A cultura do milho é responsável por 40% dos grãos produzidos no país, sendo considerada um dos segmentos mais importantes para a economia do agronegócio brasileiro. Devido ao seu alto valor nutritivo, o milho possui grande suscetibilidade ao crescimento de fungos, com destaque para Fusarium verticillioides, que além de causar danos nas raízes, colmos e espigas, é responsável por produzir fumonisinas, um grupo de micotoxinas termoestáveis e possivelmente carcinogênico, ao homem e animais. É sabido que apesar da importância não existem muitas informações associando a influência de diferentes fatores sobre a sua produção, principalmente nas condições tropicais brasileiras. Desta forma, estudos foram realizados com o objetivo geral de avaliar a influência de fatores ambientais, genótipos e métodos de inoculação de F. verticillioides na severidade da podridão de espigas, qualidade sanitária das sementes, produtividade do milho, na produção de fumonisinas e histopatologia em frangos de corte. As investigações aqui relatadas foram divididas em quatro capítulos. No primeiro capítulo, avaliou-se o efeito de fatores ambientais, genótipos e métodos de inoculação de F. verticillioides na produção de fumonisinas em grãos de milho. No segundo capítulo, comparou- se em locais diferentes métodos de inoculação artificial (spray, injetável) e natural de F. verticillioides em dez genótipos de milho pela quantificação da severidade da doença e produtividade. No terceiro capítulo, realizou-se um levantamento da população de F. verticillioides através de análise sanitária e transmissão do fungo à campo das plantas para as sementes e das sementes para as plântulas inoculados com diferentes métodos de inoculação. Por fim, o quarto capítulo, avaliou-se na safra de 2015/2016, procedentes de lavouras experimentais contendo cultura de milho, híbridos comerciais inoculados com F. verticillioides e determinou-se os parâmetros zootécnicos e histopatológicos em frangos de corte. O delineamento experimental para o primeiro e segundo capítulos, desenvolvidos em campo, foi igualmente realizado nos quatros locais estudados, sendo o de blocos ao acaso em fatorial de 10x3, com três repetições, sendo dez genótipos de milho e três métodos de inoculação. No terceiro capítulo, desenvolvido em laboratório, os experimentos tiveram o delineamento inteiramente casualizado, em fatorial de 10x3 com quatro repetições, sendo dez genótipos de milho e três métodos de inoculação. Utilizou-se as sementes provenientes dos híbridos que foram inoculados pelos três métodos de inoculação. Cada unidade experimental consistiu de um Gerbox contendo 25 sementes. No quarto capítulo, o experimento foi conduzido no aviário experimental da Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal do Tocantins, no campus de Araguaína-TO. Foram utilizados 160 pintos de um dia, frangos de corte da linhagem Cobb 500, distribuídos em delineamento experimental inteiramente casualizado, com dois tratamentos (ração basal de milho com ausência de fumonisina e a ração de grãos de milho com fumonisina), com 10 repetições contendo 8 aves cada. Todas as análises da concentração fumonisinas foram realizadas no Laboratório de Micotoxologia (LAMIC), da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), e utilizou-se a metodologia de quantificação denominada LC-MS/MS (Liquid Chromatography Mass Spectrometry) POP 45. Com relação aos resultados obtidos, para o primeiro capítulo, concluiu-se que não foi possível assegurar que grãos sintomáticos e assintomáticos quanto à infecção de Fusarium verticillioides, estejam livres de contaminação por fumonisinas e os métodos de inoculação por aspersão e o inoculado no centro da espiga não influenciaram em diferentes concentrações de fumonisinas. A produção de fumonisinas nos grãos de milho é potencializada por condições ambientais de temperatura elevada e pela susceptibilidade do genótipo e alta severidade de F. verticillioides. Nestas condições, houve tendência de produzir maiores teores de fumonisinas para a maioria dos genótipos avaliados. A produtividade de grãos foi reduzida pela incidência de F. verticillioides. Para o segundo capítulo, verificou-se que o método de inoculação artificial através de aspersão no estilo-estigma e o injetável no centro da espiga, proporcionaram maior intensidade da podridão da espiga, possibilitando diferenciar do método natural. Em Planaltina, verificou-se que o método de inoculação por aspersão resultou em maior severidade da doença, causada por Fusarium verticillioides do que o método de inoculação injetável no centro da espiga. Os híbridos de milho P4285, DKB390PRO2 e DKB310PRO2 foram os mais resistentes à podridão da espiga, nos quatro ambientes, enquanto que o híbrido 32R48YH apresentou a maior severidade da doença. O método de inoculação artificial foi o mais eficiente em ambientes de climas amenos e esta informação é importante na padronização do método para seleção e caracterização de genótipos de milho em programas de melhoramento. Para o terceiro capítulo, concluiu-se que as sementes oriundas de espigas inoculadas com spray apresentaram maior grau de incidência do patógeno, sendo este, o método mais eficiente de inoculação artificial de F. verticillioides na fase R1 para a avaliação de emergência de sementes. Os híbridos 32R48YH e o DKB240PRO2 tiveram o maior nível de infecção por F. verticillioides pois obtiveram a maior incidência do fungo. Enquanto que os híbridos P3630H e P4285H demostraram ser os mais resistentes, pois obtiveram as menores incidência do patógeno. Os híbridos P3250, 32R48YH e 30K75Y apresentaram menor percentagem de emergência quando a inoculação foi realizada pelo método injetável enquanto que os híbridos P4285H, 30K75Y e DOW30A37PW apresentaram menor percentagem de emergência quando a inoculação foi realizada pelo método spray. A transmissão da semente para a planta foi confirmada pela análise molecular. Verificou- se que, apesar das plantas não terem apresentado sintomas visíveis, pôde-se confirmar que houve infecção latente. A técnica de PCR foi capaz de revelar a presença do patógeno nas sementes de milho em menor nível de incidência avaliado (1%). No quarto capítulo, foi concluído que a concentração de 2,78μg/g de fumonisina determinada na ração não foi suficiente para provocar alterações nos parâmetros zootécnicos (peso das aves e no consumo de ração) e histopatológico (tecidos do intestino, fígado e coração) de aves da linhagem COBB 500, alimentadas até o 21° dia. As análises dos parâmetros zootécnicos e histopatológicos permitiram revelar concentrações mínimas e seguras de fumonisina que não provocaram danos toxicológicos em aves da linhagem COBB 500. Este é um importante parâmetro que pode contribuir nas etapas de produção de carnes e de produtos avícolas. / The corn crop is responsible for 40% of the grains produced in the country, being considered one of the most important segments for the Brazilian agribusiness economy. Due to its high nutritional value, maize is highly susceptible to fungus growth, especially Fusarium verticillioides, which besides causing damage to the roots, stalks and ears, is responsible for producing fumonisins, a group of thermostable mycotoxins and possibly carcinogenic, to man and animals. It is known that despite the importance, there is not much information associating the influence of different factors on its production, mainly in Brazilian tropical conditions. Studies were carried out with the general objective of evaluating the influence of environmental factors, genotypes and methods of inoculation of F. verticillioides on the severity of ear rot, seed quality, maize productivity, fumonisin production and histopathology in broilers. The investigations reported here were divided into four chapters. In the first chapter we evaluated the effect of environmental factors, genotypes and methods of inoculation of F. verticillioides on the production of fumonisins in corn grains. In the second chapter, was compared in different locations, methods of artificial (spray and injectable) and natural inoculation of F. verticillioides in ten maize genotypes by quantification of disease severity and productivity. In the third chapter a population of F. verticillioides was carried out through sanitary analysis and transmission of the fungus from plants to the seeds and from seeds to the seedlings inoculated with different methods of inoculation. Finally, the fourth chapter evaluated the harvest of 2015/2016 coming from crops containing commercial hybrids corn inoculated with F. verticillioides and the zootechnical and histopathological parameters were determined in broilers. The experimental design for the first and second chapters, conducted in the field, was also performed in the four localities studied, being a randomized block design in a 10x3 factorial scheme, with three replications, being ten maize genotypes and three inoculation methods. In the third chapter the experiments had a completely randomized design, in a 10x3 factorial scheme with four replications, being ten maize genotypes and three inoculation methods. Were used seeds from the hybrids that were inoculated by the three methods of inoculation. Each replicate consisted of a Gerbox containing 25 seeds. In the fourth chapter, the experiment was conducted in the experimental aviary of the School of Veterinary Medicine and Animal Science of the Federal University of Tocantins, on the campus of Araguaína-TO. A total of 160 broilers of Cobb 500 lineage (of one day old), were used in a completely randomized experimental design with two treatments (basal corn meal with no fumonisin and corn grain feed with fumonisin), with 10 replicates containing 8 broiler chicks each. All fumonisin concentration analyzes were performed at the Laboratory of Mycotoxology (LAMIC), Federal University of Santa Maria (UFSM), and the quantitative methodology called LC-MS / MS (Liquid Chromatography Mass Spectrometry) POP 45 was used. Regarding the results obtained, for the first chapter, it was concluded that it was not possible to assure that symptomatic and asymptomatic grains for Fusarium verticillioides infection are free from fumonisin contamination and the methods of inoculation by spraying and inoculation in the center of the ear did not influence different concentrations of fumonisins. Fumonisin production in maize grains is potentiated by high temperature environmental conditions and the susceptibility of the genotype and high severity of F. verticillioides. Under these conditions, there was a tendency to produce higher levels of fumonisins for most genotypes evaluated. The grain yield was reduced by the incidence of F. verticillioides. For the second chapter, it was verified that the method of artificial inoculation by sprinkling in the style-stigma and the injectable in the center of the spike, provided a greater intensity of the rot of the ear, allowing to differentiate of the natural method. In Planaltina, it was verified that the spray inoculation method resulted in a greater severity of the disease, caused by F. verticillioides than the injectable inoculation method in the center of the spike. Hybrids of maize P4285, DKB390PRO2 and DKB310PRO2 were the most resistant to ear rot in the four environments, while the hybrid 32R48YH showed the highest severity of the disease. The artificial inoculation method was the most efficient in mild climate environments and this information may be important in the standardization of the method for selection and characterization of maize genotypes in breeding programs. For the third chapter, it was concluded that the seeds from ears inoculated with spray presented a higher level of incidence of the pathogen, being this the most efficient method of artificial inoculation of F. verticillioides in the R1 phase for seed emergence evaluation. The hybrids 32R48YH and DKB240PRO2 had the highest level of infection by F. verticillioides because they had the highest incidence of the fungus. While the hybrids P3630H and P4285H proved to be the most resistant because they obtained the lowest incidence of the pathogen. Hybrids P3250, 32R48YH and 30K75Y presented a lower percentage of emergence when the inoculation was performed by the injectable method, while the hybrids P4285H, 30K75Y and DOW30A37PW showed a lower percentage of emergence when the inoculation was performed by the spray method. The transmission of the seed to the plant was confirmed by molecular analysis. It was found that, although the plants showed no visible symptoms, it was possible to confirm that there was a latent infection. The PCR technique was able to reveal the presence of the pathogen in maize seeds at a lower incidence level (1%). In the fourth chapter, it was concluded that the concentration of 2.78 μg/g of fumonisin determined in the diet was not sufficient to cause alterations in the zootechnical parameters (broilers weight and feed consumption) and histopathological parameters (intestinal, liver and heart tissues) of broilers of the COBB 500 lineage, fed until the 21st day. Analyzes of the zootechnical and histopathological parameters allowed to reveal minimum and safe concentrations of fumonisin that did not cause toxicological damages in broilers of Cobb 500 lineage. This is an important parameter that can contribute in the stages of production of meat and broiler chicks products.

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O milho (Zea mays) é um cereal amplamente cultivado no Brasil e no mundo. Sua produtividade pode ser afetada por diversos fatores incluindo a colonização fúngica. Em Fitopatologia, grãos afetados por fungos são denominados grãos ardidos e os gêneros mais encontrados em milho são Stenocarpella e Fusarium. Espécies de Fusarium podem causar podridões nas espigas e também podem produzir fumonisinas, toxina esta tóxica para animais e humanos e associadas ao desenvolvimento de diversas doenças. O presente trabalho teve como objetivo analisar a incidência de Fusarium ssp. com potencial toxigênico em amostras de grãos ardidos através da identificação da presença do gene fum5, responsável pela produção de fumonisinas pelo fungo, bem como quantificar os níveis de fumonisinas encontrados nessas amostras e comparação com os resultados obtidos de grãos assintomáticos. Um total de 100 amostras dos anos de 2006 e 2007 provenientes das principais regiões produtoras do Brasil foram submetidas à três análises. A primeira avaliou a incidência de Fusarium spp. nos grãos através do método do papel de filtro com congelamento e em 100% das amostras foi encontrado o fungo em níveis que variaram de 34 a 91%. A segunda análise utilizou a PCR para confirmação do gênero, identificação de espécies (F. verticillioides, F. proliferatum e F. subglutinans) e identificação da presença do gene fum5. A PCR confirmou 93% dos isolados como pertencentes ao gênero Fusarium. Os isolados negativos passaram por análise morfológica e todos foram confirmados. As PCRs para espécies identificaram 82% dos isolados como F. verticillioides, 3% como F. subglutinans e nenhum como F. proliferatum. A PCR para potencial toxigênico foi positiva para 81% dos isolados. A terceira análise consistiu na quantificação de fumonisinas (B1, B2 e B3 na proporção 5:3:1) através do método de ELISA e os níveis variaram de 4,4 a mais de 90 µg/g. Grãos assintomáticos da segunda safra de 2007 foram analisados separadamente para comparação. Em 100% das amostras houve incidência de Fusarium spp, variando de 74 a 87%. A PCR para confirmação do gênero foi positiva para 87% dos isolados e os demais passaram por análise morfológica e então confirmados. As PCRs para identificação de espécies mostrou 60% dos isolados como sendo F. verticillioides, 3% como F. subglutinans e nenhum como F. proliferatum. A maior concentração de fumonisinas nos grãos assintomáticos foi de 2,1 µg/g e em 53% das amostras não foram detectadas fumonisinas. Os resultados mostraram que há uma alta incidência de Fusarium spp. em grãos ardidos e assintomáticos. Grãos ardidos e assintomáticos têm Fusarium spp. com potencial toxigênico mas os níveis de fumonisinas encontrados nos grãos assintomáticos foram muito baixos em comparação com os encontrados nos grãos ardidos mostrando que, em condições adversas, esse fungo deixa de ser endofítico e passa a ser patogênico, podendo causar doenças na planta e produzir toxinas. Pelo fato das fumonisinas estarem concentradas nos grãos ardidos, a redução dessas toxinas da dieta deve ser baseada na eliminação dos mesmos através do controle do beneficiamento. / Maize is a cereal widely cultivated in Brazil and worldwide. Its productivity can be affected by numerous factors including fungal colonization. In pathological terms, affected grains by fungi are denominated rot grains and the two most prevalent genera found in maize are Stenocarpella and Fusarium. Species of Fusarium can cause rotting in the stalks and also produce fumonisins, which are toxic both for animals and humans since their occurrence is associated to many diseases. The present work aimed to analyse the incidence of Fusarium ssp. with toxigenic potential in rot grains samples through the identification of the presence of the gene fum5, responsible for the production of fumonisins, as well as to quantify the levels of fumonisins found in these samples and compare with the results obtained in asymptomatic grains. A total of 100 samples from the 2006 and 2007 harvests were collected from the main producing regions of Brazil and were submitted to three analyses. The first evaluated the incidence of Fusarium ssp. in the grains through the method of filter paper and freezing, which revealed incidences that varied from 34 to 91%. The second analysis used specific primers and PCR to confirm the genus and species (F. verticillioides, F. proliferatum and F. subglutinans) and to detect the presence of the fum5 gene. The results indicated that 93% of the isolates belonged to the genus Fusarium. The PCR - negative isolates were confirmed as Fusarium after morphological analysis. Eigthy two percent of the isolates were classified as F. verticillioides, 3% as F. subglutinans and none as F. proliferatum using speciesspecific PCR. The fum5 gene was detected in eighty one percent of the isolates. The third analysis consisted in the quantification of the fumonisins (B1, B2 e B3 in the proportion of 5:3:1) through the ELISA method and the levels varied from 4,4 to more than 90 µg/g. Asymptomatic grains from the second cropping season of 2007 were analyzed separately for comparison purposes. The incidence of Fusarium spp. in these varied from 74 to 87%. The PCR for confirmation of the genus was positive for 87% of the isolates. The PCRs for species identification showed 60% of the isolated as being F. verticillioides, 3% as F. subglutinans and none as F. proliferatum. The greater concentration of fumonisins in the asymptomatic grains was of 2,1 µg/g and in 53% of the samples fumonisins were not detected. Rot and asymptomatic grains presented Fusarium spp. with toxigenic potential but the levels of fumonisins found in the asymptomatic grains were much lower compared with rot grains, showing that, in adverse conditions, this fungus changes from endophytic to pathogenic, being able to parasitize the plant and to produce toxins. The fact that fumonisins levels are much higher in rot grains, a simple measure to reduce the levels of these toxins in the animal diet would be to eliminate them during processing.

O trabalho teve como objetivo avaliar a presença de fungos e aflatoxinas e ácido ciclopiazônico (ACP) em castanhas-do-brasil a campo e armazenadas, no solo e ar a fim de estabelecer vias de contaminação fúngica. A pesquisa de fungos foi feita pela técnica de semeadura em superfície em meio Ágar batata dextrose e Ágar Aspergillus flavus parasiticus e a determinação de micotoxinas, por cromatografia líquida de alta eficiência. As amostras a campo foram analisadas em: Dia 0; amostras na árvore, Dias 5, 10 e 15; em contato com solo 5, 10 e 15 dias, respectivamente. As armazenadas foram analisadas mensalmente por 11 meses. A campo, os fungos mais prevalentes foram: A. flavus em ouriços e amêndoas; Fusarium spp. em cascas. No solo foram isolados Penicillium spp. e Aspergillus flavus e no ar, Fusarium spp. e Penicillium spp. No armazenamento, em amêndoas, foi constatado A. flavus, Fusarium spp. e A. nomius; e em cascas, Fusarium spp. e A. flavus. Aflatoxinas e ACP não foram detectados. O aumento do tempo de contato das castanhas-do-brasil com o solo foi acompanhado de maior isolamento de A. flavus; sugerindo contaminação da castanha durante etapa a campo. A. nomius e A. parasiticus foram isolados apenas no armazenamento, indicando contaminação no estoque das amêndoas. / The objective of this present study was analyse, in the field and in the storage, mycobiota and the contamination by (aflatoxins and cyclopiazonic acid from Brazil nuts, soil and air samples to determine route of fungi contamination. The Brazil nuts mycobiota was determine by diluition plating method in Potate Dextrose Agar and Aspergillus flavus parasiticus agar and, micotoxins was done by high performance liquid chromatography. Field samples were collected in: day 0, samples still on the tree; days 5, 10 and 15, samples in contact with soil for 5, 10 and 15 days, respectively. The most prevalent fungi were Aspergillus flavus in fruit pods and nuts and Fusarium spp. in shells. Penicillium spp. and A. flavus were isolated from soil, and Fusarium spp. and Penicillium spp. from air. The storage samples were analysed montly during 11 months; and showed predominance A. flavus, Fusarium spp. e A. nomius in nuts, and Fusarium spp. and A. flavus in shells. Aflatoxins and cyclopiazonic acid were not detected. These findings indicate soil as the main source of fungal contamination of Brazil nuts. A. nomius e A. parasiticus were isolated only in storage, suggesting Brazil nuts contamination occurs in this period.

A cultura do milho é um dos segmentos mais importantes para a economia do agronegócio brasileiro, sendo responsável por 37% dos grãos produzidos no país. Entretanto, devido ao seu alto valor nutritivo, possui grande suscetibilidade ao crescimento fúngico, com destaque para Fusarium sp. que além de agente deteriorante é responsável por produzir fumonisinas, um grupo de micotoxinas de caráter termoestável e possivelmente carcinogênico, associada a surtos ocorridos em equinos, suínos e aves. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência de fumonisinas em milho e seus derivados durante o processo de industrialização. Um total de 1200 amostras (300 de milho, 300 de canjica, 300 de grits e 300 de farinha de milho) foram coletadas durante o processamento do milho no mês de maio de 2016 e submetidas a quantificação de fumonisinas pelo método de imunoensaio ROSA® Fumonisin Quantitative, cujo limite de detecção foi de 250 µg/kg. Paralelamente foram coletadas aleatoriamente 23 amostras (9 de milho e 14 de farinha), que foram submetidas simultaneamente a quantificação de fumonisinas pelo método ROSA® e pelo método Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, acoplado a espectrometria de massa sequencial LC MS/MS, a fim de estudar a existência de uma correlação entre os métodos. Das 1200 amostras analisadas, 370 (30,83%) apresentaram resultado positivo para fumonisinas totais, com concentrações variando de 278 a 1.522 µg/kg no milho, de 293 a 1.240 µg/kg na canjica, de 269 a 445 µg/kg no grits e de 267 a 512 µg/kg na farinha de milho. Entretanto, os teores de fumonisinas detectados no milho e derivados encontraram-se abaixo dos limites máximos tolerados pela legislação brasileira, sendo portanto, considerados aptos para consumo humano. O método ROSA® utilizado para quantificação de fumonisinas neste trabalho apresentou uma correlação de Pearson positiva forte (r = 0,98) com o método oficialmente empregado, indicando a possibilidade de utilização na quantificação de micotoxinas pelas indústrias processadoras, que necessitam de resultados rápidos, confiáveis e de baixo custo. Contudo, apesar dos níveis de fumonisinas detectados não representarem um risco à saúde dos consumidores, sugere-se um monitoramento constante de produtos à base de milho, tendo em vista que a contaminação por micotoxinas depende de um conjunto de fatores e representa um grande desafio para as indústrias processadoras de milho. / The culture of corn is one of the most important segments for the economy of the Brazilian agriculture industry, being responsible for 37 % of the grains produced in the country. Therefore, due to its high nutritious value, it possesses a great vulnerability of fungus growth, especially for the Fusarium sp., which is a deteriorate agent and responsible for producing fumonisin, a group of mycotoxins of carcinogenic character and term stable, associated to outbreaks that reach to equine, suine and poultry and also lead to esophagus cancer in humans. Thus, the aim of this work was to evaluate the incidence of fumonisin in the corn and its derivatives during the industrialization process. A total of 1200 samples (300 maize, 300 of hominy, 300 of grits and 300 of corn flour) was collected among the processing of corn during May 2016 and submitted to fumonisin quantification by method of immunoassay ROSA® Fumonisin Quantitative Method. The detection limit was 250 µg/kg. In order to verify the existence of a Pearson correlation between two different methods for fumonisin quantification, other 23 samples (9 maize and 14 flour) were randomly collected in a parallel study, followed by fumonisin quantification by simultaneously ROSA® Fumonisin Quantitative Method and the Liquid Chromatography-Mass Spectrometry LC-MS/MS. Of the 1200 samples analyzed, 370 (30,83%) tested positive for total fumonisins with concentrations ranging 278-1.522 µg/kg in corn, 293-1.240 µg/kg in hominy, 269-445 µg/kg in grits and 267-512µg/kg in corn flour. However, fumonisin levels detected in corn and derivatives were lower than the maximum level established by Brazilian law, and therefore able for human consumption. The ROSA® method for fumonisin quantitation used in this work showed a strong positive Pearson correlation (r = 0.98) with the official method employed, indicating the possibility of its use in the quantification of mycotoxins by the processing industries, that require fast, reliable and cost-effective results. Despite the detected levels fumonisins did not represent any risks to the consumers health, the corn products monitoring there must be constant, seeing that the contamination through mycotoxins depends on a group of factors and represents a great challenge to the corn manufacturing industries.

O leite é uma das principais fontes de nutrientes essenciais ao crescimento, desenvolvimento e manutenção da saúde humana. No entanto, pode também ser um veículo de agentes tóxicos, causando sérios riscos à saúde em indivíduos que o consomem, em especial as crianças. Dentre os contaminantes de alimentos, as aflatoxinas se destacam, as quais são metabólitos secundários fúngicos relevantes na saúde humana e animal. Entre os análogos de aflatoxinas identificados até o momento, a aflatoxina B1 (AFB1) é a mais prevalente e a mais tóxica; quando ingerida por animais esta sofre biotransformação hepática convertendo-se parcialmente em aflatoxina M1 (AFM1), que é excretada no leite. Entretanto, estudos recentes tem demonstrado a presença de AFB1 em leite, discordando da literatura quanto à completa conversão desta em AFM1. Uma vez presente no leite, estas aflatoxinas podem resistir a maioria dos tratamentos para obtenção de derivados lácteos; portanto, podem estar presentes nos queijos e iogurtes. Neste trabalho, o objetivo foi avaliar a capacidade do Lactobacillus acidophilus isolado e em conjunto com prebióticos (inulina, oligofrutose, β-glucana e polidextrose) em reduzir a concentração de AFB1 e AFM1 e o efeito sobre a bioacessibilidade após digestibilidade em um modelo de digestão in vitro em leite contaminado artificialmente. Para tal, foi aplicado um delineamento experimental do tipo PlackettBurman para a avaliação do efeito de seis variáveis do processo (concentração de aflatoxina, tempo de incubação e concentração dos quatro prebióticos), um controle negativo (leite integral puro) e um controle positivo (leite integral fortificado com aflatoxina). Todos os ensaios com a adição do probiótico e prebióticos promoveram redução da AFB1 e AFM1 em leite, bem como da sua bioacessibilidade. Os níveis de redução variaram de 13,53 e 35,53% para AFB1 e 17,61 e 71,52% para AFM1. Quando comparada com o controle positivo a bioacessibilidade para AFB1 variou de 23,68 a 72,67% e 0% para AFM1 (100% de redução de bioacessibilidade). Para verificar a interação do probiótico e prebióticos com as aflatoxinas e possível modificação na estrutura proteica do leite, foi realizada espectroscopia na região do infravermelho por transformada de fourier (FTIR). Foi detectada alteração da região amida I (1700-1600cm-1) nos tratamentos adicionados do probiótico e prebióticos em relação ao tratamento contendo somente as aflatoxinas e leite, o que sugere a ocorrência de um deslocamento das aflatoxinas que estão ligadas a fração proteica do leite para a parede celular do probiótico. / Milk is a major source of essential nutrients for the growth, development and maintenance of human health. However, it can also be a vehicle for toxic agents, causing serious health risks in individuals who consume it, especially children. Among the food contaminants, aflatoxins stand out, which are important secondary fungal metabolites in human and animal health. Among aflatoxin analogues identified to date, aflatoxin B1 (AFB1) is the most prevalent and most toxic. When ingested by animals it undergoes hepatic biotransformation partially converting to aflatoxin M1(AFM1), which is excreted in the milk. However recent studies have demonstrated the presence of AFB1 in milk, disagreeing in the literature about the complete conversion of AFB1 to AFM1. Once present in milk, these aflatoxins can withstand most treatments to obtain dairy products; Therefore, may be present in cheeses and yogurts. The objective of this study was to evaluate the ability of Lactobacillus acidophilus alone and in conjunction with prebiotics (inulin, oligofrutose, β-glucan and polydextrose) to reduce the concentration of AFB1 and AFM1 and the effect on bioavailability after digestibility in a digestion model In vitro in artificially contaminated milk. For this, a Plackett-Burman experimental design was used to evaluate the effect of six process variables (aflatoxin concentration, incubation time and concentration of the four prebiotics),a negative control (pure whole milk) and a positive control (Whole milk fortified with aflatoxin). All probiotic and prebiotic assays promoted reduction of AFB1 and AFM1 in milk as well as its bioavailability. Reduction levels ranged from 13.53 and 35.53% for AFB1 and 17.61 and 71.52% for AFM1. When compared to the positive control the bioaccessibility for AFB1 ranged from 23.68 to 72.67% and 0% for AFM1 (100% reduction in bioaccessibility). To verify the interaction of probiotic and prebiotics with aflatoxins and possible modification in the protein structure of the milk, spectroscopy was performed in the infrared region by fourier transform (FTIR). It was detected alteration of the amide I region (1700-1600cm-1) in the probiotic and prebiotic treatments in relation to the treatment containing only aflatoxin and milk, suggesting the occurrence of aflatoxin displacement that is linked to the milk protein fraction to the cell wall of the probiotic.

Consumption of frozen chicken breaded has increased considerably in recent decades, since they are practical and tasty, able to meet the needs of consumers. The intrinsic characteristics of this product are favorable to the proliferation of pathogenic and spoilage micro -organisms and the application of low temperatures has been the method used to extend the life of these breaded meat. Microbiological contamination can originate in breaded raw material used for production or produced during the handling and processing operations and multiplication of these microorganisms during storage can modify the sensory and nutritional properties of the food, and pose a problem food security. Due to their ability to overcome barriers of temperature and water activity, fungi are the main micro -organisms able to degrade the group of frozen foods, which, besides the appearance and deteriorating economic losses, represents a public health problem by the possibility production of mycotoxins in the product and consumer exposure. The aim of this study was to identify the main species of filamentous fungi involved in the deterioration of frozen chicken breaded , check secondary metabolites produced by the same and assess the growth of the two predominant species when exposed to low temperatures and, in parallel, to determine the temperature at counters freeze 6 supermarkets in the city of Santa Maria - RS. The predominant species involved in the deterioration of frozen chicken breaded were Penicillium glabrum, Penicillium polonicum, Penicillium manginii, Penicillium solitum and Penicillium crustosum. The analysis of the secondary metabolite profile showed the capacity to synthesize mycotoxins as cyclopiazonic acid citroviridina, roquefortina C, penitren A and verrucosidina by some isolates. The results demonstrated that the fungus P. polonicum, was able to form visible colonies on the surface of frozen chicken breaded kept at -5°C for 120 days. For P. glabrum the lowest growth was observed that temperature was 0°C. A ' spot ' supermarkets temperature analysis revealed temperature higher than -5°C in at least one of the time points evaluated, and 4 supermarkets 6 (66%) had at least one peak temperature above 0°C, with a maximum of 9.8 °C. Since there is occurrence of storage temperatures at which frozen foods fungi P. polonicum and P. glabrum could develop and knowing that these species have the ability to produce toxic metabolites, emphasize the need for greater attention to research related to fungal spoilage of frozen foods, source of contamination, methods of prevention and possible implications of the consumption of contaminated for public health products. / O consumo de empanados congelados de frango aumentou consideravelmente nas últimas décadas, uma vez que são produtos práticos e saborosos, capazes de satisfazer as necessidades dos consumidores. As características intrínsecas deste produto são favoráveis à proliferação de micro-organismos patogênicos e deteriorantes e a aplicação de baixas temperaturas tem sido o método mais empregado para prolongar a vida útil destes empanados cárneos congelados. A contaminação microbiológica em empanados pode se originar da matéria-prima utilizada para sua elaboração ou se produz durante a manipulação e operações de processamento e a multiplicação destes micro-organismos durante a estocagem pode modificar as propriedades sensoriais e nutricionais do alimento, além de representar um problema de segurança alimentar. Devido a sua habilidade em superar barreiras de temperatura e atividade de água, os fungos são os principais micro-organismos capazes de deteriorar o grupo dos alimentos congelados, o que, além do aspecto deteriorativo e perdas econômicas, representa um problema de saúde pública pela possibilidade de produção de micotoxinas no produto e exposição do consumidor. O objetivo deste estudo foi de identificar as principais espécies de fungos filamentosos envolvidas na deterioração de empanados congelados de frango, verificar metabólitos secundários produzidos pelas mesmas e avaliar o crescimento das duas espécies predominantes quando expostas à baixas temperaturas e, em paralelo, determinar a temperatura em balcões de congelamento de 6 supermercados da cidade de Santa Maria-RS. As espécies predominantes envolvidas na deterioração de empanados congelados de frango foram Penicillium glabrum, Penicillium polonicum, Penicillium manginii, Penicillium solitum e Penicillium crustosum. A análise do perfil de metabólitos secundários revelou capacidade de síntese de micotoxinas como ácido ciclopiazônico, citroviridina, roquefortina C, penitrem A e verrucosidina por alguns isolados. Os resultados demonstraram que o fungo P. polonicum, foi capaz de formar colônias visíveis na superfície dos empanados congelados de frango conservados à -5°C aos 120 dias. Para P. glabrum a menor temperatura que foi observado crescimento foi 0ºC. A análise in loco da temperatura dos supermercados revelou temperatura superior a -5°C em pelo menos um dos momentos avaliados, sendo que 4 de 6 supermercados (66%) apresentaram pelo menos um pico de temperatura acima de 0 °C, com um máximo de 9,8°C. Visto que há ocorrência de temperaturas de armazenagem de alimentos congelados nas quais os fungos P. polonicum e P. glabrum poderiam se desenvolver e sabendo-se que estas espécies têm a capacidade de produzir metabólitos tóxicos, ressalta-se a necessidade de maior atenção para pesquisas relacionadas a deterioração fúngica de alimentos congelados, origem da contaminação, formas de prevenção e possíveis implicações do consumo de produtos contaminados para a saúde pública.

This study was conducted to investigate the effect of the consumption of aflatoxins and adsorbents (esterifid glucomannan) for broiler breeders on productive and reproductive aspects addition to verify the residual effects on the progeny. Four experiments were conducted, with the first consisting of 240 broiler breeders feed with increasing levels of aflatoxins, according to the treatment: T1 free aflatoxins diet and treatments T2, T3 and T4, dies containing 0.250, 0.500 and 0.750mg the aflatoxins/kg of diet. The second experiment was composed of 300 broiler breeders submitted to diets containing aflatoxins, in the presence or not of adsorbent as treatments: T1 breeders feed free aflatoxins diets, T2 breeders feed diets containing 0.500mg of aflatoxins / kg of diet, T3 breeders submitted to the same level of aflatoxins in T2, but with 0.10% of adsorbent, T4 consists of breeders feed diets containing 0.750mg of aflatoxins/kg of diet and treatment T5 breeders submitted to the same level of aflatoxins of T4, but with 0.10% of adsorbent. The third and fourth experiments were composed of chicks from broiler breeder belonging to the first and second experiment, respectively. The parameters evaluated in the broiler breeders were: body weight, egg production, mass of eggs, egg weight, specific gravity, hatchability and chicks quality, and the study involving progeny were evaluated body weight, weight gain, feed conversion by weight gain, blood protein and albumin and liver and bursa weights in the first day of age. The performance of breoiler breeders subjected to diets containing increasing levels of aflatoxins, as well, broiler breeders subjected to diets containing levels of aflatoxins and adsorbent in the throws was not influenced. The progeny performance, in the same way, does not show the effect of the treatments applied on the broiler breeder hens. / Este estudo foi realizado para investigar o efeito do consumo de aflatoxinas e adsorventes (glucomananos esterificados) por matrizes de corte sobre aspectos produtivos e reprodutivos, além de verificar os efeitos residuais sobre a progênie. Foram realizados quatro experimentos, sendo o primeiro composto por 240 matrizes submetidas a níveis crescentes de aflatoxinas, segundo os tratamentos: T1 - dieta isenta de aflatoxinas, T2, T3 e T4, matrizes submetidas à dietas contendo 0,250, 0,500 e 0,750mg de aflatoxinas/kg de dieta. O segundo experimento foi composto por 300 matrizes submetidas à dietas contendo aflatoxinas, com presença ou não de adsorvente, conforme os tratamentos: T1 - matrizes submetidas à dietas isentas de aflatoxinas; T2 - aves alimentadas com dietas contendo 0,500mg de aflatoxinas/kg de dieta; T3 - aves submetidas ao mesmo nível de aflatoxinas do T2, porém com 0,10% de adsorvente, T4 - constituído por aves alimentadas com dietas contendo 0,750mg de aflatoxinas/kg de dieta e o tratamento e T5 - aves submetidas ao mesmo nível de aflatoxinas do T4, porém, com 0,10% de adsorvente. O terceiro e o quarto experimentos foram compostos por pintos oriundos de matrizes pertencentes ao primeiro e segundo experimento, respectivamente. Os parâmetros avaliados nas matrizes de corte foram: peso corporal, taxa de postura, massa de ovos, peso de ovos, gravidade específica, eclodibilidade e qualidade de pintos, e no estudo envolvendo a progênie foram avaliados peso corporal, ganho de peso, conversão alimentar, proteína e albumina sanguíneos e pesos de fígado e bursa ao primeiro dia de idade. O desempenho de matrizes de corte submetidas à dietas contendo níveis crescentes de aflatoxinas, bem como, de matrizes submetidas a dietas contendo níveis de aflatoxinas e adsorvente na deita não foi influenciado. Os índices zootécnicos da progênie, da mesma forma, não evidenciaram efeito dos tratamentos aplicado às matrizes de corte.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-08-14T18:24:06Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Medeiros Camargo.pdf: 1890787 bytes, checksum: 483a98199d1e25df032841b77b3a5358 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-08-17T12:37:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Medeiros Camargo.pdf: 1890787 bytes, checksum: 483a98199d1e25df032841b77b3a5358 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T12:37:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Medeiros Camargo.pdf: 1890787 bytes, checksum: 483a98199d1e25df032841b77b3a5358 (MD5) Previous issue date: 2017-07-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / O milho (Zea mays L.) ) é o segundo cereal mais produzido no Brasil e sua importância econômica se dá pelas diversas formas de uso e relevância na alimentação humana e animal. Devido à grande demanda de milho pela indústria alimentícia é necessário que os grãos fiquem armazenados por longos períodos para atender o mercado em períodos de entressafra. Durante o armazenamento, algumas espécies de fungos se proliferam em grãos armazenados favorecendo a produção de micotoxinas e tornando-os impróprios para o consumo. Dessa forma, a radiação pode ser um método alternativo de controle dos fungos e, portanto, manutenção da qualidade dos grãos de milho. Sendo assim, o trabalho foi dividido em dois capítulos visando atender a dois objetivos principais: i); ii) avaliar os efeitos da radiação UV-C e da umidade dos grãos nos parâmetros qualitativos e quantitativos tecnológicos dos grãos de milho durante o armazenamento; ii) avaliar os efeitos da radiação UV-C e da umidade dos grãos nos parâmetros qualitativos e quantitativos tecnológicos do amido de milho extraído de grãos armazenados durante o armazenamento. Foram utilizados grãos de milho colhidos mecanicamente e secos até as umidades de 13% e 16%. Os grãos receberam inóculos de fungos produtores de micotoxinas e tratamento com radiação UV-C nas doses de 4 e 8 Kj.m-2. A radiação UV-C nas doses utilizadas não apresentou influencia sobre os resultados obtidos, no entanto a umidade e o tempo de armazenamento influenciaram diretamente nos parâmetros avaliados. A associação de elevada umidade e armazenamento por longo prazo apresentou aumento sobre a incidência dos fungos Aspergillus e Pennicilium, condutividade elétrica, acidez lipídica, grãos mofados, ardidos e fermentados, e redução sobre os fungos do gênero Fusarium, solubilidade proteica, teor de lipídeos e valor L. Os compostos fenólicos apresentaram maior concentração nos grãos inoculados com fungos (0, 4 e 8 kJ.m- 2). As micotoxinas foram encontradas em maior concentração após o armazenamento, sendo favorecidas dose de 8 kJ.m-2 e a umidade de 16%. Não foram observadas alterações na amilose e solubilidade do amido. Após o armazenamento, na umidade de 16% são observadas as maiores alterações, com reduções na extração de amido, valor de L* e aumentos no valor b*, proteína bruta, teor de lipídeos. As propriedades de pasta foram mais influenciadas na umidade de 16%, com aumentos na temperatura de pasta, retrogradação e reduções na viscosidade máxima e viscosidade de quebra. O amido apresentou perfurações em todos os tratamentos, sendo encontradas em maiores concentrações na umidade de 16% na dose de 8kJ.m-2. A radiação promoveu aumento no poder de inchamento dos grânulos de amido em todas as doses em ambas as umidades, sendo os maior aumentos observados na umidade de 16%. / Corn (Zea mays L.) is the second most produced cereal in Brazil and its economic importance is due to the different forms of use and relevance in human and animal food. Because to the high demand of maize by the food industry, it is necessary that the grains are stored for long periods to meet the market in offseason. During storage, some species of fungi proliferate in stored grains favoring the production of mycotoxins and rendering them unfit for consumption. So, radiation can be an alternative method of fungus control and, therefore, maintenance of the quality of corn grains. Therefore, the study was divided into two chapters aimed at meeting two main objectives: i); Ii) to evaluate the effects of UV-C radiation and grain moisture on the qualitative and quantitative technological parameters of corn grains during nine months of storage; Ii) to evaluate the effects of UV-C radiation and grain moisture on the qualitative and quantitative technological parameters of corn starch extracted from grains stored during nine months of storage. Corn grains were harvested mechanically and dried to moisture of 13% and 16% . The grains were inoculated with fungi and treated with UV-C radiation at 4 and 8 KJ.m-2 doses. The UV-C radiation at the doses used did not influence the results obtained, however, moisture and storage time had a direct influence on the evaluated parameters. The association of high moisture and a long time of storage showed an increase in the incidence of fungi Aspergillus and Pennicilium, electrical conductivity, lipid acidity, moldy, arid and fermented grains, and reduction on fungi of the genre Fusarium, protein solubility, lipid content and Value L. The phenolic compounds presented higher concentration in the grains inoculated with fungi (0, 4 and 8 kJ.m-2). The mycotoxins were found in higher concentration after storage, being favored dose of 8 kJ.m-2 and the moisture of 16%. No changes were observed in the amylose and solubility of the starch. After storage, in the moiture of 16% are observed the major changes, with reductions in the extraction of starch, value of L * and increases in value b *, crude protein and lipid content. The pasta properties were most influenced at 16% moisture, with increases in pasta temperature, retrogradation and reductions in maximum viscosity and viscosity break. In all treatments, the starch presented perforations, being found in higher concentrations in the moisture of 16% and the dose of 8kJ.m-2. The radiation promoted an increase in the swelling power of the starch granules in all doses in both moistures, with the highest observed increases in moisture content of 16%.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese fernanda rocha.pdf: 671877 bytes, checksum: 6b9e0f3e769b8add7590d1d3f1cfe4cd (MD5) Previous issue date: 2009-04-13 / Two experiments were conducted with 960 Cobb 500 chicks raised in battery heated to 21 days. In the first experiment, birds were fed diets with corn and sorghum non-musty and moldy, or not treated with the mycotoxin adsorbent based glicomanano ester (GME) at concentrations of 0 and 0.1% of the diet. The experiment was conducted in a completely randomized in a 2 x 2 x 2 (x grain quality x adsorbent) and five replicates of 12 birds each. For the second experiment, we used four doses of aflatoxin B1 (0, 0.5, 1.0, 2.5 ppm of AFB1) and the same concentrations of GME in a completely randomized in a 4 x 2 (doses of AFB1 x concentrations GME). Diets isonutrient from corn or sorghum and soybean meal meeting the nutritional requirements proposed by the Brazilian tables. We evaluated the weight gain, feed intake, feed conversion and digestibility of dry matter (DM), ether extract (EE) and protein (N) in two metabolic tests conducted 4 to 7 and 17 to 21 days of age, for the first experiment and a test for the second aged between four and seven days. We also assessed the biometry of lymphoid organs and digestive systems, the production of antibodies against the vaccine virus disease Newcatle and histological evaluation of the bursa of Fabricius and liver. Statistical analysis was performed by GLM procedure of SAS &#61666; and Tukey (5%) to compare the means in the case of variable performance and metabolism and other variables the data were described. Chickens fed moldy grains not perform better, regardless of the inclusion of mycotoxin adsorbent for. For grains contaminated with fungi, the additive improved the digestibility and retention of nutrients, especially fat, the main substrate for the development of this organism. Moldy grains decreased the development of the organs of the digestive system and did not affect the organs of the lymphoid system and vaccine response, but it altered the histological structure of the organs evaluated. The histological damage was reduced by GME in the bursa and liver. The AFB1 affected the performance of chickens and GME did not reverse the deterioration in performance, but the effects on digestibility were minimized, especially for fats. The presence of AFB1 interfered with the development of lymphoid organs and digestive systems, depressed the response of poultry vaccination and the onset and increased severity of lesions in the liver and bursa of Fabricius, but with the use of GME, the intensity of effect in body of the birds was lower / Foram realizados dois experimentos com 960 pintos Cobb 500 criados em baterias aquecidas até 21 dias. No primeiro experimento, as aves foram alimentadas com rações com grãos de milho e de sorgo não-mofados e mofados, tratados ou não com adsorvente de micotoxinas a base de glicomanano esterificado (GME) nas concentrações de 0 e 0,1% da dieta. O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 2 x 2 (grão x qualidade x adsorvente) e cinco repetições de 12 aves cada. Para o segundo experimento, utilizaram-se quatro dosagens de Aflatoxina B1 (0; 0,5; 1,0; 2,5ppm de AFB1) e as mesmas concentrações de GME em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2 (dosagens de AFB1 x concentrações do GME). As rações foram isonutritivas a base de milho ou sorgo e farelo de soja atendendo as exigências nutricionais propostas pelas tabelas brasileiras. Foram avaliados o ganho de peso, o consumo de ração, a conversão alimentar e a digestibilidade da matéria seca (MS), do extrato etéreo (EE) e da proteína (N) em dois ensaios metabólicos conduzidos de 4 a 7 e de 17 a 21 dias de idade, para o primeiro experimento e um ensaio para o segundo com idade entre quatro e sete dias. Foram também avaliadas a biometria de órgãos dos sistemas linfóide e digestório, a produção de anticorpos vacinais contra o vírus da doença de Newcatle e a avaliação histológica da bursa de Fabricius e do fígado. A análise estatística foi realizada pelo procedimento GLM do SAS&#61666; e o teste de Tukey (5%) para comparação das médias, no caso das variáveis de desempenho e de metabolismo e para outras variáveis os dados foram descritos. Frangos alimentados com grãos não mofados apresentam melhor desempenho, independente da inclusão do adsorvente para micotoxina. Para grãos contaminados com fungos, o aditivo melhorou a digestibilidade e a retenção de nutrientes, especialmente de gordura, principal substrato para desenvolvimento desse microrganismo. Grãos mofados diminuíram o desenvolvimento dos órgãos do sistema digestório e não afetaram os órgãos do sistema linfóide e a resposta vacinal, porém alterou a estrutura histológica dos órgãos avaliados. Os danos histológicos foram reduzidos pelo GME na bursa e no fígado. A AFB1 afetou o desempenho dos frangos e o GME não reverteu a piora no desempenho, mas os efeitos na digestibilidade foram minimizados, especialmente para gorduras. A presença de AFB1 interferiu no desenvolvimento dos órgãos dos sistemas linfóide e digestório, deprimiu a resposta vacinal das aves e aumentou o aparecimento e a gravidade das lesões histológicas no fígado e na bursa de Fabricius mas, com a utilização do GME, a intensidade desses efeitos no organismo das aves foi menor