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Metabolic engineering on IgG producing CHO cell: construction and comparative analysis of clones at a metabolic levelWilkens Díaz-Muñoz, Camila January 2015 (has links)
Doctora en Ciencias de la Ingeniería, Mención Química / La venta de biofármacos representa una industria billonaria que ha crecido exponencialmente desde la década de los 70's debido al aumento de la demanda por estas proteínas terapéuticas altamente específicas. Estas proteínas recombinantes son sintetizadas por diferentes líneas celulares, especialmente aquella derivada de ovarios de hámster chino CHO ya que presentan altas tasas específicas de producción de proteína recombinante y son fácilmente adaptables a escalas industriales. Hoy en día, más de la mitad de los anticuerpos monoclonales que se encuentran en el mercado son producidos por células CHO.
Para incrementar el rendimiento de los procesos productivos, diferentes metodologías han sido usadas por investigadores. Resultados positivos han sido obtenidos aplicando principios de ingeniería y utilizando herramientas de biología molecular para modificar reacciones bioquímicas. Proyectos de Ingeniería Metabólica han sido exitosos en reducir la producción de metabolitos indeseados, especialmente lactato, e incrementar la síntesis de proteína recombinante. En este trabajo se estudia el efecto que tienen diferentes estrategias de Ingeniería Metabólica sobre el metabolismo y cultivo de células CHO.
Se ha probado que el metabolismo de carbono de células CHO es altamente ineficiente, consumiendo una cantidad de glucosa mayor de la necesaria para mantener el metabolismo energético y proliferación celular. En este trabajo se construyeron clones de células CHO productoras de IgG recombinante que sobre-expresan PYC2, MDH II y trasportador de fructosa. La expresión de estos genes permitiría aliviar cuellos de botella en el metabolismo central del carbono de las células. En este trabajo se estudiaron y contrastaron los efectos de la sobre-expresión de estos genes sobre la extensión de los cultivos, metabolismo y productividad. Los resultados indican que todos los clones estudiados presentan un metabolismo más eficiente, caracterizado por una menor producción de lactato por glucosa consumida y que no todos mejoraron su proliferación celular y/o productividad específica. Células CHO sobre expresando PYC2 mejoraron su tasa máxima de crecimiento, pero redujeron la tasa de producción de proteína recombinante; la sobre-expresión de MDH II conduce a la reducción del crecimiento celular y síntesis de proteína; finalmente, sobre-expresar el transportador de fructosa aumenta la proliferación celular y síntesis de proteína recombinante en medios con fructosa. Proponemos que las diferencias en producción de proteína se deben a alteraciones del estado RedOx de la célula que afectan en ensamblado de las cadenas peptídicas y la secreción de éstas.
Reducir la expresión del gen Lactato deshidrogenasa A ha sido el objetivo de numerosos trabajos con el fin de reducir la síntesis de lactato e incrementar la producción de proteína recombinante. Utilizando el nuevo sistema para edición genómica CRISPR-Cas logramos interrumpir una de las copias del gen. Resultados del análisis de cultivos fed-batch de estas células indican que el crecimiento celular y el metabolismo fueron afectados y la síntesis específica y volumétrica de la proteína recombinante incrementó considerablemente.
Se realizó un análisis a profundidad del metabolismo de las células deficientes en LDHa. Se midió la razón NAD+/NADH de éstas y el valor indicó que las células mutadas presentan niveles de NAD +/NADH menores que las del cultivo control, sugiriendo una mejora en su metabolismo energético debido a la mayor acumulación de NADH. Mediante Análisis de Flujos Metabólicos se estimó los flujos entre las reacciones más importantes del metabolismo central de las células. Los resultados confirmaron que en las células mutantes existen mayores flujos en el ciclo del TCA, debido principalmente a un mayor aporte de carbonos provenientes del catabolismo de amino ácidos. Estas células también presentan un menor flujo en la vía de la glicólisis, lo que se correlaciona con la menor proliferación que estas presentaron, y esto último puede explicar el aumento de síntesis de proteínas.
En este trabajo se aplicaron exitosamente conceptos de Ingeniería Metabólica para la construcción de
clones con distintos metabolismos. Este trabajo revela los efectos de varias modificaciones, lo que lo hace una
fuente útil información acerca de los efectos que tienen variadas estrategias metabólicas sobre cultivos de
células CHO. Finalmente, este trabajo resulta ser un aporte para la comunidad científica contribuyendo con la
primera comparación de diferentes clones que sobre-expresan genes claves del metabolismo central del
carbono y entregando el primer estudio en profundidad del efecto de reducir la expresión del gen de la LDHa.
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Prevalência de síndrome metabólica em idosos de uma comunidade: comparação entre três métodos diagnósticosRigo, Julio César January 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / Background and aims- The prevalence of metabolic syndrome (MS) in different studies has showed ample variation according to population characteristics and the diagnostic criteria. The International Diabetes Federation (IDF) criterion usually shows a higher prevalence of MS in the literature. The aim of this study is to compare the prevalence of metabolic syndrome with different criteria in community elderlies. Methods- A total of 378 representative community elderlies were reported in this study (252 women and 126 men, mean age 69 years). The prevalence was estimated with the most widely applied criteria to diagnose the metabolic syndrome: National Cholesterol Education Program - Adult Treatment Panel III (NCEP ATPIII), revised NCEP ATPIII and the International Diabetes Federation (IDF). Results- The MS prevalence was progressively higher accordingly with criteria NCEP ATP III, revised NCEP ATP III and IDF. The prevalence were 50,3%, 53,4% and 56,9%, respectively. The progressive increase of MS prevalence with this three criteria occurred in both genders. When genders were separated, the prevalence of MS in women was higher then men, 57,1%, 59,9% and 63,5% with criteria NCEP ATP III, revised NCEP ATP III and IDF. Conclusion- With the IDF criteria it was observed a higher prevalence of MS compared with NCEP ATP III criterion in representative community elderly. The prevalence of MS in women was higher independent of diagnostic criteria. / Introdução e objetivos- A prevalência de síndrome metabólica (SM) encontrada em diferentes estudos tem apresentado ampla variação, dependendo da população e do critério diagnóstico utilizado, havendo uma tendência de maior prevalência da SM com o critério diagnóstico da International Diabetes Federation (IDF). Este estudo teve por objetivo comparar a prevalência da SM com diferentes critérios em idosos da comunidade. População e Métodos - Participaram do estudo 378 idosos com 60 anos ou mais (252 mulheres e 126 homens) representativos de uma comunidade. A prevalência da SM foi estimada aplicando os critérios diagnósticos do NCEP ATPIII, do NCEP ATPIII revisado e da IDF. Resultados - A prevalência de SM aumentou progressivamente com a utilização dos critérios National Cholesterol Education Program - Adult Treatment Panel III (NCEP ATP III), NCEP ATP III revisado e IDF, com valores de 50,3%, 53,4% e 56,9%, respectivamente. O aumento progressivo da prevalência de SM com a utilização dos três critérios ocorreu em ambos os sexos, com maior prevalência da SM entre as mulheres, com percentuais de 57,1%, 59,9% e 63,5% com os critérios NCEP ATP III, NCEP ATP III revisado e IDF, respectivamente. Conclusão - Com o critério da IDF encontrou-se uma maior prevalência de SM em relação à prevalência encontrada com o critério do NCEP ATP III e NCEP ATP III revisado. A prevalência da SM foi maior entre as mulheres independente do critério utilizado.
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Biomarcadores inflamatórios e epigenéticos precoces de componentes da síndrome metabólica e sua associação com a dieta habitual / Inflammatory and Epigenetic early biomarkers of Metabolic Syndrome components and its association with habitual dietCarraro, Júlia Cristina Cardoso 18 December 2015 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-12-13T18:03:05Z
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Previous issue date: 2015-12-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Síndrome Metabólica (SM) é caracterizada como um conjunto de alterações metabólicas relacionadas ao maior risco de doenças cardiovasculares, diabetes, e morte prematura. Seu desenvolvimento pode estar relacionado a vários fatores, como o estresse oxidativo, a inflamação, fatores ambientais (ex. dieta) e (epi)genéticos, sendo a obesidade e a resistência à insulina fatores centrais em sua fisiopatologia. Uma vez que a SM possui importantes repercussões na qualidade e expectativa de vida, torna-se importante o diagnóstico e intervenção precoce no intuito do aumento da sobrevida destes indivíduos. Assim, este estudo teve como objetivo determinar biomarcadores inflamatórios e epigenéticos precoces da SM, bem como avaliar a associação de componentes da dieta habitual com os componentes da SM, com as concentrações de marcadores inflamatórios e com modificações epigenéticas. Dois estudos transversais foram conduzidos, sendo um composto por profissionais de saúde aparentemente saudáveis do município de Viçosa – MG (n=226; 74% do sexo feminino; idade média de 28,9 ± 7,0 anos e média de IMC de 22,4 ± 3,4 kg/m2), e o segundo por estudantes das universidades de Navarra (UNAV) e Pública de Navarra (UPNA), da cidade de Pamplona, Espanha (n=153; 67% do sexo feminino; idade média de 21,0 ± 3,0 anos e média de IMC de 22,1 ± 2,5 kg/m2). Foram avaliados indicadores antropométricos, de composição corporal, marcadores metabólicos e inflamatórios e a metilação global do DNA e de promotores de genes codificadores de marcadores inflamatórios. Os marcadores epigenéticos foram avaliados por diferentes métodos (High Resolution Melting - HRM e MALDI-TOF-Sequenon). Em relação ao primeiro estudo, a hipermetilação global do DNA e a de promotores de genes inflamatórios (IL-6, SERPINE1 e PCR) esteve associada a marcadores de adiposidade, como o perímetro da cintura - PC e índice de massa corporal - IMC. Indivíduos com maior metilação global também apresentaram aumento da pressão arterial sistólica e de marcadores do metabolismo glicídico, maiores concentrações de TNF-α e menores de adiponectina, bem como pior qualidade da dieta. A hipermetilação dos genes inflamatórios, embora não relacionada a concentrações circulantes das respectivas citocinas, esteve relacionada a componentes específicos da dieta, como o maior consumo de calorias, de carboidratos ou de lipídios totais. No segundo estudo, as concentrações séricas de interleucina-6 (IL- 6) estiveram associadas a indicadores de adiposidade (PC, razão cintura quadril - RCQ, IMC e percentual de gordura corporal), assim como ao maior risco de ocorrência da resistência à insulina e maiores concentrações séricas de PCR, mostrando-se melhor biomarcador precoce de desordens metabólicas que a interleucina-18 (IL-18). As concentrações destas interleucinas podem ser influenciadas pelo hábito de fumar, uma vez que o maior número de cigarros fumados ao dia esteve associado a maiores concentrações de IL-6 e IL-18. A melhor qualidade da dieta, bem como o maior consumo de frutas totais, laranja, maçã, vitamina C e fibra da fruta estiveram associadas à hipometilação do promotor de TNF-α. Em conjunto, os resultados dos dois estudos sugerem que as concentrações de citocinas inflamatórias e marcadores epigenéticos (metilação de DNA) podem ser bons preditores precoces de alterações metabólicas, podendo ser influenciados pela qualidade da dieta e ingestão de nutrientes e,ou grupos alimentares específicos, como o de frutas. / The metabolic syndrome (MetS) is a cluster of metabolic abnormalities associated with increased risk of cardiovascular disease, diabetes, and premature death. The development of MetS may be related to many factors such as oxidative stress, inflammation, environmental (eg. diet) and (epi)genetic factors, being obesity and insulin resistance key factors in the pathophysiology. Since MetS has important repercussions on the quality of life and life expectancy, it is very important the early diagnosis and intervention in order to increase the survival of these subjects. Thus, this study aimed to determine early inflammatory and epigenetic biomarkers of MetS, and to evaluate the association of dietary components with MetS and with the biomarkers evaluated. Two cross-sectional studies were carried out, one composed by apparently healthy healthcare professionals from Viçosa - MG (n = 226, 74% of females, age average 28.9 ± 7.0 years old and BMI average 22.4 ± 3.4 kg/m2), and the second by students from the universities of Navarra (UNAV) and Public of Navarra (UPNA), from Pamplona , Spain (n = 153, 67% of females, age average 21.0 ± 3.0 years old and BMI average 22.1 ± 2.5 kg/m2).). Subjects from the both studies were evaluated by anthropometric, body composition, metabolic and inflammatory markers and, the global DNA methylation and methylation of promoters of genes encoding inflammatory markers. Epigenetic markers were evaluated by different methods (High Resolution Melting - HRM and MALDI-TOF- Sequenon). Regarding to the first study, the global DNA and inflammatory genes promoters hypermethylation (IL-6, SERPINE1 and PCR) have been associated to adiposity markers such as waist circumference (WC) and body mass index (BMI). Individuals with higher global methylation also showed an increase in systolic blood pressure and glycemic metabolism markers, higher TNF-α concentrations and lower adiponectin, as well as poorer quality of the diet. The hypermethylation of inflammatory genes, though not related to circulating concentrations of the cytokines, was related to specific components of the diet, such as higher caloric, carbohydrate or total fatty acids intake. About the second one, interleukin-6 (IL-6) concentrations were associated with adiposity traits (WC, waist hip ratio- WHR, BMI and body fat percentage), as well as the increased risk of resistance insulin and higher serum concentrations of CRP. IL-6 has been shown to be better early biomarker of metabolic disorders that interleukin-18 (IL-18). The concentrations of these interleukins can be influenced by smoking, once the largest number of cigarettes smoked per day was associated with higher concentrations of IL-6 and IL-18. The best quality of the diet and higher consumption of total fruit, orange, apple, vitamin C and fruit fiber were associated with hypomethylation of TNF-α promoter. Taken together, the results of both studies suggest that the inflammatory cytokines levels and epigenetic markers (DNA methylation) can be good predictors of early metabolic changes, which can be influenced by the quality of diet and intake of nutrients or specific.
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Prevalência da síndrome metabólica e de seus componentes em universitários / Prevalence of metabolic syndrome and its components in college studentsFreitas, Roberto Wagner Júnior Freire de January 2013 (has links)
FREITAS, Roberto Wagner Júnior Freire de. Prevalência da síndrome metabólica e de seus componentes em universitários. 2013. 163 f. Tese (Doutorado em Enfermagem) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-12-23T12:46:48Z
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Previous issue date: 2013 / The Metabolic Syndrome (MetS) is a complex disorder represented by a group of cardiovascular risk factors. The increase in general mortality around 1.5 and the increased mortality from cardiovascular disease in 2.5 times are some of the reasons that prove the relevance of the problem. A growing number of young people, especially college students, have been affected by metabolic disorder, and to date, there are no studies with this portion of the population in Brazil. The objective of this investigation was to evaluate the prevalence of MetS and their individual components in a population of college students. Furthermore, we sought to evaluate the influence of the area and the period in which the student is in your course in the MetS prevalence. Cross-sectional study with 702 university students belonging to a Public Institution of Higher Education in Fortaleza, Brazil, in 2011. The sample consisted of students over 18 years, duly enrolled and attending courses in different areas of knowledge like: human, exact, agricultural, health and biological sciences and technology. Initially, students filled out an instrument containing data identifying, demographic and related health indicators like a physical exercise, smoking and alcohol. Next, we assessed the anthropometric data, height, weight, waist circumference, body mass index and blood pressure. Blood samples were taken by a specialized laboratory, respecting a fasting for twelve hours to blood glucose, triglycerides, HDL-cholesterol and LDL-cholesterol. The criteria used for the diagnosis of MetS was the National Cholesterol Education Program – Adult Treatment Panel III (NCEP ATP III). The project was submitted to the Ethics Committee on Human Research of the Center for Health Sciences of the Federal University of Ceará and approved according to the protocol 208/2010. The prevalence of MetS was 1.7%. With regards to its components, 30.9% and 12.1% of students had at least one or two, respectively. Waist circumference, blood pressure, levels of blood glucose and triglyceride levels were increased by 5.6%, 8.3%, 12.1% and 22.5% of the students, respectively. The levels of HDL-cholesterol were reduced by 12.0% of the sample. We found a statistically significant association between BMI and the prevalence of MetS (p=0,000). Students belonging to the health showed the better parameters of waist circumference (p=0.011), blood pressure (p=0.014), of blood glucose (p=0.036), HDL-cholesterol (p=0.000), BMI (p=0.001) and smoking (0.034). Regarding the period of the course, it was evident that alcohol use is lower among freshmen, compared to those students who are at the end of the course (p = 0.000). We conclude that the prevalence of MetS was lower among college students, however, a large portion of them have components present, increasing the chances of onset of the disorder over the years. Moreover, students belonging to health science had fewer of MetS components and better health indicators. Intervention studies should be conducted in seeking to encourage healthy lifestyles for all students, regardless of the training area and period in which they are in progress. / A Síndrome Metabólica (SM) é um transtorno complexo representado por um conjunto de fatores de risco cardiovascular. A elevação da mortalidade geral em torno de 1,5 e o aumento da mortalidade por problemas cardiovasculares em 2,5 vezes são alguns dos motivos que comprovam a relevância do problema. Um número crescente de indivíduos jovens, em especial os estudantes universitários, tem sido acometido pelo distúrbio metabólico e, até o momento, não existem estudos com essa parcela da população no Brasil. O objetivo dessa investigação foi avaliar a prevalência da SM e de seus componentes individuais numa população de estudantes universitários. Além disso, buscou-se avaliar a influência da área de formação e do período em que o aluno se encontra no curso na prevalência da SM. Estudo transversal, realizado com 702 universitários pertencentes a uma Instituição Pública de Ensino Superior de Fortaleza-Brasil, em 2011. Compuseram a amostra estudantes maiores de 18 anos, devidamente matriculados e frequentando cursos de distintas áreas do conhecimento, a saber: humanas, exatas, agrárias, saúde, ciências e tecnologia. Inicialmente, os estudantes preencheram um instrumento contendo dados de identificação, sociodemográficos e relacionados aos indicadores de saúde, como prática de exercícios físicos, tabagismo e etilismo. Em um segundo momento, foram avaliados os dados antropométricos, altura, peso, circunferência abdominal, índice de massa corporal e pressão arterial. Coletas sanguíneas foram realizadas por um laboratório especializado, respeitando um jejum de doze horas, para glicemia venosa, triglicerídeos, HDL-colesterol e LDL-colesterol. O critério utilizado para o diagnóstico de SM foi do National Cholesterol Education Program – Adult Treatment Panel III (NCEP ATP III). O projeto foi submetido ao Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos do Centro de Ciências da Saúde da Universidade Federal do Ceará e aprovado conforme o protocolo 208/2010. A prevalência da SM foi de 1,7%. Com relação aos seus componentes, 30,9% e 12,1% dos estudantes possuíam, pelo menos, um ou dois deles, respectivamente. A circunferência abdominal, a pressão arterial, os níveis de glicose sanguínea e de triglicerídeos estiveram aumentados em 5,6%, 8,3%, 12,1% e, 22,5% dos estudantes, respectivamente. Os níveis de HDL-colesterol estiveram diminuídos em 12,0% da amostra. Foi encontrada associação estatisticamente significante entre a prevalência da SM e o IMC (p=0,000). Os estudantes pertencentes à área da saúde apresentaram melhores parâmetros da circunferência abdominal (p=0,011), pressão arterial (p=0,014), glicemia venosa de jejum (p=0,036), HDL-colesterol (p=0,000), IMC (p=0,001) e tabagismo (0,034). Com relação ao período do curso, ficou evidenciado que o uso do álcool é menor nos calouros, quando comparados àqueles estudantes que estão no final do curso (p=0,000). Conclui-se que a prevalência da SM foi baixa entre os estudantes universitários, entretanto, grande parcela deles possui componentes presentes, aumentando as chances do aparecimento do distúrbio com o passar dos anos. Além disso, os estudantes pertencentes à área da saúde apresentaram menos componentes da SM e melhores indicadores de saúde. Estudos de intervenção devem ser realizados na busca de incentivar hábitos de vida saudáveis a todos os universitários, independente da área de formação e período em que se encontram no curso.
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Relação entre os elementos definidores da síndrome metabólica e a função tireoidiana em indivíduos com eutireoidismo da população de Fortaleza-CE / Relationship between the defining elements of the metabolic syndrome and thyroid function in subjects with euthyroid in population of FortalezaCastelo, Maria Helane Costa Gurgel January 2010 (has links)
CASTELO, Maria Helane Costa Gurgel. Relação entre os elementos definidores da síndrome metabólica e a função tireoidiana em indivíduos eutireoideanos adultos da população de Fortaleza-CE. 2010. 126 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-09-03T13:46:41Z
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Previous issue date: 2010 / The association between clinically overt thyroid dysfunction and the development of metabolic disorders is well established. However, in recent years, the debate about the relationship between changes in thyroid function (TF), the metabolic syndrome (MS) or its components has gained special attention. Since the thyroid stimulating hormone (TSH) screening test more sensitive for detecting changes in TF, has been discussed more stringent criteria of normality in healthy individuals, from the finding of an association of adverse clinical outcomes with values previously considered normal. However, it is difficult to define "health", particularly in relation to body adiposity, whereas obesity is a condition of high prevalence itself linked to numerous illnesses. This study aimed to evaluate the relationship between the defining elements of MS and changes in the TF and determine the reference value (RV) of TSH in a sample of healthy subjects, from the stand point of thyroid, in the city of Fortaleza, Brazil. This is a cross-sectional study conducted from March 2009 to January 2010 which included 267 euthyroid subjects were selected from clinical and laboratory criteria. This team comprised four stages including the completion of a self-administered questionnaire, laboratorial and medical evaluation, with anthropometry, measurement of waist circumference (WC), systolic blood pressure (SBP) and diastolic (DBP), determination of serum TSH, free thyroxine ( FT4), triiodothyronine (T3), anti-thyroperoxidase (ATPO), thyroglobulin antibody (ATG), fasting glucose (FG), insulin, total cholesterol (TC), LDL, HDL and triglycerides (TG), insulin resistance calculated by homeostasis model assessment (HOMA-IR ), and the realization of thyroid ultrasound (TUS). Among the 267, 125 participants were selected, named individuals-reference, characterized by normal FT4, anti-thyroid antibody negative and normal TUS normal. This group composed the database of individual records necessary for determining the VR TSH according to the NCCLS and NACB guidelines. Data were subjected to statistical analysis (software Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), versão 14.0 para Windows) being used the Student t test, Mann-Whitney test to compare continuous variables, the chi-square test for categorical variables and Spearman test for correlation analysis, adopting the statistical significance level of 5% (p < 0.05). Multiple linear regression models were applied to evaluate the associations between the FT with the concentrations of serum lipids and various traits of MS, with and without adjustment for age, sex, and HOMA-IR. To determine the reference range of TSH were adopted percentiles 2.5% and 97.5% of the distribution curve of the analyte, as the correspondents of the lower and upper limits of TSH RV. After the analysis, we observed that 77.2% of euthyroid subjects had at least one defining element of MS. Regarding the relationships between metabolic parameters and FT, there was positive correlation of TSH with only WC and DBP, while the FT4 correlated inversely with four (WC, FG, TG, DBP) in the five defining elements of MS. Yet been demonstrated a clear inverse correlation between the status of TF and HOMA-IR. From these findings, we speculate that in fact there is an association between the TF and MS, and that serum levels of thyroid hormones (THs) more than TSH, are related to cardiovascular risk factors. In determining the reference range of TSH, the values are between 0.56 to 4.45 mIU / l, which is in line with the points previously established in population-based studies. / A associação entre disfunções tireoideanas clinicamente manifestas e o desenvolvimento de distúrbios metabólicos está bem determinada. Entretanto, nos últimos anos, o debate acerca da relação entre alterações na função tireoideana (FT) e a síndrome metabólica (SM), ou seus componentes, tem ganhado especial atenção. Sendo o hormônio tireoestimulante (TSH) o teste de rastreamento mais sensível para a detecção de alterações da FT, tem se discutido critérios mais rigorosos de normalidade em indivíduos sadios, a partir do achado de associação de desfechos clínicos desfavoráveis com valores anteriormente considerados normais. No entanto, torna-se difícil a definição de “saúde”, em especial no âmbito relacionado à adiposidade corporal, considerando ser a obesidade uma condição de elevada prevalência e per si relacionada a inúmeras morbidades. Assim, este trabalho objetivou avaliar a relação entre os elementos definidores da SM e a FT e determinar o valor de referência (VR) do TSH em uma amostra de indivíduos saudáveis, do ponto de vista tireoideano, residentes na cidade de Fortaleza-CE, Brasil. Trata-se de um estudo transversal conduzido no período de março de 2009 a janeiro de 2010 onde foram incluídos 267 indivíduos eutireoideanos, selecionados a partir de critérios clínicos e laboratoriais. Esta seleção compreendeu quatro etapas incluindo o preenchimento de um questionário auto-administrado, avaliação médica e laboratorial, com antropometria, medida da circunferência abdominal (CA), da pressão arterial sistólica (PAS) e diastólica (PAD), determinação sérica de TSH, tiroxina livre (T4l), triiodotironina (T3), anticorpo anti-tireoperoxidase (ATPO), anticorpo anti-tireoglobulina (ATG), glicose em jejum (GJ), insulina, colesterol total (CT), LDL, HDL e triglicerídeos (TG), cálculo da resistência à insulina, através do modelo de avaliação da homeostase (HOMA-IR), e a realização de ultrassonografia tireoideana (UST). Dentre os 267, foram selecionados 125 participantes, denominados indivíduos-referência, caracterizados por T4l e T3 normais, anticorpos anti-tireoideanos negativos e UST normal. Este grupo compôs o banco de registros individuais necessários para a determinação do VR do TSH de acordo com as recomendações do NCCLS e NACB guidelines. Os dados foram submetidos à análise estatística, através do software Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), versão 14.0 para Windows, sendo usados o teste t de Student, teste de Mann-Whitney para comparação das variáveis contínuas, o teste do qui-quadrado para variáveis categóricas e o teste de Spearman para análise de correlações, sendo adotado o nível de significância estatística de 5% (p<0,05). Modelos de regressão linear múltipla foram aplicados na avaliação das associações entre a FT com as concentrações de lipídeos séricos e com vários traços da SM, com e sem ajuste para idade, sexo e HOMA-IR. Para determinação do intervalo de referência do TSH foram adotados os percentis 2,5% e 97,5% da curva de distribuição deste analito, como sendo os correspondentes dos limites inferior e superior do VR do TSH. Após a análise, observou-se que 77,2% dos indivíduos eutireoideanos apresentaram pelo menos um elemento definidor da SM. Quanto às relações entre os parâmetros metabólicos e a FT, observou-se correlação positiva do TSH apenas com CA e PAD, enquanto o T4l correlacionou-se inversamente com quatro (CA, GJ, TG, PAD) dos cinco elementos definidores da SM. Ainda foi demonstrada uma clara correlação inversa entre o status de FT e o HOMA-IR. A partir destes achados, especula-se que de fato exista uma associação entre a FT e a SM, e que os níveis séricos de hormônios tireoideanos (HTs), mais do que TSH, estão relacionados com fatores de risco cardiovascular. Na determinação do intervalo de referência do TSH, os valores obtidos se encontram entre 0,56 a 4,45mUI/l, o que está em consonância com os pontos previamente estabelecidos em estudos de base populacio.
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Caracterização clínica, metabólica e hormonal de portadores de lipodistrofia parcial familiarElias, Cecília Pacheco 21 August 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Rhuama Barbosa do Carmo (rhuamacarmo@bce.unb.br) on 2016-06-27T14:48:01Z
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2015_CecíliaPacheoElias.pdf: 6191176 bytes, checksum: bb982bf77f453adc040d878d0eaf512e (MD5) / Introdução: As lipodistrofias são condições raras, caracterizadas por redistribuição anormal da gordura corporal. A lipodistrofia parcial familiar (LPF) caracteriza-se por perda variável de tecido adiposo subcutâneo periférico (membros e glúteos) e acúmulo de gordura em outras regiões. Há seis variantes de LPF descritas e foram identificadas mutações em cinco genes. Manifestações clínicas incluem resistência insulínica (RI) e outros componentes da síndrome metabólica (SM).
Objetivo: Caracterização clínica, metabólica e hormonal de portadores de LPF. Métodos: Foram selecionados pacientes com achados clínicos sugestivos de LPF, acompanhados em dois hospitais públicos de Goiânia. Foram avaliadas medidas antropométricas [índice de massa corporal (IMC), circunferência abdominal (CA), relação cintura/quadril e índice de adiposidade corporal], variáveis bioquímicas e hormonais (glicemia, hemoglobina glicada, perfil lipídico, transaminases, PCR, cálcio, fósforo, PTH, 25OHD, insulina, leptina, TSH, T4 livre, T3, gonadotrofinas e androgênios; resistência insulínica foi avaliada com o índice HOMA-IR). O eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA) foi avaliado com medidas basais (cortisol, ACTH, cortisol salivar noturno e cortisol livre urinário) e dinâmicas (testes de supressão com 0,5 e 1 mg de dexametasona). Foi realizado ultrassom (US) pélvico nas mulheres, para avaliação de Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP), e US de abdome para rastreamento de esteatose hepática (EH). Avaliação cardiovascular foi considerada através de exames de ecodopplercardiograma e teste ergométrico. A composição corporal foi avaliada pelo método de absorciometria radiológica de dupla energia (DEXA), incluindo a razão de massa de gordura troncular sobre a dos membros inferiores (FMR). A correlação de medidas antropométricas e relacionadas à composição corporal, com variáveis bioquímicas e hormonais, foi avaliada pelo teste de Spearman. Resultados: Foram analisados 6 pacientes (5 mulheres e 1 homem), entre 17 e 42 anos. Observou-se heterogeneidade fenotípica e perda menos acentuada de tecido adiposo periférico nos pacientes mais jovens. O único paciente do sexo masculino incluído foi o que apresentou o fenótipo menos grave. Todos os pacientes apresentaram resistência insulínica (RI) e 3 exibiram redução da concentração circulante de leptina. SOP foi diagnosticada nas 5 mulheres avaliadas. Todos os pacientes apresentaram EH e componentes da SM. RI acentuada foi observada em 4 pacientes, dos quais 3 não apresentavam obesidade. Nenhum dos pacientes apresentou hipercortisolismo. O estudo da composição corporal por DEXA envidenciou aumento da quantidade de gordura central e redução da quantidade de gordura periférica (FMR > 1,2 e aumento da taxa androide/ginoide). Não houve correlações significativas entre medidas antropométricas e da composição corporal com variáveis bioquímicas ou hormonais, embora a FMR tenha se correlacionado melhor com alterações bioquímicas e hipoleptinemia, quando comparada à CA. Conclusão: Foram observadas RI e componentes da SM em todos os pacientes. O fenótipo lipodistrófico foi mais leve nos indivíduos mais jovens. Não foram observadas alterações do eixo HHA. A avaliação da composição corporal por DEXA foi mais sensível que as medidas antropométricas para evidenciar as modificações da distribuição de gordura na LPF. Não foram observadas correlações significativas entre medidas antropométricas e relacionadas à composição corporal com variáveis bioquímicas e hormonais nos pacientes investigados. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Background: Lipodystrophies are rare conditions characterized by abnormal redistribution of body fat. Familial partial lipodystrophy (FPL) is associated with a variable loss of peripheral subcutaneous adipose tissue (legs, arms and gluteal reagion) and fat accumulation in other regions. Six FPL variants associated with mutations at 5 loci have been described. Clinical manifestations include insulin resistance (IR) and other components of the metabolic syndrome (MS). This study aims to describe clinical, metabolic and hormonal features of FPL.
Methods: Patients with clinical features of the syndrome followed at two public hospitals in Goiania were included, and had anthropometric (body mass index, IMC, abdominal circumference, AC, waist to hip ratio, WHR, and body adiposity index), biochemical and hormonal (fasting glucose, glycated hemoglobin, lipid profile, liver enzymes, CRP, calcium, phosphorus, PTH, 25OHD, insulin, leptin, TSH, free T4, T3, gonadotrophis and androgens) measures analyzed. The hypothalamic-hypophyseal-adrenal (HHA) axis was assessed by both basal (cortisol, ACTH, nocturnal cortisol and urinary free cortisol) and dynamic (0.5 and 1 mg dexamethasone suppression tests) tests. Polycistic ovary syndrome (POS) was investigated by pelvic ultrasound and hepatic steatosis was assessed with an abdominal ultrasound. Cardiovascular evaluation was considered through echocardiogram and ergometric test. Body composition was analyzed with dual X-ray energy absorciometry (DEXA), including the ratio of troncular fat and legs (FMR). Correlation between clinical, anthropometric, biochemical, hormonal and body composition-related variables was analyzed by Spearman’s tests. Results: Six (five female and 1 male) patients aged 17 to 42 years were included. Fat distribution was heterogeneous and younger patients had lower intensity loss of peripheral adipose tissue. The only male patient included was the one with the less severe phenotype. All patients exhibited insulin resistance (IR) and 3 exhibited reduced serum leptin levels. POS syndrome was present in all 5 female patients included. All patients had components of metabolic syndrome and hepatic steatosis. None of the patients had biochemical signs of hypercortisolism. Body composition assessed by DEXA showed an increase in central body fat and reduced peripheral body fat (FMR > 1.2 and increased android/ginoid rate). There were no significant correlations between clinical, anthropometric, biochemical, hormonal and body composition-related variables, although FMR seemd to correlate better with biochemical abnormalities and hypoleptinemia than AC. Conclusion: IR and features of MS were seen in all 6 patients with FPL, and the lipodystrophic phenotype was less severe in younger patients. There were no abnormalities in HHA activity. Body composition assessed by DEXA showed increased sensitivity to detect abnormalities in fat distribution when compared to anthropometric measures. There were no significant correlations between clinical, anthropometric, biochemical, hormonal and body composition-related variables.
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Lipodistrofia em indivíduos vivendo com HIV/AIDS: fatores de risco para lipoatrofia e acúmulo de gordura corporal e associação com síndrome metabólica. Um estudo de coorteOliveira, Thais Gelenske Braga e 25 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-25 / O presente estudo teve como objetivo determinar as densidades de incidência e fatores associados com lipoatrofia(LA) e acúmulo de gordura corporal (AGC), determinar a densidade de incidência de síndrome metabólica (SM) de acordo com três critérios diferentes [American Heart Association/National Heart, Lung and Blood Institute (AHA/NHLBI), International Diabetes Federation (IDF) e Harmonizing Metabolic Syndrome: a Joint Interim Statement (JIS)] e verificar a associação de LA e AGC com o desenvolvimento de SM e com os componentes participantes dos critérios de definição de SM em pessoas vivendo com HIV (PVHIV) usando terapia antirretroviral (TARV) na Coorte AIDS-PE (2007-2012). Na avaliação de novos casos de LA e AGC e seus fatores associados, encontramos incidência de LA de 19,3(17,3-21,5)/100pessoas-ano e de AGC 34(31,4–28,1)/100pessoas-ano. Após ajuste, os fatores que permaneceram associados com desenvolvimento de LA foram tempo de diagnóstico de HIV > 5 anos e valores de CD4 <350 células/ml. Os fatores que permaneceram associados com menor risco para LA foram sobrepeso/obesidade e uso atual de atazanavir (ATV). Os fatores que permaneceram associados com desenvolvimento de AGC foram sobrepeso/obesidade, hipertrigliceridemia, pré-diabetes e sexo feminino. Os fatores que permaneceram associados com menor risco para AGC foram idade > 40 anos e uso em algum momento de lopinavir/ritonavir (LPV/r) e efavirenz (EFZ). Na avaliação de novos casos de SM, encontramos incidência de SM pelo JIS de 18,6 (16,5–21)casos/100pessoas-ano, SM pela AHA/NHLBI de 15 (13,2–17)casos/100 pessoas-ano e SM pela IDF de 12,5 (10,9–14,3)casos/100pessoas-ano. Encontramos associação entre AGC com SM, independente da definição adotada. Não encontramos associação entre LA e SM. Avaliando a associação de LA e AGC com os componentes usados para definição de SM, AGC foi fator de risco para circunferência abdominal (CA) elevada (usando ponto de corte IDF), hipertensão arterial (HAS) e hiperglicemia/diabetes mellitus. A presença de LA diminuiu o risco de desenvolvimento de CA elevada pelos critérios da AHA/NHLBI e IDF. Em nossa coorte, os fatores que se associaram com o desenvolvimento de novos casos de LA foram diferentes daqueles com AGC. Encontramos incidência alta de SM principalmente pelos critérios da JIS. AGC, mas não LA, associou-se com novos casos de SM.
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Deleção do gene PGI1 da levedura Pichia stiptis para aumentar o rendimento fermentativo a etanol.MIRANDA, André Ribas de 31 January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Nos últimos 15 anos, um grande esforço tem sido feito para uma maior utilização de
resíduos agroindustriais renováveis, podendo a biomassa lignocélulosica ser matéria
prima para os bicombustíveis. A composição dessas biomassas varia bastante, mas em
geral os substratos lignocelulósicos são constituídos de celulose (homopolímero de
glicose), hemicelulose (heteropolímero de hexoses e pentoses) e pela lignina
(compostos aromáticos). Considerando que a fermentação de glicose pode ser realizado
de forma eficiente, a bioconversão da fração das pentoses (xilose, principal açúcar
pentose obtido na hidrólise da hemicelulose), apresenta um desafio. A levedura Pichia
stipitis pode converter xilose a etanol com rendimentos industrialmente relevantes.
Porém necessita de condições limitantes de oxigênio, além do consumo da glicose inibir
de modo não competitivo a xilose e sob condições de crescimento similares o consumo
de glicose é maior que o de xilose. Com base na análise da via metabolica desta
levedura, o presente trabalho teve como objetivo redirecionar o fluxo metabólico da via
glicolitica para via das pentose fosfato dentro do que se chama modernamente de
Engeharia Metabólica. O gene PGI1 codificador da fosfoglicose isomerase foi
completamente removido do genoma da linhagem nativa NRRL 7124 com o uso de
fragmentos de PCR que continham seqüências com mais de 350 bp de homologia com
as regiões 5 e 3´ do gene alvo. Quando este gene foi deletado, a glicose-6-fosfato foi
inteiramente rotada para via da pentose fosfato. Este fluxo direciona a produção de
NADPH fundamental para a produção de precursores de nucleotídeos, aminoácidos, em
reações biossinteticas redutivas e também na conversão de xilose a xilitol. Para seleção
do transformante, foi necessária uma concentração de 1200μg/ml de Geneticina. Além
disso, a eficiência de transformação foi baixa, em parte devido à utilização do sistema
não convencional de códons por esta levedura. O cassete de deleção construído
apresenta a marca de seleção resistente a geneticina ladeado por duas regiões
denominadas loxp, que permitem a recombinação por sistemas de contra-seleção.
Possibilitando a remoção da marca de resistência
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Impacto de uma intervenção nutricional em pacientes adultos portadores de síndrome metabólica atendidos no Ambulatório de Nutrição do Hospital Escola/UFPelDuval, Patrícia Abrantes, Assunção, Maria Cecília Formoso, Silveira, Denise Halpern January 2011 (has links)
Submitted by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2014-06-06T22:25:36Z
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Previous issue date: 2011 / A Síndrome Metabólica (SM) é um importante fator de risco independente para o desenvolvimento de Diabetes Mellitus tipo 2 e doença cardiovascular, sendo atribuído principalmente à presença de resistência à insulina. O rápido crescimento da SM tem sido atribuído às alterações do estilo de vida, principalmente, hábitos alimentares inadequados e sedentarismo. Os objetivos do estudo são avaliar o impacto de uma intervenção nutricional realizada em pacientes adultos portadores de Síndrome Metabólica atendidos no Ambulatório de Nutrição do Hospital Escola/UFPel em 2010 e 2011 e, analisar o efeito de uma intervenção nutricional sobre as seguintes variáveis: peso corporal, circunferência da cintura, pressão arterial, perfil lipídico, glicemia de jejum e PCR. Trata-se de um estudo de intervenção do tipo antes e depois, serão incluídos pacientes portadores de SM segundo IDF, de ambos os sexos, com idade de 20 à 59 anos, que receberão uma prescrição dietética e um folder com orientações nutricionais contendo os 10 passos de uma alimentação saudável, baseadas no Guia Alimentar da População Brasileira, sendo acompanhados por um período de 4 meses.
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Aspectos da síndrome metabólica na doença hepática gordurosa não-alcoólica em pacientes obesos mórbidosHelena de Oliveira Cordeiro, Lúcia January 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003 / A obesidade é considerada doença epidêmica cuja prevalência está aumentando
em todo o mundo, principalmente em sua forma maligna a obesidade grave. A
obesidade grave pode ser um dos componentes da Síndrome de Resistência
Insulínica e implica risco elevado para diversas condições mórbidas como
diabetes, infarto agudo do miocárdio e alterações hepáticas como, esteatose
hepática, esteatohepatite não-alcoólica, cirrose e cânceres hepáticos. Dessa
forma, este estudo se propõe a fazer uma avaliação dos fatores de risco
metabólicos com a doença hepática gordurosa não alcoólica. Foram estudados
35 pacientes obesos severos submetidos à biópsia hepática durante
procedimento cirúrgico de gastroplastia. As medidas antropométricas e dosagens
sanguíneas de glicose de jejum, colesterol total, HDL, LDL e triglicerídeos e
enzimas hepáticas foram realizadas. Foram excluídos pacientes portadores de
hepatite viral ou outras doenças hepáticas conhecida e pacientes com ingestão
alcoólica >80g/semana. Houve uma prevalência de 88,6% de DHGNA sendo
32,2% grau I, 45,2% grau II, 25,6% grau III, essa última correspondente a
esteato-hepatite não alcoólica. Houve predomínio do sexo feminino com 68,6% vs
31,4% do sexo masculino. A média de idade foi de 37 anos. O tempo médio de
obesidade foi de 18 anos. O Índice de Massa Corpórea teve média de 53,04. O
índice cintura-quadril mostrou associaçãocom formas mais graves de doença
hepática embora não estatisticamente significante. A alteração metabólica mais
freqüente foi dislipidemia, sendo hipercolesterolemia a mais prevalente. No
entanto, hipertrigliceridemia foi o que mais se correlacionou com graus mais
severos de doença hepática (p=0,084) embora não tenha havido diferença
significativa. Diabetes Mellitus teve prevalência em 8,6% dos pacientes enquanto
hipertensão ocorreu em 60%. Aspartatominotransferase (AST) foi anormal em
16,1% dos pacientes e alaninaaminotransferase em 26,7%. Em conclusão, a
doença hepática gordurosa não alcoólica tem elevada prevalência em obesos
graves, sugerindo uma maior associação com a relação cintura-quadril e
hipertrigliceridemia
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