Neospora caninum é um protozoário Apicomplexa, parasita intracelular obrigatório que possui o cão e outros canídeos como hospedeiros definitivos e os bovinos como principais hospedeiros intermediários. Causa nos primeiros encefalopatia e nos últimos abortos com perda da fertilidade, gerando prejuízos significativos na pecuária mundial. Como Toxoplasma gondii e Plasmodium, N. caninum possui um sistema específico de secreção que permite a invasão ativa do parasita na célula hospedeira, formação do vacúolo parasitóforo e replicação. Devido ao seu ciclo intracelular, várias estratégias foram desenvolvidas para caracterizar o processo de invasão no filo, como deleção ou controle da expressão de genes envolvidos. Entre os genes com papel importante no processo invasivo, NcMic2-like1 possui destaque já que o soro contra essa proteína recombinante inibiu 60% da invasão de N. caninum in-vitro. Essa proteína micronêmica possui domínios adesivos (uma integrina e seis trombospondinas) que atuam na ligação entre os receptores da célula hospedeira e o motor de actina e miosina do parasita, possibilitando a invasão ativa. O objetivo central do trabalho foi o desenvolvimento de ferramentas genéticas para a deleção e hiperexpressão de NcMic2-like1 e outras proteínas em N. caninum para a compreensão profunda desse mecanismo, além da caracterização, localização e expressão de NcMic2-like1. Para isso dois modelos baseados na resistência a drogas e integração ao genoma do parasita foram construídos. Um se baseia na resistência contra cloranfenicol (pelo gene Cloranfenicol Acetil Transferase - CAT) e o outro contra pirimetamina (pela mutação da Diidrofolato Redutase-Timidilato Sintase - DHFRM2M3). As sequências que conferem resistência foram ligadas ao promotor e região 3\' UTR de três genes de N. caninum, NcSAG1 (ou SAG1-like); NcDHFR ou NcHXGPRT conferindo resistência às drogas após transfecção. A esses vetores de resistência foram ligadas duas sequências do controle de expressão por tetraciclina, o sistema TetR/tetO. Adaptando o sistema de T. gondii para N. caninum, TetR foi expresso sob controle do promotor RPS13 ou Tubulina de N. caninum e tetO controlou a expressão de Lac-Z (?-galactosidase), ii uma enzima repórter. TetR e tetO foram transfectados de modo estável utilizando os vetores CAT e DHFRM2M3. O sistema foi responsivo à adição de tetraciclina, além de indicar um meio provavelmente independente de TetR quando apenas tetO foi avaliado em N. caninum. Foi possível expressar Lac-Z em N. caninum, possibilitando o desenvolvimento e padronização de ensaios de invasão, crescimento e detecção do taquizoíta. Também foi realizada a detecção de YFP (proteína amarelo fluorescente) nos taquizoítas transfectados com YFP fundida em TetR. Essas ferramentas de inserção e deleção de genes possibilitaram a construção de vetores para a hiper expressão ou deleção de NcMic2-like1. Para hiper expressão o vetor foi obtido pela substituição de Lac-Z pelo gene NcMic2-like1. Para deleção de NcMic2-like1 o vetor foi desenvolvido pela ligação do seu promotor e região 3\' UTR ä CAT ou NcDHFRM2M3, que promove a substituição do gene alvo pelos de resistência por recombinação homóloga. Adicionalmente foram desenvolvidas formas para a expressão e purificação de proteínas em N. caninum. Também foi obtida a solubilização de NcMIC2-like1 recombinante pelo sistema pET28 após a adição de uma cauda solúvel amplificada do genoma de N. caninum. O desenvolvimento de métodos de manipulação genética é um fato inédito para N. caninum e possibilitará estudos moleculares mais profundos sobre os mecanismos de invasão e replicação, onde NcMic2-like1 aparece como primeira candidata para esses ensaios. / The Apicomplexa protozoan Neospora caninum is an obligate and intracellular parasite that has the dog and other canides as definitive host and especially cattle as intermediate hosts. It causes respectively encephalopathy. abortions and loss of fertility causing deep economic impact at the world livestock. As Plasmodium and Toxoplasma gondii, N. caninum has a specific system of active secretion, which allows the invasion of the parasite into the host cell, the establishment of parasitophorous vacuole and replication. Due to the intracellular cycle of parasite, several strategies have been developed to characterize the invasion process of the phylum, such as deletion or control of expression of related genes. Among the genes with an important role in the invasive process, NcMic2-like1 stands out, once the serum against the recombinant form inhibited the in vitro invasion of N. caninum up to 69%. This microneme protein has adhesive domains (one integrin and six thrombospondins) acting between the host cell receptors and the actin/myosin motor of the parasite, allowing the active invasion. The main aim of this work was the development of genetic tools for deletion and overexpression of NcMic2-like1 and other proteins in N. caninum for a deep understanding of this mechanism, in addition to the characterization, localization and expression of NcMic2-like1. Therefore two models based on the drug resistance and integration into the genome of the parasite were constructed. One was based on the resistance against chloramphenicol (chloramphenicol acetyl transferase gene by - CAT) and the other against pyrimethamine (by mutation of dihydrofolate reductase-thymidylate synthase - DHFRM2M3). The sequences that confer these two drug resistance patterns have been ligated to the promoter and the 3\' UTR region of three genes from N. caninum, NcSAG1 (or SAG1-like); NcDHFR or NcHXGPRT, conferring resistance to the drugs after transfection. These vectors were ligated to two sequences that confer resistance controlled by tetracycline, the TetR / tetO system. The T. gondii system was adapted for N. caninum. TetR was expressed under the control of N. caninum tubulin promoter and tetO controlled the expression of Lac-Z (?-galactosidase), a reporter enzyme. TetR and tetO were stably inserted in N. caninum after transfection iv with the vectors based on CAT and DHFRM2M3.The system was responsive following tetracycline presence, in addition to a TetR independent mechanism in N. caninum . Moreover, it was possible to express Lac-Z in N. caninum enabling the development and standardization of invasion, growth and detection tachyzoite assays. It was also possible to detect through fluorescence microscopy the YFP (yellow fluorescent protein) in tachyzoites transfected with YFP fused to TetR.. The tools for gene insertion and deletion allowed the construction of vectors for hiperexpression or deletion of NcMic2-like1. For hiperexpression the vector was obtained by the replacement of the Lac-Z by the NcMic2-like1 gene. For the NcMic2-like1 deletion the vector was achieved after the ligation of its promoter and 3 \'UTR region to CAT or NcDHFRM2M3. This approach leads to the replacement of the target gene by the resistance gene through homologous recombination. Furthermore approaches for expression and purification of proteins in N. caninum were developed. Also, a soluble recombinant NcMIC2-like1 form was obtained with pET28 system added with a soluble tail amplified from a genome region of N. caninum. The development of genetic manipulation methods is an unprecedented event for N. caninum and will enable deeper molecular studies over mechanisms of invasion and replication, where NcMic2-like1 is the first candidate for these assays.

O objetivo deste estudo foi infectar experimentalmente cães com oocistos esporulados de N. caninum, via oral e avaliar a ocorrência ou não da infecção. Os oocistos utilizados como inóculo foram obtidos através de bioensaio em cães, usando cérebro de búfalos soropositivos para anticorpos anti-N. caninum. Os oocistos obtidos foram confirmados ser de N. caninum por métodos moleculares e por bioensaio em gerbilos. Oocistos esporulados, com no máximo 90 dias, foram utilizados na infecção de quatro cães, com oito semanas de vida e negativos para anticorpos anti-N. caninum e Toxoplasma gondii. Os cães 1 e 4 receberam um inóculo com 10.000 oocistos esporulados cada um; o cão 2 um inóculo com 5.000 oocistos esporulados e o cão 3 recebeu 1.000 oocistos esporulados de N. caninum. O total de fezes foi coletado e examinado diariamente durante um período de 30 dias. Nenhum oocisto foi encontrado nas fezes desses animais. Durante seis meses os cães foram acompanhados para observar uma possível soroconversão e quando esta ocorria os animais eram eliminados do experimento. / The objective of this study was to evaluate the acquisition of infection in dogs experimentally infected with sporulated oocysts. The oocysts used as inoculum were obtained by bioassay in dogs using brain of buffaloes positive for anti-N. caninum antibodies. The oocysts were confirmed to be N. caninum by molecular methods and by bioassay in gerbils. Sporulated oocysts with a maximum of 90 days were used in the infection of four dogs. The dogs were eight weeks old and were negative for anti-N. caninum and Toxoplasma gondii antibodies. Dogs 1 and 4 received an inoculum of 10,000 sporulated oocysts each, dog 2 an inoculum with 5,000 sporulated oocysts and dog 3 received 1,000 sporulated oocysts of N. caninum. The total feces eliminated by the dogs were collected and examined daily for a period of 30 days. No oocysts were found in the feces of these animals. For six months the dogs were monitored to observe a possible seroconversion and when this occurred the animals were eliminated from the experiment.

Trabalho realizado no Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar / Tese de mestrado integrado. Bioengenharia (Biotecnologia Molecular). Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012

El presente trabajo de investigación se realizó para determinar la seroprevalencia de Neospora caninum en bovinos lecheros en el distrito de Locumba, provincia de Jorge Basadre región Tacna en el año 2012, cuyos objetivos fueron: Determinar la seroprevalencia de Neospora caninum en bovinos de leche, seroprevalencia de Neospora caninum por edades en bovinos de leche, identificar los factores epidemiológicos de presentación de Neospora caninum en bovinos lecheros del distrito de Locumba. El método utilizado fue la prueba de inmunofluorescencia indirecta de la prueba de inmunofluorescencia indirecta para la seroprevalencia a Neospora caninum. Los resultados obtenidos en nuestro estudio son: la seroprevalencia a Neospora caninum, con una seroprevalencia de 44,10%, en cuanto a la edad se evidencio una seroprevalencia positiva mayor en los 5 a 6 años con un 11,28% y la presencia de abortos con un 23,07% estos valores sometidos a la prueba estadística nos indica que no son factores determinantes que influyan en la presentación de la enfermedad. Por otro lado, la procedencia que evidenció valores de seroprevalencia positiva del 32,31% para Locumba y de 4,62% para Ite y Arequipa. En cuanto a la etapa en que se produjo el aborto se demostró una mayor seroprevalencia positiva en el segundo tercio de gestación con 39,29%, con respecto al destino de feto y placentas presentó un mayor porcentaje cuando se entierra o echa a la basura los restos con 23,08%, y por ultimo en cuanto a la presencia de perros y cánidos salvajes se obtuvo una seroprevalencia de 41,03% y 23,08% respectivamente, todos estos valores sometidos a la prueba estadística nos indica que son factores determinantes que influyen en la presentación de la enfermedad en el distrito de Locumba.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniv., 2007. / Härtill 4 uppsatser.

La néosporose bovine est une maladie infectieuse causée par le parasite protozoaire Neospora caninum dont la principale manifestation clinique est l’avortement. Les moyens de lutte contre la néosporose sont aujourd’hui limités et aucun traitement prophylactique n’est efficace, rendant indispensable le developpement d’un vaccin. Dans le cadre de cette thèse, des modèles de néosporose murine et ovine ont, dans un premier temps, été développés et ont permis de reproduire efficacement l’infection avec des signes cliniques identiques à ceux observés chez l’hôte naturel. Dans un second temps, la souche vaccinale Neo Ncmic1-3 KO (NeoKO) développée par VitamFero a été caractérisée. La souche a démontré une forte atténuation de sa virulence in vivo tout en conservant son pouvoir immunogène lui permettant d’induire des réponses immunitaires cellulaires de type TH1 après injection chez la souris. Enfin, cette souche vaccinale a démontré une efficacité de plus de 80% à prévenir la transmission verticale de N.caninum dans un modèle de néosporose murine congénitale exogène et à prévenir les avortements infectieux (efficacité de 70%) dans un modèle ovin de néosporose exogène. / Bovine neosporosis is an infectious disease caused by the protozoan parasite Neospora caninum. The main clinical manifestation is abortion. Means of fighting against neosporosis are limited and no prophylactic treatment is effective. Consequently, the development of a new vaccine is essential. In the first part of this thesis, murine and ovine models of neosporosis have been developed. These animal models reproduce the infection with clinical signs similar to those observed in natural hosts. Secondly, Neo Ncmic1-3 KO (NeoKO) strain developed by VitamFero was characterized. A significant attenuation of virulence was observed in mice retaining immunogenicity and ability to induce a specific Th1 immune response. Finally, this vaccine strain protects from vertical transmission of N.caninum with a rate of 80% in congenital murine model of exogenous neosporosis and protects against infectious abortion of neosporosis with a rate of 80% in ovine model of exogenous neosporosis.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T13:18:49Z No. of bitstreams: 1 Orestes Luiz de Souza Neto.pdf: 1400644 bytes, checksum: 4e3219ec0820b25baeacfab1cbe88b78 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T13:18:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Orestes Luiz de Souza Neto.pdf: 1400644 bytes, checksum: 4e3219ec0820b25baeacfab1cbe88b78 (MD5) Previous issue date: 2013-07-17 / Neospora caninum is a protozoan that causes neosporosis. It is involved in reproductive disorders in sheep and affects several species of domestic and wild animals. The objective of this research was to conduct an epidemiological study of infection with N. caninum in sheep in the State of Pernambuco, Northeastern Brazil. For it was developed two subprojects. In subproject 1 aimed to estimate the prevalence and spatial distribution of anti-N. caninum in sheeps using the indirect fluorescent antibody test (IFAT) in mesoregions the Agreste, São Francisco and Sertão Pernambucano, in the second subproject aimed to estimate the frequency of anti-N. caninum in pregnant ewes by indirect fluorescent antibody test (IFAT) in slaughterhouses of the municipalities of Petrolina (São Francisco) and Gravatá (Agreste) and check the frequency of N. caninum in ovine fetuses collected at abattoirs in the State of Pernambuco using the polymerase chain reaction (PCR). In subproject 1 was used 416 sheep of 13 properties. The technique used for the detection of antibodies was considering the IFAT cutoff 1:50. There was a prevalence of 12.9 % (55/426) of sheep seropositive for N. caninum. Seropositive animals was observed in 53.8 % (7/13) of the farms and 58 % (7/12) of the 12 cities surveyed. The three mesoregions studied showed foci of seropositive animals at a frequency of 40 % (2/5) properties from the mesoregion of São Francisco, 50 % (2/4) of the properties of the Sertão and 75 % (3/4) of the Agreste. In the second sub-project the techniques used for the detection of antibodies against the agent was IFAT and direct detection agent PCR. Of the 103 pregnant females tested in the IFAT only two (1,94 %) had antibodies to N. caninum, one of the city of Petrolina and another in the city of Gravatá. After IFAT was carried PCR tissues (brain, heart, liver, and spleen diaphragm) belonging to the female fetal positive finding for the presence of the agent in the DNA of fetal Petrolina coming from the slaughterhouse. Antibodies were detected in more than half of the municipalities and properties surveyed and in all mesoregions studied. There is need for more studies in this species to know the real impact of the agent. / Neospora caninum é um protozoário, causador da Neosporose. É envolvido em transtornos reprodutivos em ovinos e acomete várias espécies de animais domésticos e silvestres. Objetivou-se nesta pesquisa realizar um estudo epidemiológico da infecção por N. caninum em ovinos no Estado de Pernambuco, Nordeste do Brasil. Para isso foi desenvolvido dois subprojetos. No subprojeto 1 objetivou-se estimar a prevalência e distribuição espacial de anticorpos IgG anti-N. caninum em ovinos pela técnica da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) nas Mesorregiões do Agreste, São Francisco e Sertão Pernambucano; no subprojeto 2 objetivou-se estimar a frequência de anticorpos IgG anti-N. caninum em ovelhas gestantes pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), em matadouros dos municípios de Petrolina (São Francisco) e Gravatá (Agreste) e verificar a frequência de N. caninum em fetos ovinos coletados em matadouros do Estado de Pernambuco, utilizando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). No subprojeto 1 utilizou-se 416 ovinos de 13 propriedades. A técnica utilizada para a pesquisa de anticorpos foi a RIFI considerando ponto de corte 1:50. Verificou-se uma prevalência de 12,9% (55/426) de ovinos soropositivos para N. caninum. Observou-se animais soropositivos em 53,8% (7/13) das propriedades e em 58% (7/12) dos 12 municípios pesquisados. As três mesorregiões estudadas apresentaram focos de animais soropositivos, numa frequência de 40% (2/5) das propriedades da mesorregião do São Francisco, 50% (2/4) das propriedades do Sertão e 75% (3/4) do agreste. No subprojeto 2 as técnicas utilizadas para a detecção de anticorpos contra o agente foi a RIFI e para a detecção direta do agente a PCR. Das 103 fêmeas gestantes testadas na RIFI apenas duas (1,94%) apresentaram anticorpos contra N. caninum, sendo uma do município de Petrolina e outra do município de Gravatá. Após a RIFI realizou-se PCR dos tecidos (cérebro, coração, fígado, diafragma e baço) fetais pertencentes às fêmeas positivas constatando-se a presença do DNA do agente no coração do feto procedente do abatedouro de Petrolina. Anticorpos foram detectados em mais da metade dos municípios e propriedades pesquisadas e em todas as mesorregiões estudadas. Há necessidade de realizar outros estudos nesta espécie para conhecer o real impacto do agente.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-18T16:49:03Z No. of bitstreams: 1 Maria Evodia de Sousa.pdf: 1568207 bytes, checksum: 9fa64691b4276de1c352be1218ced17a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T16:49:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Evodia de Sousa.pdf: 1568207 bytes, checksum: 9fa64691b4276de1c352be1218ced17a (MD5) Previous issue date: 2011-02-14 / The aim of this study was to investigate the occurrence of anti-Neospora caninum antibodies in cattle and dogs from the State of Alagoas, as well as to identify risk factors associated to the infection for both species. Samples from 1004 bovine proceeding from 17 dairy farms of the microregion of Batalha/Alagoas and 237 samples of dogs from urban and rural areas were studied. Samples were submitted to the Indirect Immunofluorescence test. Risk factors associated to the infection were identified by means of univariate and logistic regression for interest variables. For bovine, antibodies frequency was 7.67% and for dogs was 4.2%. Risk factors identified for bovine through the multivariate analysis were non-associated breeding (OR=6.33) and improper end of aborted fetuses (OR=3.04). None of the analyzed variables were identified as risk factors for the infection in this species. N. caninum infection is present in dogs and cattle in the State of Alagoas. Researches including other regions must be performed in order to demonstrate the factual importance of this infection in the scope of the supply chain of cattle breeding, allowing estimating the economic losses due to the presence of this agent in herds / Objetivou-se com este trabalho investigar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos e cães do estado de Alagoas, Brasil, além de identificar os fatores de risco associados à infecção para ambas espécies. Foram estudados 1004 bovinos procedentes de 17 propriedades leiteiras da micro-região Batalha/Alagoas e 237 amostras de cães da zona rural e urbana. As amostras foram submetidas ao teste de Reação de Imunofluorescência Indireta. Os fatores de risco associados à infecção foram identificados através da análise univariada e regressão logística para as variáveis de interesse. Para bovinos, a frequência de anticorpos foi de 7,67% e para cães de 4,20%. Os fatores de risco identificados para bovinos na análise multivariada foram criação não consorciada (OR=6,33) e destino inadequado dos fetos abortados (OR=3,04). Nenhuma das variáveis analisadas para cães foram identificadas como fatores de risco para a infecção na espécie. A infecção por N. caninum está presente em cães e bovinos no estado de Alagoas. Pesquisas abrangendo outras microrregiões do Estado devem ser realizadas para demonstrar a real importância desta infecção no âmbito da cadeia produtiva da bovinocultura, permitindo estimar as perdas econômicas decorrentes da presença deste agente nos rebanhos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-06-20T13:29:58Z No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Goncalves de Azevedo Filho.pdf: 1942735 bytes, checksum: 02c3cdaa871437e7dc1b37053ee3a98c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-20T13:29:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Goncalves de Azevedo Filho.pdf: 1942735 bytes, checksum: 02c3cdaa871437e7dc1b37053ee3a98c (MD5) Previous issue date: 2016-10-26 / Toxoplasma gondii and Neospora caninum are obligate intracellular parasites responsible for reproductive disorders in sheep. The aim of this study was to evaluate the kinetics of antibodies in ewes naturally infected by Toxoplasma gondii and Neospora caninum. Ewes in reproductive age composed the experimental groups. All animals were submitted to pregnancy diagnosis and serological monitoring to determine prevalence and incidence rates. Blood samples of the ewes (postpartum) and their lambs (pre-colostral) were collected to evaluate the vertical transmission rate. Serological monitoring of the ewes was performed using the ELISA, and research of IgG antibodies anti- T. gondii and N. caninum in lambs was performed by IFAT. Aborted fetuses tissue samples were collected for PCR. The initial prevalence of toxoplasmosis was 25.0 % (15/60) and the final 46.7% (28/60), with an incidence of 28.9% (13/45); N. caninum initial prevalence was 26.0% (13/50) and the final 72.0% (36/50), and the incidence rate of 62.2 % (23/37). The abortion rate was 37.5% (3/8) for T. gondii and no abortions cases by N. caninum. The vertical transmission rate for T. gondii was 38.9% and 15.4% for N. caninum. The results of this study indicate immune response alterations in ewes naturally infected by T. gondii, mainly in those that aborted. Moreover, it was observed the importance of the horizontal transmission on the infection incidence by coccidia, as weel as the importance of the congenital infection to the maintenance of the parasites in the flock analyzed. / Toxoplasma gondii e Neospora caninum são parasitos intracelulares obrigatórios responsáveis por distúrbios reprodutivos em ovinos. Objetivou-se neste estudo avaliar a cinética de anticorpos em ovelhas naturalmente infectadas por Toxoplasma gondii e Neospora caninum. Ovelhas em idade reprodutiva compuseram os grupos experimentais. Todos os animais passaram por diagnóstico de gestação e monitoramento sorológico para determinar a taxa de prevalência e incidência. Amostras de sangue das ovelhas e seus conceptos foram coletadas para avaliar a taxa de transmissão vertical. Para o monitoramento sorológico das ovelhas foi utilizada a técnica de ELISA e para a pesquisa de anticorpos IgG anti- T. gondii e N. caninum nos neonatos foi utilizada a RIFI. Dos fetos abortados foram coletadas amostras de tecidos para PCR. A prevalência inicial da toxoplasmose no rebanho foi de 25,0% (15/60) e a final de 46,7% (28/60) com incidência de 28,9% (13/45); para N. caninum a prevalência inicial foi de 26,0% (13/50) e a final de 72,0% (36/50) e taxa de incidência de 62,2% (23/37). A taxa de aborto foi de 37,5% (3/8) nas ovelhas infectadas por T. gondii e ausência de abortos por N. caninum. A taxa de transmissão vertical para T. gondii foi de 38,9% e de 15,4% para N. caninum. Os resultados deste estudo indicam alterações na resposta imune de ovelhas naturalmente infectadas por T. gondii, principalmente nas ovelhas que abortaram. Além disto, constatou-se a importância da transmissão horizontal na incidência da infecção pelos coccídios e a importância da infecção congênita para a manutenção dos parasitos no rebanho analisado.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Se realizó un estudio transversal para determinar la tasa de animales seropositivos a la infección por Neospora caninum y su asociación a factores de riesgo en predios de pequeños productores de leche, asociados al programa de Servicio de Asesoría Técnica (SAT) del Instituto de Desarrollo Agropecuario (INDAP), ubicados en la Región del Libertador Bernardo O’Higgins. Se evaluaron 45 sueros de vacas en período de lactancia de 9 predios y se determinó la presencia de anticuerpos contra N. caninum en 18 sueros utilizando la técnica de Enzyme Linked Support-Assay (ELISA). Se aplicó una encuesta cerrada a los productores de cada predio para caracterizar los potenciales factores de riesgos intrínsecos y extrínsecos de la infección. Posteriormente se calculó el nivel de asociación a N. caninum para cada variable estadísticamente significativa (P < 0,05) mediante un modelo de regresión logística univariado con el programa InfoStat® versión 2014. Los factores de riesgo con asociación estadística fueron: el historial de aborto (OR = 5,09), el tipo de alimentación de los perros del predio (OR = 6), el consumo de agua desde acequias (OR = 4,5) y el manejo del material biológico de partos y abortos (OR = 7,43). Este trabajo evidenció la importancia de la transmisión horizontal y el rol del perro en la infección con N. caninum, por lo que frente a este hecho sería trascendental trabajar en medidas de tenencia responsable de las mascotas con los productores propietarios de perros. Frente a la transmisión vertical la principal medida es mantener un registro de cada vaca, sobre todo frente a eventos de abortos. Además, se debe considerar la reposición de animales seropositivos a N. caninum y que hayan cursado con abortos, siempre complementando estas medidas con mejoras en la bioseguridad de las instalaciones