Glicose e oxigênio desempenham um importante papel na regulação do metabolismo celular. Dada a importância de ambos no metabolismo - o primeiro como fonte de carbono preferencial da maior parte das células, e o segundo como aceptor final de elétrons na cadeia respiratória, em diversos organismos desenvolveram-se métodos adequados para detectar sua presença de modo a ajustar o metabolismo em função de sua disponibilidade. Neste trabalho foi realizado o estudo da expressão, no nível transcricional, dos genes envolvidos nas vias metabólicas primárias e genes envolvidos em morte celular, em células humanas, com o intuito de determinar as alterações no metabolismo energético em resposta a condições de hipóxia e anóxia, por meio da técnica de microarrays de cDNA. Utilizamos, inicialmente, células normais de fibroblasto humano ASl98 e células de fibroblasto humano MRC-5 imortalizadas por transfecção por SV40, e por fim células provenientes de ilhotas pancreáticas humanas, para a elaboração de um protocolo de cultura celular em que as mesmas crescessem aderidas a microcarregadores Cytodex I. Numa segunda etapa, células de ilhotas pancreáticas humanas foram cultivadas em suspensão, aderidas aos microcarregadores, num biorreator, sendo então realizada a análise do perfil transcricional dos genes escolhidos, frente às condições de baixa tensão de oxigênio. É apresentada a análise da expressão gênica de aproximadamente 160 genes na qual foram verificados um comportamento de indução daqueles envolvidos no metabolismo de lipídios e alguns na morte celular e um comportamento inicial de indução, e posterior inibição, do metabolismo primário como um todo. Em vista dos dados obtidos é de interesse ressaltar que essas células deveriam ser mantidas em saturações de oxigênio acima de 5% para evitar o efeito deletério observado na baixa concentração de oxigênio sobre a viabilidade celular, em termos da indução de alguns genes envolvidos na morte celular e da repressão geral dos relacionados ao metabolismo energético. Também foi verificado que, em saturações de oxigênio de até 10%, as células adotaram um padrão transcricional que indicou uma resposta ao estresse por falta de oxigênio, este por sua vez reflete-se na viabilidade celular, característica crucial para o sucesso do transplante clínico de ilhotas. / Glucose and oxygen have important roles on the regulation of cellular metabolism. Due to their importance in metabolism, the former as the preferential carbon source and the later as the final electron acceptor of the respiratory chain, many organisms have developed suitable processes to detect their presence in order to adjust the cellular metabolism to their availability. In this work, we have studied, in human cells and at the transcriptional level, the expression of genes involved in primary metabolism pathways and some of those related to cell death, aiming to resolve alterations in the energetic metabolism as a response to hypoxic and anoxic conditions, by means of cDNA microarrays. We initially used AS198 human fibroblastic normal cells and MRC-5 human fibroblastic cells immortalized by SV40, and later on cells from human pancreatic islets, to develop a cell culture protocol in which they would grow on the surface of Cytodex 1 microcarriers. As a second step, cells from human pancreatic islets were cultured on microcarriers in suspension inside a bioreactor. This culture was then used to carry out the transcriptional profile analysis of selected genes in response to low levels of oxygen. This work presents the analysis of gene expression of approximately 160 genes that can be divided into two distinct groups. The first group, the expression of which is induced, comprises genes involved in lipid metabolism and some of those related to cell death. The expression of the second group, consisting of diverse genes of the primary metabolism, suffers an initial induction followed by repression. Given the data acquired it is interesting to note that the human pancreatic islets should be maintained under at least 5% dissolved oxygen to avoid the deleterious effects on cell viability observed at lower oxygen concentrations, resulting in the induction of some genes involved in cell death and the repression of those related to energetic metabolism. It was also verified that, under oxygen saturation of at least 10%, these cells adopted a transcriptional profile that indicated a response to the stress created by the lack of oxygen, which would in turn reflect on cell viability, a crucial characteristic for success in clinical islet transplantation.

A participação do fígado na homeostasia da glicose materna ainda não está esclarecida. Este estudo avaliou a produção hepática de glicose em ratas prenhes e controle bem como algumas das principais vias metabólicas hepáticas envolvidas nas alterações metabólicas mediadas pelo fígado ao final do período de prenhez em ratas. Houve diminuição do conteúdo de glicogênio hepático e glicose circulante em ratas prenhes. A taxa de gliconeogênese diminuiu em prenhes assim como o conteúdo de IR e sua fosforilação em tirosina mediante estímulo com insulina, porém a fosforilação em serina da AKT e o conteúdo e expressão gênica da PEPCK, mantêm-se como em controles. Há aumento do conteúdo de PTP1B e de sua associação ao IR na presença de insulina. Houve diminuição do conteúdo de G6Pase, AMPK total e da fosforilação da AMPKa/1 e, conseqüentemente, da fosforilação da ACC em ratas prenhes. Há aumento de triglicérides circulantes e diminuição de triglicérides no tecido hepático. Aumenta a expressão gênica da FAS e diminuem as expressões de G-6-Pase, MEs, LXR, SREBP1 e PFK. Os resultados indicam não haver resistência à insulina no fígado de ratas prenhes e que a atividade metabólica hepática no período está voltada para a síntese de novo de ácidos graxos. / The involvement of the liver in maternal glucose homeostasis is still unclear. This study evaluated the hepatic glucose production in pregnant rats and some of the hepatic metabolic pathways involved in metabolic disorders mediated by the liver in late pregnancy.There was a decrease in liver glycogen content and plasma glucose in pregnant rats. The rate of gluconeogenesis decreased as well as the contents of IR tyrosine phosphorylation after insulin stimulus, but the pSer-AKT, PEPCK, SHP2 contents, SHP2-IR association and the expression of PEPCK remained unaltered. The content of PTP1B and its association with IR decreases in the presence of insulin. The content of G6Pase, AMPK and the phosphorylation of AMPK a/1 and consequently the phosphorylation of ACC decreases in liver from pregnant animals. Triglyceride levels and the expression of FAS was increased in pregnant rats whereas the triglycerides reduced in the liver. The expression of G-6-Pase, MEs, LXR, SREBP1 and PFK decreased in the liver of pregnant rats. The results indicate no insulin resistance in the liver of pregnant rats, and that hepatic metabolic activity in this period is focused on de novo fatty acids synthesis.

A análise de fluxos metabólicos para a produção de PHAMCL por Pseudomonas sp. LFM046 revelou que a baixa eficiência de conversão de carboidratos em PHA (60-70% do valor máximo teórico) deve estar associada à utilização principal da via das pentoses (VP) para o metabolismo de carboidratos. Eficiências significativamente maiores poderiam ser obtidas se uma parcela maior da glicose fosse metabolizada pela via Entner-Doudoroff (ED). Assim, neste trabalho foi realizada a análise de fluxos metabólicos utilizando glicose marcada (C13) e o melhoramento genético de Pseudomonas sp. LFM046 utilizando estratégia de engenharia metabólica. Experimentos com glicose marcada confirmaram um maior fluxo de carboidratos pela VP em relação a ED. A superexpressão de genes específicos de ED em Pseudomonas sp. LFM046 demonstrou apenas pequenos aumentos na eficiência de conversão de carboidratos em PHA pelas linhagens recombinantes. / The metabolic flux analysis for PHAMCL production by Pseudomonas sp. LFM046 revealed that the low efficiency of carbohydrates conversion into PHA (60-70% of the maximum theoretical value) should be associated with the main use of pentose phosphate pathway (PP) for the carbohydrate metabolism. Significantly higher efficiencies could be obtained if a larger portion of the glucose was metabolized via the Entner-Doudoroff (ED). Therefore, the metabolic fluxes analysis was performed in this work using labeled glucose (13C) and the genetic improvement of Pseudomonas sp. LFM046 by using metabolic engineering approach. Experiments with labeled glucose confirmed an increased flow of carbohydrates by PP compared to ED. The overexpression of specific genes from ED in Pseudomonas sp. LFM046 showed only small increases in the efficiency of carbohydrates conversion into PHA by recombinant strains.

Submitted by Dominick Jesus (dominickdejesus@hotmail.com) on 2015-12-18T15:16:52Z No. of bitstreams: 2 Tese_Daiani Kochhann.pdf: 621037 bytes, checksum: 77f5292da8332411f5e7e520596880d6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-18T15:16:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Daiani Kochhann.pdf: 621037 bytes, checksum: 77f5292da8332411f5e7e520596880d6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-05-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / This study aimed to understand the relationship between social status and aerobic metabolism in species of Apistogramma (Cichlidae) and how environmental differences can affect these relationships. In the first chapter, we evaluated the influence of changes in temperature and oxygen concentration in social interactions of groups of Apistogramma agassizii. In addition, we assessed how changes in the environmental parameters influence the aerobic metabolism of this species and how environmental parameters interact with the physiological ones. There was a reduction in stability of dominance hierarchy in the high temperature. Aggression levels changed significantly after the increase in temperature and decrease in oxygen concentration. Dominant fish from undisturbed environment were the only that ate more than their respective subordinates. When comparing metabolic rates in relation to social status, dominant fish had higher metabolic rate than their subordinates only in undisturbed environment. The second chapter evaluated how differences of habitat complexity influences social interaction of pairs of males of A. agassizi. In addition, we investigated how habitat structure influences metabolic rate and how physiology interacts with behaviour in differently structured enviornments. We observed an increase in biting by dominant fish at habitat with higher structural enrichment. We observed an increase in metabolic rate in dominant fish only in enriched habitats. In the third chapter the existence of dominance hierarchy in the social interactions in natural populations of A. hippolytae at Dimona and Amanã Reserve was investigated. In addition, we evaluated the influence of social status in the aerobic metabolism of this species. Groups of A. hippolytae at Dimona site had higher aggressiveness and feeding rate when compared to Amanã site groups. We observed that dominant fish have metabolic advantages in both studied sites; however, in Amanã the most subordinate fish presented aerobic metabolic profile similar to that of dominant one. Altogether, our results show that social status influences aerobic metabolism of A. hippolytae and A. agassizii, and that environment affects this influence. / Esse estudo objetivou entender as relações entre metabolismo aeróbico e posição hierárquica em espécies do gênero Apistogramma (Cichlidae) e como diferenças ambientais poderiam influenciar essas relações. No primeiro capítulo, verificou-se a influência de mudanças na temperatura e na concentração de oxigênio da água nas interações sociais de grupos de Apistogramma agassizii. Também avaliou-se como essas mudanças influenciavam o metabolismo aeróbico da espécie e como os parâmetros comportamentais interagiam com os parâmetros fisiológicos. Observou-se uma redução na estabilidade das hierarquias de dominância de grupos de indivíduos mantidos em aquários submetidos a temperaturas mais elevadas. Aumento da temperatura e diminuição no oxigênio alteraram os níveis de agressão nos grupos de A. agassizii. Peixes dominantes em ambiente sem modificações ambientais foram os únicos que tiveram uma vantagem na taxa de forrageamento quando comparados aos subordinados. A taxa metabólica foi maior em peixes dominantes apenas nos aquários sem mudanças ambientais. O segundo capítulo avaliou como diferenças na complexidade estrutural do habitat interferem nas interações sociais de duplas de machos de A. agassizii. Além disso, verificou-se como a complexidade estrutural interfere na taxa metabólica dos animais e como esses parâmetros fisiológicos interagiam com os parâmetros comportamentais. Foi observado um aumento na frequência de mordidas desferidas pelos peixes dominantes nos aquários com maior complexidade ambiental. Também foi observado um aumento na taxa metabólica em peixes dominantes quando comparados aos subordinados, mas esse aumento ocorreu apenas nos aquários com maior complexidade ambiental. No terceiro capítulo investigou-se a existência de hierarquias de dominância nas interações sociais de populações naturais de A. hippolytae nas Reservas Dimona e Amanã. Além disso, verificou-se a influência do status social no metabolismo aeróbico de indivíduos da espécie. Grupos de A. hippolytae observados na Dimona tiveram taxas mais altas de agressividade e de alimentação quando compados aos grupos da Reserva Amanã. Foi observado que peixes dominantes possuem vantagens metabólicas nas duas localidades, porém na reserva Amanã peixes na última posição hierárquica possuem perfis metabólicos semelhantes aos peixes dominantes. Conjuntamente, esses resultados indicam que o status social influencia no metabolismo aeróbico de A. hippolytae e A. agassizii, e que os fatores ambientais interferem nessa influência.

Submitted by Dominick Jesus (dominickdejesus@hotmail.com) on 2016-02-12T14:20:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Ramon Barros Baptista.pdf: 691769 bytes, checksum: ddf8f469023b77ce72d2178dc9fadfe4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-12T14:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Ramon Barros Baptista.pdf: 691769 bytes, checksum: ddf8f469023b77ce72d2178dc9fadfe4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-02-17 / Amazonian fishes exhibit a variety of strategies related to oxygen uptake in response to shortages of gas into water, related to their lifestyle and evolution. The Astronotus ocellatus is a species of extreme tolerance to hypoxia and some of their physiological, biochemical and molecular techniques could be evaluated in this study. Under conditions of severe hypoxia (0.5 mgO2 / L) the hematological parameters are primary responses and were adjusted to increase and make more efficient the carrying of oxygen to tissues, observed by the increase of hematocrit, the number of circulating erythrocytes and hemoglobin concentration. Furthermore, increased glucose demonstrated its importance in the supply of carbohydrate metabolism, especially in anaerobic glycolysis, in times of shortage of oxygen. Another strategy, and perhaps most important in increasing tolerance to hypoxia of the species was widespread suppression of metabolism evidenced by the reduction in activity of enzymes MDH and CS in tissues such as liver, heart and brain, as well as reducing glycolytic enzyme LDH in the brain. Increased expression of HIF-1α and VEGF genes in conditions of severe hypoxia revealed the importance of these, respectively, in the transcription of specific target genes related to hypoxia and increased vascularity of tissues, facilitating the transport of oxygen through the blood. As the oscar experiencing situations of daily fluctuation in oxygen levels in their natural habitat, an important strategy in the face of these periodic events is rapid and adequate recovery after hypoxic stress, observed in this work through the reorganization of hematological parameters, the enzymatic machinery and transcription of essential genes for the resumption of oxygen. / Os peixes amazônicos apresentam inúmeras estratégias ligadas à captação de oxigênio em resposta aos períodos de escassez deste gás no meio aquático, as quais estão relacionadas à sua evolução e estilo de vida. O Astronotus ocellatus é uma espécie de extrema tolerância à hipóxia e algumas de suas respostas fisiológicas, bioquímicas e moleculares puderam ser avaliadas neste trabalho. Em condições de hipóxia severa (0,5 mgO 2 /L) os parâmetros hematológicos são respostas primárias que se ajustaram para aumentar e tornar mais eficiente o carreamento de oxigênio aos tecidos, observado através do aumento do hematócrito, do número de eritrócitos circulantes e da concentração de hemoglobina. Além disso, o aumento da glicose demonstrou sua importância no abastecimento do metabolismo de carboidratos, principalmente da glicólise anaeróbica, em períodos de escassez de oxigênio. Outra estratégia, e talvez a mais importante no aumento da tolerância desta espécie à hipóxia, é a supressão generalizada do metabolismo, evidenciada por meio da redução na atividade das enzimas MDH e CS em tecidos como fígado, coração e cérebro, além da redução da enzima glicolítica LDH no cérebro. O aumento da expressão dos genes HIF-1α e VEGF em condições de hipóxia severa revelou a importância destes genes, respectivamente, na transcrição de genes alvo específicos relacionados à hipóxia e no aumento da vascularização dos tecidos, facilitando o transporte de oxigênio através do sangue. Como o acará-açu vivencia situações de flutuação diária nos níveis de oxigênio em seu habitat natural, uma importante estratégia diante destes eventos periódicos é sua recuperação rápida e adequada após o estresse hipóxico, observada neste trabalho através da reorganização dos parâmetros hematológicos, da maquinaria enzimática e da transcrição de genes essenciais durante a retomada de oxigênio.

Orientador: Maria Stella Gonçalves Raddi / Banca: Luís Marcos da Fonseca / Banca: Alberto Camilo Alecio / Banca: Carlos Henrique Gomes Martins / Banca: Miriam Sannomiya / Resumo: O glicoalcalóide esteroidal solamargina (SM) e sua aglicona solasodina (SD), isolados de frutos de Solanum palinacanthum (juá), foram avaliados in vitro quanto à citotoxicidade, mutagenicidade, atividade antimicrobiana na presença de sistema de metabolização microssomal hepático (fração S9). A viabilidade das linhagens celulares RAW 264.7, SiHa e HepG2 expostas a diferentes concentrações (200 - 6,25 µg/mL) dos alcalóides, na presença ou não da fração S9, foi avaliada após 24 horas pela técnica do MTT-tetrazólio e Vermelho Neutro (VN). A curva dose-resposta indicou que a fração microssomal diminui o efeito citotóxico dos alcalóides para as linhagens RAW e SiHA, entretanto essa atividade foi potencializada para a linhagem HepG2. Atividade antibacteriana para Staphylococcus aures, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, através da técnica de microdiluição, demonstrou que a fração S9 potencializou esse efeito para ambos os alcalóides, entretanto a concentração inibitória mínima (CIM) só foi definida para S. aureus (1,0 mg/mL), porém apenas com efeito bacteriostático. O teste de mutagenicidade, realizado pela técnica de AMES, demonstrou efeito mutagênico apenas para a SM na linhagem TA98 na ausência de ativação metabólica nas concentrações acima de 400 µg/mL. Espectrometria de massas foi utilizada para comparar os fragmentos gerados pelos alcalóides após metabolização com a fração S9. A análise espectral evidenciou a presença de diferentes fragmentos, indicando biotransformação dos alcalóides / Abstract: The steroidal glycoalkaloid solamargine (SM) and its aglycone solasodine (SD), isolated from fruits of Solanum palinacanthum (juá) were evaluated in vitro for cytotoxicity, mutagenicity, antimicrobial activity in the presence of hepatic microsomal metabolizing system (S9 fraction). The viability of RAW 264.7 cell lines, SiHa and HepG2 cells exposed to different concentrations (200 to 6.25 mg/mL) of alkaloids, in the presence or absence of S9 fraction was analyzed after 24 hours using the techniques of the MTT-tetrazolium and Neutral Red (RN). The dose-response curve indicated that the microsomal fraction decreased to cytotoxic of alkaloids lines for RAW and Siha, however this activity has was potentiated to the HepG2. Antibacterial activity Staphylococcus aures, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa by the microdilution technique, showed that the fraction S9 potentiated the effect to both alkaloids, however the minimum inhibitory concentration (MIC) was defined only for S. aureus (1.0 mg / mL), but without bactericidal effect. The mutagenicity test, performed by the technique of AMES, demonstrated mutagenic effect only for the SM strain TA98 in the absence of metabolic activation at concentrations above 400 mg/mL. Mass spectrometry was used to compare the fragments generated by alkaloids after metabolization with S9 fraction. Spectral analysis showed the presence of different fragments, indicating biotransformation of alkaloids / Doutor

Submitted by Gisely Teixeira (gisely.teixeira@uniceub.br) on 2018-06-11T18:10:57Z No. of bitstreams: 1 51400348.pdf: 862429 bytes, checksum: 9f931e6700b15e7cb110fff7a6220c81 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-11T18:10:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 51400348.pdf: 862429 bytes, checksum: 9f931e6700b15e7cb110fff7a6220c81 (MD5) Previous issue date: 2018 / O exercício em jejum promove uma maior mobilização do metabolismo de gorduras durante o exercício em virtude da potencialização da secreção de catecolaminas, cortisol e glucagon. Entretanto, tais respostas afetam a maneira como o sistema cardiovascular reage ao exercício. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta da pressão arterial sistólica (PAS), pressão arterial diastólica (PAD), pressão arterial média (PAM), frequência cardíaca (FC) e duplo produto (DP) ao exercício em jejum e pós-prandial. Foram submetidos 10 voluntários a dois procedimentos experimentais (jejum e pós-prandial) realizados por 36 minutos a 65% do VO2máx. Nos dois dias, os voluntários compareceram ao laboratório em jejum de 10 horas. Na sessão jejum, os voluntários realizaram o exercício sem a ingestão prévia de alimentos. Na sessão pós-prandial, os voluntários ingeriram antes do exercício uma refeição contendo 59,3g de carboidratos (76,73%), 9,97g de proteínas (12,90%) e 8,01g de lipídios (10,37%), em um total de 349,17 kcal. PA, FC e DP foram aferidos antes e após o exercício. Teste de Shapiro-Wilk foi utilizado para verificar a normalidade dos dados. Para análise das variáveis cardiovasculares nos dois momentos no exercício em jejum e no exercício pós-prandial, foi aplicada Anova fatorial (2X2) de medidas repetidas, com teste de comparações múltiplas de Bonferroni. Adotou-se p < 0,05 como nível de significância. Os resultados indicaram um aumento significativo (p < 0,05) da PAS, PAD e PAM somente no exercício pós-prandial. Já a FC e o DP se elevaram significativamente (p < 0,05) nos dois protocolos. Esses dados sugerem que a maior secreção de catecolaminas no exercício em jejum não seja suficiente para alterar significativamente a pressão arterial. Além disso, estima-se que a alimentação fornecida antes do exercício pós-prandial promova uma hipotensão pós-prandial, além de provocar uma maior responsabilidade da PA ao exercício.Conclui-se que o exercício pós-prandial executado por 36 minutos a 65% do VO2máx promove um aumento da pressão arterial sistólica, diastólica e média, o que não ocorre no exercício em jejum.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-04-17T14:45:11Z No. of bitstreams: 1 467311 - Texto Completo.pdf: 4096903 bytes, checksum: 8643a895a0704f20c9d1b6b34ae53cfd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T14:45:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 467311 - Texto Completo.pdf: 4096903 bytes, checksum: 8643a895a0704f20c9d1b6b34ae53cfd (MD5) Previous issue date: 2014-12-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Quantitative changes in the consumption of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) of the omega-3 family have drawn considerable attention, both for the benefits related to its ingestion, as for the damages attributed to its poor consumption. Consumption of these fatty acids is beneficial in the prevention and treatment of many inflammatory and respiratory illnesses. In addition to the dietary pattern, smoking may also directly interfere in the serum levels of these substances, given that smoking can affect the synthesis and metabolism of fatty acids. Objective: To study the relationship between polyunsaturated fatty acids of the omega-3 family and smoking. Methods: In a controlled cross-sectional study, we included smokers (group I) and non-smokers (group II). The participants of group I were recruited at the Smoking Cessation Outpatient Clinic - Toronto Western Hospital and at Smoking Cessation Outpatient Clinic - Centre for Addiction and Mental Health, both in Toronto, Canada. Group II volunteers were recruited from non-smoking hospital staff. The group I participants were included after their first medical appointment, before possible changes in their smoking habits and completed a specific questionnaire with demographic data and lifestyle habits. All smoking patients were submitted to the Fagerstrom Questionnaire for Nicotine Dependence. A blood sample was taken in order to assess the serum level of polyunsaturated fatty acids of all participants. Results: One hundred participants were included, 50 non-smokers and 50 smokers. Monthly fish intake was significantly different between smokers 430 grams (0 - 2150) and non-smokers (800 grams; 0-7740) (P<0.001). The blood level of PUFAs also showed a significant difference in DHA, being 4.13% (2.33-7.73) and 4.81% (2.79-10.21), P=0.002 among smokers and non-smokers, respectively. Conclusion: In this study, smokers consumed a significantly less fish (omega-3), when compared to non-smokers. Smokers also had lower levels of DHA serum than non-smokers. / Introdu??o: Os compostos lip?dicos, especialmente os ?cidos graxos, s?o componentes que est?o presentes em diversas formas de vida, desempenhando importantes fun??es na estrutura das membranas celulares e nos processos metab?licos. Em humanos, existem alguns ?cidos graxos necess?rios para a manuten??o da fun??o cerebral e transmiss?o de impulsos nervosos. S?o os ?cidos graxos poli-insaturados (PUFAs), pertencentes ?s fam?lias ?mega-3. Altera??es quantitativas na dieta, em rela??o ao consumo de PUFAs da fam?lia ?mega-3 t?m chamado bastante aten??o tanto para os benef?cios causados por sua ingest?o quanto aos danos atribu?dos ao seu baixo consumo. O consumo destes ?cidos graxos pode ser ?til tamb?m na preven??o e tratamento da inflama??o e doen?as respirat?rias, nas quais a inflama??o cr?nica desempenha papel significativo. Al?m disso, o baixo consumo de ?mega-3 tamb?m tem sido relacionado ao tabagismo. Assim como o padr?o alimentar, o fumo tamb?m pode interferir diretamente nos n?veis sangu?neos dessas subst?ncias, j? que o tabagismo pode afetar a s?ntese e o metabolismo dos ?cidos graxos. Desse modo, faz-se importante explorar e compreender os mecanismos desta rela??o. Objetivo: Estudar a rela??o dos ?cidos graxos poli-insaturados da fam?lia ?mega-3 com o tabagismo. M?todos: Em delineamento de estudo transversal controlado, foram inclu?dos pacientes tabagistas (n=50) e n?o tabagistas (n=50). Os participantes do grupo I foram recrutados atrav?s do Servi?o de abandono ao Tabagismo do Toronto Western Hospital e do Centre for Addiction and Mental Health ? Toronto/Canad?. Esses participantes foram inclu?dos logo ap?s a primeira consulta m?dica, quando ainda n?o tinham realizado modifica??es no h?bito de fumar. O grupo II foi composto por volunt?rios n?o fumantes. Todos os participantes completaram o question?rio espec?fico para obten??o de dados demogr?ficos e informa??es sobre seus h?bitos de vida. Os pacientes tabagistas responderam tamb?m ao Question?rio de Fagerstrom para Depend?ncia Nicot?nica. Foi coletada amostra de sangue para avalia??o do n?vel s?rico de ?cidos graxos poli-insaturados. Resultados: Foram inclu?dos 100 participantes, sendo 50 n?o tabagistas e 50 tabagistas. Com rela??o ao consumo alimentar, a ingest?o de peixe apresentou diferen?a significativa entre fumantes e n?o fumantes. Os n?o fumantes apresentaram mediana de consumo mensal de 800 (0 ? 7740) gramas de peixe, enquanto fumantes consumiam 430 (0 ? 2150) gramas por m?s (P= ?0,001). Em rela??o aos n?veis s?ricos dos PUFAS, houve diferen?a significativa para o DHA (22:6, n-3), tendo sido nos fumantes de 4,13% (2,33 ? 7,73), significativamente menor que a do grupo de n?o fumantes 4,81% (2,79 ? 10,21) , P=0,002. Conclus?o: Fumantes consomem significativamente menos peixe (?mega-3), quando comparados a n?o fumantes. Fumantes apresentam n?veis s?ricos de DHA mais baixos do que n?o fumantes.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-22T12:04:56Z No. of bitstreams: 1 469226 - Texto Completo.pdf: 1935172 bytes, checksum: ed87439b55bcfab4db835f100fcb8202 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-22T12:04:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 469226 - Texto Completo.pdf: 1935172 bytes, checksum: ed87439b55bcfab4db835f100fcb8202 (MD5) Previous issue date: 2015-03-19 / Agrochemicals are water contaminants, resulting from anthropogenic activities, having as main objective the elimination of some form of life and, therefore, being harmful even to non-target species. It is utmost importance the standardization and the use of bioindicators, especially of native organisms, besides the development of toxicity tests or bioassays to assess the impacts of the agroindustrial activities. Thus, it was sought to identify possible biochemical changes, to evaluate the oxidative balance and the survival of individuals of catfish Rhamdia quelen, in two aged groups, facing acute toxicity tests with different concentrations of Roundup? (glyphosate: 18, 36, 72 and 144?g/L), Primoleo? (atrazine: 2.5, 5, 10 and 15?g/L) and Facet? (quinclorac: 1.75, 3.5, 7 and 14?g/L). The procedures were performed with fingerlings (individuals with total length between 6 and 8 cm) and sexually newly matured individuals, called young-adult (with total length of more than 18 cm). All the animals were purchased from a farm and were kept for 7 days in a period called Acclimatization. After, agrochemicals were applied individually, at concentrations similar to those reported for the natural environment and allowed by law in our country. After 7 days of exposuring to the agrochemical, the animals were euthanized by cervical spinal cord section and the gill, liver, kidney and muscle tissues were separated and frozen at -20?C. In fingerlings, pools were performed, grouping the tissue from three individuals, due to their low weight; the tissues from young-adult were analyzed individually. It was estimated the effect of this agrochemicals on intermidiate metabolism, by determining the glycogen levels, total proteins, total lipids and triacylglycerols, on the two length ranges. It was also evaluated the effect of this agrochemicals on the oxidative status determining the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), and levels of lipid peroxidation (TBARS) in all the tissues from the animals on the two length ranges. The experimental procedures and the biochemical readings were performed in triplicate. It was also observed the effect of this agrochemicals on the survival of the individuals in experimental culture conditions, in both aged groups, searching for confirmation of sublethallity of determined concentrations for testing. The results are organized into three articles. The first is entitled Metabolic parameters and oxidative balance Rhamdia quelen changed after exposure to herbicides of rice crops (Roundup?, Primoleo? and Facet?), for submission to the journal Archives of Environmental Contamination and Toxicology, which presents the results obtained for the metabolism and the oxidative balance of fingerlings, which seem to have been able to modulate their enzymes as not to suffer oxidative damage front to Roundup? herbicide (by increasing CAT) and Primoleo? (without changes in SOD and CAT). The Facet? led to the increase of lipid peroxidation, especially in the gill, kidney and muscle tissues, despite the higher SOD, prejudicing the species significantly. The biochemical composition tissue of juveniles of R. quelen changed significantly, which may cause damages, mainly in the gill tissue, leading to a loss of homeostasis and it may result the death of the animals and/or the decrease of the reproductive success, when chronically exposed to these substances and concentrations. The second article entitled Metabolic changes in silver catfish exposed to herbicide of rice crop Roundup?, Primoleo? and Facet?, is concerned to the young-adult metabolism, for submission to the journal Environmental Pollution. There were changes in the metabolic profile of all sampled tissues, showing a differentiated tissue responsiveness, being the gills and the kidneys the most affected organs by the exposure to agrochemicals. The herbicide Facet? changed the gill tissue significantly, and it was suggested that the relevant Brazilian agencies regulate its use in protective standards for the environment. Finally, the third manuscript Article Oxidative status and lipid peroxidation determined by the exposure to agrochemicals Roundup?, Primoleo? and Facet? in Rhamdia quelen approaches the oxidative stress suffered by young-adults to be submitted to the journal Ecotoxicology and Environmental Safety. In this work the liver and kidney tissues were the most affected, and it can be infered that the Facet? (quinclorac) was the most toxic herbicide to the sexually newly matured individuals, followed by Primoleo? (atrazine) and after by Roundup? (glyphosate). One can suggest, from this set of results, a review of the current legislation in our country, to include products with the quinclorac active principle into the toxic list to be controlled in the natural environment. / Os agroqu?micos s?o contaminantes aqu?ticos decorrentes das atividades antropog?nicas, tendo como principal objetivo a elimina??o de alguma forma de vida, sendo, portanto, lesivos inclusive ? esp?cies n?o-alvo. ? de extrema import?ncia a padroniza??o e a utiliza??o de esp?cies bioindicadoras, em especial de organismos aut?ctones, al?m do desenvolvimento de testes de toxicidade ou bioensaios para avalia??o dos impactos decorrentes das atividades agroindustriais. Assim, buscou-se verificar poss?veis altera??es bioqu?micas, avaliar o balan?o oxidativo e a sobreviv?ncia de indiv?duos do jundi? Rhamdia quelen, em duas faixas et?rias, frente a testes de toxicidade aguda com diferentes concentra??es de Roundup? (glifosato: 18, 36, 72 e 144?g/L), Primoleo? (atrazina: 2,5, 5, 10 e 15?g/L) e Facet? (quinclorac: 1,75, 3,5, 7 e 14?g/L). Foram realizados os procedimentos com alevinos (indiv?duos com comprimento total entre 6 e 8 cm) e indiv?duos rec?m-maturados sexualmente, chamados alevin?es (com comprimento total superior a 18 cm). Todos os animais foram comprados de uma piscicultura e permaneceram por 7 dias em um per?odo denominado Aclimata??o. Ap?s, os agroqu?micos foram aplicados individualmente, em concentra??es semelhantes ?s relatadas para o ambiente natural e permitido pela legisla??o vigente em nosso pa?s. Ap?s 7 dias de exposi??o ao agroqu?mico, os animais foram eutanasiados por sec??o de medula cervical, e foram separados os tecidos branquial, hep?tico, renal e muscular, sendo congelados a -20?C. Nos alevinos, foram realizados agrupamentos dos tecidos de tr?s indiv?duos, devido seu baixo peso; os tecidos dos alevin?es foram analisados individualmente. Estimou-se o efeito destes agroqu?micos sobre o metabolismo intermedi?rio, atrav?s da determina??o dos n?veis de glicog?nio, prote?nas totais, lip?deos totais e triacilglicer?is, nas duas faixas de comprimento. Avaliouse tamb?m o efeito destes agroqu?micos sobre o status oxidativo determinando a atividade das enzimas super?xido dismutase (SOD) e catalase (CAT), al?m dos n?veis de lipoperoxida??o (TBARS) nos quatro tecidos dos animais, das duas faixas de comprimento. Os procedimentos experimentais e as leituras biqu?micas foram realizados em triplicata. Ainda observou-se o efeito destes sobre a sobreviv?ncia dos indiv?duos em condi??es de cultivo experimental, nas duas faixas et?rias, buscando a confirma??o da subletalidade das concentra??es determinadas para os testes. Os resultados est?o organizados em tr?s artigos, sendo o primeiro intitulado Par?metros metab?licos e balan?o oxidativo de Rhamdia quelen alterado frente ? exposi??o a herbicidas de lavoura de arroz (Roundup?, Primoleo? e Facet?), para a submiss?o ? Revista Archives of Environmental Contamination and Toxicology, onde s?o apresentados os resultados obtidos para o metabolismo e o balan?o oxidativo dos alevinos, que parecem ter conseguido modular suas enzimas a ponto de n?o sofrerem dano oxidativo frente aos herbicidas Roundup? (pelo aumento da CAT) e Primoleo? (sem altera??es nas enzimas SOD e CAT). O Facet? provocou o aumento da lipoperoxida??o, principalmente nos tecidos branquial, renal e muscular, apesar da eleva??o da SOD, agredindo significativamente a esp?cie. A composi??o bioqu?mica tecidual dos juvenis de R. quelen sofreu altera??es significativas, podendo acarretar a danos principalmente no tecido branquial, conduzindo ? perda da homeostase e podendo acarretar na morte dos animais e/ou a diminui??o do sucesso reprodutivo, quando expostos cronicamente a estas subst?ncias e nestas concentra??es. O 2? artigo, intitulado Altera??es metab?licas em jundi?s expostos aos herbicidas de lavoura de arroz Roundup?, Primoleo? e Facet?, versa sobre o metabolismo de alevin?es, para submiss?o ? Revista Environmental Pollution. Houve altera??es no perfil metab?lico de todos os tecidos amostrados, evidenciando uma responsividade tecidual diferenciada, sendo as br?nquias e os rins os ?rg?os mais afetados com a exposi??o aos agroqu?micos. O herbicida Facet? alterou significativamente o tecido branquial, sendo sugerido que os ?rg?os brasileiros competentes regulamentem o seu uso em normas protetivas ao meio ambiente. Por fim, o manuscrito do artigo Status oxidativo e lipoperoxida??o determinados pela exposi??o aos agroqu?micos Roundup?, Primoleo? e Facet? em Rhamdia quelen, aborda o estresse oxidativo sofrido pelos alevin?es, a ser submetido ? Revista Ecotoxicology and Environmental Safety. Neste trabalho os tecidos hep?tico e renal foram os mais afetados, e podemos inferir que o Facet? (quinclorac) foi o agroqu?mico mais t?xico aos indiv?duos rec?m-maturados sexualmente, seguido do Primoleo? (atrazina) e ap?s o Roundup? (glifosato). Podese, a partir deste conjunto de resultados, sugerir uma revis?o na legisla??o vigente em nosso pa?s, a fim de incluir produtos com o princ?pio ativo quinclorac na lista de t?xicos a serem controlados no ambiente natural.

A exposição da gestante a diversos fatores ambientais pode interferir drasticamente na programação metabólica do feto, podendo aumentar o risco de desenvolvimento de doenças na vida adulta, em casos como da exposição ao estresse ou restrição calórica. Por outro lado, pode resultar em uma modulação positiva, gerando uma criança mais preparada contra os possíveis insultos sofridos durante a vida, como ocorre através da prática de exercício físico durante a gestação. Considerando que a suplementação com antioxidantes tem demonstrado impedir a sinalização celular e o estabelecimento de adaptações metabólicas quando aliado ao exercício físico, nesse estudo nós avaliamos parâmetros de metabolismo energético e homeostase redox no encéfalo da prole submetida ao exercício físico materno, aliado ou não à suplementação com naringenina. Ratas Wistar adultas foram divididas em quatro grupos: (1) sedentário, (2) sedentário suplementado com naringenina, (3) exercício de natação, e (4) exercício de natação suplementado com naringenina. Os grupos 3 e 4 praticaram natação 30 minutos ao dia, 5 dias por semana, durante 4 semanas (incluindo uma semana de adaptação antes do acasalamento), enquanto os grupos 1 e 2 foram apenas submersos na água. A suplementação com naringenina foi realizada uma vez ao dia, na dose de 50 mg/kg, durante toda a prenhez, imediatamente antes do exercício físico. A prole foi eutanasiada aos 7 dias de vida, quando cerebelo, córtex parietal e hipocampo foram dissecados para as análises bioquímicas. Nossos resultados demonstraram que tanto a suplementação com naringenina quanto a prática de exercício materno causaram um aumento nas defesas antioxidantes da prole, e também um aumento na atividade da cadeia transportadora de elétrons, uma indicação de biogênese mitocondrial. A suplementação com naringenina inibiu a atividade das desidrogenases do ciclo do ácido cítrico, provavelmente interferindo no sítio de ligação do NAD+. Quando os tratamentos foram aliados, demonstrou-se a abolição dos efeitos isolados em vários parâmetros, avaliados no encéfalo dos filhotes. Também verificamos que a estrutura cerebral mais suscetível aos efeitos da naringenina e do exercício materno é o cerebelo. Concluímos que as intervenções utilizadas, suplementação com naringenina e exercício gestacional, causaram relevantes modulações metabólicas no encéfalo da prole, sugerindo cautela nas intervenções durante a gestação. / Pregnant woman's exposure to various environmental factors dramatically interferes in the fetus metabolic programming, increasing the risk for diseases in adulthood, in cases such as exposure to stress or calorie restriction. On the other hand, a positive modulation also is possible, able to prevent future insults, as occurs through physical exercise during pregnancy. Whereas antioxidant supplementation has been shown to prevent the adaptive signaling pathways when combined with exercise, in this study we evaluated some parameters of energy metabolism and redox homeostasis in the brain of the offspring submitted to maternal exercise, ally or not to naringenin supplementation. Female adult Wistar rats were divided into four groups: (1) sedentary, (2) sedentary supplemented with naringenin, (3) swimming exercise, and (4) swimming exercise supplemented with naringenin. Groups 3 and 4 practiced swimming for 30 minutes a day, 5 days a week for 4 weeks (including one week of adaptation prior to mating); while groups 1 and 2 were just submerged in the water. Supplementation with naringenin was performed daily immediately before exercise, at a dose of 50 mg/kg, throughout pregnancy. The offspring was euthanized at 7 days of life when cerebellum, hippocampus, and parietal cortex were dissected for biochemical analysis. Our results demonstrated that both strategies, naringenin supplementation and maternal exercise training, increased the antioxidant defenses in offspring’s brain, as well as the electron transport chain activity, an indication of mitochondrial biogenesis. Naringenin supplementation inhibited the activity of citric acid cycle’s dehydrogenases, probably by interfering with the NAD+ binding site. When the treatments were allies, it proved to abolish the separate effects on various parameters evaluated in puppies. It was also found that the brain structure more susceptible to the effects of naringenin and maternal exercise is the cerebellum. We concluded that the interventions used, naringenin supplementation and gestational exercise, bring substantial metabolic modulations in the offspring’s brain, suggesting caution in interventions during pregnancy.