Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine. Endocrinologie, Diabétologie et maladies métaboliques : Nantes : 2009. / Bibliogr.

Les lymphomes hodgkiniens(LH) représentent 30% des lymphomes. 90 % des patients en sont gueris mais parfois au prix d'importants effets secondaires(cancers secondaires notamment). L'enjeu actuel consiste à identifier les patients susceptibles de bénéficier d'une déescalade thérapeutique(même résultat thérapeutique obtenu au prix d'un traitement moins lourd)Actuellemnt les facteurs pronostiques utilisé en routine(stade Ann Arbor et index pronostic internationnal) ne permettent qu'une stratification imparfaite des patients notamment pour les stades localisés. Dans le but d'identifier de nouveaux facteurs pronostiques des LH nous avons mené une étude d'expression génétique sur puces Affimetrix. Nous identifions une signature moléculaire reliée à un bon pronostic et enrichie en gènes lymphocytaires B comprenant BCL11A, un facteur de transcription exprimé par les lymphocytes B et les cellules dendritiques plasmocytoïdes. Nous validons ce résultats en immunohistochimie sur TMA et retrouvons un meilleur pronostic associé aux tumeurs dont le microenvironnement est riche en cellules BCL11A+ et CD20+. Nous mettons également en évidence dans les cas EBV+ une signature d'expression génique enrichie en gènes caractéristiques d'une réponse immunitaire Th1 et anti-virale. Ces résultats peuvent fournir un rationnel scientifique à de nouvelle stratégies thérapeutiques. Il sera intéressant d'évaluer le bénéfice d'une déescalade thérapeutique chez les patients dont la tumeur présente un microenvironnement riche en lympocytesB. / The outcome of classical Hodgkin lymphoma(cHL)patients may be related to the tumor microenvironment, which in turn may be influenced by Epstein-Barr virus(EBV)infection. To characterize the cHL microenvironment, a set of 63 cHL tissue samples was profiled using DNA microarrays. Their gene expression profile differed from that of histiocyte T-cell-richB-cell lymphoma(H/TCRBCL)samples that were used as controls, mainly du to high expression of PDCD1/PD-1 in H/TCRBCL. EBV-cHLtissues could be distinguished from EBV+samples by a gene signature characteristic ofTh1 and antiviral responses. Samples from cHL patients with favourable outcome overexpressed genes specific for B cells and genes involved in apoptotic pathways. An independent set of 146 cHL samples was analyzed using immunohistochemistry. It showed a significiant adverse value in case of high percentage of either TIA-1+-reactive cells or topoisomerase-2+tumor cells, whereas high numbers of BCL11A+, FOXP3+, or CD20+ reactive cells had a favorable influence. Our results suggest an antitumoral role for B cells in the cHL microenvironment and a stronger stromal influence of the strategies.120

L'incidence des Lymphomes non-Hodgkiniens a connu un essor fulgurant ces dernières années en dépit d'indiscutables progrès thérapeutiques. Cette progression reste encore inexpliquée et l'identification de facteurs de risque et mécanismes sous-jacents constituent un enjeu majeur de santé publique. Ma thèse s'inscrit dans cette démarche et a visé à mieux comprendre 1) l'étiologie et 2) le développement de ces hémopathies. Les translocations chromosomiques impliquant des loci immuns sont à la fois initiatrices et signatures des hémopathies et peuvent résulter d'un défaut de la recombinaison VDJ à l'exemple de la t(14;18) et t(11;14) dans les lymphomes folliculaire (LF) ou du manteau et t(10;14) dans les leucémies T. Cependant les facteurs à l'origine des cassures oncogéniques restent méconnus et leur exploration a constitué le 1er objectif de ma thèse. Le 2nd axe de ma thèse a porté sur l'étiologie du processus de transformation d'une cellule prétumorale avec comme modèle le LF. La t(14 ;18) est nécessaire mais insuffisante à la pathogenèse du FL et la preuve en est que des cellules t(14;18)+ sont décrites à taux variables (~10-6) dans le sang d'individus sains(IS). Ces cellules "LF-Like" portent un ensemble d'anomalies génomiques typiques du LF pouvant bien représenter des précurseurs du LF à différents stades d'évolution. Leur persistance et évolution clonale chez l'IS suggèrent l'existence de niches prétumorales, possiblement dans les organes lymphoïdes (rate/ganglions/moelle osseuse). Je me suis donc intéressée à l'identification de ces niches prétumorales et à la capacité des "LF-like" à disséminer et acquérir des hits secondaires clé de leur évolution vers le LF / Non Hodgkin Lymphomas have shown an increasing incidence in western countries over the last decades. As etiologic factors still remain elusive, it is clearly of critical importance to better define risk factors and early steps of lymphomagenesis and progression. Chromosomal translocations juxtaposing oncogenes to immune locus thereby deregulating oncogenic expression are hallmarks of lymphoid neoplasms; examples are t(14;18) and t(11;14) in Follicular (FL) and Mantle Cell lymphomas and t(10;14) in T Leukemias. Though it is assumed that the break at the immune locus is due to physiological VDJ recombination, the origin of the break at the oncogene remains unknown. In line with this, my 1st aim was to identify factors involved in the initiation of breaks at the oncogenic locus. My 2nd aim concerned the mechanisms governing evolution of a pre-malignant cell clone into the multiple steps of lymphomagenesis with FL, a B-cell neoplasm as model. T(14;18) translocation is a critical early event in the natural history of FL. However it is now clear that t(14;18) alone is not sufficient and that acquisition of synergistic oncogenic hits are required for malignant transformation. Indeed, it has been reported that t(14;18) cells are present at variable rates in blood of healthy individuals (HI) with yet uncertain significance. We recently demonstrated that in HI t(14;18) cells constitute an expanding population of atypical B-cells displaying geno/phenotypic features of FL suggesting that those cells could be bona-fide FL precursors prone to constitute potent premalignant niches. In the 2nd part of my PhD, I questioned the ability of these so-called "FL-Like" cells to seed pretumoral niches in lymphoid organs (spleen/lymph nodes/bone marrow) and to disseminate and acquire secondary transforming hits as their FL counterparts.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine. Dermato-vénéréologie : Nantes : 2008. / Bibliogr.

Thèse de doctorat : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie : Paris Est : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse d'exercice : Médecine. Médecine nucléaire : Université de Nantes : 2005. / Bibliogr. f. 127-135 [103 réf.].

Thèse de doctorat : Immunologie : Paris 12 : 2005. / Version électronique uniquement consultable au sein de l'Université Paris 12 (Intranet). Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. : 150 réf.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine. Médecine générale : Nantes : 2008. / Bibliogr.

Le lymphome des cellules du manteau (LCM) est un lymphome d’une rare agressivité causée par la translocation chromosomique t(11; 14)(q13; q32) juxtaposant le locus de la cycline D1 (CCND1) sur le chr 11 avec le locus de la chaîne lourde de l'immunoglobuline (IgH) sur le chr 14. En conséquence, une cycline D1 proto-oncogène devient active alors qu’elle n’est pas exprimée dans les cellules-B normales. L’hypothèse initiale semble indiquer une influence directe du fort enhancer IgH sur le promoteur du gène CCND1 afin de surexprimer sa transcription. Quoi qu’il en soit, le locus CCND1 peut être éloigné jusqu'à 200kb du point de cassure du chromosome. Nous avons montré que le locus 11q13 relocalise depuis la périphérie du noyau jusque au centre actif de transcription et au nucléole (Allinne et al., 2014). Ce phénomène qui mène à l’activation du locus entier, suggère un mécanisme epigénétique de régulation des gènes dans les LCM plutôt que simplement un simple effet enhancer-promoteur. Plusieurs nouveaux traitements contre le MCL ont été proposés, y compris les inhibiteurs d’histone deacetylase (HDACis) qui impliquent des mécanismes épigénétiques. Dans les lignées cellulaires LMC, les HDACis sont décrites comme aillant des effets antiprolifératifs, et paradoxalement, le niveau d’expression protéique de la cycline D1 dans la cellule diminue. Jusqu'à présent, il n'y a pas une compréhension claire de ce phénomène, de même que les mécanismes d’action des HDACis reste inconnus. Pour ces raisons, une étude du « paysage épigénétique » sur les loci 11q13 et 14q32 devrait fortement améliorer notre connaissance sur les mécanismes de surexpression de la cycline D1 dans les LMC. L’objectif de ce travail est d'étudier la structure de la chromatine dans le locus réarrangé (11; 14)(q13; q32) dans des cellules LMC par rapport au locus 11q13 et 14q32 dans les lymphocytes humains normaux. Nous avons ensuite étudié l'effet de différentes HDACis sur le locus réarrangé (11; 14)(q13; q32) à plusieurs niveaux: l'acétylation des histones / la méthylation de la chromatine ainsi que sa conformation et l'expression des gènes. Nous avons montré que t(11:14)(q13; q32) conduit à la surexpression de CCND1 avec un groupe de gènes couvrant plus de 15 Mb autour du point de translocation. Les mêmes gènes, sensibles à la dérégulation par la translocation t(11; 14, réagissent au traitement HDACi en augmentant leur expression. Nos résultats indiquent que bien que HDACi stimule la désagrégation de l'hétérochromatine sur l'ensemble du génome, les promoteurs de gènes restent à l'abri de ces effets. / Mantle cell lymphoma (MCL) is a rare aggressive lymphoma caused by the chromosome translocation t(11;14)(q13;q32) juxtaposing the cyclin D1 (CCND1) locus on chr 11 with the immunoglobulin heavy chain (IgH) locus on chr 14. As a result, a proto-oncogene cyclin D1 which is not expressed in normal B-cells, becomes active. The initial hypothesis favored direct influence of the strong IgH enhancer on CCND1 gene promoter to upregulate its transcription. However, the CCND1 locus may be as far as 200 kb from the chromosome breakpoint. We have shown that 11q13 locus relocalizes from the nucleus periphery towards the transcriptionally active center and nucleolus (Allinne et al., 2014). This may lead to activation of the entire locus, suggesting an epigenetic mechanism of gene regulation in MCL, rather than just simple enhancer-promoter effect.Several new treatments are proposed for MCL, including histone deacetylase inhibitors (HDACis) with epigenetic mechanism of action. In MCL cell lines, HDACis were shown to have antiproliferative effects, and paradoxically, they decreased the cyclin D1 protein level in the cells. Until now, there is no clear understanding of this phenomenon, nor of HDACis mechanism of action. Therefore, a study of «epigenetic landscape» in 11q13 and 14q32 loci should significantly advance our knowledge about the mechanisms of cyclin D1 upregulation in MCL.The purpose of the present work was to study chromatin structure in the rearranged (11;14)(q13;q32) locus in MCL cells as compared to the 11q13 and 14q32 loci in normal human lymphocytes. We then studied the effect of different HDACis on the rearranged (11;14)(q13;q32) locus at several levels: histone acetylation / methylation, chromatin conformation and gene expression.We have shown that t(11:14)(q13;q32) translocation leads to overexpression of CCND1 along with a group of genes spanning over 15 Mb around the translocation point. The same genes, sensitive to deregulation by t(11;14) translocation, react to the HDACi treatment by increasing their expression. Importantly, while HDACi stimulates genome-wide disaggregation of heterochromatin, genes’ promoters stay shielded from its effect.

Thèse d'exercice : Médecine. Médecine générale : Paris 12 : 2005. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. f. 43-47.