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Análise da expressão do TNF-α, β-Defensinas 2 e 3 e proteína p16 na mucosa anal de pacientes infectados pelo Papilomavírus humano

NUNES, Maria Julliana Galvão 03 March 2017 (has links)
Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:15:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-08-02T19:39:45Z (GMT) / Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:45:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-03T22:29:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:30:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / FACEPE / A incidência de carcinoma anal e lesões precursoras relacionadas tem aumentado no mundo, em homens e mulheres e a infecção persistente pelo Papilomavírus humano (HPV) desempenha um papel fundamental na carcinogênese anal. Os fatores de risco para o desenvolvimento de câncer anal incluem intercurso anal, múltiplos parceiros e infecção cervical pelo HPV. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a infecção simultânea pelo HPV na mucosa cervical e anal e elucidar a associação entre a expressão local da proteína p16, β-defensina-2 e 3 e TNF-α (fator de necrose tumoral alfa) na mucosa anal e o grau de lesões anais associadas ao HPV. O grupo de estudo foi constituído por mulheres sexualmente ativas, com idade entre 18 e 60 anos. A coleta de células foi realizada a partir da mucosa cervical e anal com escova ginecológica, seguida de exame de colposcopia e anuscopia. O DNA foi extraído de amostras de células anais e cervicais e a PCR convencional foi realizada para detectar presença de HPV (tipos: 6, 16, 18, 31 e 33). A PCR em tempo real foi realizada utilizando primers específicos para a β-defensina 2, 3 e TNF-α. Os fragmentos de biopsia foram submetidos a coloração hematoxilina-eosina de rotina para a avaliação histológica e reação imunohistoquímica utilizando anticorpo anti-p16. Neste estudo, a positividade para p16 foi associada ao grupo com neoplasia, estatisticamente significativo (p = 0,0002) e padrão contínuo foi predominante. Cerca de 75% dos pacientes com neoplasia foram positivos para HPV e p16. Verificou-se alta taxa de infecção por HPV nas mucosas anal (70,52%), cervical (74,73%) e infecção simultânea cervical e anal (54,73%). A infecção simultânea (mucosa anal e cervical) pelo mesmo tipo de HPV foi observada em 17,30% dos pacientes. Entre os tipos de HPV identificados, o genótipo predominante nas amostras anal e cervical foi HPV6 (26,38%) e (19,71%), respectivamente. Nossos resultados também mostraram uma diminuição da expressão de TNF-α em lesões anais de alto grau em comparação com o normal HPV-positivo (p <0,0001), enquanto que os níveis de expressão de β-defensina 3 aumentaram em pacientes de alto grau (p = 0,0009). A aquisição de infecção simultânea anal e cervical pode ocorrer por diferentes meios, mostrando que o canal anal é uma fonte de infecção. / The incidence of anal carcinoma and related precursor lesions have been increasing worldwide for both men and women. The human papillomaviruses (HPVs) play a fundamental role in anal carcinogenesis, through persistent infection. Women with cervical cancer and history anal intercourse have an increased risk of anal cancer. The aim of this study was to evaluate simultaneous HPV infection in cervical and anal mucosa and to elucidate the association between p16 protein, β-defensin-2, 3 and TNF-α (tumor necrosis factor alpha) expression local in the anal mucosa and the degree of HPV-associated anal lesions. Study group was composed of sexually active immunocompetent women. Cells collection was performed from cervical and anal mucosa with a brush, followed by anuscopy and colposcopy exam. DNA was extracted from anal and cervical cell samples and PCR was performed to detect HPV presence (types: 6, 16, 18, 31 and 33). Real-time PCR was performed using specific primers to β-defensin 2, 3 and TNF-α. Biopsy fragments were subjected to routine hematoxylin-eosin staining for the histological assessment and immunohistochemistry reaction using anti-p16 antibody. In our study, positivity for p16 was frequently associated with group with neoplasia, statistically significant (P = 0.0002) and continuous pattern was predominant. About 75% of patients with neoplasia were positive for HPV and p16. A high rate of HPV infection in anal (70.52%), cervical (74.73%) and simultaneous cervical and anal mucosa (54.73%) was found. Simultaneous infection (anal and cervical mucosa) by the same type HPV was observed in 17.30% of the patients. Among all HPV types identified, the predominant genotype in anal and cervical samples was HPV6 (26.38%) and (19.71%), respectively. Our findings also showed a decreased TNF-α expression in high-grade anal lesion compared to normal HPV-positive (p < 0.0001), whereas expression levels of β-defensin 3 were increased in high-grade patients (p = 0.0009). The acquisition of simultaneous infection anal and cervical may occur by different means, showing that the anal canal is also a source of infection.
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A influência dos parâmetros de hipercelularidade, mitose e necrose em paliçada na vasculatura dos glioblastomas

Paula de Souza e Pinto, Ana 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T22:58:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2810_1.pdf: 2283343 bytes, checksum: ca8cbd5bb4e2ceac8a7c25a7641281a7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / O Glioblastoma multiforme é uma neoplasia astrocitária maligna e infiltrativa que se torna mais freqüente com a idade e tem uma incidência de 12% a 15% dentre as neoplasias intracranianas com uma sobrevida pós-operatória de 12 meses. Angiogênese é um dos principais pré-requisitos para o crescimento tumoral e para metástase. Em glioblastomas, a presença de vascularização atípica estabelece de forma marcante a malignidade de suas células que secretam fatores próangiogênicos alterando totalmente a estrutura do vaso, tornando-o similar a um glomérulo renal. O estudo dos indicadores de anaplasia (mitose, celularidade e necrose em paliçada) em região circunvizinha a angiogênese típica e atípica, em glioblastomas, esclarecerá a importância da estrutura vascular normal ou alterada para o desenvolvimento deste tipo de tumor. O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência dos parâmetros histopatológicos de hipercelularidade, mitose e necrose em paliçada na vasculatura dos glioblastomas. Foram utilizados blocos de parafina com fragmentos teciduais cujos diagnósticos histopatológicos foram de glioblastomas. Foram preparadas lâminas e, após análise histológica, selecionados os casos que apresentaram vasculatura atípica. Em cada caso foram analisados os parâmetros de malignidade: hipercelularidade, mitose e presença de necrose em paliçada em áreas vasculares típicas para comparação com áreas vasculares atípicas. Após essa análise, a morfometria gerou as médias da contagem do número de células tumorais e número de mitoses que foram comparadas intra-grupo e esses achados foram correlacionados com a presença ou ausência de necrose em paliçada. O número de mitoses e células em regiões circunvizinhas a vasos atípicos foi estatisticamente superior, estando fortemente relacionados entre si. Constatou-se, que regiões onde há o aumento do número de células e mitoses predispõem a formação de vascularização atípica. A necrose em paliçada não teve correlação com o aumento do número de mitoses em áreas vasculares típicas ou atípicas, mas sua presença foi significativa quanto ao número de células, sendo encontrada uma maior celularidade nos casos em que estava presente esse tipo de necrose. Há interferência dos parâmetros histopatológicos relacionados a hipercelularidade e número de mitoses na áreas vasculares atípicas dos glioblastomas em relação às áreas vasculares típicas
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Dosagem sequencial de fator de necrose tumoral alfa, seus receptores solúveis e endotelina-1 como valor preditivo de mortalidade no grande queimado

Ribeiro, Cyntia Aguiar January 2001 (has links)
INTRODUÇÃO: Queimaduras estão associadas a uma intensa atividade imunoinflamatória; contudo, um perfil seqüencial precoce dos níveis de TNF-α, seus receptores solúveis e endotelina (ET)-1 (um potente vasoconstritor) em pacientes queimados ainda não está claro. MÉTODOS: Foram estudados vinte pacientes com uma superfície corporal queimada (SCQ) ≥ 30% e com menos de 6h desde o acidente. Amostras de sangue foram retiradas no momento zero, 6, 12, 24h para seqüencialmente medir os níveis do TNF-α, seus receptores solúveis 1 e 2 (sTNFR1 e sTNFR2) e ET-1 usando ensaios ELISA. RESULTADOS: Idade, SCQ e lesão inalatória não foram significativamente diferentes entre sobreviventes (n=10; 30±13 anos, SCQ 40±12%) e não sobreviventes (n=11; 38±15 anos, SCQ 56±20%). Níveis do sTNFR1 estavam aumentados em não sobreviventes (2937±1676 pg/ml; 4548±1436 pg/ml) comparado aos sobreviventes (1313±561 pg/ml; 2561±804 pg/ml) nas 6 e 24h, respectivamente (P=0,01 e 0,002), enquanto níveis de sTNFR2 estavam significativamente aumentados em não sobreviventes (4617±1876 pg/ml vs 2611±1325 pg/ml) somente nas 6h (P=0,015). Níveis elevados de sTNFR1 nas 6h e TNF-α nas 12h mostraram valor preditivo positivo de 100% (para ambos marcadores) e valor preditivo negativo para mortalidade de 70 e 52%, respectivamente; risco relativo de 3,25 e 1.2, respectivamente; com intervalos de confiança de 1,4-7,3 e 1,28-3,52, respectivamente. CONCLUSÕES: Níveis aumentados de sTNFR1 e sTNFR2 foram maiores nas 6h em pacientes queimados não sobreviventes. Níveis de TNF-α e ET-1 foram similares em não sobreviventes e sobreviventes. Determinação muito precoce de sTNFR1 e sTNFR2 poderiam ajudar a identificar o risco de prognóstico adverso em pacientes grandes queimados.
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Dosagem sequencial de fator de necrose tumoral alfa, seus receptores solúveis e endotelina-1 como valor preditivo de mortalidade no grande queimado

Ribeiro, Cyntia Aguiar January 2001 (has links)
INTRODUÇÃO: Queimaduras estão associadas a uma intensa atividade imunoinflamatória; contudo, um perfil seqüencial precoce dos níveis de TNF-α, seus receptores solúveis e endotelina (ET)-1 (um potente vasoconstritor) em pacientes queimados ainda não está claro. MÉTODOS: Foram estudados vinte pacientes com uma superfície corporal queimada (SCQ) ≥ 30% e com menos de 6h desde o acidente. Amostras de sangue foram retiradas no momento zero, 6, 12, 24h para seqüencialmente medir os níveis do TNF-α, seus receptores solúveis 1 e 2 (sTNFR1 e sTNFR2) e ET-1 usando ensaios ELISA. RESULTADOS: Idade, SCQ e lesão inalatória não foram significativamente diferentes entre sobreviventes (n=10; 30±13 anos, SCQ 40±12%) e não sobreviventes (n=11; 38±15 anos, SCQ 56±20%). Níveis do sTNFR1 estavam aumentados em não sobreviventes (2937±1676 pg/ml; 4548±1436 pg/ml) comparado aos sobreviventes (1313±561 pg/ml; 2561±804 pg/ml) nas 6 e 24h, respectivamente (P=0,01 e 0,002), enquanto níveis de sTNFR2 estavam significativamente aumentados em não sobreviventes (4617±1876 pg/ml vs 2611±1325 pg/ml) somente nas 6h (P=0,015). Níveis elevados de sTNFR1 nas 6h e TNF-α nas 12h mostraram valor preditivo positivo de 100% (para ambos marcadores) e valor preditivo negativo para mortalidade de 70 e 52%, respectivamente; risco relativo de 3,25 e 1.2, respectivamente; com intervalos de confiança de 1,4-7,3 e 1,28-3,52, respectivamente. CONCLUSÕES: Níveis aumentados de sTNFR1 e sTNFR2 foram maiores nas 6h em pacientes queimados não sobreviventes. Níveis de TNF-α e ET-1 foram similares em não sobreviventes e sobreviventes. Determinação muito precoce de sTNFR1 e sTNFR2 poderiam ajudar a identificar o risco de prognóstico adverso em pacientes grandes queimados.
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Dosagem sequencial de fator de necrose tumoral alfa, seus receptores solúveis e endotelina-1 como valor preditivo de mortalidade no grande queimado

Ribeiro, Cyntia Aguiar January 2001 (has links)
INTRODUÇÃO: Queimaduras estão associadas a uma intensa atividade imunoinflamatória; contudo, um perfil seqüencial precoce dos níveis de TNF-α, seus receptores solúveis e endotelina (ET)-1 (um potente vasoconstritor) em pacientes queimados ainda não está claro. MÉTODOS: Foram estudados vinte pacientes com uma superfície corporal queimada (SCQ) ≥ 30% e com menos de 6h desde o acidente. Amostras de sangue foram retiradas no momento zero, 6, 12, 24h para seqüencialmente medir os níveis do TNF-α, seus receptores solúveis 1 e 2 (sTNFR1 e sTNFR2) e ET-1 usando ensaios ELISA. RESULTADOS: Idade, SCQ e lesão inalatória não foram significativamente diferentes entre sobreviventes (n=10; 30±13 anos, SCQ 40±12%) e não sobreviventes (n=11; 38±15 anos, SCQ 56±20%). Níveis do sTNFR1 estavam aumentados em não sobreviventes (2937±1676 pg/ml; 4548±1436 pg/ml) comparado aos sobreviventes (1313±561 pg/ml; 2561±804 pg/ml) nas 6 e 24h, respectivamente (P=0,01 e 0,002), enquanto níveis de sTNFR2 estavam significativamente aumentados em não sobreviventes (4617±1876 pg/ml vs 2611±1325 pg/ml) somente nas 6h (P=0,015). Níveis elevados de sTNFR1 nas 6h e TNF-α nas 12h mostraram valor preditivo positivo de 100% (para ambos marcadores) e valor preditivo negativo para mortalidade de 70 e 52%, respectivamente; risco relativo de 3,25 e 1.2, respectivamente; com intervalos de confiança de 1,4-7,3 e 1,28-3,52, respectivamente. CONCLUSÕES: Níveis aumentados de sTNFR1 e sTNFR2 foram maiores nas 6h em pacientes queimados não sobreviventes. Níveis de TNF-α e ET-1 foram similares em não sobreviventes e sobreviventes. Determinação muito precoce de sTNFR1 e sTNFR2 poderiam ajudar a identificar o risco de prognóstico adverso em pacientes grandes queimados.
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Indução experimental de polioencefalomalacia em ovinos confinados ingerindo dieta com alto teor de enxofre

Delfiol, Diego José Zanzarini [UNESP] 14 February 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-14Bitstream added on 2014-06-13T18:20:00Z : No. of bitstreams: 1 delfiol_djz_me_botfmvz.pdf: 582216 bytes, checksum: 773e9de40b6bbe5e492ca1d83c32e1f4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Em ovinos o excesso de enxofre na dieta é apontado como uma das principais causas de polioencefalomalacia (PEM). Na literatura nacional relatos de PEM induzida por enxofre em ovinos são escassos. O objetivo desta dissertação foi induzir PEM em ovinos fornecendo uma dieta rica em carboidratos e com diferentes níveis de enxofre e realizar avaliações clínicas e laboratoriais. Foram utilizados 18 ovinos divididos em três grupos (G1, G2 e G3) que receberam diferentes níveis de enxofre na dieta 0,2%, 0,9% e 1,2% respectivamente. Exames clínicos (frequência cardíaca, frequência respiratória, temperatura retal e motricidade ruminal) e laboratoriais (concentração de sulfeto de hidrogênio ruminal, hemogasometria venosa, pH do fluído ruminal, concentração de cobre sérico e hepático, tomografia computadorizada, necropsia e histopatológico) foram realizados em diferentes momentos. A temperatura retal, hemogasometria venosa e pH do fluido ruminal estavam dentro dos valores de referência para a espécie. Taquicardia e taquipnéia foram observadas nos três grupos. A motricidade ruminal estava diminuída nos grupos G2 e G3 em relação ao G1. Quanto maior a ingestão de enxofre, menor foram os níveis de cobre sérico e hepático detectados nos ovinos. Elevados valores de sulfeto de hidrogênio foram detectados nos grupos G2 e G3. Nenhum animal apresentou sinais clínicos de PEM. Na tomografia computadorizada, necropsia e exame histopatológico do sistema nervoso central, nenhuma alteração compatível com PEM foi observada. É provável que algum outro fator pode estar associado ao excesso de enxofre na dieta para que os ovinos desenvolvam PEM / The excess sulfur intake in sheep is described as major cause of polioencephalomalacia (PEM). In the national literature are scarce reports of sulfur induced PEM in sheep. This work aimed to feed sheep using a rich carbohydrate diet supplemented with different levels of sulfur in order to induce PEM, and to perform clinical and laboratory tests. Eighteen sheep were divided into three groups (G1, G2, and G3) and supplemented with 0.2%, 0.9% and 1.2% sulfur in diet, respectively. Clinical evaluation (i.e., heart rate, respiratory rate, rectal temperature and rumen motility) and laboratory exams (i.e., ruminal hydrogen sulfide concentration, venous gas analysis, ruminal pH, serum and liver copper concentration, computed axial tomography, necropsy, and histopathological examination) were performed. Rectal temperature, venous gas and ruminal pH were within normal limits. Tachycardia and tachypnea were observed in the three groups. Rumen motility was decreased in groups G2 and G3 when compared with G1. The higher the sulfur intake, the lower the serum and liver levels of copper. Increased ruminal hydrogen sulfide concentration was detected in G2 and G3. None of the animals had clinical signs of PEM. Computed axial tomography, necropsy, and histopathological examination of the central nervous system showed no evidence of PEM. It is thought that other factors are associated with excessive sulfur consumption for a PEM outbreak to occur in sheep
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Indução experimental de polioencefalomalacia em ovinos confinados ingerindo dieta com alto teor de enxofre /

Delfiol, Diego José Zanzarini. January 2012 (has links)
Orientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Roberto Calderon Gonçalves / Banca: José Augusto Bastos Afonso da Silva / Resumo: Em ovinos o excesso de enxofre na dieta é apontado como uma das principais causas de polioencefalomalacia (PEM). Na literatura nacional relatos de PEM induzida por enxofre em ovinos são escassos. O objetivo desta dissertação foi induzir PEM em ovinos fornecendo uma dieta rica em carboidratos e com diferentes níveis de enxofre e realizar avaliações clínicas e laboratoriais. Foram utilizados 18 ovinos divididos em três grupos (G1, G2 e G3) que receberam diferentes níveis de enxofre na dieta 0,2%, 0,9% e 1,2% respectivamente. Exames clínicos (frequência cardíaca, frequência respiratória, temperatura retal e motricidade ruminal) e laboratoriais (concentração de sulfeto de hidrogênio ruminal, hemogasometria venosa, pH do fluído ruminal, concentração de cobre sérico e hepático, tomografia computadorizada, necropsia e histopatológico) foram realizados em diferentes momentos. A temperatura retal, hemogasometria venosa e pH do fluido ruminal estavam dentro dos valores de referência para a espécie. Taquicardia e taquipnéia foram observadas nos três grupos. A motricidade ruminal estava diminuída nos grupos G2 e G3 em relação ao G1. Quanto maior a ingestão de enxofre, menor foram os níveis de cobre sérico e hepático detectados nos ovinos. Elevados valores de sulfeto de hidrogênio foram detectados nos grupos G2 e G3. Nenhum animal apresentou sinais clínicos de PEM. Na tomografia computadorizada, necropsia e exame histopatológico do sistema nervoso central, nenhuma alteração compatível com PEM foi observada. É provável que algum outro fator pode estar associado ao excesso de enxofre na dieta para que os ovinos desenvolvam PEM / Abstract: The excess sulfur intake in sheep is described as major cause of polioencephalomalacia (PEM). In the national literature are scarce reports of sulfur induced PEM in sheep. This work aimed to feed sheep using a rich carbohydrate diet supplemented with different levels of sulfur in order to induce PEM, and to perform clinical and laboratory tests. Eighteen sheep were divided into three groups (G1, G2, and G3) and supplemented with 0.2%, 0.9% and 1.2% sulfur in diet, respectively. Clinical evaluation (i.e., heart rate, respiratory rate, rectal temperature and rumen motility) and laboratory exams (i.e., ruminal hydrogen sulfide concentration, venous gas analysis, ruminal pH, serum and liver copper concentration, computed axial tomography, necropsy, and histopathological examination) were performed. Rectal temperature, venous gas and ruminal pH were within normal limits. Tachycardia and tachypnea were observed in the three groups. Rumen motility was decreased in groups G2 and G3 when compared with G1. The higher the sulfur intake, the lower the serum and liver levels of copper. Increased ruminal hydrogen sulfide concentration was detected in G2 and G3. None of the animals had clinical signs of PEM. Computed axial tomography, necropsy, and histopathological examination of the central nervous system showed no evidence of PEM. It is thought that other factors are associated with excessive sulfur consumption for a PEM outbreak to occur in sheep / Mestre
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"Análise da necrose em tecidos normais fotossensibilizados pós terapia fotodinâmica - estudo in vivo" / Necrosis characteristics of the Photodynamic therapy in normal rat liver

Ferreira, Juliana 26 June 2003 (has links)
O conceito de PDT é a fotoindução da citotoxicidade das células proliferativas envolvendo um agente fotossensibilizador, uma fonte de luz e oxigênio. Apesar de ser uma terapia eficiente no tratamento de várias neoplasias, a PDT apresenta algumas limitações dentre as quais a não seletividade em células do tecido hepático.O presente trabalho avaliou a correlação entre penetração luminosa e necrose, assim como a extensão da mesma em função da concentração do fotossensibilizador utilizado (Photogem&#61666;) e de três diferentes doses de energia. A transição do epitélio necrosado e do epitélio sadio, foi realizada após a irradiação de fígados normais de ratos previamente fotossensibilizados. O acúmulo do Photogem, administrado via endovenosa, no fígado, foi investigado através da espectroscopia de fluorescência. As fontes de luz utilizadas para irradiação foram um laser de diodo de 630nm e um dispositivo a base de LEDs (diodos emissores de luz). Observamos que o tecido hepático normal, fotossensibilizado, apresenta suas características ópticas alteradas, evidenciadas nos estudos de penetração da luz e alteração térmica durante a irradiação, refletindo na profundidade da necrose. Verificamos que a presença do FS no tecido alvo diminui a penetração da luz, levando a um aumento da temperatura, devido à grande quantidade de energia absorvida pelo FS, a qual é dissipada na forma de calor. Notamos uma abrupta delineação da necrose correspondendo à queda de intensidade luminosa no tecido iluminado. A profundidade de necrose obtida com o uso do LED apresentou uma pequena variação, devido à linha espectral do mesmo ser mais larga, quando comparado ao laser. Histologicamente o tecido hepático e irradiado apresentou necrose coagulativa, infiltrado inflamatório neutrofílico e necrose da veia centrolobular em todos os grupos experimentais; também observamos uma nítida delimitação entre o tecido epitelial normal e o tecido epitelial fotossensibilizado. Estes resultados serão importantes para o desenvolvimento de estratégias para um possível protocolo para aplicação da PDT em tumores malignos hepáticos. / The PDT concept is the photo induction of the citotoxicity of proliferating cells involving a photosensitizer agent, a light source and oxygen. Despite being an efficient therapy on the treatment of several neoplasias, PDT presents some restrictions including the non-selectivity in hepatic tissue cells. This work evaluated the correlation between light penetration and necrosis, as well as the extension of such as function of the concentration of the photosensitizer used (Photogem) and three different doses of energy. The necrosed epithelium and healthy epithelium transition was performed after the irradiation of normal livers of previously photosensitized rats. The Photogem accumulation, intravenously administrated, on the liver was investigated through fluorescence spectroscopy. The light sources used for irradiation were: diode laser operating at 630 nm and a LEDs (Light Emitting Diode) device. We observe that the photosensitized normal hepatic tissue presents its optical characteristics altered, which was previously evidenced on the studies of light penetration and thermal alteration during the irradiation, altering the necrosis depth. We checked that the photosensitizer presence on the target tissue decreases the light penetration leading to a temperature increase, due to a large amount of energy absorbed by the photosensitizer, which is dissipated by means of heat. We noticed an abrupt necrosis delineation corresponding to the drop of the light intensity on the irradiated tissue. When the LED was used, the necrosis depth presented little variation, due to its spectral line being larger when compared to the laser’s spectral line. Histological, the irradiated hepatic tissue presented coagulative necrosis, inflammatory infiltration neutrophilic and centrilobular vein necrosis in all experimental groups, we also observed a clear delimitation between normal epithelial tissue and photosensitized tissue. These results will be important to the development of strategies for a possible protocol for the PDT application on hepatic malign tumors.
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Efeito da L-alanil-L-glutamina na forma de dipeptídeo e L-glutamina-L-alanina na forma de aminoácido livre na evolução da necrose de lesão por queimaduras em ratos / Effect of L-alanil-L-glutamine as dipeptide and L-glutamine-Lalanine as free amino acid in the progression of necrosis of burn lesions in rats

Moriguti, Eny Kiyomi Uemura 25 May 2017 (has links)
Introdução: A classificação da gravidade da queimadura é determinada a partir da relação entre a superfície corporal queimada (SCQ) e a profundidade da lesão. Os fatores que influenciam a evolução da necrose na zona de estase que circunda a zona de necrose (coagulação) podem estar relacionados com a perfusão, inflamação e estresse oxidativo. No presente estudo avaliamos o efeito da glutamina, pois tem sido demonstrado ter papel importante na prevenção de lesão por isquemia e reperfusão, da inflamação e do estresse oxidativo. Objetivo: avaliar o efeito da glutamina na forma de aminoácido livre e dipeptídeo na evolução da necrose nos interespaços (zona de estase) da queimadura. Materiais e Métodos: Foram utilizados 30 ratos machos da linhagem Wistar. Em todos os animais foi feito a lesão por queimadura de terceiro grau com um pente de metal contendo quatro dentes e três interespaços pré aquecido em água à 98ºC. O Grupo 1- Controle (n=10) recebeu 7,4ml/kg de peso, de solução fisiológica a 0,9%, o Grupo 2- Dipeptídeo, recebeu 7,4 ml do dipeptídeo L-alanil-L-glutamina (1g/kg de L-glutamina e 0,6g/kg de L-Alanina) e o Grupo 3- AA-livre recebeu 1g/kg de L-glutamina e 0,6g/kg de L-alanina na forma de aminoácido livre, por gavagem, por 7 dias após a lesão por queimadura. As análises avaliadas foram por meio de fotografia (no momento 48 horas e 7 dias) e histopatologia (no 7º dia após a lesão), para avaliar a extensão da necrose, alterações isquêmicas nos interespaços (zona de estase), além da alteração da Glutationa. Resultado: Na avaliação fotográfica, houve redução significante da necrose especificamente no Grupo 3- AA-livre entre o momento 48 horas e sete dias (P=0,04). Na avaliação por histologia, globalmente houve redução da inflamação nos Grupos 2- Dipeptídeo e 3- AA-livre quando comparados com o Grupo 1- Controle (p< 0,01). Ainda nos grupos tratados houve tendência a redução de necrose na derme dos interespaços ( Grupo 1- Controle =0,95; Grupo 2- Dipeptídeo =0,73 e Grupo 3- AA-livre =0,8), mas essas diferenças não foram significantes. Os grupos tratados também apresentaram aumento do número de fibroblastos quando comparados ao Grupo 1- Controle (p<0,05). Na dosagem de Glutationa foi encontrado maior quantidade no Grupo 2- Dipeptídeo (p<0,05) quando comparado com o Grupo 1- Controle. Conclusão: A redução das lesões histológicas, redução da inflamação, manutenção de maior extensão dos interespaços, a maior quantidade de fibroblastos e o aumento da glutationa, com a administração de glutamina, observados no presente estudo, podem ter beneficiado a manutenção ou redução da evolução da necrose de queimadura em ratos.a inflamação, acelerou a cicatrização e regrediu a evolução da necrose das zonas de estase das queimaduras em ratos. / Introduction: The classification of burn severity is based on the relationship between the burned body surface (SCQ) and the depth of the lesion. Factors influencing the progression of necrosis in the stasis zone surrounding the area of necrosis (coagulation) may be related to perfusion, inflammation and oxidative stress. In the present study, we evaluated the effect of glutamine, as it has been shown to play an important role in the prevention of ischemia and reperfusion injury, inflammation and oxidative stress. Objective: to evaluate the effect of glutamine as a free amino acid and dipeptide on the progression of necrosis in the interspace (stasis zone) of the burn. Materials and Methods: Thirty male Wistar rats were used. In all animals a third degree burn injury was done with a metal comb containing four teeth and three interspaces preheated in water at 98ºC. Group 1- Control (n = 10) received 7,4 ml of 0.9% saline solution, Group 2- Dipeptide received 7.4 ml of dipeptide solution L-alanyl-L-glutamine (1g/k Lglutamine and 0.6g/k L-Alanine) and Group 3- Free AA received 1g/k L-glutamine and 0,6g/kg L-alanine as free amino acid, by gavage, for 7 days after burn injury. The analyzes evaluated were by means of photograph (in the time 48 hours and 7 days) and histopathology (on the 7th day after the injury), to evaluate the extent of necrosis, ischemic changes in the interspaces (stasis zone), besides the alteration of Glutathione . Results: In the photographic evaluation, there was a significant reduction of necrosis specifically in the 3-AA-free group between 48 hours and 7 days (P = 0.04). Histologically, there was a reduction in inflammation in Groups 2- Dipeptide and 3-AA-free when compared to Group 1-Control (p <0.01). Even in the treated groups there was a tendency to reduce necrosis in the interspaces dermis (Group 1-Control = 0.95, Group 2-Dipeptide = 0.73 and Group 3- AA-free = 0.8), but these differences were not significant. The treated groups also showed an increase in the number of fibroblasts when compared to Group 1- Control (p <0.05). In the dosage of Glutathione, a greater amount was found in Group 2 - Dipeptide (p <0.05) when compared to Group 1 - Control. Conclusion: The reduction of histological lesions, reduction of inflammation, maintenance of greater extension of the interspaces, the greater amount of fibroblasts and the increase of glutathione, with the administration of glutamine observed in the present study, may have benefited the maintenance or reduction of the evolution of necrosis of burn in rats.
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Efeitos dos bisfosfonatos nitrogenados sobre o osso alveolar

Rahde, Nicole de Mello 12 January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 420129.pdf: 2865000 bytes, checksum: e65a75398ad3d570c30ed54adcb069ee (MD5) Previous issue date: 2010-01-12 / Os bisfosfonatos s?o drogas inibidoras da reabsor??o ?ssea e t?m sido associados a uma forma peculiar de osteonecrose dos maxilares. O efeito dessas drogas ? investigado principalmente em t?bia e f?mur, sendo poucos os estudos conduzidos em maxila e mand?bula. A presente pesquisa teve por objetivo investigar, ao exame microsc?pico, o efeito dos bisfosfonatos nitrogenados alendronato e ?cido zoledr?nico sobre o osso alveolar. Trinta e um ratos f?meos (Rattus norvegicus, Wistar) foram distribu?dos em 3 grupos: (1) 11 animais tratados com alendronato (gavagem oral); (2) 10 animais tratados com ?cido zoledr?nico (intraperitoneal) e (3) 10 animais que n?o receberam bisfosfonato. Completado o per?odo de 150 dias do in?cio da terapia, os animais foram submetidos ? eutan?sia. As maxilas foram processadas e cortes histol?gicos foram corados por hematoxilina e eosina (HE) e picross?rius. Nos cortes corados por HE, foram realizadas a contagem de osteoclastos e a avalia??o da densidade trabecular ?ssea. Nos cortes corados por picross?rius, a densidade de fibras col?genas dos espa?os medulares foi determinada. Tamb?m foi realizado processamento imunoistoqu?mico para avalia??o da express?o de osteoprotegerina (OPG). As vari?veis foram quantificadas com o aux?lio dos programas Adobe Photoshop CS3 e Image Pro Plus 4.5.1. O grupo ?cido zoledr?nico apresentou densidade trabecular significativamente maior que o grupo-controle (ANOVA, teste de Tukey, P<0,001), e o grupo alendronato n?o apresentou diferen?a significativa quando comparado aos demais grupos (P>0,05). N?o houve diferen?a significativa para contagem de osteoclastos, densidade de fibras col?genas dos espa?os medulares e express?o de OPG entre os grupos (ANOVA, P>0,05). Os resultados permitem concluir que (1) o ?cido zoledr?nico promove aumento da densidade trabecular do osso alveolar, enquanto o alendronato n?o produz esse efeito; (2) alendronato e ?cido zoledr?nico n?o est?o associados ? fibrose dos espa?os medulares do osso alveolar. Os efeitos do alendronato e do ?cido zoledr?nico sobre o n?mero de osteoclastos, bem como sobre a express?o imunoistoqu?mica de OPG, necessitam ser avaliados por novas pesquisas.

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