Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:32:56Z : No. of bitstreams: 1 000735025.pdf: 468867 bytes, checksum: 46ae182b50d5693fba00b6f071b212f7 (MD5) / not available

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:29:08Z : No. of bitstreams: 1 campos_dhs_me_botfm.pdf: 422363 bytes, checksum: bae65b82d6904fbc334f730756695826 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Obesidade é uma doença metabólica crônica definida pelo acúmulo excessivo do tecido adiposo em relação à massa magra tecidual. Estudos clínicos mostram que a obesidade está associada à disfunção ventricular diastólica e não consistente comprometimento do desempenho sistólico. Os modelos experimentais que induzem obesidade por dietas têm sido utilizados como alternativa para se estudar as conseqüências das anormalidades cardíacas decorrentes do acúmulo de gordura. Pesquisas mostram que a função cardíaca em animais obesos pode estar preservada, diminuída ou aumentada. Alterações nos substratos energéticos, inibição da via glicolítica pelos ácidos graxos e redução na atividade da enzima piruvato desidrogenase (PDH) podem contribuir para a disfunção cardíaca induzida pela obesidade. Em razão da ausência de pesquisas que avaliaram a relação entre função cardíaca e metabolismo energético na obesidade, o objetivo deste estudo foi testar a hipótese que o desequilíbrio energético miocárdico, entre ácidos graxos e glicose, ocasionado pela obesidade, acarreta disfunção cardíaca. O prejuízo funcional nos animais obesos é decorrente de déficit de adenosina trifosfato (ATP), via glicolítica, para a bomba de cálcio (Ca2+) do retículo sarcoplasmático (SERCA2). Com a finalidade de testar esta hipótese, foi inibida a via glicolítica miocárdica pela administração do iodoacetato. Além disso, o metabolismo energético também foi avaliado pela estimulação da PDH pelo dicloroacetato. Ratos Wistar machos, com 30 dias, foram distribuídos em dois grupos: controle (C; n=30) e obeso (Ob; n=30). Os ratos C receberam ração padrão para roedores e os Ob um ciclo de quatro rações hiperlipídicas por um período de 30 semanas. A gordura corporal total foi realizada pela somatória dos depósitos epididimal, retroperitoneal... / Obesity is a chronic metabolic disorder defined by excessive accumulation of body fat relative to lean tissue. Clinical studies show that obesity is associated with ventricular dysfunction and not consistent impairment of systolic performance. Experimental models that induce obesity by diet have been used as an alternative to study the consequences of cardiac abnormalities resulting from accumulation of fat. Researchs show that cardiac function in obese animals may be preserved, diminished or increased. Alterations in energy substrates, inhibition of the glycolytic pathway by fatty acids and reduced activity of the enzyme pyruvate dehydrogenase (PDH) may contribute to cardiac dysfunction induced by obesity. Due to the lack of research evaluating the relationship between cardiac function and energy metabolism in obesity, the objective of this study was to test the hypothesis that the myocardial energy imbalance between fatty acids and glucose, caused by obesity, leads to cardiac dysfunction. The functional impairment in the obese animals is due to deficit of adenosine triphosphate (ATP), glycolytic pathway for calcium (Ca2+) pump of sarcoplasmic reticulum (SERCA2). For this purpose, was inhibited the myocardial glycolytic pathway by administration of iodoacetate. Moreover, energy metabolism was also assessed by stimulation of PDH by dichloroacetate. Thirty-day-old male Wistar rats were assigned to one of two groups (n=30 each): control (C) and obese (Ob). The C group was fed a standard diet and Ob group was fed cycles of four highfat diets for 30 weeks. The total body fat was measured from the sum of the individual fat pad weights (epididymal, retroperitoneal and visceral) and the obesity defined by adiposity index. The nutritional and metabolic profiles of these animals were also evaluated. The cardiac remodeling process was assessed by structural and functional analysis... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1984Bitstream added on 2014-06-13T19:12:33Z : No. of bitstreams: 1 barraviera_b_me_botfm.pdf: 3231026 bytes, checksum: b87b77290330969de4b3219f300b44e1 (MD5) / Com o objetivo de contribuir para o esclarecimento de alguns pontos ainda obscuros nas relações existentes entre o metabolismo da via das pentoses e a ação de drogas em doentes com malária causada pelo Plasmodium falciparum , foi proposta a padronização do método para pesquisa da atividade da via das pentoses, menos lesivo para os eritrócitos, menos dispendioso e que fosse tão eficiente quanto o do BREWER et alii. Estudou-se “in vitro”, com o método padronizado, a ação da clindamicina em hemácias humanas normais. Procedeu-se, ainda, a inquérito com a finalidade de avaliar a prevalência da eficiência de G6PD em habitantes de área endêmica de malária... / Not available.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-05-12Bitstream added on 2014-06-13T19:41:12Z : No. of bitstreams: 1 cardoso_mjl_dr_botfmvz.pdf: 248290 bytes, checksum: 9109a7b559aa1fe60811340d1a417214 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os efeitos do hipertireoidismo experimental (150 g/kg/dia/42 dias) na homeostase do cálcio e nos marcadores do metabolismo ósseo foram estudados em 14 gatos sem raça definida, com idade entre um e três anos. Houve uma clara tendência de aumento das concentrações séricas de PTH intacto a partir do momento inicial com diferença significativa entre este e os demais momentos. O cálcio ionizado demonstrou uma diminuição significativa aos 14 dias em relação ao momento inicial e aos 42 dias em relação aos 14 dias. Os hormônios tireoidianos apresentaram correlação positiva com o PTH e negativa com o cálcio ionizado. Já a densidade mineral óssea (DMO) apresentou tendência de correlação negativa com o PTH a partir dos 28 dias. Observou-se correlação negativa do PTH com o cálcio ionizado aos 14, 28 e 42 dias. Conclui-se que o hipertireoidismo em gatos adultos jovens sem doenças concomitantes apresenta hiperparatireoidismo secundário. As concentrações séricas da OC apresentaram diferença significativa (p<0,05) entre si, nos quatro momentos. O ICTP, um marcador específico da reabsorção óssea, não apresentou diferença significativa entre os momentos. Provavelmente o remodelamento ósseo foi provocado pelo estado hipertireóideo, visto que tanto a OC como o ICTP apresentou forte correlação positiva com a TT4 e um pouco inferior com a FT4. A FT4 não apresentou correlação positiva com o ICTP, excetuando-se aos 28 dias. Observou-se baixa correlação, em todos os momentos, entre os marcadores do metabolismo ósseo e a densidade mineral óssea. Conclui-se que o excesso dos hormônios tireoidianos em gatos provocou aumento do remodelamento ósseo visto que ocorreu alta correlação entre estes hormônios e os marcadores do metabolismo ósseo. O hipertireoidismo provocou diminuição da DMO óssea, porém a OC e o ICTP apresentaram baixa correlação com esta variável. / The effect of experimental hyperthyroidism (150 g/kg/day/42 days) on calcium homeostasis and markers of bone metabolism was studied in fourteen shorthair cats from one to three years of age. Serum concentrations of unbroken PTH had a clear tendency to increase from beginning with significant differences from the initial to other moments. The ionized calcium significantly decreased at the 14 days in comparison to the initial moment and at the 42 days in comparison to the 14 days. The thyroid hormones showed positive correlation with PTH and negative with ionized calcium. In contrast, bone mineral density had a tendency of negative correlation with the PTH from the 28 days. Negative correlation of the PTH and calcium ionized was observed at 14, 28 and 42 days. In the present study, hyperthyroidism in young adult cats without concomitant illnesses did not present secondary hyperparathyroidism. However, increase of PTH and reduction of ionized calcium were observed. Serum concentrations of osteocalcin (OC) were significantly different among all four moments. The carboxi-terminal telopeptides of collagen type I (ICTP), a specific marker of the bone reabsorption, did not significantly differ (p<0.05) between moments. Bone turnover was probably caused by the hyperthyroid state, since OC and ICTP presented strong positive correlation with TT4 and a little less with free T4 (FT4). The FT4 did not present positive correlation with the ICTP, excepting at the 28 days. Positive correlation in all the moments between markers of bone metabolism and bone mineral density was very low. In conclusion, the high correlation between thyroid hormones and markers of bone metabolism indicates that the excess of thyroid hormones in cats may cause an increase of the bone turnover. Moreover, hyperthyroidism may cause reduction of the bone DMO, although OC and the ICTP had low correlation with DMO.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-31Bitstream added on 2014-06-13T20:23:10Z : No. of bitstreams: 1 ferrari_tb_dr_botib.pdf: 518983 bytes, checksum: a92b144737e4cd94348b4b38f4115b5a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O interesse pelo maracujazeiro-doce (Passiflora alata Curtis) tem crescido devido à qualidade dos frutos para consumo in natura e aos preços alcançados no mercado de frutas frescas. Iniciativas de expansão do cultivo de maracujazeiro-doce são de grande importância tanto para o mercado interno quanto para o externo. No entanto, muitos são os relatos de baixo percentual de germinação de sementes dessa espécie, o que dificulta a formação de mudas e de porta-enxertos vigorosos e, consequentemente, a formação de pomar uniforme e com boa produção. Isso sugere que trabalhos que estudem o metabolismo germinativo de sementes de maracujazeiro-doce sejam de grande importância. Sendo assim, foram instalados dois experimentos no Departamento de Botânica e um experimento no Departamento de Química e Bioquímica do Instituto de Biociências, da Unesp, Botucatu, SP com a finalidade de atingir os objetivos propostos. O primeiro experimento constou em determinar as fases da germinação das sementes de P. alata submetidas a concentrações de GA3 e GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina, enquanto que o segundo experimento estudou os efeitos desses reguladores vegetais na germinação do maracujá-doce. O delineamento experimental dos dois experimentos foi inteiramente casualizado, com 11 tratamentos e cinco repetições de 25 sementes por parcela, seguindo esquema fatorial 2x5 (reguladores x concentrações) e uma testemunha (água destilada) em comum. As concentrações utilizadas foram 100, 200, 300, 400 e 500 mg L-1 tanto para GA3 quanto para GA4+7 + N-(fenilmetil)- aminopurina. As sementes foram acondicionadas em ‘gerbox’ preto, contendo 10 mL das soluções com os reguladores vegetais e levadas à câmara de germinação, com temperatura alternada entre 20ºC por 8 h e 30ºC por 16 h. Para o experimento um foram avaliados grau de umidade das sementes, germinabilidade, velocidade e... / Interest in sweet passion fruit (Passiflora alata Curtis) has grown due to the quality of fruits for consumption in natura and prices achieved in the fresh fruit. Initiatives to expand the cultivation of sweet passion fruit are of great importance both for the domestic market and for the external. However there are many data of low percentage of seeds germination of this species. At this way, there is difficulty in the seedlings formation and vigorous rootstock and, consequently, in uniform orchard formation and with good production. This suggests that works to study the metabolism of sweet passion fruit seed germination have great importance. So, it had been installed two experiments at Department of Botany and one experiment at Department of Chemistry and Biochemistry, Bioscience Institute, in São Paulo State University, Botucatu, SP, with the aim to reach the considered purpose data. The first one had consisted of the determination of seeds germination phases subjected to concentrations of GA3 and GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine. The second experiment studied the effects of plant growth regulators on sweet passion-fruit germination. The experimental design had been totally randomized, with 11 treatments and five replications of 25 seeds in each plot, following factorial design 2 x 5 (regulators x concentrations), and a common control (distilled water). The seeds had been submitted to the following treatments: 100, 200, 300, 400 and 500 mg L-1, for GA3 and also for GA4+7 + N- (phenylmethyl)-1H-purine-6-amine. The seeds had been sown in black containers, containing 10 mL of solutions with plant growth regulators, and taken to the germination chamber, with temperature alternated between 20ºC for 8 hours and 30º for 16 hours. The seeds moisture degree (%), the percentage of germination, average time of germination, average speed of germination and total percentage of ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-11Bitstream added on 2014-06-13T19:03:08Z : No. of bitstreams: 1 ehlert_pad_dr_botfca.pdf: 437229 bytes, checksum: f0831a89a35fb6fe8519d87cf7342229 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este trabalho foi elaborado visando determinar a influência da idade e horário de colheita para a erva-cidreira brasileira, Lippia alba (Mill.) N. E. Br., quimiotipo carvona-limoneno, sobre a produção de massa foliar, rendimento e composição do óleo essencial, bem como os teores e quantidades extraídas dos macronutrientes. O trabalho constou de dois experimentos, no primeiro testou-se diferentes idades de colheita em quatro épocas de plantio, e no segundo cinco horários de colheita, porém somente em uma época. Os experimentos foram estabelecidos na Fazenda Experimental Lageado da FCA-UNESP/Botucatu no Setor de Horticultura do Departamento de Produção Vegetal. Os plantios do primeiro ensaio foram realizados nas seguintes épocas: outubro de 2000, e janeiro, maio e julho de 2001, constando de nove idades de colheita por época. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, através de um arranjo fatorial 9x4, sendo nove idades de colheita em quatro épocas de plantio com quatro repetições cada. Cada parcela tinha 30 plantas, sendo 12 plantas úteis e um total de 888 plantas para cada época. A colheita foi realizada a cada 15 dias, a partir dos 100 dias após o plantio até completar 220 dias. Neste ensaio também se verificou os teores e a extração dos macronutrientes das folhas. O segundo ensaio constou de cinco horários: às 8:00, 10:00, 12:00, 14:00 e 16:00 h com cinco repetições, distribuídos em blocos casualizados, sendo efetuada somente uma colheita aos 145 dias. As colheitas para ambos experimentos foram realizadas a 15 cm da superfície do solo... . / This work was elaborated with the purpose to determine the influence of age and schedules of harvest for the Brazilian lemon verbena, Lippia alba (Mill.) N.E. Br., chemotype carvone-limonene, its foliar mass production, efficiency and composition of the essential oil, as well as, the contents and quantities extracted form the macronutrients through their leaves. The work consists of two experiments, in the first one, different intervals of crops were tested in the four seasons of the year, in the second one, five different schedules of cropping, but, only in summer. The experiments were established at the Experimental Farm of Lageado of FCA-UNESP/Botucatu in the Horticulture Sector of the Department of Vegetable Production. The plantings of the first testing were done in the following seasons: October 2000, January, May and July 2001, being observed 9 harvest ages each season. The experimental delineation used was of chance blocks, through a 9X4 factor arrangement, being 9 crop intervals in 4 seasons with 4 repetitions of each. Each portion had 30 plants, being that 12 plants were useful and a total of 888 plants for each season. The harvest was accomplished every 15 days, starting after 100 days of age, until it completed 220 days. In this trial the tenor and the extraction of the macronutrients of the leaves were also verified. The second trial was of the time of the.harvest which had five schedules: at 8:00, 10:00, 12:00, 14:00 and 16:00 hrs with 5 repetitions, distributed in 5 chance blocks, only one harvest being done at 145 days. The harvests for both experiments were done at 15 cm from the soil surface... (Complete abstract, click electronic address below).

Orientadora : Dra. Carolina Arruda de Oliveira Freire / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 20/02/2017 / Inclui referências / Resumo: A capacidade de sobreviver frente a variações ambientais, como pH, oxigênio, salinidade etc., está diretamente relacionada à ativação de mecanismos regulatórios. Estes garantem o equilíbrio osmótico e iônico, e mantém desta forma a homeostase do meio interno. A diversidade de estratégias apresentadas pelos crustáceos reflete na diversidade de ambientes onde estão inseridos. Neste contexto o objetivo do trabalho foi avaliar o papel dos mecanismos osmorregulatórios e de reparação celular em Macrobrachium acanthurus frente a exposições salinas de curta e longa duração. No capítulo I, indivíduos foram submetidos a alterações de salinidade em diferentes tempos de exposição a fim de avaliar o efeito de diferentes intervalos de exposição ao estresse salino in vivo na expressão da proteína de choque térmico (HSP70) muscular. No capítulo II, os animais foram expostos a salinidade 20 psu em diferentes tempos de exposição de forma a avaliar a atividade branquial da anidrase carbônica e mecanismos osmorregulatórios diante desafio hipersalino por um curso temporal. Em ambos os estudos o camarão apresentou estratégia hiperreguladora frente a salinidades baixas. No capítulo I, os animais apresentaram estratégia hiporregulatória após seu ponto isosmótico devido, provavelmente, a alguma capacidade de secreção ativa de sal pelas brânquias, aliada a um controle de permeabilidade para reduzir a entrada de sal. Mecanismos de regulação de volume celular e a ativa secreção de sal foram responsáveis pela manutenção da homeostase do meio interno nas condições 15 e 25 psu. Na condição de 35 psu os animais hipoconformaram, e expressão da HSP70 foi observada de forma variada. Apesar disso, é possível que a diferença energética entre a osmorregulação e a síntese de proteínas de estresse tenha influenciado a expressão de proteínas. No capítulo II, a exposição abrupta à salinidade de 20 psu levou à redução nas trocas iônias branquiais, causando diminuição da captação iônica e perda de água. Como resultado, houve aumento na atividade da anidrase carbônica, levando à aumento da concentração de Cl-. Desta forma fica clara a ligação entre os mecanismos de respostas e os estressores aqui utilizados, bem como a influência do tempo de exposição e grau de salinidade na expressão da HSP70 e na atividade da anidrase carbônica. Os resultados obtidos no presente estudo são frente ao estresse abrupto, sendo possível que a resposta adaptativa frente ao aumento salino gradual, seja diferenciada. Palavras chave: hipoconformador; metabolismo; crustáceo; osmorregulação; HSP70. / Abstract: The ability to survive in the face of environmental changes, such as pH, oxygen, salinity, etc., is directly related to the activation of regulatory mechanisms. These ensure the osmotic and Ionic balance and keeps the homeostasis of the internal medium. The diversity of strategies presented by crustaceans reflects the diversity of environments where they are inserted. In this context the aim of this work was to evaluate the osmorregulatory role and cell repair mechanisms in Macrobrachium acanthurus front exhibitions short and long-term salt exposure. In chapter I, individuals were subjected to different salinity changes under diferent exposure times in order to assess the effect of different ranges of salinity exposure on stress in vivo in the expression of heat shock protein (HSP70). In chapter II, the animals were exposed to 20 psu salinity at different exposure times in order to evaluate the activity of Gill carbonic anhydrase and osmorregulatory mechanisms on hypersaline challenge by a temporal course. In both studies the shrimp keeps an hyperregulatory strategy presented front to low salinity. In chapter I, the animals showed an hiporregulatory strategy after your isosmotic point due probably to some active salt secretion capacity by gills, combined with a control of permeability to reduce salt uptake. Regulatory mechanisms of cell volume and active salt secretion has been responsible for the maintenance of the homeostasis of internal conditions 15 and medium 25 psu. Provided 35 psu animals hypoconforming, and HSP70 expression was observed in varied form. Nevertheless, it is possible that the energy difference between the osmorregulação and the synthesis of stress proteins have influenced the expression of proteins. In chapter II, the abrupt exposure to salinity of 20 psu led to a reduction in branchial ion exchanges, causing decreased ion uptake and loss of water. As a result, there was an increase in the carbonic anhydrase activity, leading to an increase in the concentration of Cl-. This way is a clear link between the answers and the stress here used, as well as the influence of exposure time and the degree of salinity on expression of HSP70 and carbonic anhydrase activity. The results obtained in this study are front of the abrupt and may stress the adaptive response in the face of the increasing gradual saline, is distinguished. Key words: hypoconformer; metabolismo; crustacean; osmoregulation; HSP70.

Orientador : Drª. Lucélia Donatti - UFPR / Coorientador : Lars Tomanek, PhD. California Polytechnic State University, EUA / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 27/08/2015 / Inclui referências : f. 132-159 / Área de concentração : Biologia celular e molecular / Resumo: O impacto de metais sobre os organismos vivos pode ser evidenciado em diferentes níveis de organização biológica a partir de moléculas e células, chegando a comunidades e aos ecossistemas. A lapa Nacella conccina e encontradas na região litorânea e zona de infralitoral da Antártida onde na Baia do Almirantado se localiza a Estação Antártica Brasileira Comandante Ferraz (EACF), local deste estudo. Durante os experimentos N. concinna (N=6/metal/concentracao/tempo) foram expostos a duas concentrações de chumbo (0,9 PgL-1 e 3,0 PgL-1) e cobre (0,12 PgL-1 e 0,25 PgL-1) nos tempos de 12, 24, 48 horas para ambos os metais e 168 horas somente para o chumbo. A temperatura de 0°C e a salinidade de 34% foram mantidas constantes. As brânquias foram congeladas em nitrogênio liquido e analisadas através de técnicas de proteomica. Foram quantificadas as mudanças na abundancia de proteinas a partir de géis gerados por eletroforese 2D. As proteinas foram identificadas por espectrometria de massa tandem. Para as brânquias de N. concinna expostas ao chumbo e ao cobre um grupo semelhante de proteinas alteradas foi observado. Foram identificadas proteínas antioxidantes, incluindo a Mn-superoxido dismutase e a Ferri tina indicando maior produção de especies reativas de oxigênio. As chaperonas envolvidas na maturação de proteínas presentes no reticulo endoplasmático apresentaram alterações possivelmente devido a uma mudança no estado redox deste compartimento celular. A maior abundancia de subunidades do proteassoma pode evidenciar maiores taxas de desnaturação de proteínas pelo proteassoma. Os metais também levaram a alterações na anidrase carbonica, provavelmente decorrente de alterações no equilíbrio acida-base das células branquiais. Proteínas metabólicas, como a arginina quinase, a triose fosfato isomerase glicolitica e a enolase, bem como a piruvato desidrogenase, tiveram seu volume alterado, o que pode estar relacionado a uma maior taxa de renovação de ATP. Finalmente, observamos a alteração na abundancia de uma isoforma da Cdc42, uma proteína de sinalização com função de modificar componentes do citoesqueleto. Possíveis efeitos em cascata da alteração da Cdc42 incluem mudanças da miosina e paramiosina. Nós supomos que, a substituição de metais ligados a proteínas pelo chumbo ou cobre causou um aumento de ROS e um desafio acida-base em brânquias, provocando uma inibição de maturação de proteínas no reticulo endoplasmatico, um aumento no tamponamento de ATP por arginina quinase e proteínas glicoliticas, bem como mudanças na abundancia de Cdc42 que afetaram filamentos do citoesqueleto. Estes fatos colaboram na elucidacao das ligações entre o metabolismo, balanço energético e tolerância ao estresse em organismos antárticos, neste caso, a lapa antartica N. concinna. Palavras-chave: Antártica, anidrase carbonica, Cdc42, chaperoninas, metabolismo energético, metal, estresse oxidativo, homeostase proteica. / Abstract: The impact of metals on living organisms may be evidenced at different levels of biological organization from molecules and cells, reaching communities and ecosystems. The limpet Nacella conccina is found in the coastal region and subtidal zone of Antarctic, including the South Shetlands archipelago islands and the King George Island where is the Brazilian Antarctic Station Comandante Ferraz (EACF), local of this study. Samples of N. concinna were collected in Admiralty Bay at Punta Plaza (62 ° 04'14,5 "S, 58 ° 24'11,9" W) and Botany Point (62 ° 06'15 7 "S, 58 ° 21'14,0" W) during 2011 and 2012 austral summer. During the experiments specimens (n = 6 / metal / concentration / time) were exposed to two concentrations of lead (0.9 ?gL -1 and 3.0 ?gL-1) and copper (0.12 ?gL-1 and 0.25 ?gL-1) during 12, 24, 48 hours for both metls and 168 hours for lead. The temperature was 0 ° C and salinity was maintained constant at 34%. The gills were frozen in liquid nitrogen and analyzed by proteomic techniques. Changes in abundance of proteins were quantified in 2D gels generated by electrophoresis. Proteins were identified by tandem mass spectrometry. Gills exposed to lead and copper had a similar changed proteins. Antioxidant proteins were identified, including Mn-superoxide dismutase and ferritin indicating increased production of reactive oxygen species. The chaperone involved in the maturation of proteins in the endoplasmic reticulum showed significant differences possibly due to a change in redox state of this cellular compartment. The greater abundance of proteasome subunits may indicate higher rates of denaturation of proteins by the proteasome. Metals also led to a change in carbonic anhydrase, which may be due to changes in acidbase balance of gill cells. Metabolic proteins, such as arginine kinase, triose phosphate isomerase and glycolytic enolase and pyruvate dehydrogenase, had changed their volumes in gels, which can be related to a higher rate of ATP renewal. Finally, we note the change in the abundance of an isoform of cdc42, a signaling protein related to modify cytoskeletal structures. Possible downstream effects of cdc42 included possible shifts in myosin and paramyosin. We assume that the substitution of metals bound to proteins by lead or copper caused an increase of ROS and a challenge in acid based on gills, causing inhibition of the protein maturation in the endoplasmic reticulum, an increase in buffering ATP and the glycolytic protein arginine kinase, as well as changes in the abundance of cdc42 affecting cytoskeletal filaments. Facts those who collaborate in the elucidation of links between metabolism, energy balance and stress tolerance. Keywords: Antarctic, carbonic anhydrase, Cdc42, chaperonins, energy metabolism, ferritin, gills, heavy metal, oxidative stress, protein homeostasis.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1309.pdf: 889947 bytes, checksum: caf2fc030984ff45b3878c8ece85bb3c (MD5) Previous issue date: 2006-05-29 / Financiadora de Estudos e Projetos / The aim of this work was to investigate the metabolism of juvenile tambaqui (Colosssoma macropomum) fed 4 different protein (35, 30, 25 e 20,5 %) and lipids (4, 8, 11 e 14,5 %) levels in isoenergetic diets. The experiment was carried out in the facilities of the Adaptative Biochemistry Laboratory, located in the Genetics and Evolution Department of the Federal University of São Carlos. Fish growth, hematological parameters, digestives enzymes (unspecific proteases, unspecific lipase and amylase), metabolites (glucose, lactate, piruvate, ammonia, protein, fat acids, triglycerides, amino acids and glycogen), and the enzymes LDH, MDH, GDH, ASAT and ALAT were assayed. The hematological parameters presented no significant alterations. Tambaqui digestive enzymes were responsive to dietary levels of protein and lipids. Fish from the treatments I and II depicted the best growth. In contrast, the lowest one was observed in fish fed with the treatments III and IV. We detected glycolysis, glycogenolysis and lipolysis in livers in accordance the increase of the dietary lipid. It was observed muscular glycogenesis and gluconeogenesis from amino acids and lipolysis to energetic supply in fish fed with high lipid levels. The plasma metabolic profile reflected the function of blood metabolite deliver among the tissues underlining biochemical adaptations due to alterations on the fish feeding. In conclusion, dietary protein and lipid levels induced tambaqui digestive enzymes. The increase of dietary lipid resulted in fish growth decreased, augmented the liver glycolysis and glycogenolysis, increase the muscular glucogenesis and the gluconeogenesis. The fish metabolism seemed to be predominantly lipolitic. / Este trabalho foi realizado no Laboratório de Bioquímica Adaptativa do Departamento de Genética e Evolução da UFSCar, onde propusemo-nos a estudar os aspectos digestivos e metabólicos de juvenis de tambaqui, Colossoma macropomum, alimentado com quatro dietas isoenergéticas com diferentes níveis de proteína (35, 30, 25 e 20,5 %) e lipídio (4, 8, 11 e 14,5 %). Foram analisados os parâmetros hematológicos, a porcentagem de ganho em peso, as atividades das enzimas digestivas (proteases inespecíficas, lipase inespecífica e amilase), intermediários metabólicos (glicose, lactato, piruvato, amônia, proteína, ácidos graxos livres, triglicerídeos livres, aminoácidos e glicogênio) no fígado, músculo branco e plasma e enzimas do metabolismo (LDH, MDH, GDH, ASAT e ALAT). Os resultados obtidos indicaram que os parâmetros hematológicos não apresentaram alterações em função dos níveis de nutrientes das dietas. As enzimas digestivas foram responsivas à mudança nos teores de proteína e lipídio das dietas. Os tratamentos I e II apresentaram as melhores porcentagens de ganho em peso quando comparados aos tratamentos III e IV. O fígado realizou glicólise, glicogenólise e lipólise conforme aumentou o teor de lipídio na dieta. O músculo branco realizou glicogênese, neoglicogênese a partir de aminoácidos e lipólise para atender a demanda energética quando os teores de lipídio aumentaram nas dietas experimentais. O perfil metabólico do plasma refletiu seu papel de transporte dos diversos intermediários metabólicos entre os tecidos, refletindo os ajustes bioquímicos do metabolismo de tambaqui frente às mudanças na composição das dietas. Concluímos que as enzimas digestivas de tambaqui são induzidas pela concentração de proteína e lipídio da dieta, o aumento do teor de lipídio da dieta diminuiu a porcentagem de ganho em peso dos animais, aumentou a glicólise e a glicogenólise hepáticas, aumentou a glicogênese e a neoglicogênese musculares. A preferência metabólica nas condições ensaiadas para manutenção dos processos de produção de energia foi lipolítica.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissRYC.pdf: 1122963 bytes, checksum: 12d80966004f3d6d2564291418e03dad (MD5) Previous issue date: 2007-05-25 / Financiadora de Estudos e Projetos / For the nutrients ingested by fish are used for growth and maintenance of the energetical metabolism, they need firstly being absorbed by gastrointestinal tract. However, the most foods ingested cannot be absorbed directly through the gastrointestinal mucosa, since they are largely formed by high molecular weight molecules. The process of transforming large molecules into smaller is catalyzed by digestive enzymes. Therefore, a limiting factor to the food absorption is the availability of those enzymes. Their synthesis and the secretion can be stimulated by free amino acids in the gastric and intestinal lumen. We have investigated the effect of free essential amino acids (AAEL) supplementing the diets on the synthesis of digestive enzyme and the intermediary metabolism of matrinxa. Six fish groups were submitted to different feeding condition for 15 days. The control group was fed with 34% of protein and 4.670 kcal of gross energy by kg of food. Maize starch and soy oil were used as energy source. The second group, called SO, was fed with casein and gelatin as protein source and maize starch as energy source. The third group, called SO+AAEL, was feed with a similar food wherein the 0.6% of cellulose, added as inert stuff, was replaced by a mixture conteining 0.1% of phenylalanine, 0.1% tryptophane, 0.1% valine, 0.1% histidine, 0.1% arginine and 0.1% leucine. The fourth group, called SA, was feed with casein and gelatin as protein source and soy oil as energy source. The fifth group, called SA+AAEL, was feed with a similar food but 0.6% of cellulose was replaced by a mixture of six AAEL, just as above. The last group was kept in fast over the experimental period. After the experimental period, 9 fish from each treatment were sampled. The blood was withdrawn and white muscle, liver and digesting treat were excised. The amylolytic, proteolytic and lipolytic activities assayed in digestive tract homogenates were responsive to diet composition, mainly to the absence of starch and the addition of FEAA. The present set of data indicates that the matrinxa is able to adjust these enzymes production toward digestive process optimization. The alterations in plasmatic, muscular and hepatic metabolic intermediaries concentration become evident that the matrinxa is able to adapt its intermediary metabolism to the changes on the feeding condition to preserve vital functions. However the increase of the enzymatic activity in the fed with the diet AAEL did not result in significant modification on the intermediary metabolism. / Para que os nutrientes ingeridos pelo peixe sejam utilizados para o crescimento e para a manutenção do metabolismo energético, eles, primeiramente, precisam ser absorvidos pelo trato gastrointestinal do animal, porém a maioria dos alimentos ingeridos pelos peixes não podem ser absorvidos diretamente pela mucosa gastrointestinal, já que são constituídos em grande parte por moléculas de alto peso molecular. O processo de transformação em moléculas menores é catalisado por enzimas digestivas. Desta forma, um dos fatores que limita absorção do alimento é a disponibilidade dessas enzimas. Sua síntese e a secreção podem ser estimuladas pela presença de aminoácidos livres no lúmen gástrico e intestinal. Neste trabalho avaliamos o efeito de aminoácidos essenciais livres (AAEL) adicionados à dieta sobre a síntese de enzimas digestivas e no metabolismo intermediário de matrinxã. Seis grupos de peixes foram submetidos a condições alimentares diferentes durante 15 dias. O grupo controle recebeu uma ração com 34% de proteína e 4.670 kcal por kg de ração de energia bruta. O segundo grupo, chamado SO, foi alimentado com uma ração que continha caseína e gelatina e amido de milho. O terceiro grupo, denominado SO+AAEL, foi alimentado com uma ração semelhante à anterior, porém 0,6% celulose foi substituída por uma mistura 0,1% de fenilalanina, 0,1% de triptofano, 0,1% de valina, 0,1% de histidina, 0,1% de arginina e 0,1% de leucina. O quarto grupo, chamado SA, foi alimentado com uma ração que continha caseína e gelatina e óleo de soja. O quinto grupo, denominado, SA+AAEL, foi alimentado com uma ração semelhante à anterior, porém a 0,6% celulose foi substituída por seis AAEL, tal como explicado acima. O último grupo ficou em jejum durante período experimental. Após o período experimental, 9 peixes de cada tratamento foram amostrados para a coleta de sangue, músculo branco, fígado e trato digestório. As atividades amilolítica, proteolícica inespecífica, tríptica e lípolítica ensaiadas no sobrenadante dos homogeneizados tissulares do trato digestório apresentaram ajustes devido à modificação da composição da dieta, principalmente devido a ausência de amido e à adição de AAEL. O presente conjunto de dados indica que o matrinxã é capaz de ajustar a secreção dessas enzimas para otimizar seu processo químico digestivo. As alterações das concentrações dos intermediários metabólicos plasmáticos, musculares e hepáticos tornam evidente que o matrinxã é capaz de adaptar seu metabolismo intermediário frente à alteração da condição alimentar para manter suas funções vitais. Porém o aumento da atividade enzimática nos grupos que receberam uma dieta com AAEL não provocou modificação significativa do metabolismo intermediário.