Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-04. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:08Z : No. of bitstreams: 1 000870615_20170104.pdf: 317584 bytes, checksum: 6a269491df3512a27244ef461e746baa (MD5) Bitstreams deleted on 2017-01-06T13:21:19Z: 000870615_20170104.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-01-06T13:22:02Z : No. of bitstreams: 1 000870615.pdf: 515774 bytes, checksum: 03bc759e34cba0d37722957c82943ef6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic disease that can be fatal to humans and dogs. The disease is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum and is transmitted by the bite of the sandfly (phlebotomines). In dogs, VL is observed as an intense chronic inflammatory reaction in the liver, spleen, skin, bone marrow and lymph nodes. Arginase activity is important in VL because an increase of this enzyme may contribute to the multiplication of the parasite and a reduction of nitric oxide (NO) synthesis, predisposing a macrophage to infection. Prostaglandin E2 (PGE2) can play a regulatory role in the production of tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10), however, there have been no studies in dogs with LV. This study aimed to evaluate the arginase activity in adherent macrophages cultivated from the lymph nodes of 18 healthy and 23 naturally infected dogs and to examine levels of NO and PGE2 in the supernatant of these cultures. The regulatory effect of PGE2 on the production of TNF-α and IL-10 was also evaluated in supernatants of total lymph node leukocytes cultures. These results help to clarify the mechanisms of the immune response in CVL. / FAPESP: 2013/066849

Resumo: As alterações ultra-estruturais ocorridas nas lâminas epidérmicas e dérmicas de eqüinos com laminite são responsáveis pela rotação ou afundamento da falange distal dentro do casco. Com o objetivo de prevenir esta ocorrência foram estudados os efeitos da sobrecarga de carboidratos (SCHO), assim como da utilização de trinitroglicerina na fase prodrômica da laminite, nas lâminas epidérmicas do casco de quinze eqüinos. A indução da laminite por meio da sobrecarga de carboidratos alterou siginificativamente as lâminas epidérmicas primárias e secundárias dos cascos dos eqüinos dos grupos induzidos (Grupo Laminite e Grupo Laminite + Trinitroglicerina) em comparação com o Grupo Controle, causando retração das lâminas epidérmicas primárias, alongamento das lâminas epidérmicas secundárias e estreitamento das lâminas epidérmicas primárias e secundárias. A indução da laminite por meio da sobrecarga de carboidratos diminuiu significativamente a área da célula basal assim como a área do núcleo dos dois grupos induzidos (Grupo Laminite e Grupo Laminite + Trinitroglicerina) em comparação com o grupo controle. Foi observado, pela análise estatística, que o Grupo Laminite obteve maior redução das áreas, tanto da célula como do núcleo, porém a porcentagem de ocupação do núcleo na célula não foi diferente nos dois grupos induzidos. Na avaliação histopatológica, foram observadas lesões lamelares nos grupos Laminite e Laminite + Trinitroglicerina, características de processo degenerativo das lâminas epidérmicas. Ocorreram diminuições nos números de hemidesmossomos dos grupos induzidos quando comparados com o Grupo Controle. A administração de trinitroglicerina não foi capaz de impedir o desenvolvimento de lesões nas lâminas epidérmicas e dérmicas, assim como, nas células basais e membrana basal em cavalos com laminite induzida por sobrecarga de carboidratos. / Abstract: Disruption of the lamellar ultrastructural is responsible for a cellular failure, that culminates in distal rotation of the distal phalanx within the hoof. Aiming to prevent such debilitating condition, effects of carbohydrate overload and glyceryl trinitrate (TNG) use during the prodromal stages of experimentally induced laminitis in fifteen horses hoof were studied. Laminitis induced by grain overload affected significantly primary and secondary lamellar structure from horse's hoof (Group II and III), which in turn led to primary epidermal retraction, basal cells became elongated and both primary and secondary epidermal lamellae clump together when compared to control group (GI). Equine that developed laminitis induced by carbohydrate overload had a significant reduction in basal cell nucleus in both GII and GIII groups, when compared to horses from GI. Horses from GII group had higher reduction in areas relative to both cell and nucleus, however, the percentage of nucleus position within cell was not different in both horses groups (GII and GIII). Histophatology of hooves revealed lamellae lesions in both horses groups (GII and GIII), characterized by a degenerative process present on epidermal lamellae. Lower number of hemidesmosome in both GII and GIII groups were observed. The administration of TNG was unable to prevent the development of lesions lamellae epidermal and dermal, as in the epidermal basal cells and the basement membrane in horses with laminitis induced by carbohydrate overload. / Orientador: José Correa de Lacerda Neto / Coorientadora: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Antonio Cezar de Oliveira Dearo / Banca: Raquel Yvonne Arantes Baccarin / Banca: José Wanderley Cattelan / Banca: Marcos Lania de Araujo / Doutor

Orientador: Ligia Maria Suppo de Souza Rugolo / Banca: Sergio Tadeu Martins Marba / Banca: José Carlos Peraçoli / Resumo: A pré-eclâmpsia é uma das complicações gestacionais mais freqüentes e o radical livre óxido nítrico (NO) pode estar envolvido na fisiopatologia desta doença. O excesso de radicais livres pode gerar estresse oxidativo que contribui para a ocorrência de várias doenças neonatais, porém, a relação pré-eclâmpsia / estresse oxidativo /óxido nítrico/ doenças neonatais não está bem definida. Investigar se os níveis de NO na placenta e no recém-nascido caracterizam o estresse oxidativo na pré-eclâmpsia e relacionam-se com a morbidade e prognóstico neonatal. Estudo observacional de prematuros menores que 34 semanas de mães com pré-eclâmpsia, pareados pela idade gestacional com prematuros de mães normotensas, nascidos na Maternidade do HC da Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP, entre julho de 2008 e dezembro de 2009. Óxido nítrico foi dosado em placenta, sangue de cordão umbilical, urina do primeiro dia de vida, sangue e urina do recém-nascido no 4º dia. As variáveis bioquímicas e clínicas, de nascimento e neonatais foram comparadas nos 2 grupos: Pré-eclâmpsia e Normotensas. Foram estudados 30 prematuros de mães com pré-eclâmpsia e 30 de mães normotensas, com idade gestacional de 30 ± 2 semanas. Não houve diferença nas condições de nascimento e na morbimortalidade dos prematuros, mas os filhos de mães com pré-eclâmpsia tiveram maior necessidade de surfactante e ventilação mecânica. Os níveis séricos e urinários de NO não diferiram nos 2 grupos, sendo significativamente mais baixos na placenta do que no sangue de cordão e dos recém-nascidos. A pré-eclâmpsia foi grave em 40% dos casos, mas mesmo nestes os níveis de NO não diferiram. Na pré-eclâmpsia os níveis placentários e neonatais de NO não diferiram e não se relacionaram com a morbidade e o prognóstico neonatal / Abstract: Pre-eclampsia is one of commost complication of preganacy and the free radical nitric oxide (NO) may be enrolled in the pathophysiology of the disease. Excessive levels of free radicals can produce oxidative stress contributing to the development of several neonatal diseases. However the pre-eclampsia/oxidative stress/NO/neonatal diseases relationship has not been well established. To investigate whether NO levels in the placenta and in newborns characterize oxidative stress in pre-eclampsia and whether they are related to morbidity and neonatal prognosis.Observational study on preterm newborns, younger than 34 week, of mothers with pre-eclampsia, paired by gestational age with preterm newborns from normotensive mothers and born at the University Maternity Hospital of the Botucatu School of Medicine - UNESP from July 2008 to December 2009. Nitric oxide was dosed in the placenta, umbilical-cord blood, first-day-of-life urine and the newborn's fourth-day urine and blood. Biochemical and clinical variables from birth and the newborn, were compared in the 2 groups: Pre-eclampsia and Normotensive. Thirty preterm newborns of mothers with pre-eclampsia and 30 newborns of normotensive mothers with gestational age of 30 ± 2 weeks were studied. There was no difference in birth conditions or morbidity and mortality of preterm newborns, but the offspring of mothers with pre-eclampsia required more surfactant and mechanical ventilation. Serum and urine NO levels did not differ in the two groups and were significantly lower in the placenta than in umbilical-cord blood and in newborns. Preeclampsia was severe in 40% of cases, but even in those, NO levels did not differ. In pre-eclampsia, placental and neonatal NO levels did not differ and were not related to neonatal morbidity or prognosis / Mestre

Orientador: Angelina Zanesco / Banca: Everardo Magalhães Carneiro / Banca: José Rodrigo Pauli / Banca: Katia de Angelis / Banca: Bruno Rodrigues / Resumo: Após o período da menopausa, as mulheres passam a ter alta prevalência de hipertensão arterial. Embora os mecanismos não estejam completamente elucidados, evidências em modelos experimentais atribuem o maior risco de desenvolver doenças cardiovasculares à redução dos estrógenos associada ao estresse oxidativo e disfunção endotelial. Já está bem estabelecido que o exercício físico é capaz de promover efeitos benéficos sobre o sistema cardiovascular, atuando na via do óxido nítrico (NO), vasodilatador considerado essencial para o controle da pressão arterial (PA). Sua síntese ocorre a partir da L-arginina e, nesse sentido, muitos estudos demonstraram que a administração deste aminoácido pode melhorar a função vascular. No entanto, não foi avaliado se a associação de L-arginina e exercício físico potencializa os benefícios alcançados isoladamente, especialmente em mulheres que apresentam risco cardiovascular. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos crônicos e agudos do exercício físico aeróbio, bem como da exposição aguda à L-arginina, sobre respostas cardiovasculares e biomarcadores endócrino-metabólicos em mulheres normotensas (NT) e hipertensas (HT) na pósmenopausa. Os dados a serem apresentados foram divididos em dois momentos. O objetivo do Estudo 1 foi avaliar os efeitos do treinamento físico aeróbio (TFA) sobre os parâmetros antropométricos, cardiovasculares e bioquímicos/hormonais em mulheres NT e HT na pós-menopausa. Participaram deste estudo 33 mulheres NT e 28 HT. Foram realizadas avaliações antropométrica, cardiovascular e de aptidão física, além de exame sanguíneo de jejum para análise de perfil lipídico, glicemia, via NO/GMPc, hormônios esteróides (cortisol e testosterona) e marcadores do estresse oxidativo (superóxido dismutase, catalase, malondialdeído). Posteriormente, as participantes foram submetidas a 8 semanas de TFA e, ao final, os parâmetros foram... / Abstract: After menopause, women start to present an increased prevalence of arterial hypertension. Although the mechanisms have not been completely elucidated, evidences from experimental models have attributed an increased risk of developing cardiovascular disease in this stage to decreased estrogen levels associated with oxidative stress and endothelial dysfunction. It is well stablished that physical exercise may promote beneficial effects on the cardiovascular system, acting on the nitric oxide (NO) pathway, which is a potent vasodilator released by the endothelium and regarded as essential to blood pressure (BP) control. The NO synthesis results from L-arginine substrate and several studies have demonstrated the administration of this amino acid may increase vascular function. However, the association of L-arginine and physical exercise has not been proved to potentialize the benefits provided by these elements isolatedly, especially on women presenting increased cardiovascular risk. Thus, this study aimed to investigate the chronic and acute effects of aerobic physical exercise and of acute L-arginine administration on the cardiovascular responses and endocrine-metabolic biomarkers in normotensive (NT) and hypertensive (HT) postmenopausal women as well. For this, the collected data were presented in two different moments, named Study 1 and Study 2. The objective of Study 1 was to evaluate the aerobic physical training (APT) effects on anthropometric, cardiovascular and hormonal/biochemical parameters in NT and HT postmenopausal women. Sixty-one postmenopausal women were enrolled - 33 NT and 28 HT. Anthropometric, cardiovascular and physical capacity were performed, as well as fasting blood assay to lipid profile, glycemia, NO/cGMP pathway, steroid hormones (cortisol and testosterone) and biomarkers of oxidative stress (dismutase superoxide, catalase and malondialdehyde). Posteriorly, all the participants were submitted to 8 weeks of APT ... / Doutor

Orientador: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Denise Crispim Tavares / Resumo: Considerando a pesquisa de novas moléculas farmacologicamente ativas, orientada pelo uso tradicional das plantas com finalidade terapêutica, o presente trabalho avaliou os efeitos genotóxicos e de ativação do sistema imunológico em duas espécies de plantas do gênero Byrsonima: Byrsonima crassa e Byrsonima intermedia. Essas espécies são plantas de uso popular, pertencentes à flora do Cerrado Brasileiro, utilizadas pela população para disfunções gástricas e diarréias. Foram realizados ensaios para a caracterização da mutagenicidade dos extratos, através do Teste de Ames (TA), utilizando-se linhagens geneticamente modificadas de Salmonella typhimurium e de ativação da resposta imune celular, utilizando-se cultura de macrófagos de exsudato peritoneal (PEC) de camundongos Swiss, avaliando a liberação celular de Fator de Necrose Tumoral-alfa (TNF-α) e Óxido nítrico (NO), importantes moduladores da resposta inflamatória. Foi verificado que somente o extrato metanólico de B.crassa apresentou atividade mutagênica positiva na linhagem TA98, com e sem ativação metabólica. Analisando-se as frações aquosa e acetato de etila, verificou-se que o composto provavelmente responsável pela atividade mutagênica do extrato metanólico está presente na fração acetato. Testes realizados com os compostos isolados dessa fração (catequina, galato de metila, querecetina -3-O-β-Dgalactopiranosídeo, quercetina-3-O-α-arabinopiranosídeo e amentoflavona) revelaram ação mutagênica da amentoflavona e indícios de mutagenicidade da quercetina arabinopiranosídeo. Nos ensaios imunológicos, verificou-se que os extratos de B.crassa e B.intermedia promoveram estímulo da liberação de NO por macrófagos de camundongos em níveis reduzidos, assim como a fração aquosa do extrato metanólico de B.crassa. A fração acetato de etila do extrato...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the research of active new molecules, leaded by the traditional use of plants with therapeutic proposal, this paper tested the genotoxic effects and the activation of the immune system in two species of Byrsonima: Byrsonima crassa and Byrsonima intermedia. These are popular use species that belong to the Brazilian Cerrado, utilized by population to gastric dysfunctions and diarrheas. Many assays were done to give the characterization of mutagenicity of the extracts, through the Ames test (TA) using a line of genetic changed Salmonella typhimurium and the activation of the cellular response, using a culture of peritoneal macrophages from Swiss mice, to test the cell liberation of the Tumor Necrosis Factor-apha (TNF-a) and Nitric Oxide (NO), important modulators on the inflammation response. It was verified that only the methanolic extract of B.crassa presented positive mutagenic activity in the line TA98, with and without metabolic activation. Analyzing the watering and ethyl acetate portions, it was checked that the substance that probably is responsible by the mutagenic activity of the methanolic extract is present on the ethyl acetate portion. Assays achieved with isolated compounds from this portion - (+)-catechin, methyl galate, quercetin-3-O-ß-D-galactopyranoside, quercetin-3-O-a-Larabinopyranoside and amentoflavone - discovered mutagenic activity of amentoflavone and mutagenicity signals of quercetin-3-O-a-L-arabinopyranoside. On this immunologic assays, it was observed that the B.crassa and B.intermedia extracts did not promote the stimulation of leaving NO and TNF-a by macrophages of mouse, just live the watering portion from B.crassa methanolic extract. The ethyl acetate B.crassa portion presented stimulated and relevant activity to the liberation of NO and TNF-a. (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Coorientador: Danielle Cardoso Geraldo Maia / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Eduardo Bagagli / Resumo: A esporotricose é uma doença micótica causada pelo fungo termodimórfico Sporothrix schenckii. A resposta imune inata permite o reconhecimento de um amplo espectro de agentes patogênicos através dos PRRs, como os NLRs. Esses receptores, moléculas adaptadoras ASC e proteases caspase-1 formam os inflamassomas, complexo multiprotéico responsável pela maturação da IL-1β e IL-18. Evidências experimentais mostram que o inflamassoma tem importante papel na defesa antifúngica do hospedeiro, entretanto não há informações disponíveis sobre seu envolvimento em infecções causadas pelo S. schenckii. A indução da imunidade celular depende da interação entre antígenos, macrófagos e linfócitos, pois quando ativadas essas populações celulares liberam mediadores imunológicos, estabelecendo uma ligação entre as respostas imunológicas inata e a adaptativa. O objetivo deste trabalho foi avaliar o envolvimento do inflamassoma, por meio da determinação de caspase-1, e citocinas na resposta imunológica induzida pelo fungo S. schenckii em modelo experimental de esporotricose sistêmica utilizando camundongos Balb/c infectados e não infectados durante oito semanas. Os resultados encontrados mostraram que entre a 4ª e 6ª semanas de infecção ocorre imunossupressão do hospedeiro, com consequente agravamento da doença, pois a produção de NO permaneceu elevada neste período, assim como houve diminuição da liberação da IL-1β, IL-17, IL-23, citocinas pró-inflamatórias que agem protegendo o hospedeiro. Neste mesmo período, a diminuição do percentual de caspase-1 ativa, seguido pela menor liberação de IL-1β e IL-18, demonstrou que o inflamassoma estava com sua ativação inibida, colaborando para uma maior disseminação do patógeno, já que estão diretamente relacionada... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sporotrichosis is a fungal disease caused by the thermo-dimorphic fungus Sporothrix schenckii. The innate immune response enables the recognition of a broad spectrum of pathogens through PRRs, such as NLRs. These receptor, ASC and caspase-1 form inflammasomes, complex multiprotein responsible for maturation of IL-1β and IL-18. Experimental evidence shows that inflammassome plays an important role in antifungal host defense, however there is no information available about his involvement in infections caused by S. schenckii. The induction of cellular immunity depends on the interactions between antigens, macrophages and lymphocytes because when activated, these cell populations release immune mediators to establishing a link between the innate and adaptive immune responses. The aim of this study was to evaluate the involvement of inflamassoma, through the determination of caspase-1, and cytokines in the immune response induced by the fungus S. schenckii in an experimental model of systemic sporotrichosis using Balb/c mice infected and uninfected for eight weeks. The results showed that between the fourth and sixth weeks of infection occurs immunosuppression of the host, with consequent worsening of the disease, because NO production encontrouse high during this period, as well as decreased release of IL-1β, IL-17, IL-23, pro-inflammatory cytokines that act to protect the host. In this same period, the decrease in the percentage of active caspase-1, followed by lower release of IL-1β and IL-18, showed that inflammasome was inhibited its activation, contributing to further spread of the pathogen, since it is directly related with the innate response and optimization of an adaptive response. The production of IFN-γ remained increased during all weeks... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marileda Bonafim Carvalho / Coorientador: Luciane Helena Gargaglioni Batalhão / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Juliana Corrêa Borges Silva / Banca: Evelin Capellari Cárnio / Resumo: A instalação do estresse oxidativo decorre da existência de um desequilíbrio entre compostos oxidantes e antioxidantes, ocasionando a geração e acúmulo de espécies reativas do oxigênio (ERO). Estudos realizados nos estágios terminais da doença renal crônica (DRC) no homem e em ratos demonstraram que ocorre aumento na produção de ERO. O presente estudo foi conduzido com o objetivo de determinar se o mesmo ocorre em cães clinicamente estáveis nos diferentes estágios da DRC naturalmente adquirida. O protocolo experimental do presente trabalho foi previamente aprovado, pela Comissão de Ética no uso de Animais conforme processo n.° 013690/11. Foram estudados cinco grupos de cães, com idade variando entre quatro a 18 anos, compreendendo o grupo controle, composto por animais sadios (controle, n=17), grupo com DRC estágio 1 (DRC-1, n=12), grupo com DRC estágio 2 (DRC-2, n=10), grupo com DRC estágio 3 (DRC-3, n=13) e grupo com DRC estágio 4 (DRC-4, n=10). Os cães com DRC estavam com o quadro clínico estável e sem receber qualquer tipo de tratamento. Os animais sadios ou com DRC foram submetidos a duas coletas de sangue, com intervalo de 24 horas (amostras repetidas), para obtenção de soro e plasma. O estresse oxidativo foi avaliado pelo poder antioxidante, estimado pelo delta, e pela determinação plasmática indireta de óxido nítrico (NO) por meio da dosagem de nitrato/nitrito. O ensaio foi realizado em duplicatas das amostras de cada avaliação. Os dados obtidos (médias das duplicatas) foram submetidos à análise de variância (One-way ANOVA) não paramétrica (Kruskal-Wallis) (α=0,05). Os resultados estão expressos como média±erro padrão da média. Os valores de creatinina sérica, que definiram a classificação dos pacientes do grupo controle, DRC-1, DRC-2, DRC-3 e DRC-4 foram 1,02±0,02mg/dL; 1,06±0,05mg/dL; 1,80±0,03mg/dL; 3,39±0,21mg/dL e 6,00±0,28mg/dL, respectivamente. Os resultados relativos ... / Abstract: The establishment of oxidative stress results from an imbalance between oxidants and antioxidants compounds, which generates accumulation of reactive oxygen species (ROS). Studies conducted in terminal stages of chronic kidney disease (CKD) in humans and mice demonstrated an increase in ROS generation. The aim of this study was to determine if the same pattern of response occurs in dogs clinically stable at different stages of naturally occurring CKD. The experimental protocol of this study was previously approved by the Ethics Committee on the use of Animals n.° 013690/11. Five groups of dogs, all aged between four to 18 years old. Were studied the control group was composed of healthy animals (CG, n = 17), CKD stage 1 group (CKD-1, n = 12), CKD stage 2 group (CKD-2, n = 10), CKD stage 3 group (CKD-3, n = 13) and CKD stage 4 group (CKD-4, n = 10). CKD dogs were clinically stable with no treatment. Two blood samples were collected at intervals of 24 hours (repeated measures) to obtain serum and plasma. Oxidative stress was measured by antioxidant power and indirectly by determination of nitric oxide (NO) by nitrate/nitrite. Data (means of duplicates) were submitted to analysis of variance (One-way ANOVA) nonparametric (Kruskal-Wallis) (α = .05). The results were expressed as mean±standard error of the mean. The serum creatinine values guided the classification of patients as CG, CKD-1, CKD-2, CKD-3 and CKD-4 and were 1.02±0.02mg/dL, 1.06±0.05 mg/dL, 1.80±0.03 mg/dL, 3.39±0.21 mg/dL and 6.00±0.28 mg/dL, respectively. The results related to antioxidant power (GC) 0.032 ± 0.002 mmol/μL, (CKD-1) 0.030±0.002nmol/μL, (CKD-2) 0.028±0.003nmol/μL, (CKD- 3) 0.027±0.003 nmol/μL and (CKD-4) 0.025 ± 0.002 nmol/μL were different between the healthy dogs and dogs with CKD, but not differ significantly among groups. The results of the NO plasma concentrations did not differ significantly when comparing the GC data (10.81±0.51μM) ... / Doutor

Orientador: José Roberto Fioretto / Resumo: A Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo (SDRA) é a forma clínica mais grave da lesão pulmonar aguda e, apesar do melhor entendimento de sua fisiopatologia, a taxa de mortalidade permanece elevada. O óxido nítrico inalatório (NOi) é um vasodilatador seletivo de áreas pulmonares ventiladas, promovendo a otimização da relação ventilação/perfusão nestas áreas, com melhora da oxigenação e facilitação do esvaziamento do ventrículo direito. Tais efeitos permitiriam a redução de parâmetros ventilatórios, habitualmente elevados na SDRA, diminuindo o risco de lesão pulmonar induzida pela ventilação mecânica e a morbi/mortalidade. O estudo teve como objetivos avaliar o efeito imediato e prolongado da administração precoce de NOi associada à terapia convencional sobre a oxigenação e parâmetros ventilatórios, mortalidade, tempo de internação na UTI Pediátrica e duração da ventilação mecânica em crianças portadoras de SDRA. Dois grupos de pacientes pediátricos com SDRA foram comparados: grupo NOi (GNO; n=18), seguido prospectivamente, composto de pacientes que receberam NOi associado à terapia convencional e grupo terapia convencional (GTC; n=21), avaliado retrospectivamente, formado de pacientes que utilizaram apenas terapia convencional. Os critérios para iniciar a administração do NOi foram: saturação arterial de oxigênio < 90% a despeito de uma fração inspirada de oxigênio (FiO2) 0,6 e de uma pressão expiratória final positiva (Peep) 10 cmH2O. A resposta imediata ao NOi foi avaliada em um teste de resposta de quatro horas, considerando resposta positiva um aumento na relação PaO2/FiO2 de 10 mmHg acima dos valores basais. A terapia convencional não foi modificada durante o teste. Nos dias subseqüentes os pacientes que exibiram resposta positiva continuaram recebendo a menor dose de NOi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is the most severe manifestation and the end spectrum of acute lung injury. It has been associated with high mortality rate, despite better understanding of its pathophysiology and recent therapeutic advances. Inhalde nitric oxide (iNO)-induced vasodilation of pulmonary vasculature adjacent to well-ventilated alveoli increases blood flow to these lung areas and preferentially shunt blood away from poorly ventilated regions, matching V/Q and reducing intrapulmonary shunt. This results in improved oxygenation and reduction of both pulmonary vascular resistence and right ventricle afterload. By improving V/Q matching, iNO may allow less aggressive mechanical ventilation (MV), which minimizes the risk of ventilator-induced lung injury and mortality. The aims of this study were: 1) to determine the acute and sustained effects of iNO on some oxygenation indexes and ventilator settings, to analyze the weaning process, and to assess the safety of NO inhalation; 2) to test the hypothesis that early administration of iNO would reduce mortality rate, intensive care length of stay, and the duration of MV comparing a group of pediatric ARDS patients treated with iNO plus conventional therapy with another treated only with conventional therapy. Children with ARDS, aged between one month and 12 years were studied. There were two groups: iNO group (iNOG; n=18) composed of patients prospectively enrolled from November 1998 to 2002, and conventional therapy group (CTG; n=21) consisting of historical control patients admitted from August 1996 to August 1998. Study groups were of similar ages, gender, primary diagnoses, pediatric risk of mortality score, and mean airway pressure. PaO2/FiO2 ratio was lower (CTG: 116.9l34.5; iNOG: 71.3l24.1 - p < 0.001) and oxygenation index higher (CTG: 15.2 (7.2-32.2); iNOG: 24.3 (16.3-70.4) - p < 0.001) in the iNOG. Therapy with iNO was introduced as early as 1.5 hours after ARDS. / Doutor

Orientador: Ana Catarina Cataneo / Banca: Maria de Lourdes Lucio Ferrarese / Banca: Jeferson Zagonel / Banca: Inês Cechin / Banca: Edivaldo Domingues Velini / Resumo: O lactofen é um herbicida do grupo dos difenil-éteres utilizado na cultura da soja para o controle de plantas daninhas de folhas largas e possui como mecanismo de ação a inibição da enzima protoporfirinogênio oxidase (Protox), que catalisa a etapa de oxidação do protoporfirinogênio-IX a protoporfirina-IX (proto-IX) na via de biossíntese das clorofilas e citocromos. A inibição é seguida de um acúmulo de proto- IX, que leva à formação de espécies reativas do metabolismo do oxigênio (ERMO), peroxidação de lipídios das membranas e diminuição dos teores de pigmentos fotossintéticos, caracterizando-se assim o estresse oxidativo. Como conseqüência, podem ocorrer manchas, enrugamento e queima das folhas, levando à paralisação temporária do crescimento da cultura. Em contrapartida, o óxido nítrico (NO) é uma molécula capaz de eliminar diretamente as ERMO e assim finalizar reações propagadas em cadeia, podendo atuar como um antioxidante. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo avaliar se o pré-tratamento de plantas de soja com solução de nitroprussiato de sódio (SNP), substância doadora de NO, promove proteção contra o estresse oxidativo gerado pelo lactofen. Assim, plantas de soja no estádio fenológico V3, após pré-tratamento com as diferentes doses de SNP (0, 50, 100 e 200 μmol.L-1) por dois dias consecutivos, foram pulverizadas com lactofen na dose recomendada para esta cultura, equivalente a 0,7 L.ha-1. Às 24, 48, 72, 96 e 120 h após a aplicação de lactofen (HAAL), folíolos foram coletados para a quantificação dos teores de lipoperóxidos, clorofilas totais e suas frações "a" e "b" e carotenóides totais, bem como para a determinação da atividade das enzimas antioxidantes glutationa S-transferase (GST), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e peroxidase (POD). Além disso, ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lactofen is a diphenylether herbicide applied in soybean fields to control broadleaf weeds whose mechanism of action is the inhibition of protoporphyrinogen oxidase (Protox) enzyme, which catalyses oxidation of protoporphyrinogen-IX to protoporphyrin-IX (proto-IX) in the chlorophyll and cytochrome biosynthesis pathway. This inhibition is followed by accumulation of proto- IX, which leads to generation of reactive oxygen species (ROS), lipid peroxidation of membranes and decrease of photosynthetic pigment levels, which characterizes oxidative stress. Consequently, spots, wrinkles and leaf burn can occur, which results in transitory cessation of crop growth. However, nitric oxide (NO) is a molecule able to scavenge ROS directly and to end chain reactions, acting as an antioxidant. Thus, the present research aimed to evaluate if the pre-treatment of soybean plants with sodium nitroprusside (SNP) solution, a NO donor substance, promotes protection against oxidative stress generated by lactofen. Thus, soybean plants at V3 phenologic stage were pre-treated with different SNP levels (0, 50, 100 and 200 μmol.L-1) for two consecutive days and on the third day were sprayed with lactofen at recommended rate for this crop, equivalent to 0.7 L.ha-1. At 24, 48, 72, 96 and 120 h after application of lactofen (HAAL), leaflets were collected in order to quantify the levels of lipoperoxides, total chlorophylls and their "a and "b" fractions, total carotenoids, as well as the activity assay of glutathione S-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and peroxidase (POD) antioxidant enzymes. In addition, at two, four and seven days after application of lactofen (DAAL), visual injury evaluations were performed, and at 7 and 14 DAAL, the plants were evaluated for height, root length and leaflets number count. Afterwards, the plants were separated into leaf blades,...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria José Soares Mendes Giannini / Orientador no exterior: Joshua Daniel Nosanchuk / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Carlos Pelleschi Taborda / Banca: Mauro Cintra Giudice / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Maria Aparecida de Resende Stoianoff / Resumo: Dermatófitos são fungos que apresentam a capacidade de invadir os tecidos queratinizados do homem e dos animais, produzindo a dermatofitose. Biofilmes são comunidades estruturadas de microrganismos que se agrupam de maneira organizada a uma superfície ou que se aderem uns aos outros, dentro de uma matriz extracelular que eles mesmos produzem. Pela primeira vez, neste trabalho, foi descrita a formação de biofilmes por isolados clínicos e cepas ATCC de dermatófitos. Também se avaliou a sensibilidade das cepas frente aos antifúngicos convencionais e derivados sintéticos do ácido protocatecuico, determinando sua toxicidade e eficiência, tanto nas formas planctônicas como de biofilme. A identificação molecular dos isolados clínicos mostrou concordância com a identificação convencional. Todas as cepas e isolados foram capazes de formar biofilmes nos quatro meios testados. Trichophyton. rubrum ATCC 28189, ATCC MYA-4438, T. rubrum 143 e Trichophyton. mentagrophytes 66 produziram mais biomassa e matriz extracelular que T. mentagrophytes ATCC 11481 (p<0.05). RPMI 1640, BHI e DMEM estimularam maior produção de biomassa e matriz extracelular que o meio de queratinócitos. Todas as espécies foram capazes de formar biofilmes maduros em 72 h e uma rede de hifas circundadas em vários pontos por uma matriz extracelular foi mostrada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Na microscopia confocal, aparentemente os meios RPMI e DMEM produziram biofilmes mais espessos e o meio BHI, biofilmes mais densos e compactos. As melhores atividades anti-dermatófitos foram expressas pelos protocatecuatos de butila, pentila, hexila, nonila e decila, que exibiram baixa toxicidade para as células HaCat, NHOK e HepG2 nas regiões da concentração inibitória mínima (CIM). Nonila foi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dermatophytes are fungi that have the ability to invade keratinized tissues of human and animals, producing a condition called dermatophytosis. Biofilms are structured microbial communities that are organized by adhering to a surface, as well as to each other via an extracellular polymeric matrix. For the first time, in this work, the biofilm formation by ATCC strains and clinical isolates of dermatophytes was described. Also, the susceptibilities of the strains to conventional antifungal drugs and to the synthetic derivatives of protocatechuic acid were evaluated, determining its toxicity and efficacy. The molecular identification corroborated with the conventional one. All strains were able to form biofilms in the four media tested. Trichophyton. rubrum ATCC 28189, Trichophyton. mentagrophytes 66, and T. rubrum 143 produced more biomass, polysaccharide structures and extracellular matrix than T. mentagrophytes ATCC 11481 (p <0.05). RPMI 1640, BHI and DMEM stimulated increased production of biomass and extracellular matrix when compared to the medium for keratinocytes. All species were able to form mature biofilms in 72 hours. The SEM results showed a coordinated network of hyphae in all directions, surrounded by an extracellular matrix. In confocal microscopy, apparently RPMI and DMEM media produced thicker biofilms, while the BHI produced denser and compact biofilms. The greatest antidermatophytes activities were expressed by butyl, pentyl, hexyl, nonyl and decyl, protocatechuates, which exhibit low toxicity to HaCat, HepG2 and NHOK cells in the regions of minimal inhibitory concentrations (MIC). Nonyl was the compound with improved selectivity index for HaCat and HepG2 cells; for NHOK cells, the most selective compounds were nonyl and hexyl. Fluconazole, griseofulvin... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor