Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bruno Jose Martini Santos1.pdf: 1883262 bytes, checksum: 395f219cf3935956cd50161c96cd1a19 (MD5) Previous issue date: 2010-02-10 / The administration of the aerial parts of Pteridium arachnoideum during 15 to 57 days in proportions that varied from 50 to 75% of the supplied grass (Pennicetum purpureum) mixed with hay of bracken fern, caused in 3 of the 4 experimental horses, a clinical and pathological picture that can be attributed to the thiaminases, one of the poisonous principles of the plant. The clinical picture consisted, in a progressive way, apathy, lethargy, sleepiness, hyporrexia with evolution to anorexia, reluctance in moving, increase of heart frequency, arrhythmia and sternal decubitus passing to lateral decubitus. The decubitus lasted at the most 48 hours. In this phase, the clinical signs previously observed got more intense; additionaly the animals refused water, made attempts of getting up without success, made intense intermittent peddling movements, followed by dyspnoea, had muscular tremors, tonic muscle spasms of limbs, opistotonus, intense sweating and finally death. The electrocardiographic analysis showed hydropericardium and myocardial failure in the last 48 hours before death. Post-mortem and histopathological examinations did not show significant lesions, unless congestion in various organs, indicating congestive heart failure. Clinical pathology revealed, in relation to the blood count, in one of the three horses, anemia in the final part of the experiment, and trombocitopenia in only two. No changes were seen in the leucograma. Parallel to a fall of serous thiamine, an increase the pyruvic acid was seen in the three animals. One of the experimental horses developed a taste for the fern, and the other two only consumed the P. arachnoideum-grass mixture with addition of sugar. / A administra??o das partes a?reas de Pteridium arachnoideum durante per?odos de 15 a 57 dias na propor??o que variou de 50 a 75% da mistura com capim (Pennicetum purpureum) fornecida, causou em 3 dos 4 equinos do experimento um quadro cl?nico-patol?gico que pode ser atribu?do a tiaminase, um dos princ?pios t?xicos da planta. No quadro cl?nico foram verificados de forma progressiva apatia, letargia, sonol?ncia, hiporrexia com evolu??o para anorexia, relut?ncia em se movimentar, aumento da frequ?ncia card?aca, arritmia e finalmente dec?bito esternal passando para o lateral. O dec?bito era de no m?ximo 48 horas. Nesta fase os sinais cl?nicos anteriormente observados se intensificaram, os animais, recusavam ?gua, faziam tentativas de se levantar sem sucesso, movimentos de pedalagem intensos intermitentes, seguidos de dispn?ia, tremores musculares, espasmos musculares t?nicos dos membros, opist?tono, sudorese intensa e finalmente morte. As an?lises eletrocardiogr?ficas indicaram hidroperic?rdio e insufici?ncia mioc?rdica nas ultimas 48 horas antes da morte. Os achados de necropsia e os exames histopatol?gicos n?o revelaram altera??es significativas, a n?o ser congest?o em diversos ?rg?os e efus?es cavit?rias de colora??o amarelo ocre, o que est? relacionado com insufici?ncia card?aca congestiva. A patologia cl?nica revelou, em rela??o ao hemograma, em um dos tr?s animais, anemia na parte final do experimento, e em dois equinos trombocitopenia. O leucograma n?o apresentou altera??es. Paralelamente a queda da tiamina s?rica, foi verificado um aumento do ?cido pir?vico nos tr?s animais. Um dos animais experimentais desenvolveu um gosto pela samambaia, os outros dois consumiram a mistura de capim com feno de samambaia mediante o acr?scimo de a??car.

Atualmente, o Brasil é o segundo maior exportador de carne bovina e o sexto exportador de leite no mundo. Visando melhorar a produtividade da bovinocultura, torna-se importante a aplicação de programas sanitários adequados e eficientes. As doenças virais são preocupações constantes em qualquer programa de sanidade, devido aos grandes prejuízos econômicos que causam e o seu diagnóstico correto depende de técnicas laboratoriais eficientes. O gênero Pestivirus, da família Flaviviridae, possui três espécies reconhecidas que podem infectar bovinos: o vírus da diarreia viral bovina tipo 1 (BVDV-1), o BVDV-2 e o vírus da doença da fronteira (BDV), além de uma espécie atípica proposta como BVDV-3. Causam principalmente distúrbios respiratórios, reprodutivos e digestivos em bovinos, levando a queda de índices de produção. Os objetivos do presente trabalho foram: descrever o uso de uma técnica modificada de detecção de agentes virais que possam estar presentes em insumos utilizados na reprodução assistida e descrever a caracterização patológica e análise filogenética de pestivírus detectados em um surto da doença, sendo os dados apresentados sob a forma de dois artigos. No primeiro, pools de líquidos foliculares colhidos durante a punção ovariana de vacas para coleta de oócitos para produção in vitro de embriões foram selecionados. As amostras foram analisadas para a detecção de BVDV, herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) por isolamento viral, RT-PCR e nested PCR, sendo utilizados dois protocolos de extração de DNA e RNA: um convencional e o outro com adição de etapas pré-extração de ácido nucleico, no intuito de reduzir possíveis inibidores de RT-PCR e PCR presentes nas amostras. A utilização da técnica de pré-extração permitiu detectar um maior número de amostras positivas. No segundo trabalho, foi descrito um surto de diarreia viral bovina em um rebanho que foi testado por imunohistoquímica, ELISA, isolamento viral, RT-PCR e sequenciamento de três regiões do genoma. Foram obtidas quatro amostras distintas de BVDV-3 e as principais alterações clinicas foram encontradas nos sistemas digestivo e respiratório, mas lesões de pele e opacidade de córnea também foram observadas. Os resultados encontrados nos trabalhos realizados reforçam a necessidade da verificação quanto à presença de patógenos em materiais biológicos utilizados na reprodução assistida utilizando técnicas sensíveis e que a doença causada por BVDV-3 em bovinos é indistinguível clinicamente das causadas por outros pestivírus, sugerindo que pestivírus atípicos podem estar subdiagnosticados nos rebanhos brasileiros. / Currently, Brazil is the second largest beef and the sixth milk exporter worldwide. To improve the livestock productivity, it becomes important the applying of appropriate and efficient health programs. Viral diseases are constant concerns on any health program due to major economic losses they cause and their correct diagnosis depends of the development of efficient diagnostic techniques. The genus Pestivirus of the family Flaviviridae, has three recognized species which can infect cattle: the bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1), BVDV-2 and border disease virus (BDV), and one atypical species putatively named as BVDV-3. These viruses mainly cause respiratory, digestive and reproductive disturbances in cattle, resulting in decrease of production rates. The goals of the present work were: describe the use of a modified procedure in detecting viral agents that may be present on byproducts utilized in assisted reproduction and describe the pathological and phylogenetic frame of pestivirus detected in an outbreak of disease. The data was presented in two papers. In the first study, pooled follicular fluid collected during oocyte retrieval for in vitro embryo production were selected. The samples were analyzed for BVDV, bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) by virus isolation, RT-PCR and nested PCR, using two extraction protocols for DNA and RNA: a conventional and the other with addition of pre-extraction of nucleic acid step, in order to reduce potential inhibitors of PCR and RT-PCR present in the samples. The use of the prenucleic acid procedure allowed detecting a greater number of positive samples. In the second paper, an outbreak of bovine viral diarrhea virus was described and has been tested by immunohistochemistry, ELISA, virus isolation, RT-PCR and sequencing of three regions of the genome. Four different BVDV-3 samples were obtained and major clinical disturbances were found in the digestive and respiratory systems, but skin lesions and corneal opacity were also observed. The results obtained in the works underscore the need in checking for pathogens in biologicals used in assisted reproduction utilizing sensitive techniques and shows that the disease caused by BVDV-3 in cattle is clinically undistinguishable from those caused by other pestiviruses, suggesting that atypical pestivirus may be underdiagnosed in the Brazilian herds.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4898999 bytes, checksum: a1929863574a39c391ec971fb2ed4731 (MD5) Previous issue date: 2007-03-20 / The expression of HSP70 and HSP90 was evaluated through immunoistochemistry studies in bovine inoculated with synthetic peptides SBbo23290 and SBm7462 applied simultaneously, in association or in individual presentation. The animals received three applications with 30 days of interval among them and after challenged with the Babesia bovis strain UFV1 - 9th passage. The histopathological studies showed reactivity of the lymphoid organ seven days after the first immunization with germinative centers increased. After the second immunization, it was evident the hyperplasia of the paracortical and medular areas, with subsequent decrease of the reactivity of the germinative centers after this period, suggesting formation of a memory response to the immunogens. The heat shock proteins presented basal expression. HSP70 expressed preferentially in the paracortical area, while HSP90 showed more visible immunomarker in the paracortical and medular areas. Immunoistochemical studies showed a coincidence in the expression of HSP90 and of the peptides SBbo23290 and SBm7462, when were considered the same periods of immunization, suggesting the formation of a complex HSP- peptide. The glucose, lactate, haptoglobin and C-reactive protein levels stayed inside of the values considered physiologic for the bovine species. The basal cellular immunoreaction of HSP70 and HSP90, as well as the maintenance of the normal levels of the biochemical parameters during the whole period of the experiment, suggest that the stress provoked by the synthetic peptides was insufficient to cause damage to the organism. In other hand, the maintainance of the health condition of the animals influenced the immunological response, and the basal levels of the heat shock proteins might have been enough to promote cytoprotection after the challenge. / A expressão de HSP70 e HSP90 foi avaliada por meio de estudos imunoistoquímicos, em bovinos inoculados com peptídeos sintéticos SBbo23290 e SBm7462, aplicados simultaneamente, em associação ou em apresentação individual. Os animais receberam 3 aplicações em intervalos de 30 dias entre si e posteriormente desafiados com cepa de Babesia bovis (UFV1- 9ª passagem). Os estudos histopatológicos mostraram reatividade do órgão linfóide sete dias após a primeira imunização, com centros germinativos aumentados. Após a segunda imunização, ficou evidente a hiperplasia da região paracortical e medular, com subseqüente diminuição da reatividade dos centros germinativos após este período, sugerindo formação de uma resposta de memória aos imunógenos. As proteínas de choque térmico apresentaram expressão basal. A HSP70 expressou, preferencialmente, na região paracortical, enquanto que a HSP90 mostrou imunomarcação mais visível nas regiões paracortical e medular. Estudos imunoistoquímicos mostraram uma coincidência na expressão de HSP90 com os peptídeos SBbo23290 e SBm7462, quando se consideraram os mesmos períodos de imunização, sugerindo a formação de um complexo HSP-peptídeo. Os níveis de glicose, lactato, haptoglobina e proteína C-reativa mantiveram-se dentro dos valores considerados fisiológicos para a espécie bovina. A imunomarcação celular basal de HSP70 e HSP90, bem como a manutenção dos níveis normais das variáveis bioquímicas durante todo o período do experimento, sugerem que o estresse provocado pelos peptídeos sintéticos foi insuficiente para causar dano ao organismo. Em contrapartida, a manutenção do estado de saúde dos animais influenciou a reposta imunológica, e os níveis basais das proteínas de choque térmico podem ter sido suficientes para promover citoproteção após o desafio.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 854857 bytes, checksum: 0da19cfc06d4ca09fceb926374e1228d (MD5) Previous issue date: 2004-01-30 / The discovery of Helicobacter pylori in human beings and its relation with gastritis, peptic ulcer and gastric neoplasia, has renewed the interest on the establishment of the incidence and on the clinical meaning of this bacteria in pets, specifically in dogs. There are several researches that indicate the presence of Helicobacter ssp in dogs, even though the relation of these bacteria with gastric alterations in dogs has not been clarified yet. The aim of this dissertation was to evaluate the presence of Helicobacter ssp in dogs, to analyse the macro and microscopic findings, determine the correlation between the presence of the bacteria with alterations in the gastric mucosa, and of these with the dogs age, and additionally to investigate the correlation of the positiveness of the urease test with the presence of the bacteria. During the necropsy of 60 dogs, samples from cardia, fundus, body, and pylorus regions were collected from the dogs stomach for conducting the urease test and histopathologic examination. The urease test was positive in 95,12% of the animals. The histopathologic examination using Carbol-Fucsina coloration revealed Helicobacter ssp in 96,66% of the animals. The most frequent observed alteration in preparations colored by HE were infiltrated with inflammatory cells, predominantly mononuclear, lymphoid nodules hyperplasia and hiperemy. Correlation between the urease test and the histopathology for the diagnostic of Helicobacter ssp in dogs was found. Age was not found correlated with infection by Helicobacter ssp. It was not found any correlation between inflamatory alterations, in the presence of the bacteria, with the age of the animals. The fundus and body stomach regions presented more positive results in the urease test and the body and pylorus regions presented more positive results in the histopathologic examination. There was correlation between the number of Helicobacter ssp, the number of inflamatory cells and lymphoid nodules in those regions. The high percentage of dogs infected by Helicobacter ssp and the variation in the patogenicity among the species indicate the necessity of further investigation for the identification of species more pathogenic and mechanisms of patogenicity in dogs. Besides, due to the zoonotic potential, further research should be done on the helicobacterias. / A descoberta do Helicobacter pylori em seres humanos e a sua relação com gastrite, úlcera péptica e neoplasia gástrica, tem levado à renovação do interesse no estabelecimento da incidência e do significado clínico da bactéria em animais domésticos, especificamente cães. Existem vários relatos da presença de Helicobacter ssp em cães, mas a relação dessas bactérias com as alterações gástricas em cães ainda não está esclarecida. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a presença de Helicobacter ssp em cães, analisar os achados macro e microscópicos, determinar a correlação entre a presença da bactéria e as alterações da mucosa gástrica, e destas com a idade, além de correlacionar a positividade do teste da urease à presença da bactéria. Durante as necropsias de 60 cães, foram coletadas amostras das regiões cárdica, fúndica, do corpo e pilórica dos estômagos para a realização do teste da urease e exame histopatológico. O teste da urease foi positivo em 95,12% dos animais. O exame histopatológico usando a coloração de Carbol- Fucsina revelou Helicobacter ssp em 96,66% dos animais. As alterações mais freqüentemente observadas em preparações coradas por HE foram infiltrados de células inflamatórias, predominantemente mononucleares, hiperplasia de nódulos linfóides e hiperemia. Houve correlação entre o teste da urease e a histopatologia para o diagnóstico de Helicobacter ssp em cães. Não houve correlação da infecção por Helicobacter ssp com a idade. Também não foi demonstrada correlação entre alterações inflamatórias, na presença da bactéria, com a idade dos animais. As regiões fúndica e do corpo do estômago apresentaram maior número de resultados positivos no teste da urease e as regiões do corpo e pilórica apresentaram maior número de resultados positivos à histopatologia. Houve correlação entre o número de Helicobacter ssp, o número de células inflamatórias e nódulos linfóides nestas regiões. O alto percentual de cães infectados por Helicobacter ssp e a variação na patogenicidade entre as espécies indicam a necessidade de estudos mais profundados para identificação de espécies mais patogênicas e de mecanismos de patogenicidade em cães. Além disto, devido ao potencial zoonótico, grande atenção deve ser dada às helicobactérias.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1379407 bytes, checksum: d5005cc4450b0eb6d68a115e4f3fa732 (MD5) Previous issue date: 2005-02-03 / The objective of this study was to investigate the extracelular matrix changes in skin of dogs naturally infected by Leishmania chagasi. Fourty dogs were selected naturally infected with L. chagasi come from São Luis-MA, contained in agreement with the clinical symptoms, 20 symptomatic dogs with cutaneous lesions (group I), 20 oligosymptomatic with cutaneous lesions (group II) with positive serologically for Leishmania by Indirect Immunofluorescence Assay (IFAT) and by enzyme-linked immunosorbence assay (ELISA), and 20 dogs negative for leishmaniasis (group III), dogs not infected. Skin biopsies were accomplished for analyses of the histological alterations by technique of Hematoxylin and Eosin (HE), analyses of the collagen system for technical Picrus Sirius Red and Reticulin of Gordon & Sweets. The elastic system was evaluated by the technique of Verhoeff. Indirect Immunoperoxidase for detection of Leishmania in the cutaneous tissue. The fibers adhesive fibronectin (FN) and laminin (LN) they were detected by immunohistochemical technique with the use of the monoclonal antibodies anti-fibronectin and anti-laminin, respectively. The averages of the reactivity serologycal of the animals measure for ELISA were: 0,44 ± 0,21, for the group I; 0,23 ± 0,08 for the group II and 0,037 ± 0,007, group III, with cutoff=0,09, results were significant statistically. The largest frequencies of clinical signs presented by the dogs of the group I and II were: weight loss, generalized alopecia, dermatitis, located and widespread ulcers, opaque coat and onychogryphosis, clinical signs have been objectives of great discussions in the literature, observed so much in natural infections as in experimental. The histological alterations observed in the skin of the dogs of the groups I and II were hiperqueratose that varied of accentuated at discreet, acantosys generally accentuated, vacuolization of the basal membrane. In the derme it was observed an infiltrated inflammatory diffuse constituted mainly by neutrophils, lynphocytes, macrophages and in some cases, mast cell associated to the presence of the parasite. It was proven the prevalence of the collagen of the type III in the skin of the dogs of the group I (79,5 ± 10,0), while in the animals of the group II the collagens of the type I and of the type III was observed in variable proportions, results considered statistically significant. The presence of the collagen of the type III was confirmed by the technique of Reticulin of Gordon & Sweets. The elastic fibers of the groups I and II seemed more disforms and thicken when compared the one of the group III. The expression of the fibronectin and of the laminin it was reduced in the skin of the infected animals, being associated to the presence of parasites. These results demonstrate the intense degradation of the extracelular matrix in the skin caused by Leishmania. / O objetivo deste estudo foi investigar as alterações da matriz extracelular em pele de cães naturalmente infectados por Leishmania chagasi. Foram selecionados 40 cães naturalmente infectados com L. chagasi provenientes de São Luís-MA, agrupados de acordo com a sintomatologia clínica: 20 cães sintomáticos com lesões cutâneas (Grupo I), 20 oligossintomáticos com lesões cutâneas (grupo II) com sorologia positiva para Leishmania pela RIFI e por ELISA e 20 cães sorologicamente negativos para leishmaniose (grupo III), não infectados. Foram realizadas biopsias de pele para análises das alterações histológicas através da técnica de Hematoxilina e Eosina (HE), análises do sistema colágeno pela técnica Picrus Sirius Red e Reticulina de Gordon & Sweets. O sistema elástico foi avaliado pela técnica de Verhoeff. Utililizou-se a Imunoperoxidase Indireta para detecção de Leishmania no tecido cutâneo. As fibras adesivas fibronectina (FN) e laminina (LN) foram detectadas através da técnica de imunohistoquímica com o uso dos anticorpos monoclonais anti-fibronectina e antilaminina, respectivamente. As médias da reatividade sorológica dos animais medida pelo ELISA foram: 0,44 ± 0,21, para o grupo I; 0,23 ± 0,08 para o grupo II e 0,037 ± 0,007, grupo III, com cut-off=0,09, resultados estatisticamente significativos. As maiores freqüências de sinais clínicos apresentados pelos cães do grupo I e II foram: emagrecimento, alopecia generalizada, dermatite furfurácea, úlceras localizadas e generalizadas, pelagem opaca e onicogrifose, sendo que estes sinais clínicos têm sido alvos de grandes discussões na literatura, observados tanto em infecções naturais como em experimentais. As alterações histológicas observadas na pele dos cães dos grupos I e II foram hiperqueratose que variava de acentuada a discreta, acantose geralmente acentuada, vacuolização da camada basal. Na derme observou-se um infiltrado inflamatório difuso constituído principalmente por neutrófilos, linfócitos, macrófagos e em alguns casos, mastócitos associados à presença do parasita. Comprovou-se a predominância do colágeno do tipo III na pele dos cães do grupo I (79,5 ± 10,0), enquanto nos animais do grupo II os colágenos do tipo I e do tipo III foram observados em proporções variáveis, resultados considerados estatisticamente significativos. A presença do colágeno do tipo III foi confirmada pela técnica da Reticulina de Gordon & Sweets. As fibras elásticas dos grupos I e II apresentavam-se mais desuniformes e espessas quando comparadas as do grupo III. A expressão da fibronectina e da laminina foi reduzida na pele dos animais infectados, estando associada à presença de parasitas. Estes resultados demonstram a intensa degradação dos constituintes da MEC da pele causadas por Leishmania.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1180251 bytes, checksum: 6eb16a18647a19106bcc790bb84199b6 (MD5) Previous issue date: 2006-07-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study had as objective to verify the sensitivity of the transabdominal ultrasonography to estimate the prostate dimensions in dogs comparing the results gotten with the biometry of the gland with the dimensions at the postmorten study. It was also intended to verify the eventual influence of the age and the corporal weight on the prostate measures and to establish the frequency of the main prostate pathologies for the anatomopathologic study. Thirty five dogs had been randomly selected and they had been submitted to the transabdominal ultrasonography, using a linear transducer 7,5 MHz, occasion where they had gotten the measures length (C), depth (P) and width (L) in the plans longitudinal and transversal. After accomplishment of the postmorten study, these same prostate measures had been gotten allowing the comparison between them. All the animals were intact male dogs, with age varying between one and 16 years, with average of 7,1 ± 4,7 years. This study demonstrated that the transabdominal ultrasonography method was efficient to estimate the prostate size. The statistical analyses had demonstrated positive correlation between the prostate dimensions and the age of the animal, however this relation was not demonstrated with the corporal weight (p≤0,05). The more frequent prostate illness had been the benign prostate hyperplasia (43,75%) and prostatitis (31,25%). / Este estudo teve como objetivos verificar a sensibilidade do exame ultra-sonográfico, para estimar as dimensões prostáticas em cães comparando os resultados obtidos com a biometria da glândula ao exame post-morten. Pretendeu-se também verificar a eventual influência da idade e do peso corporal sobre as medidas prostáticas e estabelecer a freqüência das principais patologias prostáticas pelo exame anátomo-histopatológico. Trinta e cinco cães selecionados aleatoriamente foram submetidos ao exame ultra-sonográfico trans-abdominal, utilizando um transdutor linear 7,5 MHz, ocasião em que se obtiveram as medidas comprimento (C), profundidade (P) e largura (L) nos planos longitudinal e transversal. Após realização do exame post-morten essas mesmas medidas prostáticas foram obtidas permitindo a comparação entre elas. Todos os animais eram não-castrados, com idade variando entre um e 16 anos, com média de 7,1 ± 4,7 anos. Este estudo demonstrou que o método ultra-sonográfico foi eficaz para estimar o tamanho prostático. As análises estatísticas demonstraram correlação positiva entre as dimensões prostáticas e a idade do animal, porém essa relação não foi demonstrada com o peso corporal dos animais (P≤0,05) As afecções prostáticas mais freqüentes foram a hiperplasia prostática benigna (43,75%) e a prostatite (31,25%).

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1351691 bytes, checksum: a4e54f48468d2e7b8b4c81e7fa06bc89 (MD5) Previous issue date: 2012-02-15 / We collected blood samples and ectoparasites samples (ticks and fleas) of wild animals belonging to the class of mammals and birds, received by the Screening Center of Wildlife, Federal University of Vicosa, in Minas Gerais. The collection of blood samples and ectoparasites was intended to search for bioagents using molecular techniques, the Polymerase Chain Reaction (PCR). All samples were testes for the presence of microorganisms of the genus Rickettsia (CS-5 and CS-6) and Ehrlichia (ECC and ECB. Were collected from a total of 100 samples of blood, 73 of the class of birds and 27 of the class of mammals. The samples totaled 63 ticks from 13 animals and 47 fleas from five animals. The tick species were found in wild mammals Amblyomma cajennense, Amblyomma dubitatum, Amblyomma nodosum, Amblyomma ovale, Amblyomma aureolatum, Rhipicephalus sanguineus e Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The species of flea Ctenocephalides canis was found. In search of bioagents by PCR three samples of birds and five samples of mammals were positive for the detection of bacteria of the genus Rickettsia, plus four samples of ectoparasites (ticks and fleas). In the study of bacteria of the genus Ehrlichia, one sample of bird was positive and three samples of mammals, no positive samples to that detection have been obtained of ectoparasites. / Foram coletadas amostras de sangue e ectoparasitas (carrapatos e pulgas) de animais silvestres pertencentes à classe de mamíferos e aves, recebidos pelo Centro de Triagem de Animais Silvestres da Universidade Federal de Viçosa, no Estado de Minas Gerais. A coleta da amostra de sangue e ectoparasitas era destinada para pesquisa de bioagentes através de técnicas moleculares, como a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR). Todas as amostras foram testadas quanto à presença de agentes do gênero Rickettsia e Ehrlichia. Foram coletadas um total de 100 amostras de sangue, sendo 73 de animais da classe de aves e 27 da classe de mamíferos. As amostras de ectoparasitas totalizaram 63 carrapatos provenientes de treze animais e 47 pulgas, provenientes de cinco animais. As espécies de carrapato encontradas em mamíferos silvestres foram Amblyomma cajennense, Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale, Amblyomma nodosum, Amblyomma aureolatum, Rhipicephalus sanguineus e Rhipicephalus (Boophilus) microplus, e a espécie de pulga encontrada foi Ctenocephalides canis. Na pesquisa de microorganismos pela PCR, foram positivas para a detecção de bactérias do gênero Rickettsia, três amostras de aves e cinco amostras de mamíferos, além de quatro amostras de carrapatos do gênero Amblyomma e duas amostras de pulgas. Na pesquisa de bactérias do gênero Ehrlichia, foram positivas uma amostra de ave e três amostras de mamíferos, não tendo sido obtidas amostras positivas de ectoparasitas para este gênero.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 759656 bytes, checksum: 08559ba05ec99261b3eaa0c86a4aa9e9 (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Samples of mandibular, mediastinic, gastric, mesenteric and inguinal lynph nodes and lungs. kidneys, liver, heart and spleen of 24 pigs showing clinical features of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) and samples of inguinal lynph nodes of 24 clinicaly healthy pigs were colected. In one part of the samples were performed real time PCR for detection of the Porcine Circovirus 2 (PCV 2) nucleic acid. The other part were analysed for histopathological lesions. One part of the lynph nodes were submited to immunohistochemistry against the PCV 2 and this results were compared to the results of real time PCR Lynphocellular depletion and infiltration of histiocytic cells were the most seen lesions in lynph nodes. Based on the intensity of this lesions, three stages of the desease were determined Stage 1, mild lesions (39%), stage 2, moderate lesions (32,7%) and stage 3, severe lesions (20%). In the lungs, the majority of the lesions seen were intersticial pneumonia with lynphoid and hystiocytic infiltration of the alveolar septae ln the kidneys, intersticial nephritis with mononuclear infnltration were seen in 35% of the samples and glomerulonephritis with glomerular fibrin and neutrophill infiltration were seen in 50% of the samples. In the Iiver, lynphoid infiltration in the periportal zones were the lesions most observed. Lynphocellular depletion were obseved in the most samples of the spleen. No lesions were observed in the heart. Only 65.3% of the lynph nodes submitted to immunohistochemistry were considered positive for the presence of the PCV 2. Though 100% of the samples submitted to the real time PCR were considered positive for the presence of the virus. / Foram coletadas amostras de Iinfonodos mandibulares, mediastínicos, epigástricos, mesentéricos e inguinais superficiais, além de pulmões, rins, fígado. coração e baço de 24 suínos exibindo sinais clínicos da síndrome do definhamento multissistêmico pós-desmame (PMWS) e amostras de Iinfonodos inguinais superficiais de 24 suínos cIinicamente sadios. Uma pane dos tecidos foi encaminhada para a realização de PCR em tempo real para detecção do ácido nucléico do Circovírus suíno 2 (PCV 2). Outra parte das amostras foi incluída em parafina e cortada na espessura de 4 um para avaliação histopatológica. Uma parte dos linfonodos foi submetida ao teste de imunoistoquímica e este resultado foi comparado ao resultado do PCR em tempo real. Depleção Iinfóide e infiltrado macrofágico foram as lesões mais observadas nos linfonodos. Baseado na intensidade destas lesões foram determinados trés estágios da doença. Estágio 1, lesões discretas (39%), estágio 2, lesões moderadas (32,7%) e estágio 3, lesões graves (20%). Nos pulmões, a lesão mais encontrada foi pneumonia intersticial com espessamento dos septos alveolares por infltrado inflamatório mononuclear, principalmente linfócitos e histiócitos. Nos rins, a nefrite intersticial com infiltrado de linfócitos e histiócitos na medula e na córtex renal foi observada em 35 % das amostras e glomerulonefrite com infiltrado de fibrina e neutrófilos nos glomérulos foi observada em 50 % das amostras. No fígado, o achado mais freqüente foi infiltrado inflamatório linfocítico nas regiões periportais. Depleção linfóide foi observada na maioria das amostras de baço. Não foram observadas lesões nas amostras de coração. Apenas 65,3 % dos linfonodos submetidos à imunoistoquímica foram considerados positivos para a presença do PCV 2. Entretanto, 100°/o das amostras foram consideradas positivas para a presença do vírus pelo PCR em tempo real.

Atualmente, o Brasil é o segundo maior exportador de carne bovina e o sexto exportador de leite no mundo. Visando melhorar a produtividade da bovinocultura, torna-se importante a aplicação de programas sanitários adequados e eficientes. As doenças virais são preocupações constantes em qualquer programa de sanidade, devido aos grandes prejuízos econômicos que causam e o seu diagnóstico correto depende de técnicas laboratoriais eficientes. O gênero Pestivirus, da família Flaviviridae, possui três espécies reconhecidas que podem infectar bovinos: o vírus da diarreia viral bovina tipo 1 (BVDV-1), o BVDV-2 e o vírus da doença da fronteira (BDV), além de uma espécie atípica proposta como BVDV-3. Causam principalmente distúrbios respiratórios, reprodutivos e digestivos em bovinos, levando a queda de índices de produção. Os objetivos do presente trabalho foram: descrever o uso de uma técnica modificada de detecção de agentes virais que possam estar presentes em insumos utilizados na reprodução assistida e descrever a caracterização patológica e análise filogenética de pestivírus detectados em um surto da doença, sendo os dados apresentados sob a forma de dois artigos. No primeiro, pools de líquidos foliculares colhidos durante a punção ovariana de vacas para coleta de oócitos para produção in vitro de embriões foram selecionados. As amostras foram analisadas para a detecção de BVDV, herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) por isolamento viral, RT-PCR e nested PCR, sendo utilizados dois protocolos de extração de DNA e RNA: um convencional e o outro com adição de etapas pré-extração de ácido nucleico, no intuito de reduzir possíveis inibidores de RT-PCR e PCR presentes nas amostras. A utilização da técnica de pré-extração permitiu detectar um maior número de amostras positivas. No segundo trabalho, foi descrito um surto de diarreia viral bovina em um rebanho que foi testado por imunohistoquímica, ELISA, isolamento viral, RT-PCR e sequenciamento de três regiões do genoma. Foram obtidas quatro amostras distintas de BVDV-3 e as principais alterações clinicas foram encontradas nos sistemas digestivo e respiratório, mas lesões de pele e opacidade de córnea também foram observadas. Os resultados encontrados nos trabalhos realizados reforçam a necessidade da verificação quanto à presença de patógenos em materiais biológicos utilizados na reprodução assistida utilizando técnicas sensíveis e que a doença causada por BVDV-3 em bovinos é indistinguível clinicamente das causadas por outros pestivírus, sugerindo que pestivírus atípicos podem estar subdiagnosticados nos rebanhos brasileiros. / Currently, Brazil is the second largest beef and the sixth milk exporter worldwide. To improve the livestock productivity, it becomes important the applying of appropriate and efficient health programs. Viral diseases are constant concerns on any health program due to major economic losses they cause and their correct diagnosis depends of the development of efficient diagnostic techniques. The genus Pestivirus of the family Flaviviridae, has three recognized species which can infect cattle: the bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1), BVDV-2 and border disease virus (BDV), and one atypical species putatively named as BVDV-3. These viruses mainly cause respiratory, digestive and reproductive disturbances in cattle, resulting in decrease of production rates. The goals of the present work were: describe the use of a modified procedure in detecting viral agents that may be present on byproducts utilized in assisted reproduction and describe the pathological and phylogenetic frame of pestivirus detected in an outbreak of disease. The data was presented in two papers. In the first study, pooled follicular fluid collected during oocyte retrieval for in vitro embryo production were selected. The samples were analyzed for BVDV, bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) by virus isolation, RT-PCR and nested PCR, using two extraction protocols for DNA and RNA: a conventional and the other with addition of pre-extraction of nucleic acid step, in order to reduce potential inhibitors of PCR and RT-PCR present in the samples. The use of the prenucleic acid procedure allowed detecting a greater number of positive samples. In the second paper, an outbreak of bovine viral diarrhea virus was described and has been tested by immunohistochemistry, ELISA, virus isolation, RT-PCR and sequencing of three regions of the genome. Four different BVDV-3 samples were obtained and major clinical disturbances were found in the digestive and respiratory systems, but skin lesions and corneal opacity were also observed. The results obtained in the works underscore the need in checking for pathogens in biologicals used in assisted reproduction utilizing sensitive techniques and shows that the disease caused by BVDV-3 in cattle is clinically undistinguishable from those caused by other pestiviruses, suggesting that atypical pestivirus may be underdiagnosed in the Brazilian herds.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-09-04T14:51:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-09-05T11:09:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-05T11:09:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antônio Ferreira Garcia Neto - 2018.pdf: 2308172 bytes, checksum: d20521dd121eebd70319e9435511febd (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Best zootechnical indexes are important in beef cattle breeding. It is allied to the satisfactory conditions of creation and sanity. If not observed, metabolic imbalances may occur. The post mortem relationship between ruminal disturbances, hepatic abscesses and foot diseases was evaluated in beef cattle finished in pasture in a southwestern state of Goias. Then, an evaluation of the financial losses was carried out due to ruminal condemnations of cattle slaughtered in southwestern state of Goias. About the relationship, 970 male bovines, Nelore, 25 to 36 months of age, were evaluated by ante-mortem and post-mortem examination of the hoof, liver and rumen. It was considered the presence or absence of diseases. Data analyzed by the chi-square test (p <0.05). In the financial study, we considered the findings of 1,275 male bovine animals, Nellore, 25 to 36 months of age, 597 confined and 678 to pasture. Data analyzed by descriptive statistics. 363 cattle with hoof diseases, hepatic abscesses or ruminal disorders. 52 with hoof diseases, nine with hepatic abscess and 302 with ruminal alterations. Of these, 27 with two associated diseases. None with three simultaneous lesions. Ruminal lesions were found in 47 confined animals and 29 to pasture. The mean rumen weight with lesion was 4.55 kg and the mean rumen weight healthy was 4.50. The total condemned weight was 345.50 kg, 213.50 of confined cattle and 132 of pasture. The loss was R $ 2,245.75 (US $ 688.88), if sold domestically, or R $ 3,154.41 (US $ 967.62), if exported. There was no postmortem relationship between ruminitis, hepatic abscess and hoof diseases in the evaluated animals. The financial impact of ruminal condemnations was significant. / Melhores índices zootécnicos são prementes na bovinocultura de corte. Alia-se às condições satisfatórias de criação e sanidade. Se não observados, desequilíbrios metabólicos podem ocorrer. Avaliou-se a relação post mortem entre os lesões ruminais, abscessos hepáticos e enfermidades podais em bovinos terminados a pasto em um frigorífico no sudoeste goiano. Sequencialmente, promoveu-se uma avaliação dos prejuízos financeiros devido as condenações ruminais de bovinos abatidos no sudoeste goiano. Sobre a relação, avaliou-se 970 bovinos machos, raça Nelore, 25 a 36 meses de idade, pelo exame ante mortem e post mortem dos pés, fígado e rúmen. Considerou- se a presença ou ausência das lesões. Dados foram analisados pelo teste qui-quadrado (p<0,05). No estudo financeiro, considerou-se os achados de 1.275 bovinos machos, Nelore, 25 a 36 meses de idade, 597 confinados e 678 a pasto. Dados foram analisados por estatística descritiva. 363 bovinos com lesões podais, abscessos hepáticos ou distúrbios ruminais, sendo 52 com lesões podais, nove com abscesso hepático e 302 com alterações ruminais. Desses, 27 com duas enfermidades associadas e nenhum com três lesões simultâneas. Constatou-se lesões ruminais em 47 animais confinados e 29 a pasto. O peso ruminal médio lesionado foi 4,55 quilos e os saudáveis 4,50. O peso total condenado foi 345,50 quilos, 213,50 de bovinos confinados e 132 a pasto. O prejuízo foi R$ 2.245,75 (U$ 688,88), se vendidas nacionalmente, ou R$ 3.154,41 (U$ 967,62), se exportadas. Não houve relação post mortem entre ruminite, abscesso hepático e enfermidades podais nos animais avaliados. O impacto financeiro pelas condenações ruminais foi expressivo.