Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La estructura dentaria está constituida por diversos tejidos, siendo el esmalte y la dentina uno de sus principales constituyentes. Durante el proceso normal de formación de estas estructuras pueden ocurrir alteraciones que comprometen dichos tejidos, otorgándoles características que afectan tanto su estética como su funcionalidad. Dentro de estas alteraciones se encuentra la Amelogénesis Imperfecta (AI) que es una anomalía del desarrollo de origen genético. Esta alteración afecta la estructura prismática del esmalte, además de comprometer la estética dental en diferentes grados, de todos o casi todos los dientes, afectando tanto la dentición temporal como permanente. De acuerdo a la clasificación más ampliamente utilizada y aceptada, encontramos la de Witkop 1989, la cual agrupa las AI en 4 fenotipos clínicos: AI hipoplásicas, hipocalcificadas, hipomaduras e hipomaduras/hipoplásicas con taurodontismo. Cuando sobre estos tipos principales se consideran algunos rasgos secundarios específicos del esmalte y además el patrón de herencia se obtienen 14 subtipos diferentes de AI. Aún en la actualidad, es difícil caracterizar estar anomalía, ya que los sistemas de clasificación se basan principalmente en características fenotípicas, lo cual complica el diagnóstico clínico. Además, hay que considerar que en un mismo paciente o en una misma familia pueden coexistir diferentes alteraciones tanto en esmalte como en dentina. Se analizó 28 dientes con Amelogénesis imperfecta, siendo 23 dientes deciduos y 5 dientes permanentes, de los cuales 5 estaban afectados con AI tipo hipocalcificada, 13 con AI hipoplásica y 10 con AI hipomaduras, según los criterios de Witkop, además se analizaron 6 dientes definitivos y 7 dientes deciduos exfoliados de 13 sujetos controles. Se realizó una comparación a nivel ultraestructural de esmalte y dentina en microscopio electrónico de barrido (MEB) de dientes controles y dientes con amelogénesis imperfecta. Conjuntamente, se realizó un análisis elemental en el cual se utilizó un sistema de espectro de dispersión de energía de rayos X (Oxford Instruments, EDS) que se encontraba acoplado al microscopio electrónico de barrido, lo que permitió analizar la composición porcentual de los siguientes elementos C, N, O, F, Mg, P y Ca, tanto en el esmalte dental como dentina. A nivel ultraestructural, los dientes con AI en su mayoría tenían alteraciones a nivel de los prismas del esmalte, los cuales no estuvieron presentes en algunas muestras o poseían una forma muy irregular al compararlo con esmalte sano de dientes controles. Además, en el tipo de Amelogénesis hipoplásica se observó más evidentemente una delgada capa de esmalte, existiendo un esmalte con grietas y fisuras en comparación a los dientes controles. Conjuntamente al análisis en esmalte, se realizó una comparación ultraestructural de la dentina, puesto que algunos trabajos han reportado que también podría encontrase alterado este tejido. Con respecto al análisis elemental, en el esmalte se observó principalmente alterado el N y C, los cuales se encontraban aumentados en los dientes que sufren de AI, en especial en el tipo hipocalcificada, pero a pesar de esto el análisis estadístico no mostró diferencias significativas. Otra alteración fue el porcentaje en peso de Ca, el cual estaba disminuido en este tipo de amelogénesis. Al hacer el mismo estudio en dentina no se detectó grandes variaciones en la composición elemental de estas muestras. Del presente estudio se pudo concluir que existen alteraciones a nivel ultraestructural en esmalte dental afectado con AI, ya que se encontró disminución del grosor del esmalte y pérdida de regularidad de la estructura prismática. En dentina no se observaron grandes alteraciones. Con respecto al análisis composicional se concluye que sólo en el tipo de AI hipocalcificada se encontraron diferencias significativas en el porcentaje en peso de Ca, el cual estaba disminuido en relación a los controles. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt Regular No. 1140905

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: El Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) es una proteína citoplasmática transmembrana, estudios indican que contribuye en el desarrollo y progresión de lesiones potencialmente malignas a carcinoma oral de células escamosas (COCE). Analizar estos marcadores permitiría identificar lesiones de alto riesgo de malignización y seleccionar candidatos a tratamientos personalizados con inhibidores de EFGR. Objetivo: Determinar y caracterizar la expresión de EGFR en muestras de pacientes con diagnósticos de mucosa normal, displasia y carcinoma de células escamosas de la cavidad oral. Materiales y Métodos: Se Seleccionaron 54 muestras con diagnóstico histopatológico de displasia epitelial, 35 de bajo grado (DBG) y 19 de alto grado (DAG) y además se utilizó una matriz de tejidos, con 60 muestras de COCE y 9 de mucosa oral normal. La detección de EGFR se realizó mediante técnica Inmunohistoquímica con el anticuerpo Anti-Rabbit EGFR clon D38B1. En las microfotografías se determinó la expresión proteica (EP) en -, 1+, 2+ y 3+. Se utilizó test de Chi cuadrado y test de Fisher para el análisis estadístico (P<0.05). Resultados: En las DBG el 54,3% fueron mujeres mientras en las DAG y COCE fueron el 47,4% y 31,8%, respectivamente. El 88,6% de las DBG, 78,5% de las DAG y 80% de los COCE tuvieron una EP positiva para EGFR, siendo esta diferencia estadísticamente significativa (P<0.05). Sin embargo, en las mucosas normales el 100% no expresó EGFR. El 65,7% de las DBG, 68,4% de las DAG y 51% de los COCE tuvieron una alta expresión de EGFR (EP=2+y/o 3+). Discusión: En las DBG la mayoría eran mujeres a diferencia de las DAG donde eran hombres, esto podría deberse a que las mujeres tienden a consultar antes por problemas de salud. Encontramos una tendencia en las DBG, DAG y COCE a la sobre-expresión de EGFR y es propio de estas patologías debido a que la mucosa oral normales no evidencia expresión de esta proteína. Conclusión: Hay sobre-expresión de EGFR en displasias epiteliales y COCE, por otro lado, no se observó expresión en mucosa oral normal, por lo que se podría considerar como un marcador temprano de estas patologías. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt No 11400281.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Las piezas dentarias se conforman por diferentes estructuras, dentro de las cuales el esmalte y la dentina destacan por ser los principales constituyentes del diente. Durante el proceso natural de formación dentaria pueden ocurrir diversos trastornos que alteran estos tejidos. Dentro de estos trastornos de formación dentaria, se encuentra la Amelogénesis Imperfecta (AI) que es una anomalía del hereditaria del desarrollo, de baja prevalencia (1:700 a 1:14000), que afecta la estructura prismática durante el desarrollo del esmalte, provocando anomalías en su estructura y composición; alterando la estética dental, tanto en dentición temporal como permanente. La clasificación más ampliamente utilizada y aceptada, es la de Witkop 1989, la cual agrupa las AI en 4 fenotipos clínicos: AI Hipoplásicas, Hipocalcificadas, Hipomaduras e Hipomaduras/Hipoplásicas con taurodontismo. Sobre estos tipos principales de AI se consideran algunos rasgos secundarios específicos del esmalte y además el patrón de herencia, por lo que se obtienen 14 subtipos diferentes de AI. A medida que se tenga mayor claridad sobre las bases bioquímicas y genéticas de estos desórdenes del desarrollo del esmalte, se producirá una transición hacia una nueva clasificación basada en los hallazgos de estudios genéticos-moleculares. Actualmente, para dilucidar la etiología genético-molecular de las AI, se propone realizar un examen minucioso del fenotipo y del patrón de herencia lo cual dificulta la caracterización de esta enfermedad; también se debe tomar en cuenta que para un mismo paciente o familia pueden coexistir diferentes anomalías tanto en esmalte como en dentina. Se analizaron 31 dientes con Amelogénesis Imperfecta, de los cuales 11 estaban afectados con lo AI tipo hipoplásica, 13 con AI hipomadura y 7 con AI hipocalcificada, según los criterios de Witkop. El grupo control estaba formado por 16 dientes sanos. Se realizó una comparación morfológica e histopatológica del esmalte y la dentina, mediante microscopía óptica de luz corriente (MLC) y luz polarizada(MLP). Conjuntamente, se observó la ausencia/presencia de birrefringencia obtenida de las mismas preparaciones de dientes controles y afectados por AI. Los datos de birrefringencia se compararon con los porcentajes en peso de calcio, obtenido mediante MEB-EDX de todas las muestras analizadas. * En nuestros resultados observamos que los dientes con AI presentan menor porcentaje de prismas del esmalte al ser observados con MLC en comparación con controles sano. Al observar dientes con MLP se puedo detectar mejor estructuras como prismas y bandas de Hunter-Schreger (HS). Al observar el esmalte bajo MLP, se observó que los dientes afectados con cualquier tipo de AI analizada no presentaron birrefringencia en el esmalte, a diferencia de los dientes controles sanos en que la birrefringencia se observó con mayor frecuencia. También se observó que a medida que disminuye el porcentaje de calcio en el esmalte de los dientes con AI, disminuye también la birrefringencia del esmalte. Finalmente, no se observó diferencias morfológicas en la dentina (organización de túbulos dentinarios y dentina globular) de dientes controles sanos y dientes con AI al ser analizados con MLC. *Nota: Los porcentajes de calcio que se obtuvieron mediante MEB-EDX, fueron extraídos de la tesis "Estudio ultraestructural y análisis composicional EDX en dientes con diversos tipos de amelogénesis imperfecta" de Valentina Gallardo, año 2016. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt Regular No. 1140905.