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Influência do curativo de demora à base de hidróxido de cálcio na reparação dos tecidos apicais e periapicais de dentes sem vitalidade pulpar com ou sem lesão periapical visível radiograficamente : estudo histopatológico em dentes de cães /Silva, Ronaldo Souza Ferreira da. January 2004 (has links)
Orientador: Mário Tanomaru Filho / Banca: Léa Assed Bezerra da Silva / Banca: Igor Prokopowitsch / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do emprego do curativo de demora à base de hidróxido de cálcio na reparação apical e periapical após tratamento endodôntico de dentes de cães sem vitalidade pulpar, com ou sem lesão periapical visível radiograficamente. Os canais radiculares de 80 raízes de pré-molares superiores e inferiores foram submetidos ao método de indução experimental de lesões periapicais ou mantidos expostos ao meio bucal por 30 dias para contaminação. Realizado o preparo biomecânico, os canais radiculares foram obturados em única sessão ou receberam curativo de demora com pasta à base de hidróxido de cálcio por 15 dias, quando foram obturados com cimento AH Plus. Após o período de 180 dias os animais foram mortos e as peças submetidas ao processamento histológico e coradas pelo HE e Tricrômico de Mallory para avaliação da influência da presença da lesão periapical radiográfica e do emprego do curativo de demora na reparação apical e periapical. Os resultados obtidos demonstraram que o curativo de demora à base de hidróxido de cálcio foi de fundamental importância para a reparação dos tecidos apicais e periapicais, com diferença significante com relação aos grupos obturados em sessão única (p<0,05). / Abstract: The aim of this study was to evaluate the apical and periapical repair after endodontic treatment of teeth with pulp necrosis, with or without radiographic chronic periapical lesion in mongrel dogs. Eighty root canals of premolars teeth were used. Half of them was submitted to the experimentally induced chronic lesions method and the others was opened to the oral environment for 30 days for contamination. After biomechanical preparation, the root canals were filled in a single visit or they received a root canal dressing with calcium hydroxide for 15 days before root canal filling with AH Plus sealer. The animals were killed, after 180 days, by anesthetic overdose, and the histological sections were stained with H/E and Mallory Trichromic for microscopic evaluation of the influence of radiographic periapical lesion and the use of root canal dressing in the apical and periapical repair. The obtained results showed that the intracanal dressing based on calcium hydroxide was essential to the repair of the apical and perapical tissues, with significant difference to the groups filled in a single visit (p<0,5). / Mestre
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Análise da resposta de fator de necrose tumoral-a e interleucina-10 no lavado traqueobrônquico de recém-nascidos prematuros submetidos ventilação mecânicaCorso, Andréa Lúcia January 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003 / Objective: to analyze pulmonary inflammatory response in preterm infants requiring artificial ventilation through serial measurements of tumor necrosis factor-[ (TNF-[) and interleukin (IL)-10 in tracheobronchial lavage (TBL) and to investigate the association with perinatal factors and lung function. Methods: preterm newborns under 32 weeks of age requiring artificial ventilation at birth were selected for the study. The concentrations of TNF-[ and IL-10 were measured by ELISA in TBL samples within the first 48 hours of endotracheal intubation. Subsequent samples were collected on days 3, 5, 7, 10, 15 and 20 after intubation. Subjects were followed on outpatient clinic and pulmonary function tests were performed after 40 weeks of corrected age. Results: twenty-five subjects were recruited. Seventy TBL samples were obtained. Detectable levels of TNF-[ and IL-10 were observed in forty-seven (67%) and in eighteen samples (26%), respectively. There was no significant association between the TNF-[ and IL-10 levels with gestational age, birth weight, hyaline membrane disease, length of time on the ventilator and on oxygen treatement and death. In the samples collected on day 2 there was a significant association between TNF-[ and IL-10 levels and time of rupture of amniotic membranes (p=0. 002, r=0. 652 and p<0. 001, r=0. 57, respectively). There was also a significant negative association between the TNF-[ concentration on day 2 and FEF75 (p=0. 03 e r=0. 7). Conclusions: TNF-[ and IL-10 are detectable in preterm infants TBL under artificial ventilation. There was a direct relation ship between interleukins concentration and the time of amniotic membrane rupture. There was a significant inverse correlation between the TNF-[ levels and FEF75 in the patients evaluated by lung function test. / Objetivos: Analisar a resposta inflamatória pulmonar em recém-nascidos (RNs) prematuros em ventilação mecânica através da mensuração seriada do fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e interleucina (IL) -10 no lavado traqueobrônquico (LTB), verificando a sua associação com fatores perinatais e com função pulmonar. Pacientes e Métodos: prematuros com idade gestacional igual ou inferior a 32 semanas, que necessitaram de ventilação mecânica nas primeiras 24 horas por insuficiência ventilatória foram selecionados para o estudo. Foram mensuradas as concentrações das interleucinas TNF-α e IL-10 no LTB coletado dentro das primeiras 24 a 48 horas de intubação endotraqueal pela técnica de ELISA. Amostras subseqüentes foram colhidas nos dias 3, 5, 7, 10, 15 e 20 após intubação, naqueles RNs que permaneceram em ventilação mecânica por esse período. Os pacientes foram acompanhados no ambulatório de Pneumologia Pediátrica e foram realizados testes de função pulmonar após 40 semanas de idade corrigida. Resultados: Foram obtidas 70 amostras seqüenciais de LTB de 25 prematuros incluídos no estudo. Níveis detectáveis de TNF-α foram observados em quarenta e sete amostras (67%) e de IL-10 em dezoito (26%). Não houve associação significativa dos níveis de TNF-α e IL-10 com idade gestacional, peso ao nascimento, doença da membrana hialina, tempo em ventilação mecânica, duração de suplementação de oxigênio e óbito. Nas amostras coletadas no dia 2, foi encontrada uma associação significativa entre a concentração de TNF-a e IL-10 e o tempo de ruptura das membranas amnióticas (p = 0,002, r = 0,652 e p < 0,001, r = 0,57, respectivamente). Em relação ao estudo da função pulmonar, houve uma associação negativa entre a concentração de TNF-a no dia 2 e o FEF75 (p = 0,03 e r = 0,7). Conclusões: TNF-α e IL-10 são detectáveis no LTB de prematuros em ventilação mecânica. Foi observada uma relação direta entre suas concentrações e o tempo de ruptura das membranas amnióticas. Houve uma correlação inversa significativa entre os níveis de TNF-α e o FEF75 nos pacientes submetidos ao teste de função pulmonar.
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Ultrassom seriado no pós-transplante renal precoce /Contti, Mariana Moraes. January 2014 (has links)
Orientador: Maria Fernanda Cordeiro de Carvalho / Coorientador: Luís Gustavo Modelli de Andrade / Banca: Marilda Mazzali / Banca: Luciana Tanajura Santamaria Saber / Resumo: Introdução: O ultrassom (US) é um importante método diagnóstico das causas precoces de disfunção do enxerto renal. Não estão definidos parâmetros seguros para a distinção destas causas de disfunção: Necrose Tubular Aguda (NTA) e rejeição. Torna-se necessário, portanto, o aprimoramento dos métodos complementares para auxílio diagnóstico. Objetivos: O objetivo primário foi definir os parâmetros ultrassonográficos no exame seriado no pós-transplante renal precoce e identificar os preditores de evolução normal, retardo de função do enxerto (NTA) e rejeição. Os objetivos secundários foram: avaliar o Índice de Resistividade (IR), a perfusão renal - pelo Power Doppler (PD) - e o Índice Sistólico (IS). Materiais e Métodos: No período de Junho de 2012 a Agosto de 2013, 79 pacientes que receberam transplante renal de doador vivo ou falecido foram submetidos a dois exames de US: entre o 1º e o 3º pós-operatório (PO) e entre o 7º e o 10º PO. Nos dois exames foram avaliados: IR (nas três segmentares), IS, PD e IR+PD. Os pacientes foram divididos em três grupos: normal, NTA e rejeição. Os achados ultrassonográficos foram correlacionados com o desfecho clínico. Resultados: Ao 1º US o IR nas segmentares superior e média e o PD foram maiores no grupo NTA em relação ao normal. Ao 2º US o IR nas três segmentares e o PD foram maiores no grupo NTA em relação ao normal. O IS não foi diferente entre os grupos em nenhum dos dois exames. A repetição do exame de US não forneceu informações adicionais aos parâmetros já analisados. Com base na análise da curva de característica de operação do receptor (ROC), como chance de NTA, o IR na segmentar média foi o melhor índice isolado (ponto de corte 0,73) e o IR + PD o melhor índice composto (ponto de corte 0,84). O tempo de retardo de função do enxerto e o número de sessões de diálise foram maiores no grupo de IR+PD elevado... / Abstract: Not available / Mestre
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Níveis de arginase, óxido nítrico e o efeito da pge2 na produção de tnf-α em linfonodo de cães com leishmaniose visceral /Venturin, Gabriela Lovizutto. January 2015 (has links)
Resumo:A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica que pode ser fatal para os humanos. A doença é causada por um parasita intracelular, Leishmania infantum e é transmitida pela picada do mosquito flebótomo. Em cães com LV observa-se uma intensa reação inflamatória crônica no fígado, baço, pele, medula óssea e gânglios linfáticos. A atividade arginase é importante na LV, pois o aumento dessa enzima pode contribuir para a multiplicação do parasita e para a redução da síntese de óxido nítrico (NO), predispondo o macrófago à infecção. A prostaglandina E2 (PGE2) pode regular a produção do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e da interleucina-10 (IL-10), porém nenhum estudo ainda foi realizado em cães com LV. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade arginase em macrófagos aderentes de cultura de linfonodos de 23 cães naturalmente infectados e 18 saudáveis, e os níveis de NO e PGE2 no sobrenadante dessas culturas. O efeito regulatório de PGE2 na produção de TNF-α e IL-10 também foi avaliado em cultura de leucócitos totais de linfonodo. Esse estudo ajuda a esclarecer o mecanismo da resposta imunológica na LVC. / Abstract:Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic disease that can be fatal to humans and dogs. The disease is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum and is transmitted by the bite of the sandfly (phlebotomines). In dogs, VL is observed as an intense chronic inflammatory reaction in the liver, spleen, skin, bone marrow and lymph nodes. Arginase activity is important in VL because an increase of this enzyme may contribute to the multiplication of the parasite and a reduction of nitric oxide (NO) synthesis, predisposing a macrophage to infection. Prostaglandin E2 (PGE2) can play a regulatory role in the production of tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10), however, there have been no studies in dogs with LV. This study aimed to evaluate the arginase activity in adherent macrophages cultivated from the lymph nodes of 18 healthy and 23 naturally infected dogs and to examine levels of NO and PGE2 in the supernatant of these cultures. The regulatory effect of PGE2 on the production of TNF-α and IL-10 was also evaluated in supernatants of total lymph node leukocytes cultures. These results help to clarify the mechanisms of the immune response in CVL. / Orientador:Valéria Marçal Felix de Lima / Banca:Alexandra Ivo de Medeiros / Banca:Caris Maroni Nunes / Mestre
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Primeiro relato de isolamento e identificação taxonômica de fungos filamentosos em infecções endodônticas / First report of isolation and taxonomic identification of filament fungus in endodontic infectionsCinthya Cristina Gomes 10 July 2007 (has links)
A proposta deste trabalho foi demonstrar in vivo, por meio de técnicas específicas de isolamento, a presença de fungos filamentosos nos canais radiculares de dentes portadores de necrose pulpar e lesão periapical, relacionar sua presença a pacientes com resposta imunológica comprometida e realizar o estudo taxonômico dos isolados. Foram realizadas culturas de 60 canais radiculares com polpa necrosada e lesão periapical. Os pacientes responderam a um questionário de saúde e assinaram permissão para realização da pesquisa. Após isolamento absoluto e assepsia do campo operatório, as amostras foram coletadas utilizando-se 3 pontas de papel absorvente estéreis inseridas no canal radicular uma a uma, durante 1 minuto. Em campo isolado por duas lamparinas, o material coletado foi inoculado em um tubo de ensaio contendo meio de Saboraud Agar acrescido de Cloranfenicol. Próximo ao campo isolado pelas duas lamparinas, foi colocada uma placa de Petri aberta contendo o mesmo meio de cultura contido no tubo de ensaio, com o intuito de verificar a acuidade do isolamento do campo (controle negativo). Ao mesmo tempo foi efetuado um controle positivo, através de uma placa de Petri que permaneceu aberta durante a coleta, fora do campo isolado. Os tubos e placas de Petri foram mantidos em temperatura ambiente por um período de sete a quatorze dias observando o crescimento micelial. Aqueles que apresentaram crescimento foram semeados em meios específicos para microcultivo CYA Agar, Extrato de Malte Agar, ou Agar Batata. Com o auxílio de microscopia óptica, as colônias foram identificadas em gênero e espécie. Das 60 amostras coletadas, 17 apresentaram cultura positiva para fungos filamentosos, perfazendo um total de 28,3%. O gênero Aspergillus foi isolado, in situ, de 7 amostras (11,6%), sendo que a espécie Aspergillus ustus foi isolada de 3 pacientes (5%). O Aspergillus granulosus, Aspergillus niger e o Aspergillus sydowii foram isoladas de 3 pacientes respectivamente. A espécie Emericella quadriluniata, forma sexuada de Aspergillus, foi isolada de 1 paciente. O gênero Penicillium foi isolado, in situ, de 4 amostras (6,6%), sendo as espécies isoladas: Penicillium implicatum, Penicilium micsynvisk, Penicillium lividum e Penicillium citrionigrum. O gênero Fusarium foi isolado, in situ, de 2 amostras (3,3%), sendo as espécies identificadas como Fusarium moniliforme, Fusarium melanochorum, respectivamente. As espécies Aureobasidium pullulans, Exophiala jeancelmei, Eurotium amstelodame e Cladosporium sphaerospermum foram isoladas in situ de 4 amostras. Todos as amostras nas quais foi isolado fungo filamentoso pertenciam a pacientes com comprometimento da resposta imunológica. Nas placas de Petri empregadas no raio das duas lamparinas, não houve crescimento micelial. Entretanto nas placas controle positivo abertas para verificar a contaminação do meio ambiente houve crescimento de fungos ambientais que não eram compatíveis com os isolados dos canais radiculares, além de não apresentarem culturas puras. Pôde-se concluir que canais radiculares, com necrose pulpar e lesão periapical, podem apresentar cultura positiva para fungos filamentosos e que este resultado, neste estudo, apresentou relação direta com a deficiência da resposta imunológica do hospedeiro. / The purpose of the present study was to evaluate in vivo, with specific techniques that isolates the presence of filament fungus in the root canal of teeth with necrotic pulp and perirradicular disease, see the relationship between the presence of these fungus and patients with immunological deficiency and carry out a taxonomic study of the fungus isolated. It was fulfilled the culture of 60 root canals of teeth with necrotic pulp and perirradicular disease. The patients answered a health questionnaire and signed a term to allow the research. After the absolute isolation and cleaning the operating field the samples were collected using three sterile paper points inserted into the root canal during 1 minute. In an isolated field by two lamps, the collected materials were inoculated in a tube with Saboraud Agar with Cloranfenicol. Nearby the isolated field with lamps it was placed an opened Petri plaque with the same culture material from the tubes with the purpose to verify the perceptiveness of the isolated field (negative control). At the same time it was carried out the positive control group with an opened Petri plaque that was maintained far from the isolated fields. The tubes and the Petri plaque were maintained in atmosphere temperature during seven to fourteen days to observe micelial growth. Those that showed growth were spread on specific environment for microcultivation CYA Agar, Extract of Agar Malt or Agar potato. With the help of an optic microscope the colonies were identified in genre and species. Among the 60 samples collected, 17 showed positive culture for filament fungus, making up a total of 28,3%. The genre Aspergillus was isolated, in situ, of 7 samples (11,6%), and the species Aspergillus ustus was isolated from 3 pacients (5%). The Aspergillus granulosus, Aspergillus niger e o Aspergillus sydowii were isolated from 3 pacients respectivaly. The species Emericella quadriluniata, sexual form of Aspergillus, was isolated from 1 pacient. The genre Penicillium was isolated, in situ, from 4 samples (6,6%), where the species isolated were Penicillium implicatum, Penicilium micsynvisk, Penicillium lividum and Penicillium citrionigrum. The genre Fusarium was isolated, in situ, from 2 samples (3,3%), where the species identified were Fusarium moniliforme, Fusarium melanochorum, respectively. The species Aureobasidium pullulans, Exophiala jeancelmei, Eurotium amstelodame and Cladosporium sphaerospermum were isolated in situ from 4 samples. All the samples where it was isolated the filament fungus belonged to pacients with the imunolgical response compromised. On the Petri plaques employed at the range of the two lamp, it was not seen micelial growth. Thereby, on the positive control plaques, opened to check the contamination of the environment showed the growth of ambiental fungus that were not compatible with the fungus isolated from the root canal, and did not shor pure culture. It was concluded that root canal with necrotic pulp and periapical disease, can show positive culture for filament fungus and these results were directly related to the deficiency of the immunological response of the hostess.
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Purifica??o e caracteriza??o de uma nova lectina com atividade imunomoduladora da esponja Aplysina fulvaSantos, Paula Ivani Medeiros dos 10 July 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-07-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / As esponjas marinhas se apresentam como uma rica fonte de novos compostos bioativos de grande interesse biotecnol?gico, vimos, neste trabalho, relatar a purifica??o e caracteriza??o de uma lectina da esp?cie Aplysina fulva, denominada AFL com atividade imunomoduladora, bem como avaliar se a mesma possue efeito citot?xico sobre c?lulas em cultura (normais, tumorais e leishmanias). As prote?nas totais foram extra?das da esponja com tamp?o Tris-HCl 20 mM, pH 7,5, e fracionadas por precipita??o com acetona. A fra??o obtida com 1 volume de acetona possu?a maior atividade hemaglutinante e foi submetida a uma cromatografia em matriz de goma guar com tamp?o tetraborato de s?dio 20 mM, pH 7,5. Em seguida foi aplicada em uma coluna de Superdex 75 (FPLC-AKTA) contendo tamp?o Tris- HCl 20 mM, pH 7,5. A pureza da lectina foi atestada em uma coluna HILIC (HPLC). A sequ?ncia de 15 res?duos de amino?cidos do N-terminal da lectina foi determinada por degrada??o de Edman e n?o apresentou similaridade com nenhuma outra prote?na dos bancos de dados mais conhecidos. A massa foi estabelecida em 62 kDa, por gel filtra??o em Superdex 75. An?lise ap?s tratamento com agentes redutores permitiu deduzir que AFL ? uma prote?na homotetram?rica. Sua atividade hemaglutinante foi reduzida quando a lectina foi exposta em meio ?cido (pH < 4) ou quando submetida a temperaturas acima de 60 ?C. AFL apresentou especificidade para lactose e parcial para D-glicose e D-galactose. A lectina purificada AFL n?o apresentou efeito citot?xico para as linhagens de c?lulas cancer?genas (PANC, HeLa, HT-29, Bf16F10, A549) e de fibroblastos (MRC5). AFL foi capaz de aglutinar formas promastigotas vivas de Leishmania amazonensis e Leishmania. braziliensis,e teve sua atividade revertida pela adi??o de lactose ao ensaio. AFL n?o diminuiu de forma significante a viabilidade de Leishmania amazonensis. A lectina AFL apresentou atividade mitog?nica em concentra??es a partir de 40 ?g/mL para c?lula mononucleares do sangue perif?rico (mon?citos e linf?citos). A lectina AFL foi capaz de induzir na linhagem de macr?fagos (RAW264.7) de murinos a libera??o de TNF- ?, mas n?o de IL-6, na concentra??o de 10,0 ?g/mL. Quando AFL foi incubada com c?lulas espl?nicas de camundongos BALB/c, foi capaz de estimular a produ??o de IFN-? e promover a diferencia??o de c?lulas T para uma resposta imune celular do tipo Th1. A capacidade de modular a resposta imune do tipo Th1 jamais foi relatada em lectinas de esponjas marinhas. Todos os resultados corroboram com o alto potencial que a lectina AFL apresenta como uma nova mol?cula capaz de modular o sistema imune, podendo ser utilizada como adjuvante de vacinas contra microrganismos, dentre eles, os do g?nero leishmania. / Marine sponges are presented as a rich source of new bioactive compounds of great biotechnological interest. Here in this research we report the purification and characterization of a lectin from Aplysina fulva species, called AFL, that presents immunomodulatory activity, and it was also evaluated whether it possesses cytotoxic effects on cultured cells (normal, tumor and Leishmania). Total proteins were extracted from the sponge with Tris-HCl buffer 20 mM, pH 7.5, and fractionated by precipitation with acetone. The fraction obtained with 1 volume of acetone had greater hemagglutinating activity and was subjected to a column chromatography on guar gum matrix with 20 mM sodium tetraborate buffer, pH 7.5. It was then applied to a Superdex 75 column (AKTA-FPLC) containing 20 mM Tris-HCl buffer, pH 7.5. The purity of the lectin was attested in a HILIC (HPLC) column. The sequence of 15 residues of N-terminal amino acid of the lectin was determined by Edman degradation and showed no similarity to any other protein of the known databases. The molecular mass was set at 62 kDa by gel filtration on Superdex 75. Analysis after treatment with reducing agents enabled to deduce that the AFL is a homotetrameryc protein. Their hemagglutinating activity was reduced when the lectin was exposed in an acidic medium (pH <4) or when subjected to temperatures above 60 ? C. AFL showed specificity for partial lactose and D-glucose and D-galactose. The purified lectin LFA showed no cytotoxic effect on cancer cell lines (PANC, HeLa, HT-29, Bf16F10, A549) and fibroblast (MRC5). AFL was able to agglutinate living promastigotes of Leishmania amazonensis and Leishmania braziliensis, and had their activity reversed by the addition of lactose to the test. AFL did not decrease significantly the viability of Leishmania amazonensis. The AFL lectin showed mitogenic activity at concentrations from 40 ug / ml for mononuclear peripheral blood cells (lymphocytes and monocytes). The AFL lectin was able of induce the macrophage murine lineage (RAW264.7) release of TNF-?, but not IL-6 at a concentration of 10.0 mg / mL. When LPA was incubated with spleen cells from BALB / c mice was able to stimulate the production of IFN-? and to promote the differentiation of T cells to a cellular Th1 immune response. The ability to modulate the immune response of the Th1-type lectins has never been reported in marine sponges. All results confirm the high potential that the lectin AFL, that appears as a new molecule capable of modulating the immune system and can be used as an adjuvant for vaccines against microorganisms, including the gender Leishmania.
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Avaliação macro e microscópica de lesões orais induzidas por procedimentos cirúrgicos em ratos sob terapia com bisfosfonatos / Macro and microscopic evaluation of lesions induced by oral surgical procedures in rats under therapy with bisphosphonatesVasconcelos, Ana Carolina Uchoa January 2012 (has links)
Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-06-06T13:32:17Z
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438871.pdf: 2788222 bytes, checksum: aa94bbb31ea254da3b082595c7658ecb (MD5) / The aim of this work was to compare clodronate and zoledronic acid effect on the repair of surgical wounds induced by tooth extraction and oral soft tissue lesion. Thirty-four rats (Rattus novergicus, Wistar) were allocated into 3 groups: (1) 12 animals treated with zoledronic acid; (2) 12 animals treated with clodronate; and (3) 10 animals that were given saline solution. Elapsed 90 days from the beginning of the treatment, the animals were subjected to tooth extractions and surgical-induced soft tissue injury in maxillae. At 180 days of drug administration, they were euthanized. After macroscopic evaluation, maxillae were processed and histological cuts were stained with hematoxylin and eosin (H&E). Immunohistochemical expression of RANKL, OPG, von Willebrand and caspase-3 was also evaluated. Non-vital bone, inflammatory infiltrate, microbial colonies, epithelial tissue, connective tissue and vital bone were quantified at the tissue wound sites. At the tooth extraction site, root fragments were also evaluated. The variables were quantified with Image Pro Plus software. Macroscopic analysis at the tooth extraction site showed that zoledronic acid group was associated with loss of mucosal integrity (chi-square, residual adjusted analysis, p<0.001), whereas at the soft tissue wound site, no group showed this association (chi-square, p=0.151). At the tooth extraction site, the zoledronic acid group showed greater proportion of non-vital bone and microbial colonies in comparison with the other groups. At the soft tissue wound site, the proportions of non-vital bone and microbial colonies were greater in the zoledronic acid and clodronate groups than in the control group. There was no significant difference for epithelial tissue, inflammatory infiltrate and root fragments between the groups (Kruskal-Wallis test complemented by its multiple comparisons test, p>0.05). Immunohistochemical expression of RANKL, OPG, von Willebrand and caspase-3 at tooth extraction and soft tissue wound sites did not differ significantly between the three groups analyzed (Kruskal-Wallis test, p>0.05). According to the results, (1) both bisphosphonates zoledronic acid and clodronate are capable of inducing osteonecrosis; (2) the immunohistochemical analysis suggests that the involvement of soft tissues as the initiator of osteonecrosis development is less probable than has been pointed out. / A presente pesquisa teve por objetivo comparar a influência dos bisfosfonatos ácido zoledrônico e clodronato no reparo de feridas cirúrgicas induzidas por meio de exodontia e lesão de tecido mole oral. Trinta e quatro ratos (Rattus novergicus, linhagem Wistar) foram distribuídos em três grupos: (1) 12 animais tratados com ácido zoledrônico; (2) 12 animais tratados com clodronato; e (3) 10 animais que receberam solução salina. Decorridos 90 dias do início do tratamento, os animais foram submetidos a exodontias e procedimentos cirúrgicos em tecido mole, ambos na maxila. Aos 180 dias de administração dos fármacos, foi realizada a eutanásia. Após avaliação macroscópica, as maxilas foram processadas, e os cortes histológicos corados por hematoxilina e eosina (H&E), bem como submetidos a processamento imunoistoquímico com os marcadores RANKL, OPG, von Willebrand e caspase-3. Nas lâminas coradas por H&E, foram quantificadas as variáveis osso não-vital, osso vital, infiltrado inflamatório, colônias microbianas, tecido epitelial e tecido conjuntivo, sendo que, no sítio das exodontias, os restos radiculares também foram avaliados. A análise histológica foi realizada por meio do programa Image Pro Plus. Na avaliação macroscópica, no sítio das exodontias o grupo ácido zoledrônico exibiu associação com solução de continuidade da mucosa (qui-quadrado, análise de resíduos ajustados, p<0,001), enquanto na área de lesão de tecido mole, nenhum grupo exibiu essa associação (qui-quadrado, p=0,151). No sítio das exodontias, o grupo ácido zoledrônico exibiu proporção significativamente maior de osso não-vital e colônias microbianas do que os demais grupos. Na lesão de tecido mole, a proporção de osso não-vital e colônias microbianas foi significativamente maior nos grupos ácido zoledrônico e clodronato do que no controle. Não houve diferença significativa das variáveis tecido epitelial, infiltrado inflamatório e resto radicular entre os grupos (Kruskal-Wallis teste de comparações múltiplas, p>0,05). A expressão imunoistoquímica de RANKL, OPG, von Willebrand e caspase-3 também não diferiu significativamente entre os grupos (Kruskal-Wallis, p>0,05). Os resultados permitem concluir que (1) ambos, ácido zoledrônico e clodronato, são capazes de induzir osteonecrose; (2) de acordo com a análise imunoistoquímica, é pouco provável que eventos intrínsecos à mucosa oral sejam os iniciadores da osteonecrose.
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Métodos avançados de ressonância magnética de crânio na diferenciação entre radionecrose e recidiva tumoralLongo, Maria Gabriela Figueiró January 2015 (has links)
JUSTIFICATIVA E OBJETIVO: Muitos estudos reportaram o benefício dos métodos avançados de ressonância magnética (RM) para a avaliação da resposta ao tratamento do tumor cerebral, a fim de distinguir entre recidiva tumoral e radionecrose. No entanto, o tamanho da amostra em cada estudo é relativamente pequeno, o que torna difícil avaliar a validade externa. Nós realizamos uma revisão sistemática e metanálise de dados publicados afim de avaliar a acurácia dos métodos avançados de RM para diferenciação entre a recidiva e a radionecrose. Nosso objetivo foi determinar o valor diagnóstico da difusão (DWI), da perfusão Dynamic Susceptibility Contrast (PWI DSC), perfusão Dynamic Contrast Enhancement (PWI DCE) e espectroscopia (MRS). MATERIAL E MÉTODOS: A revisão sistemática incluiu todos os estudos que usaram métodos avançados de RM para detectar recidiva ou radionecrose em pacientes em segmento por tratamento radioterápico para tumor cerebral. A pequisa foi realizada nas bases de dados MEDLINE e Embase, das publicações até 31 de Julho de 2015. As sensibilidades e especificidades de cada estudo foram calculadas e a acurácia diagnóstica foi metanalisada, com um intervalo de confiança (IC) de 95%, em um modelo de efeito randômico. Foram realizados testes de heterogeneidade, sobre o efeito dos pontos de corte e modelos de metarregressão. Análises de subgrupos foram feitas com base em conjuntos de estudos com características homogêneas. RESULTADOS: 49 artigos foram incluídos na análise quantitativa, englobando um total de 1.508 pacientes. Cinco estudos avaliaram DWI, 32 avaliaram PWI e 21 avaliaram MRS. A sensibilidade (SEN) e especificidade (ESP) geral da DWI foi 81,0% (IC 95%: 71,0 a 89,0%) e 68,0% (IC 95%: 52,0 a 82,0%), respectivamente. A SEN e ESP da PWI DSC foi de 83,0% (IC 95%: 80,0 a 86,0%) e 81,0% (IC 95%: 76,0 a 85,0%) e da PWI DCE foi 76,0% (IC 95%: 66,0 a 85,0%) e 85,0% (IC 95%: 74,0 a 93,0%), respectivamente. A SEN e ESP da MRS foi de 76,0% (IC 95%: 71,0 a 80,0%) e 83,0% (IC 95%: 77,0 a 88,0%), respectivamente. O odds ratio diagnóstico (DOR) da DWI, PWI DSC, PWI DCE e MRS foi 14,83; 25,81; 14,45 e 27,39; respectivamente. O maior valor do DOR nos estudos com PWI DSC foi quando o ponto de corte do Volume Sanguíneo Cerebral relativo (rCBV) foi maior ou igual a 1,8 e o maior valor do DOR nos estudos com MRS foi quando o ponto de corte da relação Cho/Cr foi maior ou igual a 1,3. O valor do DOR nos estudos com MRS foi muito maior nos trabalhos realizados com equipamento de 3T (DOR = 40,07; IC 95%: 15,44 a 104,03) quando comparado aos trabalhos realizados em equipamento com 1,5T (18,69; IC95%: 8,32 a 42,02). CONCLUSÃO: Esta metanálise demonstrou que os métodos avançados de RM tem uma moderada e alta acurácia na diferenciação da recidiva tumoral da radionecrose usando os métodos de DWI, PWI DSC, PWI DCE e MRS. Algumas análises de subgrupos e testes de efeito do ponto de corte mostraram que alguns cenários têm uma tendência de melhor acurácia. / BACKGROUND AND PURPOSE: Several studies reported the benefit of magnetic resonance (MR) advanced methods for the treatment response of brain tumor assessment, for distinguishing tumor recurrence from radionecrosis in gliomas and other brain tumors. However, the sample size in each study is relatively small, which becomes difficult to draw conclusions about external validity. We performed a systematic review and meta-analysis of published data to evaluate the accuracy of the advanced MR methods for differentiating recurrence from radionecrosis. Our objective was to determine the diagnostic value of Diffusion (DWI), Dynamic Susceptibility Contrast Perfusion (PWI DSC), Dynamic Contrast Enhancement Perfusion (PWI DCE) and Spectroscopy (MRS), and compare the results between the methods MATERIALS AND METHODS: The systematic review included all studies that used MR advanced methods to detect recurrence or radionecrosis in patients followed by brain tumor radiotherapy. The databases selected were MEDLINE and Embase, for published data prior to July 31, 2015. The sensitivities and specificities of individual studies were calculated and the pooled diagnostic accuracies, with 95% confidence intervals (CI), were assessed under a random-effects model. It was also performed heterogeneity test, threshold effect test and meta-regression models for each MR method. A subgroup analysis was performed based on homogeneous subsets of the studies. RESULTS: 49 articles were included in the quantitative analysis, compromising 1,508 patients (919 with recurrence and 589 with radionecrosis). Five studies assessed DWI, 32 assessed PWI, and 21 assessed MRS. Overall sensitivity (SEN) and specificity (SPE) of DWI were 81.0% (95% CI: 71.0 to 89.0%) and 68.0% (95% CI: 52.0 to 82.0%), respectively. The SEN and SPE of PWI DSC were 83.0% (95% CI: 80.0 to 86.0%) and 81.0% (95% CI: 76.0 to 85.0%) and PWI DCE were 76.0% (95% CI: 66.0 to 85.0%) and 85.0% (95% CI: 74.0 to 93.0%), respectively. The SEN and SPE of MRS were 76.0% (95% CI: 71.0 to 80.0%) and 83.0% (95% CI: 77.0 to 88.0%), respectively. The overall diagnostic odds ratio (DOR) of DWI, PWI DSC, PWI DCE, and MRS were 14.83, 25.81, 14.45, and 27.39, respectively. The point with the highest DOR in the PWI DSC studies was when the relative Cerebral Blood Volume (rCBV) threshold was equal or higher than 1.8, and the point with the highest DOR in the MRS studies was when the Cho/Cr threshold was equal or higher than 1.3. The MRS DOR value is much higher in the 3T subgroup (40.07, 95% IC: 15.44 to 104.03), compared to the 1.5T subgroup (18.69, 95% CI: 8.32 to 42.02). CONCLUSIONS: This meta-analysis showed that MR advanced methods have moderate to high accuracy in differentiating tumor recurrence from radiation necrosis using DWI, PWI DSC, PWI DCE and MRS. Some subgroup analysis and threshold effect tests demonstrated subsets that have a better accuracy trend.
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Níveis de fatores inflamatórios e oxidativos em pacientes com Doença de GaucherGarcia, Cristina da Silva January 2015 (has links)
A Doença de Gaucher (DG) é a doença lisossômica de depósito mais frequente, sendo causada pela deficiência da atividade da enzima β-glicosidase ácida (GBA), que é responsável pela degradação de glicosilceramidas nos lisossomos. Seu déficit resulta no acúmulo intracelular de glicosilceramidas formando as chamadas Células de Gaucher. A DG é dividida em três grupos baseada na ausência (tipo 1) ou presença e gravidade de envolvimento do sistema nervoso central (tipo 2 e 3). A demonstração da deficiência da atividade da GBA é considerada o método padrão ouro para o diagnóstico, sendo complementada pela medida da atividade da enzima quitotriosidase (QT), que é considerada um biomarcador para a DG. Embora a função exata das células de Gaucher ainda permaneça desconhecida, acredita-se que elas secretam fatores que induzem resposta inflamatória e a produção de espécies reativas. Sabe-se que a instituição do tratamento por reposição enzimática (TRE) diminui significativamente a atividade da QT, porém essa diminuição não chega até os níveis de normalidade. A deficiência da GBA na DG também induz uma cascata de eventos, culminando secundariamente na produção de espécies reativas. Visto isso, o objetivo deste trabalho foi mensurar os níveis de citocinas próinflamatórias (IL-6, TNF-α e IL-17a), proteína S100B em pacientes com DG com e sem tratamento por reposição enzimática e relacioná-los com a atividade da QT, e também, determinar o nível de alguns marcadores de dano oxidativo como substancias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), conteúdo de carbonilas, atividade da catalase (CAT) e superoxido dismutase (SOD) e mensurar o conteúdo total de sulfidrilas (SH), marcadores da defesa antioxidante, visando um método auxiliar para o diagnóstico e acompanhamento do tratamento destes pacientes. Observamos que os níveis de IL-6 em pacientes DG sem tratamento foi duas vezes maior do que os encontrados nos indivíduos saudáveis e que a instituição do TRE provoca uma diminuição significativa nos níveis de IL-6 no soro dos pacientes. Também foi observada uma correlação positiva entre os níveis de IL-6 e a atividade da QT, ou seja, quanto maior a atividade da QT, maior os níveis de IL-6 no soro de pacientes em tratamento. Já as outras citocinas pró-inflamatórias mensuradas, TNF-α e IL-17a, não apresentaram diferença significativa entre os indivíduos saudáveis e os pacientes Gaucher, bem como a medida da proteína S100B. Nos fatores oxidativos observamos alterações na CAT, SOD e sulfidrilas, o que sugere que pacientes DG sofrem mudanças na produção de espécies reativas quando comparados aos indivíduos normais. Este aumento na CAT, SOD e sulfidrilas poderia estar relacionado com a prevenção do aumento do peróxido de hidrogênio e a prevenção de danos lipídicos. No entanto, os outros três parâmetros (TBARS, carbonila e relação SOD / CAT) não demonstraram uma diferença significativa entre os grupos. Com isso, concluímos que a IL-6 mostrou-se a melhor ferramenta a ser utilizada juntamente com a QT para auxiliar no diagnóstico e acompanhamento do tratamento de pacientes DG.
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Correlação de fluorescência superficial e profundidade de necrose em terapia fotodinâmica: possibilidade de dosimetria em tempo real / Correlation of surface fluorescence and depth of necrosis in photodynamic therapy: possibility for real-time dosimetryJosé Dirceu Vollet Filho 11 November 2011 (has links)
O tratamento do câncer e de lesões pré-malignas é uma importante aplicação da terapia fotodinâmica. A base da técnica é o uso da luz associada a um fotossensibilizador, na presença de oxigênio, de forma a promover a formação de espécies reativas de oxigênio que culminam na morte celular. Esta técnica é altamente seletiva, e apresenta poucos efeitos colaterais. A efetividade da terapia pode ser avaliada com base na emissão de fluorescência do fotossensibilizador, uma vez que o grau de fotodegradação deste indica uma terapia mais ou menos efetiva. No caso de tumores, a reincidência de lesões, causada por células malignas remanescentes, é um problema importante e que pode piorar as condições clínicas de um paciente. Este estudo propõe, portanto, um modelo matemático baseado na aferição da fluorescência do fotossensibilizador in situ para previsão da extensão do dano promovido pela terapia fotodinâmica em tempo real. Esta aferição é feita em comparação com o parâmetro experimental de profundidade de necrose, de modo a avaliar se uma lesão pode ser completamente eliminada numa dada aplicação. O estudo utilizou fígados de ratos Wistar machos, saudáveis, como modelo inicial dada sua relativa homogeneidade óptica com relação a lesões tumorais, visando minimizar variáveis. Os fígados foram irradiados com diferentes intensidades (150, 250 e 350 mW/cm2) e com diferentes fluências (50-450 J/cm2) de luz com comprimento de onda de 630 nm, CW, para avaliação das necroses e da fluorescência (avaliada usando 532 nm para excitação). A primeira versão do modelo utilizou o conjunto de dados de 250 mW/cm2 para obtenção de um modelo inicial baseado na fotodegradação avaliada por fluorescência. Este modelo foi alterado com base em modificações biológicas observadas na literatura durante a terapia. Tais alterações estão relacionadas à modificação de aporte de oxigênio causada por vasoconstricção, pela farmacocinética do fotossensibilizador e pelas modificações nas propriedades ópticas intrínsecas ao tecido. Foi possível encontrar equivalência entre modelo e experimentação ao final das modificações propostas ao modelo inicial, embora tenha sido evidente o efeito da variação no fracionamento da fluência entregue sobre os resultados da previsão. Como forma de mostrar a capacidade do modelo não apenas para previsão da profundidade de necrose (e, portanto, da extensão do dano), mas também para avaliações de dosimetria, foi proposta uma situação hipotética onde se entrega a mesma fluência de luz com intensidades diferentes (variando linearmente). Este teste mostrou o potencial do modelo não apenas para avaliar a extensão do dano causado pela terapia em tempo real, mas também para estimar os resultados de protocolos clínicos não-testados e, portanto, para a proposta de melhorias a protocolos de terapia fotodinâmica. / Malignant and pre-malignant cancer lesions treatment is an important application of photodynamic therapy. It is based on the use of light associated to a photosensitizer, in the presence of oxygen, so that reactive oxygen species may be formed, resulting in cell death. This is a highly selective technique, and few side effects are reported. The therapy efficacy may be evaluated through the photosensitizer fluorescence emission, since its level of bleaching indicates a more or less effective therapy application. Concerning cancer, recurrent lesions, caused by remaining malignant cells, is an important problem which may cause the worsening of patient´s clinical condition. Therefore, this study proposes a mathematical model based on the assessment of photosensitizer fluorescence in situ for prediction of the damage extent caused by photodynamic therapy. This evaluation is performed by comparison with the experimental parameter of depth of necrosis, as to evaluate if a lesion can be completely eliminated during an application. This study used male Wistar rats healthy livers as an initial model due to its relative optical homogeneity when compared to tumor lesions, hence minimizing variables. Livers were irradiated using different light fluence rates (150, 250 and 350 mW/cm2) and fluences (50-450 J/cm2) with 630 nm wavelength, CW, to perform evaluation of fluorescence (wit 532 nm excitation) and depth of necrosis. A first model was obtained from the 250 mW/cm2 dataset, based on fluorescence-assessed photobleaching. Such model was modified according to literature observations on biological changes during therapy. Those changes are related to the oxygen arrival, promoted by vessels shutdown, by the photosensitizer pharmacokinetics and by the changes in the intrinsic optical properties of liver tissue. Correspondence between model and experimentation was achieved after the changes proposed to the initial model, although the effect of different fractioning of light fluences on prediction has become evident. To show the model ability not only to predict depth of necrosis (and, hence, damage extent), but also for dosimetry studies, an hypothetical situation in which the same fluence has been delivered in different (linearly varying) fluence rates. This test result showed the potential of the model not only to evaluate the damage extension by the therapy in real-time, but also to investigate untested clinical protocols results and, therefore, to allow proposals of improvement to photodynamic therapy protocols.
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