Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências Animais, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-07-05T15:20:21Z No. of bitstreams: 1 2013_OscarOliveiraBrasil.pdf: 522108 bytes, checksum: a89f2e5158777e0a43601cb26341bd8b (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-07-08T14:01:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_OscarOliveiraBrasil.pdf: 522108 bytes, checksum: a89f2e5158777e0a43601cb26341bd8b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-08T14:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_OscarOliveiraBrasil.pdf: 522108 bytes, checksum: a89f2e5158777e0a43601cb26341bd8b (MD5) / Os programas de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) vêm evoluindo ao longo dos últimos anos, contudo ainda existe uma grande variabilidade na resposta superovulatória e produção embrionária que limita o sucesso desta tecnologia na ovinocultura. Um aumento da qualidade folicular e oocitária associado a uma maior controle do momento das múltiplas ovulações poderia ser benéfico para aumentar o número de embriões produzidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da maior exposição à progesterona exógena, durante a superestimulação, associado ou não a adição de agonista de GnRH sobre a resposta superovulatória, produção e qualidade embrionária, usando sêmen congelado. Quarenta e oito fêmeas da raça Santa Inês, foram sincronizadas com a inserção de um implante intravaginal (CIDR). Os animais foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais: exposição à progesterona por 14 dias (Controle; n = 14); prolongamento de 12 horas na exposição à progesterona (G12hP4; n = 21); e prolongamento de 12 horas associado a uma aplicação de 25 μg de lecirelina (G12hP4GnRH; n = 13). Para superestimulação, 133 mg de pFSH foram administradas em doses decrescentes em 8 aplicações. A resposta superestimulatória e a quantidade de folículos grandes ainda não ovulados foram avaliadas por ultrassonografia (US), ao final do tratamento com FSH e 12 horas após a segunda inseminação artificial (IA), respectivamente. O estro foi detectado com auxílio de rufiões após a remoção do CIDR, e as inseminações foram realizadas 36 e 48 horas após a retirada do mesmo, usando sêmen congelado (100x106 epz/dose). Cinco dias após a primeira inseminação, o número de corpos lúteos (CL) foi avaliado por laparoscopia e os embriões colhidos por laparotomia pré-púbica. A quantidade de ovelhas em estro e o tempo de início do estro após a remoção do dispositivo de progesterona foi semelhante entre os grupos (P>0,05). Todos os grupos tiveram uma elevada resposta superestimulatória (médias variando de 14,33 a 16,18 folículos ≥ 4 mm) (P>0,05). O número de CL foi elevado em todos os grupos (variação de 11 a 12) (P>0,05). O percentual de fertilização foi maior (P<0,05) no G12hP4GnRH do que no Controle e G12hP4 (77%, 34%, e 41%, respectivamente). O maior tempo de exposição à progesterona reduziu (P<0,05) a proporção de embriões degenerados (Controle = 30%; G12hP4 = 7% e GP12hP4GnRH = 10%). A associação do aumento da exposição à progesterona com administração de GnRH reduziu a degeneração embrionária e aumentou a fertilização dos oócitos, podendo ser adotada nos programas de MOTE. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Multiple ovulation and embryo transfer programs (MOET) have been evolving over the past few years, however there is still wide variability in superovulatory response and embryo production which limits this technology success of for the sheep industry. An increase in follicular and oocyte quality associated with a control of multiple ovulations moment could be beneficial to increase the produced embryos number. This study aimed to evaluate the effect of increased the exposure time to exogenous progesterone during overstimulation, with or without the addition of GnRH agonist at superovulatory response. For the experiments of embryo production and to access the quality frozen semen was used. Forty-eight Santa Ines ewes were synchronized with intravaginal insertion of progesterone implant (CIDR). The animals were randomly divided into three groups: exposure to progesterone for 14 days (Control, n = 14); extension of 12 hours progesterone exposure (G12hP4, n = 21); and 12 hours extension associated with an application of 25 μg of Lecirelin (G12hP4GnRH, n = 13). For overstimulation, 133 mg of pFSH in decreasing doses were administered in eight applications. Superstimulatory response and large follicles amount that has not ovulated were evaluated by ultrasonography (US), after the treatment with FSH and 12 hours after the second artificial insemination (AI), respectively. Estrus was detected with the aid of thugs after CIDR removal and inseminations were performed 36 and 48 hours after removal, using frozen semen (100x106 sptz/dose). Five days after the first insemination, the number of corpora lutea (CL) was measured by laparoscopy and the embryos were collected by prepubic laparotomy. The amount of oestrus ewes and time of onset of estrus after device removal of progesterone was similar between groups (P > 0.05). All groups had a high superstimulatory response (averages ranging from 14.33 to 16.18 follicles ≥ 4 mm) (P > 0.05). The number of CL was high in all groups (averages ranging from 11 to 12.00) (P > 0.05). The fertilization rate was significantly higher in the G12hP4GnRH compared to the Control and G12hP4 (77%, 34% and 41%), respectively. The longer exposure to progesterone reduced degenerated embryos proportion (Control = 30%; G12hP4 = 7% and G12hP4GnRH = 10%). The association of increased progesterone exposure time and GnRH administration reduces embryonic degeneration and increased oocytes fertilization rates and it may be adopted at MOET programs.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2010-03-10T19:18:04Z No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-03-16T13:08:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-16T13:08:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) Previous issue date: 2008-03 / Neste experimento foi avaliado o desempenho de diferentes grupos genéticos de ovinos no sistema de alimentador privativo (creep-feeding), confinamento e os aspectos quantitativos das carcaças em diferentes pesos ao abate. Foram utilizados 53 ovinos machos inteiros e fêmeas, de parto simples (43 animais) e gemelares (10 animais), oriundos de três grupos genéticos diferentes, sendo 24 animais da raça Santa Inês (SI), 21 oriundos do cruzamento das raças Ile de France x Santa Inês (ILE x SI), 8 oriundos do cruzamento do Texel x Santa Inês (TX x SI), com idade média de 8 meses e com pesos médios de 30, 35, 40 e 45 Kg de peso vivo. Os animais cruzados com as raças paternas Texel e Ile de France apresentaram resultados superiores aos animais Santa Inês para ganho em peso, tempo para desmama em dias e em relação aos aspectos quantitativos da carcaça no creep-feeding e confinamento e em relação aos aspectos quantitativos da carcaça dos animais experimentais. Quanto ao melhor peso de abate a ser indicado para os animais dos três grupos genéticos analisados, os animais cruzados com as raças paternas Texel e Ile de France devem ser abatidos com o peso médio de 35 kg. Os animais Santa Inês devem ser abatidos com o médio vivo de 40 kg. Para as fêmeas de todos os grupos genéticos estudados, orienta-se o abate com peso inferior aos indicados para os machos, dentro de cada grupo genético, pela deposição precoce de gordura na carcaça. Usando correlações, notou-se que a espessura de gordura e a área de olho de lombo de maneira geral, diminuem com o aumento das medidas morfométricas, indicando que animais maiores, possivelmente serão mais tardios em relação ao acabamento de carcaça que animais de porte menor. O peso da carcaça frio teve correlação negativa com peso do pernil, e em geral os maiores correlações foram entre os componentes não-carcaça. Em sistema de confinamento os animais cruzados mostraram vantagens sobre animais puros deslanadas. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The difference between different genetic groups of sheep in creep feeding, confinement and aspects of carcass at different slaughter weights were evaluated. Fifty three entire males and females were used, from simple (43 animals) and twins (10 animals) lambings, from three different genetic groups, 24 animals Santa Inês (SI), 21 from a cross between Ilê de France x Santa Inês (ILE x SI), 8 from cross between Texel x Santa Inês (TX x SI). Slaughter occurred at a mean age of 8 months and live weights 30, 35, 40 and 45 Kg. The crossbred Texel and Ile de France animals showed superior growth rates, time to weaning, as well as quality aspects of the carcass than Santa Inês. In terms of best slaughter weight, the crossbred animals should be slaughtered at a mean live weight of 35 kg, while Santa Inês should be slaughtered at 40 kg. For females of all genetic groups, the slaughter weight should be lower than males within each genetic group due to earlier deposition of fat in the carcass. Correlations showed that fat depth and eye muscle área decreased with an increase in morphometric measures, indicating that larger animals are possibly less precoce in terms of carcass finishing compared to smaller animals. The cold carcass weight had a negative correlation with leg weight and in general larger correlations were with non-carcass components. In confinement crossbred animals were shown to have advantages over pure bred hair sheep.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-11T18:37:29Z No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-13T00:31:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-13T00:31:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) Previous issue date: 2009 / O objetivo deste trabalho foi descrever e avaliar, através da análise de aspectos ultraestruturais, o processo de maturação in vitro (MIV) de ovócitos ovinos por um período de 24 horas após a inserção de ovócitos imaturos no meio de maturação. Para isso, foram coletados ovários de abatedouro, sendo os folículos aspirados no laboratório. Os complexos cumulus oophorus (CCO) selecionados foram divididos em grupos e transferidos para o meio de maturação onde permaneceram por 6, 12, 18 e 24 horas após o início do processo, exceto o tratamento 0 hora. Após a retirada das estruturas nos diferentes tempos de maturação, essas foram processadas para a microscopia eletrônica de transmissão. Foi observado no tratamento 0 hora que os ovócitos possuíam características compatíveis com estruturas imaturas e após 6 horas de MIV ocorria a migração de mitocôndrias e lipídeos para a periferia citoplasmática e início de expansão das células do cumulus. Tais alterações relacionam-se ao processo de aumento de atividade metabólica ovocitária e início do processo de maturação que levará o ovócito até o estágio de metáfase II. Entre 12 e 18 horas de MIV foram observados rearranjos citoplasmáticos de organelas, tais como o alinhamento e aumento dos grânulos da cortical associados à membrana plasmática, que permitiram inferir sobre o processo de maturação nuclear, sugerindo que, nessa espécie, 18 horas de MIV seriam suficientes para o ovócito atingir sua maturação citoplasmática e nuclear e ser fertilizado. Foi observado também a presença de mitocôndrias do tipo hooded em alguns momentos da maturação. Tais estruturas são comumente encontradas em ovócitos de outras espécies e podem estar relacionadas há um aumento da atividade metabólica mitocondrial durante o período de migração de organelas. Após 24 horas de MIV, os ovócitos avaliados apresentavam características de degeneração o que pode estar ligado ao envelhecimento desta célula devido à sua permanência por mais 6 horas no meio MIV depois da aquisição de competência para a fertilização in vitro (FIV). Este trabalho permitiu a avaliação de aspectos ultraestruturais da MIV em ovinos, bem como forneceu conhecimentos a respeito da maturação nuclear. Entretanto, mais estudos devem ser realizados para aprimorar essa importante biotécnica nessa espécie. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was describe and evaluate, by analysis of ultrastructural aspects, the in vitro maturation (IVM) process of the sheep oocytes during 24 hours after insertion of immature oocytes in maturation medium. For this, ovaries were collected from slaughterhouse and its follicles were aspirated on laboratory. The selected cumulus oocyte complex (COC) were divided into groups and transferred to the maturation medium where they were maintained for 6, 12, 18 and 24 hours after the beginning of process, except the 0 hour treatment. The structures were removed after different maturation times and processed to transmission electron microscopy. In 0 hour treatment the oocytes had compatible characteristics with immature structures and, after 6 hours of IVM, there was migration of mitochondrias and lipids to the cytoplasm periphery and the onset of cumulus cells expansion. These alterations were compatible with increasing metabolic activity on oocyte and the onset of maturation process that enable the structure to reach metaphase II. Between 12 and 18 hours of IVM, were observed cytoplasmic rearrangements of organelles, like aligning and increasing of cortical granules associated with plasmatic membrane, that were related to the process of nuclear maturation, suggesting that, in this specie, 18 hours of IVM were enough to the oocyte reach nuclear and cytoplasmic maturation and be fertilized. The presence of hooded mitochondrias in some times of maturation was observed. These structures were commonly found on other species oocytes and could be related to increase of mitochondrial activity metabolic during organelles migration. After 24 hours of IVM, the oocytes had characteristics of degeneration that can be related to cellular aging because of the persistence on the maturation medium after acquisition competence to in vitro fertilization (IVF). This work enabled the evaluation of the ultrastructural aspects of sheep IVM and provide knowledge about the nuclear maturation. However, more studies must be performed to refine this important biotechnique in sheeps.

Orientador: Eunice Oba / Banca: Fernanda da Cruz Landim Alvarenga / Banca: Vilter R. Russiano Vicente / Resumo: Com o crescimento da ovinocultura brasileira e implemento de biotecnologias da reprodução visando o aumento do rebanho ovino, torna-se importante o desenvolvimento de técnicas eficientes de maturação oocitária nestes animais, visando o melhor aproveitamento do potencial reprodutivo in vitro com consequente aumento de produtividade. O objetivo deste trabalho foi comparar a utilização de diferentes suplementos adicionados ao meio de maturação in vitro de oócitos ovinos, estabelecendo o mais adequado para posterior produção in vitro de embriões. Para isto, foram colhidos ovários de ovelhas abatidas em frigoríficos do estado de São Paulo. Os ovários foram transportados em garrafa térmica com solução salina (NACL 0,9%) à 36ºC até o laboratório da FMVZ-UNESP- Botucatu. No laboratório estes foram lavados com solução salina e aspirados para obtenção dos oócitos. Foram selecionados somente complexos cumulus oocito (CCO) que apresentassem citoplasma de aspecto homogêneo e compactação das células do cumulus. .Os CCO selecionados foram lavados duas vezes em meio TCM-199 com tampão Hepes, suplementado com 10% de SFB, 0,3 mM de piruvato de sódio e 75 μg/mL de amicacina e divididos em diferentes tratamentos de maturação (100 oócitos/grupo): Tratamento 1: TCM-199 acrescido de piruvato de sódio, LH, FSH, estrógeno e gentamicina (Meio Base) + 10% de SFB; Tratamento 2: Meio base + 10% de SFB e 100μM de cisteamina; Tratamento 3: Meio Base + 4mg/ml de BSA; Tratamento 4: Meio Base + 4mg/ml de BSA e 100μM de cisteamina. O cultivo dos oócitos para maturação in vitro foi realizado em estufa a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 em ar por um período de 20-22h. Ao final do período de maturação nuclear, os ovócitos foram desnudados por pipetagens sendo posteriormente corados com Hoescht 33342 e avaliandos quanto a configuração nuclear utilizando-se microscopia... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Nowadays, with brazilian sheep farms growth and reproduction biothcnology implementation aiming for a sheep herd increase, efficient techniques development becomes important in oocytes maturation in these animals, aiming to a better use of the in vitro reproductive potential with a consequently increase in production. The aim of this work was to compare the use of different supplements added to the in vitro maturation medium of sheep oocytes slaughted in slaughter houses in São Paulo state. The ovaries were to the FMVZ-UNESP- Botucatu laboratory. In the laboratory, they were washed with saline solution and aspirated for the oocytes recovery. Only complex cumulus oocytes (CCO) that showed homogeneous cytoplasm and cumulus cells compacted were selected. The selected CCO were washed in TCM-199 medium with Hepes tampon, supplemented with 10% of SFB, 0.3 mM of Sodium Pyruvate and 75 μg/mL of amycacin and divided in differenr maturation treatments (20 oocytes/ group): treatment 1: TCM-199 plus Sodium Pyruvate, LH, FSH, estrogen and gentamycin (base medium) + 10% of SFB; Treatment 2: Base medium + 4mg/ml of BSA and 100μM of cisteamine; Treatment 3: Base médium + 4mg/ml of BSA; Treatment 4: Base medium + 4mg/ml of BSA and 100μM of cisteamine. The oocyte cultive for in vitro maturation was done in stove at a 38.5°C atmosphere with 5% of CO2 in air for a 20-22h period. By the end of the nuclear maturation period, the oocytes were taken off the maturation medium and the granulosa cells were extracted and then they were stained with Hoescht 33342 and evaluated by nuclear configuration using the epifluorescence microscopy (Leica DMIRB) with ultra-violet light. The oocytes were classified by meiotic stage in: GV (germinative vesicle), GVB (germinative vesicle break), MI (metaphase I); MII (metaphase II); and DEG (degenerated). For statistical analysis of the evaluated characteristics... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-23Bitstream added on 2014-06-13T19:59:07Z : No. of bitstreams: 1 pavao_gd_me_botfmvz.pdf: 255517 bytes, checksum: 04964e6a61b0b2812161672e7a887153 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Com o crescimento da ovinocultura brasileira e implemento de biotecnologias da reprodução visando o aumento do rebanho ovino, torna-se importante o desenvolvimento de técnicas eficientes de maturação oocitária nestes animais, visando o melhor aproveitamento do potencial reprodutivo in vitro com consequente aumento de produtividade. O objetivo deste trabalho foi comparar a utilização de diferentes suplementos adicionados ao meio de maturação in vitro de oócitos ovinos, estabelecendo o mais adequado para posterior produção in vitro de embriões. Para isto, foram colhidos ovários de ovelhas abatidas em frigoríficos do estado de São Paulo. Os ovários foram transportados em garrafa térmica com solução salina (NACL 0,9%) à 36ºC até o laboratório da FMVZ-UNESP- Botucatu. No laboratório estes foram lavados com solução salina e aspirados para obtenção dos oócitos. Foram selecionados somente complexos cumulus oocito (CCO) que apresentassem citoplasma de aspecto homogêneo e compactação das células do cumulus. .Os CCO selecionados foram lavados duas vezes em meio TCM-199 com tampão Hepes, suplementado com 10% de SFB, 0,3 mM de piruvato de sódio e 75 μg/mL de amicacina e divididos em diferentes tratamentos de maturação (100 oócitos/grupo): Tratamento 1: TCM-199 acrescido de piruvato de sódio, LH, FSH, estrógeno e gentamicina (Meio Base) + 10% de SFB; Tratamento 2: Meio base + 10% de SFB e 100μM de cisteamina; Tratamento 3: Meio Base + 4mg/ml de BSA; Tratamento 4: Meio Base + 4mg/ml de BSA e 100μM de cisteamina. O cultivo dos oócitos para maturação in vitro foi realizado em estufa a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 em ar por um período de 20-22h. Ao final do período de maturação nuclear, os ovócitos foram desnudados por pipetagens sendo posteriormente corados com Hoescht 33342 e avaliandos quanto a configuração nuclear utilizando-se microscopia... / Nowadays, with brazilian sheep farms growth and reproduction biothcnology implementation aiming for a sheep herd increase, efficient techniques development becomes important in oocytes maturation in these animals, aiming to a better use of the in vitro reproductive potential with a consequently increase in production. The aim of this work was to compare the use of different supplements added to the in vitro maturation medium of sheep oocytes slaughted in slaughter houses in São Paulo state. The ovaries were to the FMVZ-UNESP- Botucatu laboratory. In the laboratory, they were washed with saline solution and aspirated for the oocytes recovery. Only complex cumulus oocytes (CCO) that showed homogeneous cytoplasm and cumulus cells compacted were selected. The selected CCO were washed in TCM-199 medium with Hepes tampon, supplemented with 10% of SFB, 0.3 mM of Sodium Pyruvate and 75 μg/mL of amycacin and divided in differenr maturation treatments (20 oocytes/ group): treatment 1: TCM-199 plus Sodium Pyruvate, LH, FSH, estrogen and gentamycin (base medium) + 10% of SFB; Treatment 2: Base medium + 4mg/ml of BSA and 100μM of cisteamine; Treatment 3: Base médium + 4mg/ml of BSA; Treatment 4: Base medium + 4mg/ml of BSA and 100μM of cisteamine. The oocyte cultive for in vitro maturation was done in stove at a 38.5°C atmosphere with 5% of CO2 in air for a 20-22h period. By the end of the nuclear maturation period, the oocytes were taken off the maturation medium and the granulosa cells were extracted and then they were stained with Hoescht 33342 and evaluated by nuclear configuration using the epifluorescence microscopy (Leica DMIRB) with ultra-violet light. The oocytes were classified by meiotic stage in: GV (germinative vesicle), GVB (germinative vesicle break), MI (metaphase I); MII (metaphase II); and DEG (degenerated). For statistical analysis of the evaluated characteristics... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Objetivou-se avaliar parâmetros quali-quantitativos relacionados à receptora e ao embrião inovulado e a relação destes com as taxas de sobrevivência embrionária ovina. Os parâmetros utilizados foram idade, peso, índice de massa corpórea, escore de condição corporal, número de corpos lúteos no momento da inovulação, aspecto dos corpos lúteos, concentração de progesterona plasmática, intervalo entre o fim do tratamento hormonal e início dos sinais de estro e a duração do estro das receptoras. Os embriões foram avaliados quanto ao estadio de desenvolvimento, qualidade, número de embriões inovulados e estado, congelado ou fresco. Foram utilizados 90 embriões das raças Santa Inês e Dorper, inovulados em receptoras sincronizadas com esponja impregnada com 60 mg acetato de medroxiprogesterona por 14 dias, somado à administração 400 UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) no momento da retirada da esponja. Receptoras com maior índice de condição corporal e maior concentração de progesterona plasmática apresentaram melhor taxa de sobrevivência embrionária e entre esses dois fatores há uma correlação positiva. As demais variáveis relacionadas às receptoras não influenciaram de maneira significativa a taxa de sobrevivência embrionária. O estadio de desenvolvimento embrionário exerceu influência sobre a taxa de sobrevivência embrionária, a taxa de prenhez das receptoras não diferiu em relação à qualidade dos embriões (graus 1 e 2) e aqueles transferidos à fresco resultaram em taxas de sobrevivência superiores quando comparados aos transferidos após serem congelados-descongelados / Abstract: The objective was to evaluate qualitative and quantitative parameters related to recipient and ovulated embryo and their relationship with the rates of embryo survival. The parameters used were: age, weight, body mass index, body condition score, number of corpus luteum at the time of embryo transfer, an aspect of corpus luteum, plasma progesterone concentration, interval between the end of the treatment and early signs of estrus and estrus length of the recipient. The embryos were evaluated for stage of development, quality, number of embryos ovulated and state, frozen or fresh. Were used 90 embryos of Santa Inês and Dorper, ovulated on recipeint synchronized with sponge impregnated with 60 mg medroxyprogesterone acetate for 14 days, added to an administration of 400 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) at the time of sponge removal. Recipient with higher level of body condition score and higher plasma progesterone concentration showed better embryo survival rate and between these two factors is a positive correlation. The other variables related to the recipient did not influence significantly the embryo survival rate. The stage of embryonic development influence upon the embryo survival rate, however, embryos of grades 1 and 2 did not differ in these rates. The fresh embryos had higher survival rates when compared to frozen-thawed embryos / Orientador: Eunice oba / Coorientador: Sony Dimas Bicudo / Banca: Gilson Toniollo / Banca: Maria Inês Souza / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-20T14:18:28Z No. of bitstreams: 1 2009_PriscillaPereiraMoura_noPW.pdf: 3571635 bytes, checksum: db1ebdfb32264ccb0c85738f949db5d9 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-23T23:35:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PriscillaPereiraMoura_noPW.pdf: 3571635 bytes, checksum: db1ebdfb32264ccb0c85738f949db5d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-23T23:35:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PriscillaPereiraMoura_noPW.pdf: 3571635 bytes, checksum: db1ebdfb32264ccb0c85738f949db5d9 (MD5) Previous issue date: 2009-03-09 / O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar o perfil protéico do plasma seminal ovino por meio de eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida (2D-PAGE) e verificar se alguma dessas proteínas está relacionada com a congelabilidade do sêmen, podendo ser utilizadas como marcadores para essa característica. Foram utilizados os ejaculados de cinco reprodutores, nos quais foram realizadas avaliações espermáticas e dos quais os plasmas seminais obtidos por centrifugação foram submetidos 2D-PAGE em gel a 12% de poliacrilamida. Foram identificados 92 spots, considerando todos os animais analisados. Destes, 41 (44,57%) foram identificados em todos os animais e 51 (55,43%) expressaram-se diferencialmente entre eles. Dentre as proteínas que se expressaram diferentemente, as proteínas 03 (7,9 kDa), 23 (13,6 kDa) e 31 (21,4 kDa) se destacaram, por apresentarem maior expressão e relações com as características espermáticas dos animais. A proteína 31 foi encontrada somente no animal 05 e apresentou alta expressão no mesmo. Esse animal apresentou os menores valores de integridade de membrana e espermatozóides vivos íntegros; e alto valor de espermatozóides mortos reagidos no sêmen descongelado. Já as proteínas 03 e 23 foram encontradas somente no animal 21 e se destacaram devido à alta expressão nesse animal, que apresentou a maior média de integridade de membrana no sêmen descongelado. A avaliação dos dados obtidos evidenciou variações significativas nos resultados das análises do sêmen dos animais e uma variabilidade no perfil protéico no plasma seminal dos carneiros, sugerindo as proteínas 03, 23 e 31 como possíveis marcadores da capacidade criopreservadora do sêmen. A proteína 31 como possível indicador da menor congelabilidade e as proteínas 03 e 23 como marcadores da maior congelabilidade do sêmen. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to identify and characterize the protein profile of ram seminal plasma using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and to verify if any of these proteins was associated with semen freezability, which could be used as markers for predicting semen freezability. Semen from five rams were used. The sperm analysis was held and the seminal plasma obtained by centrifugation was submitted to 2DPAGE using 12% acrylamide gel. Ninety two spots were identified considering the analyzed animals. Forty one (44.57%) were found in all animals and 51 (55.43%) were differentially expressed among them. From that proteins differently expressed, the proteins 03 (7.9 kDa), 23 (13.6 kDa) and 31 (21.4 kDa) stood out because they showed higher expression and because of relations with the sperm characteristics of the animals. The protein 31 was found just in animal 05 and showed high expression in it. This animal had the worst values for live spermatozoa with intact acrosome and plasmatic membrane integrity; and high value for dead spermatozoa with reacted acrosome in thawed semen. Proteins 03 and 23 were found just in animal 21 and showed high expression in this animal, which presented the best values for plasmatic membrane integrity in thawed semen. The results showed a significant variation among sperm analysis of the animals and variability in the protein profile of the seminal plasma of the rams, suggesting that proteins 03, 23 and 31 are possible markers of semen freezability. Protein 31 predicting low semen freezability, and proteins 03 and 23 predicting high semen freezability.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-17T17:07:53Z No. of bitstreams: 1 2009_CarolineMalhadoPBarbosa.pdf: 2811733 bytes, checksum: 2688a127cda74bbc282139f109c93ef0 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-17T17:09:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_CarolineMalhadoPBarbosa.pdf: 2811733 bytes, checksum: 2688a127cda74bbc282139f109c93ef0 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-04-17T17:09:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_CarolineMalhadoPBarbosa.pdf: 2811733 bytes, checksum: 2688a127cda74bbc282139f109c93ef0 (MD5) / O objetivo desse trabalho foi de avaliar o efeito do cruzamento dos animais Santa Inês com Dorper, pela da avaliação do desenvolvimento muscular e da gordura do músculo Longissimus dorsi, utilizando medidas de ultra-som. Foram utilizados 140 animais, sendo 70 Santa Inês e 70 Dorper x Santa Inês, sendo todos machos, com idade média de 155 dias e pensando em média 22 kg. Para as análises relacionadas à idade foram selecionados entre dos 140 cordeiros um total de 119 cordeiros, sendo 53 mestiços Dorper x Santa Inês e 66 Santa Inês. Para realização dos exames, foi utilizado um equipamento de ultra-som com transdutor linear (frequência de 6 MHz e 8 MHz). As imagens da área (ALD), comprimento (CLD) e profundidade (PLD) do músculo Longissimus dorsi, assim como a espessura da gordura subcutânea (EGS), foram realizadas pela abordagem transcutânea entre a 12ª e 13ª costela do lado esquerdo do animal. Foi estudado o efeito da raça sobre as características: peso vivo (PV), ALD, CLD e PLD, além da EGS, assim como as possíveis associações entre elas. Foi também analisado efeito das imagens geradas com transdutor de frequência 6MHz e 8MHz. Para tanto, empregou-se procedimento GLM, CORR, REG, PRINCOMP e teste de médias Tukey (p<0,05) do programa estatístico SAS® (Statistical Analysis System). O experimento mostrou que: não houve influência da raça em relação as medidas ALD, PLD, CLD, EGS e peso; as medidas ALD, CLD, PLD e idade dos ovinos foram correlacionadas positivamente com o peso vivo; não houve diferença para os dois tipos de frequências utilizadas, exceto para EGS (p<0,05). Em relação à regressão linear, evidenciou-se uma relação positiva e crescente do peso em relação as características avaliadas por ultra-som. Sendo assim, a raça Santa Inês apresentou desempenho semelhante quando comparadas com animais mestiços Dorper x Santa Inês. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In the production system, features such as area (ALD) and depth (PLD) of Longissimus dorsi muscle are important indicators of muscle amount and muscle development, as well the fat. This study used 140 animals, 70 Santa Ines and 70 Doper x Santa Ines, all males, weighing on average 22 kg and 155 days of age. For analysis related to age 119 of the 140 lambs were selected, 53 crossbred Dorper x Santa Inês and 66 Santa Inês. For the examinations, a ultrasound with linear probe (6 MHz and 8 MHz frequencies) was used. The images of the area (ALD), length (CLD) and depth (PLD) of Longissimus dorsi muscle and the thickness of subcutaneous fat (EGS) were performed through the transcutaneous scan between the 12th and 13th rib on the animal’s left side. The effect of genetic group on the characteristics: live weight (LW), ALD, PLD and CLD in addition to EGS, as well as the possible associations between them. The effect of images generated with probe of 6MHz and 8MHz frequencies were also studied. GLM, CORR, REG, PRINCOMP and Tukey (p<0.05) of the statistical program SAS® (Statistical Analysis System) were used. There was no influence of genetic group in relationship to the measures ALD, PLD, CLD, EGS and weight; measures ALD, CLD, PLD and the age of animals were positively correlated with live weight and there was no difference for the two types of frequencies used except for EGS (p<0.05). For the linear regression, there was a positive and increasing relationship between live weight and ultrasound measurements. Thus, the Santa Ines has similar performance, when compared with crosses Dorper x Santa Ines when they have the same live weight.

Tese (doutorado)–Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Washington da Silva Chagas (washington@bce.unb.br) on 2012-02-07T23:05:10Z No. of bitstreams: 1 2010_BiancaDamianiMarquesSilva.pdf: 380297 bytes, checksum: 2a4f117cad77ae396ced826b631fb39f (MD5) / Approved for entry into archive by Leila Fernandes (leilabiblio@yahoo.com.br) on 2012-02-16T10:48:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_BiancaDamianiMarquesSilva.pdf: 380297 bytes, checksum: 2a4f117cad77ae396ced826b631fb39f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-16T10:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_BiancaDamianiMarquesSilva.pdf: 380297 bytes, checksum: 2a4f117cad77ae396ced826b631fb39f (MD5) / No primeiro experimento foi encontrado um novo alelo do GDF-9, nomeado FecGE (Embrapa), que leva a uma substituição da fenilalanina por uma cisteína em uma posição conservadora do peptídeo maduro do gene. Para investigar a associação entre os genótipos FecGE e a taxa de ovulação, 39 ovelhas (15 FecG+/+, 15 FecG+/E e 9 FecGE/E) foram selecionadas dos rebanhos genotipados, e submetidas a dois protocolos de sincronização de estro (PGF2? e MAP + eCG). A taxa de ovulação foi maior (P < 0,001) no grupo homozigoto mutante (E/E) o qual mostrou um aumento de 82% na média de CL (2,22± 0,12), assim como a freqüência mais elevada (96,3%) de ovelhas com múltipla ovulação, quando comparado ao grupo +/E e +/+. O grupo heterozigoto (+/E) não apresentou nenhuma diferença (P = 0,612) na média de CL (1,34 ± 0,08), ou na freqüência (31,8%) de ovelhas com ovulações múltiplas, quando comparado as ovelhas do tipo selvagem (1,22 ± 0,11 e 14,6%, respectivamente). Foi observado efeito do genótipo no número de gêmeos por ovelha (P = 0,0136); as ovelhas E/E tiveram 44% de prenhez gemelar, +/E 14% e +/+ 0%. Em conclusão, as ovelhas homozigotas para a mutação tiveram maior taxa de ovulação e prolificidade que as heterozigotas e selvagens. No segundo trabalho foi realizado a superovulação e coleta de embriões de 18 ovelhas (6 +/+, 6 +/E e 6 E/E) para comparação da resposta ovulatória. Foram utilizados dois protocolos de superovulação: protocolo tradicional e protocolo Dia 0. A IA foi realizada com sêmen fresco de um único carneiro, de fertilidade comprovada. Cinco dias após a IA os embriões foram recuperados cirurgicamente, através de laparotomia. Dentre os parâmetros avaliados não houve diferença (P>0,05) entre o protocolo Dia 0 (CL totais 9,8 ± 5,3; estruturas totais 4,5 ± 4,6; estruturas viáveis 1,6 ± 2,0) e o protocolo tradicional (CL totais 10,0 ± 6,0; estruturas totais 3,5 ± 4,3; estruturas viáveis 1,7 ± 2,4). Para quantidade de corpos lúteos nos ovários (E/E 9,0±6,3; +/E 10,1 ±5,3; +/+ 10,5±5,3), estruturas totais coletadas (E/E 4,9±5,0; +/E 3,1±3,1; +/+ 4,1±5,2), e viáveis (E/E 1,9±2,1; +/E 2,2±2,6; +/+ 0,9±1,7), não houve diferença (P>0,05) entre os diferentes genótipos. Foi observado maior número de animais respondendo ao tratamento superovulatório quando utilizado o protocolo Dia 0 (10/18) em comparação ao protocolo tradicional (6/18). Quando se comparou a quantidade de ovelhas que responderam aos protocolos de superovulação, pelo genótipo não houve diferença significativa: E/E 6/12; +/E 5/12 e +/+ 5/12. Não foi observada alteração nos ovários, no crescimento folicular e nem na produção de embriões viáveis quando se comparou os genótipos. Os dois protocolos foram eficientes em estimular a superovulação e produção de embriões, mas não houve diferença entre os genótipos avaliados quanto a taxa de ovulação. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / In the first experiment was found a new allele of GDF-9, named FecGE (Embrapa), which leads to a substitution of a phenylalanine by a cysteine in a conservative position of the mature peptide in the gene. To investigate the association between the FecGE genotypes (E/E, +/E, and +/+) and the ovulation rate, 39 ewes (15 FecG+/+, 15 FecG+/E and 9 FecGE/E) were selected from the genotyped flocks, and submitted to two estrus synchronization protocol (PGF2α and MPA + eCG). The ovulation rate was greater (P<0.001) in the homozygote mutant (E/E) group which showed an 82% increase in CL average (2.22± 0.12), as well as the highest frequency (96.3%) of multiple-ovulating ewes, when compared to +/E and +/+ groups. The heterozygote group (+/E) presented no difference (P=0.612) in CL average (1.34±0.08), or in the frequency (31.8%) of ewes with multiple ovulations, when compared to the wild-type ewes (1.22±0.11 and 14.6%, respectively). Was observed a genotype effect on the number of twins per ewe (P=0.0136); E/E ewes showed 44% of twinpregnancy, +/E 14% e +/+ 0%. In conclusion, the homozygote ewes had higher ovulation rate and prolificacy than heterozygote and the wild-types. In second experiment the superovulation and embryo recovery was made in 18 ewes (6 +/+, 6 +/E e 6 E/E) to compare ovarian response among genotype. Two protocols of superovulation were used: traditional protocol and Day 0 protocol. Was used fresh semen for AI of one male with proved fertility. Five days after AI the embryos were recovered cirurgically, by laparotomy. There was no difference among evaluated parameters (P>0.05) between Day 0 protocol (total CL 9.8 ± 5.3; total structures 4.5 ± 4.6; viable structures 1.6 ± 2.0) and traditional protocol (total CL 10.0 ± 6.0; total structures 3.5 ± 4.3; viable structures 1.7 ± 2.4). Corpora lutea in the ovaries (E/E 9.0±6.3; +/E 10.1 ±5.3; +/+ 10.5±5.3), total structure recovered (E/E 4.9±5.0; +/E 3.1±3.1; +/+ 4.1±5.2), and viable embryos (E/E 1.9±2.1; +/E 2.2±2.6; +/+ 0.9±1.7), there was no difference (P>0.05) among groups of genotype animals. Was observed higher number of animals answering the superovulation treatment when used Day 0 protocol (10/18) in comparison with traditional protocol (6/18). The ewes that answered to superovulation protocol, by genotype, there were no significative difference E/E 6/12; +/E 5/12 e +/+ 5/12. Was not observed alteration in ovaries, in follicular growth and neither in viable embryo production when compare among genotypes. Both protocols were efficient in superovulation and embryo production, but there were no difference among evaluated genotypes in ovulation rate.