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Tendência temporal da incidência por leptospirose e a sua relação com os níveis pluviométricos na população do estado de Santa Catarina no período de 2005 a 2015

Ghizzo Filho, João January 2017 (has links)
Leptospirosis is a zoonosis of worldwide occurrence, with a large distribution and significant social, economic and health impact, high incidence and significant percentage of hospitalizations, and complementary, high lethality. Objective: To analyze the temporal trend of the incidence of leptospirosis according to the rainfall indices in the State of Santa Catarina, according to seasonality, from 2005 to 2015. Methods: Ecological study of time series, considering the prevalence of leptospirosis, rainfall indices and the demographic density, between 01/01/2005 and 12/31/2015. The information was obtained from the DATASUS, ANA/CIRAM and IBGE databases. Leptospirosis incidence rates, relative incidence excess, Pearson correlation coefficient, angular coefficient from the linear regression adjustment, and the significance level of 5%, were performed. The distribution of leptospirosis cases, rainfall indexes, rainfall cases / index ratios, stratified by month of occurrence was presented. Results: There were 5,274 cases of leptospirosis, with an annual average of 479 cases, ranging from 341 (2013) to 982 (2008). The monthly average in the period was 439 cases, ranging from 211 in August to 770 in January. The mean rate of leptospirosis in the period was 7.03 cases per 100 thousand habitants. The average rainfall index for the period was 158.68 mm, varying from 111.46 mm (2006) to 196.97 mm (2015). The lowest indexes were detected in August, with a mean of 124.9mm, the highest occurring in January, with a mean of 213,20mm. A positive correlation between leptospirosis rates and rainfall levels over the period from January to December (r = 0.68, p = 0.023) points to a positive temporal association between rainfall and disease cases. Conclusion: The disease occurred throughout the year and presented a clear seasonality. The highest pluviometric indexes occurred in the months of October to March. The analysis of the temporal trend of the incidence of leptospirosis in the State of Santa Catarina verified that the disease acquires an epidemic character, associated to the period of greatest rainfall. / Submitted by João Ghizzo Filho (joao.ghizzo@unisul.br) on 2017-11-07T19:17:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TRABALHO 2.pdf: 3428725 bytes, checksum: 920185acbf0783a30bcf0e9e077da798 (MD5) / Rejected by Caroline Correa da Cruz (caroline.cruz@unisul.br), reason: Está faltando a ficha catalográfica na versão final do trabalho, bem como a informação da linha de pesquisa na folha de rosto do trabalho (segunda página). Qualquer dúvida estamos à disposição. on 2017-11-08T10:05:51Z (GMT) / Submitted by João Ghizzo Filho (joao.ghizzo@unisul.br) on 2017-12-12T19:22:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TRABALHO_final_12_12_2017.pdf: 2474041 bytes, checksum: ed5a184214c1118b415c189ad0ae9bfd (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Correa da Cruz (caroline.cruz@unisul.br) on 2017-12-13T11:32:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TRABALHO_final_12_12_2017.pdf: 2474041 bytes, checksum: ed5a184214c1118b415c189ad0ae9bfd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T11:32:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TRABALHO_final_12_12_2017.pdf: 2474041 bytes, checksum: ed5a184214c1118b415c189ad0ae9bfd (MD5) Previous issue date: 2017 / A leptospirose é uma zoonose de ocorrência mundial, com ampla distribuição e significativo impacto social, econômico e sanitário, alta incidência, com percentual significativo de internações, e alta letalidade. Objetivo: Analisar a tendência temporal da incidência de leptospirose, de acordo com os índices pluviométricos no Estado de Santa Catarina, conforme a sazonalidade, no período de 2005 a 2015. Métodos: Estudo ecológico de séries temporais, com dados sobre leptospirose, índices pluviométricos e a população do Estado, entre 01/01/2005 e 31/12/2015. As informações foram obtidas dos bancos de dados do DATASUS, ANA/CIRAM e IBGE. Analisadas as taxas de incidência de leptospirose, o excesso relativo da incidência, o coeficiente de correlação de Pearson (r), o coeficiente angular (β), a partir do ajuste da regressão linear, e o nível de significância de 5% (p<0,05). Foi apresentada a distribuição dos casos de leptospirose, dos índices pluviométricos, da razão casos/índices pluviométricos, estratificados por mês de ocorrência. Resultados: Foram registrados 5.274 casos de leptospirose, com média anual de 479 casos, variando de 341(2013) a 982 (2008). A média mensal no período foi de 439 casos, com variação de 211, nos meses de agosto, a 770, nos meses de janeiro. A taxa média de leptospirose no período foi de 7,03 casos por 100 mil habitantes. O índice pluviométrico médio para o período foi de 158,68 mm, tendo variado de 111,46 mm (2006) a 196,97 mm (2015). Os índices mais baixos foram detectados nos meses de agosto, com média de 124,9 mm, os mais elevados ocorreram nos meses de janeiro, com média de 213,20 mm. Uma correlação positiva entre as taxas de leptospirose e os níveis pluviométricos, ao longo do período, janeiro a dezembro (r=0,68; p=0,023), aponta para uma associação temporal positiva entre quantidade de chuva e casos de doença. Conclusão: A doença ocorreu o ano todo e apresentou nítida sazonalidade. Os maiores índices pluviométricos ocorreram nos meses de outubro a março. A análise da tendência temporal da incidência de leptospirose no Estado de Santa Catarina verificou que a doença adquire um caráter epidêmico, no período de maior pluviosidade.
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Levantamento sorológico para leptospirose nos animais pertencentes ao Bosque Zoológico Municipal "Dr. Fábio de Sá Barreto" de Ribeirão Preto, estado de São Paulo /

Silva, Carolina dos Santos. January 2008 (has links)
Orientador: Raul José Silva Gírio / Banca: Samir Issa Samara / Banca: Luiz Francisco Zafalon / Resumo: A leptospirose acomete todos os animais domésticos, selvagens e o ser humano. Alguns levantamentos sorológicos realizados têm demonstrado o envolvimento de espécies selvagens na epidemiologia da doença. Uma vez que populações cativas de animais selvagens são pouco estudadas, principalmente no Brasil, o presente estudo teve como objetivos a realização de um levantamento sorológico para leptospirose no Bosque Zoológico Municipal Dr. Fábio de Sá Barreto localizado na cidade de Ribeirão Preto, SP, por meio da prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM) em amostras de soro sanguíneo de aves, peixes, répteis e mamíferos cativos, animais sinantrópicos e de vida livre e também de funcionários. Foi realizada uma distribuição dos animais reagentes dentro do zoológico a fim de se verificar os locais de risco de exposição às leptospiras. Durante o período de março a outubro de 2006 foram colhidas 388 amostras de sangue de 110 répteis, 143 aves, 110 mamíferos e 25 peixes. Dentre as 388 amostras analisadas, 339 foram de animais cativos e 49 foram de animais de vida livre selvagens, sinantrópicos e domésticos capturados pelo uso de armadilhas distribuídas dentro do zoológico. Foram colhidas amostras de soro de 15 funcionários do zoológico entre tratadores, técnicos, manutenção, estagiários e todas foram negativas na SAM. Do total de amostras de soro sanguíneo de animais examinadas, 112 (28,9%) foram reagentes para leptospirose, sendo 100 (29,4%) amostras de animais cativos e 12 (24,5%) de animais de vida livre. Os setores do zoológico onde foram encontrados mais animais reagentes cativos foram o Tanque das Tartarugas (60%), o Jardim Japonês (50%) e a Praça das Aves (36,6%). Os títulos sorológicos nas amostras reagentes variaram de 40 a 5.120 com predominância dos títulos 40 e 80 e os sorovares Patoc, Andamana, Canicola, Icterohaemorrhagiae e Panama foram os mais freqüentes. / Abstract: Not available. / Mestre
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Impactos da drenagem urbana na saúde pública em municípios de pequeno porte no Estado do Rio Grande do Norte, Nordeste do Brasil

FÁTIMA, Maria de 08 November 2013 (has links)
Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-10T14:58:09Z No. of bitstreams: 2 TESE Maria de Fátima.pdf: 7422342 bytes, checksum: 3722caf89f3f401ab007e550dc22db02 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-10T14:58:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Maria de Fátima.pdf: 7422342 bytes, checksum: 3722caf89f3f401ab007e550dc22db02 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-11-08 / A drenagem das águas pluviais urbanas, além das questões dos sistemas de micro e macrodrenagem, necessita de uma abordagem multidisciplinar, incluindo o saneamento ambiental e os diversos aspectos que envolvem a saúde pública. Essa pesquisa fundamenta-se na hipótese da correlação existente entre o manejo adequado das águas pluviais urbanas e as doenças de veiculação hídrica. Um dos grandes impactos negativos na deficiência de drenagem pluvial são as ocorrências epidemiológicas dos surtos de leptospirose, que se agravam após as inundações e são transmitidos aos seres humanos pelo contato com água ou lama contaminada pela urina de animais portadores, principalmente roedores domésticos. Foram avaliadas as correlações entre Drenagem Urbana e Saúde Pública analisando as precipitações extremas em 25 municípios do Rio Grande do Norte com até 50 mil habitantes, no período de 2000 a 2011. Na primeira etapa da pesquisa, realizou-se levantamento de dados relativo às doenças de veiculação hídrica dos municípios, histórico das precipitações e cobertura dos serviços de saneamento incluindo a drenagem; na segunda etapa, abordou-se a drenagem em cada município, por meio de entrevistas estruturadas direcionadas a técnicos, gestores e comunidade, pesquisa avaliativa de campo e documental e análise das ações desenvolvidas. Foram utilizados indicadores de saúde relacionados com as doenças de veiculação hídrica com destaque para a leptospirose por estar diretamente ligadas à drenagem das águas urbanas. Os dados foram tabulados e hierarquizados de acordo com o valor resultante da pesquisa do Sistema de Internações Hospitalares. No que se refere à relação entre as doenças e a pluviosidade dos municípios, utilizou-se software estatístico “R”, estatística descritiva, cujo resultado apresenta uma correlação linear positiva (Coeficiente de correlação linear de Pearson superior a 0,30) em 21 dos 25 municípios pesquisados. O resultado do teste de hipóteses conclui que há evidências estatísticas de que essa correlação é maior que zero, ao nível de 5% de significância. Alguns municípios apresentavam inicialmente elevado índice de agravos de saúde por leptospirose, mas ao melhorar o sistema de drenagem, conseguiram reduzir os índices de leptospirose. Entre os serviços de saneamento, o manejo de águas pluviais em áreas urbanas constitui-se de grande importância, devendo levar em consideração o crescimento das cidades e o planejamento urbano, como também as condições ambientais onde o município se encontra e a educação hidroambiental de sua população. Conclui-se que os impactos negativos decorrentes das deficiências de drenagem das águas pluviais estão diretamente relacionados com a questão da saúde pública e em especial com os riscos de transmissão de leptospirose.
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Estudo de potencias antígenos vacinais de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. / Study of potential vaccine candidates from Leptospira interrogans serovar Copenhageni.

Fraga, Tatiana Rodrigues 10 March 2009 (has links)
A utilização de vacinas destaca-se como medida preventiva contra a leptospirose. Sete potenciais antígenos vacinais de L. interrogans sorovar Copenhageni foram estudados: LipL32, LipL23 e LipL22 (lipoproteínas), SphH e Sph4 (hemolisinas), AnkB (domínio anquirina) e OmpA76 (domínio OmpA). Os genes foram amplificados, clonados e as proteínas expressas em E.coli e Salmonella enterica para ensaios de imunização e desafio. As sete proteínas foram purificadas. No primeiro desafio, hamsters foram imunizados com a salmonela recombinante para expressar a OmpA76 e desafiados com sorovar Pomona. Sobreviveu 30% do grupo salmonela recombinante, 100% da vacina comercial e 10% dos controles. No segundo desafio, hamsters foram imunizados com pool das sete proteínas e desafiados com sorovar Copenhageni. Sobreviveram 30% do grupo pool de proteínas, 90% da vacina comercial, 100% da bacterina e 0% do grupo PBS. A LipL32, OmpA76, LipL23 e LipL22 reagiram com soros de hamsters infectados. Extratos de leptospiras foram reconhecidos pelos soros específicos contra LipL32, OmpA76 e LipL23. / Preventive measures as vaccines are the best strategies to combat leptospirosis. Seven potential vaccine candidates from L. iInterrogans serovar Copenhageni were studied: LipL32, LipL23 and LipL22 (lipoproteins), SphH e Sph4 (hemolysins), AnkB (ankyrin domain) and OmpA76 (OmpA domain). The genes were amplified, cloned and the proteins expressed in E. Coli e Salmonella enteric for challenge assays. In the first assay, hamsters were immunized with the recombinant salmonella to express OmpA76 in vivo, and challenged with serovar Pomona. The survival was 30% of the recombinant salmonella group, 100% of the commercial vaccine and 10% of the control groups. In the second assay, hamsters were immunized with a pool of the purified proteins and challenged with serovar Copenhageni. The survival was 30% of the group pool of proteins, 90% of the commercial vaccine, 100% of the bacterin and 0% of the PBS group. LipL32, OmpA76, LipL23 and LipL22 reacted with hamsters infected sera. Leptospiral extracts were recognized by specific sera against LipL32, OmpA76 and LipL23.
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Clonagem, expressão e purificação de proteínas candidatas vacinais de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. Avaliação de atividades imunogênicas e características funcionais. / Cloning, expression and purification of proteins, vaccine candidates from Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. Evaluation of immunogenic and functional characteristics.

Lopes, Luana Melo 08 May 2009 (has links)
A leptospirose é uma zoonose mundial causada por bactéria do gênero Leptospira. O desenvolvimento de uma vacina de subunidade eficaz seria de grande interesse em saúde pública. Propusemos investigar 4 antigenos de Leptospira interrogans srv Copenhageni, genes LIC12659, LIC12660, LIC12631 e LIC10868, os quais foram amplificados e clonados nos vetores de expressão pAE e pAEsox. As proteínas VapB, VapC, VapBC e Sph2 foram expressas em E. coli e em salmonela SL3261 e purificadas por cromatografia de afinidade a metal. As atividades hemolítica de Sph2 e ribonucleásica de VapC não foram evidenciadas, possivelmente devido a diferenças estruturais entre as proteínas recombinantes e as nativas. Os clones de E. coli com os genes do módulo toxina-antitoxina vapBC sofreram os efeitos de inibição (vapC) e recuperação (vapBC) de crescimento, como descrito. As proteínas recombinantes, VapB purificada ou em salmonlea e Sph2, mostraram-se imunogênicas em camundongos e em hamsters. A imunização com Salmonela-VapB determinou a melhor proteção no teste de desafio. / Leptospirosis is a zoonosis worldwide distributed, caused by bacteria from the genus Leptospira. The development of an efficient vaccine of sub-unities would be of major interest for public health. We proposed to investigate 4 antigens from Leptospira interrogans srv Copenhageni, genes LIC12659, LIC12660, LIC12631 and LIC10868, which were amplified and cloned into expression vectors pAE and pAEsox. The proteins VapB, VapC, VapBC and Sph2 were expressed in E. coli and in salmonella SL3261, and purified by metal-affinity chromatography. The activities hemolytic of Sph2 and ribonuclease of VapC were not confirmed, possibly due to differences between native and recombinant proteins. The clones of E. coli with genes of the toxin-antitoxin module vapBC suffered inhibition (vapC) and recovery (vapBC) of growth rate as described. The recombinant proteins VapB purified or in salmonella and purified Sph2, showed to be immunogenic in mice and in hamsters. The immunization with Salmonella-VapB determined better protection on challenge assay.
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Etude clinique et microbiologique à propos de onze cas de leptospirose observés au C.H.U de Nancy entre 1996 et 2003

Obertin, Stéphanie Rabaud, Christian January 2006 (has links) (PDF)
Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine : Nancy 1 : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre.
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Clonagem, expressão e purificação de proteínas candidatas vacinais de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. Avaliação de atividades imunogênicas e características funcionais. / Cloning, expression and purification of proteins, vaccine candidates from Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. Evaluation of immunogenic and functional characteristics.

Luana Melo Lopes 08 May 2009 (has links)
A leptospirose é uma zoonose mundial causada por bactéria do gênero Leptospira. O desenvolvimento de uma vacina de subunidade eficaz seria de grande interesse em saúde pública. Propusemos investigar 4 antigenos de Leptospira interrogans srv Copenhageni, genes LIC12659, LIC12660, LIC12631 e LIC10868, os quais foram amplificados e clonados nos vetores de expressão pAE e pAEsox. As proteínas VapB, VapC, VapBC e Sph2 foram expressas em E. coli e em salmonela SL3261 e purificadas por cromatografia de afinidade a metal. As atividades hemolítica de Sph2 e ribonucleásica de VapC não foram evidenciadas, possivelmente devido a diferenças estruturais entre as proteínas recombinantes e as nativas. Os clones de E. coli com os genes do módulo toxina-antitoxina vapBC sofreram os efeitos de inibição (vapC) e recuperação (vapBC) de crescimento, como descrito. As proteínas recombinantes, VapB purificada ou em salmonlea e Sph2, mostraram-se imunogênicas em camundongos e em hamsters. A imunização com Salmonela-VapB determinou a melhor proteção no teste de desafio. / Leptospirosis is a zoonosis worldwide distributed, caused by bacteria from the genus Leptospira. The development of an efficient vaccine of sub-unities would be of major interest for public health. We proposed to investigate 4 antigens from Leptospira interrogans srv Copenhageni, genes LIC12659, LIC12660, LIC12631 and LIC10868, which were amplified and cloned into expression vectors pAE and pAEsox. The proteins VapB, VapC, VapBC and Sph2 were expressed in E. coli and in salmonella SL3261, and purified by metal-affinity chromatography. The activities hemolytic of Sph2 and ribonuclease of VapC were not confirmed, possibly due to differences between native and recombinant proteins. The clones of E. coli with genes of the toxin-antitoxin module vapBC suffered inhibition (vapC) and recovery (vapBC) of growth rate as described. The recombinant proteins VapB purified or in salmonella and purified Sph2, showed to be immunogenic in mice and in hamsters. The immunization with Salmonella-VapB determined better protection on challenge assay.
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Estudo de potencias antígenos vacinais de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. / Study of potential vaccine candidates from Leptospira interrogans serovar Copenhageni.

Tatiana Rodrigues Fraga 10 March 2009 (has links)
A utilização de vacinas destaca-se como medida preventiva contra a leptospirose. Sete potenciais antígenos vacinais de L. interrogans sorovar Copenhageni foram estudados: LipL32, LipL23 e LipL22 (lipoproteínas), SphH e Sph4 (hemolisinas), AnkB (domínio anquirina) e OmpA76 (domínio OmpA). Os genes foram amplificados, clonados e as proteínas expressas em E.coli e Salmonella enterica para ensaios de imunização e desafio. As sete proteínas foram purificadas. No primeiro desafio, hamsters foram imunizados com a salmonela recombinante para expressar a OmpA76 e desafiados com sorovar Pomona. Sobreviveu 30% do grupo salmonela recombinante, 100% da vacina comercial e 10% dos controles. No segundo desafio, hamsters foram imunizados com pool das sete proteínas e desafiados com sorovar Copenhageni. Sobreviveram 30% do grupo pool de proteínas, 90% da vacina comercial, 100% da bacterina e 0% do grupo PBS. A LipL32, OmpA76, LipL23 e LipL22 reagiram com soros de hamsters infectados. Extratos de leptospiras foram reconhecidos pelos soros específicos contra LipL32, OmpA76 e LipL23. / Preventive measures as vaccines are the best strategies to combat leptospirosis. Seven potential vaccine candidates from L. iInterrogans serovar Copenhageni were studied: LipL32, LipL23 and LipL22 (lipoproteins), SphH e Sph4 (hemolysins), AnkB (ankyrin domain) and OmpA76 (OmpA domain). The genes were amplified, cloned and the proteins expressed in E. Coli e Salmonella enteric for challenge assays. In the first assay, hamsters were immunized with the recombinant salmonella to express OmpA76 in vivo, and challenged with serovar Pomona. The survival was 30% of the recombinant salmonella group, 100% of the commercial vaccine and 10% of the control groups. In the second assay, hamsters were immunized with a pool of the purified proteins and challenged with serovar Copenhageni. The survival was 30% of the group pool of proteins, 90% of the commercial vaccine, 100% of the bacterin and 0% of the PBS group. LipL32, OmpA76, LipL23 and LipL22 reacted with hamsters infected sera. Leptospiral extracts were recognized by specific sera against LipL32, OmpA76 and LipL23.
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Avaliação sorológica e diagnóstico molecular para Leptospira spp. em bovinos abatidos em frigorífico do centro oeste paulista

Dutra, Marcelo Augusto Orsi January 2019 (has links)
Orientador: Simone Baldini Lucheis / Resumo: A leptospirose é uma zoonose de grande importância em saúde pública, considerada antropozoonótica com alta incidência e prevalência, negligenciada e de caráter ocupacional. Funcionários da linha de produção e manipuladores de sangue e vísceras em frigoríficos, podem infectar-se pelo contato direto com estes produtos, assim como os trabalhadores rurais nas propriedades, pelo contato e exposição direta a fômites e secreções destes animais. Esta enfermidade representa perdas econômicas importantes nos rebanhos, pois pode ocasionar abortos e fetos natimortos e, na sua forma subclínica, é comumente assintomática em bovinos. Amostras biológicas de sangue, fígado e rins de 144 bovinos abatidos em frigorífico localizado no centro-oeste paulista foram utilizadas para o diagnóstico da leptospirose com as técnicas de Soroaglutinação Microscópica (SAM) e Reação em Cadeia da Polimerase convencional (cPCR) para Leptospira spp. Os resultados sorológicos demostraram 71/144 (49,3%) animais reagentes à SAM para os seguintes sorovares: Djasiman (56,3%), Hardjoprajtino (40,8%), HardjoCTG (12,7%), Hardjo (11,3%), Hardjobovis (11,3%), Pyrogenes (9,8%), Wollfi (8,4%), Castellonis (7,0%), Pomona (4,2%), Grippotyphosa (1,4%), Hardjomini (1,4%), Icterohaemorrhagiae (1,4%) e Bratislava (1,4%). Os resultados moleculares evidenciaram a presença de DNA de Leptospira spp. em 25 animais (17,4%), sendo em rins de 21 animais, em fígado de cinco animais, em fígado e rins de dois animais e em sangue, de um (01)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Leptospirosis is a zoonosis of great importance in public health, considered anthropozoonotic with high incidence and prevalence, neglected and of occupational character. Production line workers and handlers of blood and viscera in slaughterhouses can be infected by direct contact with these products, as well as rural workers on the farms, by contact and direct exposure to fomites and secretions of these animals. This disease represents important economic losses in the herds, since it can cause abortions and stillborn fetuses and, in its subclinical form, is commonly asymptomatic in cattle. Biological blood, liver and kidneys samples from 144 cattle slaughtered in a slaughterhouse located in central-western São Paulo were used for the diagnosis of leptospirosis using the Microscopic Agglutination Test (MAT) and Conventional Polymerase Chain Reaction (cPCR) techniques for Leptospira spp. The serological results showed 71/144 (49.3%) animals reactive to MAT for the following serovars: Djasiman (56.3%), Hardjoprajtin (40.8%), HardjoCTG (12.7%), Hardjo 3%), Hardjobovis (11.3%), Pyrogenes (9.8%), Wollfi (8.4%), Castellonis (7.0%), Pomona (4.2%), Grippotyphosa, Hardjomini (1.4%), Ichterohaemorrhagiae (1.4%) and Bratislava (1.4%). Molecular results evidenced the presence of Leptospira spp. in 25 animals (17.4%): the kidneys of 21 animals, in the liver of five animals, in the liver and kidneys of two animals and in blood of one (01) animal. These results indicate an alert to the sani... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação do papel funcional de duas proteínas de Leptospira interrogans no processo de adesão do patógeno ao hospedeiro / Evaluation of the functional role of two Leptospira interrogans proteins in the adhesion process of the pathogen to the host.

Kochi, Leandro Toshio 11 May 2018 (has links)
A leptospirose é uma zoonose de distribuição global causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira. A doença possui um quadro de manifestações clínicas muito variadas em humanos, que pode apresentar febre, dores de cabeça e muscular, até um quadro clínico mais severo, conhecido como síndrome de Weil, caracterizado por hemorragias, icterícia, falência renal e hepática. Até o presente momento, os mecanismos de patogenicidade da leptospira não são totalmente claros e não existe uma vacina eficaz contra a doença. O sequenciamento de genomas de leptospiras patogênicas possibilitou a identificação de proteínas da membrana externa conservadas entre cepas patogênicas, que são os principais alvos de pesquisa para elucidar os mecanismos de patogenicidade e possivelmente o desenvolvimento de uma vacina. Nesse sentido, foram selecionados por bioinformática os genes LIC11711 e LIC12587 a partir do genoma sequenciado de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, os quais codificam para duas preditas lipoproteínas hipotéticas de funções desconhecidas. Os genes foram amplificados por PCR a partir do DNA genômico da bactéria e clonados no vetor de expressão pAE. As proteínas recombinantes foram expressas em E. coli BL21 DE3 Star pLysS e purificadas por cromatografia de afinidade a metal. As proteínas recombinantes foram inoculadas em camundongos para avaliação da sua atividade imunogênica e obtenção de soros imunes. Ambas as proteínas recombinantes se mostraram reativas com anticorpos em soros de pacientes diagnosticados com a doença, apresentando uma sensibilidade maior em relação ao teste de aglutinação microscópica (MAT), e alta especificidade, diferenciando anticorpos presentes em soros de pacientes diagnosticados com outras doenças não relacionadas. Os resultados de ELISA de bactéria intacta, proteólise por proteinase K e imunofluorescência sugerem que ambas as proteínas estão localizadas na membrana externa bactéria. Com base no ensaio de conservação por western blotting, as proteínas nativas estão presentes em diferentes cepas patogênicas de Leptospira, e ausentes na espécie saprófita L. biflexa. Em ensaios de adesão in vitro, as proteínas recombinantes interagiram com os componentes humanos laminina, e-caderina, plasminogênio, fibrinogênio, fibronectina plasmática, vitronectina, C7, C8 e C9 de forma dose-dependentes, porém com valores de afinidade baixos. Estes resultados sugerem que as proteínas codificadas pelos genes LIC11711 e LIC12587 são expressas durante a patogênese e podem desempenhar múltiplas funções a partir da interação com diferentes componentes, e deste modo auxiliam nas etapas de invasão, disseminação e evasão do sistema imune, auxiliando as leptospiras no processo de infecção. / Leptospirosis is a zoonosis of global distribution caused by pathogenic bacteria of the genus Leptospira. The disease has a wide range of clinical manifestations in humans, which can present with fever, headaches and muscular pain, to a more severe clinical condition, known as Weil\'s syndrome, characterized by hemorrhages, jaundice, renal and hepatic failure. So far, the pathogenicity mechanisms of leptospira are not entirely clear and there is no effective vaccine against a disease. Sequencing of pathogenic leptospires genomes has enabled the identification of conserved outer membrane proteins among pathogenic strains, which are the main research focus to understand the mechanism of pathogenicity and possibly identify a vaccine candidate. In this sense, the genes LIC11711 and LIC12587 were selected from the genome sequence of Leptospira interrogans serovar Copenhageni by bioinformatics, which encode two hypothetical predicted lipoproteins of unknown functions. The genes were amplified by PCR from the genomic DNA of the bacteria and cloned into pAE expression vector. The recombinant proteins were expressed in E. coli BL21 DE3 Star pLysS and purified by metal affinity chromatography. Recombinant proteins were inoculated in mice to evaluate their immunogenic activity and to obtain immune sera. Both recombinant proteins are reactive with antibodies in sera from patients diagnosed with a disease, presenting higher sensitivity than the microscopic agglutination test (MAT), high specificity, differentiating antibodies present in sera from patients diagnosed with other non-specific diseases related. The results of intact bacterial ELISA, proteinase K proteolysis and Immunofluorescence suggest that both proteins are located in the surface of the bacteria. Based on western blotting conservation assay, the coding sequences are present in different pathogenic strains of Leptospira, and absent in the nom-pathogenic L. biflexa. In in vitro adhesion assays, recombinant proteins showed interaction with the human components laminina, e-cadherin, plasminogen, fibrinogen, plasma fibronectina, vitronectin, C7, C8 and C9, in dose-dependent manner, but with low affinity values. These results suggest that the proteins encoded by the genes LIC11711 and LIC12587 are expressed during the infection and may perform multiple tasks and thus assist in the steps of invasion, dissemination and evasion of the immune system, helping leptospires during the establishment of the disease.

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