Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Programa de pós-graduação em cirurgia plástica da UNIFESP / Introdução: Obesos e ex-obesos apresentam flacidez e excesso de pele que é um órgão que pode apresentar prejuízo sensorial na obesidade. A função sensorial cutânea é imprescindível para a vida cotidiana; compreender o seu comportamento na obesidade e após a mesma com e sem abdominoplastia reparadora é útil para a adequada assistência à saúde de obesos e ex-obesos graves. Objetivo: Quantificar a sensação táctil da pele abdominal de obesas e ex-obesas bem como a repercussão sensorial da abdominoplastia. Métodos: Monofilamentos de Semmes-Weinstein foram usados para quantificar a sensação táctil inócua à pressão na pele abdominal em casuística de 25 mulheres obesas, 56 ex-obesas pós-cirurgia bariátrica e 43 magras. E 28 ex-obesas submeteram-se a abdominoplastia sem descolamento de retalho, com a função sensorial cutânea quantificada antes e seis meses após a operação, seu resultado foi comparado com um grupo controle. O nível de significância estatística adotado foi 0,05. Resultados: Os limiares sensoriais (de obesas foi de 6,9g/mm2, ex-obesas 4,4g/mm2 e magras 3,4g/mm2) são diferentes (teste de Mann-Whitney & Bonferroni). A sensação táctil da pele infra-umbilical de obesas (9,6g/mm2) diferiu do nível umbilical (5,9g/mm2) e supra-umbilical (5,4g/mm2), teste de Wilcoxon & Bonferroni. A abdominoplastia pós-bariátrica não alterou a função sensorial (Mann Whitney). Conclusão: A função sensorial cutânea abdominal está prejudicada na obesidade (em maior grau no nível infraumbilical) e em menor grau após o emagrecimento. A abdominoplastia pós-cirurgia bariátrica sem descolamento de retalho preserva essa função. / Introduction: Obeses and former obeses have flaccidity and excedent skin. The skin can have its neurologic function impaired by obesity. The cutaneous sensory tactile function is essential for the human behavior in cotidien life, and a satisfactory health assistance must understand this function inside the obesity context. Objective: To quantify the abdominal wall skin sensation in obesity and after obesity with and without postbariatric abdominoplsty. Methods: Semmes-Weinstein monofilaments were used to measure the innocuous tactile abdominal skin sensation in 25 obeses, 56 post-bariatrics and 43 thin women. And 28 former obeses were submitted to no flap undermining abdominoplasty with their skin sensation quantified before and six months after the surgery; the result was compared to a control group. The statistical significance level was 0.05. Results: Sensory limiars (Obeses = 6,9g/mm2, former obeses = 4,4g/mm2 and thins = 3,4g/mm2) are different (Wilcoxon test & Bonferroni correction). Infraumbilical abdominal skin’s sensory limiar (9,6g/mm2) is different from the umbilical (5,9g/mm2) e supra-umbilical (5,4g/mm2) levels, Wilcoxon & Bonferroni. The post-bariatric abdominoplasty kept the abdominal skin sensation function (Mann Whitney test). Conclusion: The skin sensory function is impaired in obesity and, at a lower level, after obesity; the abdominoplasty without flap undermining do not impair this skin function. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:43:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 325867.pdf: 3859462 bytes, checksum: 3585825c2cd70fd8e1331b2d03a3f2fa (MD5) Previous issue date: 2013 / Novas estratégias para a regeneração da pele são necessárias a fim de proporcionar um tratamento eficaz para feridas cutâneas e doenças. Dentre estas possíveis estratégias estão o desenvolvimento de novos biomateriais, a realização de terapia celular e a identificação e aplicação de fatores envolvidos no reparo de tecidos. Avanços na área de engenharia tecidual têm possibilitado o desenvolvimento de biomateriais que se assemelham a arquitetura tecidual da pele, como os substitutos dérmicos, que permitem o recobrimento da lesão e facilitam a recolonização celular, auxiliando assim a regeneração do tecido dérmico. Além disso, as células-tronco mesenquimais (CTMs) têm sido descritas como uma fonte atrativa de células para a engenharia de tecidos, em razão da sua multipotencialidade e capacidade de liberação de moléculas ativas importantes para o reparo tecidual. Tendo em vista estes aspectos, o presente trabalho busca estabelecer e avaliar um novo método de tratamento de lesões de pele, tendo como base a associação das CTMs derivadas da pele humana com substitutos dérmicos comerciais, utilizados atualmente em abordagens clínicas. Para isso, primeiramente, CTMs da derme humana (dCTMs) foram isoladas e sua potencialidade e características morfológicas, fenotípicas e migratórias analisadas. Os resultados obtidos mostram que as dCTMs possuem características semelhantes às CTMs derivadas da medula óssea, como: morfologia fibroblastóide, alta capacidade proliferativa, perfil de expressão de marcadores de superfície e potencial de diferenciação para fenótipos mesodermais. Além disso, as células expressam marcadores de pluripotencialidade e de linhagens neurais e mesenquimais, sem indução específica, e possuem potencial de diferenciação para a linhagem epidermal. Ademais, as dCTMs mostram alta capacidade migratória in vitro. Após esta caracterização das dCTMs, foi avaliado o crescimento e a manutenção destas células em um sistema de cultura tridimensional com os substitutos dérmicos Integra® e Pelnac®. Os resultados mostram que ambos os substitutos dérmicos suportam igualmente a adesão, proliferação e migração das dCTMs, mantendo suas características fenotípicas, tais como o perfil de expressão de marcadores de superfície, de pluripotencialidade e de linhagens neurais e mesenquimais. Tendo em vista que a associação das dCTMs com os substitutos dérmicos mostrou-se eficiente, foi avaliado a seguir o potencial terapêutico destas células associadas ao substituto dérmico (SD) Integra® no reparo de lesões de pele em camundongos. Para isso, foi avaliada a inflamação, vascularização, depósito de matriz extracelular e a re-epitelização em lesões tratadas com dCTMs associadas ao SD e em lesões mantidas apenas com o SD (controle). Os resultados demonstram que o tratamento com dCTMs + SDs aumenta o tecido de granulação, o recrutamento de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), a vascularização, o depósito de colágeno e a re-epitelização, acelerando assim o reparo tecidual. Além disso, o tratamento com dCTMs + SDs modula a expressão de diferentes genes relacionados com o reparo tecidual na área da lesão. Em conclusão, o presente estudo isolou uma população de CTMs da pele humana, denominada de CTMs dermais (dCTM), e mostrou uma eficiente associação destas células com os SDs, representando assim uma nova ferramenta terapêutica para a engenharia tecidual. Esta associação, quando avaliada no tratamento de lesões cutâneas de camundongos, mostrou-se promissora, resultando em um reparo tecidual mais eficiente.<br> / Abstract : New strategies for skin regeneration are needed in order to provide effective treatment for cutaneous wounds and diseases. Among these possible strategies are the development of new biomaterials, cell therapy and the identification and application of factors involved in tissue repair. Advances in tissue engineering have provided the development of biomaterials similar to the skin such as dermal substitute (DS), for covering the lesion and to facilitate cell recolonization thereby supporting dermal regeneration. In addition, mesenchymal stem cells (MSCs) have been suggested as an attractive source of cells for tissue engineering because of their multipotentiality and ability to release active molecules for tissue repair. Therefore, the present study established and evaluated a new method for treatment of skin lesions, based on the association of MSCs derived from human skin with commercial dermal substitutes currently used in clinical procedures. Thus, MSCs from human dermis (dCTMs) were isolated and their morphologic, phenotypic migratory characteristics and potentiality analyzed. The results showed that dCTMs have characteristics similar to MSCs derived from bone marrow, such as: fibroblast-like morphology, high proliferative capacity, profile of surface markers and differentiation potential for mesodermal phenotypes. In addition, these cells express pluripotent and mesenchymal and neural lineages markers, without specific induction. Moreover, the dMSCs display the potential for epidermal lineage and show high migratory capacity in vitro. It was also evaluated the growth and maintenance of these cells in three-dimensional (3D) culture system with the dermal substitutes Pelnac® and Integra® . The results showed that both dermal substitutes equally support the adhesion, spread and growth of human dMSCs in 3D-culture, maintaining MSC phenotype, expression of the pluripotent and neural and mesnchymal lineages markers. In view of these results, the therapeutic potential of these cells associated with the Integra DS in the repair of skin lesions in mice was evaluated in vivo. Inflammation, vascularization, deposition of matrix extracellular molecules and reepithelialization in skin lesions were analyzed. The results demonstrated that the treatment with dCTMs + DSs increases the granulation tissue, recruitment of inflammatory cells (neutrophils and macrophages), vascularization, collagen deposition and reepithelization, thus accelerating tissue repair. In addition, the treatment with dCTMs + DSs modulates the expression of different genes related to tissue repair. In conclusion, the present study isolated a population of MSCs from human skin, named dermal MSCs (dMSCs), and showed an efficient association of these cells with DSs, representing a new therapeutic tool for tissue engineering. This combination, when evaluated in the treatment of cutaneous lesions in mice, has shown to be promising, resulting in a more efficient tissue repair.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-01-22T18:11:35Z No. of bitstreams: 1 Tese_SC_JucianyRodriguesOliveiraRamalho_final.pdf: 4597107 bytes, checksum: a7828cece1f6002bc40ee9697e45cd04 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-01-22T18:12:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_SC_JucianyRodriguesOliveiraRamalho_final.pdf: 4597107 bytes, checksum: a7828cece1f6002bc40ee9697e45cd04 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-22T18:12:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_SC_JucianyRodriguesOliveiraRamalho_final.pdf: 4597107 bytes, checksum: a7828cece1f6002bc40ee9697e45cd04 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou / Descrever as características dos idosos residentes na comunidade, de acordo com os níveis de gasto energético; avaliar a associação entre gasto energético em atividades físicas e a mortalidade por todas as causas em idosos residentes em Bambuí, Minas Gerais, considerando diferenças de idade, sexo e cor da pele. Estudo com dados da Coorte de Idosos de Bambuí estabelecida em 1997, quando todos os residentes com 60 anos ou mais foram convidados a participar do estudo. O nível de atividade física global, avaliado na linha de base, foi calculado baseando-se no gasto energético estimado em metabolic equivalente task (MET). Foi utilizado o modelo de riscos proporcionais de Cox para avaliar a associação entre o gasto energético e a mortalidade no período de 11 anos de seguimento, considerando o ajuste por variáveis de confusão. Foram investigadas as interações entre gasto energético e as variáveis idade, sexo e cor da pele. Curvas de sobrevida ajustadas foram construídas. Participaram da presente análise 1378 (85,8%) idosos, sendo a taxa de mortalidade geral na coorte igual a 40,6 por 1000 pessoas-ano. A prevalência de sedentarismo foi maior em idosos mais velhos do que nos mais jovens e maior em mulheres do que em homens, com diferença estatisticamente significante. Na análise ajustada foi observada uma interação significativa entre sexo e gasto energético (p<0,03) e também cor da pele e gasto energético (≤0,01). O aumento dos níveis de atividade física foi associado com redução do risco de mortalidade principalmente entre homens, com HR de 0,59 (IC95%: 0,43-0,81) e 0,47 (IC95%: 0,34-0,66), no segundo e terceiro tercis de gasto energético, respectivamente, após ajuste por fatores de confusão. Em relação à cor da pele, a análise ajustada mostrou que homens idosos de cor branca apresentaram associação entre atividade física e mortalidade (HR: 0,49; IC95%: 0,34-0,73 e HR: 0,28; IC95%: 0,17-0,47, para os tercis 2 e 3, respectivamente), mas esse efeito não foi observado entre os homens não brancos. Esses resultados mostram os benefícios da atividade física na redução do risco de morte entre homens idosos de cor branca residentes em Bambuí, chamando atenção para a importância de se considerar a interação da atividade física com o sexo e cor da pele na sobrevida de idosos / Describe the characteristics of the older adults residing in the community, according to energy expenditure levels. To investigate the association between energy expenditure in physical activity and mortality among older adults residents in Bambuí city, Minas Gerais, assessing differences between age, gender and skin color. The study was conducted with database from Bambuí Cohort Study of Aging, started in 1997, when all the residents with 60 years and over were invited to participate in the study. The level of the total physical activity was assessed in the baseline, and the metabolic equivalente task (MET) was estimated. It was used the Cox proportional hazard models to evaluate the association between energy expenditure and mortality over 11 years of follow-up time, and potential confounders were considered. Interactions were investigated between energy expenditure and age, sex and skin color. Adjusted survival curves were plotted. 1378 (85.8%) older adults were included in this analysis, and the mortality rate was 40.6 per 1000 person-years at risk. The prevalence of insufficient physical activity was higher in older elderly than in younger and higher in women than men, with statistically significant difference. A statistically significant interaction was found between gender and energy expenditure (p<0.03) and also it was found between skin color and energy expenditure (≤0.01). The increase in levels of physical activity were associated with reduced mortality risk especially in older men, with HR=0.59 (95%CI = 0.43-0.81) and 0.47 (95%CI = 0.34-0.66) for the second and third tertiles, respectively, considering the adjusted analysis. Regarding to skin color, the adjusted analysis showed that white older men had a significant association between physical activity and mortality (HR: 0.49; IC95%: 0.34-0.73 and HR: 0.28; IC95%: 0.17-0.47, for the second and third tertiles, respectively), but this effect was not found in non-white men. These results showed the benefit of physical activity on reducing mortality risk among white older men that living in Bambuí city, and highlight the importance of considering the interaction of en

Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2013-10-10T16:05:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2013-10-21T14:45:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-21T14:46:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) Previous issue date: 2013 / A detecção do DNA de Leishmania spp, pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e suas variações, surgem como alternativas para o diagnóstico da LVC, por serem métodos altamente sensíveis e específicos. O objetivo deste trabalho foi comparar a PCR e suas variações (Seminested PCR e PCR em tempo real) utilizando amostras de pele e de baço de 60 cães soropositivos (RIFI e ELISA). Os animais foram agrupados considerando a forma clínica, sendo classificados como assintomáticos (CA; n=20), oligossintomáticos (CO; n= 22) e sintomáticos (CS; n= 18). Como controle negativo, foram utilizados fragmentos de três cães não infectados provenientes do canil da UFOP. O diagnóstico parasitológico, utilizado como padrão ouro, foi realizado por meio de duas metodologias: cultivo de aspirado medular em meio de cultura NNN/LIT e pela visualização direta de formas amastigotas do parasito em lâminas com imprints de pele e de baço. As análises moleculares foram realizadas utilizando iniciadores direcionados para a região conservada do minicírculo do kDNA de Leishmania – L150/L152 e LINR4/LIN17/LIN19 para as técnicas de PCRc e snPCR, respectivamente. Na qPCR foram utilizados iniciadores que amplificam o gene da DNA polimerase (DNA pol α) de L. infantum. De acordo com os testes parasitológicos 61,7% das amostras foram positivas. Nos fragmentos de pele, a sensibilidade da PCRc foi de 89,2%, já para a snPCR e qPCR foi de 86,5% e 97,3% respectivamente. VPP para a PCRc foi de 36,0%, snPCR de 35,3% e da qPCR foi 38,1%. O VPN foi de 93,6%, 92,1% e 98,3% pelas técnicas de PCRc, snPCR e qPCR respectivamente. Em amostras de baço, a sensibilidade da PCRc foi 81,1%, snPCR de 94,6% e de 100,0% pela qPCR. O VPP para a PCRc foi 33,9%, snPCR 37,4% e qPCR 38,7%. O VPN da PCRc foi de 89,3%, snPCR 96,7% e qPCR 100,0%. A positividade nos testes moleculares aumentou de acordo com a gravidade dos sinais clínicos. Foi observado que a qPCR apresentou os melhores resultados na pele e no baço devido a maior sensibilidade, VPP e VPN, em comparação as outras técnicas moleculares. Sendo assim, concluímos que a melhor técnica e tecido para o diagnóstico molecular da LVC é a qPCR de pele, devido à elevada sensibilidade e fácil obtenção da amostra biológica. ____________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The detection of Leishmania DNA based on polymerase chain reaction (PCR) and its variations represent alternatives for CVL diagnosis with highly sensitive and specific methods. The aim of this work was to compare the PCR and its variations (Seminested PCR and quantitative PCR) in samples of skin and spleen of 60 seropositive dogs (IFAT and ELISA). The animals were divided according to their clinical presentation and were classified as asymptomatic (CA, n = 20), oligosymptomatic (CO, n = 22) and symptomatic (CS, n = 18). As a negative control, we used fragments of three uninfected dogs from the kennel of UFOP. The parasitological diagnosis used as gold standard was performed by two methods: culture of bone marrow aspirate in culture medium NNN/LIT and direct visualization of amastigotes of the parasite on slides with imprints of skin and spleen. The primers L150/L152 and LINR4/LIN17/LIN19 were used to amplify the conserved region of the Leishmania kDNA minicircle in the cPCR and snPCR and qPCR were performed out using the DNA polymerase gene (DNA pol α) primers from L. infantum. According to the parasitological test 61.7% the samples were positive. In skin samples, the sensitivity of cPCR was 89.2%, snPCR was 86.5% and qPCR was 97.3%. PPV for cPCR was 36.0%, snPCR was 35.3% and qPCR was 38.1%. The NPV was 93.6%, 92.1% and 98.3% by the techniques of cPCR, snPCR and qPCR. In spleen samples, the sensitivity of cPCR was 81.1%, snPCR was 94.6% and qPCR was 100.0%. PPV for cPCR was 33.9%, snPCR was 37.4% and qPCR was 38.7%. NPV for cPCR was 89.3%, snPCR was 96.7% and qPCR was 100.0%. Positivity in molecular tests increased with the progression of clinical signs. It was observed that the qPCR showed the best results in skin and spleen due to higher sensitivity, PPV and NPV compared to other molecular techniques. Thus, we conclude that the best technique and tissue for molecular diagnosis of CVL is the qPCR skin due to the high sensitivity and easy obtaining the biological sample.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento / Made available in DSpace on 2013-03-04T20:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Indivíduos acometidos por queimaduras graves e/ou extensas ou por grandes feridas, ou seja, que apresentam perda significativa de tecido epitelial, são considerados pacientes gravemente enfermos uma vez que a falta massiva da pele resulta em perdas hídricas e deixa o organismo mais susceptível à infecções. Quando estes pacientes sobrevivem, após tratamento intensivo e prolongado, se deparam com cicatrizes desfigurantes, não funcionais e contraturas graves da pele. No presente trabalho foi realizada uma análise comparativa do processo de cicatrização entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® em pele de camundongo Mus musculus, através de ensaios in vivo. Os animais foram separados em três grupos e posteriormente levados à cirurgia para a retirada de 1cm2 da pele do dorso. No grupo1 (G1), no local da excisão não era colocado matriz de regeneração dérmica, ficando o ferimento exposto para cicatrização por segunda intenção; no grupo 2 (G2), no local da excisão colocava-se, matriz de regeneração dérmica Integra® e no grupo 3 (G3), colocava-se matriz de regeneração dérmica Pelnac®. Eram realizadas biópsias com 3, 6 e 9 dias de pós-operatório, onde o material retirado era processado para emblocamento em parafina e posteriormente cortado e corado com hematoxilina-eosina e tricrômico de Masson . O estudo dos cortes histológicos corados com hematoxilina-eosina tinham como objetivo a análise do processo inflamatório, análise da celularidade e neoformação vascular. Com a coloração tricrômico de Masson pretendia-se fazer uma análise da presença de colágeno e fibrose. O estudo do processo inflamatório revelou uma discreta diferença entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® no sexto dia de pós-operatório, onde, neste momento, a matriz Pelnac® mostrou-se mais efetiva em conter a inflamação. A celularidade mostrou-se praticamente igual em todos os grupos e em todos os dias estudados, com discreto aumento no terceiro dia na matriz Integra®. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo estranho. Isso nos sugere que ambas os substitutos não tiveram comportamento imunológico totalmente inerte, como esperado. A presença de neovasos ocorreu de forma efetiva em todos os grupos, porém não de forma acelerada. Não houve necrose tecidual em nenhum dos grupos estudados. A análise pela coloração tricrômico de Masson foi realizada somente de forma qualitativa devido a presença muito discreta de fibrose em nosso grupo experimental. Não observamos alterações cicatriciais severas, sendo que a mesma ocorreu de maneira uniforme em todos os grupos analisados, sem a presença de cicatrizes hipertróficas ou retrações teciduais. O resultado estético e funcional final foi viável, inclusive com presença de pilificação. Conclusão: A formação de neovasos foi semelhante em todos os grupos estudados, sugerindo uma não interferência das matrizes na neoformação vascular neste modelo experimental. A densidade de células inflamatórias por área apresentou-se um pouco maior na matriz de regeneração dérmica Integra no terceiro dia de pós-operatório, sugerindo que esta matriz possa apresentar um comportamento mais pró-inflamatório. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo-estranho. Este resultado nos mostra que os dois substitutos dérmicos estudados não apresentaram um comportamento totalmente inerte, como é o desejado. Há portanto, necessidade de melhorias em ambos os produtos, neste sentido. Com a matriz de regeneração dérmica Pelnac® houve menos processo inflamatório no sexto dia de pós-operatório. No entanto, a cicatrização da pele nos animais sem matriz de regeneração dérmica e com e com matriz de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® se deu de forma semelhante, onde todas apresentaram uma cicatriz normal, com ausência de fibrose ou cicatrização hipertrófica. Deste modo, as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® não apresentaram interferência no resultado final da cicatrização em relação às feridas sem matriz neste modelo experimental. Para estudos de cicatrizes hipertróficas ou retração de feridas, portanto, há necessidade de um aperfeiçoamento do mesmo / Three animal groups were taken to surgery consisting of removal of 1cm2 skin in the back. Group 1 (G1) animals were not treated with skin substitutes, leaving the exposed wound to heal second intention; Group 2 (G2) animals were treated, at the site of excision, with skin substitute Integra® and Group 3 (G3) animals were treated with skin substitute Pelnac®. Biopses were performed at the 3rd, 6th and 9th days after surgery. The material was then processed for histological procedures and stained with hematoxilin-eosin (HE) and Masson trichrome. HE staning was used to evaluate the linear inflammatory process, cellularity and neovascularization. On the other hand, Masson trichrome was used to analyze the presence of collagen and fibrosis. The study of inflammatory process revealed a slight difference between at the 6th day after surgery, being Pelnac® more effective in containing inflammation. The cellularity was similar in all analyzed groups in all the period studied, with a slight increase on the third day in dermal template Integra®. Both skin substitutes contained giant cells of foreign body. This suggests that both skin substitutes were not totally immunologically inert, as expected. Neovascularization were observed in all groups. Necrosis was not observed in any group. Masson staining reveled very discreet fibrosis in our experimental group. We did not observe cicatricicial changes, that was uniform in all groups, without presence of hypertrophic scars or tissue retraction. The final functional and cosmetic result was acceptable, even the presence of hairiness. Conclusion: The formation of new vessels was similar in all groups studied, suggesting a non interference matrices of neovascularization in this experimental model. The density of on inflammatory cells per area showed a little increase in dermal template Integra 3rd day after surgery, suggesting that this skin substitute display a pro-inflammatory action. Both matrices showed giant cells of foreign body. This result shows that both skin substitutes studied did not have a totally inert behavior, as is desired. Improvements in both products are needed. With Pelnac® there was less inflammatory process in the 6th pós- operative day. However, skin healing was similar in all animal groups including those animals maintained without skin substitutes, with normal scarring, no fibrosis and nor hypertrophic scarring. Thus, the skin substitutes Integra® and Pelnac® did not significantly affected the healing wounds. Improvement in the animal model is need for studies of wound contraction or hypertrophic scars

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-06-26T01:15:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317535.pdf: 1046958 bytes, checksum: 34e073ccf86d5cb176a18d9209d5d173 (MD5) / Introdução: O melasma é uma doença de pele caracterizada pelo aparecimento de manchas escuras na face e áreas expostas ao sol e que provocam grande impacto na qualidade de vida. Existem vários fatores envolvidos na sua patogênese, porém os mecanismos que levam ao seu aparecimento ainda não estão totalmente esclarecidos. Objetivos: Estudar a resposta inflamatória por meio da avaliação da celularidade, presença de edema e de apoptose de queratinócitos nas lesões de melasma, avaliar a presença ou não de telangiectasias, elastose solar e pigmento epidérmico nas lesões de melasma, avaliar a participação do óxido nítrico (NO) nas lesões de melasma, avaliar o impacto na qualidade de vida do melasma utilizando-se o questionário MelasQol já validado para a língua Portuguesa. Métodos: O estudo foi do tipo observacional transversal com componente analítico. A amostra foi definida como de conveniência. Foram selecionados 51 pacientes com diagnóstico clínico de melasma no ambulatório de Dermatologia do Hospital Universitário Professor Polydoro Ernani de São Thiago da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) entre Janeiro de 2011 e Dezembro de 2011. O trabalho envolveu a coleta de dados clínicos e a aplicação do questionário MelasQol em todos os pacientes selecionados e da realização de biópsias de 31 pacientes portadores de melasma. No protocolo foram realizadas 4 biópsias com punch 2 mm, sendo duas amostras obtidas da área de melasma e duas da pele normal adjacente com distância mínima de 1cm entre elas. O primeiro fragmento de cada área foi encaminhado para análise histológica e o segundo para dosagem do óxido nítrico. O óxido nítrico foi quantificado pela formação de seus metabólicos nitrito (NO2-) e nitrato (NO3-), utilizando a reação de Griess. Resultados: A idade média foi de 38,43 ± 6,75 anos, todos os pacientes eram do sexo feminino, e os fototipos mais comuns foram III (49,02%) e IV (33,33%). A idade média no início da doença e a duração da doença foram de 29,18 ± 7,05 e 9,25 ± 6,18 anos. Na avaliação histológica apresentaram diferença estatística a presença de elastose solar (P=0,001) e aumento da pigmentação melânica na epiderme (P < 0,001) quando comparadas as amostras da lesão de melasma e as de pele normal. A dosagem de nitrito/nitrato que são metabólitos do NO na pele lesional e perilesional, não mostrou diferença estatística entre os grupos estudados. A análise do MelasQol mostrou que 94,11% dos pacientes sentem-se incomodados com a aparência de sua pele, 64,71% sentem frustração ou constrangimento pela condição de sua pele, 52,94% sentem-se depressivos e 78,43% têm a sensação de não serem atraentes. Entretanto, para 68,63% dos pacientes, o melasma não afeta as relações com outras pessoas, 86,27% dos pacientes não sentem dificuldade em demonstrar afeto, 66,67% não se sentem menos produtivos e para 74,51% o melasma não afeta seu senso de liberdade. Conclusão: Nosso estudo demonstrou que no melasma ocorre aumento de elastose e aumento da pigmentação na epiderme. O melasma está implicado também no impacto na qualidade de vida, e nosso estudo demonstrou que o domínio da qualidade de vida mais afetado pelo melasma foi o bem estar emocional e que houve pouco impacto no domínio das relações sociais.<br> / Abstract : Introduction: Melasma is a skin disease characterized by the presence of dark spots on the face and sun-exposed areas. There are several factors involved in its pathogenesis, but the mechanisms that lead to their appearance are not yet fully understood. Objectives: To study the inflammatory response through the evaluation of cellularity, edema and apoptosis of keratinocytes in the lesions of melasma, assess the presence or absence of telangiectasias, elastosis and epidermal pigment in melasma lesions, assess the involvement of nitric oxide in melasma lesions, assess the impact on quality of life through an already validated to Portuguese language questionnaire (MelasQol). Methods: This is an observational cross-sectional study with analytical component. The sample was defined as convenience. We selected 51 patients with clinical diagnosis from Hospital Universitário Professor Polydoro Ernani de São Thiago da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) between January 2011 and December 2011. This study involved the collection of clinical data and the questionnaire MelasQol in all selected patients and biopsies from 31 patients with melasma. In the protocol four biopsies were performed with 2-mm punch, two samples from melasma area and two from adjacent normal skin with minimum distance of 1cm between them. The first fragment area of each was submitted for histological analysis and the second for dosage of nitric oxide. The nitric oxide formation was quantitated by their metabolic nitrite (NO2-) and nitrate (NO3-) using the Griess reaction. Results: The mean age was 38.43 ± 6.75 years, all patients were female, and the most common skin types were III (49.02%) and IV (33.33%). The mean age at disease onset and disease duration were 29.18 ± 7.05, 09.25 ± 6.18 years. Histological evaluation showed statistically significance on the presence of solar elastosis (P = 0.001) and increased melanin pigmentation of the epidermis (P <0.001) when compared the samples of melasma lesion and normal skin. The dosage of nitrite / nitrate metabolites in lesional and perilesional skin showed no statistical difference between groups. The MelasQol analysis showed that 94.11% of patients feel uncomfortable with the appearance of their skin, 64.71% feel frustration or embarrassment the condition of their skin, 52.94% felt depressed and 78.43% have the feeling of not being attractive. However, for 68.63% of patients, melasma does not affect relations with other people, 86.27% of patients feel no difficulty in showing affection, 66.67% do not feel less productive and 74.51% did not affect their sense of freedom. Conclusion: Our study demonstrated that in melasma there is an increase in the solar elastosis and it is associated with an increased pigmentation in the epidermis. Melasma is also implicated in the impact on quality of life, and our study showed that the domain of quality of life that was most affected by melasma was emotional wellbeing, and that there was little impact in the domain of social relations.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-06-26T01:33:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317429.pdf: 1450762 bytes, checksum: 0bd676a117643c98d42bc72ae6f5425b (MD5) / Introdução: O carcinoma basocelular (CBC) é o tumor maligno de pele mais comum em humanos. Atualmente existem inúmeras terapias para tratar o CBC, entretanto não se sabe se a inflamação peritumoral influencia na decisão cirúrgica, nem que fatores adicionais influenciam na qualidade de vida (QV) de seus portadores. Objetivos: 1) Avaliar a exerese cirúrgica do CBC utilizando-se bisturi de lâmina dupla e determinar o papel do infiltrado inflamatório peritumoral no comprometimento das margens cirúrgicas laterais dos CBC 2) Identificar os fatores que alteram a QV destes indivíduos. Métodos: Estudo transversal com componente analítico. Neste protocolo foi realizada a exérese de 99 CBCs primários sob técnica cirúrgica com bisturi de lâmina dupla e avaliação da QV com Dermatology Life Quality Index (DLQI). Resultados: Neste estudo foram analisadas 99 peças cirúrgicas de CBC. A técnica com bisturi de lâmina dupla diminuiu as margens laterais falso negativas em 50%. O infiltrado inflamatório não foi determinante no comprometimento das margens do tumor. O tipo basoescamoso foi associado com o infiltrado inflamatório intenso OR 8,38 IC95 (1,01-392,2). O infiltrado intenso e a ulceração foram associados aos plasmócitos, neutrófilos e eosinófilos. Pacientes com hábito regular de utilização do fotoprotetor apresentaram escores de DLQI elevados OR 5,33 IC95 (1,06-26,61) , bem como pacientes com tumores ulcerados OR 7,63 (IC95 1,55-37,5) ou maiores que 2 cm OR 3,81 (1,03-14,09) ou ainda que estavam localizados fora da cabeça OR 3,62 IC95 (0,98-13,36). Conclusão: Diminuição das margens laterais falso negativas pela aplicação da técnica com bisturi de lâmina dupla.As características histológicas e clínicas não demonstraram associação com o comprometimento das margens cirúrgicas. A QV foi afetada em pacientes com tumores ulcerados, ? 2cm, localizados fora da cabeça ou que tinham hábito de utilizar fotoprotetor.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:18:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337734.pdf: 3377384 bytes, checksum: 41c3085f595d79158f356834905b6bcd (MD5) Previous issue date: 2015 / Neste estudo, foi avaliado o potencial de um novo tratamento para lesões cutâneas baseado em dois componentes da engenharia de tecidos: células e arcabouço. Foi utilizado como arcabouço o hidrogel de carragenana, um polímero termo reversível de origem natural, associado a células estromais multipotentes (CEM) humanas no tratamento de lesões cutâneas em modelo murino. Inicialmente foi realizada a caracterização química da carragenana teste, obtida da alga Kappaphycus alvarezii cultivada em Florianópolis e da carragenana comercial (Sigma®). Os resultados mostraram que a carragenana teste é da classe kappa e apresenta porcentagem de sulfato semelhante à encontrada na carragenana comercial (Sigma®). Em seguida, foi avaliada a regeneração cutânea após 3, 7 e 14 dias de pós-operatório. Os resultados mostraram que o tratamento com CEM encapsuladas no hidrogel de carragenana teste (HCT) não altera a densidade do infiltrado leucocitário, a vascularização e a espessura da epiderme, além de aumentar o tecido de granulação e o depósito de colágeno quando comparado ao grupo sem tratamento (S/T). Além disso, o tratamento com CEM + HCT apresenta um menor infiltrado leucocitário, não altera a espessura do tecido de granulação e a vascularização, aumenta o depósito de colágeno quando comparado aos grupos HCT e CEM. Os resultados mostraram também que as células humanas permanecem no tecido cicatricial murino após 3 dias de pós-operatório. Em conclusão, este estudo mostrou que a carragenana obtida da alga K. alvarezii cultivada em Florianópolis representa um material de baixo custo com potencial para aplicações terapêuticas. Apesar da associação do hidrogel de carragenana teste com as CEM humanas não apresentar melhora quando comparado ao grupo sem tratamento, demostrou bons resultados quando comparado aos tratamentos isoladamente (grupos HCT e CEM) e representa uma abordagem nova, barata e potencialmente aplicável na engenharia de tecidos.<br> / Abstract : This study evaluated the potential of a new treatment for cutaneous wound based on two components of tissue engineering: cells and scaffold. Carrageenan hydrogel, a thermo reversible polymer of natural origin was used as a scaffold for the delivery of human multipotent stromal cells (MSC) for treatment of cutaneous wound in mice. At first the chemical characterization of native carrageenan obtained from seaweed Kappaphycus alvarezii grown in Florianopolis and commercial carrageenan (Sigma®) was carried out. The results showed that the native carrageenan belongs to the kappa class and shows a percentage of sulphate similar to that found in commercial sample. Evaluation of mouse skin wound healing was carried out by three steps: excisional wound in the dorsal region, treatment application and coating with Tegaderm® dressing. The results after 3, 7 and 14 days post-wounding showed that treatment with MSC encapsulated in native carrageenan hydrogel (NCH) does not change the density of the leukocyte infiltrate, vascularity and the thickness of the epidermis, and increase granulation tissue and collagen deposition when compared to the control untreated group. Furthermore, treatment with MSC encapsulated in NCH has a lower leukocyte infiltration, does not change the thickness of the granulation tissue, epidermis and vascularity, and increase collagen deposition when compared with MSC and NCH groups. In addition, human cells were detected in the scar tissue within 72 h post-wounding. In conclusion, this study showed that the carrageenan obtained of seaweed K. alvarezii cultivated in Florianopolis is a low cost material with potential therapeutic applications. The carrageenan hydrogel association with human MSC did not showed improvement compared to untreated group, but showed good results when compared to NCH and MSC groups. Thus, MSC encapsulated NCH represents a new approach applicable in tissue engineering.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-21T17:57:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 213355.pdf: 3559834 bytes, checksum: ff75c76e18a293040def1120e0f6697e (MD5) / Foi realizado um estudo experimental, randomizado e prospectivo, com a finalidade de analisar histologicamente a integração da matriz de regeneração dérmica. Foram utilizados 30 ratos albinos, da linhagem Wistar-EPM1, com idade em torno de 180 dias e peso variando de 250 a 300 gramas, divididos aleatoriamente em 3 grupos. Em todos os ratos foi realizada a retirada de um quadrado profundo de pele na região dorsal, com tamanho em torno de 4 cm2. No Grupo Implante de Matriz Dérmica, cobriu-se a ferida com um enxerto de matriz de regeneração dérmica. No Grupo Enxerto Autólogo, utilizou-se um enxerto autólogo de pele, e no Grupo Cicatrização por Contração, aguardou-se a cicatrização espontânea. Biópsias foram realizadas com 7, 14 e 21 dias, e estudadas histologicamente em relação à resposta inflamatória, à regeneração da derme e ao desenvolvimento de fibrose. Os testes estatísticos com 21 dias (p<0,05), mostraram significância para a presença de neutrófilos, neoformação dérmica, formação de canais vasculares, deposição de colágeno e formação de fibrose. O grupo da matriz de regeneração dérmica mostrou os melhores resultados, com menor processo inflamatório, menor formação de fibrose, maior deposição de colágeno, maior neoformação dérmica e maior formação de canais vasculares. No estudo realizado, foi possível conhecer com detalhes as diferentes fases da integração da matriz de regeneração dérmica ao organismo, sendo que os resultados se assemelham aos da integração do enxerto autólogo de pele.

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-12. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:35Z : No. of bitstreams: 1 000850034.pdf: 1958965 bytes, checksum: 19fdba345238432739b0e6a6d3b2303a (MD5) / O melasma é uma hipermelanose focal e adquirida de curso crônico que afeta áreas fotoexpostas, especialmente, de mulheres em idade fértil. Diversos fatores contribuem para seu desenvolvimento: exposição solar, esteroides sexuais, medicamentos e história familiar. Recentemente, ancestralidade referida foi apontada como outro fator de risco. E este fato incentivou a investigação da ancestralidade relacionada ao melasma. O principal objetivo desse projeto foi avaliar a associação entre a ancestralidade genética e o melasma facial. Foi realizado um estudo transversal envolvendo mulheres portadoras de melasma facial e seu grupo controle, pareado por idade, entre pacientes do Hospital das Clínicas, FMB-Unesp, Botucatu (Brasil). Foram excluídos descendentes de asiáticos, portadores de outras dermatoses faciais e fototipos extremos (I e VI). Após inquérito de dados clínicos e demográficos, foi coletado swab da mucosa oral para posterior extração de DNA, e a partir deste material, realizada avaliação da ancestralidade genética por estudo de marcadores informativos de ancestralidade do tipo INDEL. Foram avaliadas 119 mulheres com melasma facial e seus 119 controles. A idade média do início do melasma ocorreu aos 27±8 anos. Gestação (40%), exposição solar (37%) e contraceptivo oral hormonal (22%) foram os fatores mais frequentemente relatados como desencadeantes. Todos os sujeitos apresentaram algum grau de miscigenação quanto à ancestralidade genética. Os componentes Ancestralidade e melasma facial Maria Paula Barbieri D'Elia 14 genéticos africano e europeu diferiram significativamente entre casos e controles (10% vs 6%; 77% vs 82%; p<0,05). O percentual de ancestralidade africana (OR=1,04), história familiar de primeiro grau (OR=3,04), baixa escolaridade (OR=4,04) e uso de antidepressivos entre indivíduos com familiares acometidos pelo melasma (OR=6,15) associaram-se à doença, independentemente dos demais fatores...