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Avaliação das glandulas salivares menores em pacientes com a doença do enxerto contra o hospedeiro cronica : estudo clinico-patologico das classificações de Horn e Shulman / Histopathological evaluation of minor salivary glands in chronic Graft-versus-Host Disease after BMT : a comparative study betwee the Horn and Shuman's classifications with clinical correlation

Soares, Tânia Cristina Benetti, 1978- 11 August 2018 (has links)
Orientadores: Maria Leticia Cintra, Maria Elvira Pizzigatti Correa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T18:34:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_TaniaCristinaBenetti_M.pdf: 14432539 bytes, checksum: c0ee9e9bfd4554afbcf1633cfa93fc09 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O estabelecimento de critérios mínimos para o diagnóstico da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc), identificando aqueles com significância prognostica, bem como a padronização deste achados, pode adicionar subsídios para a conduta terapêutica, facilitar o trabalho de pesquisadores e aperfeiçoar a comunicação entre eles. O objetivo deste trabalho foi estudar dois sistemas de classificação histológica para DECHc em glândulas salivares menores (GSM), um proposto por Horn et al. em 1995 que tem sido empregado no Departamento de Anatomia Patológica, UNICAMP, e outro proposto por Shulman et al. em 2006. Este foi um trabalho retrospectivo que avaliou biópsias de GSM coletadas no momento do diagnóstico clínico de DECHc oral. As amostras de GSM foram obtidas de pacientes tratados por transplante de medula óssea (TMO) convencional, com enxerto HLA- idêntico de doadores aparentados entre 1994 e 2006. Do total de 154 pacientes com DECHc oral, 65 amostras de GSM de 65 pacientes foram selecionadas. A mediana de idade dos pacientes foi de 36 (12 - 59 anos), sendo 39 homens e 26 mulheres. As doenças de base foram LMC (n = 37), LMA (n = 11) LLA (n = 8), AA (n = 6), HPN (n = 1) e SMD (n = 2). As fontes de células tronco para os TMOs foram sangue periférico (n = 28) e medula óssea (n = 37). As biópsias foram avaliadas segundo os sistemas de classificação de Horn et al. e Shulman et al. de forma cega e independente por duas observadoras, e o resultado de consenso foi considerado para análise estatística. Foi encontrada uma significante correlação entre os diagnósticos histológicos propostos por Horn et al. e Shulman et al. (R = 87%, p = 0,0001). O critério "linfócitos periductais com exocitose nos ductos", da classificação de Shulman et al., mostrou correlação com a sobrevida global do paciente (p = 0,007). Assim, a migração de linfócitos através do epitélio ductal pode exercer influência negativa na evolução clínica dos pacientes. "Infiltrado linfocítico periductal" no sistema de graduação de Horn et al. Mostrou correlação significante com a forma clínica (localizada ou extensa) da DECHc (p = 0,04). Os resultados deste estudo apontam para a importância prognostica adversa dos critérios "infiltrado linfocítico periductal" e "linfócitos periductais com exocitose nos ductos" e podem auxiliar no entendimento da DECHc oral. / Abstract: Establishing minimum criteria for cGVHD diagnosis, identifying those with prognostic significance, as well as standardizing these features, may add subsidies to conduct therapy, to facilitate the work of researchers and to improve communication between them. The goal of this work was to study two systems for cGVHD histological classification in minor salivary glands (MSG), one proposed by Horn in 1995 that has been used at the Pathology Department, UNICAMP, and another one proposed by Shulman et al., in 2006. It was a retrospective study including MSG biopsies collected at the diagnosis of oral cGVHD. The MSG samples were obtained from patients treated by conventional HSCT, from HLA matched- sibling donors between 1994 - 2006. Among 154 patients with oral cGVHD, 65 samples were selected from 65 patients. Patients median age was 36 (12 - 59 years), 39 males and 26 females. The underlying diseases were CML (n = 37), AML (n = 11), ALL (n = 8), SAA (n = 6), PNH (n = 1) and MDS (n = 2). The sources of HSCT used were bone marrow (n = 37) and peripheral blood (n = 28). The histopathological specimens were blindly and independently examined by two observers and consensus results were considered for statistical processing. A significant correlation was found between the histological grades proposed by Horn and Shulman (R = 87%, p = 0.0001). The criterium "Periductal lymphocytic infiltrate with exocytosis into duct", in Shulman's classification, was correlated with global survival (p = 0,007). "Peri-ductal lymphocyte infiltrate" in Horn's system showed significant correlation with the clinical cGVHD form (localized or extensive) of cGVHD (p = 0.04). The results suggested similarity between final diagnoses obtained either by Horn or Shulman's classification. The periductal lymphocytic infiltrate was the most important histological criterium for clinical form of cGVHD. The lymphocytes migration through ductal epithelium might exert negative influence in patient outcome. The findings point to the adverse prognostic significance of the following criteria: "periductal lymphocytic infiltrate" and "peri-ductal lymphocytic infiltrate with exocytosis into duct" and may improve the understanding of oral cGVHD. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas
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Influência do Estado Diabético Sobre a Atividade e Distribuição das Enzimas Hexoquinase e Fosfofrutoquinase-1 nas Glândulas Submandibular e Parótida de Ratos / Influence of diabetes on the activity and distruition of the enzimes hexokinase and phosphofructokinase of the rat parotid and submandibular gland

Fernando Neves Nogueira 07 August 2001 (has links)
Na presente investigação estudamos a possível influência da falta da insulina sobre a atividade de duas enzimas importantes para a via glicolítica: a hexoquinase (HK) e a fosfofrutoquinase-1 (PFK-1), nas glândulas submandibular (GLSM) e parótida (GLPA) de ratos. Para isso, em ratos mantidos em jejum durante aproximadamente 15 horas foi injetado, via intraperitonial, estreptozotocin dissolvido em tampão citrato 0,1M pH 4,5 (60 mg/Kg de peso corporal). 48 horas após a indução, o sangue dos animais foi coletado e a glicemia determinada. Somente aqueles ratos que apresentaram glicemia igual ou acima de 350mg de glicose/100 ml de sangue foram utilizados. Os animais foram sacrificados 30 dias após a indução do estado diabético, por traumatismo craniano. As GLSM e GLPA foram removidas e analisadas para atividade e distribuição das enzimas HK e PFK-1. A enzima HK foi determinada no citosol (fração solúvel) e ligada a mitocôndria (fração ligada). A enzima PFK-1 foi determinada no citosol (fração solúvel) e ligada ao citoesqueleto (fração ligada) em dois pHs: pH 6,9, sujeito a regulação alostérica e pH 8,2, em que mostra atividade máxima. Na GLPA observamos aumento da atividade da HK tanto na fração solúvel (aproximadamente 33%) quanto na fração ligada a mitocôndria (aproximadamente 85%). Relativamente a isoenzimas de HK, não verificamos alteração no estado diabético. A atividade da enzima PFK-1 na GLPA não apresentou alterações quer considerando a forma sujeita a regulação alostérica, quer a forma com atividade máxima e portanto, não sujeita a regulação. Na GLSM constatamos uma redução da enzima HK ligada a mitocôndria de aproximadamente 74%, não havendo alteração da forma determinada no citosol (forma solúvel). Relativamente às formas isoenzimáticas, verificamos a perda de uma forma isoenzimática tanto na fração solúvel quanto na fração ligada. Por outro lado, observamos um aumento da atividade da PFK-1 da fração solúvel de aproximadamente 50% quando determinada em pH 6,9, que reflete a forma regulada alostericamente, e de aproximadamente 84% quando determinada em pH 8,2 e, portanto, não sujeito a regulação. Contrariando ao esperado, o conteúdo de Fru-2,6-P2 nas GLSM de ratos diabéticos apresentou redução de aproximadamente 42% enquanto a atividade da PFK-2 também apresentou redução. / We have studied in the present investigation a possible influence of the diabetic state of the rats on the activity of two important enzymes of the glycolitic pathway, namely, the HK and PFK-1 of the submandibular and parotid gland. The diabetic state was induced by an injection of streptozotocin (60mg/Kg body weight) dissolved in 0,1M citrate buffer pH 4,5 in rats overnight fasted. Forty-eight hours after the injection, blood was collected and the glucose determined. Only those animals presenting a blood glucose equal or above 350mg glucose/100ml blood we used in this experiment. The animals were sacrificed by cranial traumatism, thirty days after the induction of the diabetes, the submandibular and parotid glands were removed and analyzed for activity and distribution of the enzymes HK and PFK-1. The activity of the enzyme HK was determined in the cytosol (soluble fraction) and bound to mitochondria (solubilized fraction). The activity of the enzyme PFK-1 was determined in the cytosol (soluble fraction) and bounded to cytoscheletal (bound fraction)at two pHs, pH 6,9 that respond to allosteric regulation and pH 8,2 in which it show maximum activity. In the parotid gland it was observed an increase in the HK activity in both fractions, soluble and bond to mitochondria, of about 33% and 85% respectively. It was not possible to observe alterations in the isoenzymes profile. The activity of PFK-1 in the parotid gland showed no variation either considering the soluble fraction on the bound form, at both pHs in which it was determined. In the submandibular gland, it was verified a reduction of the bound HK of about 74%, but no variation in the soluble form. Concerning the isoenzymes, it was observed the disappearance of an isoenzyme in both fraction. On the other hand, we observed an increase in the activity of PFK-1 of the soluble fraction of about 50%, when determined at pH 6,9, pH in which it respond to allosteric control, and about 84% when determined at pH 8,2. Contrary to what it was expected, the content of Fru-2,6-P2 were reduced in the submandibular gland of diabetic rats.
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A glandula parotida na AIDS : analise de 100 casos de autopsia / Autopsy findings in the parotid glands of 100 Brazilian patients with aids

Vargas, Pablo Agustin, 1973- 08 May 1999 (has links)
Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T05:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vargas_PabloAgustin_D.pdf: 5064283 bytes, checksum: add315c10cfa15f730cbc610342d412c (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações anatomopatológicas das glândulas parótidas de 100 pacientes aidéticos autopsiados e de 13 que morreram por outras causas. As autópsias foram realizadas no SVOC (Serviço de Verificação de Óbitos da Capital) ¿ FMUSP (Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo) em 1996 e 1997, seguindo os preceitos éticos e técnicos do local. As glândulas parótidas foram dissecadas, cortadas em seis fragmentos e os cortes histológicos corados em H/E, Grocott e Zieh-Nielsen. No grupo HIV negativo observou-se em três casos sialadenite discreta crônica. Nas parótidas do grupo aidético observou-se dez casos de micobacteriose, três de criptococose, dois de histoplasmose e nove de citomegalovirose. Sialadenite esteve presente em 34 casos. Foram encontradas seis cistos linfoepiteliais, um tumor de Wasthin e um linfoma não-Hodgkin difuso de grandes células B. Os linfonodos intraparotídeos do grupo aidético apresentaram: depleção de linfócitos em 32 casos; granulomas com bacilos álcool-ácido resistentes e 10 de inclusão de tecido glandular nos linfonodos em 36 casos. Em 90% dos casos o nível de linfócitos CD4 no sangue dos indivíduos aidéticos esteve abaixo de 200 cels/ 'mu'l. A etiologia da sialadenite crônica em pacientes aidéticos ainda precisa ser melhor determinada. Micobacteriose e citomegalovirose foram mais freqüentes do que criptococose e histoplasmose. Estas doenças não estavam localizadas na parótida exclusivamente, envolvendo também outros órgãos. Lesões infecciosas, císticas e neoplásicas acometeram as glândulas parótidas de pacientes aidéticos mesmo sem alterações clínicas evidentes. Estudos imunohistoquimicos, hibridização ¿in situ¿ e PCR para detecção de agentes infecciosos bacterianos, fúngicos e virais tornam-se necessários para melhor determinar o envolvimento das glândulas na AIDS / Abstract: This study describes the alterations found in the parotid glands of 100 patients who died of AIDS and of 15 who died for other reasons. Sialadenitis occurred in the parotid of 13,34% cases of the control group, and in 35% cases of the AIDS group. Ten cases of mycobacteriosis, three of cryptococosis, two of histoplasmosis, nine of citomegalovirusis, six lymphoepithelial cysts, one Warthin¿s tumor and one non-Hodgkin lymphoma were found in the parotid of the HIV positive patients. Intraparotid Iymph nodes showed depletion of Iymphocytes in 31 cases and inclusion of glandular tissue in 37 cases of immunodeficient patients. Mycobacteriosis, cryptococosis and histoplasmosis in the parotid glands are well documented in the literature, but in HIV positive it is rarely described. It is also important to consider that the alterations of the parotid here described had not been diagnosed clinically. This results indicate that infectious and others lesions in the parotid gland and probably in the other major salivary glands are more frequent than here to fore described in the literature in AIDS patients / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Odontologia
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Efeito da homeopatia na função salivar e na morfologia de glândulas parótidas de ratos irradiados / Effect of homeopathy in the function and morphology of salivary parotid glands of irradiated rats

Alencar, Phillipe Nogueira Barbosa, 1984- 22 August 2018 (has links)
Orientador: Francisco Carlos Groppo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T06:46:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alencar_PhillipeNogueiraBarbosa_M.pdf: 1861524 bytes, checksum: 99b4aeb86d33c5851061af86242547cb (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O presente trabalho teve como proposta avaliar o efeito radioprotetor de uma solução homeopática sobre a função salivar e a morfologia de glândulas parótidas de ratos irradiados. A amostra foi composta por 150 animais que foram divididos, aleatoriamente, em 6 grupos de 25 animais: G1 ( grupo controle) - recebeu solução salina v.o., mas não foi irradiado; G2 (controle Irradiado) - tratamento idêntico ao G1 e recebeu dose única de irradiação de 15 Gy; G3 (álcool) - recebeu solução hidroalcoólica dinamizada em 15 CH v.o.; G4 (álcool irradiado) - tratamento idêntico ao G3 e recebeu irradiação; G5 (homeopatia) - recebeu 0,25 ml (aproximadamente 1ml/kg) da solução hidroalcoólica irradiada com 15 Gy e dinamizada em 15 CH v.o.; G6 (homeopatia irradiado) tratamento idêntico ao G5 e foi submetido à irradiação. Decorridos os tempos de 12 horas, 3, 10, 17 e 24 dias após a administração dos fármacos, todos os animais foram induzidos à salivação. Analisando a função salivar, foram observadas diferenças estatisticamente significantes somente para o período de 17 dias, no qual os animais irradiados e tratados com a formulação homeopática mostraram maior salivação dos que os demais grupos na mesma condição. Na análise morfométrica foi medido o número de ácinos em função do tempo, considerando cada grupo separadamente. A análise dos resultados mostrou que houve diferença estatisticamente significante somente para o grupo de animais que recebeu álcool e foi irradiado. Esses animais apresentaram uma tendência de diminuição do número de ácinos ao longo do tempo. Já os animais que receberam homeopatia ou o controle e foram irradiados, não mostraram diferenças estatisticamente significantes ao longo do tempo, sugerindo que o tratamento homeopático pode ter diminuído o efeito do álcool sobre o número de ácinos. Concluiu-se, por meio da função salivar, que houve um efeito radioprotetor tardio da solução homeopática. Pode-se concluir também, por meio da análise da morfologia da glândula parótida, que houve um efeito radioprotetor da solução homeopática / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the radioprotective effect of a homeopathic solution in the salivary function and in the parotid gland morphology in irradiated rats. The sample size was 150 rats randomly divided in 6 groups with 25 animals each. The groups were named based on the medication: G1 (Control) - animals received saline solution, p.o., but they were not irradiated; G2 (Irradiated Control) - received the same treatment on G1 and a single dose of 15 Gy of irradiation; G3 (Alcohol) - received a hydroalcoholic solution dynamized at 15 CH, p.o.; G4 (Irradiated Alcohol) - received the same treatment on G3 and a single dose of irradiation; G5 (Homeopathy) - received 0.25 ml (~1mL/kg) of the hydroalcoholic solution irradiated at 15 Gy and dynamized at 15 CH, p.o.; G6 (irradiated homeopathy) - received the same treatment on G5 and a single dose of irradiation. Each group was subdivided in 5 different groups, based on the time point of the euthanasia: 12 hours, 3, 10, 17, and 24 days. The medication was applied for 7 days before and 7 days after the radiation treatment. The irradiated groups received only one dose of 15Gy and after the determined times salivation were induced. The salivary function analysis showed that only the G6 group that was euthanized on the day 17 had a statistical significant difference when compared to the others irradiated groups showing a higher salivation flow rate. In the morphometric analysis, the number of acini present over the time in the parotid gland was observed. The only group that showed a statistical significant difference was the Alcohol Irradiated. This group showed a tendency of reduction in the number of acini over the time. Data from the irradiated homeopathy and irradiated control group were not statistical significant. This suggests that the homeopathic treatment might have reduced the alcohol effect on the number of acini. The homeopathy had a late radioprotective effect of the homeopathic solution based on the salivary function. In addition, it also had a radioprotective effect of the homeopathic solution based on the morphology analysis of the parotid gland / Mestrado / Radiologia Odontologica / Mestre em Radiologia Odontológica
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Correlação da expresão da proteína p53 comaspectos clínicos e histopatológicosem adenomas pleomórficos de glândula salivar maior

Cavalcanti das Neves, Jerlucia 31 January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4261_1.pdf: 9000399 bytes, checksum: 3b6d98cb6df4817475383020ebb9fa6f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Adenoma pleomórfico (AP) é o mais comum dos tumores das glândulas salivares. Transformação maligna pode ocorrer após recorrências ou em casos com longo tempo de evolução. Objetivo: analisar os aspectos clínicoepidemiológicos, anatomopatológicos e a imunoexpressão da proteína p53, em adenomas pleomórficos de glândulas salivares maiores, correlacionando-os. Material e método: Foram avaliados 106 casos de AP pela pesquisa retrospectiva nos prontuários clínicos e revisão das preparações histológicas, bem como marcação para p53 através de técnica imunoistoquímica. Resultados: A média de idade dos pacientes foi de 39,51 anos; houve predomínio do sexo feminino (69,5%); a glândula parótida foi a mais acometida (86,8%); o tempo de evolução foi superior a um ano em 76,74% dos casos, com tamanho tumoral de 3,48 cm em média. A avaliação histopatológica demonstrou cápsula tumoral incompleta e delgada em 49,0% dos casos; protusões para a cápsula ou extensão extra-capsular foram infreqüentes,11.32% e 8.49%, respectivamente ;a matriz extracelular variou entre mixocondróide (41,5%), mixóide (36,8%), condróide (3,8%), fibrótica (1,9%) e associações entre os diversos tipos foram observadas.O componente epitelial-mioepitelial constituiu 50% ou mais do tumor em 65,10% dos casos e estava disposto em arranjo cordonal (86,8%), ductal (81,1%), sólido (40,6%) , cístico (20,7%) e em "paliçada" (8,49%). Metaplasia escamosa ocorreu em 16.04% dos casos. Alterações histopatológicas relacionadas à transformação maligna foram incomuns: hialinização extensa (4,7%) e necrose (0,9%). Houve positividade para a protéina p53 em 23,58% da amostra. Em 12,0% dos casos positivos para p53 foi observada presença de alteração histológica sugestivas de transformação maligna. Conclusões: confirma-se a diversidade histopatológica do AP. Características associadas à transformação maligna não foram freqüentes na amostra. Não houve correlação significativa entre a imunoexpressão do p53 e os achados associados à transformação maligna
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Influencia das glandulas salivares sub-mandibulares e sublinguais na ingestão lactea em ratos

Vilarino, Jorge Fernando 15 July 2018 (has links)
Orientador: Antonio Celso Ramalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T15:03:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vilarino_JorgeFernando_M.pdf: 2213222 bytes, checksum: 59ea387680a0e08643dc2323bd6bdbff (MD5) Previous issue date: 1976 / Resumo: Considerando-se os resultados das experiências realizadas pose-se concluir que: Não há diferenças significativas na ingestão Láctea entre os animais controles e aquelas submetidos à cirurgia simulada, em todas as idades estudadas. Os ratos sialoadenectomizados ingerem quantidade de leite significativamente menor que os animais controles e, os submetidos à cirurgia simulada, em todas as idades. A aplicação de vaselina aos lábios dos animais sialoadenictomizados, aumentou a ingestão Láctea nas idades de 8, 10, 18 e 20 dias, embora a quantidade de leite seja significativamente menor que a obtida pelos animais controles e pelos submetidos à cirurgia simulada / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Estudo de proteinas nucleares não-histonicas em glandulas salivares de Bradysiaspatitergum (diptera, sciaridae)

Recco-Pimentel, Shirlei Maria, 1954- 04 April 1986 (has links)
Orientador : Maria Luiza Silveira Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T20:24:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Recco-Pimentel_ShirleiMaria_D.pdf: 2434016 bytes, checksum: 82d1489e982ef730dadf0f0829df382e (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Núcleos das três regiões das glândulas salivares larvais do sciarideo Bradysia spatitergum, em três fases do desenvolvimento pós-embrionário, foram analisadas por métodos cariométricos e citoquímicos.Os resultados indicaram que os métodos cariométricos de determinação de áreas e volumes nucleares não permitiram detectar aumentos em proteínas nucleares não-histônicas relacionados à atividade fisiológica característica de cada região glandular,ao longo do desenvolvimento. Por outro lado, houve diminuição nos tamanhos nucleares em pré-pupas, o que provavelmente encontra-se relacionado ao fenômeno de histólise glandular. Dados obtidos por citofotometria de varredura em preparados corados com "naphthol yellow S" a pH 2,7, indicaram que quantidades consideráveis de proteínas nucleares não-histônicas permanecem após tratamento por NaCl 3M nas três regiões das glândulas, nas três fases do desenvolvimento, proteínas estas portadoras de resíduos de lisina e de grupamentos hidrofóbicos. As variaçoes no conteúdo de proteínas nucleares não histônicas remanescentes ao tratamento com NaCl 3M,nas amostras ou entre elas, e o fato de se comportarem diferentemente frente ao tratamento por TCA, devem estar relacionados aos tipos e quantidades de proteínas estruturais e/ou reguladoras presentes nos núcleos, bem como ao tipo sua interação com o DNA ou com complexos DNA-histonas, de acordo com a atividade fisiológica de cada região,em cada fase pode estar relacionado / Abstract: Nuclei of the three salivary gland regions of the sciarid Bradysia spatitergum, under three phases of the post-embryonary development were analyzed by karyometric and cytochemical methods. The results indicated that the karyometric methods for determination of the nuclear areas and volumes did not allow the detection of increases in nuclear non-histone proteins in relation to physiological activity of each glandular region during development. On the other hand, there was a decrease in nuclear size in pre-pupal stages, which probably is related to glandular histolytic process. Data obtained after scanning cytophotometry of preparations stained with naphthol yellow S a pH 2,7, indicated that significant amounts of non-histone nuclear proteins remained in S1, S2 and S3 glandular regions in the three developmental phases, after 3M NaCl treatment. These proteins contained lysine residues and hydrophobic groups. The variation of non-histone nuclear protein content which remains after 3M NaCl treatment occurring in or between the samples and the fact that they behaved differently to TCA treatment, must be related to the different types and quantities of structural and/or regulatory proteins present in the nucleus. The type of interaction with the DNA or with DNA-histone complexes, as a function of the physiological activity in each glandular region under different developmental phase may also be involved. / Doutorado / Doutor em Ciências
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Análise morfológica microscópica de Mucoceles na mucosa bucal e inter-relação com sua etiopatogenia / Microscopic morphological analysis of Mucoceles in the oral mucosa and its interrelationship with etiopathogenesis

Consolaro, Renata Bianco 06 December 2010 (has links)
Avaliamos o perfil dos portadores de Mucoceles bucais e estudamos microscopicamente suas características para correlacioná-las com as possíveis etiopatogenias, especialmente as obstruções ductais promovidas por proliferações epiteliais hiperplásicas e neoplásicas como o papiloma intraductal, Papiloma Ductal Invertido e Sialadenoma Papilífero. Realizamos o levantamento das informações registradas de 987 casos clínicos e suas respectivas peças cirúrgicas foram re-analisadas microscopicamente em cortes teciduais corados em HE. Os dados foram registrados e tabulados para comparações e correlações. A faixa etária mais comprometida foi a segunda e terceira décadas (399 e 345 casos) e o local mais afetado foi o lábio inferior (707 casos). A distribuição entre os gêneros foi praticamente igual. Em 262 casos os pacientes relacionaram a lesão com o traumatismo prévio. Dos 987 casos, 77 (7,8%) foram diagnosticados como Cisto de Retenção Mucosa e (910) como cisto por extrasamento mucoso. Os Cistos de Retenção Mucosa aconteceram predominantemente pacientes acima da quinta década de vida. Algumas situações simultâneas foram identificadas com frequência nas glândulas salivares associadas às Mucoceles, como a Sialadenite Crônica Inespecífica, Sialadenite Crônica Esclerosente ou Tumor de Kuttner, Oncocitose e Sialolitíase. Foram diagnosticados ainda, 21 Papilomas Intraductais, 6 Papilomas Ductais Invertidos e 3 Sialadenomas Papilíferos, além de 27 Proliferações Epiteliais Intraductais de diagnóstico não determinado. Concluímos que: a) além dos traumatismos, na etiopatogenia das Mucoceles bucais deve-se considerar a presença dos Papilomas Ductais como uma importante possibilidade a ser analisada especificamente nas observações microscópicas das peças cirúrgicas enviadas para análise histopatológica, considerando-se a sua natureza neoplásica. b) a Sialolitíase e a Oncocitose devem ser consideradas como causas obstrutivas ductais de Mucoceles bucais em suas análises clínicas e microscópicas. c) as causas obstrutivas parciais e totais podem estar associadas à etiopatogenia das Mucoceles bucais do tipo Cisto por Extravasamento Mucoso, especialmente quando ocorrem próximo ou no interior do corpo glandular. A retenção de muco pode promover a ruptura dos delicados ductos proximais e dos ácinos, promovendo o derramamento de muco no tecido conjuntivo do estroma glandular, iniciando-se o processo no interior da mesma. Quando mais próximas da mucosa bucal, as causas obstrutivas podem não romper o ducto pela sua estrutura epitelial e conjuntiva ser mais espessa e resistente, gerando Cistos de Retenção Mucosa com revestimento epitelial. / This study evaluated the profile of individuals with oral Mucoceles and investigated their microscopic characteristics with a view to correlate them to the possible etiopathogenesis, especially ductal obstructions caused by hyperplastic and neoplastic epithelial proliferations such as Intraductal Papilloma, Inverted Ductal Papilloma and Sialoadenoma Papilliferum. The study surveyed the records of 987 clinical cases and respective specimens, which were microscopically reanalyzed on tissue sections stained with hematoxylin and eosin. Data were recorded and tabulated for comparisons and correlations. The most affected age range was the second and third decades of life (399 and 345 cases), and the lower lip was the most affected site (707 cases). The distribution between genders was nearly equal. In 262 cases the patients related the lesion to a previous trauma. Among the 987 cases, 77 (7.8%) were diagnosed as mucus retention cyst and (910) as mucus extravasation cyst. The Mucus Retention Cysts affected mainly patients above the fifth decade of life. Simultaneous disorders were often identified in salivary glands associated to the Mucoceles, such as Nonspecific Chronic Sialadenitis, Chronic Sclerosing Sialadenitis or Kuttner Tumor, Oncocytosis and Sialolithiasis. There were also diagnoses of 21 Intraductal Papillomas, 6 Inverted Ductal Papillomas and 3 cases of Sialoadenoma papilliferum, besides 27 Intraductal Epithelial Proliferations of undetermined diagnosis. It was concluded that: a) in addition to trauma, the etiopathogenesis of oral Mucoceles should consider the presence of Ductal Papillomas as an important possibility to be specifically analyzed on the microscopic analysis of specimens submitted to histopathological analysis, considering its neoplastic nature. b) Sialolithiasis and Oncocytosis should be considered as causes of ductal obstruction of oral Mucoceles in the clinical and microscopic analyses. c) the partial and total causes of obstruction may be associated to the etiopathogenesis of oral Mucoceles involving Mucus Extravasation Cysts, especially when they occur close to or inside the gland body. The mucus retention may cause the rupture of fragile proximal ducts and acini, causing the outflow of mucus in the connective tissue of the gland stroma, giving rise to the process inside it. When closer to the oral mucosa, the obstructive causes may not disrupt the duct because its epithelial and connective structure is thicker and more resistant, giving rise to Mucus Retention Cysts with epithelial lining.
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Análise morfológica microscópica de Mucoceles na mucosa bucal e inter-relação com sua etiopatogenia / Microscopic morphological analysis of Mucoceles in the oral mucosa and its interrelationship with etiopathogenesis

Renata Bianco Consolaro 06 December 2010 (has links)
Avaliamos o perfil dos portadores de Mucoceles bucais e estudamos microscopicamente suas características para correlacioná-las com as possíveis etiopatogenias, especialmente as obstruções ductais promovidas por proliferações epiteliais hiperplásicas e neoplásicas como o papiloma intraductal, Papiloma Ductal Invertido e Sialadenoma Papilífero. Realizamos o levantamento das informações registradas de 987 casos clínicos e suas respectivas peças cirúrgicas foram re-analisadas microscopicamente em cortes teciduais corados em HE. Os dados foram registrados e tabulados para comparações e correlações. A faixa etária mais comprometida foi a segunda e terceira décadas (399 e 345 casos) e o local mais afetado foi o lábio inferior (707 casos). A distribuição entre os gêneros foi praticamente igual. Em 262 casos os pacientes relacionaram a lesão com o traumatismo prévio. Dos 987 casos, 77 (7,8%) foram diagnosticados como Cisto de Retenção Mucosa e (910) como cisto por extrasamento mucoso. Os Cistos de Retenção Mucosa aconteceram predominantemente pacientes acima da quinta década de vida. Algumas situações simultâneas foram identificadas com frequência nas glândulas salivares associadas às Mucoceles, como a Sialadenite Crônica Inespecífica, Sialadenite Crônica Esclerosente ou Tumor de Kuttner, Oncocitose e Sialolitíase. Foram diagnosticados ainda, 21 Papilomas Intraductais, 6 Papilomas Ductais Invertidos e 3 Sialadenomas Papilíferos, além de 27 Proliferações Epiteliais Intraductais de diagnóstico não determinado. Concluímos que: a) além dos traumatismos, na etiopatogenia das Mucoceles bucais deve-se considerar a presença dos Papilomas Ductais como uma importante possibilidade a ser analisada especificamente nas observações microscópicas das peças cirúrgicas enviadas para análise histopatológica, considerando-se a sua natureza neoplásica. b) a Sialolitíase e a Oncocitose devem ser consideradas como causas obstrutivas ductais de Mucoceles bucais em suas análises clínicas e microscópicas. c) as causas obstrutivas parciais e totais podem estar associadas à etiopatogenia das Mucoceles bucais do tipo Cisto por Extravasamento Mucoso, especialmente quando ocorrem próximo ou no interior do corpo glandular. A retenção de muco pode promover a ruptura dos delicados ductos proximais e dos ácinos, promovendo o derramamento de muco no tecido conjuntivo do estroma glandular, iniciando-se o processo no interior da mesma. Quando mais próximas da mucosa bucal, as causas obstrutivas podem não romper o ducto pela sua estrutura epitelial e conjuntiva ser mais espessa e resistente, gerando Cistos de Retenção Mucosa com revestimento epitelial. / This study evaluated the profile of individuals with oral Mucoceles and investigated their microscopic characteristics with a view to correlate them to the possible etiopathogenesis, especially ductal obstructions caused by hyperplastic and neoplastic epithelial proliferations such as Intraductal Papilloma, Inverted Ductal Papilloma and Sialoadenoma Papilliferum. The study surveyed the records of 987 clinical cases and respective specimens, which were microscopically reanalyzed on tissue sections stained with hematoxylin and eosin. Data were recorded and tabulated for comparisons and correlations. The most affected age range was the second and third decades of life (399 and 345 cases), and the lower lip was the most affected site (707 cases). The distribution between genders was nearly equal. In 262 cases the patients related the lesion to a previous trauma. Among the 987 cases, 77 (7.8%) were diagnosed as mucus retention cyst and (910) as mucus extravasation cyst. The Mucus Retention Cysts affected mainly patients above the fifth decade of life. Simultaneous disorders were often identified in salivary glands associated to the Mucoceles, such as Nonspecific Chronic Sialadenitis, Chronic Sclerosing Sialadenitis or Kuttner Tumor, Oncocytosis and Sialolithiasis. There were also diagnoses of 21 Intraductal Papillomas, 6 Inverted Ductal Papillomas and 3 cases of Sialoadenoma papilliferum, besides 27 Intraductal Epithelial Proliferations of undetermined diagnosis. It was concluded that: a) in addition to trauma, the etiopathogenesis of oral Mucoceles should consider the presence of Ductal Papillomas as an important possibility to be specifically analyzed on the microscopic analysis of specimens submitted to histopathological analysis, considering its neoplastic nature. b) Sialolithiasis and Oncocytosis should be considered as causes of ductal obstruction of oral Mucoceles in the clinical and microscopic analyses. c) the partial and total causes of obstruction may be associated to the etiopathogenesis of oral Mucoceles involving Mucus Extravasation Cysts, especially when they occur close to or inside the gland body. The mucus retention may cause the rupture of fragile proximal ducts and acini, causing the outflow of mucus in the connective tissue of the gland stroma, giving rise to the process inside it. When closer to the oral mucosa, the obstructive causes may not disrupt the duct because its epithelial and connective structure is thicker and more resistant, giving rise to Mucus Retention Cysts with epithelial lining.
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Investigação da atividade apoptótica na abertura luminal dos ductos das glândulas salivares: análise comparativa entre modelo animal e humano / Investigation of apoptotic activity in the lumen formation of salivary gland ducts: comparative analysis between animal and human based models

Teshima, Tathyane Harumi Nakajima 22 March 2016 (has links)
As glândulas salivares são estruturas essenciais para a manutenção da homeostase da cavidade oral pela síntese e secreção do fluido salivar. A disfunção ou perda permanente das glândulas salivares causadas por radioterapia, doenças inflamatórias ou desordens congênitas elevam principalmente o risco de infecções da mucosa oral e de estruturas dentárias, além de potencialmente prejudicar funções fisiológicas como fala, mastigação e paladar, diretamente interferindo na qualidade de vida dos indivíduos afetados. Os tratamentos atualmente disponíveis são apenas paliativos, ressaltando a necessidade de se compreender melhor os processos embriogênicos a fim de desenvolver novas estratégias terapêuticas capazes de regenerar as glândulas salivares. O princípio da formação das glândulas salivares baseia-se na coordenação de diversos processos morfogenéticos, e este trabalho foca particularmente em investigar a formação do espaço luminal do sistema de ductos, uma vez que a adequada abertura dos lumens é um processo essencial para a secreção salivar. Relata-se que a remoção das células centrais dos cordões sólidos epiteliais por morte celular apoptótica é o principal mecanismo de abertura do espaço luminal dos futuros ductos glandulares em camundongos. Porém, pouco se sabe sobre o controle temporal da apoptose durante o desenvolvimento glandular e sobre seu comportamento em glândulas salivares humanas. Neste trabalho, o perfil de expressão de diversas proteínas envolvidas na cascata apoptótica em glândulas salivares fetais humanas foi analisado de acordo com cada estágio morfogenético por imunoistoquímica (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bcl-x, Bcl-xL, caspase-3 clivada, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivina e citocromo c). As análises semi-qualitativas resultaram em negatividade apenas para as proteínas Bcl-2, Bad, Bid e caspase-3 clivada em todas as fases de desenvolvimento. A expressão nuclear de Bax e Bak foi identificada em presumidos espaços luminais em estágios precoces, enquanto Bcl-xL foi o fator antiapoptótico da família Bcl-2 que exibiu expressão nuclear mais importante. Caspases-6, -7 e -9 foram positivas em todas as fases, e a ausência de caspase-3 clivada sugere caspase-7 como principal caspase efetora da apoptose em desenvolvimento de glândulas salivares humanas. Ambos os componentes do complexo apoptossomo foram positivos durante o desenvolvimento glandular, e o inibidor survivina demonstrou mais positividade nuclear em estágios mais avançados. Ao observar a expressão de reguladores apoptóticos durante o desenvolvimento glandular humano, foram realizados experimentos funcionais com culturas de tecido glandular de camundongos para avaliar o papel das caspases durante a formação desta estrutura. Inicialmente detectou-se a atividade apoptótica em glândulas salivares de camundongos albinos no centro dos cordões epiteliais primários a partir de estágios precoces de desenvolvimento através de TUNEL e caspase-3 clivada. A partir disso, foi realizada a inibição apoptótica funcional in vitro durante o mesmo período, que resultou em ductos significativamente mais amplos e em defeitos morfológicos importantes nas estruturas luminal e acinar. Este trabalho evidenciou portanto atividade apoptótica durante a formação de glândulas salivares humanas e de camundongo, expressando-se em fases mais precoces do que reportadas anteriormente. Além disso, a ausência de Bad e Bid indica que a via intrínseca está mais ativa que a extrínseca, e distintos perfis de expressão da maioria das moléculas sugere adicionais funções não-apoptóticas durante a morfogênese glandular. / Salivary glands are essential structures for the maintenance of homeostasis of the oral cavity by synthesizing and secreting saliva. Permanent dysfunction or loss of salivary glands caused by radiotherapies, inflammatory diseases or congenital disorders increase mainly the risk of infections of the oral mucosa and tooth surface, also impairing physiological functions as speech, mastication and taste, directly interfering in quality of life. Current treatments are only palliative-based, which highlights the need of having a better understanding of embryonic processes to develop therefore new therapeutic strategies able to regenerate salivary glands. The development of glandular secretory units and ductal system involves the coordination of several morphogenetic processes, and this study particularly focuses in investigating the formation of the lumenal space of the ductal system, as the proper lumen opening is an essential step for the salivary secretion. The clearance of the central cells of developing solid epithelial stalks by apoptotic cell death is the main mechanism of lumen space opening within presumptive ducts in mouse salivary glands. However little is known about its temporal regulation and its function in human salivary glands. Here we analysed the profile expression of several apoptosis-related proteins during human salivary gland development in correlation to each morphogenetic stage by immunohistochemistry (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bclx, Bcl-xL, cleaved caspase-3, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivin e citocromo c). Immunohistochemical results were analysed semi-qualitatively, and proteins Bcl-2, Bad, Bid and cleaved caspase-3 were considered completely negative at all stages of development. The nuclear expression of Bax and Bak were observed within the presumptive luminal spaces at early stages, while Bcl-xL was the antiapoptotic factor of Bcl-2 family that showed more prominent nuclear expression. Caspases-6, -7 and -9 were positive at all stages, and the absence of cleaved caspase-3 suggests caspase-7 as the main effector caspase during human salivary gland development. Both components of the apoptosome complex were also positive through all development, and the inhibitor of apoptosis survivin has shown more nuclear positivity at later stages. As the expression of apoptotic regulators was observed during human salivary gland development, functional experiments were then performed in mouse salivary gland cultures to determine the apoptotic activity of during the glandular formation. Initially, the apoptotic activity was detected in mouse salivary glands within the centre of primary epithelial stalks from early stages of development by TUNEL and cleaved caspase-3. Thus the in vitro apoptotic inhibition was performed at the same stages, which resulted in significant wider ducts and important morphological defects within luminal and acinar structures. This work has therefore evidenced the existence of apoptotic role in salivary gland lumen formation of both human and mouse models, having an earlier start point as reported before. Moreover, the absence of Bad and Bid indicates that the intrinsic pathway is more active than the extrinsic during human development, and the distinct subcellular expression of most molecules suggests additional non-apoptotic functions.

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