Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-25T17:39:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 299798.pdf: 2569720 bytes, checksum: f23f1ab5bf5c0f1cf7fda64e49c049b1 (MD5) / O funcionamento anormal dos receptores corticosteroides no cérebro tem sido apontado como peça fundamental para o desenvolvimento de psicopatologias no homem, tais qual a depressão e alguns transtornos de ansiedade, como o Transtorno do Estresse Pós-Traumático (TEPT). O TEPT é uma patologia comum às situações traumáticas ou de estresse intenso, e o desenvolvimento da patologia parece envolver a ação dos corticosteroides nos mecanismos de armazenamento e gerenciamento de memórias relacionadas ao trauma. O presente trabalho buscou investigar o papel de agonistas dos receptores corticosteroides GR (glicocorticoide) e MR (mineralocorticoide) na aquisição, consolidação, e expressão de memórias aversivas, utilizando o paradigma do Condicionamento Olfatório de Medo (COM). Ratos Wistar machos foram submetidos ao paradigma experimental do COM, que consiste de duas fases: a aquisição do COM pela associação entre os estímulos condicionado (EC; odor) e incondicionado (EI; choques elétricos nas patas; 0,4mA, 2s) em uma caixa de condicionamento, e a expressão do COM pela exposição ao estímulo condicionado (odor) em uma caixa de exposição ao odor. Inicialmente, quatro grupos experimentais foram condicionados com crescentes intensidades do EI para avaliar a eficiência do condicionamento. Os níveis séricos de corticosterona foram avaliados após o condicionamento e após a expressão da resposta condicionada. Os resultados comportamentais apontaram que as respostas emocionais condicionadas (RECs) mais robustas foram obtidas com a utilização de cinco choques em uma sessão de 4 min de exposição ao EC. O condicionamento com cinco choques, mas não com um, promoveu intensa liberação de corticosterona 30 min após o condicionamento ou a exposição ao EC. Foi também avaliado o papel de agonistas dos receptores corticosteroides nas diferentes etapas de aprendizado, utilizando os agonistas GR dexametasona (DEX) e MR fludrocortisona (FLU). Os resultados mostraram que a administração de DEX ou FLU na dose de 3,0 mg/kg, imediatamente após o condicionamento com um choque, promoveu intensa facilitação do condicionamento, observado pelo aumento das RECs em exposição ao EC. De maneira oposta, a administração de DEX 3,0 mg/kg ou FLU 3,0 mg/kg, 60 min antes do condicionamento com cinco choques, promoveu um prejuízo na aquisição do condicionamento, observado pelo prejuízo na exibição das RECs em exposição ao EC. A administração de DEX 1,0 mg/kg, 60 min antes da evocação, também prejudicou a expressão das RECs. Já a administração de FLU 1,0 mg/kg, 60 min antes da evocação, prejudicou pontualmente a REC, observado pela redução apenas da avaliação de risco. Também foi observado que o tratamento com DEX ou FLU, na dose de 1,0 mg/kg, causou intensa supressão do eixo HPA em resposta ao condicionamento com cinco choques. Em resumo, os dados do presente trabalho reforçam o COM como ferramenta para o estudo das memórias aversivas e sugerem um papel temporal bidirecional dos corticosteroides, fortalecendo memórias recém-formadas ao atuarem em torno do estímulo a ser lembrado, mas prejudicando o seu processamento quando sua ação se dá em determinado tempo antes da aquisição ou da expressão do condicionamento / The abnormal function of brain corticosteroid receptors has been suggested as the central core of some psychiatric conditions such as depression and anxiety disorders, as well as the post-traumatic stress disorder (PTSD). PTSD is a common reaction after the exposure to traumatic situations or intense stress and the general process involves the actions of stress hormones over the storage and management mechanisms of the trauma-related memories. In this way, the present study was designed to investigate the role of corticosteroid GR (glucocorticoid) and MR (mineralocorticoid) receptors over the aversive memory acquisition, consolidation and expression using the Olfactory Fear Conditioning (OFC) paradigm. Male Wistar rats were exposed to the OFC protocol, which consisted of two phases: the OFC acquisition by association between the conditioned (CS; odor) and the unconditioned stimuli (US; footshock; 0,4 mA, 2 s) in the conditioning chamber, and the conditioned emotional response (CER) expression by the exposure to the CS in the olfactory box. Initially, four experimental groups were conditioned with crescent US intensities in order to evaluate the most efficient conditioning protocol. Serum levels of corticosterone were also evaluated after conditioning and exposure to the CS. The first results demonstrated that the most robust defensive CER was observed with five paired footshocks along with a 4 min CS exposure. The five footshock conditioning, but not one, promoted intense corticosterone release, both 30 min after conditioning or CS exposure. We have also evaluated the role of corticosteroid receptor agonists over different learning phases using the GR agonist dexamethasone (DEX) and the MR agonist fludrocortisone (FLU). The results pointed out that DEX or FLU injection (at 3.0 mg/kg doses) immediately after conditioning with one footshock promoted intense conditioning facilitation, showed by the CERs increasing in the exposure to the CS. On the other hand, impairment of memory acquisition was observed when DEX or FLU (3.0 mg/kg) was administered 60 min prior the five footshock conditioning. Administration of DEX (1.0 mg/kg) 60 min before memory retrieval also impaired expression of the CERs to the CS. Administration of FLU (1.0 mg/kg) 60 min prior the retrieval impaired CERs in a specific manner, by reducing risk assessment behavior. DEX or FLU, at 1.0 mg/kg doses, caused an intense suppression of the HPA axis in response to five footshock conditioning session. In summary, the present study reinforces the OFC protocol as a useful tool to understand the neurobiology of trauma-related memories and supports a temporal bidirectional role for the corticosteroids, strengthening new formed memories when acting around the task to be remembered, but impairing memory function when acting in a certain time before the conditioning acquisition or expression

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T21:44:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 294467.pdf: 847398 bytes, checksum: e4fb876b22a02698fc713a938106970c (MD5) / As situações de estresse desencadeiam reações fisiológicas de medo e ansiedade, mas são os eventos traumáticos os responsáveis por precipitar as respostas neuroendócrinas não adaptativas e desproporcionais perante a ameaça inicial e aos novos estressores. A resposta neuroendócrina ao estresse é o resultado da ativação da cascata de diversos neuroefetores, especialmente da noradrenalina e dos glicocorticóides, liberados no momento do trauma ou da reativação da memória. Terminado um evento traumático, os níveis circulantes de tais mediadores devem retornar aos níveis basais, exceto quando do trauma surge o Transtorno de Estresse Pós-Traumático (TEPT), caracterizado por hiperexcitabilidade, revivências, evitação e "anestesia" emocional. Ainda, a liberação de mediadores no momento do trauma facilitaria o aprendizado associativo, porém a aquisição de informações aversivas de maneira intensa pode levar ao desenvolvimento do TEPT, protótipo de patologia de memória em humanos. Após a consolidação, as memórias podem ser reativadas por pistas ou contextos ligados ao trauma com consequente piora do quadro patológico, cronificação e incapacidade funcional. Tal reativação tornaria a memória lábil, fase na qual ocorre o processo de reconsolidação, importante na reestabilização e manutenção da informação. Com base nessas informações, sugerimos que a interferência farmacológica nesta etapa enfraqueceria as reações ansiosas e os sintomas posteriors associadas com a revivência do trauma. O objetivo principal do estudo foi levantar dados de literatura sobre o papel dos glicocorticóides no manejo das patologias de memória, em especial do TEPT, e sugerir uma nova intervenção terapêutica viável com base na manipulação das memórias traumáticas originais. Para o propósito, revisamos a clínica, o tratamento atual do TEPT e as alterações no eixo neuroendócrino, e avaliamos diversos estudos com glicocorticóides no TEPT e em modelos animais da patologia. Os resultados mostram a eficácia dos glicocorticóides no enfraquecimento da memória declarativa e das reações de medo quando administrados antes da reativação espontânea ou provocada da memória através da apresentação de elementos contextuais ou pistas que recordem o trauma. A melhora clínica é mais evidente na medida em que novas intervenções são realizadas. Concluímos que os glicocorticóides são uma alternativa possível ao tratamento clássico do TEPT com a vantagem de exibirem efeitos terapêuticos em poucas sessões, além de modular de modo persistente as reações de medo e prejudicar a evocação da memória traumática original. Ainda, propomos um modelo de intervenção farmacológico com glicocorticóides para o tratamento do TEPT.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:56:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326328.pdf: 2019637 bytes, checksum: d942bf130a8793b2f4c7885aa06efef3 (MD5) Previous issue date: 2014 / É sabido que os glicocorticoides (GCs) podem diminuir a sensibilidade periférica à insulina, termo que é aplicado como resistência à insulina (RI), fato que parece ser decorrente de alterações em eventos pós-receptores de insulina. A RI está presente nos indivíduos obesos e uma possível explicação para a RI nesses indivíduos se deve a ativação subclínica de vias de sinalização inflamatórias que incluem as cinases c-jun-N-terminal (JNK) e a cinase do IkB (IKKß). Quando ativadas, estas cinases fosforilam o IRS-1 no resíduo serina e atenuam a sinalização insulínica. A fim de verificar se há alguma similaridade entre esse processo e a RI induzida pela administração de GCs, verificamos o conteúdo e o grau de fosforilação de proteínas chaves das vias insulínica e inflamatórias no tecido adiposo branco (TAB) de ratos tratados com dexametasona (DEX). Para tal, ratos Wistar receberam injeção diária de DEX (1 mg/kg de peso corpóreo) durante 5 dias consecutivos, enquanto animais controle receberam solução salina (CTL). Foram analisados o peso corpóreo e consumo de ração, glicose sanguínea, componentes plasmáticos (triaciglicerol, insulina, lactato, TNF-a, IL-6, IL-1ß e IL-10), conteúdo de glicogênio hepático, liberação de glicerol, tolerância à glicose, à insulina e ao piruvato. Também foram avaliados o conteúdo de proteínas envolvidas na sinalização insulínica (IRS-1 e Akt) e na sinalização inflamatória (JNK, IKKß, TLR-4 e NFkB) além do receptor de glicocorticoide (GR) e da enzima 11ß-HSD1 no TAB. Os ratos DEX apresentaram redução do peso corpóreo (17%) e do consumo de ração (58%), aumento das concentrações de glicose (25%), insulina (500%), lactato (80%) e de triacilglicerol (190%) (p<0,05). O conteúdo de glicogênio hepático bem como da liberação basal de glicerol ex vivo foram 250% e 50% maiores nos ratos DEX, em relação aos ratos CTL (p<0,05). Os testes in vivo revelaram a presença de intolerância à glicose (GTT), redução da sensibilidade à insulina (ITT) bem como aumento da gliconeogênese (PTT), provavelmente de origem hepática, nos animais DEX (p<0,05). Os ratos DEX tiveram redução no conteúdo total (46%) e fosforilado (44%) da Akt, aumento da fosforilação em serina do IRS-1 (63%), redução no conteúdo do GR (47%) e aumento do conteúdo da enzima 11ß-HSD1 (69%) em TAB em relação ao grupo CTL (p<0,05). A fosforilação das proteínas-cinases JNK e IKKß foi46% e 52% menor no TAB de ratos DEX, respectivamente (p<0,05), enquanto das proteínas TLR-4 e NFkBp65 mantiveram-se similares aos do grupo CTL. As concentrações plasmáticas de TNF-a e IL-1ß também estiveram diminuídas nos ratos DEX (p<0,05). Com base em nossos resultados concluímos que o tratamento com DEX por 5 dias consecutivos reproduz a atenuação da sinalização insulínica (redução da fosforilação de Akt e aumento da fosforilação do IRS-1 em serina) em TAB de ratos. Essa atenuação da sinalização insulínica parece não ser resultante de uma ativação exacerbada dos componentes da via inflamatória já que o tratamento com o GC esta associado à redução ou inalteração do conteúdo e/ou da atividade das proteínas JNK, IKKß, TNF-a, TLR-4 e NFkBp65.<br> / Abstract : It is known that glucocorticoids (GCs) may decrease peripheral insulin sensitivity, which means insulin resistance (IR), and appears to be a consequence of changes in the insulin post-receptor events. IR is present in obese individuals and a possible explanation for the IR in these individuals is due to the subclinical activation of inflammatory pathways including the c-jun N-terminal (JNK) and IkB kinase (IKKß) kinases. When activated, these kinases phosphorylate IRS-1 at serine residues attenuating the insulin signaling. To elucidate if there is a similarity between this process and the GCs induced-IR, we evaluated the content and the activity of key proteins of the insulin and inflammatory pathways in white adipose tissue (WAT) of rats treated with dexamethasone (DEX). For this purpose, Wistar rats received daily injection of DEX (1 mg / kg body weight) for 5 consecutive days, while control animals received saline (CTL). Body weight and food intake, blood glucose, plasma components (triacyglycerol, insulin, lactate, TNF-a, IL-6, IL-1ß and IL-10), hepatic glycogen content, glycerol release and glucose, insulin and pyruvate tolerance were analyzed. We also evaluated the content of proteins involved in the insulin pathway (Akt, and IRS-1) and in the inflammatory pathway (JNK, IKKß, NFkB and TLR-4), as well as the glucocorticoid receptor (GR) and the enzyme 11ß-HSD1 in the WAT. DEX rats showed reduced body weight (17%) and food intake (58%), increased blood glucose values (25%) and augmented circulating insulin (500%), lactate (80%) and triacylglycerol (190%) (p<0.05). The hepatic glycogen content as well as the ex vivo glycerol release were 250% and 50% higher in DEX, compared to CTL rat, respectively (p<0.05). In vivo tests revealed impaired glucose tolerance (GTT), decreased insulin sensitivity (ITT) and increased hepatic gluconeogenesis (PTT), probably of hepatic origin, in DEX rats (p<0.05). DEX rats showed reduced Akt content (46%) and phosphorylation (44%), increased IRS-1 serine phosphorylation (63%), reduced GR content (47%) and augmented 11ß-HSD1 content (69%) in WAT, compared to CTL group (p<0.05). The JNK and IKKß phosphorylation was 46% and 52% lower in WAT from DEX rats, respectively (p<0.05), whereas the TLR-4 and NFkBp65 protein contents remained similar between the groups. Plasma concentrations of TNF-a and IL-1ß were also reduced in DEX rats (p<0.05). Based on our results we conclude that dexamethasone treatment for 5 consecutive days reproduces the attenuation of the insulin signaling (reduction of Akt phosphorylation and increase of IRS-1 serine phosphorylation) in WAT of rats. This attenuation of insulin pathway does not seem to be a result of an exacerbation of the inflammatory pathway activation, considering the GC treatment is associated to a reduction or no change in the content and/or activity of the JNK , IKKß , TNF-a , TLR-4 and NFkBp65 proteins.

O objetivo do presente trabalho foi verificar se a dexametasona provoca alterações em determinadas funções sexuais de cães. Para o estudo foram escolhidos 6 cães sem raça definida, da mesma idade e aproximadamente com o mesmo peso, que foram divididos em dois grupos, controle e experimental. O experimento foi dividido em dois períodos, preliminar e experimental, sendo cada um de 63 dias, o que corresponde ao tempo de uma espermatogênese. Após padronização das características sexuais estudadas no período preliminar (n=6), os animais do grupo experimental (n=4) receberam três dosificações de dexametasona sendo doses diárias de 0,5 mg/kg, 0,25 mg/kg e 0,125 mg/kg respectivamente, sendo cada uma no decorrer de uma semana. Após o término do experimento foram analisados e comparados os dados obtidos no período preliminar e experimental, bem como as três se- manas de medicação com a dexametasona no grupo experimental. As investigações proporcionaram os seguintes resultados: 1 - No comportamento sexual e desenvolvimento morfológlco dos órgãos genitais palpáveis não houve diferenças entre os dois grupos; 2 - Não houve alteração no aspecto do sêmen e vigor dos espermatozóides durante o período experimental; 3 - O volume, a concentração espermática e consequentemente o número de espermatozóides por ejaculado diminuiu em todos os animais do grupo experimental em relação ao período preliminar. Nas três semanas de medicação com dexametasona esta diminuição foi altamente significativa; 4 - Não houve alteração no índice de patologia espermática durante o período experimental no grupo medicado com dexametasona; 5 - Houve acentuada redução no nível plasmático de testosterona no grupo experimental durante a medicação com dexametasona, quando comparado com o grupo controle

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-14Bitstream added on 2015-05-14T16:59:33Z : No. of bitstreams: 1 000726331.pdf: 2093167 bytes, checksum: e200ea6c10527089eb5a86d7ba3f724f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A inflamação é caracterizada como uma resposta do organismo frente à uma agressão, a qual pode resultar em dor, edema e em alguns casos levar à disfunção do órgão ou tecido. Durante o processo inflamatório ocorre a liberação de citocinas, pequenas proteínas transcritas e traduzidas pelo metabolismo intrínseco celular, que realizam uma série de comunicações intra e intercelulares. Uma importante citocina é o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), que atua na manutenção do quadro inflamatório em situações de inflamação crônica, sendo super expressa em diversas doenças inflamatórias. A terapia anti fator de necrose tumoral α (anti-TNF-α) tornou-se uma abordagem interessante no tratamento de doenças inflamatórias crônicas, principalmente daqueles pacientes que não respondem ao tratamento convencional. Entre os fármacos utilizados no tratamento das doenças inflamatórias crônicas, encontram-se os glicocorticoides (GCs), anti-inflamatórios de natureza esteroide. Estes atuam no processo reacional de defesa do organismo minimizando o dano causado pelo agente infeccioso. Porém o uso prolongado de GCs está associado a diversos efeitos adversos, como osteoporose, síndrome metabólica, doenças cardiovasculares, catarata, entre outros, limitando o uso desses fármacos em terapias prolongadas. Dessa forma, nesse trabalho, buscou-se através da estratégia de hibridação molecular, a síntese de novos derivados anti-inflamatórios esteroides, com propriedades de modulação da citocina TNF-α, a fim de se alcançar um sinergismo de ação útil no tratamento de doenças inflamatórias crônicas. Nesse contexto, foram sintetizados e caracterizados seis compostos, série Lapdesf GL-FT, derivados dos glicocorticoides prednisolona (compostos I-III) e budesonida (compostos IV-VI), ligados ao grupamento ftalimida, responsável pela inibição da síntese de TNF-α. Os compostos ... / Inflammation is characterized as a organism response against an aggression, which can result in pain, edema and in some cases lead to organ or tissue dysfunction. During the inflammatory process are released of cytokines, small proteins transcribed and translated by intrinsic cellular metabolism, performing a variety of communication intra and intercellular. An important cytokine is tumor necrosis factor alpha (TNF-α), which acts in maintaining the inflammatory in situations of chronic inflammation, being over expressed in many inflammatory diseases. Therapy anti-tumor necrosis factor α (anti-TNF-α) has become an interesting approach in the treatment of chronic inflammatory diseases, especially those patients who do not respond to conventional treatment. Among the drugs used in the treatment of chronic inflammatory diseases are glucocorticoids (GCs), anti-inflammatory steroids. These act in the reactive process of organism defense minimizing the damage caused by the infectious agent. However, prolonged use of GCs is associated with various side effects such as osteoporosis, metabolic syndrome, cardiovascular disease, cataracts, among others, limiting the use of these drugs in prolonged therapies. Thus, in this work, we realized the viability of design and synthesis by molecular hybridization strategy of novel anti-inflammatory steroids with modulating properties of cytokine TNF-α in order to achieve a synergism of action useful in the treatment of diseases chronic inflammatory diseases. In this context, were synthesized and characterized six compounds Lapdesf series GL-FT derived from glucocorticoids prednisolone (compounds I-III) and budesonide (compounds IV-VI), connected to the phthalimide group responsible for inhibition of TNF-α. The obtained compounds were evaluated for anti-inflammatory activity in a model of paw edema and distal ulcerative colitis. Derivatives I and IV showed higher ...

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-11Bitstream added on 2015-05-14T16:59:10Z : No. of bitstreams: 1 000828925.pdf: 3092843 bytes, checksum: 841b2729e04d815eca89c85905635f41 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos têm sugerido que o excesso de glicocorticoides (GCs) durante períodos críticos do desenvolvimento pode alterar a função reprodutiva. Apesar da função essencial da próstata no sucesso reprodutivo e de sua alta susceptibilidade ao desenvolvimento de lesões com o avançar da idade, o impacto tardio de corticoterapias precoces sobre a homeostase da glândula ainda é desconhecido. No presente estudo, investigamos os efeitos da corticoterapia prenatal (PRE), durante a instalação da puberdade (PU), e sua associação (PRE+PU=REE), sobre a morfofisiologia da próstata senescente. Ratas Wistar prenhes receberam betametasona (0.1mg/kg/dia, i.m.), ou salina, nos dias gestacionais 12, 13, 18 e 19. Os descendentes machos receberam doses de betametasona (7mg/kg/dia, gavage), ou salina, do dia pós-natal 35 ao 50 (PND35-50). Na idade senil (PND300), todos os animais foram eutanasiados, amostras de sangue foram coletadas para dosagens hormonais, e a próstata ventral (VP) foi dissecada e processada para a análise morfológica, bem como para quantificação e localização de proteínas (AR, GR, PAR-4 e PCNA). Reduzidos níveis de testosterona e insulina foram observados no grupo PRE, enquanto apenas a insulina mostrou-se reduzida no grupo PU, e nenhuma redução adicional foi observada em REE. Uma tendência de aumento no índice apoptótico e incidência de ácinos com epitélio metaplásico foi detectada dentre os grupos. A quantificação de proteínas revelou menor expressão de AR no grupo PRE, maior expressão do marcador de proliferação celular (PCNA) no grupo REE, porém, diferença significativa alguma foi observada na expressão do marcador de morte celular por apoptose (PAR-4). A análise da reação imunoistoquímica para o GR indicou uma maior expressão do receptor em células epiteliais dos grupos que receberam betametasona. Com base nos resultados, sugerimos que a corticoterapia com betametasona durante o final da ... / Studies have suggested that glucocorticoids (GCs) excess during critical developmental time windows can alter reproductive parameters. Despite of the key function of the prostate in the reproductive success, and its high susceptibility to develop lesions in an age-dependent manner, the impact of early GCs excess on the gland homeostasis is still unknown. In the present study, we have investigated the effects of prenatal (PRE), peripubertal (PU) corticotherapy, and its combination (PRE+PU=REE), on aging prostate´s morphophysiology. Pregnant Wistar rats received betamethasone (0.1mg/kg/day, i.m.), or saline, on the gestational days 12, 13, 18 and 19. Male descendents received betamethasone (7mg/kg/day, gavage), or saline, from 35th to 50th postnatal day (PND35-50). Late in life (PND300), all animals were euthanized, blood samples were taken for hormones levels estimation, and the ventral prostate (VP) was excised and processed for morphology evaluation, and for proteins (AR, GR, PAR-4 and PCNA) quantification and localization as well. Lower testosterone and insulin levels were detected in group PRE, while only insulin serum levels was reduced in group PU, and no additional decrease was seen in REE. An increasing trend in the apoptosis index and metaplastic epithelium acini incidence was observed along the treated groups. The protein quantifications showed a decreased AR expression in PRE, higher proliferation marker (PCNA) expression in REE, and no significant difference in the expression of the apoptosis marker PAR-4 was detected among the groups. The immunolocalization of GR indicated a higher receptor expression in epithelial cells of treated groups, when compared to NE. Based on these results, we suggest that the corticotherapy with betamethasone during late pregnancy can program fetal prostate, resulting in altered androgen and glucocorticoids signaling permanently. Peripubertal corticotherapy deflagrated cell ... / FAPESP: 09/18468-3

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27Bitstream added on 2014-11-10T11:57:45Z : No. of bitstreams: 1 000790599.pdf: 2089633 bytes, checksum: c467c732ab903f07bf94c0c1322e8f24 (MD5) / Este estudo objetivou avaliar a participação hepática e efeito glicocorticoide sobre a resposta inflamatória em tilápias do Nilo desafiadas com Aeromonas hydrophila, submetidas ou não a hepatotoxicidade induzida pelo CCl4. Para a realização desta investigação, 130 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), com peso médio de 150g, oriundos da mesma desova, foram distribuídas aleatoriamente em 13 tanques com capacidade de 2500L de água cada, constituindo quatro tratamentos: NN = sem CCl4 e sem glicocorticoide; CN = com CCl4 e sem glicocorticoide; NG = sem CCl4 e com glicocorticoide; CG = com CCl4 e com glicocorticoide. Um 13° tanque foi composto de peixes não submetidos a nenhum tipo de manipulação para constituir os valores de referência para o estudo (PF). Para todos os grupos foram amostrados 10 animais. A administração do CCl4 foi realizada na cavidade celomática em dose única de 0,5 mL.Kg-1 de p.v. nos grupos CN e CG, enquanto a dexametasona foi administrada via IM na região dorso-lateral esquerda na concentração de 0,2% na dose de 2mg Kg-1 de p.v. nos tratamentos NG e CG. Ambas as administrações foram realizadas no momento de inoculação da cepa de A. hidrophila. Em 6, 24 e 48 HPI (horas pós inoculação), foram colhidos: o exsudato inflamatório para quantificação e avaliação das células inflamatórias; amostras de sangue para avaliação hematológica e bioquimica; feito avaliação somática e histologica do fígado e baço. Como resultado destacamos transtorno hepático gerado pelo CCl4. Este acarretou diversas alterações no mecanismo da resposta inflamatória em tilápias do Nilo como diminuição da síntese de proteínas e formação de degeneração gordurosa hepática, bem com alteração do metabolismo energético apresentando muitas vezes efeito sinérgico quando associado ao efeito imunossupressor da dexametasona, sugerindo a ocorrência de ... / This study evaluated the hepatic participation and the glucocorticoid effect on the inflammatory response in Nile tilapia challenged with Aeromonas hydrophila , submitted or not to by CCl4. Conducting this research, 130 Nile tilapia (Oreochromis niloticus ) hepatotoxicity with average weight 150g, from the same spawning , were randomly distributed into 13 tanks with a capacity of 2500L of water each , in four treatments: NN = no CCl4 and without glucocorticoids, CN = with CCl4 and without glucocorticoids , NG = no CCl4 and glucocorticoid, CG = with CCl4 and glucocorticoids. A 13 ° tank was composed of fish not subjected to any manipulation to provide reference values for the study (PF). For all groups 10 animals were sampled. The administration of CCl4 was performed on coelomic cavity in a single dose of 0.5 mL. kg -1 and the CG CN groups, while dexamethasone was administered intramuscularly in the left dorso lateral region in the concentration of 0.2% at a dose of 2mg Kg-1 bw in NG and CG treatments. Both administrations were performed at the time of inoculation strain of A. hidrophila. In 6, 24 and 48 HPI (hours post inoculation) were harvested: the inflammatory exudate for quantification and evaluation of inflammatory cells, blood samples for hematological and biochemical evaluation; made somatic and histological assessment of the liver and spleen was made. As a result include liver disorder generated by CCl4. This led to several harmful changes in the mechanism of the inflammatory response in Nile tilapia as decreased protein synthesis and the formation of fatty liver degeneration, and with altered energy metabolism often presenting synergistic effect when combined with the immunosuppressive effect of dexamethasone, suggesting the occurrence of decreased production of coagulation factors, chemical mediators of inflammation and inhibition of cell membrane receptors

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-14Bitstream added on 2014-06-13T19:57:03Z : No. of bitstreams: 1 000749034.pdf: 5348079 bytes, checksum: 102b0eda80cf87dbf991e962c48f519c (MD5) / Na avaliação da participação da insulina e dos efeitos da dexametasona sobre a resposta de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, durante aerocistite induzida por Aeromonas hydrophila, foram utilizadas 189 tilápias com peso médio 532g (± 74g), constituindo nove tratamentos: Não tratado e Não inoculado (controle); Não tratado e inoculado; Tratado com insulina (INS) e inoculado; Tratado com INS + Aloxano (ALOX) e inoculado; Tratado com insulina (INS)+ dexametasona (DEXA) e inoculado; Tratado com ALOX e inoculado; Tratado com ALOX + DEXA e inoculado; Tratado DEXA e inoculado; Tratados com INS + ALOX + DEXA e inoculado. Após, seis, 24 e 48 horas após inóculo (HPI), as tilápias foram submetidas à anestesia profunda para colheita de sangue para determinação do hemograma completo e bioquímico sérico, assim como, obtenção de exsudato. Da mesma forma, foram realizados estudos dos índices somáticos hepáticos, esplênicos e renais, além do histopatológico destes mesmos órgãos. Contudo, as avaliações na aerocistite infecciosa revelaram o predomínio de neutrófilos no local inflamado, sendo esta alteração mais significativa 24 HPI, apresentando um padrão de inflamação aguda fibrinossupurativa na histopatologia. A neutrofilia apresentou correspondência com as alterações renais na porção cranial, sendo este resultado fortemente influenciado pela tratamento com insulina. O tratamento com dexametasona suprimiu a resposta imune inata das tilápias, resultando em linfopenia e monocitopenia, seguida pela ausência de macrófagos no exsudato durante a evolução da reação inflamatória infecciosa. Hiperglicemia e hipercolesterolemia em tilápias tratadas com dexametasona confirmaram o efeito glicocorticoide sobre o metabolismo intermediário dos peixes. A administração de aloxano resultou em alterações clínico-patológicos no globo ocular, tecido hepático e tecido... / For assessing the contribution of insulin and the dexamethasone effects on the response of Nile tilapia, Oreochromis niloticus, during Aeromonas hydrophila induced aerocistite, were used 189 tilapia mean weight 532g (± 74g) distributed in nine treatments: Untreated and not inoculated (control); Untreated and inoculated; Treated with insulin (INS) and inoculated; Treated with INS + alloxan (ALOX) and inoculated; Treated with insulin (INS) + dexamethasone (DEXA) and inoculated; Inoculated and treated with ALOX; Treated with ALOX + DEXA and inoculated; DEXA Treated and inoculated; Treated with INS + ALOX + DEXA and inoculated. After six, 24 and 48 hours post inoculation (HPI), tilapia were subjected to deep anesthesia for blood samples collection to determinate of complete blood count and serum biochemistry, as well as for obtaining exudate. Studies of liver, spleen and kidney somatic index were performed, and histopathology study was realized with the same organs. However, the infectious aerocistite revealed a predominance of neutrophils in the inflamed site, which was most significant at 24 HPI, with a pattern of fibrinossuppurative exudate, showing correspondence with renal changes in the cranial portion, principally in fish treated with insulin. The immunosuppressive effect of dexamethasone resulted in lymphopenia and monocytopenia, followed by the absence of macrophages in the exudate during the evolution of infectious inflammatory reaction. Hyperglycemia and hypercholesterolemia in dexamethasone treated tilapia confirmed the glucocorticoid effect on the intermediary metabolism. The administration of alloxan resulted in clinical and pathological changes in eyeball, liver tissue, skeletal muscle tissue, accompanied by increase in the amounts of glucose, triglycerides, cholesterol and serum alkaline phosphatase. The histopathology of cutaneous tissue and skeletal muscle in ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-29Bitstream added on 2014-06-13T20:17:34Z : No. of bitstreams: 1 petrillo_tr_me_jabo.pdf: 492481 bytes, checksum: e395c785498380ae608d079eac2b53f0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este ensaio teve por objetivos avaliar o efeito da administração parenteral de dexametasona e fosfato de levamisol sobre a cinética de acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos em lamínulas de vidro, implantadas no tecido subcutâneo de pacus (Piaractus mesopotamicus), na tentativa de simular um estímulo estressante com imunossupressão e a possibilidade de compensa-la usando um imuoestimulante. Foram utilizados 147 peixes juvenis, distribuídos aleatoriamente em vinte e uma caixas de água plásticas de 250 L, contendo sete animais cada, constituindo os tratamentos: NV = não tratado; CL = controle; L 25 = levamisol (25 mg/kg), L 50 = levamisol (50 mg/kg) , D2 = dexametasona (2 mg/kg), D2+L25 = dexametasona (2 mg/kg + levamisol 25 mg/kg), D2+L50 = dexametasona (2 mg/kg + levamisol 50 mg/kg). Os pacus foram anestesiados em solução alcoólica de benzocaína (1:10000 v/v) e submetidos ao implante de lamínulas de vidro esterilizadas no tecido subcutâneo, quando administrou-se, por via intra-muscular, os fármacos de acordo com cada tratamento. Decorridos dois, sete e 15 dias pós-implante (DPI) os peixes foram novamente anestesiados para coleta de sangue e eutanasiados (solução alcoólica de benzocaína, 1:500 v/v) para a retirada das lamínulas. O sangue destinou-se aos exames hematológicos e as lamínulas à avaliação da cinética do acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos. Os resultados foram analisados pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade e demonstraram que ao longo do período experimental observou-se redução do número de eritrócitos e taxa de hemoglobina associadas ao aumento do volume corpuscular médio, quadro que sugere ligeira anemia macrocítica. Na avaliação da cinética de acúmulo celular sobre a lamínula, as maiores contagens de macrófagos isolados ocorreram sete dias após... / The aim of this study was to investigate the effect of parenteral administration of dexamethasone and levamisole phosphate on the kinetics of accumulation of macrophages and formation of giant cells in glass cover slips implanted in subcutaneous tissue of pacu (Piaractus mesopotamicus) to simulate a stressful stimulus with immunosuppression and the possibility to compensate for it using an immunostimulant. We used 147 juvenile fish, randomly divided in twenty-one plastic water tanks of 250 L, containing seven animals each: NV = not treated, and CL = control, L25 = levamisole (25 mg / kg), L 50 = levamisole (50 mg / kg), D2 = dexamethasone (2 mg / kg), D2 + L25 = dexamethasone (2 mg / kg + levamisole 25 mg / kg), D2 + L50 = dexamethasone (2 mg / kg + levamisole 50 mg / kg). Fish were anesthetized with an alcoholic solution of benzocaine (1:10,000 v / v), implanted with sterile glass cover slips at subcutaneous tissue and were administered intra-muscular drugs, according of each treatment. After two, seven and 15 days post-implantation (DPI) fish were anesthetized for blood collection and euthanized (alcoholic solution of benzocaine, 1:500 v / v) to remove the glass cover slips. The blood was used for hematological tests and the glass cover slips to assess the kinetics of accumulation of macrophages and formation of giant cells. Statistical analyses were performed using 5% Tukey test and was observed reduction in the number of erythrocytes and hemoglobin associated with increase of mean corpuscular volume, suggesting slight macrocytic anemia. Kinetic evaluation of cell accumulation on glass cover slip, the highest number of isolated macrophages occurred at seven days after implantation in all groups, associated with increased formation of policariontes cells regardless of the number of cores. The dexamethasone... (Complete abstract click electronic access below)

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A Periodontite à uma doenÃa infecto-inflamatÃria crÃnica que afeta as estruturas de suporte dos dentes. A osteoporose induzida por glicocorticoides (OIGC) à o efeito adverso principal do uso prolongado do fÃrmaco. A atorvastatina (ATV), um fÃrmaco hipolipemiante, tem se destacado por apresentar efeitos pleiotrÃpicos: anti-inflamatÃrio, antioxidante e anabÃlico Ãsseo. Diante disso, essa dissertaÃÃo tem como objetivo avaliar a influÃncia da osteoporose induzida por glicocorticoide na perda Ãssea alveolar em ratos com periodontite experimental (PE) e o efeito anti-inflamatÃrio, antirreabsortivo e antioxidante do tratamento com Atorvastatina. No estudo foram utilizados 48 ratos Wistar machos que foram divididos em grupos: NaÃve, PE, OIGC, OIGC+PE e ATV. Para induÃÃo da osteoporose induzida por glicocorticoide, os grupos OIGC, OIGC+PE e ATV receberam injeÃÃes intramusculares de 7 mg/kg de dexametasona (DEXA) 1x/semana por 5 semanas, e os grupos NaÃve e PE receberam injeÃÃes intramusculares de 0,5 ml de soluÃÃo salina (SAL). Em seguida, os grupos PE, OIGC+PE e ATV foram submetidos a PE induzida por ligadura em torno do 2o molar superior esquerdo. O grupo ATV recebeu 27 mg/kg de ATV 30 minutos antes da ligadura e diariamente por 11 dias, os demais (NaÃve, PE, OICG e OICG+PE), receberam 2 ml de SAL por via oral por 11 dias, quando entÃo foram eutanasiados. Os animais do grupo NaÃve nÃo receberam ligadura e foram utilizados como controle. A perda Ãssea alveolar (POA) foi determinada por exames macroscÃpicos, radiogrÃficos, micro-tomogrÃficos e microscÃpicos das hemimaxilas dos animais. Os fÃmures direitos dos ratos foram removidos para anÃlise radiogrÃfica e biomecÃnica. A atividade de mieloperoxidase (MPO) na gengiva, e os nÃveis gengivais de fator de necrose tumoral (TNF)-&#945;, interleucina (IL)-1&#946;, -6, -8, e -10, glutationa reduzida (GSH), superÃxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) foram analisados para investigar o estresse oxidativo e inflamaÃÃo. Para avaliar a influÃncia da via WNT/&#946;-catenina, a expressÃo imunohistoquimica de RANKL, OPG, WNT10b, DKK-1 e &#946;-catenina foram investigadas. O leucograma e os nÃveis sÃricos de transaminases, ureia, creatinina e fosfatase alcalina Ãssea (FAO) tambÃm foram realizadas. Os animais do grupo OICG+PE mostraram maior POA (p<0,05), maior reduÃÃo de FAO (p<0,05), da densidade radiogrÃfica da maxila e mÃdulo de Young no fÃmur (p<0,05) quando comparado ao grupo PE. O tratamento com ATV reduziu a POA considerando todos os parÃmetros analisados. A ATV reduziu a atividade de MPO, e os nÃveis de TNF-&#945;, IL-1&#946;, -6, e -8, enquanto aumentou os nÃveis gengivais de IL-10, GSH, SOD e CAT. ATV reduziu a expressÃo de RANKL e DKK-1, e aumentou OPG, WNT10b e &#946;-catenina. A administraÃÃo de ATV aumentou a atividade de FAO no 11o dia comparado a OICG+PE. Nenhuma diferenÃa foi vista nos nÃveis de transaminases, ureia e creatinina em qualquer dos grupos estudados. Assim podemos concluir que OICG piora a POA, inibe a atividade osteoblÃstica e altera a perda Ãssea sistÃmica em ratos com PE, e que a ATV previne a POA em ratos submetidos à OICG+PE, por meio de efeito antirreabsortivo, anti-inflamatÃrio e antioxidante, com participaÃÃo da via de sinalizaÃÃo WNT.