and have higher rates of neonatal mortality than calves produced through artificial insemination (AI) or natural mating. Therefore the goal of the present study was to evaluate the influence of conception method, IVF embryos and AI, in health and development of Brahman calves derived from IVF (Group IVF, n = 80) and from AI (Group AI, n = 20) from birth to weaning. All of the calves were from same farm and received colostrum within 6 hours of birth. Blood samples were obtained from calves at 24 hours of life to determine the activity gammaglutamyltransferase (GGT) and gammaglobulin and serum total protein (PT) concentration to evaluate passive transfer of maternal immunity. Gestation period and birth weight were significantly higher in claves from IVF group. However, there was no statistically difference in the weaning weight calves in both groups. The occurrence of dystocia, to assistance to provide colostrums, passive transfer of maternal immunity and of diseases from birth to weaning was not significantly different in the two groups. No correlation was observed among birth weight, the form of colostrum ingestion and dystocia occurrence, and passive immunity failure in both groups. Therefore, under study conditions the conception method, IVF or AI, did not influence the health and performance of Brahman calves, and not interfere with the acquisition of passive immunity / Mestre

Resumo: Foram investigados os efeitos da irradiação com diodos lasers operando em 780 nm (infravermelho) e 660 nm (visível) na maturação, fertilização e cultivo in vitro de embriões bovinos. Verificou-se que a irradiação de oócitos com ambos os lasers, durante 30, 60, 120 e 180 segundos (L30, L60, L120, L180) não afetou (p>0,05) as taxas de maturação nuclear (Infravermelho: L30 - 88,92% vs. C30 - 81,84%; L60 - 83,56% vs. C60 - 87,40%; L120 - 76,06% vs. C120 - 85,30%; L180 - 77,42% vs. C180 - 80,16%; e Visível: L30 - 65,81% vs. C30 - 71,59%; L60 - 62,75% vs. C60 - 69,62%; L120 - 70,38% vs. C120 - 64,04%; L180 - 56,72% vs. C180 - 67,41%), e de maturação citoplasmática, avaliada por meio da distribuição dos grânulos corticais (Infravermelho: L30 - 86,18% vs. C30 - 61,04%; L60 - 66,03% vs. C60 - 56,16%; L120 - 53,75% vs. C120 - 79,81%; L180 - 57,70% vs. C180 - 82,04% e Visível: L30 - 81,08% vs. C30 - 74,42%; L60 - 68,11% vs. C60 - 61,63%; L120 - 75,95% vs. C120 - 48,33%; L180 - 77,77% vs. C180 - 59,52%). As porcentagens de produção embrionária ao sétimo dia de cultivo in vitro não foram alteradas (p>0,05) após a irradiação de oócitos com laser infravermelho (L30 - 29,20% vs. C30 - 42,60%; L60 - 32,0% vs. C60 - 31,0%; L120 - 38,0% vs. C120 - 35,0%; L180 - 37,0% vs. C180 - 32,0%), mas foram reduzidas após a irradiação com laser visível durante 180 seg. (L180 - 36,0% vs. C180 - 56,0 %). A irradiação em espermatozóides com ambos os lasers não afetou (p>0,05) as taxas de clivagem ao terceiro dia de cultivo in vitro (Infravermelho: L30 - 90,0% vs. C30 - 95,83%; L60 - 85,56% vs. C60 - 98,33%; L120 - 90,83% vs. C120 - 90,83%; L180 - 89,72% vs. C180 - 97,50%; e Visível: L30 - 82,96% vs. C30 - 85,61%; L60 - 82,10% vs. C60 - 82,53%; L120 - 80,48% vs. C120 - 82,44%; ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The diodo lasers irradiation effects, operating in 780nm (infrared light) and 660 nm (visible light), were evaluated on in vitro maturation, fertilization and culture rates of bovine embryos. Both infrared and visible laser irradiation on oocytes, during 30, 60, 120 and 180 seconds (30, 60, 120, 180) did not change (p>0,05) the rates of nuclear maturation (Infrared: L30 - 88.92% vs. C30 - 81.84%; L60 - 83.56% vs. C60 - 87.40%; L120 - 76.06% vs. C120 - 85.30%; L180 - 77.42% vs. C180 - 80.16%; and Visible: L30 - 65.81% vs. C30 - 71.59%; L60 - 62.75% vs. C60 - 69.62%; L120 - 70.38% vs. C120 - 64.04%; L180 - 56.72% vs. C180 - 67.41%), and the cytoplasmic cortical granule distribution (Infrared: L30 - 86.18% vs. C30 - 61.04%; L60 - 66.03% vs. C60 - 56.16%; L120 - 53.75% vs. C120 - 79.81%; L180 - 57.70% vs. C180 - 82.04% and Visible: L30 - 81.08% vs. C30 - 74.42%; L60 - 68.11% vs. C60 - 61.63%; L120 - 75.95% vs. C120 - 48.33%; L180 - 77.77% vs. C180 - 59.52%). The in vitro embryo production rates measured on seventh day of culture were not changed (p.0,05) after the infrared laser irradiation (L30 - 29.20% vs. C30 - 42.60%; L60 - 32.0% vs. C60 - 31.0%; L120 - 38.0% vs. C120 - 35.0%; L180 - 37.0% vs. C180 - 32.0%), but they were reduced (p<0,05) after the visible laser irradiation during 180 seconds (L180 - 36.0% vs. C180 - 56.0 %). When spermatozoa were irradiated, both lasers did not change the rates of cleavage (p>0,05) on third day of in vitro culture (Infrared: L30 - 90.0% vs. C30 - 95.83%; L60 - 85.56% vs. C60 - 98.33%; L120 - 90.83% vs. C120 - 90.83%; L180 - 89.72% vs. C180 - 97.50%; and Visible: L30 - 82.96% vs. C30 - 85.61%; L60 - 82.10% vs. C60 - 82.53%; L120 - 80.48% vs. C120 - 82.44%; L180 - 83.53% vs. C180 - 87.15%), the embryo production percentages on seventh day ...(Complete abstract, click electronic access below) / Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: César Roberto Esper / Banca: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Nivaldo Antonio Parizotto / Mestre

Orientador: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Rubens Paes de Arruda / Resumo: Recentemente, tem-se dado atenção crescente aos efeitos deletérios dos radicais livres sobre os oócitos e embriões cultivados in vitro em mamíferos. No entanto, poucos estudos foram conduzidos sobre a ação desses agentes sobre a interação entre o espermatozóide-oócito durante a fertilização in vitro (FIV). Com o intuito de melhorar os resultados da produção in vitro de embriões bovinos, este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos da suplementação do meio de fecundação in vitro com antioxidantes cisteamina (Cist) e 2-Mercaptoetanol (2-ME) sobre a capacitação espermática, fecundação, qualidade dos zigotos e competência no desenvolvimento embrionário. Os espermatozóides apresentaram o DNA íntegro quase na totalidade entre os diferentes tratamentos e durante o tempo no processo da FIV. / Abstract: Recently, deleterious effects of free radicals over oocytes and embryos cultivated in vitro in mammals have received increasing attention. Nonetheless, few studies were conducted about the action of those agents over the interaction between the sperm-oocyte during in vitro fertilization (IVF). Aimed at improving results of in vitro production of bovine embryos, this work had as objective to evaluate the effects of supplementation of the in vitro fertilization environment with antioxidants cisteamine (Cist) and 2-Mercaptoethanol (2-ME) over the spermatic capacitation, fertilization, quality of zygotes and competency in the embryonic development. Spermatozoas exhibited an integral DNA almost in the totality of the different treatments and along the time in the IVF process. / Mestre

Orientador: Eunice Oba / Banca: Yeda Watanabe / Banca: Mayra D'Avila Assumpção / Banca: Fernanda Landim Alvarenga / Banca: Sony Dimas Bicudo / Resumo: Uma variedade de fatores extrinsecos como ions organicos, tampoes, composicao atmosferica gasosa, aminoacidos, fatores de crescimento, vitaminas, a acao de proteinas e macromoleculas desconhecidas podem afetar a viabilidade embrionaria. A implantacao de um sistema artificial de manutencao e desenvolvimento embrionario que simule um ambiente compativel com o fisiologico ainda e o objetivo de diversos grupos de pesquisa. O tamponamento dos meios e dependente da composicao gasosa da atmosfera de cultivo e o desenvolvimento embrionario, principalmente na fase de cultivo, sofre com as variacoes de pH verificadas durante as manipulacoes realizadas fora da estufa. Os experimentos desenvolvidos tiveram como objetivo avaliar diferentes sistemas de tamponamento para os meios de cultivo, comparando-os entre si quanto a capacidade de proporcionarem maior estabilidade de pH aos embrioes produzidos in vitro. As modificacoes propostas na composicao dos meios de cultivo foram avaliadas em duas atmosferas gasosas. Um total de 3200 ovocitos foram maturados em gotas de 100 ÊL cobertas com oleo mineral por periodo de 24 horas, agrupados em numero de 20 ovocitos por gota de meio TCM-199 com sais de Hankfs (Sigma Aldrich.), acrescido de 0,5 Êg/mL de FSH e 0,03 UI/mL de LH, 10% SFB, 20mM HEPES e antibioticos. Apos a fertilizacao, os possiveis zigotos foram submetidos ao cultivo e distribuidos de acordo com os seguintes tratamentos (T): T1: grupo controle com sistema tampao de bicarbonato de sodio do meio HTF Irvine Scientific. acrescido de aminoacidos; T2: meio SOFaa com sistema tampao composto de 25 mM de bicarbonato de sodio; T3: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 4 mM de HEPES e T4: meio SOFaa modificado pela associacao do sistema tampao com 9 mM de bicarbonato de sodio e 12 mM de fosfato de sodio. Os embrioes dispostos nos (Resumo completo, clicar acesso eletronico abaixo) / Abstract: A variable interation of intrinsic and extrinsic factors such as organics ions, buffers, atmosphere composition, aminoacids, growth factors, vitamins, proteins and other unknown components may play an important role increasing the developmental potential of in vitro produced bovine embryos. The importance of the development of an artificial system to maintain embryo viability, similar and comparable with physiologic environment, has been the objective of several studies. Therefore, the majority of those studies that focus on culture media formulations were based on the physiology of in vivo produced embryo. However, the development of commercial protocols that ensure embryo quality after in vitro production (IVP) demands some adaptations while considering the differences between in vivo and in vitro produced embryos. Media buffering depends on the gaseous atmosphere utilized during culture and embryo development is sensitive to pH variation during culture, especially in manipulations in the bench. The aim of the present study was to investigate the effect of different buffer systems in the pH stability of culture medium and in the developmental capacity of IVP embryos. 3200 COCs were cultured for 24h, using 20 oocytes per 100£gL droplet in TCM 199 (with HanksLOEsalts: Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA), containing 10% fetal bovine serum, 20mM HEPES and antibiotics under sterile paraffin oil. After fertilization, the zygotes were cultivated according with treatments (T): T1- control group with NaHCO3 (sodium bicarbonate) in medium HTF Irvine ScientificãÊ; T2- group with 25 mM NaHCO3 in medium SOFaa; T3 LV group with 9mM NaHCO3 and 4 mM HEPES in medium SOFaa and T4 LV group with 9mM NaHCO3 and 12 mM sodium phosphate in medium SOFaa. The embryos were exposed in two ambient: atmosphere with 5% CO2 + 5% O2 + 90% N2 at 39ØX C ...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Arthur Bernardes Cecílio Filho / Banca: Bráulio Luciano Alves Rezende / Banca: Edson Luiz Mendes Coutinho / Banca: Roberto Botelho Ferraz Branco / Banca: Renato De Mello Prado / Resumo: Na UNESP, Câmpus de Jaboticabal, SP, no período de 17 de fevereiro a 6 de maio de 2009, foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar doses de fósforo e de potássio na adubação de repolho 'Fuyutoyo' cultivado em Latossolo com alto teor dos nutrientes. No primeiro experimento foram avaliadas as doses de fósforo: 0, 120, 240, 360, 480, 600 e 720 kg ha-1 de P2O5, e no segundo experimento foram avaliadas as doses de potássio: 0, 60, 120, 180, 240, 300 e 360 kg ha-1 de K2O. Para cada experimento, o delineamento utilizado foi o de blocos casualizados, com sete tratamentos e três repetições. As doses de fósforo influenciaram a massa seca de folha, teor de P na folha diagnóstica, o acúmulo de P no caule e o teor de P no solo após a colheita. Houve ajuste polinomial quadrático para área foliar, massa da cabeça de repolho e produtividade, às doses de fósforo. As doses de potássio influenciaram o teor de K na folha diagnóstica, acúmulo de K na folha e o teor de K no solo após a colheita. Em Latossolo com teor alto de P disponível, a adubação com este nutriente influencia o crescimento e a produção do repolho 'Fuyutoyo', enquanto em Latossolo com teor alto de K disponível, a adubação com este nutriente não influencia o crescimento e a produção do repolho / Abstract: At UNESP, Jaboticabal, SP, from February 17 to May 6, 2009, two experiments were conducted with the objective of evaluating the levels of phosphorus and potassium fertilization on 'Fuyutoyo' cabbage grown in Oxisol with high content of nutrients. In the first experiment were evaluated the phosphorus doses: 0, 120, 240, 360, 480, 600 and 720 kg ha-1 P2O5, and in the second experiment assessed the potassium levels: 0, 60, 120, 180, 240, 300 and 360 kg ha-1 of K2O. For each experiment, the experimental design was randomized blocks with seven treatments and three replications. The phosphorus levels influenced the dry leaf weight, P concentration in diagnostic leaf, the accumulation of P in the stem and also the P content in the soil after harvest. There was a quadratic polynomial fit to leaf area, head cabbage and productivity, at doses of phosphorus. The doses of potassium influenced the content of K in the diagnostic leaf, the leaf K accumulation and K content in the soil after harvest. In Oxisol with high content of available P fertilization with this nutrient influences growth and production of 'Fuyutoyo' cabbage while in Oxisol with high content of available K fertilization with this nutrient does not influence the growth and production of cabbage / Doutor

Orientador: Jairo Osvaldo Cazetta / Banca: José Carlos Barbosa / Banca: Samira Domingues Carlin Cavallari / Resumo: A vinhaça, resíduo da produção de etanol, é amplamente utilizada como fertilizante por ter elevadas concentrações de matéria orgânica e nutrientes, principalmente o potássio. Atualmente existe o interesse de se aplicar a vinhaça em canaviais distantes das destilarias. Uma forma de tornar transporte da vinhaça menos oneroso é a sua biodigestão e posterior concentração, produzindo o concentrado de vinhaça biodigerida (CVB). Entretanto, existem diferenças entre o CVB e a vinhaça in natura (VIN). Por isso, o objetivo desta pesquisa foi de comparar o CVB com a VIN e o KCl como fertilizante no desenvolvimento inicial da cana-de-açúcar. Para isto foram conduzidos dois experimentos. No primeiro, os tratamentos corresponderam à fertilização com CVB, VIN, KCl (em dose equivalente à 450 kg ha-1 de K) e um tratamento controle (apenas água) na presença e na ausência de adubação nitrogenada. Os tratamentos foram aplicados em mudas de cana-de-açúcar com 60 dias de idade, plantadas em substrato composto pela mistura de areia fina e Latossolo (2:1) em vasos de 18 L. O delineamento experimental adotado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 X 2. No segundo experimento, o CVB, a VIN e o KCl em doses equivalentes à 60, 120, 240, 480 kg ha-1 de K e mais um tratamento controle (apenas água) foram aplicados em mudas de cana-de-açúcar, previamente preparadas como no primeiro experimento. Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 X 4 mais um tratamento adicional (controle). Em ambos os experimentos, após a aplicação dos tratamentos, as plantas foram conduzidas por 60 dias em casa de vegetação. Após este período, foram avaliadas as características químicas do substrato, a altura de plantas, número de perfilhos, área foliar, massa seca da parte aérea, do sistema radicular e total. Também foram avaliados o teor e o acúmulo de nutrientes e o acúmulo de sódio nas plantas / Abstract: The vinasse, a waste of ethanol production, is widely used like fertilizer because it has high concentration of organic matter and nutrients, especially potassium. Currently there is interest in to apply vinasse on distant areas from distilleries. One way to make transportation of vinasse less costly is its biodigestion and posterior concentration, producing the concentrated biodigested vinasse (CBV). However, there are differences between the CBV and in natura vinasse (INV). Therefore, the aim of this study was to compare the CBV with the INV and KCl in the fertilization of sugarcane in early development. For this purpose two experiments were made. At first, the treatments were fertilization with CBV, INV, KCl (at dose equivalent to 450 kg ha-1 K) and one control (water only) in the presence and absence of nitrogen fertilizer. Treatments were applied in seedlings of sugarcane with 60 days old, planted in substrate composed by fine sand and Oxisol (2:1) in pots of 18 L. The experimental design was completely randomized in a factorial 4 X 2. In the second experiment, CBV, INV and KCl in doses equivalent to 60, 120, 240, 480 kg ha-1 of K plus a control (water only) were applied in seedlings of sugar cane, previously prepared like in the first experiment. We used a completely randomized design in factorial plus one additional treatment (3 X 4 + 1). In both experiments, after the treatments, the plants were cultivated for 60 days in a greenhouse. After this period, we evaluated the chemical characteristics of the substrate, plant height, tiller number, leaf area, leaves dry mass, root dry mass and total dry mass. We also evaluated the content and accumulation of nutrients and sodium accumulation in plants. The CBV showed similar results those of INV and KCl like fertilizer, in the presence and absence of nitrogen, but the nitrogen application could increase the plant's growth. The CBV also showed similar results those of INV and ... / Mestre

Orientador: Arthur Bernardes Cecílio Filho / Banca: Marcelo Bregagnoli / Banca: Jairo Osvaldo Cazetta / Banca: Luís Felipe Villani Purquerio / Banca: Luiz Carlos Pavani / Resumo: Com o objetivo de avaliar nitrogênio e potássio para meloeiro cultivado em fibra de coco, sem drenagem, foi conduzido um experimento em estufa agrícola no período de 21-9-2011 a 3-1-2012, no Instituto Federal Sul de Minas Gerais em Muzambinho, Minas Gerais. O híbrido de melão Bônus no 2 foi cultivado no espaçamento de 1,10 x 0,40 m. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, com dezesseis tratamentos, em esquema fatorial 4 x 4 caracterizados por quatro concentrações de nitrogênio na solução nutritiva (8, 12, 16 e 20 mmol L-1) e quatro de potássio (4, 6, 8 e 10 mmol L-1) com três repetições. A parcela experimental foi constituída por 8 plantas. Foram avaliadas características de crescimento, nutrição mineral, produção do meloeiro, qualidade dos frutos e atributos químicos do substrato. Fertirrigações com 20 e 10 mmol L-1 de N e K, respectivamente, sem drenagem de solução nutritiva, não causam salinização do substrato. A máxima produtividade do meloeiro Bônus no 2, cultivado em fibra de coco, sem drenagem, é obtida com concentrações de N e K maiores do que 20 e 10 mmol L-1 / Abstract: In order to evaluate the effect of nitrogen and potassium concentrations in the nutrient solution for melons grown on coconut fiber, without drainage, an experiment was conducted in a greenhouse at the period of 09-21-2011 to 01-03-2012, at the Instituto Federal Sul de Minas Gerais, in Muzambinho, Minas Gerais. The melon hybrid 'Bonus 2' was grown in a spacing of 1.1 x 0.4 m. The experimental design consisted of randomized blocks, with sixteen treatments, in a 4 x 4 factorial design characterized by four nitrogen concentrations in the nutrient solution (8, 12, 16 and 20 mmol L-1) and four potassium concentrations (4, 6 , 8 and 10 mmol L-1) with three replicates. The experimental plot consisted of 8 plants. It was evaluated the characteristics of growth, mineral nutrition, melon production, fruit quality and chemical properties of the substrate. Fertirrigation with the concentrations of 20 and 10 mmol L-1 of N and K, respectively, without the drainage of the nutritive solution, does not lead to substrate salinization. Themaximum productivity of melon "Bonus 2" cultivated on coconut fiber, without drainage, is obtained with concentrations of N and K higher than 20 and 10 mmolL-1 / Doutor

Orientador: Maria Denise Lopes / Banca: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Marcelo Rezende Luz / Banca: Maricy Apparício Ferreira / Resumo: Objetivou-se com este estudo comparar os efeitos da congelação lenta vs vitrificação sobre a viabilidade, ultraestrutura e expressão gênica de blastocistos caninos produzidos in vivo. A coleta dos embriões foi realizada por lavagem uterina 12 dias após a primeira IA. A congelação lenta foi realizada em máquina programável e a vitrificação pela técnica do cryotop. O cultivo in vitro (CIV) foi realizado por 24 horas, em meio SOFaa acrescido de 20% de soro fetal bovino. A reexpansão embrionária foi avaliada 24 horas após a CIV e a viabilidade embrionária avaliada com o uso das sondas Hoscht 33342 e Iodeto de propídeo. A extração e amplificação do RNA foram realizadas segundo recomendações do fabricante. Foram utilizados 70 blastocistos separados nos grupos Co, Co24, Cg, Cg24, Vi e Vi24. No experimento I foram utilizados 34 embriões. Não foi evidenciada reexpansão da blastocele após 24 horas de CIV nos grupos Cg24 e Vi24, já no grupo Co24, 100% dos embriões reexpandiram. Não foi verificada diferença na intensidade da fluorescência do Hoescht entre os grupos Co, Cg e Vi, em ambos os momentos de avaliação, 0 e 24 horas. Quando comparada a intensidade do iodeto de propídeo (IP) foi observada diferença significativa entre o grupo Co em relação aos grupos Cg e Vi, independente da metodologia de criopreservação. Observou-se uma redução na quantidade de gotas lipídicas após 24 horas de CIV comparando-se os grupos Co e Co24. No grupo Vi foram observadas mitocôndrias alongadas, integridade da membrana dos blastômeros e nuclear, reticulo endoplasmático liso, vesículas de digestão, microvilosidades, junções do tipo tight e desmossomas. No Experimento II, foram utilizados 36 embriões para a avaliação da expressão gênica. Todos os genes estudados, com excessão do LIF, foram expressos. Entretanto, não houve diferença na expressão dos genes BAX, Bcl2, AQP3, Na+/K+-ATPases α1, Na+/K+-ATPases β1 e ... / Abstract: The purpose of this study was to compare the effects of slow freezing versus vitrification in canine embryo produced in vitro: viability, ultra structure and gene expression. Embryos collection was performed using uterus flush technique 12 days after the first AI. For slow freezing protocol we used a programmed machine and vitrification was performed using cryotop. In vitro culture (IVC) was conducted for 24 hours using SOFaa added with 20% of fetal bovine serum. Embryo expansion was evaluated 24 hours after in vitro culture (IVC) and embryo viability was evaluated using Hoscht 33342 and iodine propidium (PI). Extraction and amplification of the RNA was performed according to manufacturer recommendations. We used 70 blastocysts divided in groups: Co, Co24, Cg24, Vi and Vi24. In experiment I 34 embryos were used. No blastocoele expansion was observed after 24 hr of IVC in groups Cg24 and Vi24, however 100% of embryos expanded in Co24. No difference was observed in Hoescht staining intensity between Co, Cg and Vi groups, which were observed at the 0 and 24 hr periods. The iodine propidium (PI) intensity in Co was different when compared to Cg and Vi, independent of the cryopreservation method used. A reduction in the quantity of lipid drops was observed after 24 hr of IVC when comparing groups Co and Co24. In group Vi, elongated mitochondria, membrane and nuclear integrity of blastomere, smooth endoplasmic reticulum, vesicle digestion, microvilli, tight junctions and types of desmosomes were observed. In experiment II, 36 dog embryos were used for gene expression evaluation. All studied genes, except LIF were expressed. However no difference between gene expression of BAX, Bcl2, AQP3, Na+/K+-ATPases α1, Na+/K+-ATPases β1 and LIFr were observed at 0 and 24h in all groups. We concluded that the vitrification technique was the best method to cryopreserve canine embryo when we observe ultrastructure. However, it was not possible ... / Doutor

Orientador: José Gonçalves Franco Júnior / Coorientador: Edson Borges Júnior / Banca: João Batista Alcântara Oliveira / Banca: Joelcio Francisco Abade / Banca: Mario Cavagna / Banca: Júlio Elito Junior / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor