RESUMO Introdução: Atualmente a obesidade tem atingido proporções epidêmicas, evidências científicas mostram uma forte associação entre a obesidade e o maior risco para o desenvolvimento de diversas doenças tais como: doenças cardíacas, diabetes tipo II (mellitus), hipertensão e resistência à insulina. Bebidas à base de erva-mate (Ilex paraguariensis) têm importantes atividades biológicas, principalmente pelo alto teor de compostos polifenólicos existentes, que são reconhecidos por sua atividade antioxidante. Além dos compostos polifenólicos como flavonóides (quercetina e rutina) e ácidos fenólicos (ácido clorogênico e ácido cefeico), a erva-mate também é rica em cafeína e saponinas. Estudos recentes, com modelos animais e humanos demonstram inúmeros benefícios após o consumo de erva-mate, dentre estes, destaca-se sua atividade antioxidante, proteção ao DNA contra o dano induzido, atividade quimioprotetora celular, efeito na redução do LDL-colesterol, efeitos na motilidade intestinal, efeito vasodilatador, inibição da glicação e efeito termogênico. Objetivo: Avaliar os efeitos anti-obesidade do consumo de chá-mate em camundongos submetidos a uma dieta hiperlipídica. Métodos: Foram utilizados camundongos Swiss (n=62), eutróficos, machos, divididos aleatoriamente em diferentes grupos de acordo com a dieta utilizada (padrão ou hiperlipídica) e a intervenção escolhida (água ou chá-mate), por dezesseis semanas. Após a intervenção, as análises bioquímicas foram determinadas empregando-se o sistema Cobas-Mira e o quadro glicêmico foi determinado utilizando-se um glicosímetro seguido do ITT (teste de tolerância à insulina), a ação quimioprotetora ao DNA foi realizado pelo ensaio cometa; a expressão gênica das enzimas antioxidantes foi avaliada por PCR em tempo real. Para a significância dos dados foi utilizado análise de variância (ANOVA), seguido por Bonferronis post hoc teste para comparações múltiplas. Resultados: A intervenção com chá-mate nos camundongos submetidos à dieta hiperlipídica foi capaz de melhorar os seguintes parâmetros avaliados: peso corpóreo, glicemia, resposta à insulina, colesterol, triacilglicerol e LDL-colesterol. O nível de danos ao DNA foi significativamente reduzido nos camundongos obesos tratados com chá-mate em todas as doses avaliadas, porém o consumo de chá-mate não modificou a expressão das enzimas antioxidantes avaliadas (SOD, GPx e Cat) independentemente da dose utilizada. Conclusão: O presente estudo demonstra que o consumo do chá-mate pode influenciar de maneira positiva alguns biomarcadores relacionados com a obesidade induzida por dieta hiperlipídica em camundongos. / Introduction: Obesity has reached epidemic proportions, and there is a lot of evidence supporting the association of obesity with health conditions such as cardiovascular disease, diabetes, hypertension, and insulin resistance. Yerba Maté (Ilex paraguariensis) beverages have been reported to present biological activities attributed, mainly, to the it high polyphenol content, long known as antioxidants. In addition to the polyphenols such as flavonoids (quercetin and rutin) and phenolic acids (chlorogenic and caffeic acids), yerba maté is also rich in caffeine and saponins. Recently published evidences with animals and humans, has shown some beneficial effects related to the consumption of yerba maté, which include antioxidant activity, protecting effect on DNA against induced damage, chemopreventive activities, choleretic and intestinal effects, vasodilatation effects, inhibition of glycation and atherosclerosis and thermogenic effects. Objective: We evaluated the anti-obesity effects of yerba maté in a high-fat diet in mice. Methods: Sixty-two Swiss mice, were randomly assigned in different groups according to the diet and the intervention (mate-tea or water), for sixteen weeks. After intervention, the biochemical analysis was performed with Cobas-Mira system, the insulin test tolerance was determined by means of KITT, antioxidant activity were tested using Comet Assay and gene expression of antioxidant enzymes were evaluated by PCR real time . Statistical analysis was done using one-way ANOVA followed by unpaired Bonferroni. Results: Mate-tea intervention decreased in obese animals the following biochemical parameters: weight, glucose blood level, response to insulin, cholesterol, triglycerides and LDL-cholesterol. The DNA damage levels were significantly lower in obese animals treated with mate tea in all doses, but mate tea didnt affect the gene expression of antioxidant enzymes (SOD, GPx e Cat). Conclusion: In conclusion, this study reports that mate-tea may beneficial influence some biochemical markers related to high-fat diet induced obesity in mice.

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:24:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ionete Lucia Milani Barzotto.pdf: 417240 bytes, checksum: e5dbf1481e59ec3d55e125fe1dd6cedf (MD5) Previous issue date: 2010-07-02 / The Paraguay tea (Ilex paraguariensis) is a plant of economic importance to Brazil, mainly to the southern states, where most production and consumption. The leaves are industrialized aiming at preparing tea, mate, soluble powder, and the obtaining of active pharmaceuticals and cosmetics. The Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) is considered a pest of Paraguay tea, since it causes hypertrophy of new leaves, giving rise to a symptom known as "Paraguay tea bulb , a structure that houses the nymphs, which feed this site until close to adulthood. The damaged leaves usually fall and reduce crop yield. As the Paraguay tea is consumed practically 'in natura', the use of chemicals is not recommended. The use of insecticidal plants is an alternative for pest control of this culture as it does not pose risks to the environment or to humans. The objective of this study was to test the efficiency of extracts of Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp, Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides and Annona squamosa for the control of G. spegazziniana in laboratory conditions. In order to do an initial screening were tested ethanol extracts of 25% aqueous to 20%, and a commercial product based on neem seed (Organic Neem ®), 10%, and selected the ones that caused at least 50 % mortality. The control does not receive any treatment. The extracts were sprayed prior and subsequent to infestation of insects on test plants or twigs of Paraguay tea. In the first stage, the only effective treatment in prior spray was 20% aqueous extract of Chrysanthemum spp (85%). The alcoholic extracts of 25%, using the same method showed better results: A. squamosa (93.6%), T. pallida (90.4%), C. citratus (58.2%), Eucalyptus spp (51.6%) and M. azedarach (64.5%). In the method of spraying later, Eucalyptus spp, and M. azedarach aqueous, with 77.7% and 70.5% respectively, showed potential for insect control. L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85.5%), C. citratus (55.5%), A. squamosa (51.6%), C. ambrosioides (55.5%) alcoholics were more effective. After dilution to 10%, only the extract of C. citratus alcoholic and the commercial product, with the method of spraying later showed potential insecticidal, with a mortality rate above 50%. / A erva-mate (Ilex paraguariensis) é uma planta de importância econômica para o Brasil, principalmente para os estados da região Sul, onde se concentram a produção e consumo. As folhas são industrializadas visando ao preparo de chás, chimarrão, pó solúvel, bem como à obtenção de princípios ativos farmacêuticos e cosméticos. A Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) é considerada uma das principais pragas da erva-mate, pois causa hipertrofia de folhas novas, dando origem ao sintoma conhecido com ampola-da-erva-mate , estrutura que abriga as ninfas, que se alimentam neste local, até próximo da fase adulta. As folhas danificadas geralmente caem e reduzem o rendimento da cultura. Sendo a erva-mate consumida praticamente in natura, o uso de agroquímicos não é recomendado. O emprego de plantas inseticidas é alternativa para o controle das pragas desta cultura, já que não oferecem riscos ao ambiente nem ao ser humano. Assim, o objetivo do presente trabalho foi testar a eficiência de extratos de Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp., Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides e Annona squamosa no controle de G. spegazziniana, em condições de laboratório. Para fazer uma seleção inicial, foram testados extratos etanólicos a 25%, aquosos a 20%, e um produto comercial à base de sementes de neem (Organic neem®), a 10% e foram selecionados os que causaram, no mínimo, 50% de mortalidade. O controle não recebeu tratamento algum. Os extratos foram pulverizados prévia e posteriormente à infestação dos insetos-teste nas mudas ou galhos de erva-mate. Na primeira etapa, o único tratamento eficiente, na pulverização prévia foi o extrato aquoso a 20% de Chrysanthemum spp. (85%). Os extratos alcoólicos a 25%, com a utilização do mesmo método demonstraram melhores resultados: A. squamosa (93,6%), T. pallida (90,4%), C. citratus (58,2%), Eucalyptus spp (51,6%) e M. azedarach (64,5%). No método de pulverização posterior, o Eucalyptus spp, e a M. azedarach aquosos, com 77,7% e 70,5% respectivamente, demonstraram potencial para controle do inseto. A L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85,5%), C. citratus (55,5%), A. squamosa (51,6%), C. ambrosioides (55,5%) alcoólicos foram os mais eficazes. Após a diluição a 10%, apenas o extrato de C. citratus alcoólico e o produto comercial, com o método de pulverização posterior, demonstraram potencial inseticida, com mortalidade acima de 50%.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:48:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ionete Lucia Milani Barzotto.pdf: 417240 bytes, checksum: e5dbf1481e59ec3d55e125fe1dd6cedf (MD5) Previous issue date: 2010-07-02 / The Paraguay tea (Ilex paraguariensis) is a plant of economic importance to Brazil, mainly to the southern states, where most production and consumption. The leaves are industrialized aiming at preparing tea, mate, soluble powder, and the obtaining of active pharmaceuticals and cosmetics. The Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) is considered a pest of Paraguay tea, since it causes hypertrophy of new leaves, giving rise to a symptom known as "Paraguay tea bulb , a structure that houses the nymphs, which feed this site until close to adulthood. The damaged leaves usually fall and reduce crop yield. As the Paraguay tea is consumed practically 'in natura', the use of chemicals is not recommended. The use of insecticidal plants is an alternative for pest control of this culture as it does not pose risks to the environment or to humans. The objective of this study was to test the efficiency of extracts of Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp, Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides and Annona squamosa for the control of G. spegazziniana in laboratory conditions. In order to do an initial screening were tested ethanol extracts of 25% aqueous to 20%, and a commercial product based on neem seed (Organic Neem ®), 10%, and selected the ones that caused at least 50 % mortality. The control does not receive any treatment. The extracts were sprayed prior and subsequent to infestation of insects on test plants or twigs of Paraguay tea. In the first stage, the only effective treatment in prior spray was 20% aqueous extract of Chrysanthemum spp (85%). The alcoholic extracts of 25%, using the same method showed better results: A. squamosa (93.6%), T. pallida (90.4%), C. citratus (58.2%), Eucalyptus spp (51.6%) and M. azedarach (64.5%). In the method of spraying later, Eucalyptus spp, and M. azedarach aqueous, with 77.7% and 70.5% respectively, showed potential for insect control. L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85.5%), C. citratus (55.5%), A. squamosa (51.6%), C. ambrosioides (55.5%) alcoholics were more effective. After dilution to 10%, only the extract of C. citratus alcoholic and the commercial product, with the method of spraying later showed potential insecticidal, with a mortality rate above 50%. / A erva-mate (Ilex paraguariensis) é uma planta de importância econômica para o Brasil, principalmente para os estados da região Sul, onde se concentram a produção e consumo. As folhas são industrializadas visando ao preparo de chás, chimarrão, pó solúvel, bem como à obtenção de princípios ativos farmacêuticos e cosméticos. A Gyropsylla spegazziniana (Hemíptera: Psyllidae) é considerada uma das principais pragas da erva-mate, pois causa hipertrofia de folhas novas, dando origem ao sintoma conhecido com ampola-da-erva-mate , estrutura que abriga as ninfas, que se alimentam neste local, até próximo da fase adulta. As folhas danificadas geralmente caem e reduzem o rendimento da cultura. Sendo a erva-mate consumida praticamente in natura, o uso de agroquímicos não é recomendado. O emprego de plantas inseticidas é alternativa para o controle das pragas desta cultura, já que não oferecem riscos ao ambiente nem ao ser humano. Assim, o objetivo do presente trabalho foi testar a eficiência de extratos de Eucalyptus spp., Azadirachta indica, Melia azedarach, Cymbopogon citratus, Chrysanthemum spp., Trichilia pallida, Leucaena leucocephala, Chenopodium ambrosioides e Annona squamosa no controle de G. spegazziniana, em condições de laboratório. Para fazer uma seleção inicial, foram testados extratos etanólicos a 25%, aquosos a 20%, e um produto comercial à base de sementes de neem (Organic neem®), a 10% e foram selecionados os que causaram, no mínimo, 50% de mortalidade. O controle não recebeu tratamento algum. Os extratos foram pulverizados prévia e posteriormente à infestação dos insetos-teste nas mudas ou galhos de erva-mate. Na primeira etapa, o único tratamento eficiente, na pulverização prévia foi o extrato aquoso a 20% de Chrysanthemum spp. (85%). Os extratos alcoólicos a 25%, com a utilização do mesmo método demonstraram melhores resultados: A. squamosa (93,6%), T. pallida (90,4%), C. citratus (58,2%), Eucalyptus spp (51,6%) e M. azedarach (64,5%). No método de pulverização posterior, o Eucalyptus spp, e a M. azedarach aquosos, com 77,7% e 70,5% respectivamente, demonstraram potencial para controle do inseto. A L. leucocephala (100%), Chrysanthemum spp 85,5%), C. citratus (55,5%), A. squamosa (51,6%), C. ambrosioides (55,5%) alcoólicos foram os mais eficazes. Após a diluição a 10%, apenas o extrato de C. citratus alcoólico e o produto comercial, com o método de pulverização posterior, demonstraram potencial inseticida, com mortalidade acima de 50%.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:38:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marina.pdf: 1184727 bytes, checksum: 464327ef9797c59ec694ee14413ca72c (MD5) Previous issue date: 2012-09-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to select and characterize strains of entomopathogenic fungi in order to control Gyropsylla spegazziniana. For this, the fifth instar nymphs were transferred to Paraguay tea seedlings, followed by spraying conidial suspensions of 48 strains of Beauveria spp., Metarhizium anisopliae, Isaria spp. and Lecanicillium spp. at a concentration of 1 × 109 conidia/mL. The seedlings were placed in PVC cages kept in a climatized room (26 ± 1°C; 12 h photophase and 60 ± 10% R.H.), and the insect mortality was evaluated daily for 10 days. The most active isolates were compared by means of vegetative growth, conidial production in culture media, insecticidal activity and molecular analyses, by sequencing the region rDNA-ITS and RAPD. The genus 22 Beauveria spp. was more efficient among the entomopathogenic fungi, especially for strain Unioeste 44 that showed the best performance, demonstrating its potential to control the pest. Molecular analysis of rDNA-ITS region allowed the identification of isolates as B. bassiana e B. brongniartii and RAPD markes were associated with virulence / O objetivo desse trabalho foi selecionar e caracterizar isolados de fungos entomopatogênicos, visando o controle dessa praga. Para tal, ninfas de 5o ínstar foram transferidas para mudas de erva-mate, seguido da pulverização de suspensões de conídios (1 × 109 conídios/mL) de 48 isolados de Beauveria spp., Metarhizium anisopliae, Isaria spp. e Lecanicillium spp. As mudas foram acondicionadas em gaiolas de PVC, e mantidas em sala climatizada (26 ± 1°C; 12 h de fotofase e U.R. 60 ± 10%). 21 A mortalidade dos insetos foi avaliada diariamente, por 10 dias e os isolados mais ativos foram comparados entre si por meio do crescimento vegetativo, produção de conídios em meios de cultura, atividade inseticida e análises moleculares, por meio do seqüenciamento da região rDNA-ITS e marcadores RAPD. O gênero Beauveria spp. foi mais eficiente dentre os fungos entomopatogênicos, em especial o isolado Unioeste 44 que apresentou o melhor desempenho, evidenciando seu potencial para o controle da praga. As análises moleculares da região rDNA-ITS possibilitou a identificação dos isolados como B. bassiana e B. brongniartii e os marcadores RAPD foram associados à virulência

The mate-tea tree it is a forest species that occurs naturally in the tempering regions and subtropical of America of the South. In Brazil it occurs mainly in the states of the Rio Grande do Sul, Paraná and Santa Catarina. Its leaves and branches are used, mainly, as raw material in the preparation of teas. During many years, the exploration of mate-tea if restricted the natives plants, but recently it passed also to be cultivated in monoculture, system that favors the development of pragues. The tan-mite, Dichopelmus notus (Keifer, 1959) (Acari, Eriophydae), specific plague of this culture, that before met in low population levels, currently due to the high infestations, cause the premature leaf fall and death of the tips, with elevated damages to the producers. This mite comes being considered as one of the main pragues of the culture of mate-tea in the Argentine and Brazil. In result of the importance of mate-tea and of the increase of the infestation of this mite, it is necessary to search alternatives and technologies that maximize the profitability of the culture. This work aimed to select a sampling methodology to monitor the levels of infestation of the tan-mite in matetea orchards, destined to explain its habits. The study were carried out in orchard of ten years, in the arrangement of 2,5 X 4,0 m with height of 1,5 m, located in the Chapecó county, Santa Catarina state, Brazil. In three areas of approximately 2,500 m2, distant between itself about 100 m, had been selected 30 plants randomly. Fortnightly, in the period of 27/01/2004 the 10/01/2005, were evaluated infestation of D. notus in 18 mature leaves of ten plants in each area, being six in the upper one-third, six in the medium one-third and six in lower one-third, three in each localization of the crown, external and internal. The evaluations were executed directly in the orchard, using lenses with increase of ten times and 1 cm2 of fixed field. The results had evidenced that: the infestation of the mite occurs of aggregate form; the estimate of the average number of mites for cm2 of leaf, with level of 15% precision, can be carried through in three leaves of 30 plants in sections of hectare, from february to april; the mites concentrate themselves in the external part of the plant in the upper one-third part of canopy as well as at part medium one-third; positive correlation was observed among the population of D. notus and minimum and maximum temperatures, however negative correlations was observed among tan-mite e population and rain precipitation, relative humidity and speed of the wind; the Model of Normal Approach with Correction of Continuity must preferential be used in the elaboration of binomial sequential sampling plans for D. notus. / A erva-mate é uma espécie florestal que ocorre naturalmente nas regiões temperadas e subtropicais da América do Sul. No Brasil ocorre principalmente nos estados do Rio Grande do Sul, Paraná e Santa Catarina. Suas folhas e outras partes do ramo são utilizadas, principalmente, como matéria-prima no preparo de chás. Durante muitos anos, a exploração da erva-mate se restringiu a ervais nativos, mas recentemente passou a ser cultivada também em monocultura, sistema que favorece o desenvolvimento de pragas. O ácaro-do-bronzeado, Dichopelmus notus (Keifer, 1959) (Acari, Eriophydae), praga específica dessa cultura, que antes encontrava-se em baixos níveis populacionais, atualmente devido às altas infestações, provoca a queda prematura de folhas e morte dos ponteiros, com elevados prejuízos aos produtores. Esse ácaro vem sendo considerado como uma das principais pragas da cultura da erva-mate tanto na Argentina como no Brasil. Em decorrência da importância da erva-mate e do aumento da infestação desse acarino, é necessário buscar alternativas e tecnologias que maximizem a rentabilidade da cultura. Este trabalho teve como objetivo selecionar uma metodologia de amostragem para monitorar os níveis de infestação do ácaro-do-bronzeado em lavouras de erva-mate, destinada a esclarecer aspectos de sua bioecologia. O estudo foi conduzido em erval de dez anos, no espaçamento de 2,5 X 4,0 m com altura de 1,5 m, localizado no município de Chapecó, SC. Em três áreas de aproximadamente 2.500 m2 , distantes entre si cerca de 100 m, foram selecionadas 30 plantas ao acaso. Quinzenalmente, no período de 27/01/2004 a 10/01/2005, avaliou-se a infestação de D. notus em 18 folhas maduras de dez plantas em cada área, sendo seis no terço superior, seis no terço médio e seis no terço inferior, em cada terço, três na parte externa da copa e três na interna. As avaliações foram executadas diretamente nos ervais, utilizando lentes com aumento de dez vezes e 1 cm2 de campo fixo. Os resultados evidenciaram que: a infestação do ácaro ocorre de forma agregada; a estimativa do número médio de ácaros por cm2 de folha, com nível de precisão de 15%, pode ser realizada em três folhas de 30 plantas em talhões de um hectare, nos meses de fevereiro a abril; os ácaros concentram-se na parte externa da copa da planta nos terços superior e médio; há correlação positiva entre a população de D. notus e temperaturas mínimas e máximas e correlações negativas com a precipitação pluviométrica, umidade relativa e velocidade do vento; o Modelo de Aproximação Normal com Correção de Continuidade deve ser preferencialmente utilizado na elaboração de planos de amostragem seqüencial binomial para D. notus.

Ilex paraguariensis A. St.-Hil., conhecida como erva-mate, é uma árvore nativa da América do Sul onde as folhas e pequenos ramos secos são usados para preparar o chimarrão. Possui uma composição química complexa, da qual pode-se vislumbrar muitas aplicações potenciais, que poderiam vir a ampliar o emprego da erva-mate e, conseqüentemente, do mercado para esta matériaprima. As folhas de I. paraguariensis contem xantinas, flavonóides, derivados do ácido cafeoilquínico e uma quantidade significativa de saponinas triterpenóides (cerca de 10%). Neste estudo foram investigados quimicamente extratos hidroetanólicos de I. paraguariensis, de suas frações, e de algumas substâncias de referência, como também os efeitos desses na atividade antioxidante, no acúmulo de gordura (TG) e na atividade lipolítica em cultura de células 3T3-L1. Neste sentido obtivemos extratos brutos hidroetanólicos de folhas verdes (EBV) e secas (EBS) maceradas, os quais foram fracionados originando 8 frações. Ácido ursólico, ácido clorogênico e rutina foram quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Também foi realizada a determinação de fenóis por catequinas e pela precipitação por proteínas. A fração fenólicos da folha verde apresentou atividade antioxidante superior às substâncias de referência rutina e ácido clorogênico, enquanto que o ácido ascórbico apresentou a melhor atividade. O ensaio com brometo de 3- (4,5-dimetil)difenil tetrazólio (MTT) demonstrou que os extratos e padrões testados entre 50 μg/mL e 1000 μg/mL não foram citotóxicos para as células 3T3-L1. Dentre as frações testadas para a atividade na adipogênese, a fração resíduo aquoso da folha verde (RAV) apresentou maior inibição (24%) no teor de TG na concentração de 100 μg/mL. Dentre as substâncias de referência testadas, os melhores resultados foram obtidos com o ácido caféico nas concentrações de 300 μg/mL e da rutina na concentração de 100 μg/mL. Em relação à ativividade na lipólise, a fração RAV apresentou o melhor resultado nas concentrações de 50 e 75 μg/mL. Entre as substâncias de referência, o ácido gálico apresentou resultado significativo em relação à atividade antilipolítica nas concentrações de 500 e 1000 μg/mL. Para elucidar em qual estágio da adipogênese e da lipólise os extratos, frações e padrões atuam, são necessários a investigação da avaliação da ação desses extratos e frações através de análise de expressão de genes ligados a adipogênese e a atividade lipolítica. / Ilex paraguariensis A. St.-Hil., known as maté, is a native tree from South América which leaves and twigs are used to prepare the traditional beverage “chimarrão”. It has a complex chemical composition that might have many potential applications in order to increase the use of maté and then, in consequence, increase the market demand of this raw material. Leaves from I. paraguariensis have xanthines, flavonoids, cafeoylquinic acid derivatives and triterpenoid saponins (ca. 10%). Herein, it was investigated, both chemically and biologically, the hydroethanolic extracts of leaves from I. paraguariensis, its fractions, and some reference substances, as the antioxidant activity, the adipogenesis (TG) and lipolytic activities in 3T3-L1 cell culture. So, it was prepared hydroethanolic extracts of fresh (EBV) and dried leaves (EBS) by maceration, which submitted to further fractionation furnished 8 fractions. Ursolic acid, chlorogenic acid and rutin were determined in these samples by liquid chromatography (HPLC) Also, phenolic constituents were determined using catequines and protein precipitation methods. The phenolic fraction from fresh leaves presented better antioxidant activity than the tested reference substances (rutin and chlorogenic acid), while ascorbic acid presented the best activity. The MTT assay showed that the tested extracts and fractions among 50 μg/mL and 1000 μg/mL did not present citotoxicity to 3T3-L1 cells. Among the tested fractions to adipogenesis, the aqueous residue fraction from fresh leaves (RAV) presented best inibition (24%) of TG at 100 μg/mL. Among tested reference substances, cafeic acid at 300 μg/mL, and rutin at 100 μg/mL presented the best results. In relation to the lipolytic activity, the RAV fraction presented best results at 50 e 75 μg/mL and, among the tested reference substances, galic acid presented best results at 500 e 1000 μg/mL. In order to understand the mechanim of action of these fractions and reference substances at the adipogenesis and lipolysis further studies will be performed specially those about the influence on the gene expression.

Ilex paraguariensis A. St.-Hil., conhecida como erva-mate, é uma árvore nativa da América do Sul onde as folhas e pequenos ramos secos são usados para preparar o chimarrão. Possui uma composição química complexa, da qual pode-se vislumbrar muitas aplicações potenciais, que poderiam vir a ampliar o emprego da erva-mate e, conseqüentemente, do mercado para esta matériaprima. As folhas de I. paraguariensis contem xantinas, flavonóides, derivados do ácido cafeoilquínico e uma quantidade significativa de saponinas triterpenóides (cerca de 10%). Neste estudo foram investigados quimicamente extratos hidroetanólicos de I. paraguariensis, de suas frações, e de algumas substâncias de referência, como também os efeitos desses na atividade antioxidante, no acúmulo de gordura (TG) e na atividade lipolítica em cultura de células 3T3-L1. Neste sentido obtivemos extratos brutos hidroetanólicos de folhas verdes (EBV) e secas (EBS) maceradas, os quais foram fracionados originando 8 frações. Ácido ursólico, ácido clorogênico e rutina foram quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Também foi realizada a determinação de fenóis por catequinas e pela precipitação por proteínas. A fração fenólicos da folha verde apresentou atividade antioxidante superior às substâncias de referência rutina e ácido clorogênico, enquanto que o ácido ascórbico apresentou a melhor atividade. O ensaio com brometo de 3- (4,5-dimetil)difenil tetrazólio (MTT) demonstrou que os extratos e padrões testados entre 50 μg/mL e 1000 μg/mL não foram citotóxicos para as células 3T3-L1. Dentre as frações testadas para a atividade na adipogênese, a fração resíduo aquoso da folha verde (RAV) apresentou maior inibição (24%) no teor de TG na concentração de 100 μg/mL. Dentre as substâncias de referência testadas, os melhores resultados foram obtidos com o ácido caféico nas concentrações de 300 μg/mL e da rutina na concentração de 100 μg/mL. Em relação à ativividade na lipólise, a fração RAV apresentou o melhor resultado nas concentrações de 50 e 75 μg/mL. Entre as substâncias de referência, o ácido gálico apresentou resultado significativo em relação à atividade antilipolítica nas concentrações de 500 e 1000 μg/mL. Para elucidar em qual estágio da adipogênese e da lipólise os extratos, frações e padrões atuam, são necessários a investigação da avaliação da ação desses extratos e frações através de análise de expressão de genes ligados a adipogênese e a atividade lipolítica. / Ilex paraguariensis A. St.-Hil., known as maté, is a native tree from South América which leaves and twigs are used to prepare the traditional beverage “chimarrão”. It has a complex chemical composition that might have many potential applications in order to increase the use of maté and then, in consequence, increase the market demand of this raw material. Leaves from I. paraguariensis have xanthines, flavonoids, cafeoylquinic acid derivatives and triterpenoid saponins (ca. 10%). Herein, it was investigated, both chemically and biologically, the hydroethanolic extracts of leaves from I. paraguariensis, its fractions, and some reference substances, as the antioxidant activity, the adipogenesis (TG) and lipolytic activities in 3T3-L1 cell culture. So, it was prepared hydroethanolic extracts of fresh (EBV) and dried leaves (EBS) by maceration, which submitted to further fractionation furnished 8 fractions. Ursolic acid, chlorogenic acid and rutin were determined in these samples by liquid chromatography (HPLC) Also, phenolic constituents were determined using catequines and protein precipitation methods. The phenolic fraction from fresh leaves presented better antioxidant activity than the tested reference substances (rutin and chlorogenic acid), while ascorbic acid presented the best activity. The MTT assay showed that the tested extracts and fractions among 50 μg/mL and 1000 μg/mL did not present citotoxicity to 3T3-L1 cells. Among the tested fractions to adipogenesis, the aqueous residue fraction from fresh leaves (RAV) presented best inibition (24%) of TG at 100 μg/mL. Among tested reference substances, cafeic acid at 300 μg/mL, and rutin at 100 μg/mL presented the best results. In relation to the lipolytic activity, the RAV fraction presented best results at 50 e 75 μg/mL and, among the tested reference substances, galic acid presented best results at 500 e 1000 μg/mL. In order to understand the mechanim of action of these fractions and reference substances at the adipogenesis and lipolysis further studies will be performed specially those about the influence on the gene expression.

Submitted by LILIAN XAVIER DA SILVA null (lilianx1104@hotmail.com) on 2017-09-17T19:38:44Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado Lilian Xavier da Silva.pdf: 2218738 bytes, checksum: f6d8686f0ced0c0a303a834195a00061 (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-09-19T18:37:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_lx_me_araca.pdf: 2218738 bytes, checksum: f6d8686f0ced0c0a303a834195a00061 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-19T18:37:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_lx_me_araca.pdf: 2218738 bytes, checksum: f6d8686f0ced0c0a303a834195a00061 (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / A doxorrubicina (DXO) é eficaz contra diferentes formas de câncer, em adultos e crianças, porém seu uso pode causar cardiotoxicidade aguda e crônica, associada ao aumento do estresse oxidativo. Alguns antioxidantes naturais demonstraram ser eficazes em minimizar esses efeitos da DXO, no entanto, o chá mate (CM), não foi avaliado neste contexto. Nossa hipótese é que o pré-tratamento com CM por 30 dias, reduz o dano oxidativo agudo no coração e assim preserva a função cardíaca. Para testar essa hipótese, foram investigados os efeitos do pré-tratamento diário de ratos Wistar machos com 40 mg/kg m.c. de CM, contra a cardiotoxicidade aguda induzida por DXO. Para a escolha da dose de CM ratos Wistar foram divididos em grupo tratados com doses diferentes de chá (10, 20 e 40 mg/m.c., gavagem) e DXO (grupos CM + DXO). Os grupos controle (C), tratados com DXO (DXO) receberam água (1,0 mL, gavagem). Os grupos receberam CM solúvel diluído em água (8 mg/mL). No 29° do tratamento com CM, administrou-se uma dose de DXO (15 mg/kg m.c. - IP) aos grupos DXO e CM + DXO. No 31° dia, após administração de tiopental (50 mg/kg m.c.) associado à lidocaína (4,0 mg/kg m.c.), foram submetidos ao eletrocardiograma (ECG) antes da punção cardíaca (Autorização CEUA FOA: 416/2015). Creatina quinase total (CK) e a fração MB (CK-MB), foram estimadas no plasma. No homogenato de coração (KCl 1,15% m/v) foram quantificadas as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa (GSH), atividade de superóxido dismutase total (SOD) e da isoforma SOD1, e expressões de SOD1, Akt total e p-Akt, por western blotting. O pré-tratamento com 40 mg/kg m.c. de CM preveniu o aumento da frequência cardíaca, o prolongamento do intervalo QTc e PR, o aumento de CK e CK-MB e de TBARS. Também preveniu a redução de GSH, SOD e SOD1. Além disso, o aumento da relação p-Akt/Akt. Concluímos que o pré-tratamento com 40 mg/kg m.c. CM previne o dano oxidativo cardíaco agudo induzido pelo DXO, preservando a função cardíaca. / Doxorubicin (DXO) is effective against different forms of cancer in adults and children, but its use may cause acute and chronic cardiotoxicity associated with increased oxidative stress. Some natural antioxidants have been shown to be effective in minimizing the effects of DXO; however, mate tea (CM), has not been evaluated in this context. Our hypothesis is that CM pretreatment for 30 days, reduces acute oxidative damage in the heart. To test this hypothesis, the effects of daily pretreatment of male Wistar rats at 40 mg / kg m.c. of CM, against acute cardiotoxicity induced by DXO were investigated. For the choice of CM dose, Wistar rats were divided into groups treated with different doses of tea (10, 20 and 40 mg / mc, gavage) (CM + DXO groups). Groups control (C), treated with DXO (DXO) received water (1.0 mL, gavage). The CM + DXO groups received soluble CM diluted in water (8 mg / mL) during the same period. At 29 ° of CM treatment, DXO and CM + DXO groups were given a dose of DXO (15 mg / m.c.-IP). On the 31st day, after administration of lidocaine (4.0 mg / kg mc) thiopental (50 mg / kg mc), all rats were submitted to electrocardiogram (ECG) prior to cardiac puncture (CEUA FOA Authorization: 416 / 2015). Total creatine kinase (CK) and MB fraction (CK-MB) were estimated in plasma. The thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), glutathione (GSH), total superoxide dismutase (SOD) activity and the cytoplasmic isoform SOD1, in addition to SOD1 expression, were quantified in the heart homogenate (KCl 1.15% m / v) , Total Akt and p-Akt, by western blotting. Pretreatment with 40 mg / kg m.c. of CM prevented a increased heart rate, prolongation of the QTc and PR interval, increase in plasma CK and CK-MB, and TBARS in the tissue. It also prevented the reduction of GSH, SOD and SOD1. In addition, the increase in the p-Akt / Akt ratio observed after DXO was not observed in rats pretreated at 40 mg / kg m.c. of CM. We conclude that pretreatment with 40 mg / kg m.c. CM prevents acute cardiac oxidative damage induced by DXO, preserving cardiac function.

Ilex paraguariensis A. St.-Hil., conhecida como erva-mate, é uma árvore nativa da América do Sul onde as folhas e pequenos ramos secos são usados para preparar o chimarrão. Possui uma composição química complexa, da qual pode-se vislumbrar muitas aplicações potenciais, que poderiam vir a ampliar o emprego da erva-mate e, conseqüentemente, do mercado para esta matériaprima. As folhas de I. paraguariensis contem xantinas, flavonóides, derivados do ácido cafeoilquínico e uma quantidade significativa de saponinas triterpenóides (cerca de 10%). Neste estudo foram investigados quimicamente extratos hidroetanólicos de I. paraguariensis, de suas frações, e de algumas substâncias de referência, como também os efeitos desses na atividade antioxidante, no acúmulo de gordura (TG) e na atividade lipolítica em cultura de células 3T3-L1. Neste sentido obtivemos extratos brutos hidroetanólicos de folhas verdes (EBV) e secas (EBS) maceradas, os quais foram fracionados originando 8 frações. Ácido ursólico, ácido clorogênico e rutina foram quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Também foi realizada a determinação de fenóis por catequinas e pela precipitação por proteínas. A fração fenólicos da folha verde apresentou atividade antioxidante superior às substâncias de referência rutina e ácido clorogênico, enquanto que o ácido ascórbico apresentou a melhor atividade. O ensaio com brometo de 3- (4,5-dimetil)difenil tetrazólio (MTT) demonstrou que os extratos e padrões testados entre 50 μg/mL e 1000 μg/mL não foram citotóxicos para as células 3T3-L1. Dentre as frações testadas para a atividade na adipogênese, a fração resíduo aquoso da folha verde (RAV) apresentou maior inibição (24%) no teor de TG na concentração de 100 μg/mL. Dentre as substâncias de referência testadas, os melhores resultados foram obtidos com o ácido caféico nas concentrações de 300 μg/mL e da rutina na concentração de 100 μg/mL. Em relação à ativividade na lipólise, a fração RAV apresentou o melhor resultado nas concentrações de 50 e 75 μg/mL. Entre as substâncias de referência, o ácido gálico apresentou resultado significativo em relação à atividade antilipolítica nas concentrações de 500 e 1000 μg/mL. Para elucidar em qual estágio da adipogênese e da lipólise os extratos, frações e padrões atuam, são necessários a investigação da avaliação da ação desses extratos e frações através de análise de expressão de genes ligados a adipogênese e a atividade lipolítica. / Ilex paraguariensis A. St.-Hil., known as maté, is a native tree from South América which leaves and twigs are used to prepare the traditional beverage “chimarrão”. It has a complex chemical composition that might have many potential applications in order to increase the use of maté and then, in consequence, increase the market demand of this raw material. Leaves from I. paraguariensis have xanthines, flavonoids, cafeoylquinic acid derivatives and triterpenoid saponins (ca. 10%). Herein, it was investigated, both chemically and biologically, the hydroethanolic extracts of leaves from I. paraguariensis, its fractions, and some reference substances, as the antioxidant activity, the adipogenesis (TG) and lipolytic activities in 3T3-L1 cell culture. So, it was prepared hydroethanolic extracts of fresh (EBV) and dried leaves (EBS) by maceration, which submitted to further fractionation furnished 8 fractions. Ursolic acid, chlorogenic acid and rutin were determined in these samples by liquid chromatography (HPLC) Also, phenolic constituents were determined using catequines and protein precipitation methods. The phenolic fraction from fresh leaves presented better antioxidant activity than the tested reference substances (rutin and chlorogenic acid), while ascorbic acid presented the best activity. The MTT assay showed that the tested extracts and fractions among 50 μg/mL and 1000 μg/mL did not present citotoxicity to 3T3-L1 cells. Among the tested fractions to adipogenesis, the aqueous residue fraction from fresh leaves (RAV) presented best inibition (24%) of TG at 100 μg/mL. Among tested reference substances, cafeic acid at 300 μg/mL, and rutin at 100 μg/mL presented the best results. In relation to the lipolytic activity, the RAV fraction presented best results at 50 e 75 μg/mL and, among the tested reference substances, galic acid presented best results at 500 e 1000 μg/mL. In order to understand the mechanim of action of these fractions and reference substances at the adipogenesis and lipolysis further studies will be performed specially those about the influence on the gene expression.

INTRODUÇÃO: A erva-mate (Ilex paraguarienis), uma planta nativa e consumida em grande parte da América do Sul, apresenta diversos compostos bioativos que já demonstraram importante atividade antioxidante in vitro e in vivo. O chá mate é um produto desta planta cujas propriedades antioxidantes ainda não foram avaliadas em ensaios com humanos. OBJETIVO: Este projeto visa avaliar o potencial antioxidante do chá mate in vivo e ex vivo sobre o plasma e LDL de humanos após a ingestão de chá-mate. MÉTODOS: Indivíduos em jejum (n=20) tiveram seu sangue coletado em três momentos: antes, após uma hora e depois de 1 semana (7 dias) da ingestão diária de chá-mate. O plasma e a LDL obtidos nos três momentos foram submetidos à oxidação por três mecanismos diferentes [Cobre (Cu+2), lipoxigenase e peroxinitrito (SIN-1)] e em seguida foram medidos os produtos de peroxidação lipídica formados: a concentração de TBARs (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) e a formação de dienos conjugados empregando-se métodos espectrofotométricos. Também foram determinados o perfil antioxidante total do plasma (TAS), avaliação da lipoperoxidação plasmática basal (TBARs), avaliação da fragmentação da Apolipoproteína B após oxidação da LDL, por eletroforese em gel com SDS-PAGE e os níveis de expressão, por meio de análise de PCR real time, de alguns genes relacionados à produção de enzimas antioxidantes. Teste t de Student pareado foi utilizado para verificar se houve diferença estatisticamente significante entre os resultados das diversas análises antes e após o consumo do chá. RESULTADOS: Os resultados obtidos pela maioria dos ensaios realizados demonstraram que o consumo de chá mate aumentou a resistência à oxidação, a capacidade antioxidante plasmática e a expressão de genes relacionados à produção de enzimas antioxidantes. CONCLUSÃO: Esses resultados sugerem que o consumo de chá mate por período curto pode atuar como antioxidante por múltiplos mecanismos e portanto pode contribuir para diminuição do risco de desenvolvimento de doenças crônicas relacionadas a processos oxidativo. / Yerba Mate (Ilex paraguariensis) is a native and widely consumed South American plant. It contains high concentrations of bioactive compounds that respond for its high antioxidant activity in vitro and in vivo. This activity has not been demonstrated yet in humans for the mate tea, a product derived from Yerba Mate. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the antioxidant activity of maté tea in vivo and ex vivo on plasma and LDL human after ingestion of mate tea infusion. METHODS: Fasting peripheral venous blood samples of twenty healthy women (n=20) were taken in three different times: before drinking the tea, one hour later and after one week of daily consumption (7 days) of mate tea. The plasma and isolated LDL were oxidated with 3 different systems [copper (CuSO4), lipoxygenase and peroxynitrite (SIN-1)]. Next, the peroxidation products evaluated were: concentration of malonaldeyde (TBA) and conjugated dienes (lag time), using spectrophotometric methods. We also measured the plasma total antioxidant status (TAS), serum levels of malondialdehyde (MDA) as thiobarbituric substances (TBARS), fragmentation of apo B using SDS-PAGE and the level of antioxidant enzyme gene expression by PCR real time. Paired t student test was used to analyze the results before and after ingestion of mate tea. RESULTS: The results obtained by most of the tests showed that mate tea ingestion increased the plasma and LDL resistance by ex vivo oxidation, the plasma antioxidant capacity and the level of antioxidant enzyme gene expression. CONCLUSION: This study suggests that regular consumption of mate tea can act as an antioxidant by multiple mechanisms and thus may contribute decrease the risk of developing chronic diseases related to oxidative processes.