Syftet med studien var att undersöka hur lärare i grundskolan tänker kring, och beskriver hur de arbetar med, studie- och yrkesvägledning inom ramarna för det som i läroplanen (Lgr 11) beskrivs som ett ansvar för hela skolan. Studien genomfördes med kvalitativ metod i form av intervjuer med åtta lärare på sammanlagt fyra grundskolor inom Stockholms län. Resultatet visade att flera av lärarna likställde studie- och yrkesvägledning med studie- och yrkesvägledaren. De flesta av lärarna var inte medvetna om att de hade ett ansvar för skolans studie- och yrkesvägledning, utifrån rådande styrdokument. Det kunde sägas att lärarna ansåg att syftet med studie- och yrkesvägledning var att förbereda eleverna inför framtida studie- och yrkesval, även om det fanns skillnader i hur detta uttrycktes och vad det arbetet kunde innebära. Tidsbristen uppgavs vara ett hinder och de flesta hade svårt att knyta an studie- och yrkesvägledning till sitt eget ämne. Lärarna var främst präglade av sin egen erfarenhet av studie- och yrkesvägledning, snarare än att deras uppfattningar om området kunde härledas till styrdokumenten, information från rektor eller utbildning. Resultatet analyserades utifrån teorin om närbyråkrater i relation till begreppen förstå, kunna och vilja. Det konstaterades att det fanns en väldig variation lärarna emellan både vad gäller tankar kring innebörd och det praktiska arbetet. Studien visade sig kunna bekräfta en del av de resultat som Henryssons avhandling om syo-kulturer i skolan visat (Henrysson, 1994). Detta skulle kunna tyda på att mycket litet har utvecklats på 20 år vad gäller lärares förhållningssätt gentemot studie- och yrkesvägledning som ett ansvar för hela skolan. / The purpose of the study was to examine how teachers in elementary school think about, and describe how they work with, guidance and counselling within the confines of what the curriculum (Lgr 11) describes as a responsibility of the whole school. The study had a qualitative approach, where interviews with eight teachers in four schools within the county were conducted. The results showed that several of the teachers equated the guidance and counselling with the guidance counselor. Most of the teachers were not aware that they had a responsibility to the school's guidance and counselling, based on current policy documents. It could be said that the teachers felt that the purpose of guidance and counselling was to prepare students for future academic and career choices, although there were differences in how this was expressed and what the work could entail. Lack of time was reported to be an obstacle, and most found it hard to implement guidance and counselling to their subjects. The teachers were mainly influenced by their own experience of guidance and counselling, rather than their perceptions of the area could be attributed to the policy documents, information from the principal or education. The results were analyzed based on the theory of street-level bureaucracy in relation to the concepts of understanding, able and willing. It was found that there was a tremendous variation between teachers in terms of both ideas about the meaning and practical work. The results of the study in conjunction with a twenty year old PhD thesis may indicate that very little may have evolved in terms of teachers' attitude towards guidance and counselling as a whole school approach or responsibility.

Protein complexes are critical to virtually every biological process performed by living organisms. The cellular “interactome”, or set of physical protein-protein interactions, is of particular interest, but no comprehensive study of human multi-protein complexes has yet been reported. In this Thesis, I describe the development of a novel high-throughput profiling method, which I term Fractionomic Profiling-Mass Spectrometry (or FP-MS), in which biochemical fractionation using non-denaturing high performance liquid chromatography (HPLC), as an alternative to affinity purification (e.g. TAP tagging) or immuno-precipitation, is coupled with tandem mass spectrometry-based protein identification for the global detection of stably-associated protein complexes in mammalian cells or tissues. Using a cell culture model system, I document proof-of-principle experiments confirming the suitability of this method for monitoring large numbers of soluble, stable protein complexes from either crude protein extracts or enriched sub-cellular compartments. Next, I document how, using orthogonal functional genomics information generated in collaboration with computational biology groups as filters, we applied FP-MS co-fractionation profiling to construct a high-quality map of 622 predicted unique soluble human protein complexes that could be biochemically enriched from HeLa and HEK293 nuclear and cytoplasmic extracts. Our network is enriched in assemblies consisting of human disease-linked proteins and contains hundreds of putative new components and novel complexes, many of which are broadly evolutionarily conserved. This study revealed unexpected biological associations, such as the GNL3, FTSJ3, and MKI67IP factors involved in 60S ribosome assembly. It is my expectation that this first systematic, experimentally-derived atlas of putative human protein complexes will constitute a starting point for more in depth, hypothesis-driven functional investigations of basic human molecular and cellular biology. I also note that my generic FP-MS screening approach can, and is currently, being applied by other members of the Emili laboratory to examine the global interactomes of other mammalian cell lines, tissues, sub-cellular compartments, and diverse model organisms, which should expand our understanding of proteome adaptations and association networks associated with cell physiology, animal development and molecular evolution.

University, Diss.--Köln, 2006. / Zsfassung in dt. Sprache.

Att studie- och yrkesvägledningen har tydliga riktlinjer att följa syns i olika styrdokument och lagar men allt som oftast är inte detta en verklighet som skolorna följer. Syftet med detta arbete är att undersöka likheter och skillnader mellan rektorers och studie- och yrkesvägledares syn på bland annat organisationen i skolan, hur rektorer ser på hela skolans ansvar samt om där finns skillnader i synen på studie- och yrkesvägledningen när rektorer respektive vägledare berättar om den. Studien genomfördes med stöd av kvalitativa intervjuer med verksamma rektorer och studie- och yrkesvägledare i två norrlandskommuner. Resultatet som framkom stämde ganska bra med de rapporter och den tidigare forskning vi bearbetat. Utredningar, forskning och rapporter visar att organisationen av studie- och yrkesvägledningen är något som har en tendens att vara otydlig och ansvaret ligger ofta på den enskilda studie- och yrkesvägledaren. Rektorernasom är de som har ansvaret är pålästa om ’hela skolans ansvar’ när det gäller studie- och yrkesvägledning och anser att det är en viktig del i dagens skola men därefter släpper de tyglarna och låter studie- och yrkesvägledaren ta det största ansvaret när det egentligen ska vara tvärtom. Styrningen uppifrån är ofta oklar trots att rektorer har kunskapen om vad som står i läroplaner och i de allmänna råden om studie- och yrkesvägledning. Samarbetet med lärarna är begränsat vilket kan bero på att lärarna inte heller alltid vet vilken studie- och yrkesvägledarnas roll är. Samtidigt upplevs yrket väldigt fritt av den verksamma studie- och yrkesvägledaren och det är inte alltid svårt att få gehör för önskemål även om studie- och yrkesvägledare ofta önskar ett utökat samarbete med lärare.

Syftet med studien är att undersöka studie- och yrkesvägledares upplevelser av arbetet med studie- och yrkesvägledning som hela skolans ansvar inom grundskolan. Forskningen identifierar vilka förutsättningar som behövs för att gemensamt bedriva den breda vägledningen men visar även på goda exempel där studie- och yrkesvägledare samverkar med andra professioner inom skolan. Forskningen visar även vilka förmågor eleverna utvecklar från den breda vägledningen samt brister i utvärdering av lärandet. Teoretiska utgångspunkter för att analysera empirin är System Theory Framework (STF) och DOTS modellen. STF modellen används för att analysera influenser inom och utanför skolan som påverkar den breda vägledningen. DOTS modellen analyserar vad eleverna lär sig från den breda vägledningen. Studien utgår från kvalitativ metod där studie- och yrkesvägledare har intervjuats genom semistrukturerade intervjuer. Resultatet visar att den breda vägledningen påverkas av influenser både inom och utanför skolan. Studie- och yrkesvägledare agerar som stöd till lärare genom att bistå med studie- och yrkesvägledningsmaterial, information och uppmuntran i arbetet med att integrera vägledningen inom undervisningen. Lärares kompetenser och relation till eleverna dras till nytta i samplaneringen av den breda vägledningen. Studie- och yrkesvägledarens egna ansvar att involvera övrig personal i den breda vägledningen för att vägledningen ska ses som hela skolans ansvar, framgår i resultatet. Elevers valkompetens utvecklas när vägledningen integreras inom undervisningen men det finns brister i utvärderandet av detta.

THAP5 is a protein which was recently isolated in the Zervos Lab as an interactor of a pro-apoptotic protein, Omi/HtrA2. THAP5 is unique because it shares no homology with mouse or rat and can only be found in humans. The only homology it shares with any other protein is its THAP domain. THAP proteins are zinc-dependent sequence specific DNA-binding factors belonging to the zinc-finger family of proteins (2). There are 12 identified members of TIIAP proteins in humans, THAP0-THAP 11. The roles of these THAP proteins include proliferation, apoptosis, cell cycle, chromosome segregation, chromosome modification, and transcriptional regulation (2). The function of THAP5 is still unclear and thus, a Yeast Two-Hybrid experiment will be done to further determine its function. The Yeast Two-Hybrid System is a common molecular biology technique used to identify interactors of a certain protein of interest. By identifying the protein interactors of THAP5 and their functions, it is possible to further determine the function of THAP5.

Hedgehog (Hh) proteins control animal development and tissue homeostasis. They activate gene expression by regulating processing, stability, and activation of Gli/Cubitus interruptus (Ci) transcription factors. Hh proteins are secreted and spread through tissue, despite becoming covalently linked to sterol during processing. Multiple mechanisms have been proposed to release Hh proteins in distinct forms; in Drosophila, lipoproteins facilitate long-range Hh mobilization but also contain lipids that repress the pathway. Here, we show that mammalian lipoproteins have conserved roles in Sonic Hedgehog (Shh) release and pathway repression. We demonstrate that lipoprotein-associated forms of Hh and Shh specifically block lipoprotein-mediated pathway inhibition. We also identify a second conserved release form that is not sterol-modified and can be released independently of lipoproteins (Hh-N*/Shh-N*). Lipoprotein-associated Hh/Shh and Hh-N*/Shh-N* have complementary and synergistic functions. In Drosophila wing imaginal discs, lipoprotein-associated Hh increases the amount of full-length Ci, but is insufficient for target gene activation. However, small amounts of non-sterol-modified Hh synergize with lipoprotein-associated Hh to fully activate the pathway and allow target gene expression. The existence of Hh secretion forms with distinct signaling activities suggests a novel mechanism for generating a diversity of Hh responses.

Rho GTPases and their regulators such as guanosine exchange factors (GEFs) and GTPase activating proteins (GAPs) represent an important class of molecules controlling dendritic spine plasticity. Although they are typically described as cytoskeletal modulators, roles for the GTPases in endocytosis and cell polarity establishment have also been defined. The neuronal proteins a1- and a2-chimaerins belong to a group of Rac and Cdc42 GAPs that inactivate these GTPases; in addition to a GAP domain, the a-chimaerins share a phosphokinase C (PKC)-like C1 domain but have distinct N-terminal domains (NTDs). My project has explored the importance of specific domains of a1-chimaerin both in induction of a morphological cellular protrusion collapse phenotype ('circularisation') and in interactions with partner proteins that may help to explain the phenotype. The results described in my thesis show that a1-chimaerin possesses a previously undescribed C-terminal domain (CTD) that is indispensable for the ability of the protein to induce collapse of protrusions, and consequent circularisation, in various cell types; moreover, an intact CTD is also important for association of a1-chimaerin with its known effector EphA4, and potentially with other undefined membrane proteins, in a C1-domain- dependent manner. In addition, my results show that a1-chimaerin associates via its NTD with the Src kinase Fyn, and via its C1 domain with the NR2A subunit of the NMDA receptor. Further experiments explored a1-chimaerin effects on EphA4 and NMDA receptor cell surface expression, as well as binding to other putative partners - including the adaptor protein p35 and the polarity protein PAR6. Finally, I have shown that inhibition of a pathway involving the Rho-associated coiled-coil containing protein kinase (ROCK) reverts circularisation induced by a1- chimaerin, and that a blocking peptide based on the CTD may be employed to partially counteract the phenotype. These results uncover a novel domain in a1-chimaerin that may have a crucial importance for the induction of cellular process collapse by a1-chimaerin with a potential relevance to the EphA4-induced dendritic spine retraction, EphA4 receptor endocytosis, and cell surface expression of NR2A-containing NMDA receptors. This suggests a model of a multi-protein signalling complex involving a1-chimaerin that coordinates cellular process remodelling, and that is likely to be important both for adult neuronal circuit plasticity and for neurodegenerative diseases.

L'apoptosi pot ser induïda a través de nombrosos estímuls, entre els quals hi ha elsreceptors de mort. Per induir apoptosi TNFα necessita la participació d'inhibidors de latranscripció d'ARN o de la síntesi proteica, com són ActD i CHX. En aquest estudidemostrem com la citotoxicitat de TNFα en cèl·lules PC12 i en neurones corticalssensibilitzades amb ActD es dóna a través de l'activació de la caspasa iniciadora 8, dela generació de tBid i de la conseqüent activació de les pro-caspases-9 i -3. A més, eltractament amb TNFα/ActD no indueix diferències detectables en l'expressió deproteïnes involucrades en el complex de senyalització de TNFα. L'anàlisi de lesprincipals proteïnes antiapoptòtiques, com són FLIP, IAPs i els membres de la famíliade Bcl-2, demostra que Bcl-xL endogen és capaç de regular l'apoptosi induïda perTNFα, sense afectar l'activació de la via del factor de transcripció NF-κB. Lasobreexpressió de Bcl-xL dóna resistència a la mort promoguda per TNFα i ActD, i lareducció dels seus nivells indueix mort cel·lular per mitjà de TNFα, a través del'activació de JNK. Per confirmar la rellevància de Bcl-xL en el senyal promogut perTNFα, es va avaluar l'efecte de la reducció dels nivells basals de proteïnesantiapoptòtiques com Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w i Mcl-1, en el model cel·lular HeLa, onaquestes s'hi troben expressades de forma fisiològica, contràriament al que passa enles cèl·lules PC12, demostrant que Bcl-xL és la proteïna antiapoptòtica més rellevanten la protecció de la mort induïda per TNFα.Per altra banda, l'apoptosi induïda per TNFα pot ser deguda a l'acumulació d'elevatsnivells de hemo lliure. El grup hemo sensibilitza les cèl·lules Hepa a l'acció citotòxicade TNFα a través de la inducció d'estrès oxidatiu, que provoca un dany cel·lular queporta a l'activació de la via de JNK y de pro-caspasa-3. La producció de ROS i el danyinduït per estrès oxidatiu, així com la mort induïda per TNFα, conjuntament ambelevats nivells del grup hemo lliure, poden inhibir-se amb l'expressió de proteïnesprotectores com HO-1 y H-Ferritina. / La apoptosis puede ser inducida a través de numerosos estímulos, entre los cuales losreceptores de muerte. Para promover la apoptosis, TNFα necesita la colaboración deinhibidores de la trascripción del RNA o de la síntesis proteica, como ActD y CHX. Eneste estudio demostramos como la citotoxicidad de TNFα en células PC12 y enneuronas corticales sensibilizadas con ActD ocurre a través de la activación de lacaspasa iniciadora 8, la generación de tBid y la activación de las pro-caspasas-9 y -3.Además no se detectan diferencias de expresión, inducidas por TNFα/ActD, deproteínas involucradas en la formación del complejo de señalización de TNFα. Elanálisis de las principales proteínas antiapoptóticas, como FLIP, IAPs y miembros dela familia de Bcl-2, demuestra que Bcl-xL es la molécula endógena capaz de regular laapoptosis promovida por TNFα, sin afectar la activación de la vía del factor detrascripción NF-κB. La sobre-expresión de Bcl-xL confiere resistencia a la muerteapoptótica mediada por TNFα y ActD, y su disminución forzada es capaz de inducirmuerte celular únicamente tratando con TNFα por activación de JNK. Para confirmar larelevancia de Bcl-xL en la señal promovida por TNFα, la represión de proteínas antiapoptóticascomo Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w y Mcl-1 ha sido evaluada en el modelo de célulasHeLa, donde estas se expresan fisiológicamente al contrario que en las células PC12,demostrando que Bcl-xL es la proteína anti-apoptótica más importante en la protecciónde la muerte inducida por TNFα.Por otra parte, la apoptosis mediada por TNFα puede ser promovida por laacumulación de elevados niveles del grupo hemo libre. El grupo hemo sensibiliza lascélulas Hepa a la acción citotóxica de la citoquina TNFα a través de la inducción deestrés oxidativo, cuyo daño resulta en la activación de la vía de JNK y de pro-caspasa-3. La producción de ROS y el daño inducido por estrés oxidativo, así como la muerteinducida por elevados niveles del grupo hemo libre y de TNFα, pueden inhibirse por lasobre-expresión de proteínas protectoras como HO-1 y H-Ferritina. / Apoptotic cell death is triggered by several different stimuli, among which deathreceptors. To induce apoptosis, TNFα needs the cooperation of RNA transcription orprotein synthesis inhibitor, i.e. ActD and CHX. In this study we demonstrate that ActDrenders rat PC12 cells and primary mouse cortical neurons susceptible to the cytotoxiceffect of TNFα by the activation of the initiator caspase 8, generation of tBid andactivation of pro-caspase-9 and -3. Proteins involved in TNFα receptor signalingcomplex are not affected by TNFα/ActD stimulation. However, the analysis of antiapoptoticproteins, e.g. FLIP, IAPs and Bcl-2 family members, demonstrates that Bcl-xLis the endogenous regulator of neuronal sensitivity to TNFα-induced apoptosis and thatit operates in a NF-κB-independent manner. Bcl-xL overexpression completely protectsagainst TNFα/ActD-induced apoptosis, whereas its endogenous decrease sensitizes toTNFα cytotoxic effect promoting JNK-dependent cell death. To point out the relevanceof Bcl-xL in TNFα signaling pathway, endogenous decrease of the main anti-apoptoticBcl-2 family members, e.g. Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w and Mcl-1, was performed in HeLa cellline in which, contrarily to PC12, these proteins are expressed. The results obtaineddemonstrate that Bcl-xL is the most important Bcl-2-cytoprotective protein in regulatingTNFα cytotoxicity.Moreover, TNFα-induced cell death is promoted by high levels of free hemeaccumulation. Heme sensitizes Hepa cell line to TNFα-triggered apoptosis enhancingROS production and ROS-mediated damage. This results in JNK and pro-caspase-3activation. Oxidative stress-promoted apoptosis induced by heme/TNFα treatment isinhibited by the overexpression of HO-1 and H-Ferritin cytoprotective proteins.

Denna studie syftar till att beskriva och analysera hur några specialpedagoger och lärare med inriktning mot fritidshem samarbetar i strävan att skapa goda förutsättningar för elever i behov av särskilt stöd, både vad gäller den sociala och emotionella utvecklingen samt möjligheten till att uppnå kunskapsmålen. Studien genomfördes via semistrukturerade kvalitativa intervjuer med fem specialpedagoger på fem olika skolor där fritidshem fanns. Studien utgår i från de tre perspektiven; sociokulturellt, relationellt samt multimodalt.   Slutsatsen av den här studien är att specialpedagoger och lärare med inriktning fritidshem samarbetar för att skapa ett lärande hela dagen, med olika strategier för att kunna stötta elever i behov av särskilt stöd. För att skapa ett lärande hela dagen för dessa elever, framkom det att skolledningens inställning samt handledning var områden som hade stor påverkan.   Vad gäller skolledningens inställning var synen på fritidspedagogik samt hur resursfördelningen skedde viktiga faktorer. Det var viktigt att planering skedde tillsammas där gemensamma mål och strategier utformades för att kunna stötta elever i behov av särskilt stöd, utifrån skolledningens uppsatta mål.   Handledning hade en stor påverkan när det handlade om att kunna stötta elever i att uppnå kunskapsmålen. Detta skedde genom insatser som; observationer av elev och skolmiljö samt observationer av social interaktion. Därtill lades tid på regelbunden kompetensutveckling i syfte att bland annat utveckla arbetssätt som skapar en brygga mellan det teoretiska och konkreta, som exempelvis att leka och lära via olika sinnen.