Orientador: Cristiano Gallina Moreira / Banca: Clovis Wesley Oliveira de Souza / Banca: Fernando Rogério Pavan / Resumo: Sinalização química em bactérias patogênicas é um mecanismo empregado para interagir com o hospedeiro e sua respectiva microbiota. Através desta interação ocorre a regulação dos mecanismos de virulência. Estudando o mecanismo de sinalização química do sistema de 2-componentes QseBC em Salmonella enterica serovar Typhimurium foi aberta uma nova perspectiva para desvendar os mecanismos de patogenicidade. Dentre estes, uma nova proteína VisP (Virulence and stress-related Periplasmic protein) foi reportada. Seu papel inicial na interação com a enzima LpxO em S. Typhimurium foi anteriormente demonstrada. O antígeno-O da camada de LPS fornece proteção contra as defesas do hospedeiro e, particularmente, o comprimento de sua cadeia exerce um papel essencial. A montagem do antígeno-O possui o sistema Wzz, o qual determina o comprimento final de sua cadeia polissacarídica, e também apresenta uma distribuição tri-modal. Forma cadeias curtas (S-OAg), longas (L-OAg) e muito longas (VL-OAg) de antígeno-O. As proteínas WzzST e WzzfepE regulam, respectivamente, a síntese das cadeias L-OAg e VL-OAg. Neste estudo, os genes wzzST, wzzfepE, visP e lpxO foram mutados, via mutagênese λ Red, obtendo simples e duplos mutantes. Dados preliminares evidenciaram que há um aumento nas cadeias VL-OAg e L-OAg no mutante ΔvisP, e reciprocamente há diminuição de L-OAg em ΔlpxO. Foram feitos ensaios para avaliar a motilidade, invasão em células epiteliais e sobrevivência intracelular em macrófagos com as amo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chemical signaling is a mechanism employed by several bacterial species to interact within surrounding microbiota and their host. Upon this interaction the pathogenic bacteria regulate their virulence traits. The two-component system QseBC was described on chemical signaling in Salmonella enterica serovar Typhimurium, and a novel branch of pathogenic cascade regulation was revealed. Among these mechanisms a novel protein was described, VisP (Virulence and stress related Periplasmic protein). VisP interacts with LpxO enzyme on the periplasm. The O-antigen of the LPS layer provides protection against host defenses, and particularly its chain's length plays an essential role. The O-antigen assembly has the Wzz system, which determines the O-antigen final chain length, and also presents a tri-modal distribution. It forms short (S-OAg), long (L-OAg) and very-long (VL-OAg) O-antigen chains. The WzzST and WzzfepE proteins respectively regulate the L-OAg and VL-OAg synthesis. In this study, wzzST, wzzfepE, visP and lpxO genes were mutated via λ Red mutagenesis, obtaining single and double-mutants. Our preliminary data have shown that VisP increases VL-OAg and L-OAg, conversely LpxO diminishes L-OAg chain length. The motility, epithelial cell invasion and macrophage intracellular survival and replication were assessed with the mutants obtained. The ΔvisP presented 1,2 and 1,0 order of magnitude reduction in cell invasion and intracellular macrophage replication, respectively, compari... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O ambiente estuarino à reconhecidamente um local de aporte de Ãguas contaminadas de diferentes fontes. O gÃnero Vibrio à encontrado, naturalmente, nesses locais, sendo relatadas, em inÃmeros trabalhos cientÃficos, cepas resistentes a antimicrobianos utilizados, rotineiramente, no tratamento mÃdico. Foram selecionadas setenta cepas de Vibrio oriundas de amostras de Ãgua e sedimento do estuÃrio do Rio AcaraÃ, litoral Oeste do CearÃ, Brasil para o experimento. O antibiograma foi proposto em duas baterias, sendo uma com Ãgar Mueller-Hinton solubilizado em Ãgua destilada (MH+AD) e a outra em Ãgua do mar (MH+AM), alÃm de ser testada a presenÃa dos fatores de virulÃncia proteases (caseinase, elastase e gelatinase), lipases, fosfolipases, DNases, amilases, urease e hemolisinas (β-hemÃlise pelo teste de Kanagawa em Ãgar Wagatsuma). Os antimicrobianos testados foram NAL, AMP, ATM, CFL, CIP, CLO, CTX, EST, GEN, OTC, PEN, SUT e TET. Em MH+AD, o perfil de resistÃncia foi verificado para 47 (67,1%) cepas a PEN, 26 (37,1%) cepas a AMP e CFL, 8 (11,4%) a OTC, 6 (8,6%) a TET, 3 (4,3%) a ATM, e 1 (1,4%) a CLO, enquanto para MH+AM, 68 (97,1%) cepas foram resistentes a OTC, 67 (95,7%) a TET, 57 (81,4%) a PEN, 34 (48,6%) a CFL, 29 (41,4%) a AMP, 21 (30,0%) a EST, 20 (28,5%) a GEN, 5 (7,2%) a ATM e NAL, 3 (4,3%) a SUT e 1 (1,4%) a CIP. As cepas resistentes em MH+AD foram submetidas à cura do plasmÃdio pelo agente curagÃnico acridine Orange. Foi verificada resistÃncia plasmidial em 36,21% das cepas resistentes a AMP, 5,17% a ATM, 37,93% a CFL, 13,79% a OTC, 53,45% a PEN e 6,90% a TET. Por ordem de recorrÃncia, 67 (91,42%) cepas de Vibrio spp. analisadas apresentam atividade da enzima urease, seguidas de 57 (81,42%) para lipase, 54 (77,14%) a amilase, 53 (75,72%) a gelatinase, 43 (61,42%) a caseinase, 26 (37,14%) a fosfolipase, 17 (24,28%) a DNase, 16 (22,86%) a elastase e 13 (18,57%) a β-hemÃlise (Kanagawa). A Ãgua do mar influenciou, significativamente, a caracterizaÃÃo da resistÃncia das cepas de Vibrio spp. analisadas, principalmente, sobre os antimicrobianos das classes das tetraciclinas, alÃm de ter sido detectada mÃltipla resistÃncia associada à cepas com fatores preliminares de virulÃncia. / The estuarine environment is recognized as an intake of contaminated water from different sources. The genus Vibrio is found in those places, being reported in many papers resistant strains to antibiotics used routinely in medical treatment. Seventy strains of Vibrio were selected originated from samples of water and sediment from the Acaraà estuary, West coast of CearÃ, Brazil to experiment. The antibiogram was proposed in two batteries, one with Mueller Hinton agar dissolved in distilled water (MH+DW) and the other in seawater (MH+SW), and is tested the presence of virulence factors protease (caseinase, elastase and gelatinase), lipases, phospholipases, DNases, amylase, urease, and hemolysin (β-hemolysis test by Kanagawa Wagatsuma agar). The antimicrobials tested were NAL, AMP, ATM, CFL, CIP, CHL, CTX, STP, GEN, OTC, PEN, TCY and STX. In MH+DW, the resistance profile was observed for 47 (67.1%) strains to PEN, 26 (37.1%) to AMP and CFL, 8 (11.4%) to OTC, 6 (8.6%) to TCY, 3 (4.3%) to ATM and 1 (1.4%) to CHL, while for MH+SW, 68 (97.1%) strains were resistant to OTC, 67 (95.7%) to TCY, 57 (81.4%) to PEN, 34 (48.6%) to CFL, 29 (41.4%) to AMP , 21 (30.0%) to STP, 20 (28.5%) to GEN, 5 (7.2%) to ATM and NAL, 3 (4.3%) to STX and 1 (1.4%) to CIP. The resistant strains in MH+DW were subjected to plasmid curing by acridine orange agent. Resistance plasmid was observed in 36.21% of resistant strains to AMP, 5.17% to ATM, 37.93% to CFL, 13.79% to OTC, 53.45% to PEN and 6.90% to TCY. By order of recurrence, 67 (91.42%) strains of Vibrio spp. have analyzed the enzyme urease, followed by 57 (81.42%) to lipase, 54 (77.14%) to amylase, 53 (75.72%) to gelatinase, 43 (61.42%) to caseinase, 26 (37.14%) to phospholipase, 17 (24.28%) to DNase, 16 (22.86%) to elastase and 13 (18.57%) to β-hemolysis (Kanagawa). Seawater influence significantly the characterization of the resistance of strains of Vibrio spp. analyzed mainly on the drugs of the tetracycline class, and has been detected multidrug resistant strains associated with preliminary virulence factors.

Submitted by Sandro Camargo (sandro.camargo@unipampa.edu.br) on 2015-05-07T23:12:51Z No. of bitstreams: 1 131150001.pdf: 1709524 bytes, checksum: 7ab2f239e6dc021c9db84badef44c320 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-07T23:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 131150001.pdf: 1709524 bytes, checksum: 7ab2f239e6dc021c9db84badef44c320 (MD5) Previous issue date: 2014-12-19 / Os fungos na Antártica ocupam nichos distintos e realizam diferentes interações, porém sua importância nestes nichos e interações ainda são pouco compreendidas. Interações entre fungos e musgos vêm sendo relatadas para a Antártica, um exemplo dessa interação fungo- musgo é a presença de fungos formadores de anéis sobre carpetes de musgos antárticos. Estes fungos formadores de sistemas de anéis concêntricos podem causar necroses e manchas amarelas e marrons sobre os carpetes de musgos. Contudo, devido à complexidade destes fungos, as informações sobre estes são fragmentadas não existindo ainda uma caracterização completa destes organismos. Assim, este estudo buscou identificar o isolado nomeado FIMA 665-5, encontrado em amostras do musgo Sanionia uncinata (Hedw.) Loesk. Além disso, caracterizar fisiológica, bioquimicamente e testar a presença de atividade patogênica do isolado. As coletas do material para o estudo foram realizadas na Expedição Antártica Brasileira no verão austral de 2012/2013. Para a caracterização fisiológica do isolado foram testados diferentes meios de cultura (BDA, Sabouraud e MEA) e diferentes temperaturas (- 6°C, 1°C, 5°C, 10°C, 20°C e 30°C), onde a velocidade de crescimento do isolado foi medida com o auxílio de um paquímetro a cada 24h, até que o crescimento de uma das colônias atingisse a borda da placa. Os resultados foram submetidos à ANOVA e teste de Tukey (p <0,05), utilizando o software Statistix 8. Para a caracterização bioquímica foram realizados ensaios enzimáticos para verificar a produção de pectinase, celulase, protease e amilase nas temperaturas de 10°C e 30°C. Para avaliar a atividade patogênica, foram realizados testes de patogenicidade química a partir do extrato obtido do isolado, bem como teste de confronto por disco em difusão. Através de métodos moleculares e filogenéticos o isolado foi identificado como pertencente ao gênero Penicillium Link, sendo um organismo psicrotrófico, com crescimento entre 1-30°C, tendo um crescimento micelial ótimo a 20°C. O meio de cultura onde ocorre às condições nutricionais mais favoráveis para o crescimento micelial do isolado é o meio BDA. No que se refere à patogenicidade, o isolado apresentou capacidade de inibir o crescimento in vitro e causar descoloração total nos gametófitos do musgo Physcomitrium acutifolium Broth. / Fungi in Antarctica occupy different niches and perform different interactions, but its importance in these niches and interactions are still poorly understood. Interactions between fungi and mosses have been reported to Antarctica an example of these interactions is the presence of fungi forming rings on of carpets Antarctic mosses. These fungi forming rings can cause necrosis and yellow to brown stains on the carpets of mosses. However, due to the complexity of these fungi information about these are fragmented and there is still no complete characterization of these organisms. This study aimed to identify the isolated named FIMA 665-5, found in samples of moss Sanionia uncinata (Hedw.) Loesk. Further, characterize physiological, biochemical and test the presence of pathogenic activity of isolated. The collections of the material for the study were performed at the Brazilian Antarctic Expedition in the austral summer of 2012/2013. Through taxonomic, molecular and phylogenetic methods the isolate was identified belonging to the genus Penicillium Link (1809). For physiological characterization of different culture media (PDA, MEA and Sabouraud) and different temperatures (-6°C, 1°C, 5°C, 10°C, 20°C and 30°C) were tested where the diameter colony was measured with a caliper every 24h, until the growth of a colony reached the edge of the plate. The results were submitted to ANOVA and Tukey test (p <0.05) using the Statistix 8. For the biochemical characterization were performed enzymatic assays with different culture media to verify the production of enzymes such as pectinase, cellulase, protease and amylase at temperatures of 10°C and 30°C. To evaluate the pathogenic activity chemical pathogenicity tests were performed obtained from the isolated extract and by confronting disk diffusion test. Through taxonomic methods, molecular and phylogenetic isolated was identified belonging to the genus Penicillium Link, one psychrotrophs organism, with growth between 1-30°C, with a great mycelial growth at 20°C. The culture medium which has more favorable nutritional conditions for mycelial growth of isolate is PDA medium. Regarding to pathogenicity, the isolate showed ability to inhibit the in vitro growth and cause complete discoloration in the gametophytes of moss Physcomitrium acutifolium Broth.

A Mancha marrom é uma das principais doenças do trigo, causada pelo fitopatógeno Bipolaris sorokiniana, responsável por grandes perdas econômicas no cultivo do trigo em todo mundo. Este fungo apresenta uma grande diversidade morfológica, fisiológica e genética. O objetivo do trabalho foi utilizar marcadores moleculares e fenotípicos para avaliar a variabilidade genética em isolados monopóricos e polispóricos de Bipolaris sorokiniana de sementes de trigo oriundos do Brasil e outros países. A caracterização molecular envolveu as metodologias URP-PCR, PCR-RFLP, REP-PCR, BOX-PCR, ERIC-PCR assim como testes isoenzimáticos e de patogenicidade. A análise de patogenicidade revelou que isolados polispóricos são mais severos para as sementes que para as partes aéreas das plantas quando comparados com os monospóricos. A caracterização isoenzimática e molecular através das técnicas URP-PCR, PCR-RFLP, REP-PCR, BOX-PCR, ERIC-PCR exibiram uma grande diversidade intra-populacional. REP-PCR e ERIC-PCR revelaram maior diversidade entre os isolados, com uma similaridade inferior a 70%. No entanto, as amplificações realizadas com o BOX-PCR apresentaram um perfil com uma maior similaridade. Com os resultados obtidos a partir das amplificações com BOX-PCR um par de primers foi desenhado a partir de um fragmento comum a todos os isolados e que foi capaz de amplificar um produto único ao gênero Bipolaris sp. entre as amostras testadas. Com a realização de mais ensaios com outros microrganismos é possível que o mesmo possa ser utilizado como um marcador deste gênero. A técnica de PCR-RFLP utilizando as enzimas HaeIII, HinfI, HhaI, EcoRI e HindIII apresentaram perfis de restrição com variação no número de fragmentos e no peso molecular. Uma possível explicação para à variabilidade observada em todas as técnicas utilizadas pode ser atribuída à condição multinucleada das células de B. sorokiniana bem como a heterocariose, que pode levar a recombinação mitótica e ao polimorfismo. / The brown spot is a major disease of wheat caused by the pathogen Bipolaris sorokiniana, responsible for large economic losses in wheat cultivation worldwide. This fungus has a wide morphological, physiological and genetic diversity. The main objective of this work was to characterize monosporic and polisporic B. sorokiniana isolates of wheat seeds from Brazil and other countries. Pathogenicity tests were conducted to evaluate the feasibility of virulence genes as well as different molecular methodologies were tested as: URP-PCR, PCR-RFLP, REP-PCR, BOX-PCR, ERIC-PCR and isoenzyme patterns of the isolates. The pathogenicity assay reveals that the polysporic isolates caused a more severe disease to seeds than to aerial parts of the plants when compared to single spore isolates. Isoenzyme and molecular characterization through the URP-PCR, PCR-RFLP, REP-PCR, BOX-PCR, ERIC-PCR techniques showed a large intra-population diversity among the isolates. REP and ERIC-PCR revealed greater diversity among the isolates with a similarity below 70%. However, the amplification results using with BOX- PCR showed a highest similarity. The PCR-RFLP using HaeIII, HinfI , HhaI , EcoRI and HindIII restriction enzymes showed a profile variation between all isolates in relation to the number and molecular weight of the fragments. However the results obtained with BOX- PCR amplifications a higher similarity was obtained. With this result a primer was designed, based on a fragment common to all isolates, and the amplifications using these primers produced a unique fragment with the Bipolaris genus among others isolates tested. More phytopatogeneic isolates must be tested in order to confirme the specificity for Bipolaris sp. With the PCR-RFLP assay, using the enzymes HaeIII, HinfI, HhaI, EcoRI e HindIII, variability was observed among the restriction patterns realated to the number of fragments and molecular weight. One possible explanation for the observed variability in all techniques used may be attributed to the condition of multinucleated cells of B. sorokiniana and the heterokaryosis which can lead to mitotic recombination and polymorphis.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9374_1.pdf: 2655923 bytes, checksum: 4a8cd8dfda72129aa8308dbf088c4d10 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae var. anisopliae e Metarhizium flavoviride var. flavoviride são fungos entomopatogênicos com ação comprovada contra várias espécies, embora não tenham sido testados em Chrysomya albiceps, um díptero de importância na saúde pública. Assim, objetivou-se avaliar a ação de B. bassiana, M. anisopliae var. anisopliae e M. flavoviride var. flavoviride em ovos, larvas e adultos de C. albiceps, utilizando as concentrações 104, 105, 106, 107, 108 conídios.mL-1, considerando o percentual de eclosão de larvas, período de pré-pupa, pupa, percentual de emergência de adultos, ritmo de emergência, morte acumulativa, longevidade, período de postura e percentual de eclosão a partir de fêmeas infectadas. O comportamento dos fungos reisolados também foi avaliado através dos parâmetros biológicos: percentual de germinação, número de conídios, número e diâmetro de colônias, bem como a citologia no que se refere à descrição das estruturas vegetativas e reprodutivas. De acordo com a metodologia empregada, verificou-se que os três fungos apresentaram ação contra ovos, larvas e adultos de C. albiceps. Já em relação ao comportamento, foi observado que os fungos reisolados de larva apresentaram o melhor desempenho em relação ao controle e os aspectos citológicos não diferiram quando comparados ao controle. Esses resultados sugerem a possibilidade do emprego desses fungos no controle de C. albiceps.

Orientador: Hélio José Montassier / Banca: Antônio Carlos Paulillo / Banca: Ricardo Luís Moro de Sousa / Resumo: Nesse estudo, um isolado de campo do vírus da bronquite infecciosa (VBI) no Brasil (IBVPR-12), previamente classificado como um genótipo variante, foi caracterizado de forma comparativa com a estirpe M41 do VBI, sendo levantadas as características de patogenicidade em diferentes órgãos como a traqueia, o pulmão, os rins, as gônadas e as tonsilas cecais (patotipo) e a imunidade cruzada com relação à estirpe vacinal H120 do VBI (protectotipo), incluindo as respostas imunes humorais sistêmicas e locais induzidas. Para tanto, foram utilizados grupos experimentais de galinhas "specific pathogen free" (SPF) previamente vacinadas ou não com a estirpe H120 do VBI e depois desafiados com essa variante viral, ou com a estirpe M41. Para essas duas estirpes virais foram avaliadas a capacidade de replicação e as lesões produzidas em diferentes órgãos, a atividade inibidora do movimento ciliar no epitélio traqueal e as respostas imunes humorais desenvolvidas no soro sanguíneo e na secreção lacrimal dessas aves. Foram observadas diferenças marcantes na patogenicidade e no tropismo tecidual desses vírus, sendo que a estirpe M41 apresentou replicação mais intensa e lesões mais pronunciadas no trato respiratório, especialmente na traqueia, enquanto que a estirpe variante foi encontrada de forma mais distribuída em vários dos órgãos analisados, tendo-se replicado e provocado menos lesões na traqueia, mas alcançando maior replicação e tendo causado lesões mais severas nos rins e nos testículos. Nas regiões teciduais mais afetadas por lesões, a presença do VBI foi detectada por marcação específica com anticorpos policlonais contra a nucleoproteína do VBI pela técnica de imuno-histoquímica. As aves vacinadas com a estirpe H120 do VBI, revelaram proteção parcial contra a estirpe variante em órgãos como traqueia e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this study a Brazilian field isolate of infectious bronchitis virus (IBV), previously classified as variant genotype, was characterized comparatively with the M41 strain of IBV, by evaluating the pathogenicity in different organs (trachea, lung, kidney, gonads and caecal tonsil) and the cross-immunity with H120 vaccine strain, including the systemic and local humoral immune responses. Experimental groups of specific pathogen free (SPF) chickens were vaccinated or not with H120 strain of IBV and challenged with this variant isolate. The viral replication and histopathology in different tissues and organs, the ability to inhibit ciliar movement of tracheal epithelial cells, and local and systemic humoral immune responses were evaluated in these chickens. The pathogenicity and tissue tropism of these IBV strains showed marked differences, and while the M41 strain damaged more the respiratory tract, specially the trachea, the variant isolated has a wide tissue distribution, showing less replication and lesions in the trachea, but affecting more severely the kidney and the testicles. In the most affected tissue regions, the presence of IBV was detected by immunohistochemistry technique, using an anti-nucleoprotein polyclonal antibodies. The H120 vaccine induced against this variant isolate a partial protection with regard to the infection of trachea and kidney and no cross-protection to the infection of testicles. In conclusion, a new pathotype and a new protectotype of a variant genotype of a Brazilian IBV isolate were characterized in this study with regard to Massachusetts genotype and serotype strains of IBV, indicating the importance for... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-25Bitstream added on 2014-06-13T19:06:00Z : No. of bitstreams: 1 gassen_mh_dr_botfca.pdf: 1151986 bytes, checksum: d10ca5877ac7bff31ebce19ef7356faf (MD5) / A cana-de-açúcar colhida sem queima é uma realidade em todo o Estado de São Paulo e os ataques da cigarrinha-da-raiz da cana estão cada vez mais freqüentes e intensos. O controle biológico desta praga com o fungo Metarhizium anisopliae também vem se desenvolvendo e adquirindo relevada importância. Com isso, este trabalho foi conduzido com os seguintes objetivos: avaliar a produção de conídios de diferentes isolados para o controle da cigarrinha-das-raízes, a partir de dois tipos de arroz; avaliar a eficiência dos isolados selecionados como mais produtivos em populações naturais de Mahanarva fimbriolata, na cultura da cana-de-açúcar colhida mecanicamente e; verificar o manejo da população de M. fimbriolata em áreas de cana-de-açúcar colhidas sem queima da palha, observando a influência da umidade sobre sua ocorrência. Foram avaliados 14 isolados, os quais foram produzidos em arroz tipo 1 e arroz parboilizado, em sacos de polipropileno, incubados em sala climatizada para desenvolvimento do fungo. Avaliou-se a concentração e viabilidade de cada isolado para os dois tipos de arroz. Os isolados que apresentaram maior produtividade foram aplicados em campo para avaliar a patogenicidade dos mesmos à cigarrinha-das-raízes, sendo eles: ESALQ 1037, IBCB 425, IBCB 353, IBCB 410, F 99 e IBCB 333. Foram pulverizados 2 kg/ha de arroz+fungo, contendo 1,0 x 1012 conídios/ha, além do tratamento com o inseticida tiametoxam 250 WG e a testemunha, sem aplicação. As avaliações foram realizadas aos 15, 30, 60, 90 e 120 dias após a aplicação (DAA), observando-se o número de ninfas e adultos de M. fimbriolata vivos, mortos, parasitados ou não, em cada parcela. A partir dos resultados, foi possível observar que os isolados IBCB 410 e F 99 causaram, respectivamente, mortalidades de 66,67 e 33,33% para ninfas, aos 15 DAA. Após 30 DAA, os isolados IBCB 425, IBCB 353 e IBCB 333... / The sugar cane is harvested without burning a reality throughout the state of Sao Paulo and the attacks of the leafhopper-root cane are increasingly frequent and intense. Biological control this pest with the Metarhizium anisopliae also has been developing and acquiring increasing importance. Therefore, this work was conducted to evaluate the production of conidial selected for the control of root speatlebug in two types of rice, evaluate the efficiency of the isolates selected as the most productive in natural populations of M. fimbriolata, the culture of cane sugar harvested mechanically, monitor the population of M. fimbriolata in areas of sugarcane harvested without burning the straw, and the influence of temperature and humidity on its occurrence. We evaluated 14 isolates, which were produced in rice type 1 and parboiled rice in polypropylene bags, incubated in a room for fungal growth and were evaluated the concentration and viability of each isolate for both types of rice. The isolates that had higher yields were applied in the field to assess the pathogenicity of the same root speatlebug, namely: ESALQ 1037, IBCB 425, IBCB 353, IBCB 410, F 99 and IBCB 333. Were sprayed 2 kg / ha of rice + fungus, containing 1,0 x 1012 conidia / ha, in addition to treatment with the insecticide tiametoxam 250 WG and the control. Evaluations were performed at 15, 30, 60, 90 and 120 days after the application, noting the number of nymphs and adults of M. fimbriolata alive in each plot, and the number of nymphs and adults dead, infected and non-parasitized. From the results, it was observed that isolates IBCB 410 and F 99 caused mortality to nymphs of 66.67 and 33.33%, respectively, at 15 days after application. After 30 days of spraying, the isolates IBCB 425, IBCB 353 and IBCB 333 had efficiencies... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Com o objetivo de avaliar e comparar a eficiência dos fungos S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana e Paecilomyces spp. no controle de Leptopharsa heveae em diferentes concentrações de aplicação e condições climáticas, este trabalho foi constituído de seleção de isolados em laboratório, testes de produção e viabilidade de conídios em laboratório e análises de eficiência em condições de campo. Foram analisados vinte e sete isolados procedentes de diversos hospedeiros e regiões. A produção de conídios dos patógenos foi efetuada em placas de Petri contendo meio de cultura BDA. Insetos de terceiro instar da praga foram então inoculados através de pulverizações com suspensão de conídios na concentração de 1 x 109 conídios/mL. Avaliações de mortalidade foram efetuadas a cada dois dias e os valores de mortalidade confirmada contabilizados. Neste experimento ocorreu grande variação na patogenicidade entre os isolados testados, sendo que os mais patogênicos foram: 1189, E9, PL63, IBCB87 e 1225. Os dois isolados padrão, SJRC e 1200 não atingiram resultados satisfatórios neste experimento. Os cinco isolados mais patogênicos resultantes da seleção de isolados, mais os dois tidos como padrão, foram então submetidos aos testes de produção, onde foram avaliados quanto ao número de conídios viáveis produzidos. Para tanto, pré-matrizes em placas de Petri, contendo meio de cultura BDA, foram preparadas. A partir destas placas, matrizes contendo arroz como meio de cultura foram inoculadas com suspensão de conídios originária das pré-matrizes na concentração de 5 x 107 conídios/mL. Concluído o desenvolvimento dos patógenos nas matrizes, sacos de polipropileno contendo canjica de milho como meio de cultura foram inoculados com 40mL da suspensão obtida a partir as matrizes. Após um período de incubação de quinze dias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: With the objective to evaluate and compare the efficiency of the fungi S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana and Paecilomyces spp. in the biological control of Leptopharsa heveae, in different concentrations of application and climatic conditions, this research was consisted by an election of isolates in laboratory, tests of production and viability of conidia in laboratory, and analyses of efficiency in field conditions. Twenty-seven isolates from different hosts and regions had been evaluated and seven of them were elected. The pathogens production of conidia was made in Petri dishes with BDA as the culture media. Nymphs from the third instar of the pest were then inoculated through sprayings of the conidia suspension in the concentration of 1 x 109 conidia/mL. Evaluations of mortality had been done each two days and the values of confirmed mortality registered. In this experiment, a great variation of pathogenicity among the isolates was observed, but the most pathogenic were: 1189, E9, PL63, IBCB87 and 1225. The two standard isolates, SJRC and 1200 had not reached satisfactory results in this experiment. The five more pathogenic isolates resultants from the election, plus the two standards, had been submitted to production tests, where they were evaluated about the number of viable conidia produced. With this objective, pre-matrices in Petri dishes with BDA as culture media were prepared. From these cultures, matrices with rice as culture media were inoculated with the original suspension of conidia obtained from the pre-matrices in the concentration of 5 x 107 conidia/mL. After the development of the pathogens in the matrices, polypropylene bags with maize as culture media were inoculated with 40mL from the gotten suspension in the matrices. After an incubation period of fifteen days, the content of the bags was evaluated about the production of conidia and their viability... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Antonio Batista Filho / Coorientador: Edson Luis Furtado / Banca: Wilson Badiali Crocomo / Banca: Luis Garrigós Leite / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fusarium spp. is the causal agent of root rot in several crops. In no tillage system, compacted areas favor the incidence of these diseases. These fungi can also infect the grains and produce mycotoxins. Trichoderma spp. has shown promising results and can be used in the integrated management of diseases caused by soilborne pathogens. The aims of this study was to quantify and correlate populations of Fusarium spp., Trichoderma spp. and others (fungi and bacteria) with physical characteristics indicative of soil compaction in the crops of oat and soybean; identify morphological and molecularly isolates of Fusarium spp.; genetically characterize isolates of Trichoderma spp.; assess the efficiency of in vitro and in vivo control of Trichoderma spp. versus Fusarium spp. ; and quantify the production of deoxynivalenol (DON) and zearalenone (ZEA) by Fusarium spp. Soil samples were collected at Victor Graeff (RS) in an area previously mapped regarding to soil compaction. The samples were taken at three depths (0-5, 5-10, and 10-15 cm) and in six compaction levels established by the measures of resistance to penetration (Rp) (points with higher Rp: 3.4, 4.6, and 5.0 MPa, and lower Rp: 0.3, 1.3, and 2.2 MPa). The samples were evaluated for fungal and microbial population (serial dilutions) and soil physical characteristics. Fungi of the genus Fusarium and Trichoderma, when present in serial dilutions, were isolated for further molecular and morphological identification (based on TEF-1α and ITS regions, respectively). Tests were performed in vitro (direct confrontation) and in vivo (in oat and soybean) to evaluate the control efficiency of Trichoderma spp. versus Fusarium spp. The production of DON and ZEA was measured by Elisa and immunoaffinity columns, respectively. In oat grown after soybean the population and physical characteristics of the soil were showed higher correlation, with the largest populations of Fusarium spp. and Trichoderma spp. found in depths of 5-10 and 10-15 cm, respectively. 13 species of Fusarium were identified and the TEF-1α region was efficient for the distinction among them. T. koningiopsis, T. tomentosum and T. asperellum were identified, totaling five isolates and all of them showed good potential for controlling Fusarium spp. in soybean. In oat, stood out as root growth promoters, increasing the fresh weight of seedlings. In soybean isolates of F. oxysporum and F. proliferatum were pathogenic and caused damping off of seedlings. For oat, the isolates of F. graminearum did not provide the observation of such symptoms. F. graminearum and F. solani produced both DON and ZEA, while F. proliferatum and F. oxysporum produced ZEA. / Fusarium spp. é o agente causal de podridões radiculares em diversas culturas. No sistema plantio direto, áreas compactadas favorecem a incidência dessas doenças. Esses fungos podem também infectar os grãos e produzir micotoxinas. Trichoderma spp. vem apresentando resultados promissores e pode ser utilizado no manejo integrado de doenças provocadas por patógenos de solo. Os objetivos deste trabalho foram: quantificar e correlacionar populações de Fusarium spp., Trichoderma spp. e outros (fungos e bactérias) em um solo com características físicas indicativas de compactação, nos cultivos de aveia preta e soja; identificar morfológica e molecularmente os isolados de Fusarium spp.; caracterizar geneticamente isolados de Trichoderma spp.; testar a eficiência de controle in vitro e in vivo de Trichoderma spp. versus Fusarium spp.; e quantificar a produção de deoxinivalenol (DON) e zearalenona (ZEA) pelos isolados de Fusarium spp. Amostras de solo foram coletadas no município de Victor Graeff (RS) em uma área previamente mapeada quanto à compactação do solo. As coletas foram feitas em três profundidades (0-5; 5-10 e 10-15 cm) e em seis níveis de compactação estabelecidos pelas medidas de resistência à penetração (Rp) (pontos com maior Rp: 3,4; 4,6 e 5,0 MPa; e menor Rp: 0,3; 1,3 e 2,2 MPa). Nas amostras coletadas foram realizadas avaliações de população fúngica e microbiana (diluições seriais) e de características físicas do solo. Fungos dos gêneros Fusarium e Trichoderma, quando presentes nas diluições seriais, foram isolados para posterior identificação morfológica e molecular (baseada nas regiões TEF-1α e ITS, respectivamente). Foram realizados testes in vitro (confrontação direta) e in vivo (em aveia preta e soja) para avaliar a eficiência de controle de Trichoderma spp. versus Fusarium spp. A produção de DON e ZEA foi verificada pelo método Elisa e colunas de imunoafinidade, respectivamente. Em aveia preta cultivada após a soja, as características físicas e populacionais do solo se correlacionaram mais pronunciadamente, sendo que maiores populações de Fusarium spp. e Trichoderma spp. foram encontradas nas profundidades 5-10 e 10-15 cm, respectivamente. Identificaram-se 13 espécies de Fusarium e a região TEF-1α foi eficiente para sua distinção. T. koningiopsis, T. tomentosum e T. asperellum foram identificados, totalizando cinco isolados e todos eles apresentaram bom potencial de controle de Fusarium spp. em soja. Em aveia preta, destacaram-se como promotores de crescimento radicular, incrementando o peso fresco de plântulas. Em soja, isolados de F. oxysporum e F. proliferatum foram patogênicos e provocaram tombamento de plântulas. Para aveia, os isolados de F. graminearum não proporcionaram a observação desse sintoma. F. graminearum e F. solani produziram tanto DON quanto ZEA, enquanto que F. proliferatum e F. oxysporum produziram apenas ZEA.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-02Bitstream added on 2014-06-13T19:37:25Z : No. of bitstreams: 1 silva_ear_me_botfca.pdf: 272666 bytes, checksum: 6d16798c5b5ef0ec6a50253109a805bb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Com o objetivo de avaliar e comparar a eficiência dos fungos S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana e Paecilomyces spp. no controle de Leptopharsa heveae em diferentes concentrações de aplicação e condições climáticas, este trabalho foi constituído de seleção de isolados em laboratório, testes de produção e viabilidade de conídios em laboratório e análises de eficiência em condições de campo. Foram analisados vinte e sete isolados procedentes de diversos hospedeiros e regiões. A produção de conídios dos patógenos foi efetuada em placas de Petri contendo meio de cultura BDA. Insetos de terceiro instar da praga foram então inoculados através de pulverizações com suspensão de conídios na concentração de 1 x 109 conídios/mL. Avaliações de mortalidade foram efetuadas a cada dois dias e os valores de mortalidade confirmada contabilizados. Neste experimento ocorreu grande variação na patogenicidade entre os isolados testados, sendo que os mais patogênicos foram: 1189, E9, PL63, IBCB87 e 1225. Os dois isolados padrão, SJRC e 1200 não atingiram resultados satisfatórios neste experimento. Os cinco isolados mais patogênicos resultantes da seleção de isolados, mais os dois tidos como padrão, foram então submetidos aos testes de produção, onde foram avaliados quanto ao número de conídios viáveis produzidos. Para tanto, pré-matrizes em placas de Petri, contendo meio de cultura BDA, foram preparadas. A partir destas placas, matrizes contendo arroz como meio de cultura foram inoculadas com suspensão de conídios originária das pré-matrizes na concentração de 5 x 107 conídios/mL. Concluído o desenvolvimento dos patógenos nas matrizes, sacos de polipropileno contendo canjica de milho como meio de cultura foram inoculados com 40mL da suspensão obtida a partir as matrizes. Após um período de incubação de quinze dias... / With the objective to evaluate and compare the efficiency of the fungi S. insectorum, M. anisopliae, B. bassiana and Paecilomyces spp. in the biological control of Leptopharsa heveae, in different concentrations of application and climatic conditions, this research was consisted by an election of isolates in laboratory, tests of production and viability of conidia in laboratory, and analyses of efficiency in field conditions. Twenty-seven isolates from different hosts and regions had been evaluated and seven of them were elected. The pathogens production of conidia was made in Petri dishes with BDA as the culture media. Nymphs from the third instar of the pest were then inoculated through sprayings of the conidia suspension in the concentration of 1 x 109 conidia/mL. Evaluations of mortality had been done each two days and the values of confirmed mortality registered. In this experiment, a great variation of pathogenicity among the isolates was observed, but the most pathogenic were: 1189, E9, PL63, IBCB87 and 1225. The two standard isolates, SJRC and 1200 had not reached satisfactory results in this experiment. The five more pathogenic isolates resultants from the election, plus the two standards, had been submitted to production tests, where they were evaluated about the number of viable conidia produced. With this objective, pre-matrices in Petri dishes with BDA as culture media were prepared. From these cultures, matrices with rice as culture media were inoculated with the original suspension of conidia obtained from the pre-matrices in the concentration of 5 x 107 conidia/mL. After the development of the pathogens in the matrices, polypropylene bags with maize as culture media were inoculated with 40mL from the gotten suspension in the matrices. After an incubation period of fifteen days, the content of the bags was evaluated about the production of conidia and their viability... (Complete abstract click electronic access below)